СУХАЯ ЖИВАЯ ВАКЦИНА ПРОТИВ НЬЮКАСЛСКОЙ БОЛЕЗНИ И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ Российский патент 2001 года по МПК A61K39/17 A61K47/02 C12N7/00 

Описание патента на изобретение RU2162341C1

Изобретение относится к биотехнологии вирусных ветеринарных препаратов, конкретно к получению сухой живой вакцины против ньюкаслской болезни (ВНБ), предназначенной для массовой иммунизации птиц скармливанием с кормом.

Такой способ вакцинации позволяет в короткие сроки проиммунизировать большое поголовье птиц. Кроме того, сухие вакцины более устойчивы при хранении и применении.

Известна эффективная сухая живая вакцина против ньюкаслской болезни для интранозальной и аэрозольной иммунизации птиц, содержащая сухую культуру аллантоисной жидкости куриных эмбрионов (КЭ) вируса ВНБ, штамма "Ла-Сота", стабилизирующую среду - пептон, лактозу, фосфаты калия в эффективных концентрациях (А.С. 1212045 СССР, МКИ3 A 61 K 39/12, C127/00, 1990 г.).

Однако эта вакцина непригодна для оральной иммунизации птиц, так как не обладает необходимыми физико-химическими характеристиками готового вакцинного препарата, обеспечивающего устойчивость вируса ВНБ, штамма "Ла-Сота" при таком способе применения вакцины (в частности, отсутствие в составе вакцины компонента, обеспечивающего защиту ВНБ, штамма "Ла-Сота" в кислом содержимом желудка птиц).

Известна сухая живая вакцина (прототип) против ньюкаслской болезни из штамма "Ла-Сота" для аэрозольной иммунизации (прототип), которая содержит сухую культуру экстраэмбриональной жидкости (КЭ), обезвоживатель - ионообменную смолу КБ-4П-2 с размером частиц 160-630 мкм, аэросил гидроионообменную смолу КБ-4П-2 с размером частиц 160-630 мкм, аэросил гидрофобный марки АМ-1-300 (8,5% по массе), стабилизаторы (сахарозу и пептон) в эффективных концентрациях (А.С. СССР N1785098 A1 A 61 K 39/17, 1990 г.).

В этой вакцине содержится до 8,5% по массе гидрофобного высокодисперсного аэросила, что экологически небезопасно для окружающей среды и обслуживающего персонала при получении и применении такого вакцинного препарата.

Кроме того, при получении сухого препарата вакцины используют обезвоживатель - ионообменную смолу КБ-4П-2 с размером частиц 160-630 мкм, что обеспечивает достаточную эффективность этой вакцины при аэрозольном способе иммунизации, однако коэффициент использования смолы недостаточно высок, соответствует 0,8 вместо 1.

В этой вакцине не обеспечивается защита ВНБ, штамма "Ла-Сота" от воздействия кислой среды желудка птицы при пероральной иммунизации.

Известен способ получения сухой живой вакцины (по А.С. N1212045), характеризующийся тем, что биомассу вакцины замораживают, сублимируют свободную влагу вакуумированием, удаляют связанную влагу нагреванием биомассы с одновременным вакуумированием.

При таком способе получения сухого вакцинного препарата не исключается инактивация ВНБ, штамма "Ла-Сота" за счет наличия фазовых переходов в процессе приготовления вакцины.

Этот способ получения сухого вакцинного препарата требует сложного сублимационного оборудования, процесс обезвоживания длится 24-36 часов.

Известен способ получения сухой живой вакцины (прототип по А. С. N1785098) против ньюкаслской болезни из штамма "Ла-Сота" контактным обезвоживанием. Способ включает стадии: приготовления жидкой биомассы, смешения обезвоживателя с дезагрегантом (аэросилом); обезвоживания биомассы, выдерживания (для перераспределения влаги между биомассой и обезвоживателем); измельчения сухого вакцинного препарата.

По сравнению с аналогами способ-прототип не требует сложного оборудования, позволяет сократить время приготовления вакцины в 8 раз, исключает инактивацию ВНБ, штамм "Ла-Сота" за счет отсутствия фазовых переходов по сравнению с прототипом. Однако в этом способе практически отсутствует получение жидкой биомассы, что необходимо для полноты смешения экстраэмбриональной жидкости со стабилизаторами. Таким образом, не обеспечивается равномерность распределения биомассы по всей структуре вакцины.

Задачей разработки предложенной вакцины является повышение эффективности применения при пероральной иммунизации, повышение стабильности ВНБ штаммов "Ла-Сота", "А(в) ВН", "Клон-30", "Бор-74 ВГНКИ", "V-4" в кислой среде желудка птиц при пероральной иммунизации, упрощение технологии изготовления вакцины, повышение экологической безопасности при получении и применении вакцины, снижение контаминации исходного сырья микроорганизмами.

Указанная задача достигается тем, что в сухой живой вакцине ОРОВАК НБ ВЦ ВК против ньюкаслской болезни, в которой в процентах по массе содержится сухая культура экстраэмбриональной жидкости куриных эмбрионов ВНБ, одного из штаммов "Ла-Сота", в углеводно-белковый комплекс, например:
сахароза (лактоза, глюкоза) - 4,5-6,0
пептон ферментативный - 3,0-4,0
введены
казеин - 1,0-2,0
смола КБ-4П-2 с размером частиц 100-800 мкм - 69,4-80,0
аэросил АМ-1-300 - 1,0-2,0
или крахмал безводный, - 9,2-150
сухая культура экстраэмбриональной жидкости /КЭ/ одного из штаммов ВНБ "Ла-Сота", "А/в/ВН/,) "Клон-30", "Бор-74 ВГНКИ" "V-4" - 1,3 - 1,6
Предложенный способ получения сухой живой вакцины против ньюкаслской болезни, характеризующийся тем, что сухой препарат вакцины получают контактным обезвоживанием биомассы, содержащей стабилизирующие добавки влагоемкой ионообменной смолой КБ-4П-2, предварительно обработанной гидрофобным аэросилом, отличается от прототипа следующими операциями:
Для обеспечения снижения контаминации микроорганизмами исходного сырья способ включает тепловую обработку смеси смолы с аэросилом при температуре 102±2oC в течение 4-х часов и стабилизаторов при температуре 58±2oC двукратно также в течение 4-х часов.

Способ включает: приготовление биомассы; приготовление смеси ионообменной смолы с аэросилом; обезвоживание биомассы смолой.

Получение жидкой биомассы и приготовление сухого препарата вакцины осуществляют в смесителях, обеспечивающих равномерность смешения компонентов с коэффициентом неоднородности не более 15%.

Казеин, введенный в состав вакцины в сочетании с углеводно-белковым комплексом, обеспечивает повышенную стабильность ВНБ, штамма "Ла-Сота" не только при приготовлении и хранении, но и защищает ее от кислого содержимого желудка птиц при пероральной иммунизации;
за счет уменьшения содержания гидрофобного высокодисперсного аэросила в составе вакцины до 1,0-2,0% повысилась экологическая безопасность при получении и применении вакцины "ОРОВАК НБ ВК ВЦ";
рациональное содержание гидрофобного аэросила (1,0-2,0%) в составе вакцины придало ей гидрофобный характер, что снизило ее сорбционные свойства и исключило сорбцию влаги на открытом воздухе, а сочетание со стабилизирующим углеводно-белковым комплексом и влагоемким обезвоживателем обусловили повышенную стабильность вакцины при смешении с кормом и пероральной иммунизации;
время приготовления вакцины сокращено примерно в 8 раз, по сравнению с прототипом, за счет исключения стадии выдерживания и стадии измельчения вакцины.

Первая из них удлиняет процесс приготовления такого типа вакцины минимум на 4 часа, а вторая может приводить к инактивации ВНБ, штамма "Ла-Сота" или других штаммов.

Указанные обстоятельства являются техническим результатом.

Сведения, подтверждающие возможность осуществления изобретения
ПРИМЕР 1.

Перед приготовлением сухого препарата вакцины стабилизаторы - сахарозу, пептон ферментативный и казеин подвергают тепловой обработке при температуре 58±2oC в течение 4 часов два раза, а обезвоживатель - смолу КБ-4П-2 и дезагрегант аэросил АМ-1-300 - при температуре 102±2oC 4 часа. После этого все компоненты охлаждают до температуры 4±2oC.

Жидкую биомассу приготавливают путем смешения-растворения углеводно-белкового комплекса, например сахарозы 12 г, пептона ферментативного 8 г и казеина 4 г, в экстраэмбриональной жидкости 30 мл, содержащей один из штаммов ВНБ, например "Ла-Сота", "А/в/ВН", "Клон-30", "Бор-74 ВГНКИ", "V-4", в заданных концентрациях, в смесителях, обеспечивающих равномерность смешения-растворения компонентов с коэффициентом неоднородности не более 15% и при режимах, исключающих инактивацию ВНБ.

Обезвоживатель /смолу КБ-4П-2, 142 г/ с размером частиц 100-800 мкм смешивают с аэросилом 4 г в соотношении 40:1, жидкую биомассу обезвоживают смесью ионообменной смолы с аэросилом. Смешение указанных компонентов проводят в смесителях, обеспечивающих равномерность смешения компонентов вакцинного препарата с коэффициентом неоднородности не выше 15%.

Готовая вакцина представляет собой сыпучий порошок серо-желтоватого цвета. Вакцину расфасовывают во флаконы объемом 100, 200, 500 см3. Флаконы укупоривают резиновыми пробками и обкатывают металлическими колпачками.

ПРИМЕР 2
Изучают биологическую активность составов вакцины, нами названную "ОРОВАК НБ ВЦ ВК" на основе штамма "Ла-Сота", приготовленную по примеру 1 и хранившуюся в течение 8 месяцев при температуре минус 8-12,2-6 и 18-20oC. Биологическую активность определяют титрованием на 10 суточных КЭ и выражают в lg ЭИД50·г-1. Специфичность ответа КЭ определяют постановкой реакции гемагглютинации.

Результаты по определению биологической активности образцов приведены в таблице 1.

Данные, приведенные в табл. 1, свидетельствуют о том, что контактным обезвоживанием можно получать сухие препараты вируса НБ, штамма "Ла-Сота" с активностью 8,7·108 ЭИД50·г-1 и выше. Испытываемые углеводно-белковые комплексы (сахароза, пептон, казеин; лактоза, пептон, казеин и глюкоза, пептон, казеин) обладают примерно одинаково высоким стабилизирующим действием. Это расширяет диапазон используемых углеводно-белковых комплексов для приготовления вакцины контактным обезвоживанием.

Кроме того, следует отметить, что испытанные два типа посредников (аэросил и крахмал безводный) не оказывают отрицательного влияния на устойчивость вируса в процессе приготовления и хранения.

ПРИМЕР 3
В работе используют ВНБ производственных штаммов "Ла-Сота", "А(в)ВН, "Клон-30", "Бор-74 ВГНКИ", "V-4". Сухие препараты готовят контактным обезвоживанием по примеру 1.

Устойчивость ВНБ различных штаммов определяли как в процессе приготовления, так и хранения при температуре (4±2)oC в течение 1,2,5 и 12 месяцев. Стабильность биологической активности определяют по величине снижения титра инфекционности вируса в процессе хранения при температуре (37±1)oC в течение 1 и 7 суток.

Результаты исследований приведены в табл.2 и 3.

Приведенные в табл.2 результаты исследований свидетельствуют о том, что при приготовлении сухих препаратов вакцины на основе вышеиспытанных штаммов не наблюдается инактивация вируса.

Активность готовых препаратов колеблется от 8,3 (штамм "А(в)ВН") до 9,3 lg ЭИД50·г-1 (штамм "Ла-Сота").

Разница в величине титров готовых препаратов обусловлена не чувствительностью вируса вакцинного штамма, а титром исходных вируссодержащих суспензий.

Активность препаратов 4 штаммов через 12 месяцев хранения при температуре 4±2oC составляет от 2·108 до 5·108 ЭИД50·г-1. Активность вируса вакцинного штамма "А(в)ВН" через 12 месяцев хранения при таком температурном режиме снизилась в 6 раз.

Наиболее чувствительными к термотесту оказались штаммы "А(в)ВН" и "Клон-30": их титры за 7 суток хранения снизились в 60 и 30 раз соответственно. В то же время титр вируса штамма "Клон-30" 5·107 ЭИД50·г-1 соответствует требованиям ТУ по термотесту на сухие препараты против ньюкаслской болезни.

Вирус вакцины из штамма "Ла-Сота" в контактном препарате оказался высокоустойчивым к такому режиму хранения. Титр его в таких условиях хранения практически не изменился.

ПРИМЕР 4
Оценку иммуногенности образца N2 вакцины ОРОВАК НБ ВЦ ВК, приготовленного по примеру N1 из штамма "Ла-Сота", хранившегося при температуре 4±2 в течение 3 месяцев, с биологической активностью 3·108 ЭИД50·г-1, проводят на 100 цыплятах-бройлерах 14-дневного возраста. Сухой препарат вакцины смешивают с комбикормом из расчета 150-300 мг вакцины на 20 г комбикорма. Дозу вакцины скармливают в течение 2 суток один раз в день (утром, из расчета 10 г корма на 1 гол). Эффективность иммунизации контролируют через 14 и 28 дней по титрам антител, выявляемым в РТГА и по результатам контрольного заражения привитых цыплят культурой вирулентного штамма "Т-53" ВНБ в дозе 1000 ЛД50.

Результаты иммунизации цыплят-бройлеров вакциной ОРОВАК НБ ВЦ ВК представлены в табл. 4.

Данные, приведенные в табл. 4, свидетельствуют о том, что пероральная иммунизация цыплят-бройлеров вакциной ОРОВАК НБ ВЦ ВК в дозе 250-300 мг/гол обеспечивает 100 % защиту цыплят от контрольного заражения их культурой вирулентного штамма "Т-53".

ПРИМЕР 5
Проводят оценку иммуногенности вакцины ОРОВАК НБ ВЦ ВК образца N3 (см. табл. 1), приготовленного по примеру 1 из штамма "Ла-Сота", хранившегося 3 месяца при температуре 4±2oC с биологической активностью 3·109 ЭИД50·г-1. Сухой препарат вакцины смешивали с сухим комбикормом (17% остаточная влажность) из расчета получить активность смеси сухого препарата вакцины с комбикормом 3·108, 3·107, 3·106 и 3·105 ЭИД50 на 20 грамм. Смесь вакцины с комбикормом хранили при температуре 20±2 oC в полиэтиленовых мешках 1 и 7 суток. После хранения дозу вакцины скармливают цыплятам-бройлерам 15 дневного возраста в течение 2 суток 1 раз в день (утром из расчета 10 г корма на голову). Эффективность иммунизации контролируют через 14 и 28 дней по титрам антител, выявляемым в РТГА и по результатам контрольного заражения привитых цыплят культурой вирулентного ВНБ штамма "Т-53" в дозе 1000 ЛД50. Результаты исследований по оценке иммуногенной эффективности смеси вакцины с комбикормом, хранившейся 1 и 7 суток при температуре 20±2, приведены в табл.5.

Представленные в табл.5 данные свидетельствуют о высокой иммуногенности смеси вакцина-комбикорм, хранившейся в течение 1 и 7 суток при комнатной температуре.

Кроме того, приведенные в табл.5 результаты исследований подтверждают то, что углеводно-белковые компоненты в сочетании с другими испытанными компонентами обеспечивают не только стабильность инфекционной активности, но и обеспечивают высокую иммуногенность.

Отмеченное выше позволяет расширить ассортимент стабилизирующих компонентов.

ПРИМЕР 6
Массовые испытания вакцины ОРОВАК НБ ВЦ ВК проводят в благополучном по ньюкаслской болезни птицехозяйстве на поголовье 75,5 тыс. голов. За 3-4 дня до вакцинации и в течение 5 дней после нее исключают дачу птице антибиотиков, сульфаниламидных и нитрофурановых препаратов. Иммунизации подвергают только здоровую птицу.

В птицехозяйствах за одни сутки до иммунизации вакцину выставляют на комнатную температуру 20±2oC. Затем вакцину предварительно смешивают в механическом смесителе с комбикормом или другим кормом, остаточная влажность которого не выше 20% по массе. Допускается осуществлять первичное смешение в чистой эмалированной посуде.

Полученную смесь вносят в три разных места большого бункера и продолжают смешивать в течение 15 минут. Смешение вакцины с комбикормом или другим кормом проводят из расчета одна иммуногенная доза вакцины (2,5·107 ЭИД50) должна содержаться в 20 г корма. Дозу вакцины скармливают в течение 2 суток (один раз в день, из расчета 10 г на голову). Контролируют равномерность подачи смеси вакцины с кормом и поедание ее цыплятами.

Перед иммунизацией цыплят не кормят и не поят в течение 12 часов.

Результаты иммунизации контролируют на 14-16, 60-70, 270-300 сутки, исследуя в РТГА 25-40 сывороток крови от цыплят каждой группы. Результаты исследований приведены в табл.6. Вакцину ОРОВАК НБ ВЦ ВК применяют 2- и 3-кратно, а также однократно на фоне применения вакцины из штамма "Бор-74 ВГНКИ".

Из данных, приведенных в табл.6, видно, что иммунный ответ цыплят, которых прививали одной дозой вакцины ОРОВАК НБ ВЦ ВК 2,5·107 ЭИД50, формируется через 14-16 дней при среднем геометрическом титре 4,9 log 2 и напряженности иммунитета 66,6%, достигая максимума через 2 недели после ревакцинации (91,9% и 6,9 log 2).

Введение вакцины птице в возрасте 120-130 дней приводит к незначительному увеличению среднегеометрического титра антител до 7,2-7,8 log 2 и повышает эффективность иммунизации до 100%. К концу срока эксплуатации птицы (18 мес.) уровень антител снижается до 3,6 log 2 при степени защиты 79,2%.

Применение вакцины ОРОВАК НБ ВЦ ВК на фоне 2-кратной интраназальной иммунизации птицы вакциной штамма "Бор-74 ВГНКИ" также повышает степень формирования напряженного иммунитета, сохраняющегося до конца срока использования поголовья птиц.

У цыплят контрольной группы, иммунизированной вакциной штамма "Бор-74 ВГНКИ" интраназально, динамика формирования иммунитета не отличается от вакцины ОРОВАК НБ ВЦ ВК.

ПРИМЕР 7
На птицефабрике промышленного стада цыплят на поголовье в 149,2 тыс., размещенных в двух корпусах, проводят испытания вакцины ОРОВАК НБ ВЦ ВК образца N2, приготовленного по примеру 1. Смесь вакцины с комбикормом для пероральной иммунизации готовят как указано в примере 6. Скармливание смеси осуществляют двукратно в возрасте 36-44 дня и 120 дней в дозе 8·10 ЭИД50 на голову после предварительного интраназального введения вакцины из штамма "Бор-74 ВГНКИ" в возрасте 13-22 дня по общепринятой методике.

Контрольных цыплят прививают интраназально вакциной из штамма "Бор-74 ВГНКИ" в соответствии с "Наставлением..." по ее применению.

Результаты иммунизации контролируют на 14, 21 и 28 сутки, исследуя в РТГА 25-30 проб сыворотки крови от цыплят каждой группы.

Эффективность комплексной иммунизации вакциной ОРОВАК НБ ВЦ ВК перорально и вакциной из штамма "Бор-74 ВГНКИ" интраназально приведены в табл.7.

Из данных, приведенных в табл.7, следует, что иммунный ответ на пероральное введение вакцины ОРОВАК НБ ВЦ ВК достигает максимума через 2-3 недели после иммунизации. Среднегеометрический уровень антител при этом колеблется в пределах от 4,92 до 5,12 log 2 при эффективности иммунизации от 92 до 100%.

Через 3 недели после вакцинации в 120-дневном возрасте эффективность иммунизации так же, как и титры антигемагглютининов, незначительно снижаются, но не достигают запредельного уровня (84-86% и 4,44-4,9 log 2 соответственно). Аналогичная закономерность наблюдается и у цыплят контрольной группы, вакцинированных традиционным интраназальным методом.

ПРИМЕР 8
Сухую вакцину ОРОВАК НБ ВЦ ВК предварительно смешивают с кормом в соотношении 1:20 по массе в механическом смесителе 3-4 минуты. Затем полученную смесь вносят в большой бункер-смеситель в три разных места и смешивают в течение 15 минут. После осуществления смешения полученную смесь вакцины с комбикормом подают в раздаточные бункеры и на ленту для кормления птицы.

Для оценки равномерности распределения вакцины в бункерах и на ленте отбирают пробы.

Равномерность распределения вакцины в бункерах и на ленте устанавливают определением инфекционной активности проб путем титрования КЭ 9-10-суточной инкубации и определения специфичности ответа КЭ постановкой реакции гемагглютинации.

Результаты исследований приведены в табл.8.

Результаты, приведенные в табл.8, свидетельствуют о том, что в реальных условиях на птицефабрике при использовании существующего оборудования можно равномерно смешать вакцину ОРОВАК НБ ВЦ ВК с комбикормом (теоретический расчет активности смеси вакцины с комбикормом с учетом коэффициента разбавления составил величину 1,5·106 ЭИД50·г-1, а практическое - 2,5·106 ЭИД50·г-1).

В процессе продвижения смеси по ленте отмечается незначительное снижение удельной активности, но близко к ошибке метода определения активности.

ПРИМЕР 9
Вакцину ОРОВАК НБ ВЦ ВК на основе вируса штамма "Ла-Сота" вариант N2 после трех лет хранения при температуре 4±2oC смешивают с комбикормом как в примере 6.

Испытания проводят в ОПХ "Манихино" Истринского района, Московской области.

Птицу 60-суточного возраста, свободную от специфических антител к вирусу ньюкаслской болезни, иммунизировали выпаиванием в дозах 7,69 и 6,69 lg ЭИД50 (двукратно) и методом скармливания из расчета 0,25; 0,125 и 0,062 г вакцины на голову, что соответствует 8,39; 8,09 и 7,79 lg ЭИД50 соответственно. Через 21 день отбирали пробы сыворотки крови для определения в РТГА уровня поствакцинальных антител и проводят контрольное заражение птицы вирулентным штаммом "Т-53" в дозе 1000 ДД50, по результатам которого оценивают иммуногенность вакцины. В каждой группе было по 20 цыплят. Результаты исследований приведены в табл.9.

Похожие патенты RU2162341C1

название год авторы номер документа
ВАКЦИНА ПРОТИВ НЬЮКАСЛСКОЙ БОЛЕЗНИ ПТИЦ 1999
  • Григоренко А.И.
  • Махлай А.А.
  • Колосков А.В.
  • Крамской Н.В.
  • Токарик Э.Ф.
  • Смоленский В.И.
  • Фисинин В.И.
  • Филоненко В.И.
  • Горева И.П.
  • Руденко Т.В.
RU2159129C1
ВАКЦИНА ПРОТИВ НЬЮКАСЛСКОЙ БОЛЕЗНИ 2007
  • Шульгина Жанна Леонидовна
  • Горева Ирина Прокофьевна
  • Руденко Татьяна Владиславовна
  • Смоленский Владимир Иванович
  • Радьков Вячеслав Николаевич
  • Григоренко Аркадий Ильич
RU2347584C1
ВИРУСВАКЦИНА ПРОТИВ НЬЮКАСЛСКОЙ БОЛЕЗНИ ПТИЦ ДЛЯ ПЕРОРАЛЬНОГО ПРИМЕНЕНИЯ 1998
  • Евсеева С.Д.
  • Исакова Н.Б.
  • Хрипунов Е.М.
  • Мавликаев Р.Г.
  • Вишняков И.Ф.
  • Окрошидзе М.Г.
RU2149022C1
ГРАНУЛИРОВАННАЯ ВИРУСВАКЦИНА ПРОТИВ НЬЮКАСЛСКОЙ БОЛЕЗНИ ПТИЦ ДЛЯ ПЕРОРАЛЬНОГО ПРИМЕНЕНИЯ 1999
  • Окрошидзе М.Г.
  • Хрипунов Е.М.
  • Евсеева С.Д.
  • Вишняков И.Ф.
  • Мавликаев Р.Г.
  • Исакова Н.Б.
  • Гусев Н.С.
RU2153356C1
ВИРУС-ВАКЦИНА ПРОТИВ НЬЮКАСЛСКОЙ БОЛЕЗНИ ПТИЦ 2004
  • Бурдейный В.В.
  • Старов С.К.
  • Комиссаров В.Б.
  • Бурдейная Л.В.
  • Евсеев А.М.
  • Ельников В.В.
  • Сарбасов А.Б.
RU2259844C1
ЗАЩИТНАЯ СРЕДА ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ВИРУС-ВАКЦИН В ПТИЦЕВОДСТВЕ 2005
  • Придыбайло Николай Дмитриевич
  • Шанская Алла Ивановна
  • Шорников Валентин Васильевич
  • Белкина Ирина Вадимовна
  • Новосадюк Татьяна Владимировна
  • Яковлева Татьяна Егоровна
  • Пучкова Светлана Михайловна
  • Белкин Владимир Анатольевич
  • Трефилов Борис Борисович
  • Котляр Павел Юрьевич
  • Максюта Елена Владиславовна
RU2306949C2
ВИРУСВАКЦИНА ПРОТИВ ИНФЕКЦИОННОГО ЛАРИНГОТРАХЕИТА ПТИЦ ДЛЯ ПЕРОРАЛЬНОГО ПРИМЕНЕНИЯ 2000
  • Евсеева С.Д.
  • Изотова Н.А.
  • Хрипунов Е.М.
  • Исакова Н.Б.
  • Окрошидзе М.Г.
  • Малоголовкина Н.В.
RU2178308C1
ВАКЦИНА ПРОТИВ БОЛЕЗНИ НЬЮКАСЛА И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ 1990
  • Простяков Е.А.
  • Кольцов А.П.
  • Евсеева С.Д.
  • Исакова Н.Б.
  • Шитухин В.И.
  • Григоренко А.И.
  • Власов Н.Г.
  • Вишняков И.Ф.
  • Хрипунов Е.М.
  • Кушнир А.Т.
  • Агафонов Е.П.
SU1785098A1
СПОСОБ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ВИРУСВАКЦИНЫ ПРОТИВ НЬЮКАСЛСКОЙ БОЛЕЗНИ ПТИЦ ДЛЯ ОРАЛЬНОГО ПРИМЕНЕНИЯ 2008
  • Хрипунов Егор Максимович
  • Сухолейстер Кира Васильевна
  • Белун Ольга Владимировна
  • Сливко Игорь Александрович
  • Изотова Надежда Александровна
  • Кушнир Анатолий Тимофеевич
  • Власов Николай Анатольевич
  • Колбасов Денис Владимирович
RU2378013C1
Вакцина против ньюкаслской болезни птиц,способ ее изготовления и способ профилактики ньюкаслской болезни птиц 1979
  • Креймер Ю.Х.
  • Агеева Л.С.
SU826584A1

Иллюстрации к изобретению RU 2 162 341 C1

Реферат патента 2001 года СУХАЯ ЖИВАЯ ВАКЦИНА ПРОТИВ НЬЮКАСЛСКОЙ БОЛЕЗНИ И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ

Изобретение предназначено для производства биопрепаратов для пероральной иммунизации птиц против болезни Ньюкасла (БН). Вакцина содержит высушенную экстраэмбриональную жидкость культуры одного из штаммов вируса болезни Ньюкасла "Ла-Сота", "А(в) ВН", "Клон-30", "Бор-74 ВГНКИ" или "V- 4" с титром 2,0 · 108 - 1,0·1010 ЭИД50 мл-1, казеин, стабилизатор, обезвоживатель и дезагрегант. Казеин обеспечивает стабильность вируса и защищает вакцину от разрушительного воздействия желудочного сока. Из стабилизаторов вакцина содержит белково-углеводный комплекс (сахарозу или лактозу, или глюкозу, пептон ферментативный) в эффективных концентрациях. В качестве обезвоживателя - ионообменную смолу КБ-4П-2 с размером частиц 100 - 800 мкм, дезагреганта - аэросил модифицированный. Получение сухой живой вакцины осуществляют контактным обезвоживанием. Используют ионообменную смолу КБ-4П-2- с размером частиц 100-800 мкм с предварительным нанесением на ее поверхность гидрофобного аэросила 1,0 - 2,0 мас.%. При соблюдении компонентного состава и разработанных режимов приготовления получают сухую живую вакцину, которая при пероральной иммунизации защищает иммунизированную птицу от заражения вирулентным штаммом Т-53 вируса БН в дозе 1000 ЛД50 80 - 100%. 2 с.п. ф-лы, 9 табл.

Формула изобретения RU 2 162 341 C1

1. Сухая живая вакцина против ньюкаслской болезни, содержащая высушенную экстраэмбриональную жидкость культуры вакцинного штамма вируса болезни Ньюкасла, стабилизатор на основе сахарозы и пептона ферментативного, смолу КБ-4П-2- и аэросил марки АМ-1-300, отличающаяся тем, что дополнительно содержит казеин, из высушенной экстраэмбриональной жидкости культуры вакцинного штамма она содержит высушенную экстраэмбриональную жидкость культуры одного из штаммов вируса болезни Ньюкасла "Ла-Сота" или "А/в/ ВН", или "Клон-30", или "Бор-74 ВГНКИ", или "V-4" с титром 2,0·108 - 1,0·1010 ЭИД50мл-1, а смолу КБ-4П-2 - с размером частиц 100 - 800 мкм при следующем содержании компонентов, мас.%:
Высушенная экстраэмбриональная жидкость культуры вакцинного штамма вируса болезни Ньюкасла с титром 2,0·108 - 1,0·1010 ЭИД50мл-1 - 1,3 - 1,6
Сахароза - 4,5 - 6,0
Пептон ферментативный - 3,0 - 4,0
Казеин - 1,0 - 2,0
Аэросил марки АМ-1-300 - 1,0 - 2,0
Смола КБ-4П-2 с размером частиц 100 - 800 мкм - Остальное
2. Способ получения сухой живой вакцины против ньюкаслской болезни, включающий культивирование одного из штаммов вируса болезни Ньюкасла, получение экстраэмбриональной жидкости культуры из выросших штаммов, смешение полученной экстраэмбриональной жидкости со стабилизатором с последующим обезвоживанием смесью смолы КБ-4П-2 и аэросила марки АМ-1-300, отличающийся тем, что культивируют один из штаммов вируса болезни Ньюкасла "Ла-Сота" или "А/в/ ВН", или "Клон-30", или "Бор-74 ВГНКИ", или "V-4" до титра 2,0·108 - 1,0·1010 ЭИД50мл-1, используют смолу КБ-4П-2 с размером частиц 100 - 800 мкм, перед смешиванием и обезвоживанием стабилизатор и смесь смолы и аэросила предварительно подогревают в течение 4-х ч: стабилизатор до температуры 56 - 60oC двукратно, а смесь смолы и аэросила до температуры 100 - 104oC и охлаждают их до температуры 2 - 6oC.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2001 года RU2162341C1

ВАКЦИНА ПРОТИВ БОЛЕЗНИ НЬЮКАСЛА И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ 1990
  • Простяков Е.А.
  • Кольцов А.П.
  • Евсеева С.Д.
  • Исакова Н.Б.
  • Шитухин В.И.
  • Григоренко А.И.
  • Власов Н.Г.
  • Вишняков И.Ф.
  • Хрипунов Е.М.
  • Кушнир А.Т.
  • Агафонов Е.П.
SU1785098A1
ВАКЦИНА ПРОТИВ НЬЮКАСЛСКОЙ БОЛЕЗНИ ПТИЦ 1982
  • Чуйко А.А.
  • Хрипунов Е.М.
  • Богомаз В.И.
  • Семенова Н.М.
  • Огенко В.М.
  • Бурцев В.И.
  • Воронин Е.Ф.
  • Дьякова Л.А.
  • Хабер Н.В.
SU1124585A1
СПОСОБ ИЗГОТОВЛЕНИЯ СУХОЙ ВАКЦИНЫ ПРЕИМУЩЕСТВЕННО ПРОТИВ БОЛЕЗНИ НЬЮКАСЛА 1995
  • Говоров В.Т.
  • Смоленский В.И.
RU2122429C1
RU 2055890 С, 10.03.1996
US 5427791 А, 27.06.1995
US 4251509 А, 17.02.1981
Ковальская Л.А
и др
Новые препараты (биофармкомплекс) и способ их применения для профилактики ньюкаслской болезни
Научные основы технологии промышленного производства ветеринарных биологических препаратов
Тез
докл
V Всероссийской конф
Паровоз для отопления неспекающейся каменноугольной мелочью 1916
  • Драго С.И.
SU14A1

RU 2 162 341 C1

Авторы

Григоренко А.И.

Колосков А.В.

Бредихин В.Н.

Смоленский В.И.

Артемов В.А.

Михайлов В.В.

Даты

2001-01-27Публикация

2000-03-06Подача