КОМБИНАЦИЯ, СОДЕРЖАЩАЯ АНТАГОНИСТ РЕЦЕПТОРА АНГИОТЕНЗИНА II И ЭПОКСИСТЕРОИДНЫЙ АНТАГОНИСТ РЕЦЕПТОРА АЛЬДОСТЕРОНА Российский патент 2001 года по МПК A61K45/06 A61K31/585 A61P9/00 A61P9/04 A61P9/10 A61P9/12 

Описываются комбинации эпоксистероидного антагониста рецептора альдостерона и антагониста рецептора ангиотензина II для использования при лечении расстройства кровообращения, включая сердечно-сосудистые заболевания, такие, как гипертензия, застойная сердечная недостаточность, сердечная гипертрофия, цирроз и асцит. Особый интерес представляют терапии, использующие эпоксидосодержащее стероидное соединение-антагонист рецептора альдостерона, такое, как эпоксимексренон, в комбинации с соединением-антагонистом рецептора ангиотензина II.

Недостаточность сердечной мышцы (или сердечная недостаточность) независимо от того, является ли она следствием предшествующего инфаркта миокарда, сердечной болезни, связанной с гипертензией, или первичной кардиомиопатии, является основной, распространенной по всему свету проблемой. Заболеваемость симптоматической сердечной недостаточностью возрастала непрерывно на протяжении последних нескольких десятилетий.

В клинических терминах декомпенсированная сердечная недостаточность состоит из констелляции признаков и симптомов, которые возникают из застойных органов и тканей с недостаточной перфузией крови с образованием синдрома застойной сердечной недостаточности (СHF). Застой вызывается главным образом повышенным венозным давлением и недостаточной экскрецией натрия (Na⁺) относительно потребления Na⁺ с пищей и в значительной степени связан с циркулирующим уровнем альдостерона (ALDO). Аномальное удерживание Na⁺ происходит через трубчатые эпителиальные клетки по всему нефрону, включая более позднюю часть дистального канальца и кортикальные собирающие протоки, где присутствуют участки рецептора ALDO.

ALDO является наиболее сильным минералокортикоидным гормоном организма. Как связанный термином минералокортикоид, этот стероидный гормон обладает минералрегулирующей активностью. Он стимулирует реабсорбцию Na⁺ не только в почках, но также из нижнего желудочно-кишечного тракта и слюнных и потовых желез, каждый из которых представляет классические ALDO-восприимчивые ткани. ALDO регулирует всасывание Na⁺ и воды за счет экстреции калия (K⁺) и магния (Mg²⁺).

ALDO может также вызывать ответные реакции в неэпителиальных клетках. Вызванные хроническим повышением уровня ALDO в плазме, которое не соответствует потреблению Na⁺ с пищей, эти ответные реакции могут оказывать неблагоприятное влияние на структуру сердечно-сосудистой системы. Следовательно, ALDO может содействовать прогрессирующей природе недостаточности сердечной мышцы по многим причинам.

Синтез и метаболизм ALDO регулируют многочисленные факторы, многие из которых действуют у пациента с недостаточностью сердечной мышцы. Они включают ренин, а также ренин независимые факторы (такие как K⁺, АКТГ, адренокортикоидный гормон), которые стимулируют синтез ALDO. Печеночный кровоток путем регулирования клиренса циркулирующего ALDO способствует определению его концентрации в плазме, важного фактора в сердечной недостаточности, характеризующейся снижением минутного сердечного выброса и печеночного кровотока.

Система ренин-ангиотензин-альдостерон (RAAS) представляет один из гормональных механизмов, участвующий в регулировании гемеостаза давление/объем и также в развитии гипертензии. Активация системы ренин-ангиотензин-альдостерон начинается с секреции ренина из юкстагломерулярных клеток в почках и кульминирует в образовании ангиотензина II, главного активного вида этой системы. Этот октапептид, ангиотензин II, является сильным сосудосуживающим агентом и вызывает также другие физиологические эффекты, такие как стимулирование секреции альдостерона, активирование удерживания натрия и жидкости, ингибирование секреции ренина, повышение активности симпатической нервной системы, стимулирование секреции вазопрессина, индуцирование положительного сердечного инотропного эффекта и модулирование других гормональных систем.

Предыдущие исследования показали, что противодействие связыванию ангиотензина II у его рецепторов является жизнеспособным подходом для ингибирования системы ренин-ангиотензин, благодаря основной роли этого октапептида, который медиирует действия системы ренин-ангиотензин посредством взаимодействия с различными тканевыми рецепторами. Имеется несколько известных антагонистов ангиотензина II, большинство которых пептидные по природе. Такие пептидные соединения имеют ограниченное использование из-за отсутствия у них пероральной биологической доступности или их короткой продолжительности действия. Кроме того, коммерчески доступные пептидные антагонисты ангиотензина II (например, саралазин) имеют существенную остаточную агонистическую активность, которая дополнительно ограничивает их терапевтическое применение.

Известны непептидные соединения со свойствами антагониста ангиотензина II. Например, прежние описания таких непептидных соединений включают натриевую соль 2-н-бутил-4-хлор-1-(2-хлорбензил)имидазол-5-уксусной кислоты, которая обладает специфической конкурирующей активностью антагониста ангиотензина II, как показано в ряде экспериментов по связыванию, функциональных анализах и испытаниях in vivo [P.С. Wong et al., J. Pharmacol. Exp. Ther., 247(1), 1-7, (1988)]. Кроме того, как показано в ряде экспериментов по связыванию, функциональных анализах и испытаниях in vivo, натриевая соль 2-бутил-4-хлор-1-(2-нитробензил)имидазол-5-уксусной кислоты обладает специфической конкурирующей активностью антагониста ангиотензина II [F.T. Chiu et al., European J. Pharmacol., 157, 31-21 (1988)]. Было показано, что семейство производных 1-бензилимидазол-5-ацетата обладает конкурирующей активностью антагониста ангиотензина II [А. Т. Chiu et al, J. Pharmacol. Exp. Ther., 250(3), 867-874 (1989)] . В патенте США 4816463 Blankey et al. описывается семейство производных 4,5,6,7-тетрагидро-1Н-имидазо(4,5-с)тетрагидропиридина, полезных в качестве гипертензивных средств, сообщается, что некоторые из них противодействуют связыванию меченого ангиотензина II с препаратом адренальных рецепторов крыс и, таким образом, вызывают существенное снижение среднего артериального кровяного давления у находящихся в сознании гипертензивных крыс. Другие семейства непептидных антагонистов ангиотензина II характеризовались молекулами, имеющими бифенилметильную часть, присоединенную к гетероциклической части. Например, в Европейском патенте 253310, опубликованном 20 января 1988, описывается ряд соединений аралкилимидазолов, включая, в частности, семейство бифенилметилзамещенных имидазолов, в качестве антагонистов рецептора ангиотензина II. В Европейском патенте 323841, опубликованном 12 июля 1989, описывается четыре класса антагонистов ангиотензина II, а именно, бифенилметилпирролы, бифенилметилпиразолы, бифенилметил-1,2,3-триазолы и бифенилметил-4-замещенные-4Н-1,2,4-триазолы, включая соединение 3,5-дибутил-4-[(2'-карбоксибифенил-4-ил)метил] -4Н-1,2,4-триазол. В патенте США 4880804 Carini et al. описывается семейство соединений бифенилметилбензимидазола в качестве блокаторов рецептора ангиотензина II для использования при лечении гипертензии и застойной сердечной недостаточности.

Известно много лекарственных средств, блокирующих рецептор альдостерона. Например, спиронолактон является лекарственным средством, которое действует на уровень рецептора минералокортикоида путем конкурирующего ингибирования связывания альдостерона. Это стероидное соединение использовали для блокирования альдостеронзависимого переноса натрия в дистальный каналец почки, чтобы снизить отек и лечить первичную артериальную гипертензию и первичный гиперальдостеронизм [F. Mantero et al., Clin. Sci. Mol. Med., 45 (Suppl 1), 219s-224s (1973)]. Спиронолактон используют также обычно при лечении других, связанных с гиперальдостероном болезней, таких, как цирроз печени и застойная сердечная недостаточность [F. J. Saunders et al., Aldactone; Spironolactone: A. Comprehensive Review, Searle, New York (1978)]. Прогрессивно повышаемые дозы спиронолактона от 1 мг до 400 мг в день [т.е. 1 мг/день, 5 мг/день, 20 мг/день] вводили спиронолактон-интолерантному пациенту для лечения связанного с циррозом асцита [P.A. Greenberger et al., N. Eng. Reg. Allergy Proc., 7(4), 343-345 (Jul-Aug. 1986)]. Было обнаружено, что развитие фиброза сердечной мышцы чувствительно к циркулирующим уровням как ангиотензина II, так и альдостерона, и что антагонист альдостерона спиронолактон предупреждает фиброз сердечной мышцы на животных моделях, посредством этого связывания альдостерон с чрезмерным коллагеновым отложением. Было показано, что спиронолактон предупреждает фиброз на животных моделях, независимо от развития левой желудочковой гипертрофии и присутствия гипертензии [C.G. Brilla et al. J. Mol. Cell. Cardiol., 25(5), 563-575 (1993)]. Спиронолактон при дозе в диапазоне от 25 мг до 100 мг в сутки используют для лечения индуцированной диуретиком гипокалемии, когда перорально вводимые калиевые добавки или другие калийсберегающие режимы питания считают неподходящими [Physicians Desk Reference 46th End., p. 2153, Medical Economics Company Inc., Montvale, N.J. (1992)].

Предыдущие исследования показали, что ингибирование АСЕ (фермент, превращающий ангиотензин) ингибирует систему ренин-ангиотензин путем по существу полного блокирования образования ангиотензина II. Для подавления гипертензии клинически использовали много ингибиторов АСЕ. Хотя ингибиторы АСЕ могут эффективно подавлять гипертензию, побочные действия их обычно включают хронический кашель, сыпь на коже, потерю вкусового ощущения, протеинурию и нейропению.

Кроме того, хотя ингибиторы АСЕ эффективно блокируют образование ангиотензина II, уровни альдостерона не регулируются эффективно у некоторых пациентов, имеющих сердечно-сосудистые болезни. Например, несмотря на непрерывное ингибирование АСЕ у гипертензивных пациентов, получающих каптоприл, наблюдали постепенное возвращение уровня альдостерона плазмы к базовому уровню [J. Staessen et аl., J. Endocrinol., 91, 457-465 (1981)]. Подобный результат наблюдали у пациентов с инфарктом миокарда, получающих зофеноприл [С. Borghi et al., J. Clin. Pharmacol., 33, 40-45 (1993)]. Этот феномен был назван "уклонением альдостерона".

Примером другого ряда антагонистов рецептора альдостерона стероидного типа являются эпоксисодержащие производные спиронолактона. Например, в патенте США 4559332, выданном Grob et al., описываются 9α,11α-эпоксисодержащие производные спиронолактона в качестве антагонистов альдостерона, полезных в качестве диуретиков. Эти 9α,11α-эпоксистероиды оценивали на эндокринное действие по сравнению со спиронолактоном [М. De Gasparo et al., J. Pharm. Exp. Ther., 240(2), 650-656 (1987)].

Комбинации антагониста альдостерона и ингибитора АСЕ исследовали для лечения сердечной недостаточности. Известно, что смертность выше у пациентов с повышенным уровнем альдостерона в плазме и что уровень альдостерона повышается по мере того, как СHF прогрессирует из-за активации системы ренин-ангиотензин-альдостерон (RAAS). Установившееся использованием диуретика может дополнительно повышать уровень альдостерона. Ингибиторы АСЕ постоянно ингибируют продуцирование ангиотензина II, но оказывают только слабое и кратковременное антиальдостероновое действие.

Считалось, что сочетание ингибитора АСЕ и спиронолактона обеспечивает существенное ингибирование всей RAAS. Например, комбинации эналаприла и спиронолактона вводили ходячим больным при контролировании кровяного давления [P. Poncelet et al., Am. J. Cardiol., 65(2), 33K-35K (1990)]. В исследовании на 90 пациентах вводили комбинацию каптоприла и спиронолактона и нашли, что она эффективна для подавления стойкого СHF без серьезных случаев гиперкалемии (U. Dahlstrom et al., Am. J. Cardiol., 71, 29A-33A (21 Jan. 1993)] . Описывается, что спиронолактон, вводимый совместно с ингибитором АСЕ, был очень эффективен для 13 из 16 пациентов, пораженных застойной сердечной недостаточностью [A. A. van Vliet et al. Am. J. Cardiol., 71, 21A-28A (21 Jan. 1993)] . Описываются клинические улучшения у пациентов, получающих совместную терапию спиронолактона с ингибитором АСЕ энлаприлом, хотя это сообщение упоминает, что контролируемые исследования нуждаются в определении самых низких эффективных доз и установлении пациентов, которые должны получить наибольшую пользу от комбинационной терапии [F. Zannad, Am. J. Cardiol, 71(3), 34A-39A (1993)].

Комбинации антагониста рецептора ангиотензина II и антагониста рецептора альдостерона известны. Например, в заявке на патент РСТ US 91/09362, опубликованной 25 июня 1992, описывается лечение гипертензии с использованием комбинации имидазолсодержащего соединения как антагониста ангиотензина II и диуретика, такого, как спиронолактон.

Краткое изложение сущности изобретения
Комбинационная терапия, содержащая терапевтически эффективное количество эпоксистероидного антагониста рецептора альдостерона и терапевтически эффективное количество антагониста рецептора ангиотензина II, полезна для лечения расстройства кровообращения, включая сердечно-сосудистые болезни, такие, как гипертензия, застойная сердечная недостаточность, цирроз и асцит.

Выражение "антагонист рецептора ангиотензина II" предназначено для включения одного или нескольких соединений или агентов, обладающих способностью взаимодействовать с рецепторным участком, расположенным на различных тканях тела человека, этот участок является рецептором, имеющим относительно высокое сродство к ангиотензину II, и рецепторный участок ассоциируется с медиированием одной или нескольких биологических функций и событий, таких, как сужение кровеносных сосудов или расширение сосудов, медиированное почками удерживание натрия и жидкости, активность симпатической нервной системы и модулирование секреции различных веществ, таких, как альдостерон, вазопрессин и ренин, для снижения кровяного давления у субъекта, восприимчивого к повышенному кровяному давлению или пораженного повышенным кровяным давлением. Взаимодействия такого антагониста рецептора ангиотензина II с этим рецепторным участком могут быть охарактеризованы либо как "конкурирующие" (т. е. "преодолимые"), либо как "непреодолимые". Эти термины "конкурирующий" и "непреодолимый" характеризуют относительные скорости, более быструю для первого термина и более медленную для последнего термина, при которых соединение-антагонист диссоциирует из связи с рецепторным участком.

Выражение "эпоксистероидный антагонист рецептора альдостерона" предназначено для включения одного или нескольких агентов или соединений, характеризующихся ядром стероидного типа и имеющих эпоксигруппу, присоединенную к ядру, такой агент или соединение связывается с рецептором альдостерона как конкурирующий ингибитор действия самого альдостерона у рецепторного участка так, чтобы модулировать медиированную рецептором активность альдостерона.

Выражение "комбинационная терапия" в определении использования антагониста ангиотензина II и эпоксистероидного антагониста рецептора альдостерона предназначено для включения введения каждого антагониста последовательным способом по схеме, которая обеспечит полезное действие комбинации лекарственных средств, и предназначено для включения совместного введения агентов-антагонистов по существу одновременным способом, таким, как в одной капсуле, имеющей установленное соотношение активных ингредиентов, или в нескольких отдельных капсулах для каждого агента-антагониста.

Выражение "терапевтически эффективный" предназначено для определения количества каждого агента-антагониста для использования в комбинационной терапии, которая достигнет цели, заключающейся в ослаблении гипертензии с улучшением в лечении сердечной недостаточности, путем уменьшения или предупреждения, например, прогрессирования застойной сердечной недостаточности.

Другая представляющая интерес комбинационная терапия будет включать по существу три активных агента, а именно, антагонист All, агент-антагонист рецептора альдостерона и диуретик.

Для комбинации агента-антагониста All и агента-антагониста ALDO эти агенты нужно использовать в комбинации в диапазоне массовых отношений агента-антагониста All к агенту-антагонисту рецептора альдостерона от около 0,5-к-одному до около двадцать-к-одному. Предпочтительный диапазон этих агентов (отношение антагониста All к антагонисту ALDO) должно быть от около один-к-одному до около пятнадцать-к-одному, тогда как более предпочтительный диапазон должен быть от около один-к-одному до около пять-к-одному, в зависимости в конечном счете от выбора антагониста All и антагониста ALDO. Диуретический агент может присутствовать в диапазоне отношений от 0,1-к-одному до около десять-к-одному (отношение антагониста All к диуретику).

Подробное описание изобретения
Эпоксистероидные соединения-антагонисты рецептора альдостерона, подходящие для использования в комбинационной терапии, включают эти соединения, имеющие стероидное ядро, замещенное радикалом эпокситипа. Термин радикал "эпокситипа" предназначен для включения любого радикала, характеризующегося тем, что он имеет атом кислорода в качестве мостика между двумя атомами углерода, примеры его включают следующие остатки.
Термин "стероидный", используемый в выражении "эпоксистероидный", обозначает ядро, обеспечиваемое циклопентенфенантреновым радикалом, имеющим обычные кольца "А", "В", "С" и "D". Радикал эпокситипа может быть присоединен к циклопентенфенантреновому ядру в любом из присоединяемых или замещаемых положений, то есть конденсирован с одним из колец стероидного ядра или этот остаток может быть замещен на кольцевом члене этой кольцевой системы. Выражение "эпоксистероидный" предназначено для включения стероидного ядра, имеющего один или несколько присоединенных к нему радикалов эпокситипа.

Эпоксистероидные антагонисты рецептора альдостерона, подходящие для использования в комбинированной терапии, включают семейство соединений, имеющих эпоксигруппу, конденсированную с кольцом "С" стероидного ядра. Особенно предпочтительными являются 20-спироксановые соединения, характеризующиеся присутствием 9α,11α-замещенного эпоксирадикала. В таблице 1 описывается ряд 9α,11α-эпоксистероидных соединений, которые можно использовать в комбинационной терапии. Эти эпоксистероиды можно получить способами, описанными в патенте США N 4559332 Grob et al., выданном 17 декабря 1985.

Соединения-антагонисты рецептора ангиотензина II, подходящие для использования в комбинационной терапии, описываются в приведенной ниже таблице II. Предпочтительные для использования в комбинационной терапии соединения можно в общем характеризовать структурно, как имеющие две части. Первую часть образует моноарилалкильный радикал, или биарилалкильный радикал, или моногетероарилалкильный радикал, или бигетероарилалкильный радикал. Вторую часть образует гетероциклический радикал или содержащий гетероатом радикал с открытой цепью.

Обычно первая часть, моно/би-арил/гетероарилалкильный радикал, присоединяется ко второй части, гетероциклическому/имеющему открытую цепь радикалу, через алкильную группу моно/би-арил/гетероарилалкильного радикала в любом замещаемом положении второй части, гетероциклического/имеющего открытую цепь радикала. Подходящие первые части, моно/би-арил/гетероарилалкильные радикалы, определяются любым из различных радикалов, перечисленных в формуле I

где сокращения, используемые в радикалах формулы I, определяются следующим образом:
"Аr" обозначает пяти- или шестичленную карбоциклическую кольцевую систему, состоящую из одного кольца или двух конденсированных колец, причем такое кольцо или кольца обычно полностью ненасыщены, но могут быть также частично или полностью насыщены. Наиболее типичным примером "Ar" является радикал "фенил".

"Het" обозначает моноциклическую или бициклическую конденсированную кольцевую систему, имеющую от пяти до одиннадцати кольцевых членов, причем по меньшей мере один из таких кольцевых членов является гетероатомом, выбранным из кислорода, азота и серы, и такая кольцевая система содержит до шести таких гетероатомов в качестве членов кольца.

"Alk" обозначает алкильный радикал или алкиленовую цепь, неразветвленную или разветвленную, содержащую от одного до пяти атомов углерода, "Alk" типично обозначает "метилен", т.е. -CH₂-.

L обозначает одинарную связь или двухвалентный связывающий (линкерный) радикал, выбранный из углеродов, кислорода и серы. Когда "L" представляет углерод, такой углерод имеет два присоединенных к нему атома водорода.

Подходящие вторые части, гетероциклические радикалы, соединений-антагонистов ангиотензина II, используемых в комбинационной терапии, определяются любым из различных радикалов, перечисленных в формуле IIа или IIb.

где каждую из групп от Х¹ до Х⁶ выбирают из -СН=, -СН₂-, -N=, -NH-, О и S, с условием, что по меньшей мере одна из групп от Х¹ до Х² в каждой из формулы IIа и формулы IIb должен быть гетероатомом. Гетероциклический радикал формулы IIа или формулы IIb может быть присоединен через связь от любого кольцевого члена гетероциклического остатка формулы IIa или IIb, имеющего замещаемое или образующее связь положение.

Примеры моноциклических гетероциклических остатков формулы IIа включают тиенил, фурил, пиранил, пирролил, имидазолил, триазолил, пиразолил, пиридил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, изотиазолил, изоксазолил, фуразанил, пирролидинил, пирролинил, фуранил, тиофенил, изопирролил, 3-изопирролил, 2-изоимидазолил, 1,2,3-триазолил, 1,2,4-триазолил, 1,2-дитиолил, 1,3-дитиолил, 1,2,3-оксатиолил, оксазолил, тиазолил, 1,2,3-оксадиазолил, 1,2,4-оксадиазолил, 1,2,5-оксадиазолил, 1,3,4-оксадиазолил, 1,2,3,4-оксатриазолил, 1,2,3,5-оксатриазолил, 1,2,3-диоксазолил, 1,2,4-диоксазолил, 1,3,2-диоксазолил, 1,3,4-диоксазолил, 1,2,5-оксатиазолил, 1,3-оксатиолил, 1,2-пиранил, 1,4-пиранил, 1,2-пиронил, 1,4-пиронил, пиридинил, пиперазинил, симм-триазинил, асимм-триазинил, v-триазинил, 1,2,4-оксазинил, 1,3,2-оксазинил, 1,3,6-оксазинил, 1,2,6-оксазинил, 1,4-оксазинил, о-изоксазинил, п-изоксазинил 1,2,5-оксатиазинил, 1,2,6-оксатиазинил, 1,4,2-оксадиазинил, 1,3,5,2-оксадиазинил, морфолинил, азепинил, оксепинил, тиепинил и 1,2,4-диазепинил.

Примеры бициклических гетероциклических остатков формулы IIb включают бензо[b]тиенил, изобензофуранил, хроменил, индолизинил, изоиндолил, индолил, индазолил, пуринил, хинолизинил, изохинолил, хинолил, фталазинил, нафтиридинил, хиноксалинил, хиназолинил, циннолинил, птеридинил, изохроманил, хроманил, тиено[2,3-b]фуранил, 2Н-фуро[3,2-b]пиранил, 5Н-пиридо[2,3-d][1,2] оксазинил, 1Н-пиразоло[4,3-d] оксазолил, 4Н-имидазо[4,5-d]триазолил, пиразино[2,3-d] пиридазинил, имидазо[2,1-b]тиазолил, циклопента[b]пиранил, 4Н-[1,3] оксатиоло-[5,4-b] пирролил, тиено[2,3-b]фуранил, имидазо[1,2-b][1,2,4] триазинил и 4Н-1,3-диоксоло[4,5-b]имидазолил.

Соединения-антагонисты рецепторов ангиотензина II, образуемые остатками первой и второй частей формул I и II, дополнительно характеризуются кислотным остатком, присоединенным к любому из этих остатков первой и второй частей. Этот кислотный остаток предпочтительно присоединен к остатку первой части формулы I и определяется формулой III:
-U_nA (III),
где n равен числу, выбранному из числа от нуля до трех включительно, и где А представляет кислотную группу, выбранную так, чтобы она содержала по меньшей мере один кислотный атом водорода, и амидные, эфирные и солевые производные таких кислотных групп, где U представляет спейсерную группу, независимо выбранную из одного или нескольких радикалов, включающих: алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, алкенил, алкинил, арил, аралкил или гетероарил, имеющий один или несколько кольцевых атомов, выбранных из атомов кислорода, серы и азота.

Выражение "кислотная группа", выбранная так, чтобы она содержала по меньшей мере один кислотный атом водорода", используемое для определения остатка -U_nA, предназначено для включения химических групп, которые, когда они присоединены к любому замещаемому положению остатка формулы I-IIа/b, придает кислотный характер соединению формулы I-IIа/b. Термин "кислотный характер" обозначает способность быть донором протона, то есть способность соединения формулы I-IIа/b быть донором протона в присутствии принимающего протоны вещества, такого, как вода. Обычно нужно выбирать такую кислотную группу, чтобы ее соединение формулы I-IIа/b, обладающее способностью быть донором протонов, имело pK_a в диапазоне от около единицы до около двенадцати. Более типично, когда соединение формулы I-IIа/b будет иметь pK₂ в диапазоне от около двух до около семи. Примером кислотной группы, содержащей по меньшей мере один кислотный атом водорода, является карбоксильная группа (-СООН). Когда в остатке -U_nA n равно нулю и А представляет -СООН, такая карбоксильная группа должна быть присоединена непосредственно к одному из положений соединения формулы I-IIа/b. Соединение формулы I-IIа/b может иметь один остаток -U_nA, присоединенный в одном из положений соединения формулы I-IIa/b, или может иметь несколько таких остатков -U_nA, присоединенных более чем в одном из положений соединения формулы I-IIа/b. Имеется много примеров кислотных групп, некарбоксильных групп, выбираемых так, чтобы они содержали по меньшей мере один кислотный атом водорода. Такие другие кислотные группы можно сообща назвать "биоизостерами карбоновой кислоты" или назвать "кислотными биоизостерами". Конкретные примеры таких кислотных биоизостер описываются ниже. Соединения формулы I-IIа/b могут иметь один или несколько кислотных протонов и, следовательно, могут иметь одну или несколько величин рК_а. Предпочтительно, однако, чтобы по меньшей мере одна из этих величин рК_а соединения формулы I-IIа/b, придаваемая остатком -U_nA, была в диапазоне от около двух до около семи. Остаток -U_nA может быть присоединен к одному из положений формулы I-II/b через любое положение остатка -U_nA, это приводит к тому, что соединение формулы I-II/b становится относительно стабильным и имеет также лабильный или кислотный протон, чтобы удовлетворить вышеупомянутый критерий рК_а. Например, когда кислотным остатком -U_nA является тетразол, тетразол обычно присоединен у атома углерода кольца тетразола.

Любой из остатков, включенный в формулу I и формулу II, может быть замещен в любом замещаемом положении одним или несколькими радикалами, выбранными из водорода, гидрокси, алкила, алкенила, алкинила, аралкила, гидроксиалкила, галогеналкила, галогена, оксо, алкокси, арилокси, аралкокси, аралкилтио, алкоксиалкила, циклоалкила, циклоалкилалкила, арила, ароила, циклоалкенила, циано, цианоамино, нитро, алкилкарбонилокси, алкоксикарбонилокси, алкилкарбонила, алкоксикарбонила, аралкоксикарбонила, карбоксила, меркапто, меркаптокарбонила, алкилтио, арилтио, алкилтиокарбонила, алкилсульфинила, алкилсульфонила, галогеналкилсульфонила, аралкилсульфинила, аралкилсульфонила, арилсульфинила, арилсульфонила, гетероарила, имеющего один или несколько кольцевых атомов, выбранных из атомов кислорода, серы и азота, и амино и амидорадикалов формулы

где W представляет атом кислорода или атом серы, где каждый из радикалов от R¹ до R⁵ независимо выбирают из водорода, алкила, циклоалкила, циклоалкилалкила, аралкила, арила, YR⁶ и

где Y выбирают из атома кислорода и атома серы и R⁶ выбирают из водорода, алкила, циклоалкила, циклоалкилалкила, аралкила и арила, где каждый из R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁷ и R⁸ независимо выбирают из водорода, алкила, циклоалкила, циано, гидроксиалкила, галогеналкила, циклоалкилалкила, алкоксиалкила, алкилкарбонила, алкоксикарбонила, карбоксила, алкилсульфинила, алкилсульфонила, арилсульфинила, арилсульфонила, галогеналкилсульфинила, галогеналкилсульфонила, аралкила и арила и каждый из R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁷ и R⁸ дополнительно независимо выбирают из амино- и амидорадикалов формулы

где W представляет атом кислорода или атом серы;
где каждый из R⁹, R¹⁰, R¹¹, R¹³ и R¹⁴ независимо выбирают из водорода, алкила, циклоалкила, циано, гидроксиалкила, циклоалкилалкила, алкоксиалкила, галогеналкилсульфинила, галогеналкилсульфонила, аралкила и арила и где R² и R³, взятые вместе, и R⁴ и R⁵, взятые вместе, могут образовать гетероциклическую группу, имеющую от пяти до семи кольцевых членов, включая атом азота этого амино- или амидорадикала, причем эта гетероциклическая группа может дополнительно содержать в качестве кольцевых членов один или несколько гетероатомов, выбранных из атомов кислорода, азота и серы, и эта гетероциклическая группа может быть насыщенной или частично ненасыщенной; где R² и R³, взятые вместе, и R⁷ и R⁸, взятые вместе, могут образовать ароматическую гетероциклическую группу, имеющую пять кольцевых членов, включая атом азота этого амино- или амидорадикала, причем эта ароматическая гетероциклическая группа может дополнительно содержать в качестве кольцевых атомов один или несколько гетероатомов, выбранных из атомов кислорода, азота и серы; или ее таутомер или фармацевтически приемлемую соль.

Комбинационная терапия по этому изобретению будет полезна при лечении ряда расстройств кровообращения, включая сердечно-сосудистые нарушения, такие, как гипертензия, застойная сердечная недостаточность, фиброз миокарда и сердечная гипертрофия. Комбинационная терапия будет полезна также с дополнительными лечебными мероприятиями. Например, комбинационную терапию можно использовать в сочетании с другими лекарственными средствами, такими, как диуретик, чтобы помочь при лечении гипертензии.

Приведенная ниже таблица II содержит описание соединений, являющихся антагонистами ангиотензина II, которые можно использовать в комбинационной терапии. Для каждого соединения, перечисленного в таблице II, указывается опубликованный патентный документ, описывающий химическое получение соединения-антагониста ангиотензина II, а также биологические свойства такого соединения. Содержание каждого из этих патентных документов вводится здесь в качестве ссылки.

Термин "водород" обозначает один атом водорода (Н). Эта водородная группа может быть присоединена, например, к атому кислорода с образованием гидроксильной группы, или в качестве другого примера, одна водородная группа может быть присоединена к атому углерода с образованием группы; или, в качестве другого примера, два атома водорода могут быть присоединены к атому углерода с образованием -СН₂ группы. Когда используют термин "алкил" либо отдельно, либо в других терминах, таких как "галогеналкил" и "гидроксиалкил", термин "алкил" включает неразветвленные или разветвленные радикалы, имеющие от одного до двадцати атомов углерода или предпочтительно от одного до двенадцати атомов углерода. Более предпочтительными алкильными радикалами являются "низшие алкильные" радикалы, имеющие от одного до десяти атомов углерода. Более предпочтительными являются низшие алкильные радикалы, имеющие от одного до пяти атомов углерода. Термин "циклоалкил" включает циклические радикалы, имеющие от трех до десяти атомов углерода, предпочтительно от трех до шести атомов углерода, такие, как циклопропил, циклобутил и циклогексил. Термин "галогеналкил" включает радикалы, где любой один или несколько атомов углерода алкила замещены одним или несколькими атомами галогена, предпочтительно выбранными из брома, хлора и фтора. Термин "галогеналкил" особенно включает моногалогеналкильные, дигалогеналкильные и полигалогеналкильные группы. Моногалогеналкильная группа, например, может иметь в пределах этой группы либо атом брома, хлора, либо фтора. Дигалогеналкильные и полигалогеналкильные группы могут быть замещены двумя или более одинаковыми атомами галогена или могут иметь комбинацию различных атомов галогена. Дигалогеналкильная группа, например, может иметь два атома фтора, такая как дифторметильная и дифторбутильная группы, или два атома хлора, такая как дихлорметильная группа, или один атом фтора и один атом хлора, такая как фторхлорметильная группа. Примерами полигалогеналкила являются трифторметильная, 1,1-дифторэтильная, 2,2,2-трифторэтильная, перфторэтильная и 2,2,3,3-тетрафторпропильная группа. Термин "дифторалкил" включает алкильные группы, имеющие два атома фтора, замещенные на любом одном или двух атомах углерода алкильной группы. Термины "алкилол" и "гидроксиалкил" включают неразветвленные или разветвленные алкильные группы, имеющие от одного до десяти атомов углерода, любой один из которых может быть замещен одной или несколькими гидроксильными группами. Термин "алкенил" включает неразветвленные или разветвленные радикалы, имеющие от двух до двадцати атомов углерода, предпочтительно от трех до десяти атомов углерода, и содержащие по меньшей мере одну углерод-углеродную двойную связь, которая может иметь либо цис-, либо или транс-геометрию в алкенильном радикале. Термин "алкинил" включает неразветвленные или разветвленные радикалы, имеющие от двух до двадцати атомов углерода, предпочтительно от двух до десяти атомов углерода, и содержащие по меньшей мере одну углерод-углеродную тройную связь. Термин "циклоалкенил" включает циклические радикалы, имеющие от трех до десяти кольцевых атомов углерода и включающие одну или несколько двойных связей, включающих соседние кольцевые углероды. Термины "алкокси" и "алкоксиалкил" включают неразветвленные или разветвленные оксисодержащие радикалы, каждый из которых имеет алкильные части, содержащие от одного до десяти атомов углерода, такие как метоксигруппа. Термин "алкоксиалкил" включает также алкильные радикалы, имеющие две или более алкоксигрупп, присоединенных к алкильному радикалу с образованием моноалкоксиалкильных и диалкоксиалкильных групп.

"Алкокси" или "алкоксиалкильные" радикалы могут быть дополнительно замещены одним или несколькими атомами галогена, такими, как фтор, хлор или бром, в результате чего образуются галогеналкокси или галогеналкоксиалкильные группы. Термин "алкилтио" включает радикалы, содержащие неразветвленную или разветвленную алкильную группу, содержащую от одного до десяти атомов углерода и присоединенную к двухвалентному атому серы, такие, как метилтиогруппа. Предпочтительными арильными группами являются группы, состоящие из одного, двух или трех бензольных колец. Термин "арил" включает ароматические радикалы, такие, как фенил, нафтил и бифенил. Термин "аралкил" включает арилзамещенные алкильные радикалы, такие, как бензил, дифенилметил, трифенилметил, фенилэтил, фенилбутил и дифенилэтил. Термины "бензил" и "фенилметил" взаимозаменяемые. Термины "феналкил" и "фенилалкил" взаимозаменяемые. Примером "феналкила" является фенэтил", который взаимозаменяем с "фенилэтилом". Термины "алкиларил", "алкоксиарил" и "галогенарил" означают замещение одной или нескольких групп "алкил", "алкокси" и "галоген", соответственно, на кольце арила, такого как фенильный радикал. Термин "арилокси" и "арилтио" означает радикалы, образованные арильными группами, имеющими атом кислорода или серы, соответственно, через который радикал присоединен к кольцу, примерами их являются фенокси и фенилтио. Термины "сульфинил" и "сульфонил", независимо от того, использованы ли они отдельно или присоединены к радикалам с другими терминами, означают двухвалентные радикалы SO и OS₂, соответственно. Термин "аралкокси", использованный отдельно или в другом термине, включает арильную группу, присоединенную к алкоксигруппе с образованием, например, бензилокси. Термин "ацил", независимо от того, используют ли его отдельно или в таком термине, как ацилокси, означает радикал, образованный остатком после удаления гидроксила из органической кислоты, причем примерами такого радикала являются ацетил и бензоил. "Низший алканоил" является примером более предпочтительного подкласса ацила. Термин "амидо" означает радикал, состоящий из атома азота, присоединенного к карбонильной группе, этот радикал может быть дополнительно замещен таким же образом, как здесь описано. Термин "моноалкиламинокарбонил" взаимозаменяем с "N-алкиламидо". Термин "диалкиламинокарбонил" взаимозаменяем с "N,N-диалкиламидо". Термин "алкенилалкил" означает радикал, который имеет ненасыщенную двойную связь между двумя углеродами и может состоять только из двух углеродов или может быть дополнительно замещен алкильными группами, которые могут необязательно содержать дополнительную ненасыщенную двойную связь. Термин "гетероарил", который не определяли до этого по-другому, включает ароматические циклические системы, содержащие один или два гетероатома, выбранные из кислорода, азота и серы в циклической системе, имеющей пять или шесть кольцевых членов, примерами которых являются тиенил, фуранил, пиридинил, тиазолил, пиримидил и изоксазолил. Такой гетероарил может быть присоединен как заместитель через атом углерода гетероарильной циклической системы или может быть присоединен через атом углерода радикала, замещенного у атома углерода, являющегося кольцевым членом гетероарила, например, через метиленовый заместитель имидазолметильного радикала. Кроме того, гетероарил может быть присоединен через кольцевой атом азота, поскольку после присоединения ароматичность гетероарильного радикала сохраняется. Для любого из вышеупомянутых определенных радикалов предпочтительными радикалами являются радикалы, содержащие от одного до десяти атомов углерода.

Конкретными примерами алкильных групп являются метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, втор-бутил, изобутил, трет-бутил, н-пентил, изопентил, метилбутил, диметилбутил и неопентил. Типичные алкенильные и алкинильные группы могут иметь одну ненасыщенную связь и представляют такие группы, как аллильная группа, или могут иметь несколько ненасыщенных связей, причем эти несколько связей могут быть либо соседними, такими, как структуры алленового типа, или конъюгированными или разделенными несколькими насыщенными атомами углерода.

В комбинацию изобретения включены также изомерные формы вышеописанных соединений-антагонистов рецепторов ангиотензина II и эпоксистероидных соединений-антагонистов рецепторов альдостерона, включая их диастереоизомеры, региоизомеры и фармацевтически приемлемые соли. Термин "фармацевтически приемлемые соли" включает соли, обычно используемые для образования солей щелочных металлов и для образования аддитивных солей свободных кислот или свободных оснований. Природа такой соли некритическая, при условии, что она фармацевтически приемлема. Подходящие фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли можно получить из неорганической кислоты или из органической кислоты. Примерами таких неорганических кислот являются хлористоводородная, бромистоводородная, иодистоводородная, азотная, угольная, серная и фосфорная кислоты. Подходящие органические кислоты можно выбрать из алифатических, циклоалифатических, ароматических, аралифатических, гетероциклических, карбоновых и сульфоновых классов органических кислот, примерами которых являются муравьиная, уксусная, пропионовая, янтарная, гликолевая, глюконовая, молочная, яблочная, винная, лимонная, аскорбиновая, глюкуроновая, малеиновая, фумаровая, пировиноградная, аспарагиновая, глутаминовая, бензойная, антраниловая, п-гидроксибензойная, салициловая, фенилуксусная, миндальная, эмбоновая (памовая), метансульфоновая, этансульфоновая, 2-гидроксиэтансульфоновая, пантотеновая, бензолсульфоновая, толуолсульфоновая, сульфаниловая, мезиловая, циклогексиламиносульфоновая, стеариновая, альгиновая, β-гидроксимасляная, малоновая, галактаровая и галактуроновая кислоты. Подходящие фармацевтически приемлемые основно-аддитивные соли включают соли металлов, полученные из алюминия, кальция, лития, магния, калия, натрия и цинка, или органические соли, полученные из N,N'-дибензилэтилендиамина, хлорпрокаина, холина, диэтаноламина, этилендиамина, меглумина (N-метилглукамина) и прокаина. Все эти соли можно получить обычными способами из соответствующего соединения реакцией, например, соответствующей кислоты или основания, с таким соединением.

Биологическая оценка
Застойная сердечная недостаточность человека (CHF) представляет комплексное состояние, обычно инициированное сосудистой гипертензией или инфарктом миокарда (МI). Для определения вероятной эффективности комбинационной терапии для CHF важно определить активность индивидуальных компонентов комбинационной терапии. Поэтому в анализах от "А" до "С" профили антагонистов рецепторов ангиотензина II определяли для многих соединений, описанных здесь в таблице II. В анализах "D" и "Е" описываются способы оценки комбинационной терапии по изобретению, а именно, антагониста рецептора ангиотензина II таблицы II и эпоксистероидного антагониста рецептора альдостерона таблицы 1. Эффективность индивидуальных лекарственных средств, эпоксимексренона и блокатора рецептора ангиотензина II, в этих лекарственных средствах, введенных вместе при различных дозах, оценивают на моделях (грызунов) гипертензии и CHF с использованием хирургических альтераций для индуцирования либо гипертензии, либо МI. Эти способы и результаты таких анализов описываются ниже.

Анализ А. Активность связывания ангиотензина II
Соединения изобретения испытывали на способность связываться с рецептором ангиотензина II гладких мышц с использованием препарата крысиной маточной мембраны. Ангиотензин II (All) был куплен у Peninsula Labs. ¹²⁵I-Ангиотензин II (специфическая активность 2200 Ки/ммоль) был куплен у Du Font-New England Nuclear. Другие химикаты были получены от Sigma Chemical Со. Этот анализ проводили в соответствии со способом Douglas et al. [Endocrinology, 106, 120-124 (1980)] . Крысиные маточные мембраны получали из свежей ткани. Все процедуры проводили при 4°С. Матки отделяли от жира и гомогенизировали в забуференном фосфатном физиологическом растворе при рН 7,4, содержащем 5 мМ EDTA (этилендиаминтетрауксусная кислота). Гомогенат центрифугировали при 1500 x r в течение 20 мин и супернатант повторно центрифугировали при 100000 x r в течение 60 мин. Осадок после центрифугирования суспендировали в буфере, состоящем из 2 мМ EDTA и 50 мМ трис-HCl (рН 7,5) до конечной концентрации белка 4 мг/мл. В пробирки для анализа загружали 0,25 мл раствора, содержащего 5 мМ MgCl₂ 2 мМ EDTA, 0,5% бычьего сывороточного альбумина, 50 мМ трис-HCl, рН 7,5 и ¹²⁵I-Аll (приблизительно 10⁵ импульсов в минуту) в отсутствие иди в присутствии немеченного лиганда. Реакцию инициировали добавлением мембранного белка, и смесь инкубировали при 25°С в течение 60 мин. Инкубирование завершали добавлением охлажденного льдом 50 мМ трис-HCl (рН 7,5), и смесь фильтровали для отделения связанного с мембраной меченого пептида от свободного лиганда. Пробирку для инкубирования и фильтр промывали буфером, охлажденным льдом. Фильтры анализировали на радиоактивность в гамма-счетчике Micromedic. Неспецифическое связывание определяли как связывание в присутствии 10 мкМ немеченого All. Специфическое связывание вычисляли как общее связывание минус неспецифическое связывание. О рецептор-связывающем сродстве соединения-антагониста All указывала концентрация (IC₅₀) испытуемого антагониста All, которая дает 50% вытеснение общего специфически связанного ¹²⁵I-All из рецептора АТ₁ ангиотензина II. Данные по связыванию анализировали программой построения нелинейной кривой методом наименьших квадратов. Результаты приводятся в таблице III.

Анализ В: Ответная реакция гладких мышц сосудов на All in vitro
Соединения изобретения испытывали на активность антагониста в кольцах кроличьей аорты. Самцов белых кроликов New Zealand (2-2,5 кг) умерщвляли с использованием чрезмерной дозы пентобарбитала и обескровливали через сонные артерии. Грудную аорту удаляли, очищали от прилипшего жира и соединительной ткани и затем нарезали на сегменты кольца 3 мм. Эндотелий удаляли из колец мягким пропусканием свернутого куска фильтровальной бумаги в полость сосуда. Кольца затем помещали в баню для ткани с водяной рубашкой и выдерживали при 37°С между подвижным и фиксированным концами проволоки из нержавеющей стали с подвижным концом, присоединенным к датчику FT03 Grass, соединенным с полиграфом Grass Model 7D для регистрации изометрической силовой реакции. В баню вводили 20 мл оксигенированного (95% кислорода/5% диоксида углерода) раствора Кребса следующего состава (мМ): 130 NaCl, 15 NaHCO₃, 15 KCl, 1,2 NaH₂PO₄, 1,2 MgSO₄, 2,5 CaCl₂ и 11,4 глюкозы. Препараты были уравновешены в течение одного часа до того, как на кольца накладывали приблизительно один грамм положительного напряжения. Затем регистрировали кривые концентрация ангиотензина II - ответная реакция (3 x 10^-10 - 1 x 10^-5 М). Испытывали каждую концентрацию All, чтобы выявить его максимальную сократительную способность, и затем All смывали несколько раз в течение 30 мин перед повторным введением All с более высокой концентрацией. Кольца аорты подвергали воздействию испытуемого антагониста при 10^-5 М в течение 5 мин перед воздействиям All. Для получения всех кривых концентрация - ответная реакция в присутствии или отсутствие испытуемого антагониста использовали соседние сегменты одного и того же кольца аорты. Эффективность испытуемого соединения выражали в терминах величин рА₂ и вычисляли по способу Н.О. Schild [Br. J. Pharmacol. Cgemother. , 2, 189-206 (1947)]. Величина pA₂ является концентрацией антагониста, которая повышает величину ЕС₅₀ для All в два раза. Каждый испытуемый антагонист оценивали в кольцах аорты двух кроликов. Результаты приводятся в таблице III.

Анализ С: Внутрижелудочная прессорная реакция на антагонисты All in vivo
Самцов крыс Sprague-Dawley массой 225-300 г анестезировали метогекситалом (30 мг/кг, внутрибрюшинно) и в бедренную артерию и вену имплантировали катетеры. Катетеры туннелировали подкожно для выхода дорсально ниже головы и между лопатками. Катетеры заполняли гепарином (1000 ед./мл солевого раствора). Крыс возвращали в их клетку и давали регулярно корм и воду по потребности. После полного выздоровления от хирургии (3-4 дня) крыс помещали в камеры Lucite и артериальную линию соединяли с датчиком давления. Артериальное давление регистрировали на полиграфе Gould (мм Hg). Ангиотензин II вводили как болюс 30 нг/кг через венозный катетер, поставляемый в объеме 50 мкл при помощи струи 0,2 мл солевого раствора. Прессорную ответную реакцию в мм Hg измеряли по разнице между артериальным давлением до инъекции и максимально достигаемым давлением. Инъекцию All повторяли каждые 10 мин до тех пор, пока три последовательные инъекции не давали ответные реакции в пределах 4 мм Hg. Затем находили среднее значение этих трех реакций, которое представляло контрольную ответную реакцию на All. Испытуемое соединение суспендировали в 0,5% метилцеллюлозе в воде и вводили кормлением через желудочный зонд. Введенный объем был 2 мл/кг массы тела. Стандартная доза была 3 мг/кг. Инъекции болюсов ангиотензина II вводили через 30, 45, 60, 75, 120, 150 и 180 мин после кормления через желудочный зонд. Прессорную ответную реакцию на All измеряли в каждой точке времени. Крыс затем возвращали в их клетку для будущего испытания. Время между испытаниями было минимум 3 дня. Ингибирование в процентах вычисляли для каждой точки времени после кормления через желудочный зонд по следующей формуле:
[(Контрольная ответная реакция - ответная реакция в точке времени)/контрольная ответная реакция] x 100.

Результаты приводятся в таблице III.

Анализ "D": Гипертензивная крысиная модель
Самцов крыс делают гипертензивными путем установления серебряного зажима с апертурой 240 мкм на левую почечную артерию, оставляя противоположную почку нетронутой. Контрольных крыс подвергают той же процедуре, но без присоединения зажима. За неделю до операции животных, которых нужно было сделать гипертензивными, распределяют по отдельным группам и начинают обрабатывать лекарственным средством. Группам животных вводят наполнитель, только антагонист All, только эпоксимексренон и комбинации антагониста All и эпоксимексренона при различных дозах. (См. табл. А).

Через 12-24 недели оценивали систолическое и диастолическое кровяное давление, диастолическое давление левого вентрикулярного конца, левое вентрикулярное dP/dT и частоту сердечных сокращений. Сердце удаляли, взвешивали, измеряли и фиксировали в формалине. Содержание коллагена сердечных срезов оценивали с использованием компьютеризованного томографического анализа срезов, окрашенных пикросириусом. Можно было бы ожидать, что крысы, обработанные комбинационной терапией антагонистом All и эпоксимексреноном, по сравнению с крысами, обработанными любым из этих компонентов, будут проявлять улучшение в сердечной функции.

Анализ "Е": Крысиная модель инфаркта миокарда
Самцов крыс анестезируют, и сердце временно выводят на поверхность тела после торактомии через левую сторону. Левую переднюю нисходящую коронарную артерию лигируют наложением шва. Грудную клетку закрывают, и животные выздоравливают. Контрольные животные имеют шов, проходящий насквозь без лигирования. За одну неделю до хирургии животных подвергают инфаркту и разделяют на отдельные группы и начинают обработку лекарственными средствами. Группам животных вводят наполнитель, только антагонист All, только эпоксимексренон и комбинацию антагониста All и эпоксимексренона в различных дозах (см. табл. Б).

Через шесть недель оценивают систолическое и диастолическое кровяное давление, диастолическое давление левого вентрикулярного конца, левое вентрикулярное dP dT и частоту сердечных сокращений. Сердца удаляют, взвешивают, измеряют и фиксируют в формалине. Содержание коллагена в сердечных срезах оценивают с использованием компьютеризованного томографического анализа срезов, окрашенных пикросириусом. Можно было бы ожидать, что крысы, обработанные комбинацией антагониста All и эпоксимексренона, по сравнению с крысами, обработанными любым одним из этих компонентов, будут проявлять улучшение в сердечной функции.

Испытуемые соединения вводили внутрижелудочно, за исключением соединений примеров 1-2, 4-25, 27-29, 30-79, 108-109, 111, 118 и 139-149, которые вводили интрадуоденально.

Введение антагониста рецептора ангиотензина II и антагониста рецептора альдостерона можно проводить последовательно в отдельных готовых препаративных формах или можно выполнять совместным введением в одной готовой препаративной форме или отдельных готовых препаративных формах. Введение можно выполнять пероральным путем или внутривенными, внутримышечными или подкожными инъекциями. Готовая препаративная форма может быть в виде болюса или в виде водных или неводных изотонических стерильных инъекционных растворов или суспензий. Эти растворы и суспензии можно получить из стерильных порошков или гранул, имеющих один или несколько фармацевтически приемлемых носителей или разбавителей или связывающее вещество, такое, как желатин или гидроксипропилметилцеллюлоза, вместе с одним или несколькими компонентами из смазывающего вещества, консерванта, поверхностно-активного вещества и диспергирующего агента.

Для перорального введения фармацевтическая композиция может быть в форме, например, таблетки, капсулы, суспензии или жидкости. Фармацевтическую композицию предпочтительно изготовляют в форме дозированной единицы, содержащей конкретное количество активного ингредиента. Примерами таких дозированных единиц являются таблетки или капсулы. Они могут благоприятно содержать количество каждого активного ингредиента от около 1 до около 250 мг, предпочтительно от около 25 до 150 мг. Подходящая суточная доза для млекопитающего может широко изменяться в зависимости от состояния пациента и других факторов. Тем не менее доза от около 0,01 до 30 мг/кг массы тела, предпочтительно от около 1 до 15 мг/кг массы тела, может быть подходящей.

Активные ингредиенты можно вводить также инъекцией в виде композиции, где в качестве подходящего носителя можно использовать, например, солевой раствор, декстрозу или воду. Подходящая суточная доза каждого активного компонента составляет от около 0,01 до 15 мг/кг массы тела, вводимых инъекцией в виде множественных доз в зависимости от болезни, которую лечат. Предпочтительная суточная доза будет от около 1 до 10 мг/кг массы тела. Соединения, показанные для профилактической терапии, предпочтительно будут вводиться при суточной дозе обычно в диапазоне от около 0,1 мг до около 15 мг на килограмм массы тела в день. Более предпочтительная доза будет в диапазоне от около 1 мг до около 15 мг на килограмм массы тела. Наиболее предпочтительная доза находится в диапазоне от около 1 до около 10 мг на килограмм массы тела в день. Подходящую дозу можно вводить в виде множественных субдоз на день. Эти субдозы можно вводить в унифицированных лекарственных формах. Обычно доза или субдоза может содержать от около 1 мг до около 100 мг активного соединения на стандартную лекарственную форму. Более предпочтительная доза будет содержать от около 2 мг до около 50 мг активного соединения на стандартную лекарственную форму. Наиболее предпочтительной является лекарственная форма, содержащая от около 3 мг до около 25 мг активного соединения на стандартную дозу.

В комбинационной терапии антагонист рецептора альдостерона может присутствовать в количестве в диапазоне от около 5 мг до около 400 мг и антагонист All может присутствовать в количестве в диапазоне от около 1 мг до около 800 мг, причем отношения антагониста альдостерона к антагонисту All находятся в диапазоне от около 400:1 до около 1:160.

В предпочтительной комбинационной терапии антагонист рецептора альдостерона может присутствовать в количестве в диапазоне от около 10 мг до около 200 мг и антагонист All может присутствовать в количестве в диапазоне от около 5 мг до около 600 мг, причем отношения антагониста альдостерона к антагонисту All находятся в диапазоне от около 40:1 до около 1:60.

В более предпочтительной комбинационной терапии антагонист рецептора альдостерона может присутствовать в количестве в диапазоне от около 20 мг до около 100 мг и антагонист All может присутствовать в количестве в диапазоне от около 10 мг до около 400 мг, причем отношения антагониста альдостерона к антагонисту All находятся в диапазоне от около 10:1 до около 1:20.

Схему приема лекарственного средства для лечения болезненного состояния комбинационной терапией по этому изобретению выбирают в соответствии с рядом факторов, включая тип, возраст, массу, пол и медицинское состояние пациента, тяжесть заболевания, путь введения и конкретное применяемое соединение, и поэтому она может широко варьировать.

Для терапевтических целей активные компоненты этой комбинационной терапии обычно сочетают с одним или несколькими вспомогательными средствами, подходящими для показанного пути введения. Если компоненты вводят перорально, их можно смешать с лактозой, сахарозой, порошком крахмала, целлюлозными эфирами алкановых кислот, алкиловыми эфирами целлюлозы, тальком, стеариновой кислотой, стеаратом магния, оксидом магния, магниевыми и кальциевыми солями фосфорной и серной кислот, желатином, аравийской камедью, альгинатом натрия, поливинилпирролидоном и/или поливиниловым спиртом и затем таблетировать или капсулировать для обычного введения. Такие капсулы или таблетки могут содержать готовую препаративную форму пролонгированного действия, когда ее можно получить в дисперсии активного соединения в гидроксипропилметилцеллюлозе. Готовые препаративные формы для парентерального введения могут быть в виде водных или неводных изотонических стерильных инъекционных растворов или суспензий. Эти растворы и суспензии можно получить из стерильных порошков или гранул, имеющих один или несколько носителей или разбавителей, упомянутых для использования в готовых препаративных формах для перорального введения. Компоненты можно растворить в воде, полиэтиленгликоле, пропиленгликоле, этаноле, кукурузном масле, хлопковом масле, арахисовом масле, кунжутном масле, бензиловом спирте, хлориде натрия и/или различных буферах. Другие вспомогательные средства и способы введения хорошо и широко известны в фармацевтической области.

Несмотря на то, что это изобретение было описано в отношении конкретных примеров осуществления изобретения, частности этих примеров осуществления не должны истолковываться как ограничения. Т Ти

Заявлена комбинация, содержащая терапевтически эффективное количество эпоксистероидного антагониста рецептора альдостерона и терапевтически эффективное количество антагониста рецептора ангиотензина II. Комбинация может быть использована в медицине для лечения расстройства кровообращения, включая сердечно-сосудистые нарушения, такие, как гипертензия, застойная сердечная недостаточность, цирроз и асцит. Предпочтительными антигонистами рецептора ангиотензина II являются те соединения, которые имеют высокую активность и биологическую доступность и характеризуется тем, что имеют остаток имидазола или триазола, присоединенный к дифенилметильному или пиридинил/фенилметильному радикалу. Предпочтительными эпоксистероидными антагонистами рецептора альдостерона являются 20-спироксановые стероидные соединения, характеризующиеся присутствием 9α, 11α-замещенной эпоксигруппы. Предпочтительно комбинация включает в качестве антагониста рецептора ангиотензина II 5-[2-[5-[(3,5-дибутил-1H-1,2,4-триазол-1-ил)метил] -2-пиридинил] фенил-1H-тетразол, в качестве антагониста рецептора альдостерона - эпоксимексренон. Использование изобретения позволяет ослабить гипертензию и одновременно уменьшить или предупредить прогрессирование застойной сердечной недостаточности. 10 з.п. ф-лы, 5 табл.

1. Комбинация, содержащая терапевтически эффективное количество антагониста рецептора ангиотензина II и терапевтически эффективное количество эпоксистероидного антагониста рецептора альдостерона. 2. Комбинация по п.1, отличающаяся тем, что указанный эпоксистероидный антагонист рецептора альдостерона выбран из эпоксисодержащих соединений. 3. Комбинация по п.2, отличающаяся тем, что указанное эпоксисодержащее соединение имеет эпоксигруппу, конденсированную с кольцом "С" стероидного ядра 20-спироксанового соединения. 4. Комбинация по п.3, отличающаяся тем, что указанное 20-спироксановое соединение характеризуется присутствием 9α,11α-замещенной эпоксигруппы. 5. Комбинация по п.2, отличающаяся тем, что указанное эпоксисодержащее соединение выбрано из группы, состоящей из: метилового эфира γ-лактона(7α,11α,17α)-9,11-эпокси-17-гидрокси-3-оксо-прегн-4-ен-7,21-дикарбоновой кислоты, диметилового эфира (7α,11α,17α)-9,11-эпокси-17-гидрокси-3-оксопрегн-4-ен-7,21-дикарбоновой кислоты, γ-лактона(6β,7β,11β,17β)-9,11-эпокси-6,7-дигидро-17-гидрокси-3-оксо-3¹Н-циклопропа/6,7/прегна-4,6-диен-21-карбоновой кислоты, монокалиевой соли (7α,11α,17α)-7-(1-метилэтилового)эфира-9,11-эпокси-17-гидрокси-3-оксо-прегн-4-ен-7,21-дикарбоновой кислоты, монокалиевой соли 7-метилового эфира (7α,11α,17α)-9,11-эпокси-17-гидрокси-3-оксо-прегн-4-ен-7,21-дикарбоновой кислоты, γ-лактона (6α,7α,11α)-9,11-эпокси-6,7-дигидро-17-гидрокси-3-оксо-3¹Н-циклопропа/6,7/прегна-1,4,6-триен-21-карбоновой кислоты, метилового эфира (6α,7α,11α,17α)-9,11-эпокси-6,7-дигидро-17-гидрокси-3-оксо-3¹Н-циклопропа/6,7/прегна-4,6-диен-21-карбоновой кислоты, монокалиевой соли (6α,7α,11α,17α)-9,11-эпокси-6,7-дигидро-17-гидрокси-3-оксо-3¹Н-цикопропа/6,7/прегна-4,6-диен-21-карбоновой кислоты, γ-лактона (6α,7α,11α,17α)-9,11-эпокси-6,7-дигидро-17-гидрокси-3-оксо-3¹Н-циклопропа/6,7/прегна-4,6-диен-21-карбоновой кислоты, этилового эфира γ-лактона (7α,11α,17α)-9,11-эпокси-17-гидрокси-3-оксо-прегн-4-ен-7,21-дикарбоновой кислоты, 1-метилэтилового эфира γ-лактона (7α,11α,17α)-9,11-эпокси-17-гидрокси-3-оксо-прегн-4-ен-7,21-дикарбоновой кислоты. 6. Комбинация по п.1, отличающаяся тем, что указанным антагонистом рецептора ангиотензина II является 5-/2-/5-/(3,5-дибутил-1Н-1,2,4-триазол-1-ил)метил/-2-пиридинил)фенил-1Н-тетразол или его фармацевтически приемлемая соль и указанным эпоксистероидным антагонистом рецептора альдостерона является 9α,11α-эпокси-7α-метоксикарбонил-20-спирокс-4-ен-3,21-дион или его фармацевтически приемлемая соль. 7. Комбинация по п.6, отличающаяся тем, что антагонист рецептора ангиотензина II и эпоксистероидный антагонист рецептора альдостерона присутствуют в указанной комбинации при массовом отношении антагониста рецептора ангиотензина II к эпоксистероидному антагонисту рецептора альдостерона в диапазоне приблизительно от 1 : 1 до 20 : 1. 8. Комбинация по п.7, отличающаяся тем, что массовое отношение составляет приблизительно от 5 : 1 до 15 : 1. 9. Комбинация по п.8, отличающаяся тем, что массовое отношение составляет приблизительно 10 : 1. 10. Комбинация по п.1, отличающаяся тем, что указанный антагонист рецептора ангиотензина II выбран из группы, состоящей из саралазинацетата, кандесартан силексетила, CGP-63170, EMD-66397, КТ3-671, LR-B/081, валсартана, А-81282, BIBR-363, BIBS-222, BMS-184698, кандесартана, CV-11194, EXP-3174, KW-3433, L-161177, L-162154, LR-B/057, LY-235656, PD-150304, U-96849, U-97018, UP-275-22, WAY-126227, WK-1492.2K, YM-31472, лосартан калия, E-4177, EMD-73495, эпросартана, HN-65021, ирбесартана, L-159282, МЕ-3221, SL-91.0102, Тасосартана (Tasosartan), Телмисартана (Telmisartan), UP-269-6, YM-358, CGP-49870, GA-0056, L-159689, L-162234, L-162441, L-163007, PD-123177, А-81988, BMS-180560, CGP-38560A, CGP-48369, DA-2079, DE-3489, DuP-167, EXP-063, EXP-6155, EXP-6803, EXP-7711, EXP-9270, FK-739, HR-720, ICI-D6888, ICI-D7155, IСI-D8731, изотеолина, KRI-1177, L-158809, L-158978, L-159874, LR B087, LY-285434, LY-302289, LY-315995, RG-13647, RWJ-38970, RWJ-46458, S-8307, S-8308, саприсартана, саралазина, Сармезина, WK-1360, X-6803, ZD-6888, ZD-7155, ZD-8731, BIBS39, Cl-996, DMP-811, DuP-532, EXP-929, L-163017, LY-301875, XH-148, XR-510, золасартана и РD-123319. 11. Комбинация по п.10, отличающаяся тем, что указанный антагонист рецептора ангиотензина II выбирают из группы, состоящей из саралазинацетата, кандесартан силексетила, CGP-63170, EMD-66397, КТЗ-671, LR-B/081, валсартана, А-81282, BIBR-363, BIBS-222, BMS-184698, кандесартана, CV-11194, EXP-3174, KW-3433, L-161177, L-162154, LR-B/057, LY-235656, PD-150304, U-96849, U-97018, UP-275-22, WAY-126227, WK-1492.2K, YM-31472, лосартана калия, E-4177, EMD-73495, эпросартана, HN-65021, ирбесартана, L-159282, ME-3221, SL-91.0102, Тасосартана (Tasosartan), Телмисартана (Telmisartan), UP-269-6, YM-358, CGP-49870, GA-0056, L-159689, L-162234, L-162441, L-163007, PD-123177.