ПРОИЗВОДНЫЕ 3-ТРИФТОРМЕТИЛ-1-КАРБА-1-ДЕТИА-3-ЦЕФЕМ-4-КАРБОНОВОЙ КИСЛОТЫ И ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ ДЛЯ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ Российский патент 1997 года по МПК C07D487/04 A61K31/40 

Изобретение относится к 1-карба(1-детиа)-цефалоспориновым антибиотикам, промежуточным соединениям для их получения, фармацевтическим составам, включающим антибиотики, и к способу лечения инфекционных заболеваний у человека и других животных.

1-Карба(1-детиа)- цефалоспориновые антибиотики имеют бициклическую кольцевую систему, представленную следующей формулой, в которой система нумерации соответствует общепринятой в произвольной системе номенклатуры цефема.

1-Карба(1-детиа)-цефалоспорины упоминаются для удобства в данном описании как 1-карбацефалоспорины или как 1-карба-(1-детиа)-3-цефем-4-карбоновые кислоты или их производные.

Получение 1-карбацефалоспоринов и C-3- замещенных метил-производных широко раскрывается в патенте США N 4226866 на имя Кристинсена и др. Хирата и др. в заявке на патент Великобритании N 2041923 раскрывают способ получения 3-Н и 3-гало-1-карбацефалоспоринов, тогда как Хатанака и др. Tetrahedron letters 24, N 44, стр.4837-4838 (1983), предлагают способ получения 3-гидрокси-(±)-1-карбоцефалоспоринов.

Хотя многие безопасные и сильнодействующие антибиотики класса β-лактамов известны и используются клинически, исследования в данном классе продолжаются в попытках обнаружить антибиотики с повышенной эффективностью, в частности против микроорганизмов, нечувствительных или резистентных относительно известных антибиотиков.

Изобретение предлагает антибиотики на основе 7-b-ациламино-1-карба(детиа)-3-цефем-4-карбоновой кислоты, замещенные в положении 3 трифторметилом. Положение 7 этих антибиотиков замещено ациламино частью, такой как D-арилглицидиламино, или гетероциклически замещенной оксииминоацетиламиногруппой. Также предлагают фармацевтические составы, включающие антибиотики, промежуточные соединения и способы их получения. Примеры таких антибиотиков включают
7-b-D-фенилглицидиламино-1-карба(1-детиа)-3-трифторметил-3-цефем-4-карбоновую кислоту,
7-b-D-p-гидроксифенилглициламидо-1-карба(1-детиа)-3-трифторметил-3-цефем-4-карбоновую кислоту,
7-b-D-m-метилсульфониламинофенилглициламино-1-карба(1-детиа)-3-трифторметил-3-цефем-4- карбоновую кислоту, а также
7-b-[(2-аминотиазол-4-ил)-(Z)- метоксииминоацетил]амино-1-карба(1-детиа)-3-трифторметил-3-цефем-4-карбоновую кислоту.

Изобретение предлагает соединения формулы (I):

где
R₂ означает водород или карбоксизащитную группу;
R означает замещенную метильную группу формулы:
где Q NH₂;
R₄ фенил или замещенный фенил формулы:

где
a и а' означают водород, галоген, гидрокси или (C₁-C₄) алкилсульфониламиногруппу; или
R₄ обозначает тиазолил, замещенный аминогруппой; или
R является группой формулы ,
где
R₅ обозначает тиазолил, замещенный аминогруппой,
R₆ водород или (C₁-C₄) алкил, или
когда R₂ обозначает водород, их фармацевтически приемлемые соли.

1-Карба(1-детиа)цефемы, представленные вышеприведенной формулой (I), где R₂ обозначает водород, или их фармацевтически приемлемые соли ингибируют рост микроорганизмов, болезнетворных для человека и животных, и могут быть использованы для борьбы с инфекционными заболеваниями. Соединения изобретения получают в предлагаемом здесь способе в той же самой стехиометрической форме, в которой получают полусинтетические цефалоспориновые антибиотики.

Термин "карбоксизащитная группа", используемый в описании, относится к одному из сложноэфирных производных карбоновокислотной группа, обычно используемых для блокирования или защиты карбоновокислотной группы, тогда как реакции осуществляют в отношении других функциональных групп на соединении. Примерами таких защитных групп карбоновой кислоты являются 4-нитробензил, 4-метилбензил, 3,4-диметоксибензил, 2,4-диметоксибензил, 2,4,6-триметоксибензил, 2,4,6-триметилбензил, пентаметилбензил, 3,4-метилендиоксибензил, бензгидрил, 4,4'-диметоксибензгидрил, 2,2', 4,4'-тетраметоксибензгидрил, трет-бутил, трет-амил, тритил, 4-метокситритил, 4,4'-диметокситритил, 4,4', 4''-триметокситритил, 2-фенилпроп-2-ил, триметилсилил, трет-бутилметилсилил, фенацил, 2,2,2-трихлорэтил, β-(ди(н-бутил)метилсилил)этил, п-толуолсульфонилэтил, 4-нитробензилсульфонилэтил, аллил, циннамил, 1-(триметилсилилметил)проп-1-ен-3-ил и т.д. Вид используемой карбоксизащитной группы не является решающим, пока дериватизированная карбоновая кислота устойчива к условиям последующей реакции при других положениях кольцевой системы и ее можно отщепить в соответствующее время без разрыва остальной части молекулы. Предпочтительной защитной группой карбоновой кислоты является аллильная группа. Аналогичные карбоксизащитные группы, используемые в области цефалоспоринов, пенициллинов и пептидов, также можно использовать для защиты заместителей карбоксильной группы азетидинона. Другие примеры этих групп рассматриваются в работах Е.Хаслама "Защитные группы в органической химии", Дж. Г. У. МакОмие, ред. Пленум Пресс, Нью-Йорк, 1973, глава 5; Т.У. Грина "Защитные группы в органическом синтезе", Джон Уилли энд Санз, Нью-Йорк, 1981, глава 5. Родственный термин "защитный карбокси" означает, что карбоксильная группа замещена одной из вышеупомянутых карбоксизащитных групп.

В вышеприведенном определении соединений, представленных формулой (I), (C₁-C₄)алкил относится к прямоцепочечным и разветвленным алкильным группам, таким как метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, трет-бутил.

Когда в формуле (I) R обозначает замещенную фенильную группу, в которой заместитель(и) представлен(ы) в виде а и а', примерами таких групп являются галофенил, например 4-хлорфенил, 3-бромфенил, 2-фторфенил, 2,2-дихлорфенил и 3,5-дихлорфенил; гидроксифенил, например 2-гидроксифенил, 3-гидроксифенил, 4-гидроксифенил, 2,4-дигидроксифенил и 3,4-дигидроксифенил; алкилсульфониламино, например 3-метилсульфониламино, 4-метилсульфониламино, 3,5-(диметилсульфониламино)фенил, 4-н-бутилсульфониламинофенил и 3-этилсульфониламинофенил.

Примеры соединений, представленных формулой (I), когда R обозначает оксииминозамещенную группу, представленную формулой:

представляют собой, например, 2-(2-аминотиазол-4-ил)-2-метоксииминоацетил.

3-Трифторметил-карбацефемы формулы (I) могут быть получены в соответствии с приведенными в конце описания схемами.

3-Трифторметансульфонилокси ("трифлат" или "ТФ") карбацефем исходное вещество схемы 1 может быть получено способом Эванса и др. патент США N 4673737, который введен в данное описание в качестве ссылки. Это 3-трифлат - исходное вещество вначале подвергают взаимодействию с тиофенолом в атмосфере азота в присутствии амина, и предпочтительно третичного амина, такого как триэтиламин или диизопропилэтиламин, с получением бензгидрил 7-β-феноксиацетиламино-1-карба(1-детиа)-3-фенилтио-3-цефем-4-карбоксилата. Промежуточный 3-фенилтио затем подвергают взаимодействию с гидридом трибутилолова в атмосфере азота в присутствии свободно-радикального ингибитора, такого как 2,2'-азо(бис)изобутирилнитрил (AIBN), и нагревают, предпочтительно до температуры около 120^oC, с получением промежуточного 3-(три-н- бутил)станнана, как изображено на схеме 1. Это промежуточное соединение олова объединяют с положительным галогенирующим агентом, и предпочтительно бромом, с получением бензгидрил-7 b-феноксиацетиламино-1-карба(1-детиа)-3-бром-3-цефем -4- карбоксилата. Промежуточное 3-бромсоединение затем нагревают (предпочтительно до температуры около 70^oC) и объединяют со смесью кадмия, хлористой меди, дибромдифторметана и ДМФ, получая бензгидрил-7 b-феноксиацетиламино-1-карба(1-детиа)-3-трифторметил-3-цефем-4-карбоксилат. Несмотря на то что ДМФ является предпочтительным, другие пригодные соединения, включая соединения группы формулы:

в которой
R' обозначает водород или (C₁-C₄) алкил;
R'' и R''' самостоятельно обозначают (C₁-C₄)алкил, или вместе с атомом азота образуют насыщенное кольцо, например пирролидин или пиперидин.

Это промежуточное соединение затем ацилируют с использованием ди-трет-бутилдикарбоната ((трет-BOC)₂O) с последующей обработкой основанием, таким как LiOH, получая 7β-(трет-бутилоксикарбониламино) промежуточное соединение (не показано). (Дополнительные подробности данного взаимообмена трет-бутоксикарбонильной защитной группы на феноксиацетил-защитную группу можно найти в заявке на европатент N 8836996.5, публ. N 0301877 Докет N X-6913).

Группу трет-бутоксикарбонила (трет-BOC) и сложный бензгидрильный эфир можно отщепить с использованием известной методики, например с помощью трифторуксусной кислоты (TFA) в присутствии анизола. Полученное нуклеарное промежуточное соединение 7-амино-3-трифторметил затем N-ацилируют активированной формой желательной 7-ацильной группы. В схеме 1 D-фенилглициловую группу вводят путем взаимодействия 7-амино-нуклеарного промежуточного соединения с трет-BOC-защищенным ангидридом D-фенилглицина, образованным с использованием трет-BOC-защищенного фенилглицина и изобутилхлорформиата, как показано ниже.

Любые оставшиеся трет-бутоксикарбонильные защитные группы затем можно отщепить путем обработки трифторуксусной кислотой. Несмотря на то что феноксиацетиловые и трет-бутоксикарбонильные (трет-BOC) группы используют в качестве аминозащитных групп, и бензгидрильную группу в качестве карбоксизащитной группы, специалист в данной области техники, относящейся к химии β-лактамов, поймет, что другие карбоксильные и аминозащитные группы служат в качестве функциональных эквивалентов.

Способ по схеме 1 осуществляют в основном в безводных условиях, которые представляют собой условия проведения реакции, свободные от присутствия воды. В соответствии с этим растворители сушат перед их использованием в способе. Пригодные органические растворители включают метиленхлорид, хлороформ, метиловый спирт, ди- или трихлорэтан, тетрагидрофуран (ТГФ), диметилпропилен-мочевину (DMPU), гексаметилфосфорный триамид (НMPA), диметилацетамид, тетрагидропиран, диоксан, ацетонитрил, простой диэтиловый эфир, диметилацетамид, диметилсульфоксид, диметоксиэтан и их смеси.

Свободно-радиальные ингибиторы описаны в статье Лейрда и Йоргенсена "Радиальная цепная реакция", Журнал органической химии, т.55, N 1, стр. 9-27 (1990), раскрытие которой введено в данное описание в качестве ссылки. Пригодные свободно-радикальные ингибиторы включают AIBN, Bu₃SnH, Cl₃CBr, бензоил пероксид и др. приведенные в вышеупомянутой статье на стр.19 под таблицей VI. Другие ингибиторы включают фотолиз X₂, где X Cl, Br и I (Шлекер, Хенкель, Сибах. Chem.Ber. 110, 2880 (1977)), O₂ (Руссел, Кауп y.A.C.S. 91, 3851 (1967)), соли металлов (Тунг, Ято. J.Chem, Soc. Chem.Commun, 205 (1978)) и сложные эфиры тиогидроксамовых кислот (Бартон, Крич, Кретзахман, Tetra, Letters, 25, 1955 (1984)).

Определенный выше термин "положительный галогенирующий агент" относится к соединению, имеющему электрофильный галоген, или, другими словами, соединению, приводящему к получению галогена, имеющего положительный заряд. Примерами таких агентов являются, например, SbF₅, F₂, IF₅, BrF₃, SF₄, Cl ₂, HOCl, (CH₂CO)₂NCl, N-хлорсукцинамид, Me₃COCl, NO₂Cl, SO₂Cl₂, Br₂, 1,3-дибромгидрантоин, N,N-дибромбензолсульфонамид, HOBr, N-бромсукцинамид, C₄H₈O₂Br₂, ICl, IBr, I₂,N -иодосукцинамид и 1,3-дииодо-5,5-диметилгидантоин.

Схема 2 изображает синтез соединений формулы (I) с использованием способа по схеме 1 с применением п-нитробензилкарбоксизащитной группы вместо бензгидрила.

Промежуточную соль трифторуксусной кислоты затем обрабатывают смесью N-метилморфолина (NMM), (трет-бутоксикарбониламино)-3-фторфенилуксусной кислоты (N Hтрет-BOC-FPAA) и 1-хлор-3,5- диметокситриазина (CDMT) с получением трет-BOC-защищенного промежуточного соединения. Это промежуточное соединение затем обрабатывают цинком и HCl с последующей обработкой трифторуксусной кислотой.

Альтернативно 3-трифторметилкарбацефемы формулы (I) могут быть получены в соответствии со схемой 3.

В схеме 3 3-трифлат-промежуточное соединение в безводном органическом растворителе превращают в 3-бромо-промежуточное соединение с использованием реакции замещения, применяя бромидсодержащую соль, предварительно LiBr, в присутствии затрудненного амин-основания. Бромидсодержащие соли включают бромид щелочного металла, тетраалкиламмоний бромид и тетраалкилфосфоний бромид. Предпочтительным затрудненным амином является 2,6-лутидин. Это 3-бромпромежуточное соединение затем превращают непосредственно в 3-трифторметиловое промежуточное соединение путем обработки смесью цинка и дибромдифторметана в присутствии бромистой меди и ДМФ. Промежуточный p-нитробензил 7β-феноксиацетиламино-1-карба(1-детиа)-3-трифторметил-3-цефем-4-карбоксилат обрабатывают смесью Zn/HCl с удалением группы сложного эфира p-нитробензила и затем повторно этерифицируют аллилбромидом. Феноксиацетильную группу отщепляют с использованием известной методики, т.е. применяя PCl₅/пиридин, изобутиловый спирт, с получением хлоргидрата аллил-7β-амино-1-карба(1-детиа)3-трифторметил-3-цефем-4-карбоксилата. Это промежуточное соединение затем можно обрабатывать активированной формой желательной карбоновой кислоты с получением 7-ациального заместителя, в основном в соответствии с изобретением на схеме 1. 4-Аллил карбоксизащитную группу можно затем отщепить с использованием известной методики освобождения от защиты, т.е. применяя тетракистрифенил-фосфинпалладий(0), с последующим отщеплением трет-BOC-защищенной группы трифторуксусной кислотой, получая соединения формулы (I). Как на схеме 1, используемые аминокислотные карбоксизащитные группы являются показательными, и специалист в области b-лактамов поймет, что можно использовать и другие защитные группы.

На схемах 1 и 3 3-бромопромежуточное соединение подвергают взаимодействию со смесью галогенида меди (Br, Cl, I) дигалодифторметана, либо кадмия, либо цинка, и ДМФ или группы формулы:

где R', R'' и R''' имеют вышеприведенные значения.

Полагают, что данная смесь приводит к получению in situ трифторметилмеди, которая взаимодействует с 3-бромопромежуточным соединением с образованием 3-фторметилового промежуточного соединения. Предпочтительно по крайней мере один молярный эквивалент трифторметилкадмия или трифторметилцинка присутствует с медью с тем, чтобы по крайней мере теоретически получить по крайней мере один молярный эквивалент трифторметилмеди.

Реакция замещения, в которой 3-трифлат превращают в 3-бромопромежуточное соединение, более полно представлена на схеме 4.

На схеме 4 R₁ означает водород и R₂ имеет вышеприведенное значение, тогда ка к А обозначает защищенный амино или ациламино формулы:

где R имеет вышеприведенное значение.

Реакции осуществляют в апротонном растворителе, таком как, например, представленный выше в описании. 3-Трифлат объединяют с бромидом лития и предпочтительно 2,6-лутидином. Смесь нагревают до температуры около 60-70^oC, предпочтительно около 65^oC, и сохраняют в течение периода времени, достаточного для получения 3-бромосоединения. Время нагревания предпочтительно составляет около 16 ч, и более предпочтительно около 48 ч. Обычно полученные продукты включают смесь Δ2/Δ3 изомеров. Δ2-Изомер можно затем изомеризовать в Δ3-изомер путем взаимодействия Δ2-изомера с сильным основанием, таким как 1,8-диазабицикло [5.4.0] ундец-7-ен (DBU) или 1,5-диазабицикло [4.3.0]нон-5-ен (DBN). Как раскрывается, 3-бромосоединение является пригодным промежуточным соединением для получения соединений, представленных формулой (I). Следует понять, однако, что сами по себе 3-бромосоединения являются ценными антибиотиками. Поэтому 3-бромопромежуточное соединение можно превратить, как 3-трифторметил, с образованием 1-карба(1-детиа)-3-цефем-3-бромо-4-карбоновых кислот или их фармацевтически приемлемых солей. Например, на схеме 3 стадию превращения 3-бромо в 3-трифторметил можно опустить с образованием (3-бромо)цефемов.

Термин "затрудненное аминоснование" включает как ароматические, так и алифатические затрудненные амины. Ароматические затрудненные амины включают амины с алкильным заместителем, связанным с ароматическим атомом углерода, примыкающим к атому азота. Предпочтительные заместители могут быть более крупными, нежели метил, например этил, изопропил, трет-бутил и арил. Более предпочтительными ароматическими аминами могут быть затрудненные амины по крайней мере с обоими ароматическими атомами углерода, примыкающими к азотному заместителю, с такими заместителями, как (C₁-C₆)алкилы и (C₁-C₄)алкокси. Кроме того, бициклические и полициклические амины могут быть использованы в том случае, если по крайней мере один атом углерода, примыкающий к атому азота, содержит подходящий заместитель. Алифатические затрудненные амины также могут быть использованы, и они включают третичные амины, такие как диизопропилэтиламин, этилдифениламин и т.д.

В одном аспекте изобретение предлагает 7β-амино-1-карбоцефалоспориновые соединения, а также их соли и сложные эфиры, пригодные в качестве промежуточных соединений при получении антибиотиков, представленных формулой (I). Эти промежуточные соединения представлены формулой (II):

где R₂ обозначает водород или карбоксизащитную группу, или их кислотно-аддитивные соли.

7-Аминосоединения формулы (II) образуют соли с общепринятыми кислотами, такими как минеральные кислоты, например хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота и фосфорная кислота, и сульфоорганические кислоты, например метансульфокислота, н-бутансульфокислота, бензолсульфокислота, p-толуолсульфокислота и нафталинсульфокислота. Такие соли используют для выделения и очистки 7-аминокислот и их сложных эфиров. Соединение формулы (II) также можно образовывать соли с гидроксидами, карбонатами и бикарбонатами щелочных или щелочно-земельных металлов. Примерами таких солей являются натриевые, калиевые, кальциевые и магниевые соли. Соли могут быть образованы с аминами, такими как дибензиламин, циклогенсиламин, триэтиламин, этаноламин, диэтаноламин и т.п.

Соединения 7β-амино-1-карба-3-цефема формулы (II) N-ацилируют карбоновой кислотой RCOOH или ее реакционноспособными производными для получения соединения формулы (I). N-ацилирование можно осуществлять с использованием общих способов ацилирования, используемых для N-ацилирования ядер цефалоспорина, например 7-ACA и 7-АDCА. Например, ядро (2) объединяют с кислотой RCOOH в присутствии осушителя, такого как карбодиимид, например дициклогексилкарбодиимид. Альтернативно карбоновую кислоту можно превратить в реакционноспособное производное карбоксильной группы и реакционноспособное производное, используемое в N-ацилировании. Реакционноспособными производными карбоксильной группы являются галогенангидриды, азиды кислот и ангидриды кислот, такие как активные сложные эфиры, образованные с использованием этилхлорформиата и изобутилхлорформиата; фенилкарбоматы; N-гидроксиимиды, такие как образованные с помощью N-гидроксисукцинимида и N-гидроксифталимида; а также образованные с помощью гидроксибенгзтриазола (HBT); и аналогичные активные карбоксипроизводные. Во время N-ацилирования любые свободные амино- или карбоксигруппы, присутствующие в карбоновой кислоте RCOOH, желательно защитить.

В другом аспекте изобретения предлагается предпочтительный вариант соединения формулы:

где R₄ имеет вышеприведенные значения.

В другом аспекте изобретения предлагается способ получения соединения формулы:

который заключается во взаимодействии соединения формулы:

со смесью галогенида меди, кадмия или цинка, дигалодифторметана и либо ДВФ, либо группы формулы:

гдe R', R'' и R''' имеют вышеприведенные значения,
или с трифторметилмедью, по существу в безводном инертном органическом растворителе, где X обозначает галоген. R₂ имеет вышеприведенные значения и группа R₉R₁₀N обозначает защищенную аминогруппу или R₉ обозначает водород и R₁₀ обозначает ацильную группу, имеющую карбоновокислотное происхождение Способ может происходить при температуре в диапазоне около 10-90^oC, предпочтительно около 60^oC.

Соединения изобретения предлагаются для способа лечения инфекционных заболеваний у человека и других животных и для фармацевтических составов, пригодных для лечения. Терапевтический способ заключается во введении человеку или животному антибиотически эффективной нетоксичной дозы соединения, представленного формулой (I), или его фармацевтически приемлемой соли, когда R₂ означает водород.

1-Карбацефалоспорины, предлагаемые изобретением, образуют соли с пригодными основаниями, в частности, фармацевтически приемлемые нетоксичные соли. Карбоксильная группа 1-карбацефалоспорина может образовать соли с гидроксидами, карбонатами и бикарбонатами щелочных и щелочноземельных металлов. Примерами таких фармацевтически приемлемых солей является натриевые, калиевые и магниевые соли. Соли также могут быть образованы с помощью аминов, таких как дибензиламин, дициклогексиламин, триэтиламин, этаноламин, диэтаноламин и аналогичные амины. Таким же образом, когда 1-карбацекфалоспорин замещен двумя или более карбоксильными группами, ди- и три-соли получают традиционными солеобразующими способами.

Соединения 1-карбацефалоспорина, представленные в соответствии с изобретением с заместителем аминогруппы в положении 7 боковой цепи, образуют соли с пригодными кислотами с получением антибиотиков в качестве фармацевтически приемлемых солей. Примерами пригодных кислот являются хлористоводородная, бромистоводородная, серная и фосфорная кислоты.

1-Карбацефалоспорины, представленные в соответствии с изобретением, в случае когда R₂ обозначает водород, могут образовывать цвиттерионовую (внутрисолевую) форму соединения, когда заместитель в положении 7 включает свободный амино.

Антибиотически эффективным количеством является количество между 25 мг и 2 г приблизительно. Соединение, соль или сложный эфир можно вводить в разовой дозе или в многократных дозах в течение суток. Обработку (лечение) можно продолжать в течение периода времени от одной недели до десяти суток, или более длительно, в зависимости от продолжительности инфекции. Конкретная доза и схема приема лекарственного средства могут зависеть от таких факторов, как вес и возраст пациента, состояние конкретного организма, тяжесть инфекции, общее состояние здоровья пациента и толерантность пациента к антибиотику.

1-Карба(1-детиа)цефем можно вводить парентерально, перорально, подкожно или ректально. Как и в отношении с другими антибиотиками на основе β-лактама, способ изобретения может быть использован профилактически с целью предотвращения инфекций после экспонирования или перед возможным экспонированием, например предоперационно. Антибиотический 1-карба(1-детиа)цефем может быть введен общепринятыми способами, например в капсулах, таблетках суппозиториях, шприцом или путем внутривенного капельного вливания.

Фармацевтические составы изобретения включают антибиотически нетоксичное количество 1-карба(1-детиа)-3-цефема, представленного формулой (I) или формулой (III), где R₂ обозначает водород, или его фармацевтически приемлемой соли, а также фармацевтический носитель.

Фармацевтически приемлемые соли представляют собой полезные формы антибиотиков для получения антибиотических составов. Составы для перорального введения включают капсулы, таблетки, лепешки и жидкие суспензии. Антибиотик или его соль или сложный эфир в форме сухого порошка включают в желатиновые капсулы для перорального применения. Антибиотик также может быть смешан с наполнителем, например стабилизатором, перед наполнением. Капсулы могут содержать около 100-5000 мг для получения составов унифицированной дозы.

Таблетки, содержащие около 100-500 мг антибиотика или его соли или сложного эфира, получают традиционными средствами, и они могут содержать вдобавок связующее вещество, дезинтегратор, стабилизатор, антиокислитель и т.д.

Жидкие препараты антибиотика могут быть получены для младенческого и гериатрического применения. Педиатрические суспензии составляют с антибиотическими пероральными наполнителями, такими как суспендирующие средства, ароматизаторы, стабилизаторы и т.д. Растворы антибиотиков аналогичным образом можно сформулировать с солюбилизаторами, ароматизаторами, сахаром, водой и т.д.

Парентеральные составы антибиотиков для инъекцирования формулируют с водой для инъекции, раствором Рингера, физиологическим раствором или раствором глюкозы. Антибиотик также можно вводить как внутривенную жидкость капельным методом.

Для парентерального применения антибиотик или его производное получают предпочтительно в форме сухого кристаллического порошка или в виде лиофилизированного порошка и вводят в ампулы. Такие ампулы содержат приблизительно от 100 мг до 2 г антибиотика на ампулу.

Следующие сокращения имеют указанные значения:
трет-ВОС трет-бутоксикарбонил или трет-бутилоксикарбонил,
ЖХВР жидкостная хроматография высокого разрешения,
ТГФ тетрагидрофуран,
Y константа взаимодействия для спектров ЯМР в Гц,
ДМФ N,N-диметилформамид,
DMPU диметилпропиленмочевина,
BSU бис(триметилсилил)мочевина,
BSA бис(триметилсилил)ацетамид,
DMAP диметиламинопиридин,
DBU 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен,
AIBN азо(бис)изобутирилнитрил,
DCC дициклогексилкарбодиимид,
TFA трифторуксусная кислота,
HMPA гексаметилфосфорный триамид,
DMSO диметилсульфоксид.

Экспериментальная часть.

Препарат 1. Дименилметил (7S,6R)-7- феноксиацетамидо-3-фенилтио-1-карба-(1-детиа)-3-цефем-4-карбоксилат.

Раствор диметил [7S, 6R]-7-феноксиацетамидо-3- трифторметилсульфонилокси-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоксилата (40,0 г, 63,00 ммоль) в 180 мл безводного ацетонитрила обрабатывают под N₂ диизопропилэтиламином (15,4 мл, 88,0 ммоль) и тиофенолом (7,1 мл, 69,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение ночи при температуре окружающей среды. Растворитель удаляют в вакууме и остаток очищают хроматографией на силикагеле (элюирование с помощью 35:65 этилацетат/гексан), получая 33,45 г (90%) светло-желтого твердого тела.

¹H ЯМР (CDCl₃), d 7.2-7.6 (м, 19 Н), 7.08 (т, Y 7 Гц, 1 Н), 7.05 (с, 1 Н), 6.90 (д, Y 8 Гц, 2 Н), 5.44 (м, 1 Н), 4.54 (с, 2Н), 3.81 (дт, Y 5, 12 Гц, 1 Н), 2.0-2.3 (м, 2 Н), 1.7-1.8 (м, 1 Н), 1.3-1.5 (м, 1 Н).

Препарат 2. Дифенилметил (7S, 6R)-7- феноксиацетамидо-3-бромо-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоксилат.

Дифенилметил [7S, 6R]-7-феноксиацетамино-3- трифторметилсульфонилокси-1-карба (1-детиа)-3-цефем-4-карбоксилат (150 г, 0.238 моль) растворяют в 1600 мл безводного ДМФ и обрабатывают 2,6-лутидином (63,8 г, 0,595 моль) и литийбромидом (121,1 г, 1,43 моль). Реакционную смесь нагревают до 65^oC в течение 30 мин и сохраняют при данной температуре в течение 64 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и 75% растворителя удаляют при пониженном давлении при температуре 50^oC. Суспензию разбавляют этилацетатом/простым эфиром, промывают раствором NaHCO₃ (3 раза), 1 н. раствором HCl (3 раза) и солевым раствором, сушат в присутствии сульфата магния, фильтруют через силикагель с 10% этилацетата/CH₂Cl₂ и упаривают при пониженном давлении до осаждения твердого тела. Твердое тело бежевого цвета (34,4 г) собирают и после дальнейшего упаривания маточных растворов собирают дополнительно 10,6 г твердого тела. Эти две партии твердых тел объединяют, поскольку обе они представляют собой желательные D3-изомеры (указанное в заголовке соединение). Оставшуюся жидкость отгоняют досуха, получая 64,7 г смеси Δ2/Δ3-изомеров. Смесь олефин-изомеров уравновешивают следующим образом. Растворение смеси (64,7 г, 0,115 моль) в 675 мл безводного CH₂Cl₂ осуществляют путем обработки с помощью DBU (4,7 г, 0,031 моль). Через 3 ч при комнатной температуре реакционную смесь фильтруют через силикагель с 10% этилацетата/CH₂Cl₂ и упаривают. Остаток растворяют с небольшом количестве этилацетата, разбавляют гексаном и охлаждают до 0^oC. Это приводит к получению 17,6 г чистого Δ3-изомера, и остальные 39,4 г (из маточного раствора) хроматографируют на силикагеле (элюируя градиентом толуола к 30/70 этилацетата в толуоле). Получают 31,5 г смеси Δ2/Δ3 --изомеров, которую растворяют в этилацетате, разбавляют гексаном, затравливают продуктом и охлаждают до 0^oC. Получают 18,2 г Δ3-изомера, оставляя 14,2 г смеси Δ2/Δ3 -изомеров. Общее количество, равное 80,8 г, указанного в заголовке продукта выделяют при выходе 61%
Препарат 3. Аллил [7S, 6R]-7-феноксиацетил-амино-3-бромо-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4- карбоксилат.

(a) Аллил [7S, 6R]-7-феноксиацетиламино-3- трифторметилсульфонилокси-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоксилат (1,0 г, 1,9826 ммоль) и высушенный литийбромид (0,689 г, 7,9302 ммоль) объединяют в ДМФ (3,0 мл). Смесь после растворения всех твердых тел медленно нагревают приблизительно до 67^oC и перемешивают в течение 16 ч. Смесь охлаждают до комнатной температуры и объединяют с 75 мл EtOAc, 50 мл 1:1 раствора H₂O/насыщенный NaHCO₃. Органические вещества отделяют и промывают 50 мл 1 н. раствора HCl, сушат в присутствии сульфата натрия, фильтруют и концентрируют до красновато-коричневого масла. Флеш-хроматография при элюировании 7% EtOAc/CH₂Cl₂ приводит к получению 87 г продукта и с выходом около 10%
(b) 3-Трифлат из стадии (a) выше (200 мг, 0,3965 ммоль) объединяют с высушенным бромидом лития (138 мг, 1,586 ммоль) и DMPU (2 мл) и смесь нагревают до 65-67^oC в течение 6 ч. К смеси прибавляют 2,6-лутидин (0,4362 ммоль) и смесь перемешивают при температуре 67^oC в течение ночи (14 ч). Смесь вливают в 50 мл EtOAc и 20 мл насыщенного раствора NaHCO₃. Органические вещества промывают 25 мл 1 н. раствора HCl, отделяют и сушат в присутствии сульфата натрия, фильтруют и концентрируют до коричневато-желтого масла. Флеш-хроматография с элюированием 7% EtOAc/CH₂Cl₂ позволяет получить 45 мг (26%) 60/40 смеси Δ2/Δ3-изомеров.

(c) Повторяют методику, приведенную в стадии (b), за исключением того, что 2,6-лутидин помещают в смесь в начале методики, а не после начала нагрева. Используют следующие количества:
Исходное вещество 3-трифталат 200 мг, 0,3965 ммоль
2,6-Лутидин 0,793 ммоль, 92 мкл
Бромид лития 138 мг, 1,586 ммоль
DMPU 2 мл
Данная методика позволяет получить 55 мг (31,2%) смесиΔ2/Δ3- -изомеров в соотношении 60/40.

(d) Повторяют приведенную в стадии (c) методику за исключением того, что ДМФ используют вместо DMPU. Используют следующие количества:
Исходное вещество 3-трифлат 145 мг, 0,2875 ммоль
2,6-Лутидин 0,5749 ммоль, 67 мкл
Бромид лития 100 мг, 1,15 ммоль
ДМФ 1,5 мл
Данная методика приводит к получению 61,2 мг (49%) смеси Δ2/Δ3-изомеров в соотношении 70/30.

(e) Повторяют методику, приведенную в стадии (d), за исключением того, что смесь нагревают приблизительно в 2,5 раза более длительно, или 48 ч. Используют следующие количества:
Исходное вещество 3-трифлат 11 г, 21,808 ммоль
2,6-Лутидин 43,616 ммоль, 5,08 мл
Бромид лития 7,6 г, 87,232 ммоль
ДМФ 120 мл
Данный препарат позволяет получить 4,6 г указанного в заголовке соединения, или 48,5% выход смеси Δ2/Δ3-изомеров при соотношении свыше 95/5 соответственно. Данные относительно 2-изомера:
¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃): δ 7.32 (т, J 1 Гц, 2 Н), 7.10 (д, J 9 Гц, 1 Н), 7.05 (т, J 6 Гц, 1 Н), 6.92 (д, J 8 Гц, 2 Н), 6.50 (м, 1 Н), 5.95 (м, 1 Н), 5.35 (м, 3 Н), 4.90 (с, 1 Н), 4.63 (м, 2 Н), 4.55 (с, 2 Н), 4.15 (м, 1 Н), 2.35 (м, 1 Н), 2.15 (м, 1 Н); ИК (CHCl₃): 3019, 1771, 1747, 1691, 1517, 1495, 1236 и 1182 см^-1.

Масс-спектр, m/e 434 (M⁺), 436 (M⁺ + 2).

Анализ для C₁₉H₁₇N₂O₅Br:
Вычислено, C 52.43, H 4.40, N 6.44
Найдено, C 52.23, H 4.36, N 6.37
Пример 1. Дифенилметил [7S, 6R]-7- феноксиацетамидо-3-трибутилстаннил-1-карба(1-детиа)-3-цефем-карбоксилат.

Суспензию дифенилметил [7S, 6R]-7- феноксиацетамидо-3-фенилтио-1-карба(1-детиа)-3-цефем-карбоксилата (37,0 г, 62,7 ммоль) в 32 мл безводного диглима обрабатывают под N₂ гидридом трибутилолова (42,1 мл, 157,0 ммоль) и азо (бис) изобутилнитрилом (AIBN) (12,4 мл, 75,2 ммоль). Реакционную смесь нагревают до 120^oC в течение 45 мин и затем охлаждают до температуры окружающей среды. Остаток очищают хроматографией на силикагеле (элюируя 40:60 этилацетат/гексан). Получают 37,1 г светлого вязкого масла (77%).

¹H-ЯМР (CDCl₃): d 7.55 (д,J=7Гц, 2H), 7.44 (д, J=7Гц, 2H), 7.2-7.4 (м, 7H), 7.0-7.1 (м, 2H), 6.9 (м, 3H), 5.48 (м,1H), 4.56 (с,2H), 3.87 (м, 1H), 2.6-2.7 (м, 1H), 2.3-2.45 (м,1H), 1.9-2.0 (м,1H), 1.2-1.4 (м,12H), 0.8-0.85 (м, 15H).

ИК (CHCl₃): 2958.2, 2923.7, 1766.2, 1689.9, 1523.0, 1496.2, 1374.4 и 1239.5 см^-1.

Масс-спектр (FAB): m/e (M⁺) 771.

УФ (EtOH): l_max275 нм (ε9960).
Анализ для C₄₁H₅₂ N₂O₅Sn: C, H, N,
Пример 2. Дифенилметил [7S, 6R]-7- феноксиацетамино-3-бромо-1-карба(1-детиа)-3-цефем -4-карбоксилат.

Станнан из примера 1 (8,58 г, 11,13 ммоль) в 400 мл безводного ТГФ охлаждают в ванне, содержащей смесь ацетона с сухим льдом, и обрабатывают по каплям раствором Br₂ (1,78 г, 11,13 ммоль) в 100 мл ТГФ в течение 30 мин. Растворитель удаляют при пониженном давлении и хроматографируют на силикагеле с 40:60 этилацетат/гексан, получая 5,02 г (80%) твердого тела белого цвета.

¹H-ЯМР (CDCl₃): δ 7.2-7.5 (м, 12H), 7.0-7.1 (м, 2H), 6.98 (с,1H), 6.9 (д, J= 8Гц, 2H), 5.40 (м,1H), 4.54(с, 2H), 3.95 (м, 1H), 2.7-2.8 (м, 2H), 1.9-2,0 (м,1H), 1.5-1.7 (м,1H), 1.3-1.4 (м, 1H).

ИК (CHCl₃): 3025.2, 1787.0, 1742.2, 169.7, 1600.6, 1518.9, 1496.0, 1302.3 1242.7 см^-1.

Масс-спектр (FAB)-m/e(M⁺) 561.

УФ (EtOH): l_max275 нм (ε4870).
Анализ: C₂₉H₂₅BrN₂O₅: C,H,N.

Пример 3. Дифенилметил [7S, 6R]-7- феноксиацетамино-3-трифторметил-1-карба-(1-детиа)-3-цефем-4-карбоксилат.

Суспензию кадмия (20,0 г, 178 ммоль) в 100 мл безводного ДМФ охлаждают в ванне с ледяной водой под N₂ и обрабатывают по каплям раствором CF₂Br₂. Периодическое удаление ледяной ванны необходимо для поддержания ровного продолжения реакции. После прибавления соединения ванну удаляют и реакционную смесь перемешивают при температуре окружающей среды в течение 1 ч. В отдельной колбе исходное промежуточное соединение 3-брома (10,0 г, 17,8 ммоль) растворяют в 18 мл безводного DMPU и нагревают до температуры 70^oC. Раствор кадмиевого реагента обрабатывают раствором CuCl₂ (17,6 г, 178 ммоль) и полученный красновато-бурый раствор прибавляют к 3-бромо-промежуточному соединению через канюлю в течение 1 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь разбавляют этилацетатом, фильтруют через броунмиллерит, промывают водой и солевым раствором, сушат в присутствии сульфата магния и восстанавливают до коричневого масла в вакууме. Это масло хроматографируют на силикагеле с 40:60 этилацетат/ гексан, получая 4,7 г (49%) указанного в заголовке продукта в виде пены.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ 7.3-7.4 (м, 12H), 7.0-7.2 (М, 3H), 6.9(д, J=8Гц, 2H), 5.49 (м, 1H), 4.58 (с,2H), 3.96 (м, 1H), 2.3-2.5 (м, 2H), 2.0-2.1(м,1H) и 1.4-1.5(м, 1H).

ИК (CHCl₃): 1787.0, 1742.2, 1692.7, 1600.6, 1518.9, 1496.0, 1302.3 и 1242.7 см^-1.

Масс-спектр (FAB) m/e (M⁺+1) 517.

УФ (EtOH): l_max264 нм (ε8946).
Анализ: C₃₀H₂₅F₃N₂O₅; C, H, N.

Пример 4. Дифенилметил [7S,6R]-7-трет бутоксикарбоксамидо -3-трифторметил-1-карба (1-детиа)-3-цефемкарбоксилат.

Дифенилметил [7S, 6R]-7-феноксиацетамидо-3- трифторметил-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоксилат (4,7 г, 8,5 ммоль) растворяют в 85 мл безводного CH₂Cl₂ под N₂, охлаждают в ванне с ледяной водой и обрабатывают ди-трет-бутилкарбонатом (2,04 г, 9,35 ммоль) и диметиламинопиридином (DMAP) (0,52 г, 4,3 ммоль). Через 45 мин реакционную смесь нагревают до температуры окружающей среды 4 ч. Раствор фильтруют через кремнезем с 20:80 этилацетат/CH₂Cl₂. После удаления растворителя в вакууме остаток берут в 85 мл безводного ТГФ и охлаждают в ванне со льдом. Прибавляют по каплям LiOH (9,7 мл 1 М раствора) и раствор нагревают до комнатной температуры. Реакционную смесь экстрагируют этилацетатом и данный экстракт промывают 1 н. раствором HCl, насыщенным раствором NaHCO₃, солевым раствором, сушат в присутствии безводного сульфата магния и упаривают в вакууме досуха. Получают 4,2 г неочищенной пены оранжевого цвета.

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ 7.3-7.4 (м, 10H), 6.95 (с,1H), 5.98 (шир.д, J=11 Гц, 1H), 5.22 (м, 1H), 3.87 (м, 1H), 2.3-2.5(м, 2H), 2.0-.1 (м, 1H) и 1.6-1.7 (м, 1H), 1.23 (с, 9H).

ИК (CHCl₃): 1785.3, 1740.0, 1718.5, 1497.3, 1301.7 и 1243.3 см^-1.

Масс-спектр (FAB):m/e (M⁺+1) 517.

УФ (ЕтОН) l_max264 нм (ε8946).
Анализ C₂₇H₂₇F₃N ₂ O₅; C, H, N.

Пример 5. Трифторацетатная соль [7S, 6R]-7- амино-3-трифторметил-1-карба-(1-детиа)-3-цефем-4- карбоновой кислоты.

Продукт из примера 4 (2,99 г, 3,87 ммоль) растворяют в холодной трифторуксусной кислоте (TFA) (40 мл) и триэтилсилане (13 мл) под N₂ при 0^oC. Реакцию поддерживают при 0^oC в течение 30 мин в ванне со льдом, после чего ванну удаляют и смесь перемешивают 20 мин. Прибавляют безводный CH₃CN и толуол, и объем уменьшают в вакууме. Данный процесс повторяют и колбу концентрируют досуха. Остаток затем суспендируют в CH₃CN и фильтруют. Твердые тела промывают смесью CH₃/простой диэтиловый эфир и затем дважды простым диэтиловым эфиром, получая 925 мг (66%) указанного в заголовке соединения в виде твердого тела белого цвета.

¹H-ЯМР(DMSO-d ₆ /TFA) δ 8.0-8.2 (шир.с, 1H), 4,92 (д, J=6Гц, 1H), 3.97 (м, 1H), 2.0-2.1 (м, 2H), 1.7-1.8 (м, 2H).

Пример 6. [7S, 6R]-7-[D-альфа-(трет-бутокси-карбониламино)фенилацетиламино] -3-трифторметил-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоновая кислота.

Трифторацетатную соль из примера 5 (0,90 г, 2,47 ммоль) суспендируют в 25 мл этилацетата под N₂ и обрабатывают силилтрифторацетамидом (1,51 мл, 8,15 ммоль) и затем нагревают при 35^oC до тех пор, пока все твердые тела будут в растворе. В отдельной колбе трест-ВОС-фенилглицин растворяют в 25 мл этилацетата под N₂, охлаждают до -45^oC и обрабатывают последовательно изобутилхлорформиатом (0,21 мл, 2,47 ммоль) и N-метилморфолином (0,326 мл, 2,96 ммоль). Через 30 мин раствор амина охлаждают до 0^oC, а затем добавляют через канюлю в течение 5 мин и перемешивают 30 мин при температуре росы от -45 до -35 ^oC и в течение 1,5 ч при температуре росы до 0^oC. В это время прибавляют 2,0 мл метанола, ванну со льдом убирают и раствор перемешивают в течение 10 мин до его нагревания до комнатной температуры, упаривание и хроматография на кремнеземе с использованием 3%-ной уксусной кислоты в этилацетате к получению указанного в заголовке продукта в виде получистой пены бежевого цвета (1,03 г, 87%).

¹H-ЯМР (CDCL₃) d 7.1-7.4(м, 5H9,6.1 (шир.с, 1H), 5.4(шир.с, 1H),3.8 (шир.м,1H), 2.2-2.4 (шир.м,2H) и 1.2-1.5(шир.м,1H).

Пример 7. 7 b-[D-альфа-(амино)фенилацетил-амино]-3-трифторметил-1-карба(1-детиа)-3-цефем -4- карбоновая кислота.

Трет-ВОС-защищенную кислоту из примера 6 помещают в колбу при 0^oC и обрабатывают смесью холодной трифторуксусной кислоты (TFA) (20 мл) и третилсилана (7 мл). После перемешивания в течение 15 мин при 0^oC ванну со льдом убирают и реакционную смесь перемешивают в течение 10 мин при температуре окружающей среды, разбавляют раствором CH₃CN и уменьшают в объеме. Дальнейшее разбавление раствором CH₃CN сопровождают упариванием досуха, суспендированием остатка в EtO₂ и фильтрацией. Полученное твердое тело промывают неоднократно раствором EtO₂ и сушат в вакууме с получением 0,74 г неочищенного продукта со степенью чистоты около 85% Обращенно-фазовая хроматография на колонке C-18 со ступенчатым градиентом из 10% CH₃CN/H₂O в 30% CH₃CN/H₂O приводит к получению 0,39 г (50%) указанного в заголовке продукта в виде белого твердого тела.

¹H-ЯМР (D₁O)d 7.5-7.6 (м,5H), 5.44 (д, J=7 Гц, 1H), 5.21 (с,1H), 3.95 (м,1H), 2.25 (шир.м, 2H), 1.7-1.8 (м,1H), 1.0-1.1 (м,1H).

ИК (CHCl₃): 1776.7, 1740.0, 1693.7, 1561.6, 1300.2 и 1166.1 см^-1.

Масс-спектр (FAB): m/e (M⁺+1) 384.

УФ (EtOH): l_max257 нм (ε9190).
Пример 8. [7S, 6R] -7-{ [2-(трет-бутокси- карбомил)амино-4-тиазолил] (метоксиимино)ацетил} амидо-3-трифторметил-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоновая кислота.

Трифторацетатную соль [7S, 6R] -7-амино-3- трифторметил-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоновой кислоты (0,10 г, 0,275 ммоль)обрабатывают под N₂ бис(триметилсилил)мочевиной (0,281 г, 1,38 ммоль) и 1,4 мл безводного ДМФ. Твердые тела, растворенные после нагревания суспензии до температуры 45^oC, сохраняют в растворе при данной температуре в течение 1 ч. В отдельной колбе [2-(трет-бутоксикарбонил)-амино-4-тиазолил] -(метоксиимино)уксусную кислоту (0,083 г, 0,275 ммоль) растворяют в 1,4 мл ДМФ, охлаждают до -5^oC, обрабатывают оксалилхлоридом (0,035 г, 0,275 ммоль) и нагревают до температуры окружающей среды 30 мин. Раствор зародыша охлаждают до температуры охлаждающей среды, обрабатывают пиридином (0,067 г, 0,825 ммоль) и затем раствором хлорангидрида кислоты. После перемешивания в течение 2 ч раствор охлаждают в ванне со льдом и обрабатывают 2 мл воды, разбавляют этилацетатом и распределяют на фракции. Органический слой промывают два раза 1 н. раствором HCl, водой и солевым раствором, сушат в присутствии сульфата магния, фильтруют и упаривают досуха. Hеочищенное твердое тело (0,101 г) флеш-хроматографируют на кремнеземе с использованием 4% НОАс в этилацетате, получая 0,087 г (59%) указанного в заголовке продукта.

Пример 9. [7S, 6R] -7-([2-амино-4-тиазолил- (метоксиимино)ацетил]амино)-3-трифторметил-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоновая кислота.

Смесь трифторуксусной кислоты (1,5 мл) и триэтилсилана (0,5 мл) охлаждают в ванне со льдом и EtOH под N₂ и обрабатывают дифенилметил [7S, 6R]-7-{ [2-(трет-бутоксикарбонил)-амино-4-тиазолил] (метоксиимино)ацетил} амидо-3-трифторметил-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоксилатом. Через 30 мин реакционную смесь обрабатывают раствором CH₃CH и упаривают досуха. Этот неочищенный остаток (0,055 г) хроматографируют препаративной ЖХВР на обращенно-фазовой колонке с использованием ступенчатого градиента CH₃CN:H₂O:HOAc от 15:84:1 до 20:79:1, получая 0,021 г конечного продукта.

¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆) δ 9,25 (д, J=11 Гц, 1Н), 7,18 (шир.с, 2Н), 6,70 (с, 1Н), 5,48 (м, 1Н), 3,9 (м, 1Н), 3,80 (с, 3Н), 2,37 (шир.м, 2Н), 1,95 (м, 1Н), 1,6 (м, 1Н).

Пример 10. [7S, 6R]-7-[D-альфа-(трет-бутоксикарбониламино)-4-гидроксифенилацетиламино] -3-трифторметил -1- карба-(1-детиа)-3-цефем-4-карбоновая кислота.

Раствор D-альфа-(трет-бутоксикарбониламино) -4- гидроксифенилуксусной кислоты (0,214 г, 0,799 мМ) в 2,4 мл безводного ТГФ обрабатывают 1-гидроксибензотриазолом (0,108 г, 0,799 мМ) и DCC (0,198 г, 0,959 мМ) при 0^oC. Осадок образуется через 5 мин, и суспензию нагревают до температуры окружающей среды и перемешивают в течение 2 ч, после чего раствор фильтруют и охлаждают до 0^oC. Цвиттерион (амфотерный ион) карбацефема суспендируют в 2,4 мл безводного ТГФ и обрабатывают бистриметилсилилацетамидом (BSA) (0,8 мл), получая раствор, который концентрируют до густого масла, разбавляют 0,8 мл ТФГ, охлаждают до 0^oC и обрабатывают холодным раствором сложного эфира. Через 30 мин ванну удаляют и реакционную смесь перемешивают в течение ночи. Растворитель упаривают и остаток распределяют между этилацетатом и водным раствором NaHCO₃. Органический слой экстрагируют еще раз водным раствором NaHCO₃ и объединенные органические слои разделяют этилацетатом и pH снижают до 2,5 с помощью 1 н. раствора HCl. Водный слой промывают этилацетатом и объединенные органические слои сушат в присутствии сульфата магния, фильтруют и концентрируют с получением 0,371 г (67%) указанного в заголовке продукта, который не подвергают дальнейшей очистке.

Пример 11. [6R, 7S] -7β-[D-a-(амино) -4-гидроксифенилацетиламино]-3-трифторметил-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоновая кислота.

Продукт из примера 10 помещают в колбу при температуре 0^oC и обрабатывают смесью холодной трифторуксусной кислоты (TFA) (2,2 мл) и триэтилсилана (0,5 мл). Колбу сразу же помещают в ротационный испаритель и концентрируют до масла, которое растирают в порошок с помощью диэтилового эфира, получая твердое вещество, которое собирают фильтрацией и промывают раствором EtO₂. Это твердое вещество сушат в вакууме в течение 3 ч с получением 0,132 г неочищенного продукта. Обращенно-фазовая хроматография на колонке C₁₈ с использованием ступенчатого градиента от 99/1:H₂O/HOA_c до 5/94/1:CH₂CN/H₂O/ уксусная кислота после лиофилизации позволяет получить 0,055 г (25%) указанного в заголовке продукта в виде твердого тела белого цвета.

¹Н-ЯМР (D₂O) d7,35 (м, 2Н), 6,97 (м, 2Н), 5,40 (д, J=7 Гц, 1Н), 5,13 (с, 1Н), 3,90 (с, 1Н), 2,1-2,3 (шир.м, 2Н), 1,73 (м, 1Н) и 1,10 (м, 1Н).

ИК (KBr):1768,0, 1688,9, 1613,6, 1519,1 1300,2 см^-1.

Масс-спектр (FAB):m/e (M⁺+1) 400.

УФ (этанол): l_max 234,257 нм (ε 1280, 9030).

Анализ:
Вычислено, C 51,13, H 4,04, N 10,52
Найдено, C 51,25, H 4,21, N 10,29
Пример 12. [6R, 7S]-7-b-[D-a-(амино)-4- фторфенилацетиламино]-3-трифторметил-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоновая кислота.

Раствор рацемического трет-ВОС-защищенного 4-фторфенилглицина (0,216 г, 0,80 мМ) в 8,0 мл этилацетата охлаждают до температуры -45^oC, обрабатывают изобутилхлороформиатом (0,104 мл, 0,80 мМ) и N-метилморфолином (0,097 мл, 0,88 мМ), после чего перемешивают в течение 30 мин. 7-Амино-3-трифторметил-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4- карбоновую кислоту (0,200 г, 0,80 мМ) растворяют в 8,0 мл этилацетата после прибавления моносислилтрифторацетамида (0,341 мл, 1,84 мМ) и прибавляют к смешанному ангидриду при -45^oC. Через 30 мин раствор нагревают до 0^oC в течение 1 ч и затем обрабатывают 0,5 мл MeOH, нагревают до температуры окружающей среды, фильтруют через броунмиллерит и концентрируют при температуре 30^oC. Продукт хроматографируют на силикагеле и использованием 3:87:10 НОАс/этилацетат/ гексан. Оба диастереомера видны при ¹Н-ЯМР вместе с незначительными примесями. Неочищенный продукт (0,228 г) обрабатывают холодным раствором TFA (1,8 мл) и Et₃SiH (0,6 мл), концентрируют, порошкуют с помощью EtO₂, собирают фильтрацией и промывают EtO₂. Соль неочищенной TFA (0,209 г) хроматографируют на колонке C₁₈ двумя ступенчатыми градиентами от 15% CH₃/H₂O до 20% CH₃/H₂O, получая чистые после лиофелизации 0,030 г (10%) продукта из L-аминокислоты и 0,046 г (14%) продукта, полученного из D-аминокислоты. Время удерживания при ЖХВР: C₁₈ 1/20/79: НОАс/CH₃CN/H₂O, 2 мл/мин, L=4,11 мин, D=5,38 мин. L-диастереомер:
¹Н-ЯМР(CDCl) d 9,1 (м, 1Н), 7,50 (м, 2Н), 7,22 (т, J=10 Гц, 2 Н), 5,17 (шир.с, 1Н), 4,89 (шир.с, 1Н), 3,76 (м, 1Н), 2,17 (м, 2Н),1,73 (м, 1Н), 1,60 (м, 1Н).

ИК (CHCl₃):см^-1.

Масс-спектр (FAB):m/e (M⁺).

УФ (EtOH): l_max 257 нм (ε)
Пример 13. [7S, 6R]-7-{[2-(трифторметил)- амино-4-тиазолин] (трифенилметоксиимино)ацетил} амидо-3-трифторметил-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоновая кислота.

7-Амино-3-трифторметил -1- карба(1-детиа)-3-цефем -4-карбоновую кислоту (0,300 г, 1,20 мМ) (цвиттерион карбацефема) растворяют в 6,0 мл сухого ДМФ с помощью бистриметилсилилмочевины (BSU)(1,23 г, 6,0 мМ) при 50^oC в течение 1 ч и затем при комнатной температуре 30 мин. В отдельной колбе [2-тритиламино-4- тиазолил](тритилоксиимино)уксуную кислоту (0,806 г, 1,20 мМ) растворяют в 6,0 мл сухого ДМФ и охлаждают до 0^oC, обрабатывают по каплям оксалилхлоридом (0,105 мл, 1,20 мМ) и нагревают до температуры окружающей среды. Ядро затем охлаждают до 0^oC, обрабатывают пиридином (0,194 мл, 2,4 мМ) и хлорангидридом кислоты, нагревают до температуры окружающей среды и перемешивают 2 ч. После прибавления 2,0 мл воды реакционную смесь обрабатывают 1 н. раствором HCl и экстрагируют этилацетатом. Этилацетатовый слой промывают водой, 1 н. раствором HCl, водой, солевым раствором, сушат в присутствии сульфата магния и концентрируют. Неочищенный продукт (1,12 г) хроматографируют фильтрацией через силикагель с помощью 3% НОАс/этилацетата, получая 0,95 г (88%) указанного в заголовке продукта в виде белого порошка.

Пример 14. [7S, 6R]-7-([2-амино-4-тиазолил-(оксиимино)ацетил]амидо)-3-трифторметил-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоновая кислота.

Раствор бис-тритилированного карбацефема из примера 13 в 4,5 мл ТГФ обрабатывают 7,6 мл 75% -ного водного раствора муравьиной кислоты и медленно нагревают до 40^oC под азотом 2 ч. После охлаждения прибавляют 20 мл CH₂CN с последующей концентрацией, и данный процесс повторяют с получением остатков коричневого цвета. Это твердое вещество промывают 3/1:EtO₂/CH₃CN и твердое вещество выделяют центрифугированием. После проведения дополнительных промывок с использованием EtO₂ твердое вещество хроматографируют на колонке HP-20ss с помощью 1% HOAc/H₂O после загрузки CH₃CN.

Полученное твердое тело хроматографируют на колонке C₁₈ с использованием 1/10/89:HOAc/CH₃CN/H₂O, получая 0,027 г твердого тела кремового цвета.

¹H-ЯМР (ДМСО -d₆) δ 9.13 (д, J=9 Гц, 1H), 7.07 (с, 2H), 6.64 (с, 1H), 5.50 (м, 1H), 3.89 (м, 1H), 2.25 (м, 2H), 1.95 (м, 1H), 1.60 (м, 1H).

ИК (CHCl₃) см^-1.

Масс-спектр (FAB): m/e (M⁺)
УФ (EtOH): l_max 257 нм.

Пример 15. Дифенилметил [7S, 6R]-7-фенокси-ацетамидо-3-трифторметил-1-карба-(1-детиа)-3-цефем-4-карбоксилат.

Суспензию промытого кислотой цинка (58,2 г, 0,89 моль) в 1780 мл безводного ДМФ под азотом обрабатывают по каплям 205,4 (0,98 ммоль) CF₂Br₂•CF₂Br ₂ прибавляют с тем, чтобы поддержать температуру на уровне 45-50^oC. После завершения прибавления реакционную смесь перемешивают при температуре окружающей среды 1,5 ч, и за это время смесь возвращается к комнатной температуре. Раствор цинкового реагента охлаждают до температуры -30^oC и обрабатывают DMPU (100 мл) и CuCl (88,1 г, 0,89 ммоль). Через 15 мин реакционную смесь нагревают до 0^oC в течение 30 мин. В отдельной колбе дифенилметил(6R, 7S)-7- феноксиацетамидо-3-бромо-1-карба(1-детиа)-3- цефем-4-карбксилат (50,0 г, 0,089 ммоль) растворяют в безводном DMPU (100 мл) и 100 мл ДМФ под азотом и нагревают до 65^oC. Прибавляют медный раствор к бромиду через канюлю в течение 1 ч, поддерживая температуру на уровне 65^oC. Через 1 ч реакционную смесь охлаждают до 50^oC и перемешивают в течение 16 ч. Реакционную смесь охлаждают до температуры окружающей среды, разбавляют этилацетатом, вливают в насыщенный раствор NaHCO₃, фильтруют через броунмиллерит, промывают дважды NaHCO₃, водой, 1 н. раствором HCl (два раза), водой и солевым раствором, сушат в присутствии сульфата магния и восстанавливают до бурого масла в вакууме. Это масло фильтруют через силикагель с помощью 60-40 этилацетата/гексана и перекристаллизовывают из этилацетата/гексана, получая 28,4 г (58%) твердого вещества не совсем белого цвета.

Пример 16. Аллил [7S, 6R]-7- феноксиацетамидо-3-трифторметил-1-карба-(1-детиа)-3-цефем-4- карбоксилат.

После растворения продукта из примера 15 (26,00 г, 0,050 моль) в 375 мл N,N- диметилформамида и 750 мл тетрагидрофурана под азотом прибавляют 375 мл 1 н. раствора HCl с последующим прибавлением цинкового порошка (19,61 г, 0,30 ммоль). Раствор становится теплым, и его перемешивают 90 мин, а затем фильтруют через броунмиллерит. Затем ТГФ упаривают. После разбавления этилацетатом осуществляют четыре промывки 1 н. раствором HCl, водой, солевым раствором, сушат в присутствии сульфата натрия и упаривают при пониженном давлении до неочищенного твердого вещества оранжевого цвета. Твердое вещество растворяют в этилацетате, прибавляют 50%-ный водный раствор бикарбоната натрия, и двухфазный раствор обрабатывают кислой сернокислой соль тетрабутиламмония (17,83 г, 0,052 моль). После перемешивания в течение 15 мин слои разделяют, и этилацетатный слой сушат в присутствии сульфата натрия, фильтруют и упаривают при пониженном давлении до вязкого масла. Масло растворяют в 110 мл хлороформа и обрабатывают аллилбромидом (7,26 г, 0,060 моль), растворенным в 35 мл хлороформа, через капельную воронку в течение 30 мин. Раствор перемешивают при температуре окружающей среды в течение ночи, восстанавливают до твердого тела и хроматографируют на силикагеле с использованием 70% гексан/30% этилацетат, получая после упаривания при пониженном давлении 14,35 г указанного в заголовке соединения (68%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) δ 7.45 (д, J=8 Гц, 1H), 7.30 (т, J=7 Гц, 2H), 7.00 (т, J= 7 Гц, 1H), 6.87 (д, J=10 Гц, 2H), 2.0-6.58 (м, J= Гц, 1H), 5.45 (дд, J=9 Гц, 1H), 5.4-5.2 (м, 2H), 5.72 (т, J=6 Гц, 2H), 5.43 (с, 2H), 3.95-3.85 (м, 1H), 2.55-2.4 (м, 1H), 2.4-2.25 (м, 1H), 2.1-1.95 (м, 1H), 1.6-1.4 (м, 1H).

Пример 17. Дифенилметил [7S, 6R]-7-фенокси-ацетамидо-3-трифторметил-1-карба-(1-детиа)-3-цефем-4-карбоксилат.

Суспензию только что промытого кислотой цинкового порошка (58,2 г, 0,89 моль) суспендируют в 1780 мл безводного ДМФ в трехлитровой трехгорлой колбе, снабженной перегородкой, термометром, трубопроводом для азота, капельной воронкой и конденсатором с сухим льдом. Приблизительно 20% охлажденного на льду дибромдифторметана (205,4 г, 0,98 моль) прибавляют по каплям в быстром темпе через капельную воронку, и через 15 мин начало экзотермической реакции вызывает повышение температуры до 50^oC. Остальной дибромдифторметан прибавляют со скоростью, которая поддерживает внутреннюю температуру реакции на уровне 45-50^oC, после чего дибромдифторметан перемешивают в течение 90 мин после прибавления всего соединения. Вслед за охлаждением раствора до температуры -30^oC прибавляют 150 мл DMPU с последующим прибавлением CuCl (88,1 г, 0,89 моль), перемешивают 20 мин, затем ванну заменяют ледяной баней и перемешивание продолжают в течение 20 мин. В отдельной колбе исходный винилбромид (50,0 г, 0,089 моль) растворяют в 100 мл безводного DMPU и 100 мл безводного ДМФ и нагревают до температуры 65-70^oC. К бромиду прибавляют холодный медный реагент через канюлю в течение приблизительно 1 ч, поддерживая температуру на уровне 65-70^oC во время прибавления, и затем перемешивают в течение 1 ч при температуре 70^oC. После охлаждения до температуры окружающей среды разбавляют этилацетатом, медленно вливают в 50%-ный водный раствор бикарбоната, отделяют, промывают два раза 50%-ным водным бикарбонатом, водой, два раза 1 н. раствором HCl, водой, солевым раствором, сушат в присутствии сульфата магния и восстанавливают до бурого масла. Масло хроматографируют на силикагеле с использованием 60:40 гексанэтилацетат, после чего кристаллизуют из этилацетата/гексана с получением 28,4 г твердого вещества бежевого цвета (58%).

Пример 18. п-Нитробензил[7S, 6R]-7- феноксиацетамидо-3-трифторметил-1-карба-(1-детиа)-3-цефем-4-карбоксилат.

Указанное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой примера 17 (за исключением того, что CuBr используют вместо CuCl), получая твердое вещество бежевого цвета с выходом 64%
¹H-ЯМР (CDCl₃) d 8.19 (д, J=9 Гц, 2H), 7.63 (д, J=9.0 Гц, 2H), 7.30 (т, J= 6 Гц, 3H), 7.03 (т, J=8 Гц, 1H), 6.86 (д, J=9 Гц, 2H), 5.45 (т, J=5 Гц, 1H), 5.37 (квартет, J=15 Гц, 2H), 4.57 (с, 2H), 4.0-3.9 (м, 1H), 2.6-2.35 (м, 1H), 2.4-2.3 (м, 1H), 2.1-2.0 (м, 1H), 2.6-2.4 (м, 1H).

Пример 19. Хлористоводородная смесь аллил-[7S- 6R]-7-амино-3-трифторметил-1-карба(1-детиа)-3-цефем-карбоксилата.

Продукт из примера 16 (10,53 г, 0,0246 моль) растворяют в 83 мл сухого метиленхлорида под азотом и охлаждают до 0^oC. Раствор обрабатывают пиридином (2,41 г, 0,0305 моль) через шприц, после чего порционно в течение 20 мин прибавляют PCl₅ (5,84 г, 0,0280 моль). Ледяную ванну удаляют через 30 мин и раствор перемешивают в течение 1,5 ч и за это время раствор переохлаждают до температуры ледяной бани и обрабатывают изобутиловым спиртом (18,4 г, 0,248 моль), растворенным в 20 мл диэтилового эфира, через шприц в течение 5 мин. Через 20 мин ледяную ванну удаляют и реакционную смесь перемешивают 1 ч. Образуется густое, ворсистое твердое вещество белого цвета, которое охлаждают до 0^oC, собирают фильтрацией, промывают два раза 50/50 смесью метиленхлорида/простого диэтилового эфира и один раз диэтиловым эфиром. Это твердое вещество сушат в вакууме в течение 3 ч, получают 6,49 г указанного в заголовке продукта в виде хлопьеобразного твердого вещества белого цвета (77%).

¹H-ЯМР (DMCO-d₆) d 9,20 (c, 3H), 6,0-5,8 (м, 1H), 5,35 (д, J 1 Гц, 1H), 5,24 (д, J 1 Гц, 1H), 4,90 (д, J 1 Гц, 1H), 4,75 (т, 2H), 4,1- 3,9 (м, 1H), 3,5-3,2 (м, 2H), 2,2-2,1 (м, 1H), 1,9-1,7 (м, 1H).

Пример 20. Аллил (7S, 6R)-7-[D-a- (третбутоксикарболамино)-3-фторфенилацетамино]-3-трифторметил-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоксилат.

Раствор (трет-бутоксикарбониламино)-3-фторфенилуксусной кислоты (1,05, 0,00321 моль ) в 21 мл безводного метиленхлорида обрабатывают N-метилморфолином (0,35 г, 0,00343 моль) и 1-хлор-3,5-диметокситриазином (0,58 г, 0,00321 моль) при температуре 0^oC под азотом и перемешивают в течение 45 мин. Продукт из примера 16 (1,00 г, 0,00306 моль) суспендируют в 8 мл метиленхлорида, обрабатывают N-метилморфолином (0,35 г, 0,00343 моль) и полученный раствор прибавляют по каплям в течение 10 мин к вышеуказанному раствору активированного сложного эфира. Через 20 мин при 0^oC ванну удаляют и раствор перемешивают в течение 90 мин. После упаривания растворителя в вакууме остаток растворяют в этилацетате, нерастворимые вещества удаляют фильтрацией через броунмиллерит и упаривают до масла, после чего неочищенный продукт хроматографируют на силикагеле с использованием 75:25 гексан/этилацетат, затем 65: 45 гексан/этилацетат, получая 1,45 г (88%) указанного в заголовке продукта в виде бежевой пены.

¹H-ЯМР (CDCl₃) d 7,4-7,3 (м, 2H), 7,2-7,0 (м, 2H), 6,75 (д, 1H), 6,0-5,85 (м, 1H), 5,7-5,5 (м, 1H), 5,4-5,2 (м, 2H), 5,2-5,1 (м, 1H), 4,8- 4,7 (м, 1H), 3,95-3,8 (м, 1H), 2,6-2 2,2 (М, 2H), 2,0-1,7 (м, 1H), 1,40 (с, 9H) и 1,3-1,1 (м, 1H).

Пример 21. (7S, 6R)-7[D, L-a-(трет-бутоксикарбониламино)-3- фторфенилацетамино]-3-трифторметил-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоновая кислота.

Продукт из примера 20 (1,45 г, 0,00268 моль) растворяют в 4,5 мл этилацетата и 1 мл метиленхлорида под азотом и дезоксигенируют барботированием азота в колбу в течение 5 мин. Раствор охлаждают в ванне со льдом и обрабатывают 0,070 г тетракистрифенилфосфинпалладия, 0,070 г тетрафенилфосфина и 6,4 мл (0,00322 моль) 0,5 М раствора 2-этилгексаноата натрия в этилацетате. Через 5 мин ванну удаляют и раствор перемешивают в течение 30 мин, вливая в 30 мл смеси 50/50 диэтилового эфира и гексана. Полученный осадок собирают фильтрацией с отсосом, растворяют в этилацетате и небольшом количестве метиленхлорида, промывают 1 н. раствором HCl, сушат в присутствии сульфата магния и упаривают с получением 1,20 г (89%) указанного в заголовке соединения, которое не подвергают дальнейшей очистке.

Пример 22. (6R, 7S)-7-b-[D-a-(амино)-3-фторфенилацетиламино]-3-трифторметил-1-карба (1-детиа)-3-цефем-4-карбоновая кислота.

Продукт из примера 21 (1,15 г, 0,00229 моль) прибавляют за одну порцию к охлажденному на льду раствору TFA (11,5 мл) и анизола (0,75 мл, 0,00687 моль) под азотом и перемешивают 30 мин. Реакционную смесь разбавляют ацетонитрилом и восстанавливают в вакууме, вновь разбавляют ацетонитрилом и упаривают при температуре 30^oC досуха. Остаток порошкуют простым диэтиловым эфиром и полученное твердое тело собирают фильтрацией и промывают неоднократно простым диэтиловым эфиром. Неочищенное твердое вещество сушат в вакууме с получением 0,89 г смеси диастереомеров; 0,20 г продукта хроматографируют обращенно-фазовой хроматографией на колонке C-18 порционно (0,020 г) с использованием 10% ацетонитрил/1% AcOH/H₂O, получая после лиофилизации 0,032 г искомого продукта.

Пример 23. Аллил (7S, 6R)-7-a-(трет-бутоксикарбониламино)-3-этилсульфонамидофенилацетиламино]-3-трифторметил-1-карба (1-детиа)-3-цефем-4-карбоксилат.

Указанное в заголовке соединение, полученное в соответствии с примером 20, имеет вид белой пены (88%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) d 7,50 (с, 1H), 7,35-7,1 (м, 6H), 6,0-5,75 (м, 2H), 5,4-5,1 (м, 4H), 5,8-5,7 (м, 2H), 3,95-3,8 (м, 1H), 3,10 (квартет, J 8 Гц, 2H), 2,6-2,0 (м, 3H), 1,40 (с, 9H), 1,30 (м, 1H).

Пример 24. (7S, 6R)-7-[D, L-a-(третбутоксикарбониламино)-3-этилсульфонамидофенилацетиламино] -3-трифторметил-1-карба (1-детиа)-3-цефем-4-карбоновая кислота.

Неочищенное соединение, указанное в заголовке, получают из продукта примера 23 в соответствии с методикой примера 21 (96%) и не подвергают дальнейшей очистке.

Пример 25. (6R, 7S)-7-b-[D-a-(амино)-3-этилсульфонамидофенилацетил-амино]-3-трифторметил-1карба-(1-детиа)-3-цефем-4-карбоновая кислота.

Указанный в заголовке продукт получают из неочищенного продукта примера 24 в соответствии с методикой примера 22 и хроматографируют на колонке C-18, используя 20% ацетонитрил/1% ацетат аммония/ H₂O, с получением 14% продукта после лиофилизации.

¹H-ЯМР (DMCO-d₆) d 9,85 (шир.с, 1H), 9,3- 9,1 (м, 1H), 7,3-7,0 (м, 4H), 5,3-5,2 (м, 1H), 4,72 (с, 1H), 3,7-3,6 (м, 1H), 3,1-2,9 (м, 1H), 2,2-1,9 (м, 2H), 1,4-1,3 (м, 1H), 1,25-0,95 (м, 4H).

Пример 26. Аллил (7S, 6R)-7-[a-(третбутоксикарбониламино)-3-бромфенилацетиламино]-3-трифторметил-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоксилат.

Указанное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой в примере 20 и хроматографируют на силикагеле с использованием 70/30 гексан/этилацетат, получая не совсем белую пену (91%).

¹H-ЯМР (CDCl₃ d 7,5-7,2 (м, 5H), 6,0-5,7 (м, 2H), 5,5-5,2 (м, 3H), 5,0-4,7 (м, 1H), 3,95-3,8 (м, 1H), 2,6-2,2 (м, 2H), 2,1-1,7 (м, 1H), 1,4 (с, 9H), 1,1-1,3 (м, 1H).

Пример 27. (7S, 6R)-7-[D, L-a- (третбутоксикарбониламино)-3-бромфенилацетиламино]-3-трифторметил-1-карба (1-детиа)-3-цефем-4-карбоновая кислота.

Указанный в заголовке продукт с выходом свыше 100% выделяют в результате реакции, аналогичной реакции примера 21. Исходным веществом является продукт из примера 26.

Пример 28. [6R, 7S]-7-b-[D-a-(амино)-3- бромфенилацетиламино]-3-трифторметил-1-карба(1- детиа)-3-цефем-4-карбоновая кислота.

Указанное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой примера 26 и хроматографируют с использованием 15% ацетонитрил /1% AcOH/H₂O, получая продукт с выходом 10%
¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) d 9.20 (шир.с, 1H), 7.65 (с, 1H), 7.65 (с, 1H), 7.50 (д, J 5 ГЦ, 1 H), 7.40 (д, J= 5 Гц, 1H), 7.30 (т, J 5 Гц, 1H), 5.3-5.2 (м, 1H), 4.75 (с, 1H), 3.7-3.6 (м, 1H), 2.20-2.0 (м, 2H), 1.4-1.2 (м, 2H).

Пример 29. Аллил [7S, 6R]-7-[a-трет- бутоксикарбониламино)-3-трифторметилфенилацетиламино]-3-трифторметил-1- карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоксилат.

Указанное в заголовке соединение получают в соответствии с примером 20 в виде белой пены (91%).

¹H-ЯМР (CDCl₃) d 7.4-7.2 (м, 4H), 6.9-6.8 (м, 1H), 6.0-5.85 (м, 1H), 5.7-5.55 (м, 1H), 5.4-5.2 (м, 4H), 4.75 (т, J 3 Гц), 4.0-3.8 (м, 1H), 2.5-2.2 (м, 2H), 2.1-1.7 (м, 1H), 1.7-1.5 (м, 1H), 1.40 (с, 1 H).

Пример 30. [7S, 6R)-7-(D, L-a-(трет - бутокискарбониламино)-3-трифторометилфенилацетиламино] -3-трифторметил-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоновая кислота.

Указанное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой примера 21, получая свыше 100% неочищенного твердого тела светло-желтого цвета. Исходным веществом является продукт из примера 29.

Пример 31. [6R, 7S]-7-b-[D-a-(амино)-3-трифторметилфенилацетиламино]-3-трифторметил-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоновая кислота.

Указанное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой примера 22, используя продукт из примера 30 в качестве исходного вещества, и хроматографируют на колонке C18 порционно (0,020 г), применяя 15% ацетонитрил /1% AcOH/H₂O, с получением продукта, имеющего выход 12%
¹ЯМР (ДМСО-d₆)d 9.5-9.3 (м, 1H), 8.6 (шир.с, 3H), 7.9-7.6 (м, 4H), 5.56-5.35 (м, 1H), 5.16 (с, 1H), 3.85-3.75 (м, 1H), 2.3-2.1 (м, 2H), 1.35-1.25 (м, 1H), 1.25-1.1 (м, 1H).

Пример 32. [6R, 7S)-7-b-[D-a-(амино)-3,4 -дихлорфенилацетиламино]-3-трифторметил-1-карба(1 -детиа)-3-цефем-4-карбоновая кислота.

Рацемический раствор трет-ВОС-защищенного 3,4-дихлорфенилглицина (0,550 г, 0,00173 моль) в 21 N,N-диметилформамида охлаждают до -45^oC под азотом, прибавляют изобутилхлорформиат 80,22 мл, 0,00173 моль) с последующим прибавлением N-метилморфолина (0,19 мл, 0,00173 моль) и перемешиванием полученного раствора 30 минут. Моносилилтрифторацетамид (1,53 г, 0,00824 моль) прибавляют к перемешанной суспензии 7-амино-3-трифторметил-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоновой кислоты (0,600 г, 0,00165 моль) в 15 мл N,N- диметилформамида и раствор нагревают до 40^oC в течение 30 мин. Раствор силилированного ядра хлаждают и прибавляют к смешанному ангидриду со скоростью, которая поддерживает внутреннюю температуру реакции на уровне -40^oC. Раствор медленно нагревают до 0^oC через 2 ч, прибавляют 1, 2 мл MeOH, и ванну со льдом удаляют. После достижения температуры окружающей среды раствор разбавляют этилацетатом, фильтруют через броунмиллерит, промывают четыре раза 1 н. раствором HCl, водой, солевым раствором, сушат в присутствии сульфата магния и концентрируют при пониженном давлении. Остаток хроматографируют на силикагеле с использованием 2/80/ 18:HOAc/этилацетат/гексан. Неочищенный продукт прибавляют к перемешанному раствору TFA (4,0 мл) и Et₃SiH (1,2 мл) в ванне со льдом и через 30 мин раствор концентрируют, порошкуют простым диэтиловым эфиром, собирают фильтрацией и промывают простым диэтиловым эфиром. Хроматография неочищенной соли TFA (0,114 ) на колонке C18 с использованием градиента к 25% CH₃CN/H₂O позволяет получить после лиофилизации 0,021 г (3%) смеси диастереомеров (90% D-боковой цепи и 10% L боковой цепи при анализе ЖХВР).

¹H-ЯМР (ДМСО d₆) d 9.15 (шир.с, 1H), 7.7-7.6 (м, 2H), 7.38 (д, J 8 Гц, 1H), 5.3-5.25 (м, 1H), 4.75 (с, 1H), 3.8-3.7 (м, 1H), 2.2-2.1 (м, 2H), 1.4-1.2 (м, 2H).

Пример 33. [6R, 7S]-7b-[D-a-(амино)-3-хлор-4-гидроксифенилацетиламино] -3-трифторметил-1-карба-(1-детиа)-3-цефем-4-карбоновая кислота.

Указанный в заголовке продукт получают в соответствии с условиями проведения реакции примера 32, за исключением того, что чистый трет-ВОС-защищенный D-3-хлор-4-гидроксифенилглицин используют для ацилирования, получая 41% -ный выход твердого вещества белого цвета.

¹H-ЯМР (ДМСО-d₆) d 7.40 (с, 1H), 7.15 (д, J 9 Гц, 1H), 6.95 (д, J 10 Гц, 1H), 5.17 (д, J 5 Гц, 1H), 4.75 (с, 1H), 3.7-3.6 (м, 1H), 2.2 1.9 (м, 2H), 1.45-1.3 (м, 1H), 1.15-1.0 (м, 1H).

Пример 34. Аллил [7S, 6R] -7-[[2- (трифенилметил)амино-4-тиазолил] (третбутокси-карбонилметоксиимино) -ацетил] амидо-3- трифторметил-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоксилат.

Указанное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой примера 20 с выходом 41% твердого тела белого цвета.

¹H-ЯМР (CDCl₃) d 8.68 (д, 1H), 7.34 (c, 16H), 7.02 (с, 1H), 6.80 (с, 1H), 6.0-5.9 (м, 1H), 5.57 (д, 1H), 5.4-5.2 (м, 2H), 4.8-4.7 (м, 4H), 4.0-3.9 (м, 1H), 2.5-2.4 (м, 1H), 2.4-2.3 (м, 1H), 2.2-2.1 (м, 1H), 1.65-1.5 (м, 1H), 1.44 (с, 9H).

Пример 35. [7S, 6R]-7-[2-амино-4- тиазолил(карбоксиметоксиимино)ацетил] -3-трифторметил-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4- карбоновая кислота.

200 мг (0,245 ммоль) вышеуказанного продукта примера 34 обрабатывают 2,5 мл холодной трифторуксусной кислоты и 0,8 мл холодного триэтилсилата под азотом в ванне со льдом 1 ч. Затем ванну удаляют и раствор нагревают до комнатной температуры и перешивают в течение ночи. Раствор разбавляют ацетонитрилом и упаривают до небольшого объема в вакууме при 30^oC, затем разбавляют еще 2 раза ацетонитрилом и упаривают досуха. Остаток порошкуют простым диэтиловым эфиром и 73 мг неочищенного твердого тела бежевого цвета собирают фильтрацией с отсосом (57%-ный выход).

65 мг (0,126 ммоль) вышеуказанного неочищенного продукта растворяют в 3 мл безводного ацетонитрила под азотом с последующим прибавлением 3 мг (0,0126 ммоль) трифенилфосфина и 1 мг (0,00252 ммоль) палладиевого ацетата. Раствор охлаждают в ванне со льдом при одновременном прибавлении через шприц 0,036 мл (0,132 ммоль) гидрида трибутилолова. Через 1 ч раствор обрабатывают 0,014 мл (0,252 ммоль) уксусной кислоты и перемешивают в течение 30 мин. Осадок собирают и промывают простым диэтиловым эфиром и затем перекристаллизовывают из метанола/этилацетата/диэтилового эфира с получением 21 мг светло-желтого твердого тела (выход 35%).

¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆) d 9,45-9,3 (м, 1H) 7,14 (c, 2H), 6,76 (c, 1H), 5,5-5,4 (м, 1H), 4,56 (c, 2H), 3,9-3,8 (м, 1H), 2,4-2,2 (м, 2H), 1,95-1,85 (м, 1H), 1,6-1,45 (м, 1H)
Пример 36. Аллил (7S, 6R)-7-[D,L-a- (третбутоксикарбониламино)-3-тиенилацетиламино]-3-трифторметил-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоксилат.

Указанное в заголовке соединение, полученное в соответствии с методикой примера 20, имеет вид твердого вещества не совсем белого цвета (91%).

Пример 37. [7S, 6R]-7-[D,L-a- (третбутоксикарбониламино)-3-тиенилацетиламино]-3-трифторметил-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоновая кислота.

Указанное в заголовке соединение получают из продукта примера 36 в соответствии с методикой примера 21 без дальнейшей очистки.

Пример 38. [6R,7S]-7-b-[D-a-(амино)-3-тиенилацетиламино]-3-трифторметил-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоновая кислота.

Указанный в заголовке продукт получают из неочищенного продукта примера 37 в соответствии с методикой, приведенной для примера 22, и хроматографируют на колонке C18 с использованием метанола/уксусной кислоты, воды, получая 18%-ный выход лиофилизации.

¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆) d 9,3-9,2 (м, 1H), 7,6-7,5 (м, 2H), 7,15 (д, 1H), 5,3-5,2 (м, 1H), 4,90 (с, 1H), 3,85-3,6 (м, 1H), 2,2-2,0 (м, 2H), 1,45-1,2 (м, 2H).

Пример 39. Аллил [7S, 6R]-7-b-[D-a-(третбутоксикарбониламино)-3-бензиенилацетиламино]-3-трифторметил-1-карба-(1-детиа)-3-цефем-4-карбоксилат.

Указанное в заголовке соединение, полученное в соответствии с методикой примера 20, имеет вид пены белого цвета (выход 60%).

Пример 40. [7S, 6R]-7-b-[D-a-(третбутоксикарбониламино)-3-бензтиенилацетиламино]-3-трифторметил-1- карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоновая кислота.

Указанное в заголовке соединение получают из продукта примера 39 в соответствии с методикой примера 21, и не подвергают очистке.

Пример 41. [6R, 7S)-7-b-[D-a-(амино)-3-бензтиенилацетиламино]-3-трифторметил-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоновая кислота.

Указанное в заготовке соединение получают в соответствии с методикой примера 22 из неочищенного продукта примера 40 и хроматографируют на кнопке C18 с использованием метанола/уксусной кислоты/воды, после чего лиофилизуют с получением твердого вещества белого цвета с выходом 32%
¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆) d 9,35 (д, 1H), 9,1-8,5 (шир.с, 3H), 8,1-7,9 (м, 2H), 7,9 (с, 1H), 7,5-7,3 (м, 2H), 5,5-5,3 (м, 2H), 3,9-3,7 (м, 1H), 2,2-2,1 (м, 2H), 1,4-1,3 (м, 1H), 1,2-1,1 (м, 1H).

Пример 42. Аллил 7-[(N-трет- бутилоксикарбонил-N-феноксиацетил)-амино] -3-бромо-1-карба(1-детиа)-2,3-цефем-4-карбоксилат
Смесь 60/40 D2/Δ3 соединения 3-бромо из препарата 3 (100 мг, 0,2297 ммоль) объединяют с ДМАР (29 мг, 0,2343 ммоль) и ди-трет-бутилдикарбонатом (0,2412 ммоль, 84 мкл). Смесь перемешивают приблизительно 1 ч при комнатной температуре. Смесь непосредственно хроматографируют на силикагеле с элюированием 20% EtOAc/CH₂Cl₂, получая 104 мг (85%-ный выход) указанного в заголовке соединения в виде смеси 60/40 Δ2/Δ3 изомеров соответственно. Данные относительно Δ2-изомера.

¹Н-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 7,30 (т, J=8 Гц, 2H), 7,0 (т, J 6 Гц, 1H), 6,90 (д, J 8 Гц, 2 H), 6,30 (м, 1H), 5,95 (м, 1H), 5,65 (м, 1H), 5,35 (м, 2H), 5,10 (м, 2H), 4,88 (с, 1H), 4,75 (м, 2H), 4,10 (м, 1H), 2,25 (м, 2H), 1,50 (с, 9H).

Пример 43. Аллил-7-[(N-трет-бутоксикарбонил-N-феноксиацетил)амино]-3-бромо-1-карба(1-детиа)-2-цефем-4-карбоксилат.

Чистый D2-изомер 3-бромосоединения из препарата 3 (4,6 г, 10,57 ммоль) объединяют с ди-трет-бутилдикарбонатом (2,54 г, 11,6241 ммоль, 2,65 мл) и DMAР (1,33 г, 10,88 ммоль), после чего перемешивают. Смесь обрабатывают, как в примере 34, получая 5,3 г (93,6%-ный выход) указанного в заголовке продукта.

Пример 44. Аллил [7S, 6R]-7-трет-бутилоксикарбониламино-3-бромо-1-карба-(1-детиа)-2-цефем-4-карбоксилат.

Продукт из примера 42 (104 мг, 0,1947 ммоль) объединяют с ТГФ (2 мл) и первой порцией LiOH (0,1652 мл) и перемешивают в течение 40 мин. Затем прибавляют вторую порцию LiOH (0,0295 мл) и смесь перемешивают 1 ч. Смесь выливают в 40 мл EtOAc и затем смешивают с 10 мл воды и 10 мл насыщенного раствора NaHCO₃. Органические вещества отделяют, сушат в присутствии сульфата натрия, фильтруют и концентрируют с получением 79 мг (выход свыше 100%) неочищенного продукта. Данные относительно Δ2-изомера:
¹Н-ЯМР (300 МГц, CDCl ₃) δ 6,35 (м, 1H), 5,95 (м, 1H), 5,35 (м, 2H), 5,15 (м, 2H), 4,88 (с, 1H), 4,68 (м, 2H), 4,05 (м, 1H), 2,35 (м, 2H) и 1,42 (с, 9H).

Пример 45. Аллил [7S, 6R]-7- бутилоксикарбониламино-3-бромо-1-карба(1-детиа)-2-цефем-4-карбоксилат.

Продукт из примера 43 (5,25 г, 9,8076 ммоль) объединяют с ТГФ (95 мл) и первой порцией LiOH (8,75 мл) и перемешивают приблизительно 40 мин. Прибавляют вторую порцию LiOH (1,55 мл) и смесь перемешивают в течение 1 ч. Смесь обрабатывают в соответствии с примером 36, получая 4,02 г (выход свыше 100%) указанного в заголовке продукта.

Пример 46. Аллил [7S, 6R]-7- бутилоксикарбониламино-3-бромо-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоксилат.

Продукт из примера 44 (16 мг, 0,0399 ммоль) объединяют с 0,3 мл CH₂Cl₂ и DBU (0,0064 ммоль, 1,0 мкл). Смесь перемешивают 60 мин при комнатной температуре. Смесь отмеривают пипеткой через 1 ч кремнезема и затем элюируют с использованием 10% EtOAc/CH ₂Cl₂. Указанный в заголовке продукт пропускают через DBU на кремнеземе. Смесь концентрируют до пены, получая 15,1 мл продукта при соотношении 15/85D2/Δ3- изомеров, что представлятет 94,9% восстановления на основе теоретического минимума от 16 г.

Пример 47. Аллил [7S, 6R]-7- бутилоксикарбониламино-3-бромо-1-карба-(1-детиа)-3-цефем-4-карбоксилат.

Продукт из примера 45 (4,0 г, 9,97 ммоль) обрабатывают в соответствии с примером 46 за исключением того, что 6% etAOc/CH ₂Cl₂ используют вместо 10% раствора, получая чистый Δ3-изомер. Используют следующие реакционные условия:
DBU 2,5 ммоль, 0,373 мл
CH₂Cl₂ 70 мл
Неочищенную смесь вносят непосредственно в хроматографическую колонку глубиной 8 дюймов (20,32 см) и диаметром 4 дюйма (10,16 см) (кремнезем) и элюируют с помощью 6% EtOAc/CH₂Cl₂, получая 1,98 г желательного Δ3-изомера и 610 мг смеси Δ2/Δ3 изомеров, повторно хроматографируют, как описано выше с получением дополнительных 250 мл чистого Δ3-изомера и 360 мг чистого Δ2-изомера. Чистый Δ3-изомер прибавляют с получением общего количества 2,23 г (66%-ный выход) чистого Δ3- изомера.

¹Н-ЯМР (300 МГц, CHCl₃)δ 5,95 (м, 1H), 5,35 (м, 3H), 5,15 (м, 1H), 4,75 (м, 2H), 3,85 (м, 1H), 2,75 (м, 2H), 2,0 (м, 1H), 1,70 (м, 1H) и 1,42 (с, 9H).

ИК (CHCl₃): 3019, 1775, 1718, 1504, 1369, 1206 1055 см^-1.

Macc-cпектр: m/e 400 (М⁺).

Анализ для C₁₆H₂₁N₂O₂Br:
Вычислено, C 47,89, H 5,28, N 6,78, Br 19,91
Найдено, C 47,85, H 5,05, N 6,77, Br 19,76
Пример 48. [7S, 6R]-7-(аминофенилацетил)-амино-3-бромо -1-карба(1-детиа)-3-цефем-4- карбоновая кислота.

A) В 25-мл колбу прибавляют при температуре 30^oC 78 мг (0,1944 ммоль) аллил [7S, 6R)-7- бутилоксикарбониламино-3-бромо-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоновой кислоты в 4 мл EtOH и 37 мг (0,1944 ммоль) моногидрата n-толуолсульфокислоты, после чего смесь концентрируют досуха. Прибавляют EtOH (4 мл) и смесь вновь концентрируют досуха. В отдельной колбе 46 мг (0,1944 ммоль) (2-пропенилокси)карбониламино-D-фенилглицина и 34 мг (0,1944 ммоль) хлордиметокситриазина в 1,5 мл CH₂Cl₂ объединяют и охлаждают до 0^oC. Прибавляют N-метилморфолин (NMM) и смесь перемешивают 40 минут. В это время прибавляют другой эквивалент NMM, после чего прибавляют смесь в первой колбе. Смесь нагревают до комнатной температу ры 2-5 ч. Смесь концентрируют почти досуха, после чего прибавляют 1 мл CH₂Cl₂ и 1 мл 50/50 смеси EtOAc/гексана. Затем смесь нагружают на 15 г (кремнезем) хроматографической колонки и элюируют с использованием 10% MeOH/EtOAc, получая 74 мг аллил-7-(фенил(2-пропенилокси)карбониламино)ацетиламино-3-бромо-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоксилата, физические данные которого приведены ниже.

¹Н-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) d 7,30 (с, 5H), 7,08 (м, 1H), 5,95 (м, 3H), 5,25 (м, 6H), 4,72 (д, J 6 Гц, 2H), 4,52 (м, 2H), 3,82 (м, 1H), 2,62 (м, 2H), 1,58 (м, 1H), 1,25 (м, 1H).

ИК (CHCl₃): 3019, 1775, 1727, 1689, 1496, 1241 и 1052 см^-1.

Масс-спектр: m/e 517.

Анализ для C₂₃H₂₄N₃O₆Br:
Вычислено, C 53,29 H 4,67, N 8,11, Br 15,4
Найдено, C 53,51, H 4,46, N 7,93, Br 15,4
B) В 25-мл колбе объединяют 73 мг (0,1408 ммоль) продукта из части (A) в 2,0 мл CH₃CH и 1,0 мл Et₂O, 7,4 мг (0,0282 ммоль) трифенилфосфина и 1,4 мг (0,0056 ммоль) ацетата палладия. Смесь охлаждают до 0^oC через 5 мин и через микрошприц прибавляют 76 мкл раствора Bu₃SnH. Смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают 45 мин. К смеси прибавляют 4 мкл Bu₃SnH и 2 мл Et₂O и перемешивают дополнительно 30 мин. Прибавляют концентрированный раствора HCl (23,5 мкл, 12 М), и в это время наблюдается преципитация. Прибавляют 10 мл Et₂O и смесь переносят в 40-мл центрифужную пробирку. Затем прибавляют 20 мл Et₂O и смесь центирифугируют. Твердое вещество декантируют и промывают (2х10 мл CH₃CN/10 мл Et₂O), затем промывают дважды 15 мл Et₂O. Смесь сушат в вакууме с получением 51,5 мг твердого вещества бурого цвета, которое растворяют в 1,2 мл CH₃CN и 0,13 мл 1 н. раствора HCl, центрифугируют и декантируют в 15-мл центрифужную пробирку, образуя завихрения, прибавляют несколько выше, чем 1 эквивалент, 1,5 М раствора NH₄OH с тем, чтобы установить pH на уровне около 4,0, и в это время осаждается твердое вещество белого цвета, которое затем центрифугируют и декантируют, промывая один раз 8 мл Et₂O и дважды 8 мл 1/1 Et₂O/гексан, после чего сушат с получением 46,5 кг указанного в заголовке продукта. Физические данные этого продукта приведены ниже.

¹H-ЯМР (300 МГц, D₂O) d 7.55 (м, 5H), 5.40 (д, J=12Гц, 1H), 5.20 (с, 1H), 3.85 (м,1H), 2.50 (м, 2H), 1.55 (м, 1H), 1.25 (м, 1H).

ИК(КВ) 3150, 3050, 1770, 1750, 1625, 1550, 145 и 1325 см^-1.

Масс-спектр: m/e 394(M⁺+1).

Пример 49. 7-(((2-Амино-4-тиазолил)-метоксииминоацетил)амино)-3-бромо-1-карба(1-дтиа)-3-цефем-4-карбоновая кислота.

А) В 50-мл колбе объединяют 240 мг (0,5981 ммоль) аллил-7-бутоксиамино-3-бромо-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоксилата в 8 мл EtOH и 114 мг (0,5891 ммоль) моногидрата п-толуолсульфокислоты, после чего смесь разрушают ультразвуком до растворения всех твердых веществ. Смесь концентрируют досуха, прибавляют 8 мл EtOH и смесь вновь концентрируют досуха. Во второй колбе объемом 50 мл объединяют 181 мг (0,5891 ммоль)[2-(трет-бутоксикарбонил)амино-4-тиазолил](метоксиимино)-уксусной кислоты и 105 мг (0,5891 ммоль) хлордиметокситриазина в 4,5 мл CH₂Cl₂ и охлаждают до 0^oC. Во вторую колбу прибавляют N-метилморфолин (NMM) (69 мкл, 0,628 ммоль) и содержимое перемешивают 45 мин. После перемешивания прибавляют другой эквивалент NMM и содержимое первой колбы в CH₂Cl₂ через пипетку. Температуру во второй колбе доводят до комнатной и содержимое перемешивают 2,5 ч. Смесь концентрируют почти досуха, после чего прибавляют 2,5 мл CH₂Cl₂/EtOAc. Затем смесь загружают в колбу хроматографической колонки (50 г, кремнезем) и элюируют с помощью 80/20 CH₂Cl₂/EtOAc. Желательное вещество концентрируют с получением 270 мг указанного в заголовке продукта.

¹H= ЯМР (300 МГц, CDCl₃) d 9,45 (с, 1H), 8.25 (д, J=8 Гц, 1H), 6.98 (с, 1H), 5.95 (м, 1H), 5.68 (м, 1H), 5.35 (м, 2H), 4.75 (м, 1H), 4.0 (м, 1H), 3.95 (с, 3H), 2.80 (м, 2H), 2.10 (м,1H), 1.90 (м, 1H) и 1.52 (с, 9H).

Масс-спектр: m/e 583 (M⁺+1).

Анализ для C₂₂H₂₅N₅O₇SBr:
Вычислено, C 45.29, H 4.32, N 12.00
Найдено, C 45.09, H 4.52, N 11.76
В) Продукт из части (А) выше (270 мг, 0,4623 ммоль) в 3 мл CH₂Cl₂ помещают в 50-мл колбу с 54 мг (0,5085 ммоль) этилгексаноата натрия в 3 мл EtOAs. В колбу помещают 3,1 мг (0,0116 ммоль) трифенилфосфина и 13,4 мг (0,0116 ммоль) тетракистрифенилфосфинпалладия (0) и смесь перемешивают 1,5 ч. Для осаждения твердого тела прибавляют 30 мл Et₂O и смесь перемешивают 20 мин, после чего вливают в 200 мл CH₂Cl₂ и 75 мл 1 н. раствора HCl. Твердое вещество выделяют, сушат в присутствии сульфата натрия, фильтруют и концентрируют досуха с получением 250 мг.

С) В колбу емкостью 50 мл помещают 251 мг (0,4591 ммоль) продукта из части (В) выше и 3 мл CH₂Cl₂ и смесь охлаждают до 0^oC. В колбу прибавляют 0,22 мл (1,36 ммоль) Et₃SiH и 3 мл трифторуксусной кислоты, и смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 35-40 мин. Смесь разбавляют 25 мл CH₃CN и концентрируют до 1 мл. Три раза прибавляют по 10 мл CH₃CN и по 10 мл толуола и смесь концентрируют досуха с получением желтовато-коричневого твердого вещества. Твердое вещество хроматографируют на 75 г (кремнезем) и элюируют с помощью 0,5% AcOH/4,5% изопропанол/20% CH₃CN/75% EtOAc до выхода всего искомого твердого тела. Искомые фракции концентрируют до 1/2 мл и преципицируют с помощью Et₂O. Смесь центрифугируют и сушат с получением 60 мг указанного в заголовке продукта. Твердое тело хроматографируют повторно на 10 г NP20SS, элюируя с помощью 0,25% AcON, 10% CH₃CN, 89,75% воды и собирают фракции по 10 мл.

¹H-ЯМР(300 МГц, D₂O) d 7.08 (с.1H), 5.46 (д, J=12Гц, 1H), 4.10 (м, 1H), 4.05 (с, 3H), 2.78 (м, 2H),05 (м, 1H) и 1.80 (м, 1H).

Масс-спектр: m/e 444 (M⁺+1).

Соединения формулы (I) ингибируют рост некоторых болезнетворных организмов, как продемонстрировано методом разведения в агаре, в котором испытуемые соединения разводят до приемлемого диапазона концентраций в 0,1 М фосфат-забуференном растворе, pH 7.0, вводят в агар Мюллера-Хинтона (Дифко), пополненный 1% Бакто-Сапплементом С (Дифко), при 50^oC и отверждают в чашках Петри. Свежие ночные культуры исследуемых бактерий разбавляют приблизительно до 1 x (10)⁴ клеток/мкл и наносят в объеме 1 мкл на поверхности агаровых пластин. Иннокулированные пластины инкубируют в течение ночи при температуре 35^oC в окружающем воздухе. Конечные значения минимальной ингибирующей концентрации (МИК) регистрируют как наименьшие концентрации антибиотика в микрограммах на миллилитр, которые ингибируют развитие видимого роста на пластинах. Ниже суммированы результаты таких испытаний с использованием соединений приведенных выше примеров. Следующие номера соединений присвоены тем соединениям, которые упоминаются в таблице:
1. 7b-[D-a-(амино)фенилацетиламино]-3- трифторметил-1-карба-(1-детиа)-3-цефем-4- карбоновая кислота
2. [6R, 7S]-7β-[D-a-(амино)-4- гидроксифенилацетиламино]-3-трифторметил-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоновая кислота
3. [6R, 7S]-7-b-[D-a-(амино)-4- фторфенилацетиламино]-3-трифторметил-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоновая кислота
4. [7S, 6R]-7-([2-амино-4- тиазолил(метоксиимино)ацетил]амидо)-3-трифторметил-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоновая кислота
5. [7S, 6R]-7-([2-амино-4- тиазолил(оксиимино)ацетил]амидо)-3-трифторметил-1-карба-(1-Детиа)-3-цефем-4-карбоновая кислота
6. [6R, 7S] -7-b-[D-a-(амино)-3- этилсульфонамидофенилацетиламино]-3-трифторметил-1-карба (1-детиа)-3- цефем-4-карбоновая кислота
7. [6R, 7S]-7-b-[D-a-(амино)-3- бромфенилацетиламино]-3-трифторметил-1-карба (1-детиа)-3-цефем-4-карбоновая кислота
8. [6R, 7S]-7-b-[D-a-(амино)-3- фторфенилацетиламино]-3-трифторметил-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоновая кислота
9. [6R, 7S]-7-b-[-a-(амино-3- трифторметилацетиламино]-3-трифторметил-1-карба(1-детиа)-3-цефем-4-карбоновая кислота.

Производные 3-трифторметил-1-карба-1-детиа-3-цефем-4-карбоновой кислоты и промежуточный продукт для их получения. Сущность изобретения: предлагаются в качестве антибиотиков 7-β-ациламино-1-карба(1-детиа)-3-трифторметил-3-цефем-4-карбоновые кислоты и их производные. Также предлагаются фармацевтические составы, включающие антибиотики, промежуточные соединения и способ их получения. 3 с. и 8 з.п. ф-лы, 1 табл.

1. Производные 3-трифторметил-1-карба-1-детиа-3-цефем-4-карбоновй кислоты общей формулы

где R² водород или карбоксизащитная группа;
R замещенная метильная группа общей формулы
R⁴-CH-Q
где Q NH₂, R⁴ фенил или замещенный фенил общей формулы

где а и а' водород, галоген, гидрокси или С₁ - С₄-алкилсульфониламиногруппа, или R⁴ тиазолил, замещенный аминогруппой;
или R группа общей формулы

где R⁵ тиазолил, замещенный аминогруппой, R⁶ водород или С₁ С₄-алкил, или, когда R² водород,
их фармацевтически приемлемые соли. 2. Производные 7-амино-3-трифтометил-1-карба-1-детиа-3-цефема общей формулы

где R² водород или карбоксизащитная группа,
или их кислые аддитивные соли. 3. Соединение по п.2, отличающееся тем, что R² водород. 4. Соединение по п.2, отличающееся тем, что R² карбоксизащитная группа. 5. Производные 1-карба-1-детиа-3-цефем-4 карбоновой кислоты общей формулы

где R² водород или карбоксизащитная группа;
R^t С₁ С₆-алкил;
W аминозащитная группа. 6. Соединение по п.1 общей формулы

где R⁴ фенил или замещенный фенил общей формулы

где а и а' имеют указанные значения. 7. Соединение по п. 6, отличающееся тем, что R⁴ замещенная фенильная группа общей формулы

где а и а' имеют указанные значения. 8. Соединение по п.7, отличающееся тем, что а водород и а' гидрокси. 9. Соединение по п.7, отличающееся тем, что а и а' водород. 10. Соединение по п.7, отличающееся тем, что а фтор. 11. Соединение по п.1 или 6, проявляющее противомикробную активность.