СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ОПИЙНОЙ НАРКОМАНИИ Российский патент 1998 года по МПК G01N33/52 

Изобретение относится к медицине, а именно к наркологии.

Известен способ диагностики опийной наркомании путем клинического исследования (Морфинизм. - М., 1984, с.10-31).

Недостатками этого способа являются невысокая точность, субъективность оценки, зависящая от квалификации врача.

Наиболее близким к предлагаемому способу по характеру решаемой задачи и технической сущности является способ диагностики опийной наркомании путем проведения твердофазного иммуноферментного анализа сыворотки крови пациента с определением антител к наркотикам (журн.: "Вопросы наркологии", 1995, N 2, с.36-44).

Недостатками этого способа являются невысокая точность диагностики (48,1±4,9%), наличие ложноположительных результатов у здоровых (4,6±3,1%).

Техническим результатом предлагаемого способа является повышение точности диагностики, отсутствие ложноположительных реакций у здоровых и соматических больных.

Это результат достигается тем, что с помощью твердофазного иммуноферментного анализа определяют уровень иммунореактивности аутоантител к белку мозга НВ-GAM в сыворотке крови по оптической плотности продуктов реакции и при его снижении более 35% по сравнению со средним уровнем иммунореактивности здоровых лиц диагностируют опийную наркоманию.

Не вытекает из известного уровня техники тот факт, что снижение уровня иммунореактивности аутоантител к белку мозга HB-GAM более 35% по сравнению со средним уровнем здоровых лиц может служить диагностическим критерием опийной наркомании.

Способ осуществляют следующим образом.

Полистироловые планшеты фирмы "Nunc" (Дания) активируют раствором НВ-GAM с концентрацией 2 мкг/мл в 0,05 М карбонатном буфере c рН 9,6 - вносят по 100 мкл в лунку. Инкубацию проводят при 4^oС в течение 16 ч. После отмывания планшет от несвязавшейся части антигена отмывающим буфером (140 мМ NaCl; 2,7 мМ КСl; 1,5 мМ КН₂РО₄; 8,7 мМ NaHPO₄), содержащим 0,05% Твина 20, их помещают в 0,05%-ный раствор желатины на 1 ч при 36^oС. После этого наносят сыворотки больных и 10 здоровых лиц, разведенные в 200 раз, по 100 мкл. Для построения калибровочной кривой на планшет наносят по 3 образца сыворотки здоровых лиц, разведенные в 200, 300, 400, 600 и 800 раз. Все разведения осуществляют на отмывающем буфере без Твина 20. Инкубацию проводят в течение 16 ч при 4^oС. Затем планшет отмывают аналогичным образом и наносят вторичные антитела - антивидовые IgG, конъюгированные с пероксидазой хрена ("Sigma", США) в разведении 1:2000. Инкубируют в течение 3 ч при комнатной температуре. После отмывания планшета реакцию проявляют 0,01%-ным раствором о-фенилендиамина с 0,001%-ной перекисью водорода на 0,2 М цитрат-фосфатном буфере рН 5,0. Спустя 10-15 мин фотометрически определяют оптическую плотность продуктов реакции на длине волны 492 нм. Реакции сывороток больных оценивают относительно среднего уровня иммунореактивности сывороток здоровых лиц.

При снижении уровня иммунореактивности аутоантител к белку мозга НВ-GAM, оцениваемой по оптической плотности продуктов реакции, более 35% по сравнению со средним уровнем иммунореактивности здоровых лиц диагностируют опийную наркоманию.

Пример. Больная С., 1977 г.р. История болезни 703. Поступила в Государственный научный центр наркологии 29.04.96. Эпизодическое употребление опиатов в течение 2 мес, физическая зависимость в течение 2 лет. Явления абстиненции проявляются в виде снижения настроения, бессонницы, головной боли, боли в мышцах, а также болей тянущего, выкручивающего характера. Больной проведено определение уровня сывороточной иммунореактивности аутоантител к белку мозга НВ-GAM с помощью твердофазного иммуноферментного анализа. Оптическая плотность продуктов реакции 0,429. Среднее значение аналогичного показателя у здоровых лиц 0,670. Снижение иммунореактивности у обследованной больной, выраженное в единицах оптической плотности, составило 36%. Диагноз опийной наркомании подтвержден.

Указанным способом проведено исследование 27 больных опийной наркоманией с физической зависимостью от наркотика от полгода до семи лет, 97 здоровых лиц и 54 соматических больных. Совпадение результатов клинического исследования и предлагаемого способа отмечено в 85% случаев. Ложноположительных результатов у здоровых и соматических больных не отмечено.

Предлагаемый способ имеет преимущества перед известными, заключающиеся в повышении точности и объективизации диагностики. Способ может быть применен для комплексной диагностики опийной наркомании.

Способ может быть использован в области медицины, а именно в наркологии для повышения точности и объективизации диагностики опийной наркомании. Больному проводят сочетанное клиническое исследование и твердофазный иммуноферментный анализ сыворотки крови с определением уровня иммунореактивности аутоантител к белку мозга HB-GAM по оптической плотности продуктов реакции и при его снижении более 35% по сравнению со средним уровнем имменореактивности здоровых лиц диагностируют опийную наркоманию.

Способ диагностики опийной наркомании путем проведения клинического исследования и твердофазного иммуноферментного анализа сыворотки крови больного, отличающийся тем, что определяют уровень иммунореактивности аутоантител к белку мозга HB-GAM по оптической плотности продуктов реакции и при его снижении более 35% по сравнению со средним уровнем иммунореактивности здоровых лиц диагностируют опийную наркоманию.