СПОСОБ САНАЦИИ ЖЕНЩИН С МАССИВНОЙ МИКРОБНОЙ ОБСЕМЕНЕННОСТЬЮ ГРУДНОГО МОЛОКА Российский патент 1999 года по МПК A61K35/74 

Изобретение относится к области медицины, а именно к педиатрии, и может быть использовано для антибактериальной обработки молочных желез у женщин, переболевших любой формой мастита либо различными инфекционно-воспалительными заболеваниями с локализацией на молочной железе или вне ее (трещины сосков, эндометрит, флебит, острые кишечные заболевания, пиелонефрит) после клинического выздоровления, а также у практически здоровых женщин с массивной микробной обсемененностью грудного молока.

В последние годы заметно повысилась роль различных условно- патогенных возбудителей как причины возникновения кишечных расстройств у детей первых месяцев жизни. Ведущее место среди них принадлежит стафилококку. Кишечные поражения при стафилококковой инфекции у детей раннего возраста обусловливаются чаще всего видом Staphilococcus aureus, иногда S. epidermidis. Источником инфекции для новорожденных могут являться постоянные носители стафилококка и, в первую очередь, мать, особенно при наличии у нее различных гнойно-воспалительных заболеваний стафилококковой этиологии (мастит, эндометрит и т.д.). Установлено, что грудное молоко, массивно обсемененное условно-патогенными микроорганизмами (УПМ), обеспечивает пищевой путь передачи инфекции ребенку, а также активирует контактный механизм передачи. В последние годы показана возможность выделения стафилококков (и, в первую очередь, S.aureus) в массивном количестве из грудного молока не только у женщин, переболевших маститом или другими инфекционно-воспалительными заболеваниями с локализацией на молочной железе или вне ее после клинического выздоровления, но и у практически здоровых женщин /1, 2, 3/.

Известны способы санации бактерионосителей патогенного стафилококка, в т. ч. кормящих матерей (в частности, в родильных домах), путем подкожного, внутримышечного или перорального введения лекарственного препарата в организм пациентки. Так, известны способы санации с использованием стафилококкового анатоксина (вводят подкожно, курс от 1 до 9 инъекций в возрастающих дозах); стафилококкового бактериофага (вводят подкожно или внутримышечно в возрастающих дозах, курс от 3-5 до 7-8 инъекций препарата); антибиотиков, например, оксациллина натриевой соли, ампициллина тригидрата, полимиксина М сульфата, цепорина и т. д. в фармакопейно принятых дозировках и режимах (преимущественно перорально). Используют также комбинированное применение стафилококкового бактериофага с антибиотиками /4, 5, 6/. Известен также способ санации путем применения 1%-ного спиртового раствора хлорофиллипта, который вводят в организм матери перорально по 25-30 капель 3 раза в день в течение 10-14 дней с последующим повторным бактериологическим анализом молока, на основании которого решается вопрос о возможности возобновления грудного вскармливания /1, 2/.

Однако рассматриваемые способы-аналоги не обеспечивают достигаемого при использовании изобретения технического результата. Это обусловлено тем, что указанные препараты, по-видимому, обладают ограниченной способностью проникновения во внутренние полости молочных желез - отводящие молоко протоки и молочные "цистерны", где локализуется значительное количество УПМ, в частности, S. aureus, что в ряде случаев не позволяет создать в этих областях концентраций препарата, необходимых и достаточных для снижения уровня обсемененности грудного молока до нормы. Высокая видоспецифичность анатоксина и бактериофага обусловливает их относительно низкую эффективность при комплексном массивном заражении. Антибиотики, оказывая неспецифическое антибактериальное воздействие на организм в целом, одновременно негативно влияют на микробный гомеостаз кормящей матери (в частности, на кишечную микрофлору), а также на показатели иммунитета, что, в свою очередь, может опосредованно негативно воздействовать на колонизационную резистентность ребенка, вызывая кишечные расстройства, а также на его иммунобиологическую реактивность. Подобные негативные воздействия могут значительно усиливаться в случаях заражения антибиотикоустойчивыми штаммами микроорганизмов, когда возникает необходимость корректировать курс лечения, меняя антибиотик или увеличивая его дозу. Кроме того, все указанные препараты при их приеме могут в ряде случаев вызывать побочные эффекты в виде аллергических реакций, тошноты, рвоты и т. д. Все это исключает возможность грудного вскармливания в процессе санации.

Наиболее близким к заявленному решению по совокупности существенных признаков является способ санации бактерионосителей патогенного стафилококка, в т. ч. женщин с массивной микробной обсемененностью грудного молока, путем наружного применения стафилококкового бактериофага жидкого в виде ежедневных примочек или влажных повязок на область поражения в дозе 5 мл и более в зависимости от индивидуальных особенностей клинического случая /5/.

Однако способ-прототип также не может обеспечить достижение технического результата изобретения. Это обусловлено тем, что стафилококковый бактериофаг, по-видимому, обладает (как было указано выше) ограниченной способностью проникновения в труднодоступные внутренние полости молочных желез, что при его наружном применении (так же, как и в случае его подкожного или внутримышечного введения) не позволяет непосредственно воздействовать на очаги инфекции, расположенные в выводных протоках и молочных "цистернах", что приводит к относительной длительности курса лечения. Кроме того, при наружном применении стафилококкового бактериофага возможны местные аллергические реакции, которые проявляются болезненностью, гиперемией и отечностью. Все это (включая отмеченную выше относительно низкую эффективность бактериофага при комплексном массивном заражении) исключает возможность грудного вскармливания до окончания курса санации.

Задачей изобретения является создание способа санации женщин с массивной микробной обсемененностью грудного молока, обеспечивающего оптимальные условия для продуцирования и непосредственного доступа в выводные протоки и "цистерны" молочных желез полифункционального комплекса регуляторных метаболитов, обладающего угнетающим действием в отношении УПМ, в частности стафилококков, и неспецифическим анабиозстимулирующим действием на клетки микроорганизмов, в сочетании с условиями для максимальной пролонгированной изоляции УПМ от кислорода при отсутствии негативных воздействий как на организм в целом, так и на микробный гомеостаз кормящей матери и ребенка.

Поставленная задача решается тем, что в способе санации женщин с массивной микробной обсемененностью грудного молока, включающем аппликации лекарственного препарата на область поражения, согласно изобретению перед аппликациями лекарственного препарата проводят расслабляющий массаж молочной железы в течение 3-10 мин. В качестве лекарственного препарата используют суспензию микроорганизмов нормальной микрофлоры кишечника, находящихся преимущественно в активных фазах роста (т.е. в лаг-фазе или экспоненциальной фазе /7/), причем суспензия дополнительно содержит 1-8 мас.% микробиологической защитной потенциально пленкообразующей среды. Аппликации суспензии осуществляют на область соска и ареолы молочной железы с экспозицией 30-40 мин, после чего поверхность кожи выслушивают. В качестве микроорганизмов нормальной микрофлоры кишечника используют в основном бифидобактерии или лактобактерии. В качестве защитных сред, способных образовывать при высыхании защитный слой (пленку), используют стандартные микробиологические среды, применяемые при дегидратации микроорганизмов указанных видов, например, сухое обезжиренное молоко (среда N 1) или среду, содержащую 72-90% лактозы, 2-6% декстрана, 2-6% тиомочевины и 2-6% аскорбиновой кислоты (среда N 2). Препарат наносится на кожу в дозах, позволяющих получить наличие микробных клеток в концентрации не менее 10⁶ клеток на см² кожи. Возможно применение в качестве лекарственного препарата промышленно выпускаемых биологических препаратов, получаемых из микробов - представителей нормальной микрофлоры кишечника, так называемых "эубиотиков" /5, 8, 9/, при условии, что в них содержится защитная среда указанного типа в необходимых концентрациях, или возможно применение указанных препаратов после дополнительного введения защитной среды данного типа и доведения ее концентрации до необходимых величин. В качестве эубиотиков целесообразно использование бифидумбактерина или лактобактерина, которые вводят в количестве 2,5-5 доз препарата. После высушивания поверхности кожи дополнительно проводят тонизирующий массаж молочной железы. Процедуру санации осуществляют 2 раза в день (утром и вечером) в течение 5-7 дней.

Для выбора оптимального содержания защитной среды в суспензии микроорганизмов было исследовано влияние различных концентраций защитных сред в суспензии культуры Bifidobacterium bifidum на рост культуры S. aureus. Для этого 5 мл суспензии 4-х часовой культуры B. bifidum N 791, выращенной на среде Блаурок /10/, центрифугировали при 15000 об/мин в течение 15 мин. К полученному концентрату клеток добавляли водный раствор защитной среды N 1 или N 2 до содержания в конечном продукте 10⁷ клеток/мл B. bifidum и 0,005-0,12 г защитной среды на мл суспензии. Посев культуры S. aureus производили из суспензии ее физиологическим раствором при разведении 1:100 (0,1) на желточно-солевой агар с добавкой 10% по весу суспензии клеток B. bifidum, содержащей различное количество защитной среды, разлитый в чашки Петри. Подсчет колоний на чашке производили через 48 ч инкубации при 37,5^oC. В зависимости от колониеобразования определяли титр стафилококка.

Результаты представлены в таблице 1.

Из данных таблицы 1 видно, что оптимальным является содержание защитной среды в количестве 1-8 мас.%. При низких концентрациях защитных сред (менее 1 мас. %) отсутствует возможность образования изолирующей пленки. Повышение содержания защитных сред в суспензии свыше 8 мас.% не только не приводит к усилению угнетающего действия бифидобактерий на S. aureus, но может даже способствовать его снижению вследствие повышенной вязкости, которая может препятствовать распространению клеток бифидобактерий и регуляторных метаболитов. Кроме того, при использовании суспензий с повышенным содержанием защитных сред наблюдались субъективные негативные кожные ощущения у пациенток.

Для выбора оптимальной концентрации суспензии микрорганизмов для аппликаций было исследовано влияние различных концентраций на эффективность санации. С этой целью была проведена санация с использованием заявленного способа у 160 практически здоровых женщин в возрасте от 17 до 36 лет с уровнем обсемененности грудного молока S. aureus 5 • 10³ КОЕ/мл. При этом женщины были распределены на 4 группы (по 40 человек), в каждой из которых для аппликаций использовали различные препараты. Каждая из групп включала 4 подгруппы (по 10 человек), в каждой из которых для аппликаций использовали различные дозы одного и того же препарата. Экспозиция аппликаций во всех группах составляла 35 мин. Аппликации проводились с помощью стерильных марлевых салфеток с площадью поверхности разового использования 0,1-0,3 дм².

1, 2 группы - аппликации суспензией 6-ти часовой культуры B. bifidum, штамм 791, выращенной на питательном бульоне с добавлением NaCl /10/, содержащей 5 мас.% защитной среды N 1 (1 группа) или N 2 (2 группа) в дозах, обеспечивающих концентрации 10⁵, 10⁶, 10⁷, 10⁸ клеток микроорганизмов на 1 см² кожи (1-4 подгруппы 1-ой группы и 5-8 подгруппы 2-ой группы);
3, 4 группы - аппликации суспензиями препаратов бифидумбактерина (3-я группа) и лактобактерина (4-я группа), растворенных в воде из расчета 1 ; 2,5 ; 5 и 7,5 доз препарата (при содержании в 1 дозе не менее 10⁸ - 10⁹ живых микробных клеток) в 5 мл воды (9-12 и 13-16 подгруппы соответственно).

Результаты санации показали, что аппликации суспензиями микроорганизмов в дозах, обеспечивающих концентрации 10⁶ и более клеток на 1 см² кожи, позволяли достигнуть положительный результат санации (снижение обсемененности грудного молока S. aureus до уровня менее 250 КОЕ/мл) в 80-90% случаев, тогда как при концентрациях менее 10⁶ клеток на 1 см² кожи положительный результат наблюдали только в 10-20% случаев. Установлено также, что при использовании промышленно выпускаемых препаратов - бифидумбактерина и лактобактерина оптимальной является суспензия, содержащая 2,5-5 доз препарата (положительный результат санации у 80-90% женщин). Уменьшение концентрации суспензии приводило к снижению эффективности санации (при 1 дозе эффективность составляла 10-20%), а при увеличении концентрации до 7,5 доз препарата показатели эффективности санации оставались на прежнем уровне.

Для выбора оптимальной экспозиции аппликаций было исследовано влияние временных показателей на эффективность санации и на состояние кожи соска и ареолы после проведения аппликации. С этой целью была проведена санация с использованием заявленного способа у 180 практически здоровых женщин в возрасте от 17 до 36 лет с уровнем обсемененности грудного молока S. aureus 5 • 10³ КОЕ/мл. При этом женщины были распределены на 4 группы (по 60 человек), в каждой из которых для аппликаций использовали различные препараты в одних и тех же концентрациях. Каждая из групп включала 4 подгруппы (по 10 человек), в каждой из которых аппликации препарата проводили с разными экспозициями. Приспособления для аппликаций были аналогичны описанным выше.

1, 2 группы - аппликации суспензией 6-ти часовой культуры B.bifidum штамм 791, выращенной на питательном бульоне с добавлением NaCl /10/, содержащей 5 мас.% защитной среды N 1 (1-я группа) или N 2 (2-я группа), в дозах, обеспечивающих концентраций 10⁶ - 10⁷ клеток микроорганизмов на 1 см² кожи, при экспозиции 10, 20, 30, 40 50 и 60 мин (1-6 подгруппы 1-ой группы и 7-12 подгруппы 2-ой группы) ;
3, 4 группы - аппликации суспензиями препаратов бифидумбактерина (3-я группа) и лактобактерина (4-я группа), растворенных из расчета 5 доз препарата в 5 мл воды при экспозиции 10, 20, 30, 40, 50 и 60 мин (13-18 и 19-24 подгруппы соответственно).

Результаты санации показали, что экспозиция 30-40 мин обеспечивала положительный результат санации для всех использованных для аппликаций препаратов в 80-90% случаев при отсутствии негативных кожных реакций. Снижение временных показателей приводило к уменьшению эффективности санации (при экспозиции 20 мин положительный эффект наблюдался в 60-70% случаев, а при экспозиции 10 мин - в 10-30% случаев). Увеличение экспозиции свыше 40 мин не приводило к значимому повышению эффективности санации, однако, начиная с экспозиции 50 мин, в отдельных случаях (10-20%) наблюдались осложнения в виде мацерации кожи соска, причем частота негативных реакций возрастала с увеличением экспозиции.

Достижение обеспечиваемого изобретением технического результата обусловлено следующим. Известно, что в процессе развития бактериальные клетки выделяют в окружающую среду продукты своего обмена, в том числе вещества с регуляторными функциями. Заявленный способ основывается на использовании относительно нового направления практической микробиологии, а именно возможном применении метаболитов регуляторного действия, выделяемых клетками микроорганизмов при воздействии на них стрессовых факторов (термошок, радиация, обработка химическими агентами, дегидратация и т.д.). Известно, что многие штаммы микроорганизмов выделяют белковые токсины, называемые бактериоцинами (например, колицины - токсины, продуцируемые штаммами Echerichia coli), обладающие активностью только в отношении близкородственных штаммов, но, как правило, не действующие на культуру - продуцент данного токсина /7/. Известно, что бифидо- и лактобактерии, являющиеся представителями нормальной микрофлоры кишечника, обладают антагонистической активностью в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, вырабатывая разнообразные бактерицидные и бактериостатические вещества, в т.ч. вещества типа антибиотиков /11/. С помощью исследований закономерностей развития микробных культур (преимущественно культур E. coli) было доказано существование системы специфической аутометаболической регуляции развития микробных популяций, которая базируется на определяемом механизмами типа обратной связи продуцировании бактериальными клетками в окружающую среду веществ, способных оказывать как стимулирующее, так и ингибирующее действие на культуру-продуцент /12, 13/. Вместе с тем показано, что ряд аутометаболических факторов может обладать неспецифическим регуляторным действием в отношении микроорганизмов различных таксономических групп. В частности, это свойство использовано при разработке новой группы стимуляторов, где в качестве исходного материала при выделении последних используют либо супернатант клеток нативной культуры в процессе выращивания, либо супернатант клеток, предварительно подвергнутых воздействию нелетальных стрессовых факторов (слабое постоянное электрическое поле, термошок, перемещение из питательной среды в условия голодания, замораживание-оттаивание и т.п.) /14, 15/. Рассматривая потенциальные функции биорегуляторов различной природы, исходят из того, что они выделяются клетками микробов в целях поддержания численности популяции на определенном оптимальном для конкретных условий уровне, что обеспечивает, в том числе, и сохранение популяции в неблагоприятных условиях. При этом в зависимости от природы стрессового фактора, по-видимому, будут продуцироваться метаболиты различного функционального назначения, например, направленные на повышение мутагенной активности, на стимуляцию роста, на перевод клетки в неактивное, в частности, анабиотическое состояние. Преобладание метаболитов последней группы, по мнению авторов заявленного решения, наиболее вероятно в условиях нехватки ингредиентов, необходимых для нормальной жизнедеятельности микроорганизмов (воды, источников углерода, азота, специфических факторов роста и т. п. / 7/), что может быть обусловлено, в том числе и конкуренцией микроорганизмов. Одним из условий появления метаболитов этого типа является обезвоживание Следует отметить, что интенсивность выделения метаболитов во внеклеточную среду будет зависеть от функционального состояния клетки (фазы роста), интенсивности действия негативного фактора, природы клеток, наличия в околоклеточном пространстве защитных и иных добавок и т.д.

В процессе реализации предложенного способа осуществление массажа, расслабляющего гладкомышечную мускулатуру молочной железы, способствует расширению выводящих протоков и создает оптимальные условия для доступа активного начала лекарственного препарата во внутренние полости и каналы молочных желез (в т.ч. в молочные "цистерны"), где локализуется значительное количество УПМ, и, в первую очередь, стафилококков. При нанесении на кожу соска и ареолы достаточно концентрированной суспензии микроорганизмов (бифидо- и лактобактерий), находящихся в активной фазе роста, т.е. в стадии максимального выделения в окружающую среду ауторегуляторных метаболитов специфического действия, микробные клетки сорбируются как на поверхности кожи, так и в выводных протоках молочной железы. Однако после попадания микроорганизмов на кожу и во внутренние каналы происходит переход от благоприятных для развития клеток условий к неблагоприятным вследствие возникающей дегидратации, нехватки необходимых для роста популяции питательных ингредиентов, конкурентной борьбы с микроорганизмами других групп, в частности стафилококками. В этих условиях активная многочисленная микробная популяция суспензии, сорбированная как на коже, так и во внутренних каналах молочной железы, осуществляет залповый выброс полифункционального комплекса метаболитов (или, возможно, полифункциональных метаболитов), обладающих как бактерицидным действием в отношении конкурирующих видов, так и неспецифическим анабиозстимулирующим действием. Благодаря малым размерам эти метаболиты способны глубоко проникать по выводящим протокам молочных желез вплоть до молочных "цистерн", оказывая угнетающее воздействие и снижая численность популяции стафилококков, находящихся в организме в неактивной стационарной фазе развития.

Параллельно происходит высыхание (обезвоживание) суспензии с образованием на поверхности кожи и/или в выводящих протоках пленки, изолирующей стафилококки (являющиеся, как известно, факультативными анаэробами) от кислорода, и тем самым препятствующей их нормальной жизнедеятельности, что также способствует снижении численности их популяции. На микробные клетки лекарственного препарата рассматриваемый процесс оказывает гораздо менее выраженное негативное воздействие в связи с тем, что клетки поступают уже адаптированными к защитной среде, а также имеют большие (по сравнению со стафилококками) возможности для получения кислорода, т.к. располагаются в верхних слоях изолирующей пленки. Что касается бифидобактерий, то они (в отличие от стафилококков и лактобактерий, являющихся факультативными анаэробами) являются чистыми анаэробами, для развития которых кислород практически не нужен.

Еще одной функцией защитной среды является повышение прочности фиксации микробных клеток лекарственного препарата на коже и на стенках выводных протоков молочных желез. Это позволяет обеспечить активное действие препарата в течение по крайней мере 20-60 мин, пролонгируя тем самым санирующий режим, причем в течение всего этого времени практически исключается адаптация стафилококков к изменившимся условиям.

Комплексное действие перечисленных выше факторов обеспечивает максимальное подавление культуры стафилококков, в т.ч. и в труднодоступных внутренних областях молочной железы, в результате чего резко падает титр стафилококка в грудном молоке. Одновременно последнее обогащается как микроорганизмами, способствующими формировании у ребенка нормальной кишечной микрофлоры, так и метаболитами, стимулирующими рост благоприятной для ребенка микрофлоры и подавление УПМ. Все это позволяет осуществлять грудное вскармливание ребенка в течение всего курса санации. Проведение после аппликаций заявленными препаратами тонизирующего массажа, в результате которого происходит выброс молока, позволяет промыть выводные протоки и "цистерны" молочной железы, освобождая их как от части метаболитов, так и от погибших клеток микроорганизмов, и дополнительно снижает вероятность заражения ребенка стафилококками даже в первые дни лечения. Таким образом, заявленная совокупность действий позволяет повысить эффективность санации и избежать необходимости отмены грудного вскармливания ребенка до окончания курса санации. Кроме того, использование в предложенном способе в качестве лекарственных препаратов микроорганизмов, присущих нормальной микрофлоре кишечника человека, с физиологически обоснованными, безвредными для организма добавками в сочетании с разработанными авторами изобретения дозировками и режимами введения обусловливает отсутствие негативных воздействий как на организм кормящей матери в целом, так и на микробный гомеостаз матери и ребенка.

Способ осуществляют следующим образом. Перед процедурой грудь моют теплой кипяченой водой и насухо вытирают. Проводят расслабляющий массаж молочной железы. При этом осуществляют поглаживание молочной железы ладонью в медленном темпе (приблизительно 10-20 касаний в мин) по часовой стрелке, минуя ареолу, в течение приблизительно 1-3 мин (до появления легкой гиперемии кожной поверхности и повышения температуры на 0,3-0,5^oC). Затем производят растирание ладонью молочной железы в том же темпе по часовой стрелке в течение приблизительно 2-5 мин (до появления выраженной гиперемии кожной поверхности и повышения температуры кожи на 0,5-0,7^oC). Суспензией 2,5-6,5 часовой культуры бифидо- или лактобактерий в концентрации 10⁷-10⁹ клеток в 1 мл, содержащей 1-8 мас.% защитной среды N 1 (сухое обезжиренное молоко) или N 2 (72-90% лактозы, 2-6% декстрана, 2-6% тиомочевины и 2-6% аскорбиновой кислоты), либо взвесью ресуспендированных микробных клеток, полученной при растворении в воде готовых сухих препаратов - бифидумбактерина или лактобактерина (из расчета 2,5-5 доз препарата на 5 мл кипяченой воды) смачивают 4-х слойную марлевую салфетку (стерильную) в форме круга с величиной поверхности для разового использования 0,1-0,3 дм². Выбор дозы препарата в пределах заявленного интервала значений осуществляют индивидуально в зависимости от уровня микробной обсемененности грудного молока, иммунологической реактивности организма (по клиническим проявлениям) и целостности кожного покрова соска и ареолы. Пропитанную взвесью микробных клеток салфетку накладывают (через 1 - 2 мин после массажа) на сосок и ареолу молочной железы в виде аппликаций, плотно прижимая к поверхности груди. Поверх салфетки можно наложить компрессную или вощеную бумагу и закрепить ее повязкой вокруг торса. Экспозиция аппликации составляет 30-40 мин. После снятия салфетки грудь высушивают в течение 1-3 мин и проводят тонизирующий массаж молочной железы. При этом осуществляют последовательно поглаживание молочной железы ладонью в среднем темпе (с частотой приблизительно 25-40 касаний в мин) по часовой стрелке в течение приблизительно 0,5-2 мин (до появления легкой гиперемии кожной поверхности и повышения температуры кожи на 0,7 - 0,9^oC): затем - растирание ладонью молочной железы по часовой стрелке в том же темпе в течение приблизительно 2-5 мин (до появления выраженной гиперемии кожной поверхности и повышения температуры кожи на 0,9-1,2^oC); и наконец - разминание молочной железы двумя ладонями по часовой стрелке в том же темпе до появления первой порции молока (приблизительно в течение 2-7 мин). После окончания массажа грудь ополаскивают теплой кипяченой водой и насухо вытирают. Процедуру проводят 2 раза в день (утром и вечером) непосредственно перед кормлением ребенка. Продолжительность курса санации 5-7 дней.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1.

Кормящая мать С., 26 лет. Ребенок Саша С., 2,5 мес, находился на отделении кишечных инфекций Детской городской инфекционной больницы N 3 г. С.-Петербурга с диагнозом: Сальмонеллез. Получал естественное вскармливание.

При бактериологическом обследовании грудного молока матери на наличие УПМ, которое производили по общепринятым методикам /2/, был выделен S. aureus. Массивность обсеменения составляла 8 • 10⁷ КОЕ/мл.

Была проведена санация матери с использованием заявленного способа. При этом перед процедурой грудь обмыли теплой кипяченой водой и насухо вытерли. Провели расслабляющий массаж молочной железы, включающий: поглаживание молочной железы ладонью в медленном темпе (12 касаний в мин) по часовой стрелке, минуя ареолу, в течение 2,5 мин; растирание ладонью молочной железы в том же темпе по часовой стрелке в течение 3 мин. Суспензией 4-х часовой культуры B. bifidum 791 в концентрации 10⁷ клеток/мл, содержащей 1 мас.% защитной среды N 1, смачивали 4-х слойную марлевую стерильную салфетку в форме круга с величиной поверхности для разового использования 0,1 дм². Пропитанную взвесью микробных клеток салфетку накладывали (через 1 мин после массажа) на сосок и ареолу молочной железы в виде аппликации, плотно прижимая к поверхности груди. Поверх салфетки накладывали компрессную бумагу и закрепляли ее повязкой вокруг торса. Экспозиция аппликации составляла 30 мин. После снятия салфетки грудь высушивали в течение 1 мин, после чего проводили тонизирующий массаж молочной железы. При этом осуществляли последовательно поглаживание молочной железы ладонью в среднем темпе (с частотой 30 касаний в мин) по часовой стрелке в течение 1,5 мин, затем - растирание ладонью молочной железы по часовой стрелке в том же темпе в течение 2 мин ; и наконец - разминание молочной железы двумя ладонями по часовой стрелке в том же темпе в течение 2,5 мин (до появления первой порции молока). После окончания массажа грудь ополаскивали теплой кипяченой водой и насухо вытирали. Непосредственно после окончания процедуры производили кормление ребенка. Процедуру осуществляли 2 раза в день (утром и вечером) в течение 7 дней. В течение всего курса санации ребенок получал естественное вскармливание.

При повторном бактериологическом исследовании грудного молока (после окончания курса санации) высев S. aureus составил менее 250 КОЕ/мл (т.е. в соответствии с Методическими рекомендациями /2/ находился в пределах нормы). У ребенка наблюдалось улучшение общего состояния, снижение интоксикации, нормализация стула. Осложнений, побочных явлений у матери и ребенка отмечено не было.

Пример 2.

Кормящая мать К., 28 лет. Ребенок Веня К., 8 мес, находился на отделении кишечных инфекций ДГИБ N 3 с диагнозом: Дизентерия Зонне. Получал естественное вскармливание.

При бактериологическом исследовании грудного молока матери был выделен S. aureus, массивность обсеменения 1 •10⁶ КОЕ/мл.

Была проведена санация матери с помощью заявленного способа аналогично примеру 1. Расслабляющий массаж осуществляли в следующем режиме: поглаживание молочной железы с частотой 15 касаний в мин в течение 2 мин : растирание - в том же темпе в течение 3 мин. Для аппликаций использовали суспензию 6-ти часовой культуры B. bifidum N 791 в концентрации 10⁸ клеток/мл, содержащей 8 мас.% защитной среды N 1. Площадь поверхности марлевой салфетки 0,3 дм². Экспозиция аппликации 40 мин. После снятия салфетки грудь высушивали в течение 2 мин. Тонизирующий массаж осуществляли в следующем режиме: поглаживание молочной железы с частотой 35 касаний в мин в течение 2 мин; растирание - в том же темпе в течение 3 мин; разминание молочной железы в том же темпе в течение 4 мин (до появления первой порции молока). Продолжительность курса санации 6 дней.

При повторном бактериологическом обследовании грудного молока (после окончания курса санации) высев S. aureus составил 230 КОЕ/мл (в пределах нормы). У ребенка наблюдали улучшение общего состояния, снижение интоксикации, нормализацию стула. Осложнения, побочные явления у матери и ребенка отсутствовали.

Пример 3.

Кормящая мать С.. 25 лет. Ребенок Ира С., 2 мес, находилась на отделении кишечных инфекций ДГИБ N 3 с диагнозом: Сальмонеллез. Получала естественное вскармливание. Результаты бактериологического исследования грудного молока: выделен S. aureus, массивность обсеменения более 5 • 10⁴ КОЕ/мл.

Была проведена санация матери с помощью заявленного способа аналогично примеру 1. Расслабляющий массаж: поглаживание молочной железы с частотой 10 касаний в мин в течение 2 мин; растирание - в том же темпе в течение 3 мин. Для аппликаций использовали смесь ресуспендированных микробных клеток, полученную при растворении в воде готового препарата бифидумбактерина сухого (производитель: научно-производственное объединение "Биомед", концерн "Иммуноген", г. Пермь) из расчета 2,5 доз препарата на 5 мл кипяченой воды. Площадь поверхности марлевой салфетки 0,2 дм². Экспозиция аппликации 30 мин. После снятия салфетки грудь высушивали в течение 2 мин. Тонизирующий массаж: поглаживание молочной железы с частотой 25 касаний в мин в течение 1,5 мин; растирание - в том же темпе в течение 2,5 мин, разминание - в том же темпе в течение 7 мин (до появления первой порции молока). Продолжительность курса санации 7 дней.

При повторном бактериологическом исследовании грудного молока (после окончания курса санации) высев S. aureus составил менее 250 КОЕ/мл (в пределах нормы). У ребенка наблюдалось улучшение общего состояния, снижение интоксикации, нормализация стула. Осложнения, побочные явления у матери и ребенка отсутствовали.

Пример 4.

Кормящая мать Ф. , 36 лет. Ребенок Гена Ф., 3 мес, госпитализирован в клинику детских инфекций Санкт-Петербургской государственной педиатрической медицинской академии. Диагноз: Дизентерия Флекснера. Находясь в клинике, получал естественное вскармливание.

Результаты бактериологического исследования грудного молока матери: выявлен S. aureus в количестве более 1 • 10⁷ КОЕ/мл.

Была проведена санация матери с помощью заявленного способа аналогично примеру 1. Расслабляющий массаж: поглаживание молочной железы с частотой 20 касаний в мин ; растирание - в том же темпе в течение 4 мин. Для аппликаций использовали взвесь ресуспендированных микробных клеток, полученную при растворении 5 доз бифидумбактерина сухого аналогично примеру 3. Площадь поверхности марлевой салфетки 0,3 дм². Экспозиция аппликации 40 мин. После снятия салфетки грудь высушивали в течение 1 мин. Тонизирующий массаж: поглаживание молочной железы с частотой 35 касаний в мин в течение 2 мин: растирание - в том же темпе в течение 4 мин: разминание - в том же темпе в течение 3 мин (до появления первой порции молока). Продолжительность курса санации 6 дней.

При повторном бактериологическом обследовании грудного молока (после окончания курса санации) высев S. aureus составил 215 КОЕ/мл (в пределах нормы). У ребенка наблюдалось улучшение общего состояния, снижение интоксикации, нормализация стула. Осложнений, побочных явлений у матери и ребенка отмечено не было.

Пример 5.

Кормящая мать Л., 40 лет. Ребенок Федя Л., 3 мес, поступил на отделение кишечных инфекций ДГИБ N 3 с диагнозом: Острая кишечная инфекция неясной этиологии. Из анамнеза известно, что 2 месяца назад мать находилась на лечении в стационаре с диагнозом: Гнойный мастит. Вульвовагинит. Был проведен курс ампициллина тригидрата (10 дней перорально) и бриллиантового зеленого (местно). Выписана с клиническим выздоровлением.

При бактериологическом исследовании грудного молока матери выделен S. aureus в количестве 1 • 10⁹ КОЕ/мл.

Была проведена санация матери с помощью заявленного способа аналогично примеру 1. Расслабляющий массаж: поглаживание молочной железы с частотой 18 касаний в мин в течение 3 мин; растирание -в том же темпе в течение 5 мин. Для аппликаций использовали взвесь ресуспендированных клеток, полученную при растворении в воде готового препарата лактобактерина сухого (производитель: Горьковский НИИ эпидемиологии и микробиологии, г.Горький) из расчета 2,5 доз препарата на 5 мл кипяченой воды. Площадь поверхности марлевой салфетки 0,3 дм². Экспозиция аппликации 40 мин. После снятия салфетки грудь высушивали в течение 1 мин. Тонизирующий массаж: поглаживание молочной железы с частотой 40 касаний в мин в течение 0,5 мин; растирание - в том же темпе в течение 1 мин; разминание молочной железы - в том же темпе в течение 5 мин (до появления первой порции молока). Продолжительность курса санации 7 дней. В течение курса санации ребенок получал естественное вскармливание.

Повторное бактериологическое исследование грудного молока (после курса санации): рост колоний S. aureus отсутствует. У ребенка отмечено незначительное улучшение самочувствия, снижение интоксикации, урежение стула с 8-ми до 5-ти раз в сутки. Осложнений, побочных явлений у матери и ребенка не наблюдалось.

Пример 6.

Кормящая мать П., 23 года. Ребенок Гена П., 4 мес, находился на отделении кишечных инфекций ДГИБ N 3 с диагнозом: Дизентерия клинически.

Бактериологическое обследование грудного молока матери показало наличие S. aureus, массивность обсеменения 5 • 10³ КОЕ/мл.

Была проведена санация матери с помощью заявленного способа аналогично примеру 1. Расслабляющий массах: поглаживание молочной железы с частотой 10 касаний в мин в течение 1 мин, растирание - в том же темпе в течение 2 мин. Для аппликаций использовали взвесь ресуспендированных микробных клеток, полученную при растворении 5 доз лактобактерина сухого аналогично примеру 5. Площадь поверхности марлевой салфетки 0,1 дм². Экспозиция аппликации 30 мин. Высушивание груди в течение 2 мин. Тонизирующий массаж: поглаживание молочной железы с частотой 25 касаний в мин в течение 0,5 мин ; растирание - в том же темпе в течение 3 мин; разминание молочной железы - в том же темпе в течение 3,5 мин (до появления первой порции молока). Продолжительность курса санации 5 дней.

Повторное бактериологическое исследование грудного молока после курса санации: высев S. aureus составил менее 250 КОЕ/мл. У ребенка наблюдалось улучшение общего состояния, снижение интоксикации, нормализация стула. Осложнений, побочных явлений у матери и ребенка отмечено не было.

Заявленный способ был использован для проведения санации 107 практически здоровых женщин в возрасте от 17 до 40 лет с массивностью обсеменения грудного молока S. aureus, превышающей 1000 КОЕ/мл. При этом у 42 женщин санацию осуществляли с помощью бифидумбактерина, а у 65 женщин - с помощью лактобактерина. Санацию кормящих матерей-бактерионосителей проводили на базе клиники детских инфекций Санкт-Петербургской государственной педиатрической медицинской академии и Детской городской инфекционной больницы N 3 г. С. Петербурга. Эффективность санации оценивали путем бактериологического исследования грудного молока на стафилококк до и после курса санации. Выделение и идентификацию культуры стафилококка проводили по общепринятым методикам /2/. Результат санации расценивали как положительный при снижении массивности обсеменения грудного молока S. aureus до уровня менее 250 КОЕ/мл в соответствии с Методическими рекомендациями /2/. Кроме того, учитывали наличие или отсутствие у пациенток осложнений, побочных явлений при проведении санации. В связи с тем, что в течение всего курса санации заявленным способом отмены грудного вскармливания не производили, оценивали также наличие или отсутствие опосредованных негативных воздействий процедуры на организм ребенка.

Группу сравнения составили 43 женщины в возрасте от 17 до 37 лет, леченные с помощью оксациллина натриевой соли. Антибиотик вводили перорально в терапевтической дозе 0,5 г 4 раза в сутки в течение 5 дней /6/. В период лечения кормление ребенка грудью прекращали.

Результаты представлены в таблице 2.

Из данных таблицы 2 видно, что применение заявленного способа обеспечивает достижение положительного результата санации в среднем в 88,8% случаев при отсутствии у кормящих матерей каких-либо осложнений. При этом в процессе санации заявленным способом у детей с наличием кишечных проявлений стафилококковой инфекции (дисфункция стула, патологические примеси, неперевариваемость) в ряде случаев наблюдалось улучшение общего состояния, снижение интоксикации, нормализация функций кишечника. Каких-либо осложнений и побочных явлений санации у детей отмечено не было.

При использовании для санации антибиотика оксациллина при сопоставимой с заявленным способом эффективности (в среднем 88,4%), у пациенток наблюдались осложнения в виде аллергических реакций, тошноты, дисфункции кишечника в среднем в 20,9% случаев.

Таким образом, заявленный способ санации, обеспечивая высокую эффективность, соответствует при этом также физиологическим и экологическим критериям, т. к. функционирует в рамках современной медицины и экологии (в частности требований, касающихся необходимости снижения ксенобиотических нагрузок на людей).

Источники информации
1. Стафилококковая инфекция с поражениями кишечника у детей первых месяцев жизни: эпидемиология, диагностика, клиника, лечение. Методические рекомендации (Мин-во здравоохранения СССР, Гл. упр. лечеб-профилакт. помощи детям и матерям). - М.: Моск. обл. н-и клинич. ин-т, 1985.- с.3-4, 20
2. Методические рекомендации по бактериологическому контролю грудного молока (Мин-во здравоохранения СССР, Гл. упр. лечеб.- профилакт. помощи детям и матерям).- М.:Б.И., 1984.- 31 с.

3. Будаговская С. Н., Шутова А.П., Мордвинова Н.Б. и др. Эпидемиологическая оценка микробной обсемененности грудного молока здоровых женщин //Журн.микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии.-1984.-N 10.- с.79-82
4. Справочник неонатолога/Под ред.В.А. Таболина. Н.П. Шабалова.-Л.: Медицина, 1984.- с.32
5. Справочник по применению бактерийных и вирусных препаратов /Под ред. С. Г. Дзагурова и Ф.Ф. Резепова.- М.: Медицина, 1975.- с. 110-111, 113-116, 161-163, 168-170 (прототип)
6. Машковский М. Д. Лекарственные средства. В двух частях. Ч.II - 12-е изд. , перераб. и доп..- М.: Медицина, 1993.- с.254-255, 257, 262-264, 308-309
7. Стейниер P. , Эдельберг Э., Ингрэм Дж. Мир микробов. В трех томах. /пер.с англ./ - М.:Мир. 1979.-т.1, с.35. т.2, с.42-44, 69-87, 308
8. Маркова И.В., Шабалов Н.П. Клиническая фармакология новорожденных.- Л.: Медицина, 1984.- С.233
9. Лечение и профилактика дисбактериоза у детей: Метод.рекомендации (Мин-во здравоохранения СССР, Гл. упр. лечеб.- профилакт. помощи детям и матерям: /сост.Дорофейчук В.Г. и др./- М.: Б.И.. 1986.- с.8
10. Каталог сухих микробиологических питательных сред.- Махачкала: НПО "Питательные среды", 1992.-с.5
11. Красноголовец В.Н. Дисбактериоз кишечника.- 2-е изд. перераб. и доп. - М.: Медицина, 1989.- с.7-12
12. Пшеничнов P. А. . Колотов В.М. Барихин С.Я. и др. О существовании системы специфической аутометаболической регуляции развития микробных популяций. Первые наблюдения по выявлению аутофактора, стимулирующего развитие культур.-// Экология,- 1975.- N 3- с.42-50
13. Авторское свидетельство СССР N 1638156, C 12 N 1/00, 1/38, 1991, Бюл. N 12
14. Андреев B.C., Горшенина E.С., Дронова Н.В., и др. Электроадаптация микроорганизмов к стрессовым воздействиям.- //Биотехнология,- 1986.- N 6.- с.41-47
15. Заявка N 93008942/13 от 17.02.93. С 12 N 1/38-

Использование: в области медицины, а именно в педиатрии для антибактериальной обработки молочных желез у женщин, переболевших любой формой мастита, различными инфекционно-воспалительными заболеваниями после клинического выздоровления, а также у практически здоровых женщин с массивной микробной обсемененностью грудного молока. Технический результат заключается в обеспечении оптимальных условий для продуцирования и непосредственного доступа в выводные протоки и "цистерны" молочных желез полифункционального комплекса регуляторных метаболитов, обладающего угнетающим действием в отношении условно-патогенных микроорганизмов (УПМ) и неспецифическим анабиозстимулирующим действием на клетки микроорганизмов, в сочетании с условиями для максимальной пролонгированной изоляции УПМ от кислорода при отсутствии негативных воздействий как на организм в целом, так и на микробный гомеостаз кормящей матери и ребенка. В способе проводят расслабляющий массаж молочной железы в течение 3-10 мин. Затем осуществляют аппликации с экспозицией 30-40 мин на область соска и ареолы молочной железы суспензией микроорганизмов нормальной микрофлоры кишечника, дополнительно содержащей 1-8 мас.% микробиологической защитной пленкообразующей среды. В качестве среды используют сухое обезжиренное молоко или смесь лактозы, декстрана, тиомочевины и аскорбиновой кислоты. Препарат наносят в дозах, обеспечивающих наличие микробных клеток в концентрации не менее 10⁶ клеток на см² кожи. Возможно применение эубиотиков, например бифидумбактерина или лактобактерина. В заключение проводят тонизирующий массаж молочной железы. Процедуру санации осуществляют 2 раза в день (утром и вечером) в течение 5-7 дней. 10 з.п. ф-лы, 2 табл.

1. Способ санации женщин с массивной микробной обсемененностью грудного молока, включающий аппликации лекарственного препарата на область поражения, отличающийся тем, что перед аппликациями лекарственного препарата проводят расслабляющий массаж молочной железы в течение 3-10 мин, в качестве лекарственного препарата используют суспензию микроорганизмов нормальной микрофлоры кишечника, содержащую дополнительно 1-8 мас.% микробиологической защитной пленкообразующей среды, а аппликации суспензии осуществляют на область соска и ареолы молочной железы с экспозицией 30-40 мин в дозах, обеспечивающих концентрацию клеток микроорганизмов не менее 10⁶ клеток на см² кожи, после чего поверхность кожи высушивают, при этом процедуру санации проводят 2 раза в день в течение 5-7 дней. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что используют микроорганизмы, находящиеся в активных фазах роста. 3. Способ по пп.1 и 2, отличающийся тем, что в качестве микроорганизмов нормальной микрофлоры кишечника используют бифидобактерии. 4. Способ по пп.1 и 2, отличающийся тем, что в качестве микроорганизмов нормальной микрофлоры кишечника используют лактобактерии. 5. Способ по пп.1-4, отличающийся тем, что в качестве защитной пленкообразующей среды используют сухое обезжиренное молоко. 6. Способ по пп.1-4, отличающийся тем, что в качестве защитной пленкообразующей среды используют среду, содержащую 72-90% лактозы, 2-6% декстрана, 2-6% тиомочевины и 2-6% аскорбиновой кислоты. 7. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве суспензии микроорганизмов нормальной микрофлоры кишечника, содержащей защитную пленкообразующую среду, используют суспензию эубиотиков. 8. Способ по п.7, отличающийся тем, что в качестве эубиотиков используют бифидумбактерин. 9. Способ по п.7, отличающийся тем, что в качестве эубиотиков используют лактобактерин. 10. Способ по пп.8 и 9, отличающийся тем, что эубиотики вводят в количестве 2,5-5 доз препарата. 11. Способ по пп.1-10, отличающийся тем, что после высушивания поверхности кожи дополнительно проводят тонизирующий массаж молочной железы.