БИСИМИДАЗОЛ-(1,10)-ФЕНАНТРОЛИНПЛАТИНА (III) ДИХЛОРИД, ПРОЯВЛЯЮЩИЙ ЦИТОСТАТИЧЕСКУЮ ПРОТИВООПУХОЛЕВУЮ АКТИВНОСТЬ Российский патент 1997 года по МПК C07F15/00 

Изобретение относится к биологически- активным координационным соединениям платины (II).

В химиотерапии злокачественных опухолей широко применяется цис-дихлородиамин платина (цис-ДДП), основным недостатком которой является высокая токсичность [1]
В [2] описаны соединения платины с 1-винилимидазолом: бромид тетракио (1-винилимидазол) Pt (II), проявляющим противоопухолевую активность, но обладающим слабой специфичностью.

Задача изобретения получение платинового химиотерапевтического реагента с улучшенным специфическим взаимодействием и сниженной токсичностью.

Таким препаратом является новое химическое соединение: бисимидазол-[1,10]-фенантролинплатина (II) дихлорид общей формулы I

в качестве биокомпонента препарата, обладающего цитостатической противоопухолевой активностью.

Данное соединение содержит во внутренней сфере две молекулы имидазола (Im) в цис-положении и бидентатносвязанную молекулу 1,10-фенантролина (ОР).

Совместное присутствие фенантролинового и имидазольных колец в полученном препарате позволяет использовать тонкие взаимодействия между платиновым соединением и биополимером, в составе которого имеются соответствующие комплементарные группировки.

Данное соединение получают путем смешения дихлоро-(1,10)-фенантролинплатины (II) с имидазолом в соотношении 1:2,5 и длительным нагреванием в водном растворе (Т=80^oC) с интенсивным перемешиванием и последующим центрифугированием. Соединение идентифицировали элементным анализом, ИК-спектроскопией. Полученный препарат был испытан на токсичность, цитостатическую противоопухолевую активность (in vitro и in vivo).

Пример 1. Навеску 0,1 г (PtOPCl₂] и 0,3 г имидазола в соотношении 1:2,5 помещают в стакан с дистиллированной водой. Стакан ставят на подогреваемую до 80^oC магнитную мешалку. Осадок перемешивают более 16 ч при постоянном объеме воды. В течение этого времени консистенция осадка меняется и его цвет светлеет. Суспензию помещают в пробирку для центрифугирования, переносят в центрифугу и высаживют осадок. Водную фракцию сливают, добавляют ацетон, взмучивают осадок и вновь подвергают центрифугированию, из пробирки отбирают светлый слой осадка (≈4/5 всего его объема).

Средство представляет собой осадок светлого цвета, устойчивое на воздухе и сохраняющееся в течение длительного времени без изменения свойств.

Найдено, Cl 12,3; N 13,2.

Для [PtOP (Im)₂Cl₂ вычислено, Cl 11,81; N 13,99.

ИК спектры (см^-1) 1660, 1610, 1530 (νC=C; νC=N); отсутствие полос V_Pt-Cl.

Пример 2. Исследование острой токсичности препарата проведено на 50 мышах линии BALB/c при внутрибрюшинном введении препарата в физиологическом растворе в интервале доз от 46 до 450 мг/кг. Величина LD₅₀ для предлагаемого средства установлена по известному методу Литчфилда и Уилкоксона и составляет 289,7 (333,9-251,4) мг/кг, максимально переносимая доза (МПД) 209,2 мг/кг. Как известно, у цис ДДП LD₅₀ равна 13-14 мг/кг. Таким образом, по величине полулетальной дозы токсичность предлагаемого средства почти в 20 раз меньше, чем у прототипа.

Пример 3. Исследование цитостатической противоопухолевой активности предлагаемого средства проведено на лейкозных клетках линии К-562 и НИТ-102 (2,5•10⁵ мг/мл), культивируемых в среде RPMI-1640 с 10%-ной фетальной сывороткой по включению ³H уридина (0,1-1 мкKu). Радиоактивность определена на сцинтилляционном счетчике Mark III.

Результаты исследований (табл.1) показали, что данное соединение через 24 ч после внесения в культуру клеток в дозе 0,2-0,002 мГ/мЛ оказывает выраженное подавление пролиферации опухолевых клеток (P < 0,001), причем, как видно из табл. 2, цитоингибирующий эффект заявляемого средства существенно превышает таковой у цис ДДП (P <0,001).

Параллельное изучение жизнеспособности опухолевых клеток К-562 и НИТ-102 (подсчет по окраске трипановым синим) позволил установить в дозах 0,2-0,02 мг/мл 100%-ный цитотоксический эффект через 24-48 ч после внесения средства в культуру клеток.

Пример 4. Исследование противоопухолевой активности средства в условиях in vivo проведено на 48 мышах BALB/c с карциномой Эрлиха и мастоцитомой P-815, через 48 ч после перевивки опухолей (10•10⁶ клеток на мышь внутрибрюшинно). Однократное введение средства в максимально переносимой дозе 209 мг/кг сопровождалось увеличением продолжительности жизни животных с карциномой Эрлиха с 16,7±0,67 дней в контроле (8 мышей) до 22,3±1,1 дня (P <0,001) и с 19,7±0,9 дня до 28,4±1,14 дня (P <0,001) соответственно у мышей с опухолью P-815 (в каждой группе не менее 8 животных). Трехкратное курсовое введение средства в течение 10 дней в дозе 70 мг/кг 8 мышам с опухолью Эрлиха сопровождалось еще более значительным увеличением продолжительности жизни до 42,1±2,3 (258% от контроля).

Таким образом, совокупность полученных результатов свидетельствует о выраженной антибластической активности заявляемого средства. При этом токсическое действие выражено в меньшей степени, а цитостатическая антипролиферативная активность выше, чем у известного препарата цис-дихлородиамминплатины (II) (ДДП) (см. чертеж).

Изобретение относится к биологически- активным соединениям платины (II). Задача, решаемая изобретением, - получение платинового химиотерапевтического реагента с улучшенным специфическим взаимодействием и сниженной токсичностью. Таким препаратом является новое химическое соединение: бисимидазол - (1,10)-фенантролинплатина (II) дихлорид общей формулы I, приведенной в тексте описания в качестве биокомпонента препарата, обладающего цитостатической противоопухолевой активностью. 2 табл., 1 ил.

Бисимидазол-(1,10)-фенантролинплатина(II)дихлорида общей формулы

проявляющий цитостатическую противоопухолевую активность.