СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ХОЛАНГИТА Российский патент 1998 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для диагностики холангитов и динамического наблюдения за эффективностью проводимой терапии.

Известны способы диагностики холангита, заключающиеся в визуальном контроле желчи, желчных протоков при холангиоскопии (Петровский Б.В., с соавт. Реконструктивная хирургия при поражениях внепеченочных желчных протоков.- М. : Медицина, 1980, с. 76-89) и бактериологическом исследовании желчи (Нидерле Б. , с соавт. Хирургия желчных путей, Прага, Авиценнум, 1982, с. 250-251). Данные способы диагностики неточны и отличаются большой длительностью.

Более совершенными являются способы диагностики холангита путем биохимического исследования желчи, особенно определение активности ферментов. Существует метод оценки воспаления желчевыводящих путей по увеличению активности щелочной фосфатазы в желчи, полученной при дуоденальном зондировании (Цудик А.З., Асадов Н.К., Асцатурова Г.Н., Вопр. мед. химии, 1986, том 32, N 4, с. 24-27). Однако данный метод не может быть применен для диагностики воспаления в билиарной системе в послеоперационном периоде, так как активность щелочной фосфатазы в желчи при ее свободном оттоке значительно колеблется в ближайшем послеоперационном периоде (Вавилова Т.П., дисс. канд. мед. наук.- М.: 1975, 20 с.)
Изобретение направлено на решение задачи: повышение точности способа.

Поставленная задача достигается тем, что исследуют активность другого фермента, а именно каталазы в желчи (полученной интраоперационно или собранной из дренажа в послеоперационный период) и при активности фермента более 3,5 мкмоль/мл мин диагностируют холангит. В отличие от щелочной фосфатазы активность каталазы в желчи здоровых людей практически отсутствует и появляется только при воспалении в билиарной системе.

Способ осуществляют следующим образом.

Проводят фотометрическое определение активности каталазы в желчи, оттекающей по дренажу, по методике (Королюк М.А., с соавт., 1988) в модификации для желчи (Соснин Д.Ю., Терехина Н.А., Хлебников В.В., 1994).

Принцип методики определения активности каталазы представлен в таблице.

Расчет активности каталазы проводят по следующей формуле:
A=(E_контр.-E_опыт.)•146,04/(t•V), мкмоль/мин мл,
где
A - активность каталазы, мкмоль/мл мин;
E_контр.- оптическая плотность контрольной пробы;
Е_опыт. - оптическая плотность опытной пробы;
t - время инкубации, в мин;
V - объем вносимой пробы;
146,04 - коэффициент пересчета активности каталазы в мкмоль.

При слишком высокой активности фермента следует развести исследуемую желчь в 10 или более раз.

Халангит диагностируют при активности каталазы желчи более 3,5 ммоль/мин мл.

Пример 1. Больной М., 64 г., история болезни N 11824.

Госпитализирован в экстренном порядке через 2 сут. после появления болей в животе. При поступлении состояние средней тяжести, субиктеричность склер, температура тела нормальная.

Несколько возбужден, пальпировался увеличенный желчный пузырь.

После введения спазмолитиков пузырь не сократился. Через 4 ч. от поступления выполнена лапароскопия брюшной полости, дренирование круглой связки печени. Желчный пузырь катарально изменен, при инструментальной пальпации сократился. В течение 24 ч. проводилась инфузионная терапия. Нарастали явления интоксикационного психоза, появилась перитонеальная симптоматика, в связи с чем больной был оперирован. Во время лапаротомии был обнаружен гангренозный желчный пузырь. Выполнена холецистэктомия. При наружном дренировании из холедоха поступает мутная с хлопьями желчь без запаха. Холедох 0,8 см, мягкий.

При выполнении интраоперационной холангиографии контраст поступает в двенадцатиперстную кишку. Бактериологическое исследование протоковой желчи: выделены E. coli и B. fragilis (100 млрд. КОЕ/мл), активность каталазы составила 104,4 мкмоль/мл-мин. В послеоперационном периоде находился на лечении в отделении реанимации, где проводилась искусственная вентиляция легких. Центральная гемодинамика поддерживалась внутривенным введением симпатомиметиков. На фоне нарастающей полиорганной недостаточности наступила смерть больного. Патологоанатомический диагноз: желчно-каменная болезнь, гангренозный калькулезный холецистит, гнойный холангит, холангиолит с множественными холагиогенными абсцессами печени, желтуха кожных покровов и внутренних органов, септическая гиперплазия селезенки.

Пример 2. Больная С., 68 лет, история болезни N 12143.

Госпитализирована в плановом порядке с диагнозом желчнокаменная болезнь, хронический калькулезный холецистит, сахарный диабет II типа. Выполнена холецистэктомия, дренирование холедоха и подпеченочного пространства. На операции: желчный пузырь, 6х4х3 см, заполнен камнями; холедох 7 мм, мягкий; буж N 3 свободно проходит в двенадцатиперстную кишку. Наружное дренирование холедоха и подпеченочного пространства. При бактериологическом исследовании из камня выделена E. coli, в желчном пузыре желчи нет, протоковая желчь стерильна, активность каталазы - 2,02 мкмоль/мл мин. При гистологическом исследовании желчного пузыря выявлены признаки хронического холецистита, при исследовании биоптата печени, взятого интраоперационно, обнаружен перидуктулярный фиброз с белково-зернистой дистрофией гепатоцитов. При динамическом наблюдении в послеоперационном периоде на 6 сут. отмечено появление тошноты, чувства тяжести в правом подреберье, температура тела увеличилась до 37,6^oC, лейкоцитоз 10400 /мкл, СОЭ 66 мм/ч., уровень глюкозы 18,4 ммоль/л, холангиостома функционирует, суточный холерез 200-400 мл макроскопически неизменной желчи. При исследовании активность каталазы - 10,4 мкмоль/ мл мин. Проведен забор желчи для бактериологического исследования, выявлен рост St. epidermidis. Поставлен диагноз послеоперационного холангита.

Проведена антибактериальная терапия, эндохоледохеальная лазерная терапия. Состояние больной улучшилось. На 10 сут. после операции температура тела нормальная, лейкоцитоз 6000/мкл, COЭ 30 мм/ч., общий билирубин 10,5 мкмоль/л, связанный - 0 мкмоль/л, свободный 10,5 мкмоль/л. Активность каталазы в желчи 0,94 мкмоль/мл мин. При бактериологическом исследовании роста не выявлено. Холедохостома удалена на 12 сут. после операции.

Пример 3. Больная Ц., 74 г., история болезни N 11559.

Госпитализирована в экстренном порядке через 8 сут. от появления болей в правом подреберье, температура тела 38,0^oC. При поступлении состояние средней тяжести, температура 37,2^oC, лейкоцитоз 9000/мкл, общий билирубин 27,9 мкмоль/л, связанный 20,0 мкмоль/л, свободный 7,9 мкмоль/л. Проводилась инфузионная дезинтоксикационная терапия. При ультразвуковом исследовании органов брюшной полости обнаружены конкременты в желчном пузыре. Во время операции желчный пузырь не изменен, в просвете камни, холедох 10 мм, мягкий. Протоковая желчь макроскопически не изменена; буж N 3 в двенадцатиперстную кишку не проходит.

Выполнена холецистэктомия, трансдуоденальная папиллосфинктеропластика, наружное дренирование холедоха. При гистологическом исследовании препаратов выявлены признаки хронического холецистита; в печени: белково-зернистая дистрофия гепатоцитов, перидуктулярный фиброз, пролиферация дуктул - склерозирующий холангиолит. Диагноз желчнокаменная болезнь, хронический калькулезный холецистит, рубцовый стеноз большого дуоденального соска III степени. При интраоперационном бактериологическом исследовании желчи выявлен рост St. aureus 100 тыс КОЕ/мл, активность каталазы составила 24,8 мкмоль/мл мин. В послеоперационном периоде проводилась антибиотикотерапия, эндохоледохеальная лазеротерапия. На 6 сут. после операции активность каталазы снизилась до 1,96 мкмоль/мл мин, при бактериологическом исследовании роста невыявлено. Послеоперационное течение гладкое. Дренаж холедоха удален на 10 сут.

Пример 4. Больная К., 48 лет, N истории болезни 10064.

Госпитализирована в экстренном порядке с жалобами на боли в правом подреберье, тошноту, желтушность кожных покровов, кожный зуд. Больна около 2 недель. Состояние средней тяжести. Кожные покровы желтушные, печень +1,0 см, желчный пузырь не увеличен. В биохимическом анализе крови общий билирубин 112,6 мкмоль/л, связанный билирубин 90,2 мкмоль/л, свободный билирубин 22,4 мкмоль/л, активность АлАТ 2,96 ммоль/л ч., активность АсАТ 1,1 ммоль/л ч. При УЗИ-исследовании - признаки холедохолитиаза. Больная оперирована через неделю после поступления.

На операции: желчный пузырь спавшийся, серозная оболочка не изменена, конкременты не определяются. Холедох 8 мм, мягкий. Печень увеличена, край закруглен. Проведена пункционная холецистохолангиография, признаков холедохолитиаза не выявлено. Выполнена краевая биопсия печени, десимпатизация печеночной артерии. В желчи, полученной во время операции, роста микроорганизмов не выявлено. Активность каталазы 0,67 мкмоль/мл мин.

Гистологическое заключение при исследовании биоптата печени: хронический активный гепатит с умеренной степенью активности. В послеоперационном периоде осложнений не наблюдалось. Больная выписана на 10 сут.

Данное наблюдение свидетельствует о том, что источником каталазы в желчи является преимущественно эпителий желчных ходов, а не гепатоциты. Это свидетельствует о специфичности метода, что предоставляет возможность диагностировать холангит и проводить дифференциальную диагностику желтух.

Способ диагностики холангита заключается в том, что исследуют активность катализы в желчи, полученной интраоперационно или собранной из дренажа в послеоперационный период, и при активности фермента более 3,5 мкмоль/мл • мин диагностируют холангит. 1 табл.

Способ диагностики холангита путем биохимического исследования желчи, отличающийся тем, что исследуют активность каталазы желчи и при активности фермента более 3,5 мкмоль/м мин диагностируют холангит.