БИСИМИДАЗОЛ-(1,10)-ФЕНАНТРОЛИН МЕДИ (II) ДИХЛОРИД, ПРОЯВЛЯЮЩИЙ АНТИБАКТЕРИАЛЬНУЮ И АНТИБЛАСТИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ Российский патент 2002 года по МПК C07F1/08 A61K31/4745 A61P35/00 

Изобретение относится к координационным соединениям металлов, проявляющим цитостатическую активность и может быть использовано в медицине и ветеринарии для цели химиотерапии.

В химиотерапии злокачественных опухолей широко используются цитостатические металлопрепараты, в частности цис-дихлордиамин платина (цисплатина, платидиам) (Rosenberg B., Van Camp L. u gp. Pt compounds; a new class of potent antitutov agans nature, 1969, 222 (5191), p. 385-386).

Недостатком указанного препарата является ограниченность его применения, так как он, обладая противоопухолевой активностью, не обеспечивает антимикробный защитный эффект, поскольку опухолевый рост часто осложняется бактериальными и вирусными инфекциями.

Кроме того, этот препарат токсичен и имеет низкую растворимость.

Известно новое координационное соединение платины: бисимидазол-[1,10]-фенантролинплатина (11) дихлорид, проявляющий противоопухолевую активность, патент РФ 2089555, А 61, С 07 F 15/00, от 10.09.1997.

Однако указанное вещество также обладает недостаточной растворимостью и невысокой антибактериальной активностью. Кроме того, цитостатические платиновые препараты дорогостоящие.

Задача заявляемого изобретения - создание противоопухолевого металлопрепарата, обладающего как высокой антибактериальной цитостатической активностью, так и высокой растворимостью.

Поставленная задача решена созданием нового вещества бисимидазол-[1,10] -фенантрилин меди (II) дихлорида общей формулы

Данное соединение содержит во внутренней сфере ион Сu⁺², две молекулы имидазола (Im) и бидентатно-связанную молекулу 1, 10-фенантролина (Phen), во внешней - Cl₂.

Новое вещество [Cu Phen Im²] С1₂ получают путем взаимодействия дихлорида меди (CuCl₂) в спиртовом растворе с 1,10-фенантролином и имидазолом при мольном соотношении 1:1:2.

Полученное соединение идентифицировали элементным анализом, ИК-спектроскопией и трилонометрическим тестированием с пирокатехинфиолетовым, оно было также исследовано на антибактериальную активность, токсичность и противоопухолевый эффект.

Изобретение поясняется следующими примерами.

Пример 1. Способ получения заявляемого вещества. Раствор, содержащий 0,15 г имидазола (Im) и 0,132 г 1,10-фенантролина (Phen) в 2 мл этанола внесли в раствор 0,125 г CuCl₂ в 2 мл спирта.

После тщательного перемешивания выделился мелкий синий осадок.

Трилонометрическим тестированием с пирокатехинфиолетовым (концентрация тритона Б устанавливалась по стандартному раствору меди (II) в присутствии лигандов) в составе осадка найдено 13,9% меди.

Результаты элементного анализа, мас.%: найдено N 16,52, Cl 14,1; С 42,2; Н 3,6; вычислено N 15,57; Cl 13,2; С 40,03; Н 2,97.

ИК спектры (см^-1) - 430 см^-1 валентные колебания Cu-N связей.

Растворимость в воде заявляемого препарата составляет 25 мг/мл против 2 мг/мл у цисдихлордиаминплатины и 1,5 мг/мл у бисимидазол [1,10]-фенантролинплатина (II) дихлорида.

Пример 2. Антибактериальная активность препарата определялась методом серийных разведений препарата в бактериальных культурах. Результаты опытов учитывались через 24 часа инкубации (табл.1).

Из табл. 1 следует, что заявляемый препарат оказывает выраженное антибактериальное действие, вызывая 100% подавление роста бактерий во всех изученных концентрациях.

Пример 3. Исследование острой токсичности препарата проведено на 35 мышах линии BALB/c при внутрибрюшинном введении средства в физиологическом растворе.

Величина LD₅₀ для заявляемого средства установлена методом пробит-анализа и составляет 19 мг/кг, в то время как у известного препарата цисплатины KD₅₀ равна 13,5 мг/кг. Таким образом, по величине полулетальной дозы токсичность заявляемого препарата в полтора раза меньше, чем у химиопрепарата цисплатины.

Пример 4. Исследование антибластической активности заявляемого препарата проведено [in vitro и in vivo] на лейкозных клетках линии HUT-102 и К-562 (2,5•10⁵/мл), культивируемых в среде RPMI-1640 по включению ³H-тимидина и по окраске трипановым синим. Подсчет разноактивности осуществлен на сцинтилляционном счетчике Mark-III.

Результаты опытов показали, что данное средство через 24 часа после внесения в культуру опухолевых клеток оказывает выраженный дозозависимый цитоингибирующий эффект (p<0,001), подавляя полифирапию опухолевых клеток и вызывая их гибель (см. табл. 2).

Исследование противоопухолевой активности препарата в условиях курсового внутрибрюшного введения in vivo проведено на 90 мышах BALB/c с карциномой Эрлиха и мастоцитомой Р-815 через 48 часов после перевивки опухолевых штаммов (7•10⁶ клеток на мышь внутрибрюшинно).

Четырехкратное введение препарата в течение 10 дней в дозе 5 мг/кг сопровождалось статистически достоверным увеличением продолжительности жизни животных с карциномой Эрлиха с (22,3+0,4) дней в контроле (30 нелеченных мышей) до (49,4+0,6) дня (p<0,001), соответственно у мышей с опухолью Р-185 (в каждой группе по 20 животных) с 19,2+0,3 дней до 47,7+0,5 дней (245% от контроля).

Полученный объем информации свидетельствует о выраженной антибактериальной и противоопухолевой активности нового вещества и его высокой растворимости.

Источники информации
1. Rosenberp В., Van Camp L. и др. Pt compounds; a new class of potent antitutov agans nature, 1969, 222 (5191), p. 385-386.

2. Патент РФ 2089555, А 61, С 07 F 15/00, 10.09.1997.

Описывается новое соединение бисимидазол-(1,10)-фенантролин меди (II) дихлорид формулы (1). Новое соединение проявляет антибактериальное и антибластическое действие. Также описан способ получения заявленного соединения. 2 с.п. ф-лы, 2 табл.

1. Бисимидазол-(1,10)-фенантролин меди (II) дихлорид формулы

проявляющий антибактериальную и антибластическую активность. 2. Способ получения бисимидазол-(1,10)-фенантролин меди (II) дихлорида путем взаимодействия дихлорида меди в спиртовом растворе с 1,10-фенантролином и имидазолом при мольном соотношении компонентов 1:1:2.