СПОСОБ В.М.ЕВСТРОПОВА ИММУНОДИАГНОСТИКИ ДОКЛИНИЧЕСКОЙ СТАДИИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ОПУХОЛЕЙ Российский патент 1998 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к биологии и медицине, точнее к исследованию биологических материалов человека и животных иммунологическими методами.

Известен способ формирования группы риска с заболеванием рака пищевода (Довгалюк А.З, Столяров В.И., Семилуцкая И.Б. - авт. свид. N 1805392, 1993). Недостатками данного способа являются: узкий диагностический диапазон (только рак пищевода), низкая чувствительность теста (32% при раке пищевода против 12,3% у здоровых лиц), дороговизна теста (необходимо наличие антисывороток).

Цель изобретения: повышение эффективности и экономичности способа доклинической диагностики рака.

Поставленная цель достигается следующим образом:
Из крови общепринятым методом (Д.В.Стефани, Ю.Е.Вельтищев, Клиническая иммунология детского возраста. М.: Медицина, 1977, с.257) получают лимфоциты и гранулоциты. Эти клетки в пропорции между собой от 0,1 до 10 или от 10 до 0,1 инкубируют в среде 199 в течение от 1-2 мин до 3-х ч. Клеточную суспензию, помещенную на предметное или покровное стекло фиксируют общеизвестным способом (Никитин В. М. , Справочник методов иммунологии. Кишинев Штинца, 1992. с.с. 114,129) и окрашивают по Романовскому-Гимза.

Под микроскопом регистрируют процент лимфоцитов, присоединивших к своей поверхности гранулоциты. При снижении данного показателя более, чем на 53% от такового практически здоровых лиц, обследование повторяют с интервалом от 4 до 18 недель. В случае получения аналогичного результата при повторном обследовании делают заключение о наличии доклинической стадии рака.

Пример 1. У пациента А число лимфоцитов, взаимодействующих с аутогранулоцитами снижено (по сравнению со здоровыми лицами) при первом обследовании на 63%, при повторном - на 67%. Тщательное инструментальное и гистологическое обследование показало наличие рака желудка in situ.

Пример 2. У пациента Б число лимфоцитов, взаимодействующих с аутогранулоцитами, по сравнению со здоровыми лицами, снижено, при первом обследовании, на 59%, при повторном - на 24. Инструментальное и гистологическое обследование показало наличие эрозии шейки матки. Результат - у пациента Б отсутствует доклиническая стадия рака.

При помощи предлагаемого способа было обследовано 55 больных раком различных стадий заболевания. У 16 пациентов диагностирован рак молочной железы, у 15 - рак матки, у 13 - рак различных отделов желудочно-кишечного тракта (желудка или кишечника). У 11 обследуемых пациентов был поставлен диагноз: рак in situ (нулевая, доклиническая стадия рака) желудка, шейки матки.

Примечание: n - число обследуемых в группе.

Следовательно, снижение взаимодействия лимфоцитов с аутогранулоцитами (в предлагаемом способе) на доклинической стадии рака в 6,9 раз превышает таковое у здоровых лиц, что свидетельствует о высокой специфичности метода. Двукратное обследование (с интервалом в 4-18 недель) снизило число положительных результатов у здоровых лиц до 5, а процент положительных результатов - до 5,8%.

Превышение процента положительных результатов по предлагаемому способу превысило при этом процент положительных результатов у здоровых лиц в 15,5 раз. Метод, используемый в качестве прототипа, давал положительный результат при раке в 32% и у здоровых лиц - в 12,37; превышение процента положительных результатов при раке, по сравнению с контрольной группой, составлено всего 2,5 раза.

Таким образом, предлагаемый способ обладает высокой чувствительностью и специфичностью и может быть использован для доклинической диагностики рака различных локализаций.

Использование: в биологии и медицине, а также для исследования биологических материалов человека и животных иммунологическими методами. Лимфоциты обследуемого инкубируют двукратно с интервалом 4 - 18 недель с аутологичными гранулоцитами в пропорциях 0,1 : 10 - 10 : 0,1 и при последующей двукратной регистрации снижения количества контактно взаимодействующих клеток на 53% и более от показателя здоровых лиц ставят диагноз рака. Способ обладает высокий чувствительностью и специфичностью. Повышается эффективность и экономичность метода иммунодоклинической стадии рака. 1 табл.

Способ иммунодиагностики доклинической стадии рака, включающий исследование лимфоцитов, отличающийся тем, что лимфоциты инкубируют двукратно (с интервалом 4 - 18 недель) с аутологичным гранулоцитами (в пропорциях 0,1 : 10 - 10 : 0,1) и при последующей двукратной регистрации снижения количества контактно взаимодействующих клеток на 53% и более от показателя здоровых лиц ставят диагноз рака.