СПОСОБ ОЦЕНКИ ЭФФЕКТИВНОСТИ ЗАМЕЩЕНИЯ КОСТНОГО МАТРИКСА ПРИ ТРАНСПЛАНТАЦИИ В ХОДЕ ОПЕРАТИВНОГО ЛЕЧЕНИЯ КОСТНОЙ ОПУХОЛИ Российский патент 1998 года по МПК G01N33/68 

Изобретение относится к медицине, а именно к ортопедии.

В медицинской практике результаты трансплантации при оперативном лечении доброкачественных костных опухолей определяют при помощи рентгенографии. Сущность способа заключается в том, что в определенные сроки осуществляют динамический контроль и по кальциевым включениям судят об эффективности замещения дефектов костной ткани трансплантантом (Марин И.М. Хирургическое лечение доброкачественных опухолей костей. Кишинев, 1981).

Однако при помощи этого способа делать вывод о результатах трансплантации можно не раньше, чем через 6 месяцев после операции. Помимо того способ создает повышенную лучевую нагрузку, которая угнетает иммунные свойства организма.

Решений, близких к изобретению, не выявлено.

Целью изобретения является раннее и точное тестирование уровня биосинтетической активности неоостеогенеза и резорбции трансплантата.

Цель достигается тем, что при осуществлении способа прогнозирования результатов трансплантации костного матрикса при оперативном лечении доброкачественных костных опухолей на протяжении 3-4 месяцев определяют содержание в суточной моче гидроксипролинаметаболического индикатора коллагенового обмена, и при наличии в показаниях двух пиков гидроксипролинурии, после второго из которых наблюдают постепенную нормализацию показателя, диагностируют эффективное замещение трансплантата.

Способ осуществляют следующим образом.

На 14-21-е, 30-е, 60-е, 120-е сутки после трансплантации костного матрикса определяют количество гидроксипролина в суточной моче больного по методике R.Veutz, W.Beng, W.Baufeld, V.Veutz.

В ампуле смешивают 1 мл мочи и 3 мл 6 н раствора соляной кислоты, запаивают ампулу, 3 ч гидролизуют в сушильном шкафу при температуре 120^oC. Содержимое ампулы переносят в центрифужную пробирку, на кончике ножа добавляют смесь для осаждения гуминов, встряхивают, отстаивают 15 мин, центрифугируют при 2000 об/мин, 1 мл центрифугата переносят в фарфоровую чашку, выпаривают на водяной бане. Нейтрализуют 1 мл воды, выпаривают. Процедуру повторяют 2 раза. Сухой остаток растворяют в 2,5 мл воды и разливают в 3 пробирки: 1-я проба, 2-я контроль, 3-я стандарт по 0,5 мл гидролизата в каждую. В 1-ю и 2-ю пробирки добавляют по 1 мл изопропилового спирта, в 3-ю пробирку примешивают по 0,5 мл хлорамина "Т". Пробирки выдерживают при комнатной температуре 4 мин. Добавляют в каждую по 1 мл деметиламинобензальдегида (ДАБА), во 2-ю по 0,5 мл хлорамина "Т". Хорошо встряхивают, на 20 мин помещают в термостат при 60^oC, затем охлаждают во льду, 20 мин выдерживают при комнатной температуре, фиксируют в ФЭК зеленый фильтр, кувета 5,0.

Расчет проводят по формуле:

где

При благоприятных результатах трансплантации отмечают 2 пика увеличения экскреции гидроксипролина. Первый пик, в основном обусловленный наибольшей активностью резорбтивных процессов аллогенного костного матрикса, наблюдают на 14-21-е (при остеобластокластоме, остеоидной остеоме и энхондроме) или на 30-е (фиброзная дисплазия) сутки. Второй пик, усиленный биосинтезом коллагена в новообразованной костной ткани, отмечают на 60-е (при энхондроме) или 90-е (фиброзная дисплансия, остеобластокластома, остеодная остеома) сутки. После второго пика наблюдают постепенную стабильную нормализацию данных биохимического контроля.

При ожидаемых рецидивах кривая показания гидроксипролинурии сглажена, нормализации данных не наблюдают.

Пример 1. Больной М. 16 лет, диагноз остеобластокластома проксимального отдела правой бедренной кости, 19.07.88 г. произведена операция резекция опухоли и трансплонтация в костный дефект костного матрикса.

5.07.88 г. (до операции), 10.08.88, 23.08.88, 18.09.88, 12.10.88, 15.11.88, 18.01.89 определяли содержание гидроксипролина в суточной моче больного. Показания следующие:
5.07.88 58,8 мг/24 ч
10.08.88 178,0 мг/24 ч
23.08.88 67,8 мг/24 ч
18.09.88 79,7 мг/24 ч
12.10.88 205,6 мг/24 ч
15.11.88 85,3 мг/24 ч
18.01.89 57,4 мг/24 ч,
т. е. на 21-е и 90-е сутки наблюдали пики гидроксипролинурии, после второго пика нормализацию данных биохимического контроля. Диагностировали удовлетворительное замещение трансплантата, что в дальнейшем подтвердилось рентгенографическими данными.

Пример 2. Больной Р. диагноз остеобластокластома IV метакарпальной кости левой кисти. Операция произведена 29.07.86 г. Результаты проведенных анализов определение гидроксипролина в суточной моче следующие, мг/24 ч:
25.07.86 (до операции) 53,8
20.08.86 (21-е сутки) 99,9
28.08.86 (30-е сутки) 92,8
29.09.86 (60-е сутки) 85,5
21.10.86 (90-е сутки) 94,9
25.11.86 (120-е сутки) 85,7.

Кривая показаний гидроксипролина сглажена, нормализация гидроксипролинурии не наблюдается. Через 1 год 8 месяцев у больного был выявлен рецидив заболевания, произведена вторая операция.

Пример 3. Больная К. 54 лет, диагноз: эндрохома основной фаланги IV пальца левой кисти. 01.07.86 произведена операция: пристеночная резекция с замещением полости губчатым костным матриксом. Результаты анализов, мг/24 ч:
17.06.86 (до операции) 71,3
15.07.86 (14-е сутки) 66,0
25.07.86 (30-е сутки) 64,0
29.08.86 (60-е сутки) 62,0
29.09.86 (90-е сутки) 66,0
9.10.86 (120-е сутки) 68,6
25.11.86 (150-е сутки) 70,4
Через 1,5 года выявлен рецидив. Произведена повторная операция.

Способ применен на 53 больных, лечившихся в Ереванском НИИ травматологии и ортопедии: 51 благоприятные результаты, 2 рецидива). Результаты исследований представлены в таблице.

Описываемый способ обеспечивает раннее в сравнении с рентгенографией прогнозирование рецидива заболевания при оперативном лечении доброкачественных костных опухолей с трансплантацией в дефект костного матрикса, что позволяет своевременно повторно оперировать больного.

Способ безвреден, что дает возможность частого динамического контроля, точен, дает качественную и количественную характеристику биосинтеза коллагена, т.е. процесса неоостеогенеза и резорбции имплантированного костного матрикса, достаточно полно представляет динамику замещения трансплантата.

Использование: в медицине, ортопедии, для оценки эффективности замещения костного матрикса при трансплантации в ходе оперативного лечения доброкачественной костной опухоли. Сущность изобретения: в пробах суточной мочи пациента через установленные промежутки времени в течение 4 месяцев после трансплантации определяют содержание гидроксипролина и при наличии в полученных данных двух пиков увеличения указанного показателя, после второго из которых наблюдают постепенную нормализацию показателя до значения нормы, оценивают замещение костного матрикса как эффективное. Способ безвреден, точен, позволяет получить качественную и количественную характеристику процесса неоостеогенеза и резорбции имплантированного костного матрикса. 1 табл.

Способ оценки эффективности замещения костного матрикса при трансплантации в ходе оперативного лечения доброкачественной костной опухоли, отличающийся тем, что в пробах суточной мочи пациента через установленные промежутки времени в течение 4 месяцев после трансплантации определяют содержание гидроксипролина и при наличии в полученных данных двух пиков увеличения указанного показателя, после второго из которых наблюдают постепенную нормализацию показателя до значения нормы, оценивают замещение костного матрикса как эффективное.