СРЕДСТВО ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ РАКА "ФУКУС" Российский патент 1998 года по МПК A61K35/80 

Изобретение относится к медицине, а именно к профилактической онкологии.

Известно использование в качестве онкопрофилактического средства бета-каротина, полученного из растительного сырья, который способен тормозить развитие злокачественных опухолей некоторых локализаций (Mathews-Roth M.M. Beta-carotene, canthaxanthin, and phytoene// In: Nutrition and Cancer Prevention. Ed by T. E. Moon, M.S. Micozzi. - New York and Basel: M. Dekker, Inc. 1989, P. 273 - 290). Известно средство для профилактики злокачественных новообразований "Фитолон" и "Фитолон-М" на основе производных хлорофилла, полученных из бурой морской водоросли ламинария сахаристая (патент N 2031654, кл. A 61 K 35/80, 31/40, от 18.05.93, опубл. БИ N 9 от 27.03.95).

Наиболее близким по своему действию к предлагаемому изобретению является "Средство для профилактики рака "Кламин", полученное на основе бурой морской водоросли ламинария сахаристая (патент N 2034560, кл. A 61 K 35/80, от 18.05.93, опубл. БИ от 10.05.95).

Однако, профилактическая онкология нуждается в новых онкопрофилактических средствах. Кроме того, количество производимой таблетированной пищевой добавки "Кламин" сдерживается мощностью водорослевого комбината, производящего субстанцию, в результате количество выпускаемого препарата "Кламин" явно недостаточно.

Целью изобретения является расширение ассортимента средств и пищевых добавок из морских водорослей, обладающих онкопрофилактическим действием.

Поставленная цель достигается тем, что средство для профилактики рака "Фукус" содержит экстракт фукусный (ЭФ), полученный из фукуса пузырчатого (Fucus vesiculosus), а также при необходимости физиологически приемлемые вспомогательные вещества и наполнители, используемые для приготовления лекарственных форм.

Как известно, фукус пузырчатый является одной из разновидностей пищевых бурых морских водорослей, широко используемой в гомеопатической практике. Он применяется в гомеопатии при дефиците йода, гипотиреозе, ожирении, запорах, а также для лечения узловатого зоба (Келлер Г. Гомеопатия, пер. с нем., 5-е издание/ Фрейбург 1983). В современной медицине изучаются возможности применения биологически активных веществ водорослей семейства фукусовых для профилактики и лечения различных заболеваний. Например, у полисахаридов и полифенолов фукуса пузырчатого выявлена антивирусная активность в отношении вируса СПИДа (Beress A., Wassermann O., Bruhn T., Beress L. A new procedure for the isolation of anti-HIV compounds (polysaccharides and polyphenols) from the marine alga Fucus vesiculosus// J. Nat. Prod., 1993, Vol. 56, P. 478 - 488). Использование фукуса пузырчатого или ЭФ по новому назначению - в качестве онкопрофилактического средства не известно и является новым.

ЭФ получают из фукуса пузырчатого беломорского путем водно-содовой экстракции на Архангельском водорослевом комбинате. Экстракцию воздушно-сухих водорослей проводят горячей водой при температуре 60 ± 5^oC в соотношении 1 : 20 (к массе водорослей), кальцинированной содой в количестве 1,0 - 1,5 мас. %, после чего варят водоросли в этом растворе в течение 4 - 5 ч, раствор фильтруют, упаривают и сушат. Сушат под давлением 0,19 ± 0,01 МПа или 1,9 ± 0,1 кт/кг. Массовая доля воды в высушенном ЭФ должна быть не более 18%. Высушенную пленку ЭФ дробят до порошка. Возможен щелочной гидролиз водорослей.

На полученный продукт имеются ТУ 15-02-009-08-94 "Экстракт фукусный", предназначенные для использования в качестве биоактивной добавки в парфюмерно-косметической промышленности.

Внешний вид: ЭФ представляет собой порошок темно-коричневого цвета, хорошо растворимый в воде. Состав: содержание воды - не более 18%, золы к сухому продукту - не более 30%, при растворении 1% раствора в воде - pH 8 - 12. На экстракт фукусный имеется гигиенический сертификат N 43 от 14.09.94 г. Архангельского областного центра Госсанэпиднадзора.

ЭФ содержит такие вещества, как полисахариды, фукостеролы, аминокислоты, углеводы, липиды, минеральные вещества, в том числе йод, витамины группы B, витамин C. Богатый минеральный состав фукусовых водорослей отличается от других бурых водорослей высоким содержанием цинка, так как эти водоросли способны извлекать и накапливать цинк из воды. В состав средства "Фукус" входит ряд природных антиканцерогенных веществ, таких как, например, полисахарид фукоидан, фукостеролы, полиненасыщенные жирные кислоты омега-3 типа, микроэлементы. Фукостеролы, входящие в состав средства, обладают антиоксидантной активностью, т. е. подавляют в организме образование свободных радикалов, в частности супероксидных. Предположительно за счет комплекса биоактивных веществ проявляется адаптогенное, онкопрофилактическое и радиопротекторное действие средства "Фукус". Дополнительный эффект создают альгиновые кислоты которые составляют от 18 до 28% (на а.с.м.) от ЭФ, и обладают способностью выводить из организма соли тяжелых металлов, токсины, радионуклиды, а также ингибировать всасывание радиоактивных элементов.

В отличие от исходной бурой водоросли ЭФ содержит весь комплекс биоактивных веществ из фукуса пузырчатого, но в более усвояемой форме для животного организма за счет щелочного гидролиза водорослевой массы и перевода липидных фракций в связанное состояние в виде кальциевых и натриевых солей.

Ниже приведены примеры получения и использования средства "Фукус". Онкопрофилактическое средство "Фукус" может быть использовано в виде порошка, гранул, таблеток, водного раствора, сиропа, а также в виде мази.

Пример 1.

Рецептура средства "Фукус" в виде сиропа, мас.%:
ЭФ - 2,0 - 4,0
Сахар - 55,0 - 70,0
Лимонная кислота - 0,2 - 0,8
Спирт этиловый - 0 - 10,0
Пищевой ароматизатор - 0 - 0,5
Вода кипяченая - Остальное - До 100,0
Для приготовления сиропа "Фукус" в отдельную емкость загружают 20 г порошка ЭФ и заливают его 160 мл теплой кипяченой воды (1/2 рецептурного количества воды) для набухания и растворения (по типу желатина). Емкость ставят на водяную баню при температуре 50 - 70^oC. Растворение ведут при периодическом перемешивании в течение 1 ч. После полного набухания и растворения ЭФ сливают и фильтруют через капроновый или марлевый фильтр в дополнительную емкость. В варочную емкость загружают 600 г сахарного песка, заливают оставшимся количеством воды. Варят сироп при кипячении на маленьком огне в течение 30 мин, после чего фильтруют. В сироп добавляют 50%-ный водный раствор лимонной кислоты (из расчета 8 г кислоты на 16 мл воды) и выдерживают смесь при температуре 70^oC в течение 2 ч при периодическом перемешивании до образования инвертного сахара, после чего сироп охлаждают до 30 - 40^oC и приливают при постоянном перемешивании водный раствор ЭФ. Смесь перемешивают в течение 15 - 20 мин и вводят 144 мл воды, 50 г этилового спирта и 2 г пищевого ароматизатора, например, вишневого. Сироп хорошо перемешивают и подают на разлив и расфасовку. Возможно использование других сахаров: маннита, ксилита, сорбита, глюкозы для приготовления сиропа.

Пример 2. Для приготовления водного раствора средства "Фукус" растворяют 2 г порошка ЭФ в 1 л теплой кипяченой воды на водяной бане при температуре 50 - 70^oC. Растворение проводят при периодическом перемешивании в течение 1 ч до полного растворения ЭФ, затем раствор фильтруют через марлевый или капроновый фильтр. Полученный водный раствор представляет собой желеобразный продукт темно-коричневого цвета. Данный раствор давали животным в экспериментах.

Пример 3. Средство "Фукус" может быть приготовлено в виде мази для местного применения.

Рецептура средства "Фукус" в виде мази, мас.%:
ЭФ - 1,0 - 4,0
Эмульсионный воск - 2,0 - 3,0
Моностеарат глицерина - 0,6 - 1,2
Масло растительное хлопковое, дезодорированное - 6,0 - 10,0
Жир куриный - 1,0 - 2,0
Метилпараоксибензойная кислота (консервант) - 0,2 - 0,3
Отдушка - 0,1 - 0,3
Вода кипяченая - Остальное - До 100,0
При изготовлении мази "Фукус" в реактор с водяной рубашкой загружают 20 г эмульсионного воска, 6 г моностеарата глицерина, 80 г растительного масла, 10 г жира куриного и 2 г консерванта. Смесь сплавливают при нагревании и температуре 60 - 70^oC до однородной жидкой массы (жировая основа). В отдельную емкость загружают 10 г ЭФ в виде порошка и 870 мл воды. Смесь нагревают на водяной бане до полного набухания и растворения компонентов в течение 1 - 2 ч, после чего полученный желеобразный раствор ЭФ фильтруют через капроновое сито. Жировую основу в реакторе охлаждают до 50 - 60^oC и вводят туда при постоянном перемешивании водный раствор ЭФ. Эмульгирование смеси проводят в течение 1 ч до охлаждения смеси до 30 - 35^oC, после чего вводят отдушку. Полученную мазь (крем) отправляют на линию разлива и фасовку.

Пример 4. Используют средство "Фукус" в виде порошка, по 1 чайной ложке 3 раза в день, запивая водой.

Предлагаемое средство для профилактики рака "Фукус" прошло апробацию на базе НИИ онкологии им. проф. Н.Н. Петрова Минздравмедпрома РФ (г. Санкт-Петербург). Изучалось антиканцерогенное действие средства "Фукус" на моделях рака молочной железы и толстой кишки. У средства "Фукус" обнаружена также способность стимулировать кроветворение. В то же время у средства "Фукус" не выявлено острой токсичности и местнораздражающего действия (см. Заключение НИИ онкологии им. Н.Н. Петрова).

Онкопрофилактические свойства средства "Фукус" подтверждаются следующими примерами.

Пример 5. На модели рака молочной железы.

У крыс-самок ЛИО разводки НИИ онкологии им. Н.Н. Петрова с начальным весом тела 200 - 230 г индуцировали опухоли молочной железы путем однократных интрамаммарных инъекций N-метил-N-нитрозомочевины (МНМ) в ткань всех 12 молочных желез по 1 мг МНМ на железу (1-я неделя эксперимента). В опытной группе крысам давали перорально ЭФ до конца эксперимента с питьевой водой в концентрации 2 г/л (см. пример 2), что соответствует суточному потреблению 200 мг/кг веса тела животного. ЭФ давали, начиная с 6-й недели эксперимента, т. е. в фазе промоции/прогрессии канцерогенеза. В опытах были также 2 группы интактных животных, которые не получали канцероген: интактный контроль, интактные животные + ЭФ. Через 12 мес крыс забивали, оценивали частоту и множественность развития опухолей молочной железы. Проводили гистологическую обработку органов и тканей всех групп животных по стандартной методике с окраской гематоксилин/эозином. При световой микроскопии проводили патоморфологический анализ материала. Опухоли классифицировали в соответствии с требованиями Международного агентства по изучению рака (Pathology of Tumours in Laboratory Animals, Second Edition, Vol.1, Tumours of the Rat/Ed. by V.S. Turusov and U. Mohr. - IARC Sci., Publ. N 99, Lyon: IARC, 1990). Результаты эксперимента обрабатывали методами вариационной статистики с использованием критериев t (Стьюдента) и хи-квадрат.

Влияние средства "Фукус" на развитие опухолей молочной железы, индуцированных МНМ у крыс, представлено в табл. 1. Как видно из данных табл. 1, средство "Фукус" статистически достоверно уменьшало частоту опухолей молочной железы на 27%, а их множественность - на 51%. В группах крыс, получавших канцероген, большинство опухолей молочной железы были злокачественными, реже - доброкачественными.

Пример 6. На модели рака толстой кишки.

У крыс-самок ЛИО разводки НИИ онкологии им. Н.Н. Петрова с начальным весом тела 200 - 230 г индуцировали опухоли толстой кишки путем интраректальных инстилляций МНМ. Со 2-й по 5-ю недели эксперимента крысам провели 4 интраректальных инстилляции МНМ по 4 мг в 0,5 мл физиологического раствора на крысу, т.е. 1 раз в неделю в течение 4-х недель. В опытной группе крысам давали перорально ЭФ до конца эксперимента с питьевой водой в концентрации 2 г/л (см. пример 2), что соответствует суточному потреблению 200 мг/кг веса тела животного. ЭФ давали, начиная с 6-й недели эксперимента, т.е. в фазе промоции/прогрессии канцерогенеза. В опытах были также 2 группы интактных животных, которые не получали канцероген: интактный контроль, интактные животные + ЭФ. Через 12 мес крыс забивали, оценивали частоту и множественность развития опухолей толстой кишки. Проводили гистологическую обработку органов и тканей всех групп животных по стандартной методике с окраской гематоксилин/эозином. При световой микроскопии проводили патоморфологический анализ материала. Опухоли классифицировали в соответствии с требованиями Международного агентства по изучению рака.

Влияние ЭФ на развитие опухолей толстой кишки, индуцированных МНМ у крыс, представлено в табл.2.

Как видно из данных табл. 2, средство "Фукус" статистически достоверно снижало частоту новообразований толстой кишки на 28%, а их множественность - на 45%. Большинство опухолей толстой кишки были злокачественными.

Результаты испытаний свидетельствуют, что средство "Фукус" эффективно тормозит развитие рака молочной железы и толстой кишки, индуцированных МНМ у крыс, т. е. обладает антиканцерогенной активностью в отношении 2-х наиболее часто встречающихся у человека злокачественных опухолей.

На тех же моделях опухолей были проведены опыты с бета-каротином и средством для профилактики рака "Кламином" (см. табл. 3 и 4). В опытах были использованы: водорастворимая форма бета-каротина Аквитон-Ю (Санкт-Петербург) и таблетированная пищевая добавка "Кламин" (Санкт-Петербург).

При сравнении данных 2-х онкопрофилактических средств с предлагаемым средством "Фукус" следует, что на модели рака молочной железы кламин и фукус проявляли примерно одинаковые антиканцерогенные эффекты, тогда как бета-каротин вообще не тормозил канцерогенез молочной железы на этой модели. На модели рака толстой кишки все три сравниваемых препарата примерно в одинаковой степени снижали множественность опухолей данной локализации, в среднем - на 45 - 50%, тогда как частоту опухолей толстой кишки фукус снижал на 28%, т.е. более выражено, чем бета-каротин - на 16%, и кламин - на 18%.

Использование предлагаемого средства "Фукус" для профилактики рака позволяет расширить ассортимент и качество онкопрофилактических средств из природного сырья.

Изобретение относится к медицине, а именно к профилактике рака. Предложенное средство содержит экстракт фукусный, полученный щелочным гидролизом из фукуса пузырчатого в концентрации от 0,2 до 100%, физиологически приемлемые вспомогательные вещества и инертные наполнители. Средство "фукус" эффективно тормозит возникновение и развитие рака молочной железы и толстой кишки. 4 табл.

Средство для профилактики рака на основе бурых морских водорослей, отличающееся тем, что оно содержит экстракт фукусный, полученный щелочным гидролизом из фукуса пузырчатого (Fucus veculosus) в концентрации 0,2 - 100%, физиологически приемлемые вспомогательные вещества и инертные наполнители.