ВИРУСВАКЦИНА ПРОТИВ НЬЮКАСЛСКОЙ БОЛЕЗНИ ПТИЦ ДЛЯ ПЕРОРАЛЬНОГО ПРИМЕНЕНИЯ Российский патент 2000 года по МПК A61K39/17 C12N7/00 

Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии, а именно к вакцине против ньюкаслской болезни птиц, предназначенной для перорального применения. Пероральный способ вакцинации наиболее предпочтителен для массовой иммунизации, причем применение сухих вакцин с кормом имеет преимущества по сравнению с применением вакцин с питьевой водой благодаря их устойчивости в период кормления, ареактогенности, а также удобству фасовки и транспортировки.

Известна вакцина из штамма "Бор-74 ВГНКИ" (а.с. N 826584, 1982 г.), используемая путем ее интраназального, энтерального или аэрозольного введения в организм птицы с последующей ревакцинацией. Недостаток этой вакцины в том, что ее высушивают длительным, трудоемким способом сублимационной сушки; перед использованием регидратируют и применяют в жидком виде с водой, где она быстро инактивируется.

Известна также вирусвакцина ОРОВАК-НБ против инъюкаслской болезни из штамма "Ла-Сота" (Научные основы технологии промышленного производства ветеринарных биологических препаратов. Тезисы докладов V Всероссийской конференции, 14-17 мая 1996 г., с. 24; ТУ 1007-024-93), приготовленная методом контактного обезвоживания и содержащая в своем составе инфекционную экстраэмбриональную жидкость, а также стабилизатор основного состава (сахароза, пептон, казеин, смола КБ-4П-2 и аэросил АМ-1-300). Эту вакцину применяют для ревакцинации кур и цыплят в условиях промышленного птицеводства, для чего скармливают 2 дня подряд после первичной вакцинации аэрозольным или другим методом.

Недостатками этой вакцины являются ее высокая летучесть, что неблагоприятно для вакцинирующего персонала, а также невысокая иммуногенность.

Целью изобретения является вакцина, обладающая более низкой летучестью и более высокой иммуногенностью.

Указанная цель достигается тем, что вакцина против болезни Ньюкасла дополнительно содержит тонкодисперсный мел, стабилизаторами являются сахароза и пептон, а в качестве дегидратанта используют смолу КБ-4П-2, смешанную с гидрофобным аэросилом АМ-1-300. Положительный эффект достигается при следующем соотношении компонентов вакцины, мас.%:
Смола КБ-4П-2 - 58,0 - 61,0
Экстраэмбриональная жидкость куриных эмбрионов, содержащая вакцинный штамм вируса ньюкаслской болезни птиц - 20,0 - 24,0
Пептон - 6,0 - 6,6
Тонкодисперсный мел - 5,6 - 8,1
Сахароза - 3,3 - 4,0
Аэросил АМ-1-300 - остальное
Примеры конкретного выполнения
Пример 1. Вакцину готовят следующим образом: 4 г пептона (ГОСТ 13805-76) и 6 г сахарозы (ГОСТ 58833-75), охлажденные до 4 - 6^oC, заливают 20 мл инфекционной экстраэмбриональной жидкости, представляющей собой 70 - 72-часовую расплодку на 9-дневных куриных эмбрионах вируса болезни Ньюкасла, штамм "Бор-74 ВГНКИ", и путем многократного перемешивания стеклянной палочкой растворяют в ней стабилизирующие добавки. Для обезвоживания вируссодержащей суспензии используют дегидратирующую смесь, состоящую из заранее охлажденных до 4 - 6^oC 60 г ионообменной смолы КБ-4П-2 (ТУ 67-233-82), 1 г гидрофобного аэросила АМ-1-300 (ТУ 6-18-186-74) и 8 г высокодисперсного мела марки М-90Т (ТУ 5743-010-00436303-95). Смесь получают перемешиванием компонентов в экспериментальной лабораторной шаровой мельнице, представляющей собой металлический цилиндрический барабан с внутренним диаметром 12 мм, емкостью 3 дм³. Уровень заполнения мельницы металлическими шарами диаметром 5 и 10 мм равен 1/3 объема, время перемешивания 4 мин, скорость вращения барабана 60 мин^-1. К полученной дегидратирующей смеси добавляют вируссодержащий материал и перемешивают в течение 3 мин при 60 мин^-1. Температура смешиваемой массы не должна превышать 28^oC. Полученную сухую массу отделяют от шаров, выдерживают не менее 4 часов для перераспределения влаги при температуре 4 - 6^oC. Готовую сухую вакцину хранят при температуре 4 - 6^oC.

Вакцина была стерильна в отношении бактериальной и грибковой микрофлоры, безвредна при введении внутримышечно цыплятам, сохраняла биологические и иммуногенные свойства в течение 12 месяцев хранения при температуре 4 - 6^oC и обеспечивала защиту 80 - 94% цыплят при заражении вирулентным штаммом "Т-53".

В таблице 1 приведены биологические и физические свойства вакцины.

Пример 2. 4 г пептона и 8 г сахарозы, охлажденные до 4 - 6^oC, заливают 30 мл инфекционной экстраэмбриональной жидкости, представляющей собой 70 - 72-часовую расплодку на 9-дневных куриных эмбрионах вируса болезни Ньюкасла, штамм "Ла-Сота", и путем многократного перемешивания стеклянной палочкой растворяют в ней стабилизирующие добавки. Для обезвоживания вируссодержащей суспензии используют ионообменную смолу КБ-4П-2, 70 г которой смешивают с 2 г аэросила АМ-1-300 и 7 г мела, охлажденными до 4 - 6^oC, в экспериментальной шаровой лабораторной мельнице. Время перемешивания 4 мин, скорость вращения барабана 60 мин^-1. К полученной смеси добавляют охлажденный до 4 - 6^oC вируссодержащий материал и перемешивают в течение 5 мин при скорости вращения барабана 60 мин^-1. Температура смешиваемой массы не должна превышать 28^oC. Полученную сухую массу отделяют от шаров, выдерживают не менее 4 ч при 4 - 6 ^oC для перераспределения влаги и хранят при температуре 4 - 6^oC.

Цыплят 25-дневного возраста однократно иммунизировали смесью вакцины с кормом из расчета 0,5 г и 1,0 г вакцины на голову. Вакцина была стерильна в отношении бактериальной и грибковой микрофлоры, безвредна при внутримышечном введении цыплятам и сохраняла биологические и иммуногенные свойства в течение 12 месяцев хранения при температуре 4 - 6^oC.

В таблице 1 приведены биологические и физические свойства вакцины, а в таблице 2 - иммуногенные.

Использование вакцины против ньюкаслской болезни птиц для перорального применения обеспечивает по сравнению с вакциной ОРОВАК-НБ следующие преимущества: сокращение кратности вакцинации благодаря более высокой иммуногенности; равномерное смешивание с кормом без запыления помещения.

Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии, а именно к вакцине против ньюкаслской болезни птиц, предназначенной для перорального применения. Вакцина против ньюкаслской болезни обладает низкой летучестью и высокой иммуногенностью. Вакцина дополнительно содержит тонкодисперсный мел, стабилизаторами являются сахароза и пептон, а в качестве дегидрата используют смолу КБ-4П-2, смешанную с гидрофобным аэросилом АМ-1-300. После однократной иммунизации вакцина вызывает напряженный иммунитет у 94,5% цыплят (кур). 2 табл.

Вирусвакцина против ньюкаслской болезни птиц для перорального применения, включающая экстраэмбриональную жидкость куриных эмбрионов, содержащую вакцинный штамм вируса болезни Ньюкасла, пептон, сахарозу, аэросил АМ-1-300, смолу КБ-4П-2, отличающаяся тем, что дополнительно содержит тонкодисперсный мел при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Смола КБ-4П-2 - 58,0 - 61,0
Вакцинный штамм вируса болезни Ньюкасла - 20,0 - 24,0
Пептон - 6,0 - 6,0
Мел тонкодисперсный - 5,6 - 8,1
Сахароза - 3,3 - 4,0
Аэросил АМ-1-300 - Остальное