СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОЙ СЫВОРОТКИ КРОВИ Российский патент 1998 года по МПК A61K39/00 

Изобретение относится к медицине, касается способов получения сыворотки крови человека и может быть использовано в клинической медицине для направленной регуляции функции организма.

Широко известны способы получения сыворотки крови, основанные на взятии крови у доноров инкубации, отделении и консервировании сыворотки. Известен и способ получения биологически активной сыворотки. Способ заключается в воздействии на организм инфекционных агентов с последующей выработкой антител в крови и получаемых с сывороткой крови. Нас интересует возможность получения сыворотки крови, действующей на любые другие системы организма, не связанные с иммунной системой. В окружающей нас жизни существует множество экзогенных и эндогенных факторов, оказывающих отрицательное влияние на человека. Но бороться с ними вышеуказанной биологически активной иммунной сывороткой невозможно.

Задачей, на решение которой направлено заявляемое изобретение, является получение биологически активной сыворотки крови, повышающей устойчивость к эндогенным и экзогенным факторам.

Для решения поставленной задачи предлагается новый способ получения биологически активной сыворотки, заключающийся в том, что перед взятием крови донора вводят в состояние двигательной, гипоксической, термической, пищевой, звуковой, антиалкогольной или антиникотиновой мотивации (потребности) продолжительностью от 10 минут до 3 часов.

В результате адекватного воздействия физической нагрузки, тишины, высоких или низких температур, пищевого насыщения, гипоксии, алкоголя и никотина, полученная из крови донора сыворотка обладает специфическими свойствами. Таким образом, налицо технический результат - биологически активная сыворотка, обладающая специфическими свойствами и не имеющая отрицательного воздействия на организм.

В зависимости от характера воздействия на организм получают сыворотки с биологической активностью различного характера:
1) миогенная,
2) аудиоактивная,
3) термоактивная,
4) диетактивная,
5) антигипоксическая,
6) антиалкогольная,
7) антиникотиновая.

Способ получения сыворотки
После воздействия на организм, адекватного активности получаемой сыворотки производят забор крови в количестве 70 мл с помощью системы для взятия крови одноразового пользования ВК 10-01, помещают ее в контейнер "Компопласт" и подвешивают в рефрижераторе при 4^oC на 24 часа. Затем с помощью стерильного электроотсоса осуществляют отделение сыворотки и производят ее расфасовку в стерильные флаконы для последующего консервирования в морозильной камере при -25^oC.

Конкретные примеры осуществления способа
Миогенноактивная сыворотка (МС)
10 добровольцев - спортсменов в возрасте 18-23 лет, практически здоровых, медицинская группа - основная. Перед взятием крови были подвергнуты интенсивным физическим нагрузкам в течение 10-15 минут. Забор крови произведен в количестве 70 мл от каждого с помощью систем для взятия крови одноразового пользования ВК 10-01. Затем кровь поместили в контейнеры "Компопласт" и подвесили в рефрижераторе при 4^oC на 24 часа. С помощью стерильного электроотсоса осуществлено отделение сыворотки и произведена ее расфасовка в стерильные флаконы и осуществлено консервирование в морозильной камере при -25^oC.

Аудиоактивная сыворотка (АС)
12 студентов - добровольцев в возрасте 18-22 года, практически здоровых, медицинская группа - основная перед взятием крови помещались на 45-60 минут в звуконепроницаемую камеру.

Отбор крови, отделение сыворотки и ее консервирование проводили так же, как и в предыдущих примерах.

Диетактивная сыворотка (ДС-Н)
(снимающая чувство голода)
12 добровольцев - мужчин в возрасте от 35-40 лет, практически здоровых, медицинская группа - основная. Перед принятием крови находились на высококалорийной диете (5000-6000 ккал) в течение 3 часов.

Отбор крови, отделение и консервацию сыворотки проводили так же, как в предыдущих примерах.

Антигипоксическая сыворотка (АГС)
Обследовано 18 мужчин в возрасте 18-25 лет с явлениями хронической легочной недостаточности. Антигипоксическую сыворотку получали у доноров после их 30-минутного пребывания в барокамере при 500-550 мм. рт.ст. (2500-3000 м. ).

Отбор крови, консервацию и отделение сыворотки проводили так же, как в предыдущих примерах.

Термоактивная сыворотка (повышающая устойчивость к жаре) ТС-12
18 студентов - добровольцев в возрасте 18-28 лет, практически здоровых, медицинская группа - основная. Перед взятием крови были подвергнуты воздействию низких температур (+12^oC) в течение 45-60 мин.

Отбор крови, консервацию и отделение сыворотки проводили также, как и в предыдущих примерах.

Термоактивная сыворотка (повышающая устойчивость к холоду) ТС-70
16 студентов - добровольцев в возрасте 18-22 лет, практически здоровых, медицинская группа - основная. Перед взятием крови были подвергнуты воздействию высоких температур (+60 - 70^oC) в течение 45-60 минут.

Отбор крови, консервацию и отделение сыворотки проводили так же, как и в предыдущих примерах.

Антиалкогольная сыворотка (ААС)
30 добровольцев - мужчин в возрасте 22-50 лет, практически здоровых, медицинская группа - основная. Перед взятием крови провоцировались алкоголем (2-3 ч) до появления чувства полного отвращения к спиртному.

Отбор крови, консервация и отделение сыворотки проводили так же, как в предыдущих примерах.

Антиникотиновая сыворотка (АНС)
18 студентов - добровольцев в возрасте 18-22 лет, практически здоровые, медицинская группа - основная. Перед взятием крови провоцировались никотином (20-40 мин) до появления чувства резкого отвращения к курению.

Отбор крови, консервация и отделение сыворотки проводили так же, как и в предыдущих примерах.

Примеры, иллюстрирующие эффективность полученных сывороток.

Миогенная сыворотка (МС)
МС применяется с целью повышения общей и специальной физической работоспособности, для профилактики и лечения астенических состояний, депрессий иммунитета, умственного и физического переутомления.

Положительный эффект наблюдается через 60 минут после однократного приема МС.

Привыкания и побочных явлений при использовании МС не обнаружено.

Пример 1. Экспериментальную группу при изучении действия МС составили спортсмены - легкоатлеты, специализирующиеся на дистанциях 400 и 800 м гладкого бега (28.12.91 г.). Возраст спортсменов - от 16 до 18 лет, из них мастера спорта - 4 человека, кандидатов в мастера - 6. Вес спортсменов колебался от 63 до 71 кг, рост 175-183 см.

Контрольную группу составили спортсмены той же специализации в возрасте от 16 до 18 лет. Из них мастеров спорта - 5, кандидатов в мастера - 5. Вес спортсменов контрольной группы колебался от 63 до 70 кг, рост - 174-181 см.

У спортсменов экспериментальной группы через 2 часа после энтерального применение МС в дозе 0,3 мл/кг массы тела отмечалось повышение физической работоспособности на 12,6% (рWC_170/кг массы тела) от исходного фона и на 12,8% по сравнению с контрольной группой.

Экспериментальная группа выполняла больший объем работы при более низком уровне частоты сердечных сокращений (ЧСС) и более интенсивным восстановлением ЧСС к третьей минуте после велоэргометрической нагрузки.

Патологических изменений со стороны сердечно-сосудистой системы и крови не отмечено.

На вторые сутки после однократного применения МС высокая физическая работоспособность в экспериментальной группе сохранилась.

На пятые сутки физическая работоспособность спортсменов экспериментальной группы возвращалась к исходному уровню.

Пример 2. МС применялась внутримышечно и энтерально при подготовке 24 боксеров СССР к выступлению на Играх доброй воли в г.Сиетле (1990 г.). Прогноз специалистов (без учета применения МС) о выступлении боксеров - 9 медалей любого достоинства. Фактические результаты - 20 медалей.

3-кратный допинг-контроль боксеров дал отрицательную реакцию.

Общая оценка тренеров и врача команды: использование МС положительно влияет на выносливость и физическую работоспособность боксеров. Субъективная оценка большинства боксеров - применение МС способствовало успешному выступлению и ее целесообразно использовать при подготовке спортсменов к собственным соревнованиям.

Пример 3. МС применялась у 60 мужчин, не занимающихся спортом, в возрасте от 20 до 25 лет.

Внутримышечное введение МС в дозе 0,3 мл/кг массы тела вызвало повышение общей физической работоспособности на 12% (рWC₁₇₀), умственной работоспособности (простые и сложные аналоги) на 16%, ускорение психического темпа на 19% увеличение объема кратковременной памяти на 7%, улучшение самочувствия и повышения жизненного тонуса.

Одновременно повышалась активность иммунной системы: уровень иммуноглобулинов (гр. А.М.О) возрастал на 26,8 - 33,3%.

Форма выпуска МС; растворы, порошки, капсулы.

Срок хранения готовых форм МС: порошки, капсулы - до 5 лет, растворы - 10-15^oC - до 1 года.

Аудиоактивная сыворотка (АС)
АС используется для повышения остроты слуха по всему диапазону частот, а также для профилактики и лечения нарушений остроты слуха различной этиологии.

Положительное действие АС наступает через 15-30 минут после однократного приема. Продолжительность лечебного действия 3-суточного курса - не менее 5 недель.

Привыкания и побочных явлений при длительном применении АС не обнаружено.

Пример. Больной Г., 30 лет. Жалобы на снижение слуха на оба уха. Считает себя больным в течение 5 лет. Заболевание связывает с воздействием шума оркестра в ресторане, где несколько лет работал официантом. Лечился амбулаторно без эффекта (проводилась медикаментозная терапия, физиотерапия). Объективно: правое ухо - барабанная перепонка серого цвета, с опознавательными пунктами. Шепотная речь - 1,5 м, разговорная речь - 5 м. Левое ухо - барабанная перепонка серого цвета, контурируется, шепотная речь - 1,5 м, разговорная речь - 5 м. Остальные ЛОР органы без видимой патологии. 18, 19, 20.11.86 г. производились внутримышечные инъекции АС в наружно-верхний квадрант ягодичной мышцы в количестве 0,3 мл на 1 кг массы тела. Субъективно отмечал улучшение остроты слуха на оба уха, повышение разборчивости и большую четкость речи. Отмечал также повышение умственной и физической трудоспособности. Побочных действий от введения препарата не наблюдалось.

В таблице представлены аудитограммы больного Г. о хронической нейросенсорной тугоухостью до и в разные сроки после введения АС (правое ухо, воздушная проводимость).

Как видно из таблицы, после инъекций АС наблюдалось повышение остроты слуха у больного Г. во всем аудиоматрическом диапазоне частот на 10-30 дБ с максимумом в день 3-ей инъекции. Острота слуха была повышена, постепенно снижаясь в течение 5 недель (дата последнего обследования), оставаясь достоверно выше исходного уровня.

Аналогичные результаты получены и на левом ухе.

Форма выпуска: растворы, порошки, ректальные свечи.

Срок хранения готовых форм при +4^oC до 3-х лет.

Антигипоксическая сыворотка (АГС)
АГС применяется для профилактики гипоксических явлений повышает потребление кислорода, повышает физическую работоспособность.

Положительное действие АГС наступает после 3-дневного цикла инъекций.

Привыкания и побочных явлений от АГС не обнаружено.

Пример. 14 добровольцам, страдающим легочной недостаточностью, в возрасте 25-45 лет, ежедневно в течение 3 суток вводили внутримышечно сыворотку (АГС) в дозе 0,3 мг/кг-массы тела.

После завершения сывороточной терапии у больных наблюдалась положительная динамика показателей внешнего дыхания, крови, физической работоспособности. Исчезла одышка, частота дыхания уменьшалась на 25%, частота сердечных сокращений уменьшилась на 8-10%, максимальное потребление кислорода возросло на 15%, физическая работоспособность по данным велоэргометрии повысилась на 12%.

Форма выпуска АГС: растворы, порошки, свечи. Срок хранения готовых форм: при 15-20^oC (растворы) до 3 лет, при +4^oC (порошки, свечи) до 5 лет.

Термоактивная сыворотка (ТС-12)
ТС-12 применяется для профилактики заболеваний, повышения устойчивости и ускорения процессов адаптации к воздействию высоких температур окружающей среды.

Положительное действие наступает через 15-30 минут после однократного приема. Продолжительность лечебного действия одной дозы - не менее 2 суток.

Привыкания и побочных явлений ТС-12 не обнаружено.

Пример. 18 студентам - добровольцам в возрасте 18-22 лет, тяжело переносящим высокие температуры окружающей среды, внутримышечно вводилась ТС-12 в дозе 0,3 мл/кг массы тела. После применения ТС-12 обследуемые находились в гипертермической камере при температуре +70±5^oC и относительной влажности 30-40%. Во время нахождения в гипертермической камере обследуемые были под постоянным медицинским наблюдением с регистрацией ЧСС, ЭКГ, частоты дыхания, зрения, слуха, интенсивности потоотделения и т.д.

Продолжительность пребывания в условиях гипертермии на фоне применения ТС-12 была в 2,5 раза больше, чем без применения ТС-12 (контрольные исследования тех же испытуемых).

Форма выпуска ТС-12: растворы, порошки, свечи.

Срок хранения готовых форм: при - 15-20^oC (растворы) до 3 лет, при +4^oC (порошки, свечи) до 5 лет.

Термоактивная сыворотка (ТС-70)
ТС-70 применяется для профилактики заболеваний, связанных с переохлаждением, повышения устойчивости организма к воздействию низких температур, ускорения адаптации человека к гипотермии.

Положительное действие ТС-70 наступает через 15-30 минут после однократного приема. Продолжительность лечебного действия одной дозы - не менее 2 суток.

Привыкания и побочных явлений ТС-70 не обнаружено.

Пример. 16 студентам - добровольцам в возрасте 18-22 лет, часто подверженным простудным заболеваниям, в течение осенне-зимнего периода 1990-1991 года внутримышечно применялась ТС-70 в дозе 0,3 мл/кг массы тела. Через 30 минут после введения ТС-70 у обследуемых наблюдалось ускорение восстановления температуры кожных покровов после холодовой нагрузки по методу Маршака. В области предплечья и бедра это восстановление температуры было более чем в 2 раза интенсивнее, чем до применения ТС-70. Количество функционирующих холодовых точек на фоне применения ТС-70 снижалось на 7%. Концентрация иммуноглобулинов в крови возрастала на 15-20%. Простудных заболеваний в течение 60 суток медицинских наблюдений не обнаружено.

Форма выпуска ТС-70: растворы, порошки, свечи.

Срок хранения готовых форм: при - 15-20^oC (растворы) до 3 лет, при +4^oC (порошки, свечи) до 5 лет.

Диетактивная сыворотка (ДС-Н)
ДС-Н показана для профилактики и лечения нарушений обмена веществ при повышенном аппетите и постоянной жажде. Показана при диетическом питании и искусственном снижении массы тела.

Положительное действие ДС-Н наступает через 60 минут после однократного приема. Продолжительность лечебного действия одной дозы - не менее 1-2 суток.

Пример. Обследованы 12 мужчин в возрасте 25-40 лет с постоянным чувством голода и повышенной массой тела. ДС-Н применялась внутримышечно в дозе 0,3 мл/кг массы тела. Через 2-3 часа осуществляли забор крови.

Антиалкогольная сыворотка (ААС)
ААС применяется для профилактики и лечения алкоголизма различной степени, устранения алкогольной потребности человека.

Положительное действие наступает через 60 минут после однократного приема ААС. Продолжительность лечебного действия одной дозы - не менее 2-4 суток.

Привыкания и побочных явлений от приема ААС не обнаружено.

Пример. 30 мужчинам в возрасте 22-50 лет, страдающим хроническим алкоголизмом, применялась ААС ежедневно в дозе 0,3 мл/кг массы тела в течение 3 суток. После применения ААС у больных при алкогольной провокации наблюдался стойкий рвотный рефлекс и исчезновение алкогольной мотивации. Рвотный рефлекс проявлялся и через 30-40 суток после приема ААС, антиалкогольная мотивация также сохранялась.

Форма выпуска ААС: растворы, порошки, свечи.

Срок хранения готовых лекарственных форм: при -15-20 (растворы) до 3 лет, при +4^oC (порошки) до 5 лет.

Антиникотиновая сыворотка (АНС)
АНС применяется для профилактики и лечения детского и взрослого никотинизма, устранения никотиновой потребности человека.

Положительное действие наступает через 3 суток после трехкратного ежедневного приема АНС. Продолжительность лечебного действия курсового приема АНС 30-40 суток.

Привыкания и побочных явлений от АНС не обнаружено.

Пример. 18 студентам-добровольцам, страдающим никотиновой потребностью (выкуривающим до 40 сигарет в сутки), внутримышечно вводилась АНС в дозе 0,3 мл/кг массы тела ежедневно в течение 34 суток. После проведенного антиникотинового курса лечения у обследованных студентов наблюдалось исчезновение потребности к табакокурению. В течение 30 суток клинического наблюдения только 3 из 18 студентов возобновили курение. Возобновление курения ими объяснялось чрезмерным стрессовым напряжением, связанным с совмещением дневного обучения в институте и вечерней работой в строительном кооперативе. Остальные 15 студентов спокойно оставили эту вредную привычку.

Форма выпуска АНС: растворы, порошки, свечи.

Срок хранения готовых лекарственных форм: при -15-20^oC (растворы) до 3 лет, при +4^oC (порошки) до 5 лет.

Все виды сывороток, по сравнению с традиционными аналогами, не имеют побочных действий или противопоказаний к применению.

Способ включает воздействие на донора в течение от 10 мин до 3 ч для приведения его организма в мотивационно-потребностное соединение, при котором происходит биологическое активирование крови донора, отбор порции биологически активной крови от донора, ее инкубацию и отделение биологически активной сыворотки от названной крови, после чего названную сыворотку инкубируют. Все виды сыворотки, полученные данным способом, по сравнению с известными не имеют побочных действий или противопоказаний к применению. 8 з.п. ф-лы, 2 табл.

1. Способ получения биологически активной сыворотки крови, включающий отбор крови у донора, инкубацию, отделение с последующим консервированием, отличающийся тем, что перед отбором крови донора приводят в состояние двигательной, звуковой, гипоксической, термической, пищевой, антиалкогольной или антиникотиновой мотивации продолжительностью от 10 мин до 3-х ч. 2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что для получения аудиоактивной сыворотки в качестве воздействия перед отбором крови донора помещают в звуконепроницаемую камеру на 45 - 60 мин. 3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что для получения термоактивной сыворотки в качестве воздействия перед отбором крови донора подвергают термическому воздействию в интервале температур 12 - 70^oC в течение 45 - 60 мин. 4. Способ по п. 3, отличающийся тем, что для получения сыворотки, повышающей устойчивость организма к холоду, перед отбором крови донора подвергают воздействию высоких температур в интервале 65 - 70^oC в течение 45 - 60 мин. 5. Способ по п. 3, отличающийся тем, что для получения сыворотки, повышающей устойчивость организма к жаре, перед отбором крови донора подвергают воздействию пониженных температур в интервале 12 - 14^oC в течение 45 - 60 мин. 6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что для получения антигипоксической сыворотки в качестве воздействия перед отбором крови донора помещают в барокамеру на 20 - 30 мин с давлением 500 - 550 мм рт. ст. 7. Способ по п. 1, отличающийся тем, что для получения антиалкогольной сыворотки в качестве воздействия перед отбором крови у донора проводят алкогольную провокацию до появления чувства полного отвращения к спиртному (2-3 ч). 8. Способ по п. 1, отличающийся тем, что для получения антиникотиновой сыворотки в качестве воздействия перед отбором донора подвергают никотиновой провокации до появления резкого отвращения к курению (20 - 40 мин). 9. Способ по п. 1, отличающийся тем, что для получения сыворотки, снимающей чувство голода, перед отбором крови донора содержат на высококалорийной диете (5000 - 6000 ккал) в течение 2 - 3 ч.