Способ специфической профилактики мыта лошадей вакциной с иммуномодулятором Российский патент 2024 года по МПК A61K39/07 A61K39/09 C12N1/20 A61P31/04 

Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к способам профилактики инфекционных болезней лошадей.

Способ включает иммунизацию инактивированной вакциной против мыта из штамма бактерий Streptococcus equi Н-5/1 с культуральной жидкостью штамма бактерий Bacillus subtilis ТНП-3. Способ позволяет повысить эффективность вакцинации за счет создания иммунитета высокой напряженности.

В Казахстане используется вакцина «Акынтай» из штамма бактерий Streptococcus equi BNK (патент Республики Казахстан № 31032, опубл. 15.04.2016 г., бюл. 4). Однако вакцина обладает низкой эффективностью и содержит антибиотики, использование которых запрещается или ограничивается в Европейских странах и США.

Известен способ профилактики мыта лошадей, который предусматривает иммунизацию лошадей вакциной из штамма бактерий Streptococcus equi Н-34 с иммуномодулятором (патент РФ на изобретение №2143279 опубл. 07.10.1998 г., бюл. 36). Однако при этом способе используется штамм бактерий Streptococcus equi Н-34, который снят из депонирования в связи с утратой антигенной активности (иммуногенности). Вакцина снята с производства.

Известен штамм бактерий Streptococcus equi Н-5/1, используемый для изготовления вакцины против мыта (патент РФ на изобретение № 2703485, опубл. 17.10.2019 г., бюл. 29). Однако данная вакцина изготовляется без иммуномодулятора. Следовательно, эффективность низкая.

В основу изобретения положена задача разработки способа профилактики мыта молодняка лошадей инактивированной вакциной с иммуномодулятором.

Технический результат изобретения. Для изготовления вакцины используют инактивированный штамм бактерий Streptococcus equi H-5/1. К вакцине добавляют культуральную жидкость штамма бактерий Bacillus subtilis ТНП-3, которая повышает иммуногенность вакцины и иммунобиологическую реактивность организма. Введение вакцины с культуральной жидкостью штамма бактерий Bacillus subtilis ТНП-3 вызывает иммунитет высокой напряженности не менее чем у 90% вакцинированных лабораторных животных и молодняка лошадей.

В качестве компонента вакцины используют инактивированную культуру штамма бактерий Streptococcus equi H-5/1, депонированного во Всероссийской государственной коллекции штаммов микроорганизмов, используемых в ветеринарии и животноводстве ФГБУ Всероссийский государственный центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов (ВГНКИ) (справка о депонировании штамма от 17.07.2023 г., №0007, дата депонирования 12.06.2023 г. под номером ВКШМ-Б-07ГХ, регистрационный номер ВКШМ-Б-141П).

Для повышения эффективности вакцины и повышения иммунобиологической реактивности организма к вакцине в качестве иммуномодулятора добавляют культуральную жидкость бульонной культуры штамма бактерий Bacillus subtilis ТНП-3. Штамм бактерий Bacillus subtilis ТНП-3 выделен из мерзлотно-переходной средне-суглинистой почвы Якутии. Этот штамм депонирован во Всероссийской государственной коллекции микроорганизмов, используемых в ветеринарии и животноводстве Всероссийского государственного центра качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов (ВГНКИ).

Справка о депонировании от 8 августа 2022 г. № 320П (дата депонирования 15.07.2022 г., регистрационный номер ВКШМ-Б-320П).

Получен патент РФ №2105810. «Штамм бактерий Bacillus subtilis, используемый для обеззараживания птичьего помета и навоза от патогенных микроорганизмов» от 27 февраля 1998 г. Лабораторными опытами подтверждена способность штамма бактерий Bacillus subtilis ТНП-3 стимулировать иммунологическую реактивность организма.

Штамм бактерий Streptococcus equi H-5/1 выращивают в мясопептонном бульоне, содержащем 10% сыворотки крови лошади и 1% глюкозы до накопления 3 млрд. микробных клеток в 1 мл. Бактериальную массу инактивируют формалином в течение 72 часов, затем добавляют гель гидроокиси алюминия до 6% концентрации.

Штаммы бактерий Bacillus subtilis ТНП-3 выращивают в МПБ в течение 5 суток при температуре 37°С. Затем центрифугируют при 7000 об/мин в течение 15 минут, сливают надосадочную жидкость во флаконы по 200 мл и стерилизуют в автоклаве при 0,5 атм – 3 минут, в колбах по 1000 мл – 7 минут.

Затем к 2 мл инактивированной вакцины против мыта, добавляют 1 мл культуральной жидкости штамма бактерий Bacillus subtilis ТНП-3.

Для определения напряженности иммунитета отбирают 20 голов белых мышей в возрасте 10-14 суток массой 6-7 г. Первую группу (10 голов) вакцинируют подкожно в дозе 0,5 мл, а вторую группу (10 голов) не вакцинируют и в дальнейшем используют в качестве контроля.

Через 10 дней после вакцинации 10 голов мышей первой группы и 10 голов контрольной группы заражают суточной культурой патогенного штамма мытного стрептококка в дозе 5 LD₅₀. В течение 12 дней наблюдения за животными в первой группе заболевает и погибает 1 голова. В контрольной группе отмечают заболевание и падеж 9 зараженных мышей.

Отбирают 40 голов молодняка лошадей 6-7 месячного возраста и иммунизируют однократно ассоциированной вакциной с культуральной жидкостью из штамма бактерий Bacillus subtilis ТНП-3 в дозе 3 мл.

В течение 6 месяцев наблюдения из первой группы заболевают мытом 2 головы. Эффективность иммунизации составляет 96,8%.

В группе не иммунизированного молодняка заболеваемость составляет 84,9%.

Таким образом, иммунизация инактивированной вакциной из штамма бактерий Streptococcus equi H-5/1 с культуральной жидкостью штамма бактерий Bacillus subtilis ТНП-3 вызывает иммунитет высокой напряженности и может быть использована в качестве способа профилактики мыта молодняка лошадей.

Изобретение относится к области ветеринарии, а именно к способу профилактики мыта лошадей путем иммунизации инактивированной вакциной. Способ профилактики мыта лошадей путем иммунизации инактивированной вакциной, отличающийся тем, что в качестве средства иммунизации используют инактивированную вакцину против мыта из штамма бактерий Streptococcus equi Н-5/1 и культуральной жидкости бульонной культуры штамма бактерий Bacillus subtilis ТНП-3, выращенного в МПБ в течение 5 суток, центрифугированной при 7000 об/мин в течение 15 минут и стерилизованной в автоклаве при 0,5 атм в течение 3 минут, причем к 2 мл инактивированной вакцины против мыта добавляют 1 мл культуральной жидкости Bacillus subtilis ТНП-3, вакцину вводят в дозе 3 мл однократно. Указанное изобретение вызывает иммунитет высокой напряженности не менее чем у 90% вакцинированных лабораторных животных и молодняка лошадей. 1 пр.

Способ профилактики мыта лошадей путем иммунизации инактивированной вакциной, отличающийся тем, что в качестве средства иммунизации используют инактивированную вакцину против мыта из штамма бактерий Streptococcus equi Н-5/1 и культуральной жидкости бульонной культуры штамма бактерий Bacillus subtilis ТНП-3, выращенного в МПБ в течение 5 суток, центрифугированной при 7000 об/мин в течение 15 минут и стерилизованной в автоклаве при 0,5 атм в течение 3 минут, причем к 2 мл инактивированной вакцины против мыта добавляют 1 мл культуральной жидкости Bacillus subtilis ТНП-3, вакцину вводят в дозе 3 мл однократно.