СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 5-ЗАМЕЩЕННЫХ ПИРРОЛО (2,3-α)ПИРИМИДИНОВ Российский патент 1999 года по МПК C07D487/04 C07D239/00 C07D207/00 

Данная заявка на патент является частично продолжающей патентной заявки серийный номер 07/951515, поданной 25 сентября 1992 г.

Настоящее изобретение относится к области фармацевтической и органической химии, и в соответствии с ним предлагается способ получения 5-замещенных пирроло[2,3-d] пиримидиновых производных, которые могут быть использованы в качестве промежуточных продуктов при получении терапевтически активных антифолатов на основе пирроло[2,3-d]пиримидинов.

Соединения, которые известны своим антифолатным действием, широко признаны как хемиотерапевтические агенты, применяемые при лечении рака. Один из таких агентов, метотрексат, а настоящее время является широкораспространенным противораковым лекарством; уже синтезированы, прошли испытания и обсуждения в химической и медицинской литературе многие другие соединения из семейства производных фолиевой кислоты. Такие соединения проявляют различное действие на ферментативном уровне. Так, в частности, они ингибируют действие таких ферментов, как дигидрофолатредуктаза, фолатполиглутаматсинтетаза, глицинамидрибонуклеотидформилтрансфераза и тимидилатсинтаза.

Относительно недавно был открыт ряд производных 4-оксипирроло-[2,3-d] пиримидин-L-глутаминовой кислоты, причем было показано, что они с особым успехом могут быть использованы в качестве антифолатных лекарств [см., например, Акимото и др., описание из европейской патентной публикации 0434426].

5-замещенные пирроло[2,3-d]пиримидиновые соединения формулы I

где R-NHC^*H/COOR¹/CH₂CH₂COOR¹ или OR¹;
каждый из R^I - водород или идентичные или различные карбоксизащитные группы; при углеродном атоме, обозначенном значком ^*, имеется L-конфигурация; n - 0 или 1, а арильная группа, которая может быть замещенной, могут быть использованы при получении различных терапевтических средств на основе 5-замещенных пирроло[2,3-d]пиримидиновых производных или же, когда

где каждый R¹ обозначены водородный атом, или соль, могут быть использованы в качестве терапевтических агентов.

В соответствии с настоящим изобретением предлагаются региоспецифические способы получения 5-замещенных пирроло[2,3-d]пиримидинов, которые могут быть использованы в качестве промежуточных продуктов при получении, кроме прочих, фармацевтически активных пирроло[2,3-d] пиримидиновых соединений или в качестве фармацевтически активных соединений.

Кроме того, в соответствии с настоящим изобретением предлагается региоспецифический способ получения 5-замещенных пирроло[2,3-d]пиримидиновых соединений, причем указанный способ осуществляют в одном и том же сосуде.

В соответствии с настоящим изобретением предлагается способ получения 5-замещенных пирроло[2,3-d]пиримидинов формулы I

где
каждый из R¹ - водородный атом или же этими символами могут быть обозначены идентичные или различные карбоксиблокирующие группы; знаком * обозначена L-конфигурация при углеродном атоме n - 0 или 1; а арильная группа, которая может быть замещенной; или же солей, при осуществлении которого предусмотрены
a) реакция 2,4-диамино-6-оксипиримидин с галоидальдегидом формулы II

где Y - атом брома, хлора или иода, а значения символов R, R^I A и * определены выше, и
b) возможная реакция солеобразования реакционного продукта со стадии a).

Согласно настоящему изобретению предлагается также способ получения 5-замещенных пирроло[2,3-d]пиримидинов формулы I

где значения символов R, R¹ n и * определены выше,
или же их солей, при осуществлении которого предусмотрены
a) реакция галоидирующего агента с соединением формулы III

где значения символов R, R¹ n и * определены выше, а R² - заместитель формулы IV, V или VI



где R³-OR⁴, где R⁴ - оксиблокирующая группа; OCOR⁵, где R⁵ - алкил C₁-C₆, фенил, бензил или циклоалкил C₃-C₆; NR⁶ R⁷, где каждым из символов R⁶ и R⁷ независимо друг от друга может быть обозначен алкил C₁-C₆, циклоалкил C₃-C₆ или же совместно с азотным атомом и, возможно, кислородным атомом они могут образовывать 5- или 6-членную насыщенную моноциклическую группу, которая возможно замещена одним или несколькими заместителями, выбираемыми из класса, охватывающего алкил C₁-C₄ и алкоксигруппу C₁-C₄, каждый или R⁸ и R⁹ - алкил C₁-C₄ или же совместно с кислородными атомами они могут образовывать 5- или 6-членную насыщенную моноциклическую группу, которая возможно замещена одним или двумя заместителями, выбираемыми из класса, который охватывает гидроксил, алкил C₁-C₄ и алкоксигруппу C₁-C₄;
b) реакция реакционного продукта со стадии a) с 2,4-диамино-6-оксипиримидином и
c) возможная реакция солеобразования реакционного продукта со стадии b).

Во всем тексте данного описания температура во всех случаях выражена в градусах Цельсия, пропорции всех материалов, процентные доли и тому подобное выражены в весовых единицах во всех случаях, за исключением тех, что относятся к растворителям или их смесям, количества которых выражены в объемных единицах.

Термин "алкил C₁-C₄" использован для обозначения линейных или разветвленных алифатических цепей с 1 - 4 углеродными атомами, в частности метила, этила, пропила, изопропила, н-бутила, изобутила, втор.-бутила и трет.-бутила.

Термин "алкил C₁-C₆" использован для обозначения алкилов C₂-C₄ плюс линейных и разветвленных алифатических цепей с 5 - 6 углеродными атомами, включая сюда, например, н-пентил, изопентил, неопентил, н-гексил, изогексил, 3-метилпентил, 2,3-диметилбутил и тому подобное.

Термин "арил" использован для обозначения циклической структуры, которая в формулах I, II, III и VII идентифицирована как и служит для обозначения 5- или 6-членных ароматических остатков, включая сюда гетероциклические группы, содержащие до трех гетероатомов (например, азот, кислород и серу), например, такие, как фенил, в особенности 1,4-фенилен, тиенил, пиридил, фурил и тому подобное. Такие арильные группы возможно замещены в дополнение к COR-группе одной или несколькими замещающими группами, выбираемыми из атомов галогена, гидроксила, алкила C₁-C₄ и алкоксигрупп C₁-C₄. За исключением незамещенного 1,4-фенилена предпочтительно единственное замещение группы во 2-м положении относительно 1-го положения группы COR.

Термин "алкоксигруппа C₁-C₄" служит для обозначения алкильной группы с 1 - 4 углеродными атомами, присоединенной посредством кислородного мостика, в частности метокси-, этокси-, н-пропокси-, изопропоксигруппы и тому подобного.

Термин "атомы галогена" служит для обозначения атомов брома, хлора, фтора и иода.

Термин "циклоалкил C₃-C₆" служит для обозначения насыщенной углеводородной циклической группы, содержащей от 3 до 6 углеродных атомов, включая сюда, например, циклопентил и циклогексил.

Используемые в данном описании выражения "карбоксиблокирующая группа для R¹, где R¹ не может обозначать водородного атома" и "оксиблокирующая группа для R⁴" служат для обозначения групп, которые обычно не содержатся в молекулах конечных терапевтических соединений, но которые намеренно вводят на определенном этапе осуществления процесса синтеза для защиты группы, в противном случае способной вступать в реакцию при совершении различных химических манипуляций, с последующим удалением. Поскольку соединения, молекулы которых содержат по одной или несколько защитных групп, имеют значение прежде всего как химические промежуточные продукты (хотя некоторые блокированные производные также проявляют биологическое действие), их точное строение не имеет решающего значения. Многочисленные реакции образования и удаления таких защитных групп описаны в ряде обычных работ, включая сюда, например, Protective Groups in Organic Chemistry, глава 3 (издательство Макоми, Пленум-Пресс, 1973); Грин, Protective Groups in Organic Synthesis, глава 2 (Джон Уили, 1981) и Шроедер и Любке, The Peptides том 1 (Академик пресс, 1965).

Карбоксильные группы можно защитить в виде эфирной группы, которая способна селективно удаляться в мягких условиях таким образом, чтобы не разорвать желаемой структуры молекулы. Класс сложных эфиров, приемлемых для использования при защите карбоксильной группы, охватывает разветвленные алкиловые (C₁-C₆) эфиры, в частности трет.-бутильные, и сложные эфиры, замещенные (I) алкоксигруппой C₁-C₄, такой как метоксиметил, 1-метоксиэтил, этоксиэтил и тому подобное;
(II) алкилтиогруппой C₁-C₆, такой как метилтиометил, 1-этилтиометил и тому подобное; (III) галоидсодержащей группой, такой как 2,2,2-трихлорэтил, 2-бромэтил, 2-иодэтоксикарбонил и тому подобное; (IV) от 1 до 3 фенильными группами, каждая из которых может быть как незамещенной, так и одно-, двух- или трехзамещенной алкилами C₁-C₆, алкоксигруппами C₁-C₄, гидроксилами, атомами галогена и нитрогруппами, такими как нитробензил; или же (V) арилом, таким как фенацилом. В случае наличия более одной карбоксильной группы карбоксиблокирующие группы могут быть как идентичными, так и различными. В предпочтительном варианте такие группы должны быть идентичными. Предпочтительными блокирующими группами являются C₁-C₆ эфирные, в частности метилэфирные и этилэфирные.

Класс предпочтительных оксиблокирующих групп включает в себя остатки простых эфиров, в частности алкилового C₁-C₄ эфира, фенилового эфира и силилового эфира. К особенно приемлемым силилэфирным остаткам относятся, например, триизопропилсилилэфирная, триметилсилилэфирная, триэтилсилилэфирная и трет. бутил-диметилсилилэфирная группы (см. например, Голвин Э.У., Silicon Reagemts in Organic Synthesis (Академик пресс, 1988).

Соединение формулы I существует в таутомерном равновесии с соответствующими 4(3H)-оксосоединениями. В иллюстративных целях ниже представлены равновесные состояния пирролопиримидиновой циклической системы и нумерация позиций.

Для удобства 4(3H)-оксоформа изображена в формуле I, и во всем тексте данного описания использована соответствующая номенклатура. Однако совершенно очевидно, что такие изображения охватывают соответствующую таутомерную 4-оксиформу.

Условия осуществления предлагаемого способа требуют реакции 2,4-диамино-6-оксипиримидина с галоидальдегидом формулы II в растворителе с учетом необходимости содействия циклизации.

Используемый при осуществлении предлагаемого способа 2,4-диамино-6-оксипиримидиновый исходный материал технически доступен, в то время как методы получения галоидальдегидов формулы II, когда R-OR¹, где R¹ - водородный атом или карбоксиблокирующая группа, известен из литературных источников (см., например, Дегроу и др., J. Med. Chem., 25, 1227 - 1230, 1982).

В работе Магроу говорится о получении соединений формулы II, где 1,4-фенилен, n - 0, R-OR¹, а R¹ - водородный атом. Методы защиты карбоксильных групп и получения соединения формулы II, у которых n - 1, хорошо известны.

Другой исходный материал для соединения формулы II получают конденсацией енольного эфира формулы VII

арильная группа, которая может быть замещенной; R-OR¹; R¹ - водородный атом или карбоксиблокирующая группа; n - 0 или 1; R³-OR⁴; а R⁴ - оксиблокирующая группа, как это в общем изложено в вышеуказанной работе Макгроу, с соединением формулы VIII

где каждым из R¹, которые могут быть как идентичными, так и различными, обозначает карбоксиблокирующую группу, а при углеродном атоме, обозначенном знаком *, имеется L-конфигурация, с использованием обычной технологии конденсации. Один из предпочтительных способов конденсации, когда R в формуле II соединения - водородный атом, изложен Тейлором и др. в описании к американскому патенту N 4686537. В другом варианте соединение формулы II вначале необходимо освободить от защитных групп, а затем проводить конденсацию.

После завершения реакции конденсации реакционный продукт галоидируют согласно известным процедурам (см., например, вышеуказанную публикацию Декимпа) с использованием соответствующего галоидирующего агента, в результате чего получают исходный материал формулы II, где Y - атом брома, хлора или иода, а значения символов R¹, n и * определены выше.

Класс особенно приемлемых галоидирующих агентов охватывает, например, элементарные бром, хлор и йод, N-бром-, N-хлор- и N-йодсукцинимид, N-бром-, N-хлор- и N-йодфталимид и тому подобное.

Таким образом, согласно этому первому аспекту настоящего изобретения предлагается способ получения 5-замещенных пирроло[2,3-d]пиримидинов формулы I

где
R¹ - либо водородные атомы, либо идентичные или различные карбоксиблокирующие группы; знаком * при углеродном атоме обозначена L-конфигурация; n - 0 или 1; а арильная группа, которая может быть замещенной; или их солей, при осуществлении которого предусмотрены
a) реакция 2,4-диамино-6-оксипиримидина с галоидальдегидом формулы II

где Y - атом брома, хлора или иода, а значения символов R, R¹, n и * определены выше, и
b) возможная реакция солеобразования реакционного продукта со стадии a).

Вышеуказанную реакцию проводят в среде приемлемого растворителя, к которым относятся, например спирты C₁-C₄, ацетонитрил, диметилформамид (ДМФ), диметилсульфоксид (ДМСО), диметилацетамид, N-метилпирролидинон, вода и их смеси. Предпочтительнее использовать смесь растворителей, которая включает в себя этанол и воду или ацетонитрил и воду.

Время, необходимое для завершения такой реакции, может легко определить любой обычный специалист в данной области. Момент завершения этой реакции можно определить с помощью хроматографического анализа, например, тонкослойного хроматографического анализа или хроматографического анализа под высоким давлением.

Температура, создаваемая на этой стадии, должна быть достаточной для того, чтобы обеспечить завершение такой реакции. Обычно температура, которая находится в интервале приблизительно от 25 до 100^o, предпочтительна, тогда как температура в интервале примерно от 70 до 90^oC является особенно предпочтительной.

Что касается прочего, то соединения формулы I, полученные при осуществлении предлагаемого способа, можно легко выделить согласно обычным процедурам, причем они не требуют никакой дополнительной очистки для последующего использования в качестве полупродуктов.

В соответствии с другим аспектом настоящего изобретения предлагается способ получения 5-замещенных пирроло[2,3-d] пиримидинов формулы I, при осуществлении которого предусмотрены
a) реакция галоидирующего агента с соединением формулы III

где значения символов R, R¹, n и * определены выше; а R² - заместитель формулы IV, V или VI



где R³-OR⁴, где R⁴ - оксиблокирующая группа; OCOR⁵, где R⁵ - алкил C₁-C₆, фенил, бензил или циклоалкил C₃-C₆; NR⁶R⁷, где каждый R⁶ и R⁷ независимо от другого - алкил C₁-C₆, циклоалкил C₃-C₆ или же совместно с азотным атомом и, возможно, кислородным атомом образуют 5- или 6-членную насыщенную моноциклическую группу, которая возможно замещена одним или двумя заместителями, выбираемыми из класса, который охватывает алкил C₁-C₄ и алкилоксирадикалы C₁-C₄; каждый из R⁸ и R⁹ независимо от другого - алкил C₁-C₄ или же совместно с кислородным атомом они образуют 5- или 6-членный насыщенный моноциклический радикал, который возможно замещен одним или двумя заместителями, выбранными из класса, который охватывает гидроксил, алкил C₁-C₄ и алкоксигруппу;
b) реакция реакционного продукта со стадии a) 2,4-диамино-6-оксипиримидин и
c) возможна реакция солеобразования реакционного продукта со стадии b).

В технике известны процедуры получения альдегида формулы III [где R² - заместитель формулы IV] (см., например, Тейлор и др. J. Med. Chem., 55, 3222 - 3227, 1990).

Тейлор описал процедуру получения соединений формулы III, где R-OR¹, а R¹ - метил, n - 0 или 1, хорошо известны, а R² - заместитель формулы IV. Альдегид формулы III можно дополнительно модифицировать с получением енаминов, енольных сложных эфиров, енольных простых эфиров [где R² - заместитель формулы V] и ацеталей [где R² - заместитель формулы VI] в соответствии с методами, которые известны в органической химии. Таким образом, исходный материал согласно данному аспекту настоящего изобретения включает в себя соединения формулы III в форме альдегидов, енольных простых эфиров, енольных сложных эфиров, енаминов и ацеталей.

Предпочтительными исходными соединениями формулы III являются енольные простые эфиры формулы III, где R-OR¹, R¹ - карбоксиблокирующая группа; R² - заместитель формулы V, R³-OR⁴, а R⁴ -оксиблокирующая группа (в особенности метил).

По другому варианту енольный простой эфир в качестве исходного материала формулы III может быть получен конденсацией вышеуказанного предпочтительного енольного простого эфира формулы III с соединением формулы VIII согласно вышеизложенному. Перед реакцией конденсации из соединений формулы III, где R-OR¹, а - R¹ - карбоксиблокирующая группа, предпочтительнее удалить блокирующие группы. Однако по предпочтительному варианту такую реакцию конденсации следует проводить после завершения данного процесса.

После выбора исходного соединения формулы III и его введения в соответствующий растворитель вначале проводят реакцию этого соединения с галоидирующим агентом, после чего проводят реакцию реакционного продукта с первой стадии с 2,4-диамино-6-оксипиримидином. Возможна реакция солеобразования реакционного продукта с этой первой стадии согласно обычным процедурам.

Соответствующие и предпочтительные растворители, температура, продолжительность реакции и процедурf выделения для осуществления данного способа идентичны тем, что описаны выше для циклизации соединений формулы II с получением соединений формулы I.

В ходе проведения процесса получения соединений формулы I согласно предлагаемому способу каждую стадию можно осуществлять независимо, причем реакционный продукт с каждой стадии выделяют и очищают или, что предпочтительнее? оставляют по месту получения в процессе, когда каждую из стадий способа последовательно осуществляют в одном и том же реакционном сосуде.

Соединения формулы I, где R-OR¹, а R¹ - водородный атом или карбоксиблокирующая группа, или же где а R¹ - идентичные или различные карбоксиблокирующие группы, представляют собой промежуточные продукты, которые могут быть использованы для получения, помимо прочих, терапевтически активных пирроло [2,3-d] пиримидиновых антифолатных агентов.

Когда R-OR¹, а R¹ - водородный атом или после предпочтительной стадии удаления защитных групп, когда R¹ - карбоксиблокирующая группа, вначале следует провести реакцию конденсации соединения формулы I с соединением вышеприведенной формулы VIII. В том случае, если после конденсации R¹ - водородный атом, продукт получают в конечной форме, которая готова для фармацевтического применения. В том случае, если R¹ - карбоксиблокирующая группа, такую блокирующую группу можно удалить, получив продукт, который представляет собой терапевтически активный антифолат.

Подобным же образом в том случае, когда в соединении формулы I и R¹ - водородный атом, оно является терапевтически активным как реакционный продукт осуществления способов настоящего изобретения. Между прочим, когда R¹ - карбоксиблокирующая группа, указанное соединение также следует выделять согласно стандартным методам, получая терапевтически активный агент.

После получения терапевтически активных пирроло [2,3-d] пиримидиновых антифолатов конверсия в солевую форму позволяет получить в фармацевтическом отношении более приемлемые соединения.

Конкретные аспекты настоящего изобретения проиллюстрированы с помощью нижеследующих примеров, которыми его рамки не ограничены ни в коем случае.

Препаративный пример 1.

Метил-4(4-триметилсилилокси-3-бутенил)-бензоат
В смесь 3,65 г (17,7 ммоль) 4-(4-карбометоксифенил)-бутаналя с 3,43 г (21,2 ммоль) 1,1,1,3,3,3-гексаметилдисилазана в 177 мл хлористого метилена в атмосфере азота при температуре -15^oC в течение 2 мин добавили 3,89 г (19,5 ммоль) триметилсилилиодида. Смесь перемешивали в течение 10 мин, после чего ей дали нагреться до комнатной температуры. По истечении 2 ч избыток реагента "погасили" добавлением 100 мл воды. Слои разделили и органическую фазу высушили над сульфатом натрия. Вакуумным концентрированием удалили растворитель, получив 5,0 г метил-4-(4-триметилсилилокси-3-бутенил)-бензоата с достижением 100%-ного выхода продукта. Тонкослойный хроматографический анализ (ТХА) [кремнезем; гексан/этилацетат в соотношении 3 : 2] показал, что вышеуказанный продукт был практически чистым, а его температура кипения при остаточном давлении 0,12 торра составляла 170^oC.

¹H-ЯМР-спектрограмма (CDCl₃, δ) : 0,15 (с., 9H), 2,41 (к., 7,2 Гц, 2H), 2,69 (м., 2H), 3,89 (с., 3H), 4,47 (к., 7,2 Гц, 1H), 6,15 (м., 1H), 7,25 (д. , 8,2 Гц, 2H), 7,93 (д., 8,2 Гц, 2H);
¹³C ЯМР-спектрограмма (CDCl₃, δ) : 0,60, 25,0, 35,9, 51,8, 109,8, 128,4, 128,5, 129,6, 138,6, 148,0, 167,1; FDMS: 279 (90), 278 (M⁺, 100%), 280, 251, 226. Тонкослойной хроматографической обработкой [кремнезем; гексан/этилацетат в соотношении 3:2] получили аналитический образец.

Данные элементарного анализа для C₁₅H₂₂O₃Si
Вычислено: C - 64,71% H - 7,96%
Найдено: C - 64,90% H - 8,05%
Препаративный пример 2
2-бром-4-(4-карбометоксифенил) бутанал
К 4,46 г (16 ммоль) метил-4-(4-триметилсилилокси-3-бутенил)-бензоата, полученного в эксперименте примера получения 1, в 26 мл четыреххлористого углерода при температуре -20^oC осторожно добавили в течение 4 ч 2,56 г (16 ммоль) брома в 16 мл четыреххлористого углерода. Смеси затем дали нагреться до комнатной температуры с последующей ее декантацией с небольшого количества нерастворимого материала. В вакууме с помощью роторного испарителя удалили растворитель, получив 4,60 г 2-бром-4-(4-карбометоксифенил)-бутаналя. Хроматографическая очистка [кремнезем; гексан/этилацетат в соотношении 7:3] вышеуказанного продукта позволила получить 4,0 г вещества с достижением выхода 87,8%.

¹H-ЯМР-спектрограмма (CDCl₃, δ) : 2,24 (м., 1H), 2,36 (м., 1H), 2,81 (м. , 1H), 2,91 (м., 1H), 3,90 (с., 3H), 4,16 (м., 1H), 7,27 (д., 8,2 Гц, 2H), 7,97 (д., 8,2 Гц, 2H), 9,46 (д., 2,1 Гц, 1H);
¹³C ЯМР-спектрограмма (CDCl₃, δ) : 32,5, 32,7, 51,7, 54,3, 128,3, 128,4, 129,8, 145,0, 166,6, 192,0.

Пример 3
-4-(2-[2-амино-4-оксо-3,7-дигидропирроло (2,3-d) пиримидин-5-ил] - этил)-бензойная кислота, метиловый эфир
К 1,69 г (13,4 ммоль) 2,4-диамино-6-оксипиримидина с 2,20 г (26,8 ммоль) ацетата натрия и 20 мл воды при температуре 80^oC в течение 5 мин добавили 3,82 г (13,4 ммоль) 2-бром-4-(4-карбометоксифенил)-бутаналя, полученного в эксперименте примера получения 2, в 7 мл метанола. Смесь выдержали при температуре 80^oC в течение 5 мин, охладили до комнатной температуры и перемешали в течение 30 мин. Далее эту смесь профильтровали, промыли водой и высушили в течение 18 ч при температуре 50^oC и остаточном давлении 10 торр, получив 3,32 г метилового эфира 4-(2-[2-амино-4-оксо-3,7-дигидропирроло[2,3-d] пиримидин-5-ил] этил) -бензойной кислоты (температура плавления - свыше 220^oC) с достижением выхода продукта 79,4%. Оставшийся фильтрат охладили до температуры 5^oC и профильтровали, дополнительно получив 0,069 г вышеуказанного продукта, благодаря чему выход продукта довели до 81%.

¹H-ЯМР-спектрограмма (DМСО-d₆, δ) : 2,80 (м., 2H), 2,93 (м., 2H), 3,78 (c. , 3H), 5,97 (с., 2H), 6,26 (д., 2,0 Гц, 1H), 7,28 (д., 8,2 Гц, 2H), 7,80 (д. , 8,2 Гц, 2H), 10,12 (с., 1H), 10,58 (с., 1H); FDMS 312 (M⁺); данные элементарного анализа для C₁₆H₁₆N₄O₃:
Вычислено: C - 61,53% H - 5,16 N - 17,94%
Найдено: C - 61,79% H - 5,33 N - 17,66%.

Препаративный пример 4
-4-[2-(2-амино-4,7-дигидро-4-оксо-3H-пирроло(2,3-d) пиримидин-5-ил)-этил]-бензойная кислота
Смесь 3,17 (10,15 ммоль) метилового эфира 4-[2-(2-амино-4,7 -дигидро-4-оксо-3H-пирроло (2,3-d)пиримидин-5-ил)-этил] - бензойной кислоты, полученного в эксперименте примера 3, в 30 мл 1н. водного раствора гидрата окиси натрия и 5 мл метанола перемешали в течение 20 ч при комнатной температуре. Добавили 5 мл тетрагидрофурана и конечную смесь перемешали в течение 4 ч с последующей нейтрализацией 30 мл 1н. водного раствора соляной кислоты. Выпавший в осадок материал отделили фильтрованием, промыли 20 мл воды и высушили в вакуумном сушильном шкафу при температуре 50^oC, в результате чего получили 2,65 г вышеуказанного продукта с достижением 87%-ного выхода.

¹H-ЯМР-спектрограмма (DМСО-d₆, δ); : 2,45 (м., 2H), 2,91 (м., 2H), 5,99 (с. , 2H), 6,27 (д., 2,0 Гц, 1H), 7,27 (д., 8,2 Гц, 2H), 7,79 (д., 8,2 Гц, 2H), 10,14 (с., 1H), 10,59 (д., 2,0 Гц, 1H), 13,2 (шир.с., 1H).

Препаративный пример 5
Диметиловый эфир N-[4-{2-(2-амино-4,7-дигидро-4-оксо-3H-пирроло (2,3-d) пиримидин-5-ил)-этил}-бензоил]-глутаминовой кислоты.

К 2,00 г (6,74 ммоль (4-[2-(2-амино-4,7-дигидро-4-оксо-3H-пирроло(2,3-d)пиримидин-5-ил) -этил] -бензойной кислоты, полученной в эксперименте примера получения 4, в 23 мл диметилформамида в токе азота добавили 1,40 г (13,8 ммоль) N-метилморфолина и 1,17 г (6,70 ммоль) 4-хлор-2,6-диметокситриазина. За процессом образования этого активнодействующего сложного эфира следили по результатам жидкостного хроматографического анализа аликвот под высоким давлением. После 40-минутной выдержки при комнатной температуре добавили 0,70 г (6,9 ммоль) N-метилморфолина с последующим добавлением 1,56 (7,37 ммоль) гидрохлорида диметилового эфира L-глутаминовой кислоты. По истечении 30 мин ЖХВД-анализ показал практически полное завершение расхода активнодействующего эфира и образование диметилового эфира N-[4-{2-(2-амино-4,7-дигидро-4-оксо-3H-пирроло (2,3-d) пиримидин-5-ил)-этил}-бензоил]-глутаминовой кислоты. Реакционную смесь профильтровали и вышеуказанный продукт сконцентрировали, а затем очистили хроматографической обработкой на кремнеземе, элюируя смесью метанола с хлористым метиленом в соотношении 1:4. Собрали чистые фракции, получив 1,30 г вышеуказанного продукта с достижением его выхода 43%.

1H-ЯМР-спектрограмма (DМСО-d₆, δ) : 2,01 (м., 2H), 2,40 (т., 7,4 Гц, 2H), 2,80 (м., 2H), 2,92 (м., 2H), 3,53 (с., 3H), 3,59 (с., 3H), 4,40 (м., 1H), 5,99. (с., 2H), 6,26 (д., 1,9 Гц, 1H), 7,23 (д., 8,2 Гц, 2H), 7,73 (д., 8,2 Гц, 2H), 8,62 (д., 7,5 Гц, 1H), 10,15 (с., 1H), 10,57 (д., 1,9 Гц, 1H).

Препаративный пример 6
-N-[4-{ 2-(2-амино-4,7-дигидро-4-оксо-3H-пирроло (2,3-d) пиримидин-5-ил) этил}-бензоил]-глутаминовая кислота
Смесь 0,50 г (1,1 ммоль) диметилового эфира N-[4-{2-(2-амино-4,7-дигидро-4-оксо-3H-пирроло(2,3-d) пиримидин-5-ил)этил} -бензоил] -глутаминовой кислоты, полученного в эксперименте примера получения 5, с 3,3 мл 2н. водного раствора гидрата окиси натрия перемешивали при комнатной температуре 48 ч и нейтрализовали до величины pH, равной 5, добавлением 6М водного раствора соляной кислоты. Осадок отфильтровали, промыли водой и высушили, получив 0,277 г вышеуказанного продукта с достижением 59%-ного выхода.

Препаративный пример 7
-1-метокси-4-(4-карбоксиметилфенил)-1-бутен
К 3,77 г (11 ммоль) метоксиметилтрифенилфосфонийхлорида в 10 мл толуола при температуре 0^oC в токе азота в течение 20 мин добавили 11 мл (11 ммоль) 1М раствора трет.бутоксида калия в тетрагидрофуране. Образовавшийся раствор перемешивали в течение 10 мин, а затем в течение 15 мин добавили 1,92 г (10 ммоль) 3-(4- карбоксиметилфенил)-пропанола в 10 мл толуола. После перемешивания смеси в течение 20 мин. добавили 40 мл этилового эфира. Образовавшийся осадок отфильтровали пропусканием через диатомовую землю, собрали, промыли 20 мл воды, 20 мл насыщенного раствора хлорида натрия и высушили с помощью смеси сульфата натрия с насыщенным раствором хлорида натрия в соотношении 9: 1. В результате вакуумного концентрирования профильтрованного раствора и растирания осадка в гексане получили 1,72 г 1-метокси-4-(4-карбоксиметилфенил)-1-бутена. По завершении хроматографической обработки вышеуказанного продукта (силикагель; смесь гексана с этилацетатом в соотношении 8: 2) получили 1,0 г смеси геометрических изомеров [Z/E - 6:4] с достижением общего 45%-ного выхода продукта с температурой кипения 140^oC под остаточным давлением 0,07 торра.

¹H-ЯМР-спектрограмма (CDCl₃, σ) : 2,23 (д.к., 1,0, 8,1 Гц), 2,40 (д.к., 1,3, 8,0 Гц), общие 2H, 2,70 (т., 8,1 Гц), 2,71 (т., 8,0 Гц), общие 2H, 3,48 (с. ), 3,55 (с. ), общие 3H, 3,89 (с.), 3,90 (с.), общие 3H, 4,32 (к., 6,2 Гц), 4,71 (д.т., 7,3, 12,6 Гц), общие 1H, 5,87 (д.т., 1,3, 6,2 Гц), 6,28 (д. т., 1,0, 12,6 Гц), общие 1H, 7,23 (д., 8,2 Гц), 7,27 (д., 8,2 Гц), общие 1H, 7,94 (д., 8,2 Гц), 7,95 (д., 8,2 Гц), общие 2H;
¹³C-ЯМР-спектрограмма (CDCl₃, σ) : 25,2, 29,3, 36,0, 37,4, 51,9, 56,0, 59,5, 101,8, 101,9, 105,5, 127,9, 128,0, 128,5, 128,6, 129,6, 129,7, 146,9, 147,5, 147,9, 148,0, 167,1, 167,2.

ИК-спектрограмма (CHCl₃): 3025, 2954, 1716, 1656, 1610, 1437, 1284, 1112 см^-1; масс-спектрограмма (FD): m/z - 220 (M⁺).

Пример 8
Метиловый эфир 4-(2-[2-амино-4(1H)-оксо-4,7-дигидропирроло (2,3-d) пиримидин-5-ил]-этил)-бензойной кислоты
К 1,10 г (5,0 ммоль) 1-метокси-4-(4-карбоксиметилфенил)-1 -бутена, полученного в эксперименте примера получения 7, в 10 мл ацетонитрила добавили 10 мл воды. Образовавшуюся смесь охладили до температуры 5^oC и добавили в нее 0,80 г (1,0 экв.) брома. Добавили 0,63 г (5,0 ммоль) 2,4-диамино-6-оксипиримидина и смесь перемешивали с нагреванием до температуры 80^oC. По истечении 40 мин смесь охладили до комнатной температуры и добавили в нее 20 мл воды. Величину pH образовавшегося шлама довели до 6 добавлением 5н. раствора гидрата окиси натрия. Выпавший осадок собрали фильтрованием, промыли водой и высушили при температуре 50^oC и остаточном давлении 10 торр, получив 1,44 г вышеуказанного продукта с достижением 92%-ного выхода.

Пример 9
Диэтиловый эфир 4-(2-[2-амино-4(1H)-оксо-4,7-дигидропирроло (2,3-d) пиримидин-5-ил]-этил)-бензоил-L-глутаминовой кислоты
К 300 мг (0,766 ммоль) диэтилового эфира N-4-(1-метокси-1- бутен-4-ил)-бензоил-L-глутаминовой кислоты, 3,0 мл ацетонитрила и 3,0 мл воды, которые перемешивали при комнатной температуре, добавили 122 мг (0,766 ммоль) брома в 1 мл ацетонитрила. В приготовленный раствор добавили 188 мг (2,3 ммоль) ацетата натрия и 0,97 мг (0,77 ммоль) 2,4-диамино-6-оксипиримидина и конечную смесь выдержали при температуре 60^oC в течение 18 ч, охладили, а затем сконцентрировали в вакууме. Полученный остаток растерли с использованием 2 порций по 5 мл воды и декантировали раствор. Добавили 5 мл этанола и 440 мг (2,3 ммоль) моногидрата п-толуолсульфокислоты. После кипячения с обратным холодильником в течение 20 мин смесь охладили до комнатной температуры и профильтровали. Осадок промыли 2 порциями по 5 мл этанола и высушили, получив п-толуолсульфонатную соль соединения, указанного в заголовке примера.

Настоящее изобретение описано подробно, включая сюда предпочтительные варианты его воплощения. Однако необходимо иметь в виду, что при изучении вышеприведенного описания любой специалист в данной области может вносить в варианты любые модификации и/или усовершенствования, не выходя при этом за рамки и существо настоящего изобретения, которые определены в нижеследующей формуле изобретения.

Предлагается способ получения новых 5-замещенных пирроло (2,3-α)пиримидинов, которые могут быть использованы в качестве полупродуктов для получения пирроло (2,3-α)пиримидиновых противоопухолевых агентов или самих противоопухолевых агентов. Способ получения вышеуказанных соединений общей формулы (I) где R¹ - водород или одинаковые или разные карбоксизащитные группы; знаком * обозначена L-конфигурация при углеродном атоме; n=0 или 1; а арильная группа, которая может быть замещена, или из солей, заключается в том, что включает: а)взаимодействие 2,4-диамино-6-оксипиримидина с галоидальдегидом формулы (II), где Y - атом брома, хлора или йода, а определены выше; и в) необязательно реакцию солеобразования реакционного продукта со стадии а). Описывается еще один способ получения соединения формулы (I). Способ осуществляют в одном и том же сосуде. 2 с. и 8 з.п. ф-лы.

1. Способ получения 5-замещенных пирроло(2,3-d)пиримидинов формулы I

где R = -NHC*H(COOR¹)CH₂CH₂COOR¹ или OR¹;
R¹ - водород или одинаковые или различные карбоксизащитные группы;
знаком * обозначена h-конфигурация при углеродном атоме;
n = 0 или 1;
арильная группа, которая может быть замещена,
или их солей, отличающийся тем, что включает а) взаимодействие 2,4-диамино-6-оксипиримидина с галоидальдегидом формулы II

где Y - атом брома, хлора или йода,
R, R¹, n и * определены выше,
и в) необязательно реакцию солеобразования реакционного продукта со стадии а). 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что R = OR¹, R¹ - водород или карбоксизащитная группа, n = 0, 1,4-фенилен. 3. Способ по п.2, отличающийся тем, что Y - атом хлора или брома. 4. Способ по п.1, отличающийся тем, что R представляет собой фрагмент NHC*H(COOR¹)CH₂CH₂COOR¹, R¹ - водород или одинаковые или различные карбоксизащитные группы, n = 0, 1,4-фенилен. 5. Способ по п.4, отличающийся тем, что Y - атом хлора или брома. 6. Способ получения 5-замещенных пирроло(2,3-d)пиримидинов формулы I

где R представляет собой NHC*H(COOR¹)CH₂CH₂COOR¹ или OR¹;
R¹ - водород или одинаковые или различные карбоксизащитные группы;
знаком * обозначена h-конфигурация при углеродном атоме;
n = 0 или 1;
арильная группа, которая может быть замещена,
или их солей, отличающийся тем, что он включает а) взаимодействие галоидирующего агента с соединением формулы III
R²-(CH₂)_n-CH₂-A-COR,
где R, R¹, n и * определены выше, а R² - заместитель формулы IV
R³-CH=Ch-CH₂,
где R³-OR⁴,
R⁴ - гидроксизащитная группа; OCOR⁵, где R⁵ - алкил(C₁ - С₆), фенил, бензил или циклоалкил C₃ - С₆, NR⁶R⁷, где R⁶ и R⁷ независимо представляют собой алкил C₁ - С₆, циклоалкил C₃ - С₆ или же вместе с атомом азота, необязательно с атомом кислорода образуют 5- или 6-членный насыщенный моноциклический радикал, который необязательно замещен одним или двумя заместителями, выбираемыми из группы, состоящей из (C₁ - С₄)алкила и (C₁ - С₄)алкокси;
в) взаимодействие реакционного продукта со стадии а) с 2,4-диамино-6-оксипиримидином и с) необязательно реакцию солеобразования реакционного продукта со стадии в). 7. Способ по п.6, отличающийся тем, что R = OR¹, R¹ - водород или карбоксизащитная группа; R² - заместитель формулы (IV) R³-CH=CH-CH₂; R³ = OR⁴, R⁴ - гидроксизащитная группа; n = 0 и 1,4фенилен. 8. Способ по п.7, отличающийся тем, что галогенирующий агент представляет собой бром или хлор. 9. Способ по п.6, отличающийся тем, что R представляет собой фрагмент NHC*H(COOR¹)CH₂CH₂COOR¹, каждый R¹ - водород или одинаковые или различные карбоксизащитные группы; R² - заместитель формулы (IV) R³-CH=CH-CH₂; R³ = OR⁴, R⁴ - гидроксизащитная группа; n = 0 и 1,4фенилен. 10. Способ по п.9, отличающийся тем, что галогенирующий агент представляет собой бром или хлор.

Приоритет по пунктам:
25.09.92 - по пп.1 - 5, кроме Y - йод;
24.05.93 - по пп.6 - 10.