Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в фармакологии и медицине.
К заболеваниям, сопровождающимся нарушением функций центральной нервной системы, относятся различные формы неврологической и психиатрической патологии.
Поскольку указанные заболевания значительно распространены, а арсенал средств для их лечения весьма ограничен, то поиски способов получения новых средств представляют собой существенный интерес.
Наиболее близким к заявляемому является способ получения лечебного средства при заболеваниях, сопровождающихся нарушением функций центральной нервной системы, заключающийся в использовании в качестве исходного сырья мозга животных (Рекламный проспект фирмы "Эбеве", Австрия, "Церебролизин").
Сырье подвергают гомогенизации, после чего производят экстракцию, предназначенную для извлечения растворимых в воде компонентов, затем предусмотрено освобождение полученного экстракта от белка. Активная фракция церебролизина представляет собой низкомолекулярные и биологически активные нейропептиды, которые способны преодолевать гематоэнцефалический барьер и непосредственно поступать к нервным клеткам.
Известный способ позволяет получить лечебное средство необходимого действия, однако природа и сочетание входящих в него активных нейропептидов не обеспечивает достаточно высокой активности средства и, кроме того, спектр действия полученного средства несколько ограничен.
Задачей настоящего изобретения является создание способа получения лечебного средства при заболеваниях, сопровождающихся нарушением функций центральной нервной системы, в котором за счет выбранной совокупности действий и режимов, направленных на получение пренатальных нейропептидов и расщепления неактивных высокомолекулярных предшественников достигается высокая активность получаемого средства и значительно расширяется спектр его действия.
Поставленная задача решается тем, что в способе получения лечебного средства при заболеваниях, сопровождающихся нарушением функций центральной нервной системы, заключающемся в гомогенизации ткани мозга животного, экстракции растворимых компонентов, согласно изобретению ткань мозга извлекают из эмбриона животного, а гомогенизированную массу разбавляют физиологическим раствором, после чего выдерживают ее до завершения процессов экстракции, а к раствору, полученному после удаления образовавшегося осадка, добавляют консервант в количестве не менее 0,05%, производят стерилизацию раствора фильтрованием и выдерживают его до завершения образования липидного слоя, а после его отделения оставшийся раствор выдерживают до прекращения процессов агрегации при температуре, не превышающей физиологическую, затем после отделения образовавшихся частиц раствор подвергают взаимодействию с иммобилизованным протеолитическим ферментом, причем режим взаимодействия устанавливают исходя из контрольной пробы получаемого средства и полученный раствор выдерживают в течение 30 суток при температуре не выше 10oC.
Использование в заявляемом способе в качестве исходного сырья мозговой ткани эмбриона животных, например крупного рогатого скота, связано с наличием в ней регуляторных пептидов пренатального периода, что определяет основные свойства получаемого средства.
После процесса гомогенизации полученную массу разбавляют физиологическим раствором и выдерживают до полной экстракции растворимых белков пептида. Условия указанной операции контролируют посредством определения полноты экстракции. В процессе экстракции образуется осадок нерастворимых частиц: белки, липиды, мембраны и др., осадок подлежит удалению.
Полученный после удаления осадка раствор содержит в себе белки, аминокислоты, липиды и представляет собой основу для получения целевого продукта.
Добавление к такому раствору консерванта в количестве не менее 0,05% обусловлено необходимостью противовирусного, противогрибкового и т.п. обеззараживания получаемого средства.
Образовавшуюся взвесь отделяют, поскольку она будет отрицательно влиять на последующие процессы способа. Отделение взвеси можно осуществлять, например, фильтрованием.
Стерилизованный раствор выдерживают при комнатной температуре до завершения образования липидного слоя (время выдержки обычно составляет 5 суток), липидный слой затем отделяют. Оставшийся раствор выдерживают при температуре, не превышающей физиологическую, поскольку при более высокой температуре термолабильные белки будут подвергаться денатурации. Время выдержки зависит от завершения процессов агрегации частиц, о чем можно судить по изменению прозрачности раствора.
Образовавшийся осадок отделяют, а раствор подвергают процессу протеолиза на колонне с иммобилизованным ферментом. Указанный процесс обеспечивает необходимую специфичность действия образовавшихся в результате расщепления пептидов.
Окончательным завершающимся этапом заявляемого способа является выдерживание полученного элюента обычно в течение 30 суток при температуре 10oC до его стабилизации, другими словами, выдерживание элюата при данных условиях препятствует процессам агрегации неактивных частиц.
Изобретение поясняется примерами конкретного выполнения.
Пример
Для получения заявляемого лечебного средства берут 100 г ткани головного мозга эмбриона свиньи, затем производят измельчение и гомогенизацию при температуре 8oC. К полученной массе добавляют 400 мл физраствора, охлажденного до температуры 10oC, массу выдерживают при перемешивании при температуре 8oC до завершения процессов экстракции растворимых белков в течение 36 часов. Образовавшийся осадок отделяют после центрифугирования при 3000 g в течение 1 часа при температуре 24oC.
К полученному экстракту по каплям добавляют, избегая вспенивания и перемешивая 50 мл 1%-ного раствора хинозола в физрастворе. Затем раствор стерилизуют фильтрованием, а образовавшийся раствор выдерживают в течение 5 суток при 20 - 25oC, после чего продолжают выдерживать раствор еще 1 час при температуре 50oC.
При таких условиях образуется липидный слой, который после охлаждения отделяют, а раствор подвергают фильтрации через фильтр 45 мкм.
Полученный фильтрат пропускают через колонку, заполненную носителем (например, сефарозой B) с иммобилизованным ферментом.
Скорость элюции устанавливают исходя из полноты расщепления высокомолекулярных компонентов. Содержание белка в полученном продукте составляет 12 мг/мл. Элюат стерилизуют в асептических условиях фильтрацией через фильтр 0,22 мкм.
Затем стерилизованный раствор выдерживают в течение 30 суток при температуре 10oC. После стерилизации путем последовательной фильтрации через фильтры 0,45 мкм и 0,22 мкм раствор ампулируют.
Полученное лечебное средство "Цереброкурин" представляет собой прозрачную жидкость светло-желтого цвета со слабым специфическим запахом. Заявляемое лечебное средство идентифицируют посредством снятия электрофорограммы.
Способ получения лечебного средства "Цереброкурин" достаточно прост в выполнении. Однако особенности совокупности всех его действий и режимов отделяют его высокую терапевтическую активность и специфичность, что подтверждено клиническими испытаниями.
Высокие фармацевтические свойства полученного препарата, заключающиеся в положительном влиянии на высшую нервную деятельность, в основе которых лежит активация энергопродуцирующей и белоксинтезирующей функции нервных клеток, повышение активности синаптического аппарата нейронов и др., определяют расширение диапазона заболеваний, на которые направлено получаемое предлагаемым решением средство.
Заявляемый способ позволил получить препарат "Цереброкурин", который имеет широкий диапазон действия, что положительно отличает его от известных препаратов такого же назначения.
"Цереброкурин" назначают при различных формах вегетососудистой дистонии и астеноневротического синдрома, хронических дициркуляторных и посттравматических энцефалопатиях, при явлениях острого нарушения мозгового кровообращения, старческом слабоумии сосудистого гнезда, при умственной отсталости различной этиологии, при ишемической болезни сердца и др.
название | год | авторы | номер документа |
---|---|---|---|
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛЕЧЕБНОГО СРЕДСТВА, РЕГУЛИРУЮЩЕГО ДИФФЕРЕНЦИАЦИЮ КЛЕТКИ | 1997 |
|
RU2128513C1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СРЕДСТВА "БИПЕКС" ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ НОВООБРАЗОВАНИЙ МОЗГА | 1997 |
|
RU2128510C1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОГО СРЕДСТВА | 1997 |
|
RU2128514C1 |
ЛЕКАРСТВЕННЫЙ ПРЕПАРАТ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ГЕМОРРАГИЧЕСКОГО И ИШЕМИЧЕСКОГО ИНСУЛЬТА И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ | 2011 |
|
RU2470650C1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОМПЛЕКСА БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ПОЛИПЕПТИДОВ ДЛЯ НОРМАЛИЗАЦИИ ФУНКЦИЙ ГОЛОВНОГО МОЗГА И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЕ СРЕДСТВО НА ЕГО ОСНОВЕ | 2004 |
|
RU2275924C2 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОГО КОМПЛЕКСА И БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫЙ БЕЛКОВО-ПОЛИПЕПТИДНЫЙ КОМПЛЕКС | 2010 |
|
RU2428196C1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИЗ ЖИВОТНОГО СЫРЬЯ КОМПЛЕКСА БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ПОЛИПЕПТИДОВ, НОРМАЛИЗУЮЩИХ ФУНКЦИИ ГОЛОВНОГО МОЗГА, ФАРМАКОЛОГИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ И ЕЕ ПРИМЕНЕНИЕ | 1996 |
|
RU2104702C1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БЕЛКОВОЙ ПИЩЕВОЙ ДОБАВКИ | 1996 |
|
RU2075944C1 |
СРЕДСТВО, НОРМАЛИЗУЮЩЕЕ ФУНКЦИИ ГОЛОВНОГО МОЗГА, И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ | 2006 |
|
RU2302871C1 |
БЕЛКОВО-ПОЛИПЕПТИДНЫЙ КОМПЛЕКС, ОБЛАДАЮЩИЙ АНТИГИПОКСИЧЕСКИМ, ТКАНЕСПЕЦИФИЧЕСКИМ РЕПАРАТИВНЫМ ДЕЙСТВИЕМ НА ЦЕНТРАЛЬНУЮ И ПЕРИФЕРИЧЕСКУЮ НЕРВНУЮ СИСТЕМУ, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ НА ЕГО ОСНОВЕ | 2011 |
|
RU2485132C2 |
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в фармакологии и медицине. Способ состоит в гомогенизации ткани мозга эмбриона животного в физиологическом растворе, выдерживании гомогенизированной массы до завершения процесса экстракции, в добавлении к раствору, полученному после удаления образовавшегося осадка консерванта, в стерилизации раствора фильтрованием и выдерживании его до завершения образования липидного слоя. Затем липидный слой отделяют, а раствор выдерживают до прекращения процесса агрегации, после чего образовавшиеся частицы отделяют, а раствор подвергают взаимодействию с иммобилизованным протеолитическим ферментом. Технический результат - полученный препарат имеет широкий диапазон действия, высокую терапевтическую активность и специфичность.
Способ получения лечебного средства при заболеваниях, сопровождающихся нарушением функций центральной нервной системы, заключающийся в гомогенизации ткани мозга животного, экстракта растворимых компонентов, отличающийся тем, что ткань мозга извлекают из эмбриона животного, а гомогенизированную массу разбавляют физиологическим раствором, после чего выдерживают ее до завершения процессов экстракции, а к раствору, полученному после удаления образовавшегося осадка, добавляют консервант в количестве не менее 0,5%, производят стерилизацию раствора фильтрованием и выдерживают его до завершения образования липидного слоя, а после его отделения оставшийся раствор выдерживают до прекращения процессов агрегации при температуре, не превышающей физиологическую, затем после отделения образовавшихся частиц раствор подвергают взаимодействию с иммобилизованным протеолитическим ферментом, причем режим взаимодействия устанавливают, исходя из контрольной пробы получаемого средства, и полученный раствор выдерживают в течение 30 суток при температуре не выше 10oC.
Печь для непрерывного получения сернистого натрия | 1921 |
|
SU1A1 |
RU 1298979, 01.11.84 | |||
Аппарат для очищения воды при помощи химических реактивов | 1917 |
|
SU2A1 |
RU 94035038, 10.07.96 | |||
Переносная печь для варки пищи и отопления в окопах, походных помещениях и т.п. | 1921 |
|
SU3A1 |
US 4067963, 10.01.78 | |||
Очаг для массовой варки пищи, выпечки хлеба и кипячения воды | 1921 |
|
SU4A1 |
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ АКТИВНЫХ ФОРМ ТУБЕРКУЛЕЗА ЛЕГКИХ | 2015 |
|
RU2599972C1 |
Кипятильник для воды | 1921 |
|
SU5A1 |
УСТРОЙСТВО ИЗМЕРЕНИЯ ГИДРОПЛОТНОСТИ ПЛУНЖЕРНЫХ ПАР | 2015 |
|
RU2578743C1 |
Приспособление для точного наложения листов бумаги при снятии оттисков | 1922 |
|
SU6A1 |
Способ получения продуктов горения высокого давления | 1925 |
|
SU4866A1 |
Авторы
Даты
1999-04-10—Публикация
1997-12-02—Подача