Изобретение относится к области биохимической фармакологии и медицинской химии. Более конкретно, настоящее изобретение относится к готовым препаративным формам в виде высокодозированных липосомных аэрозолей различных фармацевтических препаратов, включая циклоспорин A и будезонид.
Многие различные заболевания легких успешно лечатся с применением аэрозольных систем доставки лекарственных средств, используемых для их нанесения непосредственно на область легких. Для доставки подобным путем разработаны различные устройства (например, ингалятор с отмеряемой дозой и ингалятор для сухого порошка). Струйные распылители использовались в клинических условиях для аэрозольной доставки растворимых в воде лекарств и ультратонких суспензий, однако, их применение с нерастворимыми в воде гидрофобными соединениями ограничено.
Разработка липосомных препаративных форм, совместимых с аэрозольной доставкой, позволяет струйному распылителю доставлять дополнительные лекарственные средства. Применение липосом для аэрозольной доставки имеет много преимуществ, включающих водную совместимость, замедленное высвобождение в легких, позволяющее поддерживать уровень терапевтической дозы, и кроме того, липосомы способствуют внутриклеточной доставке, в частности, к альвеолярным макрофагам.
Эффективность локализованной, местной терапии с применением аэрозолей определяется по количеству лекарственного средства, доставленного на участок заболевания в объеме легких, и существует несколько различных ключевых параметров, которые определяют количество доставки, такие как терапевтическая эффективность аэрозольной готовой препаративной формы. Например, важными переменными являются различные конструкции и варианты распылителей, условия работы (например, скорость потока) и присутствие вспомогательного оборудования (трубок, соединений, приспособления для рта, маски на лицо и им подобные). Таким образом, эффективность выхода аэрозоля может быть повышена путем соответствующего дополнения к подходящему распылителю. Неподходящие дополнительные устройства и/или несовершенные параметры могут негативно отражаться на ингалируемых дозах, участках доставки и влиять на терапевтический результат.
Лекарственные препараты также являются критическим фактором регулирования эффективности выхода аэрозоля и аэродинамических свойств комплекса лекарственное средство-липосомы. Обнаружено, что эффективность выхода комплекса лекарственное средство-липосомы может быть повышена путем использования липосом, полученных при низких температурах фазового перехода (см. Waldrep et al., J. of Aerosol Med. 7:1994 (1994) и Waldrep et al., Int'l J. of Pharmaceutics 97:205-12 (1993)). Дополнительный способ повышения выхода аэрозольного комплекса лекарственное средство-липосомы состоит в повышении концентраций лекарственного средства и фосфолипидов в резервуаре. Распыление некоторых готовых препаративных форм с комплексом лекарство-липосомы при более чем 50 мг/мл приводит к засорению форсунки распылителя, тогда как пустые готовые препаративные формы успешно распыляются вплоть до 150 мг/мл (см. Thomas, et al. Chest, 99:1268-70 (1991)). Кроме того, на эксплуатационные качества аэрозоля (выход и размер частиц) влияют физико-химические свойства, такие как вязкость и поверхностное натяжение. Эти переменные воздействуют на максимальные концентрации комплекса лекарство-липосомы с доставкой аэрозоля посредством струйного распылителя.
Противовоспалительные глюкокортикоиды используются для лечения астмы и других тяжелых воспалительных легочных заболеваний в течение уже более сорока лет. Недавно аэрозольная глюкокортикоидная терапия стала использоваться как один из путей введения. В настоящее время существует несколько различных, хотя структурно сходных, глюкокортикоидов с местной активностью - например, беклометазон, будезонид, флунизолид, триамцинолона ацетонид и дексаметазон - которые подходят для применения в распылителях с отмеренной дозой и в распылителях для сухого порошка при аэрозольном лечении астмы и других воспалительных заболеваний легких. В то время как системные осложнения, такие как супрессия гипоталамо-гипофизарной системы, образование катаракты и ингибирование роста, не являются частыми осложнениями при лечении астмы с помощью распыляемых глюкокортикоидов, местные побочные эффекты в виде кандидоза и дисфонии имеют место, что делает необходимым использование дополнительных приспособлений. В настоящее время в Соединенных Штатах не существует глюкокортикоидных готовых препаративных форм, утвержденных для применения распылением, хотя ультратонкие суспензии беклометазона и будезонида применяются в Европе и в Канаде.
Настоящее изобретение относится к концентрированным аэрозольным составам циклоспорин-A-липосомы и будезонид-липосомы с высокими дозами, которые обеспечивают максимум производительности аэрозоля с размером частиц с аэродинамическим диаметром в диапазоне 1-3 мкм по медиане массы (MMAD).
Целью настоящего изобретения является создание высокодозированной фармацевтической липосомной аэрозольной композиции, содержащей в контейнере около 12-30 мг/мл фармацевтического соединения и около 130-375 мг фосфолипида/мл исходной концентрации.
Одним из объектов изобретения является аэрозольная фармацевтическая композиция соединение-липосомы, содержащая около 12-30 мг/мл фармацевтического соединения в до около 130-375 мг фосфолипидов/мг исходной концентрации в резервуаре, где фармацевтическое соединение выбрано из группы противовоспалительных глюкокортикоидов, иммуносупрессорных соединений, противогрибковых соединений, антибиотиков, противовирусных соединений и противораковых соединений.
Объектом изобретения является также высокодозированная липосомная аэрозольная композиция циклоспорина A (CsA), содержащая до около 30 мг/мл циклоспорина A в до около 225 мг фосфолипидов/мл исходной концентрации в резервуаре.
Согласно изобретению предлагается высокодозированная аэрозольная композиция будезонид-липосомы (Bud), содержащая до около 15 мг/мл будезонида в до около 225 мг фосфолипидов/мл исходной концентрации в резервуаре.
В предпочтительном варианте согласно изобретению предлагается высокодозированная липосомная аэрозольная композиция циклоспорина A, содержащая до около 20 мг/мл циклоспорина A в до около 150 мг дилауроилфосфатидилхолина (DLPC)/мл исходной концентрации в резервуаре.
В наиболее предпочтительном варианте согласно изобретению предлагается высокодозированная липосомная аэрозольная композиция циклоспорина A, содержащая до около 21,3 мг/мл циклоспорина A в до около 160 мг дилауроилфосфатидилхолина (DLPC)/мл исходной концентрации в резервуаре.
Согласно изобретению предлагается высокодозированная аэрозольная композиция будезонид-липосомы, содержащая до около 15 мг/мл будезонида в до около 225 мг дилауроилфосфатидилхолина (DLPC)/мл исходной концентрации в резервуаре.
В наиболее предпочтительном варианте согласно изобретению предлагается высокодозированная аэрозольная композиция будезонид-липосомы, содержащая до около 12,5 мг/мл будезонида в до около 200 мг дилауроилфосфатидилхолина (DLPC)/мл исходной концентрации в резервуаре. Другие фосфолипиды в готовых препаративных формах комплекса будезонид-липосомы могут заменяться на DLPC.
Таким образом, настоящее изобретение предлагает высокодозированную аэрозольную композицию комплекса противовоспалительные глюкокортикоиды-, иммуносупрессивное соединение-, противогрибковое соединение-, антибиотик-, противовирусное соединение- и противораковое соединение-липосомы, содержащую около 12-30 мг/мл фармацевтического соединения в до около 130-375 мг фосфолипида/мл исходной концентрации в резервуаре.
Другие дополнительные особенности и преимущества настоящего изобретения будут очевидны из следующего описания настоящих предпочтительных воплощений изобретения, приведенных с целью раскрытия изобретения.
Для более четкого понимания в описании приводятся чертежи. Следует отметить, что эти чертежи иллюстрируют предпочтительные варианты изобретения и не являются ограничивающими заявленный объем изобретения.
Фиг. 1 иллюстрирует распределение липосомного аэрозольного препарата с высокими и низкими дозами циклоспорина A-DLPC, распыляемых с помощью распылителя Aerotech II при скорости потока 10 литров в минуту по определению каскадного измерителя ударов Андерсена. Данные (средняя ± среднеквадратичное отклонение) представляют процентное содержание фракции общего количества циклоспорина A, выделенного на каждом этапе воздействия ударного устройства с ассоциированным предельным размером в мкм (n=3 анализа). Диапазон аэродинамического диаметра по медиане массы (MMAD) и геометрическое стандартное отклонение рассчитывают на участке логарифмической вероятности.
Фиг. 2 иллюстрирует циклоспорин A, распыляемый из распылителя Aerotech II с высокими и низкими дозами препарата циклоспорин A-DLPC липосомы при скорости потока 10 литров в минуту, как определено на модели, имитирующей легкие человека. Значения представляют циклоспорин A, собранный при различном времени распыления образцов аэрозоля на фильтры, присоединенные к Респиратору Харварда, доведенные до общего объема (TV) в 500 мл и при скорости 15 вдыханий в минуту (ВРМ).
Фиг. 3 представляет профиль распределения аэрозольного липосомного препарата формы: Budesonide-DLPC с высокими и низкими дозами, распыленной при помощи распылителя Aerotech II при скорости потока 10 литров в минуту, как определено с помощью каскадного измерителя ударов Андерсена. Полученные данные (средняя величина ± среднеквадратичное отклонение) представляют процентное содержание фракций по отношению к общему количеству циклоспорина A, выделенному на каждой стадии воздействия с ассоциированным предельным размером в мкм (n=3 анализа). Аэродинамический диаметр по медиане массы (MMAD) и стандартное геометрическое отклонение (GSD) рассчитывались на графике логарифмической вероятности.
Фиг. 4 показывает Будезонид, вдыхаемый в виде липосомных препаратов форм Будезонид-DLPC с дозами от низких до высоких, распыляемых с помощью распылителя Aerotech II при скорости потока 10 литров в минуту, как определено на модели, имитирующей легкие человека с общим объемом (TV) 500 мл и при 15 вдыханий в минуту (ВРМ). Значения представляют Будезонид, собранный при различном времени распыления образцов аэрозоля на фильтры, присоединенные к Респиратору Харварда, доведенные до общего объема (TV) в 500 мл и при скорости 15 вдыханий в минуту (ВРМ).
Фиг. 5 иллюстрирует временную зависимость CsA концентраций, вдыхаемых через распыляемые липосомные и кремофорные готовые препараты. На диаграмме представлены комплексы CsA-Cremophor (50 мг/мл; кружки), CsA-DLPC (5 мг/мл; закрашенные треугольники) и CsA-DLPC (20 мг/мл; ромбы).
Фиг. 6 иллюстрирует концентрацию пульмональной CsA за время вдыхания у ICR мышей (35 г) после вдыхания распыленного комплекса CsA-DLPC (20 мг/мл).
Фиг. 7 иллюстрирует противовоспалительный эффект комплекса Bud-DLPC с высокими лозами на лейкоциты при проведении легочного бронхиоальвеолярного лаважа (BAL) в ответ на LPS (эндотоксин) стимул.
Фиг. 8 иллюстрирует анализ перколляционного градиента Bud-DLPC липосом.
Фиг. 9 иллюстрирует выход аэрозоля DLPC (мг/мл) при распылении липосомной композиции с пустым DLPC, CsA-DLPC и Bud-DLPC с возрастающими концентрациями. Аэрозоли получали с помощью тестированной воды и стандартизированного распылителя Aerotech II (начальный стартовый объем 4 мл; скорость потока 10 л/мин) и парные образцы собирали в отсекателе AGI-4 при 4-5 и 6-7 минутах распыления. Концентрации DLPC определяли при помощи ВЭЖХ анализа. Представленные данные являются характерными для готовых препаратов, тестированных при каждой указанной концентрации, и нанесены на график в зависимости от начального содержания DLPC (мг/мл) в липосомах.
Фиг. 10 иллюстрирует распределение массы (мг/мин) распыленных готовых препаративных форм с пустым DLPC, CsA-DLPC и Bud-DLPC с возрастающими концентрациями. Аэрозоли получали с помощью тестированной воды и стандартизированного распылителя Aerotech II (начальный стартовый объем 5 мл; скорость потока 10 л/мин) и выход массы определяли с использованием аналитического баланса через 10 минут распыления. Представленные данные являются характерными для готовых препаративных форм, тестированных при каждой указанной концентрации, и нанесены на график в зависимости от начального содержания DLPC (мг/мл) в липосомах.
Фиг. 11 иллюстрирует выход CsA и Bud (мг/мин) в распыленных аэрозольных липосомных препаратах CsA-DLPC и Bud-DLPC с возрастающими концентрациями. Аэрозоли получали с помощью тестированной воды и стандартизированного распылителя Aerotech II (начальный стартовый объем 5 мл; скорость потока 10 л/мин) и парные образцы собирали в отсекателе AGI-4 при 4-5 и 6-7 минутах распыления. Концентрации DLPC определяли при помощи ВЭЖХ анализа аликвот образцов, также анализированных на содержание DLPC (фиг. 1). Представленные данные являются характерными для готовых препаративных форм, тестированных при каждой указанной концентрации, и нанесены на график в зависимости от начального содержания лекарственного средства (мг/мл) в липосомах.
Фиг. 12 иллюстрирует вязкость (сантипуазы) липосомных готовых препаративных форм с пустым DLPC, CsA-DLPC и Bud-DLPC с возрастающими концентрациями (начальный стартовый объем 10 мл; при комнатной температуре окружающей среды). Данные представляют среднюю величину от 10 наблюдений для каждой из тестируемых готовых препаративных форм при каждой из указанных концентраций и нанесены на диаграмму в зависимости от начального содержания DLPC (мг/мл) в липосомах.
Фиг. 13 иллюстрирует анализ пространственного натяжения (дины/см) липосомных препаратов с пустым DLPC, CsA-DLPC и Bud-DLPC с возрастающими концентрациями (начальный стартовый объем 7 мл; при комнатной температуре окружающей среды). Представленные данные представляют среднюю величину от 10 наблюдений для каждой из тестируемых готовых препаративных форм при каждой из указанных концентраций и нанесены на диаграмму в зависимости от начального содержания DLPC (мг/мл) в липосомах. Образцы также тестировали на вязкость.
Целью настоящего изобретения является улучшение эффективности доставки высокодозированных фармацевтических аэрозольных композиций, состоящих из комплекса соединение-липосома. Например, настоящее изобретение описывает улучшенную эффективность доставки липосомного аэрозоля с циклоспорином A. В серии экспериментов определено, что выход аэрозольного лекарственного средства можно улучшить при применении липосомных готовых препаративных форм с низкой температурой изменения фазы, таких как DLPC (содержащего 12 атомов углерода, жирные кислоты с насыщенными боковыми цепями). Также было определено, что определенные распылители повышают выход аэрозольного липосомного лекарственного средства при желаемом размере аэродинамического диаметра в диапазоне 1-3 мкм по медиане массы (MMAD). Концентрация циклоспорина A, применяемого в этих ранних исследованиях, составляла 1,0 мг с 7,5 мг DLPC на мл исходного раствора в резервуаре.
В 1993 году появилась необходимость в повышении выхода аэрозольного липосомного циклоспорина A путем увеличения производства препарата. Это могло быть осуществлено различными путями, такими как выбор более эффективного распылителя. Выход липосомного аэрозольного циклоспорина A повышался путем дополнения распылителем Aerotech II (ATII) (из CIS-USA, Bedford, Mass). ATII дает приблизительно 50-процентное повышение аэрозольного выхода по сравнению с использующимся прежде Puritan Bennett 1600sj.
Второй способ повышения выхода аэрозольного липосомного лекарственного средства состоял в повышении концентрации лекарственного средства и фосфолипидов в жидкости в емкости распылителя. Концентрация липосомного циклоспорина A-DLPC в 5 мг циклоспорина A/37,5 мг на мл была успешно повышена при достижении желаемого выхода аэрозоля при аэродинамическом диаметре в диапазоне 1-3 мкм по медиане массы (MMAD). При использовании модели легких человека анализ данных аэрозолей показал, что приблизительно 3,2 мг циклоспорина A теоретически могло бы располагаться в легких после одного 15-минутного вдыхания. Изучение в Университете Питсбурга групп пациентов с легочным аллотрансплантатом, получающих лечение аэрозольным циклоспорином A (растворенным в этаноле или пропиленгликоле), продемонстрировало клиническое улучшение (отмена отторжения трансплантата) при доставке 20 мг циклоспорина A в легкие. При применении соответствующей липосомной системы циклоспорин A-DLPC для достижения этого количества требуется приблизительно 2 часа вдыхания аэрозоля. Такой пролонгированный дневной интервал вдыхания может быть тяжел для пациента и требует 8 замен емкости распылителя. Таким образом, следовало повысить концентрацию циклоспорина A-DLPC в резервуаре. Однако, хорошо известно, что невозможно распылять липосомы при концентрации больше 50 мг/мл, так как большие концентрации приводят к склеиванию распыляемых частиц.
В настоящем изобретении удалось достигнуть концентрации циклоспорина A 20-30 мг/мл: 140-225 мг DLPC/мл исходной концентрации в резервуаре. Размер частиц был маргинально увеличен, при этом сдвигая вверх MMAD аэрозоля до 2,0 мкм с 1,6 мкм, как продемонстрировано с циклоспорином A-DLPC (5 мг/37,5 мг), без изменений в GSP (фиг. 1). Аэрозольный выход "высоких доз" 20-30 мг циклоспорина A-DLPC был значительно выше, чем 5 мг циклоспорина A- DLPC.
Как продемонстрировано на фиг. 2 на модели, имитирующей легкие человека, 15 минут циклоспорина A-DLPC с высокими дозами, период времени, необходимый для доставки необходимой терапевтической дозы пациентам с легочным трансплантатом, составлял бы приблизительно 45 минут и меньше. Конечно, основанием для определения этого периода времени послужили результаты исследования доз другими исследователями, использующими другие аэрозоли циклоспорина A. Так как липосомный циклоспорин A является терапевтически более эффективным при низких дозах и менее токсичным, чем циклоспорин A в этаноле или пропиленгликоле, время вдыхания желательно сократить. Увеличение циклоспорина A-DLPC выше, чем около 30 мг циклоспорина A-225 мг DLPC, оказывается неэффективным.
Настоящее изобретение демонстрирует пригодность высокодозированного липосомного аэрозоля циклоспорин A-DLPC в интервале 20-25 мг циклоспорина A/150-200 мг DLPC на мл, хотя количества, вплоть до 30 мг/мл, также входят в понятие высокие дозы. Другие фосфолипиды в высокодозированной аэрозольной композиции циклоспорин A-липосомы могут быть замещены на DLPC. Характерные примеры подходящих фосфолипидов включают фосфатидилхолид яичного желтка, гидрированный фосфатидилхолид соевых бобов, димиристоифосфатидил холид, диолиеолил дипальмитоилеолил фосфатидил холид и дипальмитоилфосфатидилхолид.
Высокодозированный аэрозоль циклоспорин A-липосомы оказывается пригодным при различных иммунологических легочных заболеваниях, таких как отторжение трансплантата, бронхолитическая облитерация, аллергия, гиперчувствительность и астма, и при применении различных систем распыления пригоден для применения в педиатрии, при лечении подростков и взрослых. При лечении различных перечисленных здесь заболеваний требуется различное время вдыхания.
Создание высоких доз циклоспорин A-DLPC необходимо, так как аэрозоли с высокими дозами циклоспорина A используются для лечения случаев отторжения легочного трансплантата. В этих исследованиях пациентов лечили распылением циклоспорин A-кремофор (50 мг циклоспорина A/мл). Как продемонстрировано на фиг. 5, выход аэрозоля с комплексом циклоспорин A-липосомы (5 мг/мл и 20 мг/мл) заметно выше. Циклоспорин A-кремофор является очень раздражающим, но этот аэрозоль дает некоторое клиническое преимущество. Таким образом, комплекс циклоспорин A-липосомы будет даже лучше одновременно тестировать на схожих пациентах. Циклоспорин A-DLPC липосомный аэрозоль также эффективен при лечении астмы, как описано для перорального циклоспорина A.
Авторы данного изобретения также определили, что с глюкокортикоидом будезонидом можно получать стабильные липосомы, которые можно распылять эффективно и получать аэрозоли в диапазоне 1-3 мкм MMAD. При такой концентрации в резервуаре для доставки дневной дозы при лечении астмы требуется обычное время распыления, и с распылителем ATII оно будет составлять приблизительно 15 минут. Это клинически осуществимо и практически выполнимо.
Фирмой Boehringer-ingelheim исследовались глюкокортикоидные липосомы в аппарате для распыления. Конструкция их аппарата предназначена для доставки 100-200 мкг глюкокортикоида на 20 мл рабочего объема. Простое математическое преобразование показывает, что требуется 5000 - 10000 мкг/мл в резервуаре устройства. В этих экспериментах с аппаратом тестировался Будезонид в этаноле.
Основываясь на предыдущих экспериментах, для достижения необходимой концентрации в липосомном препарате получали концентрированные и вязкие суспензии. В предыдущих экспериментах с Будезонидом использовалось соотношение 1: 25 (Будезонид к DLPC по весу). Основываясь на требующихся высоких концентрациях DLPC, проверялись различные соотношения Будезонид:DLPC, и соотношение 1: 15 было определено как наиболее подходящее. Препарат затем концентрировали сначала до 5 мг Будезонида: 75 мг DLPC на мл, и наконец, до 10 мг Будезонида: 150 мг DLPC на мл. Концентрирование с другими глюкокортикоидами (беклометазон дипропионат или флунизолид) было более трудным из-за нестабильности готовых препаративных форм. Готовая препаративная форма, содержащая 10 мг Будезонида-150 мг DLPC, была стабильной и могла эффективно распыляться с помощью распылителя ATII.
Фиг. 3 показывает, что повышение концентрации приводит к увеличению аэрозольных частиц, увеличивая MMAD с 1,2 мкм до 1,0 мкм с комплексом Будезонид-DLPC с высокими дозами. Фиг. 4 демонстрирует, что после одного 15-минутного вдыхания этого препарата Будезонида с высокими дозами, будет вдыхаться приблизительно 6 мг Будезонида или 6-кратная наивысшая клиническая суточная доза. Сродство между выходом аэрозольного комплекса Будезонид-DLPC с низкими и высокими дозами не было пропорционально.
Характерный "высокодозированный" Будезонид-DLPC липосомный аэрозоль находится на уровне около 12,5 мг Будезонида/225 мг DLPC на мл. Другие фосфолипиды в препарате липосомного Будезонида с высокими дозами могут быть замещены на DLPC. Этот липосомный аэрозольный препарат комплекса Будезонид-DLPC клинически пригоден для лечения определенных легочных заболеваний, таких как астма и интерстициальный фиброз, а также иммунологического заболевания отторжения легочного трансплантата, бронхолитической облитерации, аллергии и гиперчувствительности. Он оказывается пригодным для лечения детей, подростков и взрослых с помощью различных систем распыления.
Следующие примеры даны с целью иллюстрации различных воплощений изобретения и никоим образом не ограничивают настоящее изобретение.
Пример 1
Липосомный препарат: Получение высокодозированного комплекса лекарство/липосомы
Согласно изобретению был осуществлен процесс лиофилизации для получения оптимального препарата различных комплексов лекарство/липосомы. Было установлено, что оптимальное отношение по весу между циклоспорином A и DLPC составляет 1:7,5. Для определения максимальной концентрации, совместимой с распылением, готовые препаративные формы, предназначенные для аэрозольной доставки лекарственного средства, получали с содержанием от 10 до 30 мг циклоспорина А и от 75 до 225 мг DLPC, при оптимальном весовом соотношении CsA и DLPC 1: 7,5. Было определено, что готовые препараты, содержащие 21,3 мг циклоспорина A: 160 мг DLPC, являются оптимальными, судя по аэрозольному выходу и размерам частиц для вдыхания. Для оптимизации комплекса циклоспорин A-липосомы с высокими дозами 100 мг циклоспорина A (Sandoz Pharmaceuticals or Chemical Company) смешивают с 750 мг синтетического альфа-лецитина; 1,2-дилауроил-sn-глицеро-3- фосфохолина (DLPC от Avanti Polar Lipids). Работая при 37oC в теплой комнате, комплекс лекарственное средство/DLPC смешивают в 20 мл третичного бутанола при перемешивании, как описано Waldrep et al. , Int'l J. of Pharmaceutics 97:205-12 (1993). После перемешивания смесь лекарственное средство/липид переносят пипеткой в стеклянный пузырек, быстро замораживают, затем лиофилизируют в течение ночи для удаления трет-бутанола, оставляя порошкообразную смесь. Многослойные липосомы получают путем добавления 10 мл сверхчистой воды выше температуры фазового перехода (Tc) при 25oC для достижения конечной стандартной концентрации лекарственного средства 1-30 мг циклоспорина A: 7,5-225 мг DLPC на мл. Смесь инкубируют в течение 30 минут при комнатной температуре при периодическом перемешивании для получения многослойных везикулярных липосом. Как альтернатива, эти готовые препаративные формы можно получить с помощью роторного выпаривания. Аликвоты берут для определения концентрации лекарственного средства с помощью ВЭЖХ. Этот простой способ получения липосом выбран в связи с тем, что он может быть легко масштабирован для производства больших партий.
После набухания некоторое количество готовых липосом проверяют на размер и на присутствие кристаллов лекарственного средства путем микроскопии, визуально как до, так и после распыления. Ассоциация лекарственное средство-липид (эффективность инкапсулирования) определяется с использованием анализа градиента перколляции, как описано у O'Riordan et al., J. of Aerosol Med., in press (1996). Нет необходимости в уменьшении размера препарата многослойного везикулярного циклоспорина A-DLPC лекарственное средство-липосома до распыления, так как лекарственное средство-липосомы (гетерогенная стартовая смесь 2,2 к 11,6 микрометров после набухания) уменьшается в размере позднее во время распыления (и продолжительного рефлюкса) благодаря силам, образующимся при экструзии через выходное отверстие распылителя. Размер этих липосом в каплях аэрозоля составляет 271-555 нм. Частицы жидкости в аэрозоле содержат от одной до нескольких липосом. Диаметр липосом меньше, чем водные аэрозольные частицы, в которых они переносятся (см. Waldrep et al., Ink'l J. of Pharmaceutics 97:205-12 (1993)). После набухания готовые препараты используются для распыления в течение нескольких часов. Стерильные готовые препаративные формы можно хранить в течение месяцев при комнатной температуре или в холодильнике.
Для готовых препаративных форм оптимальное соотношение между лекарственным средством и липидом определяют путем тестирования различных готовых препаративных форм с соотношением Будезонид-DLPC от 1:1 до 1:20. Соотношение 1: 15 (по весу) выбрано как оптимальное для готовой высокодозированной препаративной формы Будезонид-DLPC. Такой препарат получают при смешивании 10-150 мг Будезонида с 150- 2250 мг DLPC (как описано выше для циклоспорина A-DLPC). Работая при 37oC при комнатной температуре, лекарственное средство/DLPC смешивают в 20 мл третичного бутанола при перемешивании. После смешивания смесь лекарственное средство/липид переносят пипеткой в стеклянный пузырек, быстро замораживают и затем лиофилизируют в течение ночи для удаления трет-бутанола, причем остается порошкообразная смесь. Многослойные липосомы получают путем добавления 10 мл сверхчистой воды при температуре выше температуры фазового перехода (Tc) при 25oC для доставки конечной стандартной концентрации лекарственного средства в 1-15 мг Будезонида: 15-225 мг DLPC на мл раствора. Смесь инкубируют в течение 30 минут при комнатной температуре при периодическом перемешивании для получения многослойных везикулярных липосом. Для определения концентрации лекарственного средства аликвоты исследуются методом ВЭЖХ. Как альтернатива, эти липосомные готовые препаративные формы можно получить с помощью роторного выпаривания. Фиг. 8 показывает анализ градиента перколляции Bud-DLPC липосом (см. O'Riordan et al., J. of Aerosol Med., in press (1996)). Набухнув однажды, многослойные везикулярные Будезонид-DLPC липосомы остаются стабильными в течение нескольких недель при комнатной температуре. Стерильно приготовленные липосомы стабильны в течение месяцев. Хлорид бензалкония (10 мг/л) может быть добавлен в качестве консерванта.
Пример 2
Липосомные аэрозоли: Лечение аэрозолем лекарственное средство-липосомы
Для работы с аэрозолем лекарственное средство-липосомы используется распылитель Aerotech II (CIS-USA, Bedford USA), хотя другие коммерческие распылители также могут быть использованы. ATII имеет высокий выход, эффективный распылитель показывает получение липосомных аэрозолей с оптимальным размером частиц в 1-3 мкм MMAD для доставки в периферические отделы легких (см. Vidgren, et al., Int'l J. of Pharmaceutics 115:209-16 (1994)). Источник сухого воздуха доставляется в распылитель и внутреннее поглощение сухого воздуха регулируется регулятором потока и составляет 10 литров в минуту. Первоначальный объем резервуара составляет 5 мл и достаточен для 15-20 минут действия аэрозоля. Более длительные интервалы лечения требуют повторного заполнения резервуара.
Пример 3
Распределение размеров частиц в аэрозоле лекарственное средство-липосомы
Аэродинамическое распределение размеров частиц в аэрозоле лекарственное средство-липосомы определяется, как описано у Waldrep et al., J. of Aerosol Med. 7:1994 (1994), используя самплер для определения невидимых размеров окружающих частиц Andersen 1 ACFM (Graseby Andersen Instruments Inc., Atlanta, GA) в качестве имитатора легких человека (Andersen). Аэрозоли, содержащие лекарственное средство-липосомы, производимые из распылителя ATII, собирали, используя вакуумный насос (1 ACFM), измеритель удара при 8 этапах при стандартном времени действия в 0,5 минут для каждого эксперимента. Концентрации лекарственного средства в каплях аэрозоля с размером 0-10 мкм собирали на каждом этапе (0=9,0-10,0 мкм; 1=5,8-9,0 мкм; 2=4,7-5,8 мкм; 3=3,3-4,7 мкм; 4= 2,1-3,3 мкм; 5=1,1-2,1 мкм; 6=0,65-1,1 мкм; 7=0,43-0,65 мкм) и определяли после элюирования с 10 мл этанола или метанола и анализа с помощью ВЭЖХ. USP искусственное горло, соединенное с выходным отверстием измерителя ударов, используется для удаления аэрозольных частиц более чем 10 мкм. На конечной стадии используется стеклянный собирающий фильтр. После определения концентрации лекарственного средства на каждом этапе с помощью ВЭЖХ аэродинамический диаметр по медиане массы (MMAD) и геометрическое стандартное отклонение (GSD) комплекса лекарственное средство-липосомы подсчитывается по графику логарифмической вероятности, с эффективным предельным диаметром на оси ординат и кумулятивным процентом менее, чем диапазон размера (по концентрации) в качестве абсциссы (KaleidaGraph 3,0). MMAD и GSD определяют по содержанию лекарственного средства в липосоме, распределенного в массиве капель аэрозоля (см. Waldrep et al. , Int'l J. of Pharmaceutics 97:205-12 (1993)). Область капель более, чем размер липосом, определяет MMAD и GSD. Обоснованность этого способа определения MMAD & GSD независимо подтверждена при использовании Лазерного счетчика частиц аэрозоля, модель 3300 TSI.
Пример 4
Оценка вдыхаемой дозы
Для определения вдыхаемой дозы Bec-DLPC липосомы распыляемые образцы собирают в систему, имитирующую легкие человека, как описано Smaldone et al. , Am. Rev. Respir. Dis 143:727-37 (1991). Используя респиратор Харварда, аэрозольные образцы из распылителя ATII (скорость потока 10 л/мин) собирают в фильтры Whatman GF/F при 15 вдыханиях в минуту при объеме одного вдыхания 500 мл. Этот основной объем одного вдыхания, составляющий 500 для мужчин (450 для женщин), определен по номограмме, приспособленной для учета частоты дыхания, веса и пола. Аэрозольные образцы собирали в течение пятнадцатиминутного периода распыления. Количество циклоспорина A или Будезонида, попавших на фильтры, определяют после экстракции с помощью ВЭЖХ.
Пример 5
Анализы легочного циклоспорина A: Твердофазная экстракция
Осуществлялись следующие этапы:
1. После вдыхания циклоспорина A-DLPC в виде липосомного аэрозоля выделяют ткань легких мыши. Добавляют внутренний стандартный CSD 10 мкг (1 мкл 1/мг/мл исходного раствора). Ткань гомогенизируют или в смесителе, или в пробирках Wig-L-Bug (используя 4-5 шариков на пробирку).
2. Гомогенизированную ткань экстрагируют в 1 мл сверхчистой воды в течение 1-2 минут. Этот объем используют для одного образца ткани, а при объединении более чем одного образца, его разбавляют.
3. Добавляют 2 мл 98-процентного ацетонитрила/2-процентного метанола и образцы энергично встряхивают.
4. Образцы центрифугируют на полной скорости 20 минут; супернатант переносят в чистую пробирку и центрифугируют 10 минут на полной скорости.
5. Супернатант собирают и добавляют по 5 мл сверхчистой воды к каждому 1 мл тканевого экстракта.
6. Готовят колонку Sep-Pak C18 (Waters Sep-Pak Light для единичной мышиной ткани) и промывают 5 мл 95-процентного этанола и 5 мл сверхчистой воды. Образцы добавляют медленно и промывают 5 мл сверхчистой воды и 5 мл 50-процентного ацетонитрила.
7. Элюат переносят в сборочную пробирку и элюируют 1 мл метанола, а затем 0,5 мл воды.
8. Загрязнение удаляют при промывании элюата дважды 1,5 мл гексана и отбрасыванием верхнего слоя.
9. Экстрагированный элюат выпаривают до сухого состояния с использованием температуры регулировки реактивной среды с минимальным потоком воздуха.
10. Восстановление проводят в 0,3 мл подвижной фазы CSA и образце в ВЭЖХ.
Пример 6
Анализ лекарственного средства с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ): анализ будезонида
Исследование с помощью ВЭЖХ применяется с разными целями для определения: содержания Будезонида в липосомной готовой препаративной форме, эффективности инкапсулирования, содержания Будезонида в аэрозольных образцах, полученных на модели легких. Концентрацию Будезонида определяют с помощью ВЭЖХ анализа с использованием автозагрузочного устройства Waters WISP 717 и колонки Waters Nova-Pak C18 (3,9 x 150 мм) при комнатной температуре. Пик регистрируют при 238 нм, используя детектор, работающий при различных длинах волн в УФ и видимой части спектра с количественной оценкой по Версии 2,15 Millenium 2010 Chromatography Manager фирмы Waters. Подвижная фаза, использующаяся при этих исследованиях, представляет 50:50 этанол/ метанол при скорости потока 0,6 мл в минуту (см. Anderson & Ryrfeldt, J. Pharm. Pharmacol. 36: 763-65 (1984)). Образцы для анализа растворяют непосредственно в этаноле (для растворения липосом). Стандарты лекарственного средства готовят из исходного раствора этанола, хранящегося при -80oC.
Пример 7
Анализ лекарственного средства с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ): анализ циклоспорина A
Циклоспорин A в липосомных готовых препаративных формах (для определения содержания циклоспорина A и эффективности инкапсулирования) и аэрозольных образцах определялся с помощью ВЭЖХ. В исследовании использовались автоматический инжектор образцов Waters (Milford, MA) WISP и колонка Supelco LC-1, нагретая до 75oС. Подвижная фаза состояла из 50 процентов ацетонитрила, 20 процентов метанола и 30 процентов воды (см. Charles et al., Ther. Drug Monitor. 10: 97-100 (1988)). Пик регистрируют при 214 нм, используя детектор, работающий на разных длинах волн, и количественно оценивают по Версии 2,15 Millenium 2010 Chromatography Manager фирмы Waters. Образцы для анализа растворяют непосредственно в метаноле (для растворения липосом). Стандарты лекарственного средства получают из исходного раствора метанола, хранящегося при -80oC.
Пример 8
Анализ лекарственного средства с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ): анализ DLPC
Была использована модификация схемы проведения ВЭЖХ Grit and Commelin, Chem. & Phys. of Lipids 62:113-22 (1992). Применялись автоматический инжектор образца Waters 717 WISP и амино-колонка Sperisorb S5 (0,25 см х 4,6 мм, 5 мкм) с подвижной фазой: ацетонитрил, метанол и 10 мМ аммиак/трифторуксусная кислота, pH 4,8 (64:28:8 по объему). Пики регистрируют с помощью масс-испарительного детектора (SEDEX 55, Sedre, France) и количественно оценивают по Версии 2,15 Millenium 2010 Chromatography Manager фирмы Waters. Образцы для анализа растворяют непосредственно в этаноле или метаноле (для растворения липосом).
Пример 9
Модель легких для тестирования лекарственного средства на мышах: исследование острого воспаления: (LPS) техника бронхиолярного лаважа
Липополисахарид стенки грамотрицательной клетки (LPS) использовался для восстанавливающей индукции острого пульмонологического воспаления у мыши. 10-минутная экспозиция Е. coli 055:B5 LPS (Sigma) аэрозоля, выпущенного из распылителя PBsj 1600 (концентрация в резервуаре 100 мкг/мл; доставленная доза 60 нг), вызвала сильный флогистический ответ, что определено путем аккумуляции PMN в альвеолах в ответ на выработку хемотаксических цитокинов (определимо на 3 часу; пик ответа на 6 часу после стимула). В различное время после применения аэрозоля LPS мышей забивали под метоксифлурановой анестезией и обескровливали через абдоминальную аорту. В трахею хирургическим путем вставлялась канюля с PE50 трубкой (наружный диаметр 0,965 мм. Clay Adams). Используя сбалансированный раствор солей по Хенксу в общем объеме 2,0 мл (HBSS; Ca/Mg свободный с EDTA), легкие орошали 5 минут объемом приблизительно в 1,0 мл. Выход обычно составлял 85 процентов извлечения лаважной жидкости. Полученные в результате белые клетки подсчитывали с помощью гемоцитометра, подвергали цитоцентрифугированию и окрашивали. По различным подсчетам эффект лекарственного средства отмечается по снижению количества белых клеток и по уменьшению количества PNM и/или миелопероксидазы положительных клеток относительно постоянных макрофагов и/или миелопероксидазы отрицательных клеток. Это исследование используется как стандарт для тестирования режима действия аэрозолей, содержащих лекарственное средство/липосомы, на биологическую активность посредством уменьшения острого воспалительного клеточного разрастания дыхательных путей. Фиг. 7 показывает противовоспалительный эффект высоких доз Bud-DLPC на легочный бронхоальвеолярный лаваж (BAL) лейкоцитов в ответ на вызов LPS (эндотоксина).
Пример 10
Цитология: легочный лаваж
Клеточные препараты (лаваж, тимоциты, лимфоузлы или спленоциты) подсчитывались на гемоцитометре, подвергались цитоцентрифугированию на слайды (используя Miles Cyto-Tek) и окрашивались с помощью Wright-Giemsa. May-Grunwald-Giemsa или лейкоцитарная пероксидаза прямо зависит от способа приготовления. Дифференциальный подсчет был произведен путем микроскопического наблюдения с масляной иммерсией. Биологический эффект режима применения аэрозоля с комплексом лекарственное средство-липосомы отмечался по снижению общего количества белых клеток и по снижению числа PMN или миелопероксидазы положительных клеток относительно обычных макрофагов.
Пример 11
Ингибирование антиген/митоген индуцированного лимфоцитарного бластогенеза in vitro с помощью CsA, выделенного из ткани легких мыши, после аэрозольной доставки CsA-DLPC липосом (см. табл.A)
Биологическая активность CsA, доставленного в легкие с липосомным аэрозолем
Первичный иммунный ответ для тестирования был вызван в связанной с бронхами лимфоидной ткани и в связанных с легкими медиастинальных лимфатических узлах. После местной интраназальной иммунизации мышей линии Balb/c осажденным квасцами яичным альбумином (AP-OVA (80 мкг), дополненный вакциной Bordetella pertussis) мышей забивали через 7 дней, медиастинальную ткань удаляли и изолировали лимфоциты для анализа in vitro. Исследование пролиферации состоит в изменении в стимулировании лимфоцитов после активации сенсибилизирующим антигеном яичным белком или неспецифическим T-клеточным митогеном, Con А плюс совмещенный с культурой CsA изолированный из ткани легких мыши при твердофазной экстракции при ВЭЖХ. Поглощение 3[H]-TdR в ДНК определялось в течение 48-72 часов. Ингибирование специфической или неспецифической активации лимфоцитов было продемонстрировано путем уничтожения или уменьшения антиген-специфического стимулирования или в ингибировании нечувствительности к митогену.
Пример 12
Физико-химический анализ:
Пространственное натяжение и вязкость: Пространственное натяжение (дины/см) измеряется с использованием Tensiomat (Model 21, Fisher Scientific, Indiana, PA). Платино-иридиевое кольцо известного размера было поднято с поверхности жидкости для тестирования при точно контролируемых условиях. "Кажущееся" значение с дисплея прибора умножают на фактор коррекции, включающий размер измерительного кольца, плотность жидкости и другие параметры (в соответствии с инструкцией изготовителя). Измерение вязкости проводят с использованием вискозиметра Gilmont Falling Ball (Gilmont Instruments, Barrington, IL). Вязкость в сантипуазах определяют при комнатной температуре окружающей среды.
Измерение размера комплекса лекарственное средство-липосомы: размер частиц комплекса лекарственное средство-липосомы измеряют с Nicomp Model 370, Submicron Particle Sizer (Program Version 5,0 Nicomp Particle Sizing Systems, Santa Barbara, CA). Образцы комплекса лекарственное средство-липосомы, диспергированные в воде, анализировали в соответствии с инструкцией производителя и данные выражали как размер взвешенных везикул. Комплекс лекарственное средство-липосомы подразумевает, что диаметр частиц измеряют из резервуарных образцов в начальном периоде через 10 минут распыления и из аэрозольных образцов, выделенных с использованием отсекателя AGI-4, как описано Waldrep et al., Int'l J. of Pharmaceutics 97:205-12 (1993).
Результаты на фиг. 9 (график построен для концентрации DLPC) демонстрируют, что происходит увеличение выхода аэрозоля DLPC липосом до 170 мг/мл с уменьшением выхода при более высоких концентрациях. Распространение этих данных на CsA-DLPC липосомы дает подобные результаты с максимальным липосомным аэрозольным выходом с 21,3 мг CsA: 160 мг DLPC/мл (фиг. 9). Для липосом Bud-DLPC максимальный выход DLPC аэрозоля был продемонстрирован с готовой препаративной формой, состоящей из 12,5 мг Bud:187,5 мг DLPC/мл. Анализ нарушений распыления жидкого индифферентного вещества, продемонстрированный на фиг. 10 (график построен для DLPC), показывает зависимое от концентрации снижение выхода, как определено по массе, превращенной в аэрозоль в минуту.
С повышением концентрации липосом происходит сопутствующее подобное же повышение выхода аэрозоля вплоть до критической точки (фиг. 11) (график построен для концентрации лекарственного средства). Измерение выхода аэрозольного лекарственного средства CsA и Bud при ВЭЖХ анализе показывает максимальные концентрации для распыления (фиг. 11). Для CsA-DLPC липосом максимальный выход составлял 21,3 мг CsA: 160 мг/мл. Для Bud-DLPC максимум составлял 12,5 мг Bud:187,5 мг DLPC. Физико- химический анализ этих липосомных готовых препаративных форм демонстрировал параллельное повышение вязкости (график построен для концентрации DLPC) (фиг. 12). Результаты для DLPC, Bud-DLPC и CsA-DLPC были одинаковыми. Вязкость готовых препаративных форм Bud-DLPC была примерно на 20 процентов меньше, чем только для пустого DLPC. Вязкость CsA-DLPC была стойко самой низкой и колебалась между 16 мг CsA/120 мг DLPC и 24 мг CsA/180 мг DLPC/мл. Эти результаты предполагают, что для каждой готовой препаративной формы существует максимальная вязкость, совместимая с распылением аэрозоля; выше этих значений не существует добавочного выхода с повышенной концентрацией комплекса лекарственное средство-липосомы.
Результаты на фиг. 13 (график построен для концентрации DLPC) демонстрируют, что добавление CsA и Bud к DLPC липосомам вызывает снижение в пространственном натяжении готовой препаративной формы. Снижение пространственного натяжения зависит от концентрации, достигая плато при около 100 мг DLPC/мл. Не существует определенной связи между аэрозольным выходом липосомной готовой препаративной формы и пространственным натяжением. Однако, с повышением концентрации липосомной готовой препаративной формы отмечается инверсивное родство между пространственным натяжением и измерениями вязкости.
Анализы готовых препаратов комплекса лекарственное средство-липосомы до распыления при квазиупругом светорассеянии демонстрировали гетерогенный стартовый диапазон размера частиц приблизительно от 2,2 до 11,6 мкм (это в или около верхнего точного предела Nicomp 370). После распыления определены минимальные различия между любыми готовыми препаративными формами. Размер частиц липосом внутри резервуара для распыления составлял 294-502 нм, и образцы аэрозоля собирали с помощью отсекателя AGI- 4, в диапазоне от 271 до 555 нм.
Готовые высокодозированные препараты лекарственное средство-липосомы, состоящие из 10 мг Bud:150 мг DLPC и CsA 20 мг:DLPC 150 мг, выбраны для дальнейшего аэрозольного изучения. Анализы с каскадным измерителем ударов Андерсена показывают значение 2,0 мкм MMAD/1,5 GSD для Bud-DLPC и 2,0 мкм/1,8 для sA-DLPC (таблица 1). Анализы этих готовых препаративных форм на модели, имитирующей легкие человека, при 15 ВРМ и 500 мл общего объема демонстрируют, что за 3 минуты вдыхания можно вдохнуть 1000 мкг дневной дозы Bud в липосомах, а за 12 минут вплоть до 5000 мкг (таблица 1). Результаты вдыхания CsA-DLPC на модели легких человека демонстрируют, что с высокими дозами CsA-DLPC требуется 4 минуты для вдыхания 5000 мкг распыляемого CsA в липосомах; 11,5 минут требуется для вдыхания 15000 мкг CsA (таблица 1). Эти результаты демонстрируют высокую способность липосом для аэрозольной доставки лекарственного средства.
Настоящее изобретение относится к высокодозированный липосомной аэрозольной композиции циклоспорина A, содержащей до около 30 мг/мл циклоспорина A в до около 225 мг фосфолипида/мл исходной концентрации в резервуаре. Предпочтительно, липосомная аэрозольная композиция содержит до около 21,3 мг/мл циклоспорина A в до около 160 мг фосфолипида/мл исходной концентрации в резервуаре. Обычно согласно изобретению, в липосомной аэрозольной композиции с циклоспорином A размер частиц, как измерено методом аэродинамического диаметра по медиане массы, находится на уровне от около 1,0 мкм до около 3,0 мкм. Кроме того, в циклоспорин A липосомной аэрозольной композиции соотношение циклоспорина A и фосфолипида составляет от около 1 до около 7,5. Предпочтительно, фосфолипид выбран из группы, состоящей из фосфатидилхолида яичного белка, фосфатидилхолида гидрированных соевых бобов, димиристоифосфатидилхолида, диолиеолилдипальмитоилеолил фосфатидилхолида и дипальмитоил фосфатидилхолида. В целом, липосомная аэрозольная композиция с циклоспорином A согласно изобретению может быть использована для лечения иммунологических легочных заболеваний. Предпочтительно, подобные иммунологические легочные заболевания выбраны из группы, состоящей из реакции отторжения трансплантата, бронхолитической облитерации, аллергии, гиперчувствительности и астмы.
Настоящее изобретение также касается высокодозированной будезонид-липосомной аэрозольной композиции, состоящей из до около 15 мг/мл будезонида в до около 225 мг фосфолипида/мл исходной концентрации в резервуаре. Предпочтительно, будезонид-липосомная аэрозольная композиция содержит до около 15 мг/мл будезонида в до около 225 мг фосфолипида/мл стартовой концентрации в резервуаре. Для будезонид-липосомной аэрозольной композиции согласно изобретению размер частиц, измеренный по диапазону аэродинамического диаметра по медиане массы, находится на уровне от около 1,0 мкм до 2,0 мкм. В целом, будезонид-липосомная аэрозольная композиция имеет соотношение будезонида к фосфолипиду от около 1 до около 15. Характерные примеры фосфолипидов даны выше. Обычно будезонид- липосомная аэрозольная композиция может использоваться для лечения иммунологических и воспалительных легочных заболеваний.
Характерные примеры иммунологических и воспалительных легочных заболеваний приведены выше. Циклоспорин A косвенно ингибирует воспаление путем блокады иммунного ответа. Будезонид ингибирует как иммунные ответы, так и воспаление. Эти легочные заболевания имеют оба компонента.
Настоящее изобретение, кроме того, направлено на способ лечения больных, имеющих иммунологические легочные заболевания, включающий этап назначения данному больному фармакологически приемлемой дозы циклоспорина A. Настоящее изобретение, кроме того, направлено на способ лечения больных, имеющих иммунологическое легочное заболевание, включающий этап назначения названному больному фармакологически приемлемой дозы аэрозольной композиции будезонид-липосомы. Получение подходящих фармацевтических композиций и концентраций для применения по приведенной методике очевидны для квалифицированных специалистов.
Настоящее изобретение также направлено на липосомную аэрозольную композицию с циклоспорином A, содержащую до около 30 мг/мл циклоспорина A в до около 225 мг дилауроилфосфатидилхолина/мл исходной концентрации в резервуаре. Кроме того, предлагается высокодозированная аэрозольная будезонид-липосомная композиция, содержащая до около 15 мг/мл будезонида в до около 225 мг дилауроилфосфатидилхолина/мл исходной концентрации в резервуаре.
Настоящее изобретение относится в целом к высокодозированным липосомным аэрозольным композициям, содержащим около 12-30 мг/мл фармацевтического соединения и около 130-375 мг фосфолипида/мл исходной концентрации в резервуаре. Например, настоящее изобретение относится к противовоспалительным глюкокортикоидам, иммуносупрессивным соединениям, противогрибковым соединениям, соединениям антибиотиков, противовирусным соединениям и противораковым соединениям, доставляемым посредством липосомной аэрозольной композиции в фосфолипиде с высокой дозой.
Любые патенты и публикации, упомянутые в данном описании, иллюстрируют лишь уровень техники в области изобретения. Эти патенты и публикации включены здесь в виде ссылок.
Настоящие примеры с описанными способами, методиками, лечением и специфическими соединениями приведены как предпочтительные воплощения и не ограничивают объем заявленного изобретения.
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| УВЕЛИЧЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ ИНГАЛЯЦИОННОЙ ТЕРАПИИ С ПОМОЩЬЮ ДИОКСИДА УГЛЕРОДА | 2000 |
|
RU2270683C2 |
| СТАБИЛИЗАЦИЯ КОМПОЗИЦИЙ "ЛИПИД:ДНК" В ПРОЦЕССЕ РАСПЫЛЕНИЯ | 1999 |
|
RU2213578C2 |
| ЛИПОСОМНЫЕ АЭРОЗОЛИ С МАЛЫМ РАЗМЕРОМ ЧАСТИЦ ДЛЯ ДОСТАВКИ ПРОТИВОРАКОВЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ | 1998 |
|
RU2223749C2 |
| УСИЛЕНИЕ ЭКСПРЕССИИ ГЕНОВ ГЛЮКОКОРТИКОИДАМИ | 1996 |
|
RU2203093C2 |
| КОМПОЗИЦИИ ПОЛИЭТИЛЕНИМИН: ДНК ДЛЯ АЭРОЗОЛЬНОЙ ДОСТАВКИ | 2000 |
|
RU2242970C2 |
| ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ, СОДЕРЖАЩИЕ ЦИКЛОСПОРИН | 2006 |
|
RU2421209C2 |
| СИСТЕМЫ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЛЕГОЧНЫХ ИНФЕКЦИЙ | 2013 |
|
RU2657510C2 |
| ЛИПОСОМАЛЬНАЯ ДОСТАВКА СОЕДИНЕНИЙ, ОСНОВАННЫХ НА ВИТАМИНЕ Е | 2002 |
|
RU2328273C2 |
| ЛИПОСОМЫ, ОСУЩЕСТВЛЯЮЩИЕ ТИМУС-ЗАВИСИМУЮ ПОМОЩЬ "СЛАБЫМ" АНТИГЕНАМ, ИСПОЛЬЗУЕМЫМ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ВАКЦИНЫ | 1993 |
|
RU2107493C1 |
| УСОВЕРШЕНСТВОВАННОЕ РАНЕВОЕ ПОКРЫТИЕ ДЛЯ УЛУЧШЕНИЯ ЗАЖИВЛЕНИЯ РАН | 2000 |
|
RU2245722C2 |
Изобретение может быть использовано в медицине для лечения различных заболеваний легких. Композиция содержит 12-30 мг/мл циклоспорина А или будезонида и 130-375 мг/мл фосфолипида в сверхчистой воде. Композиция находится в емкости распылителя. Второй вариант композиции: до около 21,3 мг/мл циклоспорина А, до около 160 мг дилауроилфосфатидилхолина/мл начальной концентрации в резервуаре. Третий вариант: до около 12,5 мг/мл будезонида в до около 187,5 мг динауроилфосфатидилхолина/мл начальной концентрации в резервуаре. Диапазон размера частиц этой липосомы, измеренного по аэродинамическому диаметру по медиане массы, составляет от около 1,0 мкм до около 3,0 мкм. Изобретение позволяет получать концентрированные составы с высокими дозами активных веществ, что обеспечивает максимальную производительность получаемых на их основе аэрозольных препаратов. 3 с. и 13 з.п.ф-лы, 13 ил., 2 табл.
| Пюпитр для работы на пишущих машинах | 1922 |
|
SU86A1 |
| Торфодобывающая машина с вращающимся измельчающим орудием | 1922 |
|
SU87A1 |
| Пюпитр для работы на пишущих машинах | 1922 |
|
SU86A1 |
