СПОСОБ ИЗГОТОВЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ПРЕПАРАТОВ ИЗ ЭМБРИОНАЛЬНЫХ ТКАНЕЙ Российский патент 1999 года по МПК A61K35/48 

Описание патента на изобретение RU2132688C1

Изобретение относится к биохимической технологии получения на основе эмбриональных тканей биологически активных препаратов с фиксированными фармакологическими свойствами, несмотря на неопределенность их химического состава. Технологические процессы на основе изобретения могут быть использованы в фармацевтической промышленности для изготовления неспецифических био- (преимущественно цито- и наиболее предпочтительно иммуно-) корректоров и, в особенности, биостимуляторов широкого спектра действия.

Потребность в препаратах такого типа является массовой и систематически возрастает в связи с продолжающимся загрязнением природной среды ксенобиотиками (в том числе - радионуклидами), появлением новых (типа ВИЧ) инфекций и существенным ослаблением физических нагрузок на большинство урбанизированного населения.

Поэтому технологические процессы изготовления указанных препаратов должны удовлетворять комплексу трудносовместимых требований. К важнейшим из них относятся:
пригодность для коррекции физиологического статуса человека в широком спектре возможных патологий и причин их возникновения, минимум противопоказаний к применению и доступность для медицинских учреждений и населения, зависящая преимущественно, во-первых, от производительности технологических процессов и затрат ресурсов на их осуществление и, во-вторых, от стабильности целевого продукта и соответственно его пригодности для длительного хранения с сохранением стерильности и фармакологических свойств.

Два первых требования могут быть в принципе выполнены при использовании эмбриональных тканей, взятых в основном из эмбрионов животных, в качестве общеизвестного и общепризнанного ныне источника биологически активных веществ широкого спектра действия.

Например, из заявки Франции 2413912 на группу изобретений "Лекарственные средства на основе зародыша и способ их получения" известен способ получения биологически активных средств на основе эмбриональной ткани, который предусматривает измельчение и гомогенизацию мягких тканей эмбрионов животных в смеси с физиологическим раствором.

Биологически активные средства, полученные описанным простейшим способом, были применены на сельскохозяйственных животных, что позволило повысить их продуктивность на 7-15% в сравнении с контролем.

Однако обремененность иммунодепрессантами и высокомолекулярными антигенами, допустимая при использовании этих средств в животноводстве, не позволила получить заметный иммуностимулирующий эффект у людей. Кроме того, биохимический состав описанного препарата существенно колеблется от партии к партии и потому он непригоден для длительного хранения.

Более совершенен способ получения биологически активных средств согласно Европейской заявке 0249563 на изобретение "Экстракты зародышевых тканей органов животных, пригодные для инъекции человеку". Этот способ наряду с измельчением и гомогенизацией мягких тканей эмбрионов животных предусматривает удаление нежелательных примесей при экстракции водорастворимых активных веществ.

Однако при этом в экстракт не переходят многие биологически активные вещества, что снижает стимулирующий эффект при использовании целевого продукта. Кроме того, экстракт подобно вышеуказанному препарату имеет биохимический состав, который существенно колеблется от партии к партии, что также отражается на стабильности его фармакологических свойств при длительном хранении.

Поэтому нередко прибегают к искусственным приемам воздействия на эмбриональную ткань в надежде повысить эффективность и стабильность целевых продуктов в качестве средств лечения и профилактики иммунной системы человека.

Из числа аналогов такого типа к предлагаемому изобретению наиболее близок способ изготовления биологически активных препаратов на основе эмбриональных тканей, известный из описания изобретения к патенту Украины 2164. Этот способ предусматривает:
измельчение мягких эмбриональных тканей,
их гомогенизацию в дисперсионной среде на основе воды до разрушения клеточных оболочек,
отделение (например, фильтрованием или центрифугированием) неразрушенных клеточных элементов,
гидролиз гомогената в присутствии консерванта при температуре 4-45oC в течение времени от двух суток до шести недель, причем тем дольше, чем ниже температура,
термообработку гидролизата при температуре 60-120oC до денатурации балластных веществ,
отделение денатурированных термолабильных веществ и выделение из гидролизата термостабильного целевого продукта со средней молекулярной массой менее 10 кДа путем фракционирования, выполняемого, например:
- ультрафильтрацией, или
- центрифугированием при ускорении свыше 1500 g в течение 20-40 мин, или
- диализом через полупроницаемую пленку и/или
- гельфильтрацией,
стерилизацию, разлив и укупорку препарата.

Целевым продуктом при этом служит супернатант, содержащий в качестве действующего начала смесь относительно низкомолекулярных термостабильных веществ неопределенного состава со средней молекулярной массой в пределах 0,7-10,0 кДа.

Однако описанный способ
обладает тем более низкой производительностью, чем ниже температура гидролиза,
связан с существенными энергозатратами и, что особенно важно,
не обеспечивает стабильность качества целевого продукта из-за принципиальной невозможности надежного управления гидролизом. Поэтому в гидролизате всегда присутствует весьма сложная смесь химически и биохимически нестабильных продуктов преимущественно белковой природы. Лишь некоторые из них, но далеко не все, удается удалить термообработкой гидролизата и осаждением денатурированных белков, которые негативно влияют на стойкость целевого продукта при хранении и которые (даже при молекулярной массе менее 10 кДа) способны оказывать непредвиденное побочное действие.

Соответственно в основу изобретения положена задача путем усовершенствования приемов подготовки сырья и уточнения условий его переработки создать такой способ изготовления биологически активных препаратов из эмбриональных тканей, который обеспечивал бы существенное повышение стабильности фармакологических свойств целевого продукта при повышении производительности процесса и сокращении затрат на его осуществление.

Поставленная задача решена тем, что в способе изготовления биологически активных препаратов из эмбриональных тканей, включающем измельчение мягких эмбриональных тканей, их гомогенизацию в дисперсионной среде на основе воды до разрушения клеточных оболочек, отделение неразрушенных клеточных элементов, фракционирование супернатанта с выделением целевого продукта со средней молекулярной массой менее 10 кДа, стерилизацию, разлив и укупорку препарата, согласно изобретению целевой продукт выделяют и одновременно с выделением стерилизуют фракционированием супернатанта по молекулярной массе непосредственно после отделения неразрушенных клеточных элементов.

Исключение гидролиза и изменение порядка выполнения оставшихся операций обуславливают не только существенное повышение производительности процесса и сокращение затрат, что благоприятно сказывается на доступности целевого продукта для широких слоев населения экологически опасных территорий, но и практически исключает появление в целевом продукте неконтролируемых примесей, возникших при гидролизе сырья, и тем самым стабилизирует его фармакологические свойства.

Первое дополнительное отличие состоит в том, что супернатант после отделения неразрушенных клеточных элементов одновременно фракционируют и стерилизуют ультрафильтрацией, которая представляет собой один из наиболее эффективных процессов выделения из сложных смесей веществ с заданным максимальным значением молекулярной массы и исключает бактериальное заражение целевого продукта при его разливе и укупорке в стерильных условиях.

Второе дополнительное отличие, которое может быть использовано согласно изобретению как независимо от первого, так и в сочетании с первым дополнительным отличием, состоит в том, что эмбрионы перед измельчением мягких тканей замораживают и размораживают. Уже было установлено, что охлаждение до примерно +4oC и выдерживание при этой температуре изолированных мягких тканей теплокровных животных способствует подавлению в них процессов синтеза, сохранению достаточной активности окислительно-восстановительных процессов и интенсификации катаболических процессов (см., например: Тканевая терапия/коллектив авторов/. Под ред. Н.А.Пучковской- Киев: ЗДОРОВ'Я, 1975, с. 5, абзац 6-й сверху; с. 6, абзац 5-й сверху; с.12). Однако нам (по имеющимся у нас данным - впервые) удалось экспериментально установить, что замораживание эмбрионов, то есть их перевод в твердое состояние, и размораживание перед отделением мягких тканей для последующего измельчения способствует, как можно увидеть далее в примерах, заметному росту биологической активности целевого продукта.

Третье дополнительное (ко второму) отличие состоит в том, что эмбрионы замораживают до температуры не ниже -80oC, поскольку замораживание до более низких температур, не влияя на повышение биологической активности целевого продукта, существенно удлиняет размораживание и снижает производительность процесса.

Четвертое дополнительное (к третьему) отличие состоит в том, что эмбрионы замораживают постепенно, то есть при плавном понижении температуры. Это также способствует повышению активности целевого продукта.

Пятое дополнительное отличие, которое может быть использовано согласно изобретению как независимо от любого из указанных выше дополнительных отличий, так и в сочетании с любым из них или с их произвольной совокупностью, состоит в том, что в качестве целевого продукта выделяют вещества со средней молекулярной массой менее 5,0 кДа. Как показали исследования, целевой продукт с указанной характеристикой обладает вполне достаточной (иммуно) стимулирующей активностью при практически полном отсутствии побочных реакций.

Далее сущность изобретения поясняется
описанием предложенного способа в общем виде,
перечнем и нормативными значениями контролируемых показателей качества целевого продукта;
описанием метода сравнительных испытаний биологической активности целевого продукта и
конкретными примерами осуществления изобретательского замысла и результатами оценки целевых продуктов.

Предложенный способ в общем виде предусматривает:
отбор эмбрионов сельскохозяйственных животных (обычно у коров и, возможно, овец или свиней в первой половине беременности) в убойных цехах предприятий мясной промышленности,
предварительную обработку отобранных эмбрионов, в том числе
- обязательную обработку, то есть отделение плаценты, обескровливание (обычно через неперевязанную пуповину), обмывку проточной водой для удаления следов околоплодной жидкости и крови и помещение обескровленных и обмытых эмбрионов в холодильную камеру с температурой не выше 12oC (обычно на срок не более суток) и
- возможную дополнительную обработку: замораживание (в частности, ступенчатое) до температуры ниже 0oC (но предпочтительно не ниже -80oC) эмбрионов после обескровливания и обмывки и их размораживание;
отделение головы, копыт, желчного пузыря (с осторожностью), желудка и кишечника;
отделение мягких тканей от костей;
измельчение мягких тканей (обычно на куттерах);
гомогенизацию измельченных мягких тканей в дисперсионной среде на основе воды (обычно в изотоническом растворе) до разрушения клеточных оболочек (с использованием аппаратов типа "коллоидная мельница");
отделение неразрушенных клеточных элементов и элементов волокнистых тканей (например: центрифугированием при 1-80 тыс. об/мин, или фильтрованием, как правило, на вакуумном нутч-фильтре);
одновременное выделение целевого продукта со средней молекулярной массой менее 10 (предпочтительно менее 5) кДа и его стерилизацию фракционированием супернатанта с использованием средств, служащих "бактериальными фильтрами" (предпочтительно с использованием волоконных ультрафильтрационных установок);
разлив и укупорку целевого продукта (обычно - в стеклянные ампулы) в стерильных условиях.

В случаях использования апирогенной дистиллированной воды в качестве дисперсионной среды для приготовления гомогената в целевой продукт перед разливом добавляют хлорид натрия до достижения изотонической точки.

В целевой продукт, закладываемый на длительное хранение, может быть добавлен подходящий консервант, например хинозол, в достаточном для достижения антисептического эффекта и фармакологически приемлемом количестве, в частности около 0,8-1,0 г/л. Кроме того, такой продукт может быть дополнительно стерилизован любым из известных способов.

В целевом продукте в соответствии с утвержденной в 1994 г. Фармакопейным комитетом Министерства здравоохранения Украины Временной фармакопейной статьей ВФС 42У "Эрбисол для инъекций (Erbisolum pro injectionibus)" контролируют методами, предусмотренными "Государственной фармакопеей" и обозначаемой далее ГФ:
прозрачность (препарат должен выдерживать сравнение с эталонным раствором 1; ГФ XI, вып. 1, с. 198);
цветность (окраска препарата не должна быть интенсивнее эталона 3а; ГФ XI, вып. 1, с. 194), причем препарат без консервантов практически бесцветен, а при использовании хинозола имеет желто-коричневый цвет;
pH от 6,5 до 7,5 (при потенциометрическом определении; ГФ XI, вып. 1, с. 113);
механические включения (препарат должен выдерживать требования, указанные во Временной инструкции по контролю инъекционных растворов на механические включения И 42-3-85);
стерильность (препарат должен быть стерилен при определении методом мембранной фильтрации; ГФ XI, вып. 2, с. 187);
токсичность (препарат должен быть нетоксичен in vivo при внутривенном введении лабораторным животным в дозе 0,5 мл/кг и наблюдении в течение 48 часов; ГФ XI, вып. 2, с. 182);
пирогенность (препарат должен быть апирогенен in vivo при внутривенном введении лабораторным животным в дозе 0,5 мл/кг смеси, приготовленной в соотношении по объему 1/1 из испытуемого образца и 0,9% изотонического раствора хлорида натрия для инъекций, при наблюдении в течение 48 часов; ГФ XI, вып. 2, с. 183);
содержание белков (при обработке 1 мл препарата 1 мл 5% раствора трихлоруксусной кислоты и перемешивании раствор должен оставаться прозрачным, что свидетельствует об отсутствии белков);
содержание пептидов в 1 мл препарата - от 1,0 до 3,0 мг/мл (по биуретовой реакции);
сухой остаток - от 14 до 20 мг/мл (при высушивании до постоянной массы 10 мл препарата при температуре от 100 до 105oC);
биологическую активность, которая при определении описанным ниже методом должна быть не ниже 3 единиц.

Биологическую активность полученного вещества определяют по поглощению красителя (нитросиний тетразолий) макрофагами под влиянием целевого продукта. Для этого из брюшной полости мышей или крыс вымывают физиологическим или буферным раствором клеточный пул, содержащий до 30% фагоцитирующих клеток. Полученную смесь вносят во флаконы из стекла с плоским дном и инкубируют в термостате при 37oC не менее 1 часа. После этого флаконы трижды промывают физиологическим или буферным раствором для удаления неприлипших клеток.

Далее вносят в одну часть флаконов порцию жидкости, состоящей соответственно из 0,5/0,5/1 частей физиологического раствора, целевого продукта и 0,1% раствора красителя, а в другую часть флаконов - порцию жидкости, состоящей соответственно из 1/1 частей физиологического раствора и 0,1% раствора красителя. Клетки с указанной экспериментальной и контрольной смесями инкубируют в течение 1 часа, затем снова трижды промывают для удаления остатков красителя. Во флаконы с отмытыми клетками добавляют диметилсульфоксид и 2М едкую щелочь в соотношении 1:1. Через 10-15 мин измеряют оптическую плотность раствора при длине волны 630 нм.

Биологическую активность оценивают соотношением оптических плотностей в эксперименте и контроле.

Пример 1.

Для получения целевого продукта были взяты эмбрионы свиней и крупного рогатого скота (далее - КРС).

После обязательной предварительной обработки: отделения плаценты, обескровливания, обмывки проточной водой для удаления следов околоплодной жидкости и крови и суточного выдерживания обескровленных и обмытых эмбрионов в холодильной камере при температуре около 4oC отделили головы, копыта, желчные пузыри, части желудочно-кишечного тракта и мягкие ткани от костей.

Затем мягкие ткани измельчили на куттере с отверстиями в решетке диаметром 3 мм и фарш дважды пропустили через коллоидную мельницу для гомогенизации с использованием апирогенной дистиллированной воды в качестве дисперсионной среды.

Гомогенат отцентрифугировали в течение 15 мин при 3 тыс. об/мин для отделения неразрушенных клеточных элементов и элементов волокнистых тканей, осадок передали на утилизацию, а в надосадочную жидкость добавили хлорид натрия до его конечной концентрации 0,9% и смесь подвергли стерилизующей ультрафильтрации для выделения целевого продукта со средней молекулярной массой менее 10 кДа.

Далее описанным выше методом определили биологическую активность, которая для продукта, полученного из свиных эмбрионов, оказалась в 5,0 раз, а из эмбрионов КРС - в 4,0 раза выше контроля.

После контроля прозрачности, цветности, pH, механических включений, стерильности, токсичности, пирогенности и содержания, белков, пептидов и сухого остатка, которые соответствовали нормам вышеупомянутой Временной фармакопейной статьи ВФС 42У "Эрбисол для инъекций", целевой продукт в стерильных условиях разлили и укупорили в стеклянные ампулы.

Пример 2.

Для получения целевого продукта были взяты свежие и замороженные эмбрионы КРС.

Целевой продукт из свежих эмбрионов (ЦПСЭ) был получен в основном так, как описано в примере 1, с теми отличиями, что перед отделением мягких тканей их не выдерживали в холодильнике, и что при стерилизующей ультрафильтрации в качестве целевого продукта были выделены вещества со средней молекулярной массой до 5 кДа.

Для получения целевого продукта из замороженных эмбрионов (ЦПЗЭ) способ, описанный в примере 1, был дополнен такими операциями, как замораживание обескровленных и обмытых эмбрионов в скороморозильной камере до температуры около -40oC, выдерживание при этой температуре в течение 48 часов и их самопроизвольное размораживание при комнатной температуре. Как и в примере 1, при стерилизующей ультрафильтрации в качестве целевого продукта были выделены вещества со средней молекулярной массой до 10 кДа.

Биологическая активность ЦПСЭ оказалась в 7,8, а ЦПЗЭ - в 10,8 раза выше контроля.

Пример 3.

Для получения целевого продукта были взяты эмбрионы КРС, постепенно (при понижении температуры со скоростью -2 oC/час) замороженные до -80oC в морозильнике, снабженном регулятором температуры, а затем разморожены при комнатной температуре.

ЦПЗЭ был получен, как указано в примере 2, с использованием при гомогенизации пригодного для инъекций 0,9% изотонического раствора хлорида натрия.

Биологическая активность ЦПЗЭ оказалась в 11,0 раз выше контроля.

Пример 4.

Для получения целевого продукта были взяты эмбрионы КРС, постепенно (при понижении температуры со скоростью -2,5 oC/час) замороженные до -90oC в морозильнике, снабженном регулятором температуры, а затем разморожены при комнатной температуре.

ЦПЗЭ был получен, как указано в примере 2, с использованием при гомогенизации пригодного для инъекций 0,9% изотонического раствора хлорида натрия.

Биологическая активность ЦПЗЭ оказалась в 10,8 раз выше контроля.

Пример 5.

Для получения целевого продукта были взяты эмбрионы КРС, из которых описанным выше способом-прототипом с использованием гидролиза гомогената в присутствии консерванта (хинозола) при температуре 40oC в течение трех суток, термообработки гидролизата при температуре 120oC до денатурации балластных веществ, отделения денатурированных термолабильных веществ и ультрафильтрации гидролизата получен целевой продукт со средней молекулярной массой менее 10 кДа.

Его биологическая активность была всего в 2,3 раза выше контроля.

Промышленная применимость предложенного способа обоснована как стабильностью показателей качества (и особенно биологической активности, которая во всех случаях более чем в 4 раза выше контроля), так и сокращением расхода энергии в среднем на 15%, и возможностью выполнения всего технологического цикла не более чем за 60 часов (обычно - за сутки).

Похожие патенты RU2132688C1

название год авторы номер документа
БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОЕ СРЕДСТВО, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ, ПРЕПАРАТ, СОДЕРЖАЩИЙ УКАЗАННОЕ СРЕДСТВО, И СПОСОБ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ПРЕПАРАТА 1992
  • Николаенко А.Н.
  • Шорох Д.Б.
  • Шевченко А.А.
RU2041715C1
БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОЕ СРЕДСТВО, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ПРЕПАРАТ, СОДЕРЖАЩИЙ УКАЗАННОЕ СРЕДСТВО, И СПОСОБ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ПРЕПАРАТА 1992
  • Николаенко Александр Николаевич
RU2041717C1
Средство, обладающее антиоксидантным и нейропротекторным свойствами 2018
  • Тимченко Людмила Дмитриевна
  • Ржепаковский Игорь Владимирович
  • Арешидзе Давид Александрович
  • Писков Сергей Иванович
  • Аванесян Светлана Суреновна
  • Кузнецова Ярославна Александровна
  • Лионова Светлана Сергеевна
  • Блажнова Галина Николаевна
  • Сизоненко Марина Николаевна
  • Бондарева Надежда Ивановна
  • Козлова Мария Александровна
  • Вакулин Валерий Николаевич
RU2686098C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ОСНОВНОГО ИНГИБИТОРА ПРОТЕАЗ ИЗ ЛЕГКОГО И ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА 1994
  • Пак В.Н.
  • Овечкина Л.Г.
RU2088241C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТА "ИНГИПРОЛ" 2001
  • Пак В.Н.
  • Пак Н.А.
RU2197252C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ХОЛЕСТЕРОЛЭСТЕРАЗЫ, ТРИПСИНА, ДЕЗОКСИРИБОНУКЛЕАЗЫ И РИБОНУКЛЕАЗЫ ИЗ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА 2005
  • Толстикова Татьяна Генриховна
  • Бочков Денис Владимирович
RU2311455C2
БЕЛКОВО-ПОЛИПЕПТИДНЫЙ КОМПЛЕКС, ОБЛАДАЮЩИЙ АНТИГИПОКСИЧЕСКИМ, ТКАНЕСПЕЦИФИЧЕСКИМ РЕПАРАТИВНЫМ ДЕЙСТВИЕМ НА ЦЕНТРАЛЬНУЮ И ПЕРИФЕРИЧЕСКУЮ НЕРВНУЮ СИСТЕМУ, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ НА ЕГО ОСНОВЕ 2011
  • Назаренко Анна Борисовна
  • Соколов Михаил Анатольевич
RU2485132C2
БЕЛКОВО-ПОЛИПЕПТИДНЫЙ КОМПЛЕКС (БПК), ОБЛАДАЮЩИЙ ТКАНЕСПЕЦИФИЧЕСКИМ РЕПАРАТИВНЫМ И ОМОЛАЖИВАЮЩИМ ДЕЙСТВИЕМ НА КОЖНУЮ ТКАНЬ, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БЕЛКОВО-ПОЛИПЕПТИДНОГО КОМПЛЕКСА, ОБЛАДАЮЩЕГО ТКАНЕСПЕЦИФИЧЕСКИМ РЕПАРАТИВНЫМ И ОМОЛАЖИВАЮЩИМ ДЕЙСТВИЕМ НА КОЖНУЮ ТКАНЬ, И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ НА ОСНОВЕ БПК, ОБЛАДАЮЩАЯ АНТИГИПОКСИЧЕСКИМ, ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИМ, ТКАНЕСПЕЦИФИЧЕСКИМ РЕПАРАТИВНЫМ ДЕЙСТВИЕМ НА КОЖНУЮ ТКАНЬ И СЛИЗИСТЫЕ ОБОЛОЧКИ, С ОМОЛАЖИВАЮЩИМ ЭФФЕКТОМ 2011
  • Назаренко Анна Борисовна
  • Соколов Михаил Анатольевич
RU2460736C1
БЕЛКОВО-ПОЛИПЕПТИДНЫЙ КОМПЛЕКС, ОБЛАДАЮЩИЙ ТКАНЕСПЕЦИФИЧЕСКИМ РЕГЕНЕРАТИВНО-РЕПАРАТИВНЫМ И ОМОЛАЖИВАЮЩИМ ДЕЙСТВИЕМ НА КОЖНУЮ ТКАНЬ, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ НА ЕГО ОСНОВЕ 2011
  • Назаренко Анна Борисовна
  • Соколов Михаил Анатольевич
RU2485133C2
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОГО КОМПЛЕКСА И БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫЙ БЕЛКОВО-ПОЛИПЕПТИДНЫЙ КОМПЛЕКС 2010
  • Назаренко Анна Борисовна
  • Соколов Михаил Анатольевич
  • Жукова Ирина Николаевна
RU2428196C1

Реферат патента 1999 года СПОСОБ ИЗГОТОВЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ПРЕПАРАТОВ ИЗ ЭМБРИОНАЛЬНЫХ ТКАНЕЙ

Изобретение относится к биохимической технологии получения на основе эмбриональных тканей биологически активных препаратов. Способ включает измельчение мягких эмбриональных тканей, их гомогенизацию в дисперсионной среде на основе воды до разрушения клеточных оболочек, отделение неразрушенных клеточных элементов, фракционирование супернатанта с выделением целевого продукта со средней мол. м. менее 10 кДа, стерилизацию, разлив и укупорку препарата, при этом целевой продукт выделяют и одновременно стерилизуют фракционированием супернатанта по молекулярной массе непосредственно после отделения неразрушенных клеточных элементов. Технический результат - повышение стабильности фармакологических свойств целевого продукта и производительности процесса и сокращение затрат. 5 з.п. ф-лы.

Формула изобретения RU 2 132 688 C1

1. Способ изготовления биологически активных препаратов из эмбриональных тканей, включающий измельчение мягких эмбриональных тканей, их гомогенизацию в дисперсионной среде на основе воды до разрушения клеточных оболочек, отделение неразрушенных клеточных элементов, фракционирование супернатанта с выделением целевого продукта со средней мол. м. менее 10 кДа, стерилизацию, разлив и укупорку препарата, отличающийся тем, что целевой продукт выделяют и одновременно с выделением стерилизуют фракционированием супернатанта по молекулярной массе непосредственно после отделения неразрушенных клеточных элементов. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что супернатант после отделения неразрушенных клеточных элементов одновременно фракционируют и стерилизуют ультрафильтрацией. 3. Способ по п.1, отличающийся тем, что эмбрионы перед измельчением мягких тканей замораживают и размораживают. 4. Способ по п.3, отличающийся тем, что эмбрионы замораживают до температуры не ниже -80oC. 5. Способ по п. 4, отличающийся тем, что эмбрионы замораживают постепенно. 6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве целевого продукта выделяют вещества со средней мол. м. менее 5,0 кДа.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 1999 года RU2132688C1

Печь для непрерывного получения сернистого натрия 1921
  • Настюков А.М.
  • Настюков К.И.
SU1A1
БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОЕ СРЕДСТВО, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ, ПРЕПАРАТ, СОДЕРЖАЩИЙ УКАЗАННОЕ СРЕДСТВО, И СПОСОБ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ПРЕПАРАТА 1992
  • Николаенко А.Н.
  • Шорох Д.Б.
  • Шевченко А.А.
RU2041715C1
Аппарат для очищения воды при помощи химических реактивов 1917
  • Гордон И.Д.
SU2A1
БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОЕ СРЕДСТВО, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ПРЕПАРАТ, СОДЕРЖАЩИЙ УКАЗАННОЕ СРЕДСТВО, И СПОСОБ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ПРЕПАРАТА 1992
  • Николаенко Александр Николаевич
RU2041717C1
Переносная печь для варки пищи и отопления в окопах, походных помещениях и т.п. 1921
  • Богач Б.И.
SU3A1
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ АКТИВНЫХ ФОРМ ТУБЕРКУЛЕЗА ЛЕГКИХ 2015
  • Даниловских Михаил Геннадьевич
  • Карпов Анатолий Васильевич
  • Максимовский Алексей Саватьевич
  • Винник Людмила Ивановна
RU2599972C1
Очаг для массовой варки пищи, выпечки хлеба и кипячения воды 1921
  • Богач Б.И.
SU4A1
УСТРОЙСТВО ИЗМЕРЕНИЯ ГИДРОПЛОТНОСТИ ПЛУНЖЕРНЫХ ПАР 2015
  • Варнаков Дмитрий Валерьевич
  • Варнаков Валерий Валентинович
  • Платонов Александр Викторович
  • Варнакова Екатерина Алексеевна
  • Дежаткин Михаил Евгеньевич
RU2578743C1

RU 2 132 688 C1

Авторы

Шорох Дмитрий Бориславович

Писоцкий Антон Анатольевич

Шевченко Александр Александрович

Волощенко Юрий Васильевич

Диденко Наталья Юрьевна

Даты

1999-07-10Публикация

1996-07-29Подача