ЗАМЕЩЕННЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ 3-АЦИЛАМИНО-5-ФЕНИЛ-1,4-БЕНЗОДИАЗЕПИН-2-ОНА, СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ И ПРОМЕЖУТОЧНЫЙ ПРОДУКТ Российский патент 1999 года по МПК C07D243/24 C07D243/28 C07D403/12 A61K31/55 

Изобретение относится к производным 3-ациламино-5-фенил-1,4-бензодиазепин-2-она и к их солям, способу их получения и к промежуточным продуктам для их получения.

Соединения согласно изобретению отличаются от других производных 1,4-бензодиазепина своей оригинальной структурой и своими новыми фармакологическими свойствами. Речь идет о производных 1,4-бензодиазепинов, фенильная группа которых в положении 5 бензодиазепина замещена, по крайней мере, тремя заместителями.

Эта особая структура придает продуктам согласно изобретению неожиданные и очень интересные фармакологические свойства. В самом деле, соединения изобретения обладают сродством к рецепторам холецистокинина и поэтому являются новыми агонистами рецепторов холецистокинина (ССК) в тесте панкреатической амилазы.

ССК представляет собой пептид, широко распространенный в головном мозгу, особенно в коре головного мозга, полосатом теле, гиппокампе, вентральной оболочке, септуме и гипоталамусе.

ССК также выделяется на периферическом уровне тонкой кишкой; его действие проявляется, в частности, в стимулировании везикулярного сокращения, повышении билиарной секреции, контроле ферментативной панкреатической секреции, воздействии на желудочные сокращения, воздействии на интестинальную подвижность. В некоторых случаях он может воздействовать на артериальное давление и оказывать влияние на иммунные системы.

ССК в некоторых центральных невронах сосуществует с допамином. Он также вмешивается в механизмы с участием ацетилхолина, габа, серотонина, опиоидов, соматостатина, вещества P и ионных каналов.

Его введение вызывает физиологические изменения: пальпебральный птоз, гипотермию, гипергликемию, каталепсию, и поведенческие изменения: гиполокомоторность, ухудшение исследовательской способности, анальгезию, способность к обучению, изменение сексуального поведения и чувства насыщения.

Агонист рецептора ССК, особенно рецептора ССКА, следовательно, может быть использован в качестве лекарственного средства при лечении некоторых расстройств поведения в отношении питания, тучности, диабета, при лечении расстройств в отношении эмоционального, сексуального и мнезического поведения; при лечении шизофрении, психозов, болезни Паркинсона и различных расстройств желудочно-кишечной сферы (Drugs of the Future, 1992, 17, N 3, 197-206).

До настоящего момента все описанные 1,4-бензодиазепины, обладающие хорошим сродством к рецепторам ССКА, являются антагонистами.

Лигандные соединения рецепторов ССК и гастрина известны в литературе, например, из заявки на патент ВОИС-93/20099.

В качестве примера можно назвать также Девазепид или L-365260, формулы которых представляют собой, соответственно:


Агонисты рецептора ССК пептидной природы или структуры, очень отличной от соединений согласно настоящему изобретению, описаны в литературе. Например, некоторые продукты, обладающие такими свойствами, описываются в европейском патенте A-0383690, ВОИС 90/06937 и европейском патенте A-0376849.

Соединения изобретения, также как их соли присоединения неорганических или органических кислот, отвечают формуле (I)

в которой - R_I обозначает:
(I) водород;
(II) (C₁ - C₄)-алкил;
(III) группу -CH₂-CHOH-(CH₂)_m - Z, в которой m = 0 или 1 и Z обозначает (C₁-C₄)-алкильную группу; (C₃-C₈)-циклоалкильную группу; арильную группу, в случае необходимости замещенную (C₁-C₄)-алкилом, (C₁-C₄)-алкоксилом или галогеном; или Z обозначает насыщенный или ненасыщенный гетероцикл, в случае необходимости замещенный (C₁-C₄)-алкилом, (C₁-C₄)-алкоксилом или галогеном; или
(IV) R_I обозначает группу -(CH₂)_nCOR₀, в которой
- R₀ обозначает OR₂ или NR₂ R₃, причем R₂ и R₃ являются одинаковыми или разными и обозначают H или (C₁-C₄)-алкил; и/или R₂ и R₃ вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют насыщенный или ненасыщенный гетероцикл;
n = 1 - 3;
- R_II обозначает
либо (I) ароматический азотсодержащий гетероцикл; R_IIa выбираемый среди хинолина, изохинолина, бензимидазола и индола, причем этот последний в случае необходимости замещен на азоте группой W, где W обозначает CO-(C₁-C₄)-алкильную группу, или группу (CH₂)_nCOR₀, в которой n и R₀ имеют указанные для R_I значения;
либо (II) группу R_IIб

в которой Y обозначает атом галогена, (C₁-C₃)-алкильную группу, или (C₁-C₃)-алкоксильную группу;
- X₁, X₂ и X₃ являются одинаковыми или разными и обозначают (C₁-C₃)-алкил, (C₁-C₃)-алкоксил, атом галогена или трифторметильную группу;
- X₄ обозначает водород или идентичен X₁, X₂ или X₃; и их стереоизомеры.

Под термином "алкильный радикал" понимают алкильные радикалы с 1-4 C-атомами, линейные или разветвленные.

Под термином "насыщенный или ненасыщенный гетероцикл" понимают ароматический или неароматический гетероцикл, выбираемый среди фурана, тиофена, пиррола, имидазола, пирролидина, пиперидина, пиперазина, пиридина или морфолина.

Особая группа соединений согласно изобретению образована соединениями формулы (I), в которых X₁ находится в положении 2, X₂ находится в положении 4, X₃ находится в положения 6 и X₄, безразлично, в положении 3 или 5 фенильного радикала.

Из этих соединений предпочтительны такие, в которых, по крайней мере, три из заместителей X₁, X₂, X₃ или X₄ обозначают (C₁-C₂)-алкил или (C₁-C₂)-алкоксил, и в особенности таковые, выбираемые среди метильных или метоксигрупп в положении 2, 4, 6 ароматического ядра; кроме того, предпочтительно, чтобы R_IIa обозначал возможно замещенный индолил.

Другая группа предпочтительных соединений образована соединениями, в которых два из заместителей X₁, X₂, X₃, и X₄ обозначают, соответственно, 2-(C₁-C₃)-алкоксильную группу и 6-(C₁-C₃)-алкоксильную группу.

Когда X₁, X₂ или X₃ обозначает атом галогена, то речь идет предпочтительно об атоме хлора, но они также могут обозначать атом фтора, брома или иода.

Соединения согласно изобретению все имеют центр асимметрии и, следовательно, могут также существовать в форме оптических изомеров. Настоящее изобретение также включает эти изомеры, либо индивидуально, либо в виде смеси.

Соли присоединения неорганических или органических кислот, например, могут представлять собой соли, образованные с соляной, бромоводородной, азотной, серной, фосфорной, уксусной, муравьиной, пропионовой, бензойной, малеиновой, фумаровой, янтарной, винной, лимонной, щавелевой, глиоксиловой, аспарагиновой кислотами; алкансульфокислотами, такими как метан- или этансульфокислоты; арилсульфокислотами, такими как бензол- или п-толуолсульфокислоты; и арилкарбоновыми кислотами.

Из продуктов изобретения особенно можно назвать производные, отвечающие вышеприведенной формуле (I), и их соли присоединения неорганических или органических кислот, где в вышеуказанной формуле (I) заместитель R_II обозначает группу R_IIa формулы:

в которой, W, X₁, X₂, X₃ и X₄ имеют вышеуказанное значение.

Из предпочтительных соединений изобретения можно назвать следующие соединения:
N-/2,3-дигидро-5-(2,6-диметокси-4-метилфенил)-1-метил-2- оксо-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил /-1H-2-индолкарбоксамид;
{ N-/2,3-дигидро-5-(2,6-диметокси-4-метилфенил)-1-метил-2-оксо- 1H-1,4-бензодиазепин-3-ил /-2-аминокарбонил-1H-индол-1-ил}-уксусная кислота,
метил-(N-/2,3-дигидро-5-(2,6-диметокси-4-метилфенил)-1-метил-2- оксо-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил /-2-аминокарбонил- индол-1-ил)-ацетат;
правовращающий N-/2,3-дигидро-5-(2,6-диметокси-4-метилфенил)-1- метил-2-оксо-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил /-1H-индол-2-карбоксамид;
N-/2,3-дигидро-5-(2,3,6-триметокси-4-метилфенил)-1-метил-2-оксо- 1H-1,4-бензодиазепин-3-ил/-1H-2-индолкарбоксамид.

Соединения согласно изобретению могут быть получены согласно схеме 1 (см. в конце описания).

Когда R_II обозначает азотсодержащий гетероцикл R_IIa, то соединения формулы (I) могут быть получены путем конденсации 3-амино-5-фенил(замещенный) 1-метил-1,4-бензодиазепин-2-она формулы (II), в обычных условиях ацилирования аминной функции, с кислотой формулы R_IIaCOOH, в которой чувствительные функции R_IIa в случае необходимости защищены, или с активированной формой кислоты, такой как галоидангидрид кислоты, ангидрид кислоты или сложный активированный эфир, получаемый с реагентами, обычно используемыми в пептидном синтезе.

Когда функции защищены, после конденсации, если необходимо, проводят соответствующую реакцию для удаления защитных групп.

Некоторые из кислот R_IIaCOOH известны и даже имеются в продаже; другие получают, используя известные методы для аналогичных молекул, особенно согласно способам, описанным в европейском патенте A-432040.

Когда R_II обозначает группу R_IIб:

в которой Y имеет указанное для формулы (I) значение, соответствующие мочевины формулы (I) могут быть получены из аминобензодиазепина формулы (II) с замещенным фенилизоцианатом формулы:

в которой Y имеет вышеуказанное значение. Эти изоцианатные производные имеются в продаже или могут быть получены известными способами.

3-Амино-1,4-бензодиазепин-2-оны формулы (II), также как промежуточные продукты синтеза (V), (VI) и (VII), указанные ниже, являются новыми и составляют другой аспект настоящего изобретения.

Согласно другому из этих аспектов, настоящее изобретение относится к способу получения соединений формулы (I), отличающемуся тем, что замещенное бензольное производное формулы (III):

в которой X₁, X₂, X₃ и X₄ имеют указанное для формулы (I) значение, вводят во взаимодействие с ангидридом П-карбоксиантраниловой кислоты формулы (IV):

в которой R_I имеет указанное для формулы (I) значение, для получения дифенилкетона формулы (V):

в которой X₁, X₂, X₃, X₄ и R_I имеют указанное для формулы (I) значение, который затем вводят во взаимодействие с галогенкетоном формулы:
Гал - CH₂COCl
в которой Гал обозначает предпочтительно атом брома или хлора, затем полученное соединение циклизуют, например, в присутствии аммиака, для получения бензодиазепина формулы (VI):

в которой X₁, X₂, X₃, X₄ и R_I имеют указанное для формулы (I) значение, имея в виду, что, если R_I обозначает (C₂-C₄)-алкил, то соединение формулы (VI) также можно получать путем алкилирования амида (формула (VI), где R_I=H) за счет воздействия производного Алк J, в котором Алк обозначает (C₂-C₄)-алкил, затем получают оксим соединения формулы (VI) путем введения во взаимодействие трет-бутилата калия с изоамилнитрилом, (CH₃)₂CH - CH₂-CH₂-ONO, для получения бензодиазепина формулы (VII):

в которой R_I, X₁, X₂, X₃ и X₄ имеют указанное для формулы (I) значение, затем оксимную функцию восстанавливают водородом в присутствии катализатора, как рутений-на-угле, для получения аминобензодиазепин-2-она формулы (II):

в которой X₁, X₂, X₃, X₄ и R_I имеют указанное для формулы (I) значение, после чего полученное соединение подвергают воздействию
либо кислоты формулы: R_IIaCOOH или одной из ее активированных форм, где R_IIa имеет указанное для формулы (I) значение;
либо фенилизоцианата формулы

в которой Y имеет указанное для формулы (I) значение, для получения соединений формулы (I) согласно изобретению или одной из их солей.

Промежуточные соединения формул (II), (V), (VI) и (VII) являются соединениями, составляющими часть изобретения.

Стереоизомеры и соли присоединения соединений формулы (II) являются частью изобретения.

3-Аминобензодиазепин-2-оны формулы (II) получают известными и описанными в литературе способами, например, согласно заявке на патент ВОИС/9307130, путем восстановления оксима формулы (VII) по реакции каталитического гидрирования или путем восстановления при использовании адекватного металла в кислых условиях. Адекватные катализаторы гидрирования включают, например, катализаторы на основе благородных металлов, таких как рутений или родий, которые, например, могут быть фиксированы на угле. Эту реакцию предпочтительно осуществляют в адекватном органическом растворителе, таком как спирт, например, метанол, при температурах 60-70^oC, предпочтительно при 60^oC. Адекватные способы восстановления, при которых используются металлы, включают применение цинка и трифторуксусной кислоты в адекватном растворителе, таком как уксусная кислота, примерно при 40-50^oC.

Оксимы формулы (VII) получают путем взаимодействия изоамилнитрила в присутствии основания, такого как алкоголяты щелочных металлов, например, как трет. -бутилат калия, согласно, например, M.G.BOCK и др., J. Org. Chem. 1987, 52, 3232-3239.

Бензодиазепины формулы (VI) получают, согласно M.G.BOCK и др., J. Org. Chem. 1987, 52, 3232-3239, путем циклизации между галогенкетоном Гал-CH₂-COCl и дифенилкетоном формулы (V), также полученным согласно BOCK и др. Дифенилкетон формулы (V) получают путем конденсации ангидрида N-карбоксиантраниловой кислоты формулы (IV), в которой R_I обозначает водород или метил.

Когда R_I обозначает (C₂-C₄)-алкил, то бензодиазепины формулы (VI) получают путем алкилирования соединения формулы (VI), где R_I=H, в присутствии гидрида щелочного металла, такого как гидрид натрия, в органическом растворителе, таком как диметилформамид, в присутствии алкилирующего агента АлкX, в котором Алк обозначает (C₂-C₄)-алкил, а X обозначает галоген, предпочтительно иод, согласно европейскому патенту 167919.

3-Аминобензодиазепин-2-оны формулы (II) также могут быть получены при применении или адаптации способов, описанных в патенте ВОИС 93/07130, европейском патенте 167919, европейском патенте 540039, или согласно B.E. EVANS, J. Med Chem. 1988, 31, 2235.

Другая альтернатива в отношении получения 3-аминобензодиазепин-2-онов, в особенности таких, фенил которых в положении 5 тетразамещен, состоит в применении к этим соединениям способа, описанного M.G. BOCK и др., J. Org. Chem. , 1987, 52, 3232. Для получения дифенилкетона может быть использован метод J.R. Lewis и др., Tetrahedron, 1982, 37, 209, согласно которому осуществляют взаимодействие 2-метил-1,3-бензоксазин-4-она с ариллитиевыми соединениями.

Получение оптически чистых соединений формулы (I) осуществляют при использовании и адаптации способа, применяемого M.G. BOCK и др., J. Org. Chem. 1987, 52, 3232-3239, и согласно нижеприведенным Приготовлениям в соответствии со схемой 2 (см. в конце описания).

Соединения были исследованы на предмет определения их сродства ин витро в отношении рецептора CCKA.

Это сродство составляет 0,5 - 100 нмоль, с селективностью для рецепторов CCKA по сравнению с рецепторами CCKB, которая может достигать, например, фактора 10 000 для соединения Примера 1.

Другие соединения согласно изобретению (соединения Примеров 6 и 7) обладают сродством к рецептору CCKB, идентичным или выше такового, получаемого для рецептора CCKA.

Изучение агонистического эффекта по отношению к рецепторам CCKA проводится путем измерения выделения амилазы, реализуемого следующим образом. Панкреатические ацинусы получают путем ферментативного переваривания (коллагеназа) поджелудочной железы крысы, подвергнутой голоданию в течение 18 часов. Аликвоты (485 мкл) инкубируют при 37^oC в течение 30 минут в присутствии возрастающих концентраций агонистов, согласно Jensen и др., J. Biol. Chem. , 1982, 257 (10), 5554. Инкубацию прекращают путем центрифугирования в течение 15 секунд. Надосадочную жидкость выдерживают в ледяной бане для измерения содержания амилазы согласно способу CESKA и др., Clin., Chim. Acta, 1969, 26, 437 (phadebas - реактив). Испытуемые соединения растворяют в диметилсульфоксиде, затем в инкубационном буфере.

Соединения согласно изобретению ведут себя как агонисты рецепторов CCK с CE₅₀ (концентрация продукта, которая вызывает 50% максимального ответа, получаемого с самим CCK) порядка наномоля.

Агонистический эффект, продемонстрированный на этой модели ин витро, подтверждается на модели ин виво по выделению желчи у голодной мыши согласно протоколу, описанному D. GULLY и др., European J. Pharmacol., 1993, 232, 13-19. Соединения вводят перорально за час до умерщвления. Желчный пузырь извлекают, затем взвешивают и получают результаты, выраженные в мг/кг веса тела, например, для соединения Примера 10 DE₅₀ = 0,3 мг/кг.

Следовательно, соединения формулы (I) применяют в качестве агонистов рецепторов ССК и могут найти применение для лечения некоторых расстройств поведения в отношении питания, тучности, диабета; для лечения расстройств эмоционального, сексуального и мнезического поведения; для лечения психозов и особенно шизофрении, болезни Паркинсона и различных расстройств желудочно-кишечной сферы.

Соединения формулы (I) малотоксичны; их токсичность приемлема для их применения в качестве лекарственного средства для лечения вышеуказанных расстройств и заболеваний.

Дозировка, изменяемая в зависимости от лечения и в зависимости от вызванного заболевания, может составлять, например, 0,05 - 100 мг в день для взрослого при введении перорально.

Фармацевтическая композиция содержит в качестве действующего начала одно из вышеуказанных соединений. Эти композиции реализуют таким образом, чтобы ее можно было вводить пищеварительным или парентеральным путем.

В фармацевтических композициях настоящего изобретения для орального, подъязычного, подкожного, внутримышечного, внутривенного, чрескожного, локального или ректального введения, активный ингредиент может быть введен в единичных формах введения, в смеси с классическими фармацевтическими носителями, животным и людям. Соответствующие единичные формы введения включают пероральные формы, такие как таблетки, желатиновые капсулы с лекарством, порошки, грануляты и оральные растворы или суспензии; подъязычные и ротовые формы введения; формы введения внутримышечно, подкожно, внутривенно, в нос или в глаза и ректальные формы введения.

Когда готовят твердую композицию в форме таблеток, то основной активный ингредиент смешивают с фармацевтическим эксципиентом, таким как желатина, крахмал, лактоза, стеарат магния, тальк, гуммиарабик или аналогичные вещества. Таблетки можно покрывать сахарозой или другими соответствующими материалами или еще их можно обрабатывать таким образом, что они имеют пролонгированную или замедленную активность и непрерывно высвобождают заданное количество действующего начала.

Препарат в виде желатиновых капсул с лекарством получают путем смешения активного ингредиента с разбавителем и внесения полученной смеси в мягкие или жесткие желатиновые капсулы.

Препарат в форме сиропа или эликсира может содержать активный ингредиент вместе с подслащивающим веществом, предпочтительно некалорийным, метилпарабеном и пропилпарабеном в качестве антисептика, так же как с соответствующим агентом, придающим вкус и цвет.

Диспергируемые в воде порошки или грануляты могут содержать активный ингредиент в смеси с диспергаторами или смачивателями, или суспендирующими агентами, как поливинилпирролидон, точно так же, как с подслащивающими веществами и улучшающими вкус агентами.

Для ректального введения прибегают к свечам, которые готовят со связующими, плавящимися при ректальной (кишечной) температуре, например, как масло какао или полиэтиленгликоли.

Для парентерального, внутриносового или внутриглазного введения используют водные суспензии, изотонические солевые растворы или стерильные и инъецируемые растворы, которые содержат фармацевтически приемлемые диспергаторы и/или смачиватели, например пропиленгликоль или бутиленгликоль.

Действующее начало также может быть сформулировано в виде микрокапсул, в случае необходимости с одним или несколькими носителями или добавками.

Композиция может быть в виде единичной дозы, содержащей 0,05 - 100 мг действующего начала.

Ниже приводится описание примеров осуществления изобретения, так же как способы получения некоторых промежуточных соединений синтеза. Указанные температуры плавления (т. пл. ) определяют в капилляры и выражают в градусах Цельсия.

Следующие примеры, не ограничивающие объема охраны изобретения, иллюстрируют изобретение.

Приготовление I
(2,6-Диметокси-4-метилфенил)-(2-метиламинофенил)-кетон (соединение 1)
К раствору 30 г 3,5-диметокситолуола в 400 мл тетрагидрофурана при температуре около -20^oC добавляют 129 мл бутиллития в виде 1,6 М раствора в гексане. По окончании добавления реакционную смесь доводят до температуры 0^oC, затем перемешивают в течение 1 часа. Охлаждают до -20^oC и порциями добавляют 36,67 г ангидрида N-метил-N-карбоксиантраниловой кислоты. Оставляют температуру повышаться до комнатной и перемешивают в течение 2-х часов, затем добавляют 500 мл воды и экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу промывают водой, сушат над сульфатом натрия и выпаривают в вакууме. Остаток очищают путем хроматографии на силикагеле, элюируя смесью толуола с этилацетатом в соотношении 9/1. Фракции чистого продукта концентрируют в вакууме и остаток кристаллизуют из диизопропилового эфира. Получают кристаллы бежевого цвета, которые плавятся при 215^oC. Выход = 78%.

Точно таким же образом также можно получать следующие соединения:
(2,4,6-триметоксифенил)-(2-метиламинофенил)кетон; т.пл. = 190^oC; выход = 86% (соединение 2),
(2,3,6-триметокси-4-метилфенил)-(2-метиламинофенил)-кетон; т. пл. = 141^oC; выход = 81% (соединение 3).

Приготовление II
(N/2-(2,6-Диметокси-4-метилбензоил)фенил/-N-метилбромацетамид (соединение 4)
К смеси 10 г (2,6-диметокси-4-метилфенил)-(2-метиламинофенил)- кетона в 100 мл дихлорметана и 20 мл воды, охлажденной до -10^oC, прикапывают 6,34 г бромацетилхлорида в 20 мл дихлорметана. Реакционную смесь оставляют для повышения ее температуры до комнатной, затем интенсивно перемешивают в течение 2-х часов. Декантируют, и органическую фазу последовательно промывают водой, сушат над сульфатом натрия и выпаривают досуха с получением кристаллов бежевого цвета, которые плавятся при 121^oC. Выход = 99%.

Таким же образом можно также получать нижеуказанные соединения:
N-/2-(2,4,6-триметоксибензоил)фенил/-N-метилпромацетамид; т.пл. = 118^oC; выход = 92% (соединение 5);
N-/2-(2,3,6-триметокси-4-метилбензоил)фенил/-N- метилбромацетамид; масло; выход = 100% (соединение 6).

Приготовление III
1,3-Дигидро-5-(2,6-диметокси-4-метилфенил)-1-метил-1,4- бензодиазепин-2-он (соединение 7)
14 г N-/2-(2,6-Диметокси-4-метилбензоил)фенил/-N- метилбромацетамида растворяют в 300 мл метанола, охлаждают до -10^oC и в течение 2-х часов барботируют аммиак, затем реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 3-х часов, после чего выпаривают досуха. Остаток обрабатывают дихлорметаном, затем органическую фазу последовательно промывают водой, сушат над сульфатом натрия и выпаривают досуха. Остаток очищают путем хроматографии на колонке с силикагелем, элюируя смесью дихлорметана с метанолом (95:5).

Концентрирование фракций чистого продукта приводит к белого цвета кристаллам, которые плавятся при 200^oC; выход = 89%.

Таким же образом получают:
1,3-дигидро-5-(2,4,6-триметоксифенил)-1-метил-1,4- бензодиазепин-2-он, т.пл. = 161^oC; выход = 89% (соединение 8); и
1,3-дигидро-5-(2,3,6-триметокси-4-метилфенил)-1-метил-1,4- бензодиазепин-2-он; т.пл. = 180^oC; выход = 84% (соединение 9).

Приготовление IV
1,3-Дигидро-5-(2,6-диметокси-4-метилфенил)-3-гидроксиимино-1- метил-1,4-бензодиазепин-2-он (соединение 10)
К суспензии 9 г 1,3-дигидро-5-(2,6-диметокси-4-метил- фенил)-1-метил-1,4-бензодиазепин-2-она в 300 мл толуола порциями, при охлаждении до -20^oC, добавляют 7,8 г трет.-бутилата калия, затем оставляют температуру медленно повышаться до 0^oC в течение 35 минут, охлаждают до -20^oC, и прикапывают 3,9 г изоамилнитрита в 50 мл толуола. Реакционную смесь затем перемешивают в течение 90 минут при 0^oC, затем, последовательно, реакционную смесь выливают в воду, доводят pH-значение до 4 с помощью уксусной кислоты, экстрагируют этилацетатом, органическую фазу промывают водой, сушат над сульфатом натрия и выпаривают досуха. Остаток кристаллизуют из диизопропилового эфира, отфильтровывают и высушивают с получением бежевого цвета кристаллов, которые плавятся при 150^oC. Выход = 76%.

Таким же образом получают:
1,3-дигидро-5-(2,4,6-триметоксифенил)-1-метил-1,4- бензодиазепин-2-он, т.пл. = 155^oC; выход = 80% (соединение 11);
1,3-дигидро-5-(2,3,6-триметокси-4-метилфенил)-1-метил-1,4- бензодиазепин-2-он; т.пл. = 144^oC; выход = 83% (соединение 12).

Приготовление V
3-Амино-1,3-дигидро-5-(2,6-диметокси-4-метил-фенил)- 1-метил-1,4-бензодиазепин-2-он (соединение 13)
В автоклав помещают 6,4 г 1,3-дигидро-5-(2,6-диметокси-4- метилфенил)-3-гидроксиимино-1-метил-1,4-бензодиазепин-2-она в 180 мл метанола вместе с 1,32 г 5%-ного рутения-на-угле, автоклав нагревают при 60^oC и гидрируют под давлением водорода 6 бар в течение 22-х часов, затем, последовательно, реакционную смесь охлаждают, катализатор отфильтровывают и фильтрат выпаривают досуха. Остаток обрабатывают ацетоном и продукт очищают путем солеобразования через посредство его оксалата. Получают бежевого цвета кристаллы оксалата целевого продукта, которые плавятся при 170^oC; выход = 80%.

Таким же образом получают:
оксалат 3-амино-1,3-дигидро-5-(2,4,6-триметоксифенил)-1-метил- 1,4-бензодиазепин-2-она; т.пл. = 155^oC; выход = 83% (соединение 14); и
3-амино-1,3-дигидро-5-(2,3,6-триметокси-4-метилфенил)-1-метил- 1,4-бензодиазепин-2-он, который получают в форме масла; выход = 75% (соединение 15).

Разделение диастереоизомеров соединений формулы (II)
Приготовления VI
Стадия 1
1,73 г 3-Амино-1,3-дигидро-5-(2,6-диметокси-4-метил-фенил)-1- метил-1,4-бензодиазепин-2-она растворяют в 30 мл диметилформамида в присутствии 1,42 г BOC-D-фенилаланина, затем охлаждают до 5^oC и добавляют 1,07 мл триэтиламина, затем 2,4 г B.O.P. Затем реакционную смесь оставляют для повышения ее температуры до комнатной и оставляют стоять в течение ночи при перемешивании. После этого реакционную смесь выливают в воду, декантируют, сушат над сульфатом натрия, отфильтровывают и концентрируют в вакууме. 2-трет. -Бутоксикарбониламино-N-/2,3-дигидро-5-(2,6-диметокси-4- метилфенил)-1-метил-2-оксо-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил/-3- фенилпропионамид в виде маслянистого остатка, получаемого с количественным выходом, используют таким, какой есть, в следующей стадии (соединение 16).

Стадия 2
4,6 г 2-трет.-Бутоксикарбониламино-N-/2,3-дигидро-5-(2,6- диметокси-4-метилфенил)-1-метил-2-оксо-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил/-3- фенилпропионамида, полученного выше, растворяют в 30 мл этилацетата, смесь охлаждают до 0^oC, затем прикапывают 30 мл 5 н. раствора хлороводорода в этилацетате (солянокислого этилацетата).

По окончании введения оставляют температуру повышаться до комнатной и раствор перемешивают в течение 3-х часов. Реакционную смесь выливают в диэтиловый эфир, отфильтровывают выпавший осадок, затем последовательно промывают его диэтиловым эфиром и сушат его с получением 2-амино-N-/2,3-дигидро-5-(2,6-диметокси-4-метилфенил)-1- метил-2-оксо-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил/-3-фенилпропионамида в виде белых кристаллов c выходом 90%; т.пл. = 165^oC (соединение 17).

Стадия 3
Полученные на предыдущей стадии диастереоизомеры разделяют с помощью препаративной ВЭЖХ. Разделение диастереоизомеров осуществляют на приборе PROCHROM LC50 с аксиальным динамическим давлением. Используемой стационарной фазой является обратимая фаза KROMASIL с пористостью 100 Элюирование осуществляют в изократическом режиме с помощью 65% (вода + 1% трифторуксусной кислоты) и 35% (ацетонитрил-вода в соотношении 90:10 с 0,8% трифторуксусной кислоты) с дебитом 120 мл/мин и с УФ-детектированием при 220 нм. Из 3,7 г полученного на предыдущей стадии рацемата, после лиофилизации и подщелачивания, получают каждый из двух стереоизомеров в виде пены с выходом разделения 45%.

Приготовление VII
Синтез правовращающего энантиомера и левовращающего энантиомера 3-амино-1,3-дигидро-5-(2,6-диметокси-4-метилфенил)-1-метил-1,4- бензодиазепин-2-она
Оба энантиомера получают в две стадии из двух вышеразделенных диастереомеров, используя классический метод расщепления по Эдману согласно P. EDMAN, Acta Chem. Scand., 1950, 4, 283.

Синтез правовращающего энантиомера
Стадия 1 (соединение 18)
720 мг Полученного на стадии 3 Приготовления VI диастереоизомера растворяют в 10 мл дихлорметана и добавляют 220 мг фенилизотиоцианата. Смесь кипятят с обратным холодильником в течение 1 часа, затем выпаривают реакционную смесь в вакууме и остаток кристаллизуют из диизопропилового эфира. Получают кристаллы, которые плавятся при 140^oC. Выход = 95%.

Стадия 2
860 мг Производного тиомочевины, полученного на предыдущей стадии, растворяют в 20 мл этилацетата, охлаждают до температуры около 5^oC и прикапывают 10 мл 5 н. раствора хлороводорода в этилацетате. Температуру оставляют повышаться до комнатной и перемешивают 2 часа, затем реакционную смесь выпаривают и хроматографируют остаток на колонке с силикагелем (элюирующее средство: дихлорметан-метанол-вода-уксусная кислота = 90:10:1:1). Фракции чистого продукта выпаривают в вакууме, затем, последовательно, выпаривают, остаток подщелачивают, экстрагируют дихлорметаном, промывают водой и высушивают. После выпаривания получают кристаллы, которые плавятся при 139^oC; выход = 89%.

[α]20D

Синтез левовращающего энантиомера (соединение 19)
Левовращающий энантиомер получают идентичным образом, используя расщепление по Эдману другого диастереоизомера. Получают кристаллы, которые плавятся при 139^oC; выход = 85%; [α]20D

Пример 1. (I): R_I = CH₃;

X₁ = 2-OCH₃; X₂ = 6-OCH₃; X₃ = 4-CH₃; X₄=H.

0,47 мл Пиридина растворяют в 10 мл дихлорметана, охлаждают до -5^oC и прикапывают 0,68 мл тионилхлорида, оставляют смесь на 20 минут при той же температуре, затем порциями добавляют 208 мг индол-2-карбоновой кислоты и перемешивают в течение 30 минут. Порциями добавляют 400 мг 3-амино-1,3-дигидро-5-(2,6-диметокси- 4-метилфенил)-1-метил-1,4-бензодиазепин-2-она, затем оставляют температуру повышаться до комнатной и реакционную смесь перемешивают в течение 16 часов. К реакционной смеси добавляют воду, отфильтровывают выделившийся осадок и сушат с получением белых кристаллов N-/2,3- дигидро-5-(2,6-диметокси-4-метилфенил)-1-метил-2-окcо-1H-1,4- бензодиазепин-3-ил/-1H-2-индолкарбоксамида, которые плавятся при 310^oC с разложением, выход = 79%.

Пример 2. (I): R_I = CH₃;

X₁=2-OCH₃; X₂=6-OCH₃; X₃=4-OCH₃; X₄=H.

Следуя методике Примера 1 и используя 3-амино-1,3-дигидро- 5-(2,4,6-триметоксифенил)-1-метил-1,4-бензодиазепин-2-он, получают N-/2,3-дигидро-5-(2,4,6-триметоксифенил)-1-метил-2-оксо-1H-1,4- бензодиазепин-3-ил/-1H-2-индолкарбоксамид; т.пл. = 297^oC; выход = 87%.

Пример 3. (I): R_I=CH₃;

X₁=2-OCH₃; X₂=6-OCH₃; X₃=4-CH₃; X₄=H.

К раствору 0,37 г 3-амино-1,3-дигидро-5-(2,6-диметокси-4- метилфенил)-1-метил-1,4-бензодиазепин-2-она в 10 мл диметилформамида, охлажденному до 5^oC, добавляют 0,28 г 1-метоксикарбонилметил-1H-индол-2-карбоновой кислоты, 578 мг B.O.P. и 0,303 мл триэтиламина. Реакционную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре, затем выливают в воду и экстрагируют этилацетатом. Последовательно промывают органическую фазу водой, сушат ее над сульфатом натрия и выпаривают досуха. Полученные кристаллы перекристаллизуют из смеси диизопропилового эфира с изопропанолом. Получают белые кристаллы { N-[2,3-дигидро-5-(2,6-диметокси-4-метилфенил)-1-метил-2-оксо- 1H-1,4-бензодиазепин-3-ил] -2-аминокарбонилиндол-1-ил}-метилацетата, которые плавятся при 242^oC. Выход = 77%.

Пример 4. (I): R_I=CH₃;

X₁=2-OCH₃; X₂=6-OCH₃; X₃ = 4-CH₃; X₄=H.

220 мг N-[2,3-дигидро-5-(2,6-диметокси-4-метилфенил)-1-метил-2- оксо-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил-2-аминокарбонил-1H-индол-1- ил] метилацетата растворяют в 10 мл метанола и прикапывают 1 мл 1 н. раствора гидроксида натрия, затем перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Смесь обрабатывают водой и экстрагируют диэтиловым эфиром, водную фазу подкисляют до pH 3 с помощью гидросульфата калия и экстрагируют дихлорметаном, сушат экстракт над сульфатом натрия и выпаривают досуха. Из диизопропилового эфира кристаллизуют { N-[2,3-дигидро-5-(2,6-диметокси-4-метил-фенил)-1- метил-2-оксо-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил] -2-амино- карбонил-1H-индол-1-ил} -уксусную кислоту с получением кристаллов белого цвета, которые плавятся при 138^oC. Выход = 75%.

Пример 5. (I): R_I=CH₃;

X₁=2-OCH₃; X₂=6-OCH₃; X₃ = 4-CH₃; X₄=H.

К 56 мг 3-амино-1,3-дигидро-5-(2,6-диметокси-4-метилфенил)- 1-метил-1,4-бензодиазепин-2-она в 10 мл дихлорметана добавляют 0,022 мл 2-хлорфенилизоцианата, затем реакционную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Концентрируют в вакууме и остаток кристаллизуют из диизопропилового эфира, получая 3-(2-хлорфенилуреидо)-1,3-дигидро-5-(2,6-диметокси-4-метилфенил)- 1-метил-1,4-бензодиазепин-2-он; т.пл = 260^oC; выход = 91%.

Пример 6. (I) = R_I = CH₃;

X₁=2-OCH₃; X₂=6-OCH₃; X₃ = 4-CH₃; X₄ = H.

Используя 3-амино-1,3-дигидро-5-(2,6-диметокси-4- метилфенил)-1-метил-1,4-бензодиазепин-2-он, как и в предыдущем Примере 5, и конденсируя, как и в предыдущем Примере 5, с 3-метилфенилизоцианатом, получают 1,3-дигидр-5-(2,6-диметокси-4- метилфенил)-1-метил-3-(3-метилфенилуреидо)-1,4-бензодиазепин-2-он; т.пл. = 260^oC; выход = 94%.

Пример 7. (I): R_I = CH₃;

X₁ = 2-OCH₃; X₂ = 4-OCH₃; X₃ = 6-OCH₃; X₄ = H.

Конденсируя 3-амино-1,3-дигидро-1-метил-5-(2,4,6- триметоксифенил)-1,4-бензодиазепин-2-он с 3-метилфенилизоцианатом, получают 1,3-дигидро-1-метил-3-(3-метилфенилуреидо)-5-(2,4,6- триметоксифенил)-1,4-бензодиазепин-2-он; т.пл. = 240^oC; выход = 94%.

Пример 8. (I): R_I = CH₃;

X₁=2-OCH₃; X₂=4-OCH₃; X₃ =6-OCH₃; X₄=H.

Следуя методике Примера 7 и используя 2-метилфенилизоцианат, получают 1,3-дигидро-1-метил-3-(2-метилфенилуреидо)-5- (2,4,6-триметоксифенил)-1,4-бензодиазепин-2-он; т.пл. = 250^oC; выход = 92%.

Пример 9. (I): R_I=CH₃;

X₁=2-OCH₃; X₂ = 4-CH₃; X₃= 6-OCH₃; X₄=H.

(Левовращающий энантиомер)
К раствору 0,38 г левовращающего энантиомера 3-амино-1,3-дигидро-5-(2,6-диметокси-4-метилфенил)-1-метил-1,4- бензодиазепин-2-она в 10 мл диметилформамида, охлажденному до 5^oC, добавляют 0,52 г B.O.P. и 0,19 г индол-2-карбоновой кислоты, затем 0,23 мл триэтиламина. Реакционную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре, затем выливают в воду и экстрагируют этилацетатом, экстракт сушат над сульфатом натрия и выпаривают досуха. Продукт очищают путем колоночной хроматографии на силикагеле (элюирующее средство: дихлорметан-метанол = 95:5). Фракцию чистого продукта выпаривают досуха и остаток кристаллизуют из диизопропилового эфира. Получают белые кристаллы (-)-N-[2,3-дигидро-5-(2,6-диметокси-4-метилфенил)-1-метил-2-оксо- 1H-1,4-бензодиазепин-3-ил] -1H-индол-2-карбоксамида, которые плавятся при 135^oC; выход = 81%; [α]20D

Пример 10 (I): R_I=CH₃;

X₁=2-OCH₃; X₂=4-CH₃; X₃ = 6-OCH₃; X₄=H.

(Правовращающий энантиомер)
Это соединение получают идентичным другому энантиомеру (Пример 9) таким образом из правовращающего энантиомера 3-амино-1,3-дигидро- 5-(2,6-диметокси-4-метилфенил)-1-метил-1,4-бензодиазепин-2-она, получают кристаллы белого цвета (+)-N-/2,3-дигидро-5-(2,6-диметокси- 4-метилфенил)-1-метил-2-оксо-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил/-1H-индол-2- карбоксамида, которые плавятся при 135^oC; выход = 78%; [α]20D

Пример 11. (I): R_I=CH₃;

X₁=2-OCH₃; X₂=3-OCH₃; X₃ = 6-OCH₃; X₄=4-CH₃.

Следуя методике Примера 3, но исходя из 3-амино-1,3-дигидро-5-(2,3,6-триметокси-4-метилфенил)-1-метил- 1,4-бензодиазепин-2-она и индол-2-карбоновой кислоты, получают кристаллы N-[2,3-дигидро-5-(2,3,6-триметокси-4-метилфенил)-1- метил-2-оксо-1H-1,4-бензодиазепин-3-ил]-1H-2-индолкарбоксамида, плавящегося при 290^oC; выход = 68%.

Биологические испытания
Исследование соединений на агонистическую активность.

Исследуемое соединение растворяли сначала в диметилформамиде, а затем в инкубационном буфере.

Ацинусы поджелудочной железы получали путем ферментативного переваривания (коллагенеза) поджелудочной железы, изъятой у крысы, которой не давали пищу в течение 18 часов перед экспериментом.

Аликвотные части (485 мкл) инкубировали при температуре 37^oC в течение 30 минут в присутствии возрастающих концентраций исследуемого соединения согласно методу Джонсена и сотр., J.Biol. Chem., 1982, 257 (10), 5554.

Центрифугирование прекращали через 15 секунд.

Надосадочную жидкость выдерживали на ледяной бане для измерения содержания амилазы согласно методу CESKA и др., Clin. Chim., Acta, 1969, 26, 437.

Агонистический эффект оценивался по концентрации исследуемого соединения, способного индуцировать на 50% максимальный ответ, получаемый с самим CCK, т.е. показатель EC₅₀.

Чем меньше показатель EC₅₀, тем выше эффективность исследуемого соединения в качестве агониста к CCK.

Результаты приведены ниже:
Соединение по примеру - EC₅₀ (CCK)
1 - 0,7
2 - 3
3 - 2,5
4 - 5,5
5 - 20
6 - 50
7 - 100
9 - 20
10 - 0,4
11 - 2
Результаты подтверждают агонистическую активность новых соединений.

Описываются новые замещенные производные 3-ациламино-5-фенил-1, 4-бензодиазепин-2-она общей формулы (I), где значения R_I, R_II, Х₁-Х₄ указаны в п. 1 формулы изобретения, которые обладают сродством к рецепторам холецистокинина и поэтому являются новыми агонистами рецепторов холецистокинина в тесте панкреатической амилазы. Описываются также способ их получения и промежуточный продукт. 3 с. и 6 з.п.ф-лы.

1. Защемленные производные 3-ациламино-5-фенил-1,4-бензодиазепин-2-она формулы (I)

в которой R_I - (C₁-C₄)алкил;
R_II означает либо (i) индол, в случае необходимости замещенный на атоме азота группой W, где W - группа (CH₂)_nCOR_o, в которой n = 1 - 3, а R_o - группа OR₂, где R₂ - водород или (C₁-C₄)алкил; либо (ii) группу

в которой Y - атом галогена или группа (C₁-C₃)алкил;
X₁ - X₃, одинаковые или различные, - (C₁-C₃)алкил или (C₁-C₃)алкокси;
X₄ - водород, (C₁-C₃)алкил,
их стереоизомеры и их соли присоединения неорганических или органических кислот. 2. Соединение формулы (I) по п.1, в которой R_II индол, в случае необходимости замещенный, а W, R_I, X₁ - X₄ имеют значения, указанные в формуле (I), а также его соли. 3. Соединение формулы (I) по п.1, в которой R_II - группа R_IIb, Y, R_I, X₁ - X₄ имеют значения, указанные в формуле (I), а также его соли. 4. Соединение формулы (I) по п.1, в которой X₁ находится в положении 2, X₂ - в положении 4, X₃ - в положении 6 и X₄ может независимо находиться в положении 3 или 5 фенильного радикала. 5. Соединение формулы (I) по п.1, в которой X_I - группа 2-(C₁-C₃)алкокси, X₂ - группа 6-(C₁-C₃)-алкокси и X₃, X₄, X_I и X_II имеют значения, указанные в формуле (I), а также его соли. 6. Соединение формулы (I) по п.1, в которой по меньшей мере три заместителя из X₁ - X₄ означают (C₁-C₂)алкил или (C₁-C₂)алкокси. 7. Соединения формулы (I) по любому из пп.1 - 4 в оптически чистой форме. 8. Способ получения соединений формулы (I) по п.1, отличающийся тем, что замещенное бензольное производное формулы (III)

в которой X₁ - X₄ имеют значения, указанные в формуле (I),
подвергают взаимодействию с ангидридом N-карбоксиантраниловой кислоты формулы (IV)

в которой R_I имеет значения, указанные в формуле (I),
с получением дифенилкетона формулы (V)

в которой X₁ - X₄ и R_I имеют значения, указанные для формулы (I),
который подвергают взаимодействию с галогенкетоном формулы
Hal-CH₂COCl,
в которой Hal - предпочтительно атом брома или хлора,
и полученное соединение циклизуют с получением бензодиазепина формулы (VI)

в которой X₁ - X₄ и R_I описаны в п.1,
затем получают оксим соединения VI путем его взаимодействия с трет-бутилатом калия и изоамилнитрилом (CH₃)₂CH-CH₂-CH₂-ONO с получением бензодиазепина формулы (VII)

в которой R_I, X₁ - X₄ имеют значения, указанные для формулы (I),
затем восстанавливают оксимную функцию с помощью водорода в присутствии катализатора рутения на угле с получением аминобензодиазепин-2-она формулы (II)

в которой X₁ - X₄ и R_I имеют значения, указанные для формулы (I),
затем полученное соединение подвергают действию либо кислоты формулы R_IIaCOOH или одной из активированных форм этой кислоты, в которой R_IIa - индол, возможно замещенный по азоту группой W, где W имеет значения, указанные в п.1, либо фенилизоцианата формулы

в которой Y имеет значение, указанное для соединений формулы (I), и полученный целевой продукт общей формулы (I) в случае необходимости переводят в одну из его солей присоединения органических или неорганических кислот. 9. Соединение формулы (II)

в которой R_I - (C₁-C₄)алкил;
X₁-X₃, одинаковые или разные, - (C₁-C₃)алкил или (C₁-C₃)алкокси;
X₄ - водород или (C₁-C₃)алкил.