Изобретение относится к медицинской вирусологии и может быть использовано в здравоохранении для профилактики эпидемического гриппа среди детей 3 - 14 лет живой интраназальной гриппозной вакциной из штамма A/47/Иоганесбург/94/1 (H3N2). Штамм вируса гриппа A (H3N2) (патент СССР N 1838404, опублик. 30.08.93, бюлл. N 32)-прототип, утратил антигенную актуальность и вследствие этого не может вызывать защитную реакцию во время эпидемии гриппа A(H3N2).
Задачей, на решение которой направлено предлагаемое изобретение, является получение вакцинного штамма актуальной антигенной разновидности на основе эпидемического вируса A/Иоганесбург/33/94 (H3N2).
Вакцинный штамм A/47/Иоганесбург/94/1 (H3N2) получен методом генетической реассортации эпидемического вируса A/Иоганесбург/33/94 (H3N2) с холодоадаптированным штаммом A/Ленинград/134/47/57 (H2N2) - донором аттенуации с последующей селекцией в присутствии антисыворотки к вирусу A/Лениград/134/47/57 (H2N2) ГИСК N 392 (ГИСК им. Л.А.Тарасевича).
Методом рестрикционного анализа амплифицированных ДНК копий фрагментов генома родительских и реассортантного вакцинного вирусов установлено, что вакцинный штамм A/47/Иоганесбург/94/1 (H3N2) унаследовал 6 генов, кодирующих внутренние белки PB1, PB2, PA, NP, M, NS от донора аттенуации, и 2 гена, кодирующих поверхностные белки HA (гемагглютинин) и NA (нейтраминидазу) от эпидемического вируса. Методом рестрикционного анализа ДНК копий генов вакцинного штамма также подтверждено наличие мутаций в генах, кодирующих негликозилированные белки, показанных для донора аттенуации A/Ленинград/134/47.
Вакцинный штамм A/47/Иоганесбург/94/1 (H3N2) является температурочувствительным (разность титров при 32oC и 40oC - 7.0 lg ЭИД 50/0,2 мл) и холодоадаптированным (разность титров при 32oC и 25oC - 3,5 lg ЭИД 50/0,2 мл).
Таким образом, представленный вакцинный штамм A/47/Иоганесбург/94/1 (H3N2) характеризуется сочетанием полезных признаков, необходимых вакцинному штамму: антигенной специфичностью поверхностных белков эпидемического вируса A/Иоганесбург/33/94 (H3N2), структурой генома, оптимальной для реассортантных вакцинных штаммов, температурочувствительностью и хододоадаптированностью, что коррелирует с аттенуацией для человека, характерной для донора аттенуации.
Морфология штамма - полиморфная, типичная для вируса гриппа.
Характеристика штамма. Инфекционная активность при репродукции в развивающихся куриных эмбрионах при 32oC в течение 48 ч - 8,0 lg ЭИД 50/0,2 мл.
Гемагглютинирующая активность - 1:256 - 1:512.
Штамм проявляет генетическую стабильность биологических признаков после 5-и пассажей на куриных эмбрионах (при использовании больших заражающих доз).
Штамм ареактогенен при интраназальном введении детям 3 - 14 лет.
Пример. Группу из 84 детей в возрасте 3 - 14 лет вакцинировали интраназально в объеме 0,5 мл реассортантным штаммом A/47/Иоганесбург/94/1 (H3N2) с инфекционной активностью 7,0 lg ЭИД 50/0,2 мл. Группа детей того же возраста из 32 человек получила плацебо.
Средние реакции с кратковременным повышением температуры свыше 37,6oC не наблюдались. Показатель реактогенности составил 0%. Слабые температурные реакции до 37,5oC - в 2-х случаях в группе вакцинируемых и в 2-х случаях в группе плацебо (см. таблицу).
Таким образом вакцинный штамм A/47/Иоганесбург/94/1 (H3N2) ГИСК N 392 по показателям реактогенности соответствует требованиям, предъявляемым к вакцинным штаммам фармакопейной статьей ФС 42-298 ВС-89 на живую гриппозную вакцину для интраназального применения детям 3 - 14 лет.
Изобретение относится к медицинской вирусологии и касается получения вакцинного штамма для живой гриппозной интраназальной вакцины для детей, соответствующего по антигенным свойствам актуальному вирусу А/Иоганесбург/33/94 (Н3N2). Вакцинный штамм А/47/Иоганесбург/94/1 - реассортант, полученный путем скрещивания эпидемического вируса А/Иоганесбург/33/94(Н3N2) с холодоадаптированным температурочувствительным вирусом А/Ленинград/134/47/57 (Н2N2) - донором аттенуации, безвредным для взрослых и детей, свойства которого дают возможность гарантированно получать реассортантные вакцинные штаммы из вновь появляющихся эпидемических вирусов. Штамм А/47/Иоганесбург/49/1 активно размножается в развивающихся куриных эмбрионах при оптимальной температуре 32 - 34oC, характеризуется температурочувствительностью и холодоадаптированностью. Реассортант унаследовал от эпидемического вируса два гена, кодирующих поверхностные белки (гемагглютинин и нейраминидазу) от эпидемического вируса и шесть мутантных генов, кодирующих негликозилированные белки от донора аттенуации. Штамм А/47/Иоганесбург/94/1 (Н3N2) ареактогенен для детей 3 - 15 лет при интраназальном введении. Штамм депонирован в ГИСК под N 392. Вакцинный штамм А/47/Иоганесбург/94/1 по биологическим свойствам и показателям реактогенности соответствует требованиям, предъявляемым к вакцинным штаммам фармакопейной статьей ФС 42-298 ВС-89 на живую гриппозную вакцину для интраназального применения детям 3 - 14 лет. 1 табл.
Штамм вируса гриппа А(47)Иоганесбург(94)1 (Н3 N2) ГИСК N 392, используемый для получения живой интраназальной гриппозной вакцины для детей.
| SU, патент, 1838404, кл | |||
| Способ гальванического снятия позолоты с серебряных изделий без заметного изменения их формы | 1923 |
|
SU12A1 |
