СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ САХАРНОГО ДИАБЕТА Российский патент 2004 года по МПК A61K35/39 A61P3/10 

Изобретение относится к области хирургии и терапии и может быть использовано при лечении сахарного диабета.

Известен способ лечения сахарного диабета, предусматривающий трансплантацию β-клеток поджелудочной железы млекопитающих (новорожденных поросят, кроликов и т.д.) в капсулу, образованную предварительным подкожным введением полиакриламидного геля, при этом культивирование клеток проводят с использованием стандартных сред и растворов (см. МПК А 61 К 35/39, патент Российской Федерации №2165263, опубл. 20.04.2001 г.).

Существенным недостатком способа является невысокая эффективность лечения, обусловленная необходимостью продолжения лечения пероральными антидиабетическими препаратами.

Наиболее близким к заявляемому способу лечения сахарного диабета является способ, предусматривающий имплантацию культуры клеток доброкачественной инсуломы человека в прямую мышцу живота в виде взвеси на физрастворе, при этом количество имплантируемых клеток определяют по соотношению N=Q:q, где

N - количество имплантируемых клеток, тыс.;

Q - суточная потребность пациента в инсулине, ед.

Q - суточная производительность инсулина 1 тыс. клеток ед., а при культивировании клеток измеряют их количество и содержание инсулина в культурной среде через заданные промежутки времени и по уровню этих величин определяют производительность инсулина данной культуры клеток, причем по данной величине определяют количество клеток культуры, необходимое для приготовления имплантанта (см. МПК А 61 К 35/39, патент Российской Федерации №2004247, опубл. 15.12.93 г.) - ближайший аналог.

Существенными недостатками известного способа лечения сахарного диабета являются:

- кратковременность продуцирования клетками донора инсулина в организме реципиента из-за эффекта отторжения гетерогенных клеток, в результате чего необходима значительная имунносупрессивная терапия и повторение операции трансплантации;

- снижение синтеза инсулина клетками трасплантата вследствие бласттрансформации клеток донора, приводящее к введению экзогенного инсулина;

- сложность точного контроля производительности инсулина конкретной фракцией культуры клеток.

Техническим результатом предлагаемого способа является повышение эффективности лечения за счет исключения повторных операций и проведения имунносупрессивной терапии.

Сущность технического решения заключается в том, что в способе лечения сахарного диабета, предусматривающем имплантацию клеток доброкачественной инсулиномы человека, ее стандартизацию по дебету синтезируемого инсулина согласно изобретению имплантацию клеток доброкачественной инсулиномы человека осуществляют в ткань поджелудочной железы в ее хвостовую часть, при этом до трансплантации ткань инсулиномы подвергают гистологическому исследованию.

Известно, что эндокринные клетки, вырабатывающие инсулин, располагаются в хвостовой части поджелудочной железы. Проведение имплантации клеток доброкачественной инсулиномы человека в ткань поджелудочной железы в ее хвостовую часть позволит исключить повторные операции трансплантации за счет увеличения времени продуцирования клетками донора инсулина в организм реципиента, исключения отторжения гетерогенных клеток, повысить синтез инсулина клетками трансплантата за счет исключения бласттрансформации клеток, что в совокупности повышает эффективность лечебного процесса.

Введение процедуры гистологического исследования ткани инсулиномы позволяет исключить возможность ошибки трансплантации клеток опухоли иной морфологической структуры и обеспечить иммуную резистентность трансплантируемых клеток.

Способ осуществляют следующим образом. У больного инсулиномой человека производят энуклеацию опухоли. Полученную ткань опухоли исследуют на предмет ее морфологического соответствия ткани инсулиномы. После морфологического подтверждения наличия ткани инсулиномы, удаляется соединительно-тканная капсула и ткань инсулиномы гомогенезируется механическим способом в стерильных условиях. Полученный в стерильных условиях гомогенат инкубируется в термостате при Т=37°С в течение двух часов в гидролизате лактальбумина с добавлением 5% фетальной сыворотки. После инкубации гомогенат охлаждается до Т=4°С, помещается в раствор Эрла с добавлением антибиотиков на 1,5-2,0 ч, промывается до полной прозрачности надосадочной жидкости и нормализации рН среды.

Центробежным методом, из подготовленного таким образом гомогената выделяют чистую суспензию клеток инсулиномы, которую помещают в защитную питательную среду RPM - 1640 с добавлением 20%-ной фетальной сыворотки и консервируют при Т=4°С и гидростатическом давлении 400-500 атм.

Перед имплантацией суспензия клеток инсулиномы очищается от консервационной среды многократной промывкой в солевом растворе и помещают в стерильный физиологический раствор с добавлением 5%-ного раствора глюкозы, температуру при этом повышают до 20-37°С, а гидростатическое давление снижают до 760 мм рт. ст.

Полученную культуру клеток инсулиномы стандартизуют по дебету синтезируемого инсулина по 10 ед. в сутки и имплантируют в ткань хвостовой части поджелудочной железы больного сахарным диабетом.

Имплантацию осуществляют пневмоперитонеальным методом через брюшную стенку с применением фиброволоконной оптики и эндоскопического инструмента.

Пример 1. Больная Л. наблюдается 8 лет с диагнозом: инсулинома доброкачественная гормонально активная. 12.05.99 г. оперативным путем проведена энуклеация опухоли. Полученная опухолевая ткань морфологически соответствует ткани доброкачественной инсулиномы. Ткань опухоли обработана по предлагаемой методике. Полученная суспензия клеток инсулиномы тестирована на гормональную активность перед непосредственной трансплантацией реципиенту 06.04.2000 г.

Больная К. 33 года. Сахарный диабет I типа, диабетическая ангиопатия сосудов нижних конечностей. Суточная потребность в экзогенном инсулине 41 ед., уровень гликемии натощак 15-17 моль/л. 06.04.2000 г. проведена аллотрансплантация клеток инсулиномы в хвостовую часть поджелудочной железы пункционным способом в количестве 5 мл суспензии и гормональной активностью 40 ед. синтезируемого инсулина с использованием фиброволоконной оптики и эндоскопического инструмента пневмоперитонеальным доступом через переднюю брюшную стенку. На 4-е сутки после трансплантации гликемия натощак 3,5-3,8 ммоль/л на фоне базисного введения экзогенного инсулина в дозе 20 ед. и болюсного введения хумалога, инсулина ультракороткого действия. На 12-е сутки базисное введение экзогенного инсулина, гликемия натощак 4,8 ммоль/л, болюсное введение хумалога продолжено. На 16-е сутки больная переведена на амбулаторное наблюдение на фоне улучшения общего состояния. Гликемия натощак 6,7 ммоль/л, рекомендовано продолжение введения инсулина ультракороткого действия. Больная наблюдалась в течение 12 месяцев. Уровень гликемии натощак не превышал верхней границы нормы. Больная использует болюсный метод введения хумалога, при нарушениях диеты не более 2-3 раза в месяц.

Пример 2. Больной М., 47 лет, диагноз: сахарный диабет I типа, инсулинозависимый, диабетическая ангиопатия, нефропатия, гипертония артериальная. Суточная потребность в экзогенном инсулине 60 ед. в сутки. Гликемия натощак 14-16 ммоль/л. Состояние субкомпенсации, артериальное давление 180/90 мм рт. ст. 14.04.2000 г. под общим наркозом проведена аллотрансплантация культуры клеток инсулиномы в хвостовую часть поджелудочной железы пункционным способом в количестве 7 мл суспензии с гормональной активностью 60 ед. экзогенного инсулина пневмоперитонеальным доступом через переднюю брюшную стенку с использованием фиброволоконной оптики и применения эндоскопического инструмента фирмы OLIMPUS. На 3-и сутки уровень гликемии натощак резко снизился до 2,7 ммоль/л. У больной отмечалось гипогликемическое состояние. Базисное введение экзогенного инсулина прекращено на фоне болюсного введения инсулина ультракороткого действия на 12-е сутки после трансплантации. На фоне улучшения общего состояния снижение уровня, протенурии, уменьшение артериального давления до 140/80 мм рт. ст., больной переведен на амбулаторное наблюдение и в течение 12 месяцев он наблюдался эндокринологом. Уровень гликемии натощак в пределах верхней границы нормы. Болюсного введения инсулина ультракороткого действия больному не проводилось.

Субъективные и объективные симптомы вышеуказанных пациентов, данные исследования крови, мочи, общее состояние позволяют сделать вывод о высокой эффективности предлагаемого способа лечения вплоть до полного излечения больных, страдающих недостатком экзогенного инсулина.

В отличие от известных способов, заявляемое техническое решение позволяет также исключить возможность малигнизации клеток трансплантата и других побочных эффектов.

Изобретение относится к медицине, в частности к эндокринологии, и касается лечения сахарного диабета. Для этого имплантируют клетки доброкачественной инсулиномы человека в ткань хвостовой части поджелудочной железы больного сахарным диабетом. До имплантации проводят стандартизацию культуры клеток по дебету синтезируемого инсулина. Способ обеспечивает снижение суточной дозы используемого экзогенного инсулина при достижении нормальных показателей гликемии у больных.

Способ лечения сахарного диабета, предусматривающий имплантацию клеток доброкачественной инсулиномы человека, ее стандартизацию по дебету синтезируемого инсулина, отличающийся тем, что имплантацию клеток инсулиномы осуществляют в хвостовую часть ткани поджелудочной железы.