ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ПОДАВЛЕНИЯ И ЛЕЧЕНИЯ АНОРЕКТАЛЬНЫХ И ОБОДОЧНО-КИШЕЧНЫХ БОЛЕЗНЕЙ Российский патент 2001 года по МПК A61K31/7048 A61K31/353 A61P1/00 

Изобретение относится к лечению аноректальных и ободочно-кишечных болезней (включая геморрои) при помощи новой комбинации ингредиентов, которая обладает свойствами для подавления воспаления, предотвращения кровотечения и хрупкости капилляров.

Аноректальные и ободочно-кишечные болезни обычно характеризуются воспалением инфицированной области. Другими обычными симптомами являются симптомы, связанные с воспалением, подобным повышению температуры тела, зудом, покраснением, болью и припухлостью. Обычной характеристикой таких аноректальных и ободочно-кишечных болезней является появление трещин, щелей, свищей и абсцессов.

Среди различных аноректальных и ободочно-кишечных болезней геморрои занимают видное положение и были предметом многочисленных клинических исследований. Геморроидальная болезнь характеризуется кровотечением без всякой боли. Свежие кровяные пятна появляются немедленно после очищения. Однако боль имеет место, когда геморрои инфицируются вторично или осложняются тромбозом и трещинами. Геморрои характеризуются эпизодами острых геморроидальных приступов с кровотечением, болью и выпадением геморроидальной массы.

Поэтому эффективным лечением острых геморроидальных приступов должно быть не только обеспечение ослабления боли уже через 2-3 дня после начала лечения, но также снижение рецидива таких приступов.

Существует несколько способов лечения геморроев. Были выданы патенты, относящиеся к перевязочным материалам (Европейский патент N 8803398) и хирургическим приспособлениям (Европейский патент N 0095142). Патент (патент Соединенных Штатов N 4621635) был выдан для использования лазеров при лечении геморроев. Были также запатентованы способы криофармакотерапии и электрохимические способы для лечения геморроев, смотри Европейский патент N 0091405 и Европейский патент N 0116688 соответственно. Однако наибольшими недостатками вышеупомянутого является вовлечение медицинских специалистов, помимо простого предписания лекарственных средств, и вероятная госпитализация. Кроме того, некоторые из них физически и/или психологически неприятны в применении.

Несколько патентов (NN 4160148, 4508728, 4797392, 4518583 и 5234914) были выданы в Соединенных Штатах Америки, относящиеся к композициям, содержащим определенные средства для заживления ран и обеспечивающим симптоматическое ослабление путем промотирования восстановления ткани, снижения воспаления и стимулирования заживления ран. Некоторые из них, подобные патентам Соединенных Штатов NN 4518583 и 5234914, содержат антимикробные средства. Эти композиции, однако, только ослабляют симптомы, связанные с воспалением, подобным повышенной температуре тела, зудом, покраснением, болью и припухлостью.

Ряд композиций для лечения аноректальных болезней (включая геморрои) основываются на анестезирующих и сосудосуживающих свойствах их составных частей, но эти композиции обеспечивают только временное симптоматическое ослабление.

Были выданы патенты в Соединенных Штатах Америки (патенты Соединенных Штатов NN 4613498, 4626433, 5166132, 5219880, 5234914 и 4797392) и Европе (Европейские патенты NN 8518086 и 0513442), относящиеся к композициям с изменяющимися составными частями для местного применения в форме подходящих и приемлемых фармацевтических носителей, например солей, мазей и т.д., с органическими, неорганическими и биологическими активными агентами. Однако эти композиции обеспечивают только временное облегчение и ограничиваются местным применением, их нельзя использовать для системного использования или перорального введения.

Местное лечение геморроидальной боли и спазм сфинкторов и мышц, расположенных в ЖК (желудочно-кишечном) тракте, описывается в выданном патенте (патент США 5957753), композиция которого включает аминокислоту L-аргинин в фармацевтически приемлемом носителе. Другой патент США (5591436) был выдан для композиции диетической добавки для лечения геморроев. Композиция содержит от 60% до 95% по массе индийского барбариса, от 4,8% до 38% по массе Nagkesar и от 0,2 до 2% по массе листьев дерева мелия индийская.

Другой патент США (5562906) описывает использование коры или ягод деревьев видов Xanthoxylum clavaherculis L и Xanthoxylum americanum Hill, и тот и другой относятся к семейству деревьев с желтой древесиной, и тот и другой, содержащие соединение Xanthoxylum, применяют для лечения геморроев и других мембранных и капиллярных нарушений вен и артерий. Их применением добиваются повышенной прочности и гибкости вен, артерий и их составляющих структур.

На рынке для лечения геморроев доступны фармацевтические композиции, содержащие диосмин и комбинацию диосмина и гесперидина. Однако концентрация диосмина и гесперидина в таких композициях много выше, чем концентрации флавоноидов данного изобретения. Кроме того, такие диосмин и гесперидин получают из синтетических источников.

Изобретатели провели исследования и в результате затрат времени и умственных способностей нашли, что композиция флавоноидов данного изобретения проявляет неожиданно существенно повышенную фармакологическую и терапевтическую восприимчивость при значительно меньших уровнях доз по сравнению с существующими композициями, применяющими флавоноиды.

Данное изобретение относится к фармацевтической композиции, которая безопасна и безболезненна и имеет длительную эффективность.

Композиция и способ лечения аноректальных болезней, включая геморрои, и ободочных болезней с длительной эффективностью и низкой частотой выпадения включает прикладывание к геморроям и аноректальным тканям эффективного количества композиции, включающей фармацевтически приемлемый носитель и смесь флавоноидов. Лечение включает также введение пероральным путем и/или парентеральным путем эффективного количества композиции, включающей фармацевтически приемлемый носитель и смесь флавоноидов.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ПРЕДПОЧТИТЕЛЬНЫХ ВОПЛОЩЕНИЙ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Данное изобретение относится к композициям, которые водорастворимы и могут быть однородно распределены в пораженной области. Она снижает воспаление и успокаивает чувство зуда и связанного с ним жжения. Изобретение обеспечивает также ослабление боли, которая характеризует геморрои. При введении любым способом композиция предотвращает также рост микроорганизмов. Изобретение полезно при лечении поражений других, чем геморрои, в аноректальной области, композицию изобретения можно приготовить в виде нескольких типов лекарственных форм. При использовании композиции людьми не бывает побочного действия. Кроме того, лечение не является физически и/или физиологически неприятным при ее применении. Растение Euphorbia prostrata (семейство: Euphorbiaceae) было идентифицировано как уместное при изучении аноректальных и ободочных заболеваний, включая геморрои. Euphorbia prostrata хорошо известно в индийской традиционной медицине при использовании для лечения астмы, кровавой дизентерии и заросших свищей. В Euphorbia prostrata (фиг. 1) были открыты и идентифицированы пять новых соединений, а именно лутеолин, 6-метоксикверцетингликозид, кверцетин и гликозиды лутеолина и апигенина. Euphorbia prostrata содержит 1 - 2,5% всех флавоноидов. Из них апигенингликозид составляет 0,8-1,4%, лутеолингликозид составляет 0,2-0,5%, 6-метоксикверцетингликозид составляет 0,2%, кверцетин и лутеолин составляют 0,1%.

Сообщается, что эти флавоноидные составные части имеют противовоспалительные свойства. Эти соединения экстрагируют из Euphorbia prostrata для испытания и комбинируют в пропорции, которая новая и до этого не сообщалась. Соединения в такой пропорции стандартизировали в фармацевтически приемлемые спецификации, чтобы гарантировать воспроизводимость от порции к порции. Результатом является стандартизированный экстракт Euphorbia prostrata, который является основным активным агентом в улучшенной аноректальной композиции. Другой необычной особенностью этого экстракта Euphorbia prostrata является то, что его получают таким способом, чтобы получаемая композиция была водорастворима. Фармацевтические носители, используемые в данном изобретении, являются капсулами, таблетками, мазями, кремами, гелями, пенами, аэрозолями, спреями и тому подобными. Другими растениями, содержащими апигенингликозиды и лутеолингликозиды, являются lxora arborea (Rubiaceae), Bommervia hispida (Pteridaceae), Adenocalymma alliaceum (Bignomiaceae), Thalictrum thunbergii (renunculaceae), Perilla frutescens (Labiateae), Matricaria chamomilla (Compositae), Thymus membranaceous (Labiateae), Digitalis lanata (Scrophulariaceae), Cuminum cyninum (Umbelliferae), Petroselinum, Euphorbia minuta, E. Serpeus-microfolia, E. granulata. Chrysenthemum indicum и Matricaria chamomilla (Compositae) содержат как апигенин, так и лутеолин.

Гликозиды кверцетина описывали из других видов Euphorbia (E. verrueosa, E. platiphyllos, E. discolor, E. dulcis, E. helioscopia, E. thymifolia и т. д.).

Фармацевтическая композиция, содержащая стандартизированный экстракт Euphorbia prostrata в качестве активного ингредиента, содержит 35-62% флавоноидов. Из них апигенингликозид составляет 30-45%, лутеолингликозид составляет 3-9%, 6-метоксикверцетингликозид составляет 1-6%, кверцетин и лутеолин составляют 1-2%. Экстракт кроме пигментов, стеринов, тритерпеноидов и т.д. содержит также таннины (5%), смолы и камеди (10-15%).

Фармацевтическая композиция данного изобретения может содержать также активные агенты из других растений и/или из других фармакологических групп, например местные анестезирующие средства, сосудосуживающие факторы, защитные средства, противораздражающие средства, вяжущие средства, кератолитические средства и антихолинергические средства.

Предпочтительно, благотворным будет включение других заживляющих раны и антимикробных средств, которые приведут к улучшению эффективности композиции.

Местные анестезирующие средства и/или их соли включают, но не ограничиваются ими, бензокаин, диперодон, прамоксин, камфору, дибукаин, фенол, тетракаин, лигнокаин и фенакаин. Количество таких анестезирующих средств могло варьировать между 0,25% и 25% по массе.

Сосудосуживающие факторы включают, но не ограничиваются ими, эфедрин, фенилэфрин, фенилэфрин и/или их соли. Количество таких сосудосуживающих средств может варьировать между 0,005% и 1,5% по массе.

Защитные средства включают, но не ограничиваются ими, гель гидрооксида алюминия, каламин, какао-масло, тресковый или акулий печеночный жир, глицерин в водном растворе, каолин, ланолин, минеральное масло, крахмал, белый вазелин, спирт шерстяного жира, оксид цинка, растительное или касторовое масло, полиэтиленгликоль и пропиленгликоль. Количество таких защитных средств может изменяться между 5,0% и 88,0% по массе.

Противораздражающее средство включает, но не ограничивается им, ментол в водном растворе. Количество такого противораздражающего средства может изменяться между 0,25-2,5% по массе.

Вяжущие средства включают, но не ограничиваются ими, каламин, оксид цинка, воду hamamelis, висмутовое соединение резорцина, субгаллат висмута, перуанский бальзам, хлоргидроксиаллантоинат алюминия, дубильную кислоту и таннины. Количество таких вяжущих средств может изменяться между 0,2% и 60,0% по массе. Таннины дополнительно можно получить из растений, например Butea monosperma (семейство: Leguminosea), Butea parviflora и Butea frondoza.

Средства для заживления ран включают, но не ограничиваются ими, витамин А и витамин D в количестве по массе между 0,005% и 0,04%. Может быть также включен перуанский бальзам в количестве по массе между около 0,5% и 2,5%. Может быть также включен тресковый печеночный жир в количестве по массе между 1,0% - 6,0%. Может быть также включено производное живых дрожжевых клеток в количестве между 2-50000 единиц на грамм.

Антимикробные средства включает, но не ограничивается ими, хлорид бензтиония, хлорид бензалкония, борную кислоту, бензоат 8-хинолинола, вторичный-амилтрикрезолы, хлорид цетилпиридиния, фенол, ментол, хлортимол, камфору и сульфат 8-гидроксихинолина. Количество таких антимикробных средств изменяется между 0,02% и 40,0% по массе.

Кератолитические средства включают, но не ограничиваются ими, хлоргидроксиаллантоинат алюминия и резорцин. Количество таких кератолитических средств может изменяться между 0,2% и 3,5% по массе.

Антихолинергические средства включают, но не ограничиваются ими, атропин или другие алкалоиды соланового типа либо один, либо в комбинации. Количество таких антихолинергических средств может изменяться между 0,02% и 0,1% по массе.

Фармацевтические композиции данного изобретения можно растворить или диспергировать в подходящей основе, которая может представлять собой суппозитории, мази, пены, спреи, содержащие лекарственное средство мягкие прокладки (подушечки), капсулы и таблетки.

Капсулы содержат 5-50 мг стандартизированного экстракта Euphorbia prostrata, предпочтительно 9-15 мг, вместе с фармацевтическими наполнителями. Аналогично, таблетки можно приготовить диспергированием 5-50 мг стандартизированного экстракта Euphorbia prostrata, предпочтительно 9-15 мг, вместе с фармацевтическими наполнителями. Эти таблетки могут быть покрытыми или не покрытыми оболочкой.

Мазь может содержать 0,1-10% (масса/масса) стандартизированного экстракта Euphorbia prostrata, предпочтительно 0,2-5%. Капсула может приниматься субъектом в максимальном количестве 100 мг в день вместе с местной аппликацией, содержащей такой же экстракт, как и когда требуется.

Гранулы в легко диспергируемой и шипучей форме можно приготовить с использованием в качестве наполнителей сахарозы, маннита, бикарбоната натрия, лимонной кислоты, хлорида натрия и т.д.

Крем можно приготовить эмульгированием водной фазы, содержащей активный агент (0,1-10% масса/масса, предпочтительно 0,2-5%), вместе с подходящей маслянистой фазой таким образом, чтобы это привело к образованию водорастворимого крема.

Можно получить другие альтернативные формы путем приготовления стандартизированного экстракта в 0,1-10% (масса/масса) абсорбционной основы, например гидрофильной мази (ФСША), или водорастворимых основ, например ПЭГ-мази (НФСША), или например водопоглощающих основ, например гидрофильного вазелина (ФСША), ланолина (ФСША), или в углеводородных основах, например белом вазелине (ФСША).

Композиции суппозиторий могут содержать либо гидрофобную, либо гидрофильную основу и могут включать какао-масло, глицеринированный желатин, гидрогенизированные растительные масла, смеси полиэтиленгликолей с разными молекулярными массами, эфиры жирных кислот и полиоксиэтиленсорбитана и полиэтиленстеараты, поливиниловый спирт, поливинилпирролидон, полиакриламид, химически модифицированный крахмал или комбинации этих материалов.

Основы пены и спрея могут содержать один или несколько водных или неводных растворителей, пропеллантов, поверхностно-активных веществ, суспендирующих и стабилизирующих агентов.

Содержащие лекарственные средства прокладки (подушечки) могут содержать один или несколько следующих компонентов: воду, глицерин, пропиленгликоль, спирт и воду Hamamelis.

ОЦЕНКА ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ СТАНДАРТИЗИРОВАННОГО ЭКСТРАКТА
Пероральная противовоспалительная активность (ПВА):
Исследования со стандартизированным экстрактом Euphorbia prostrata при введении перорально показали ингибирование как индуцированного каррагенаном отека при времени (t) = 180 мин (b = 0,019, r = 0,965, p < 0,001) с величиной ED₅ 5,98 мг/кг (95% С. К. = 11,71-23,68), так и индуцированного гистамином отека (b = 0,019, r = 0,860, p < 0,001) с величиной ED₅₀ = 16,37 мг/кг (95% С.К. = 0,01-32,73).

Индуцированный каррагенаном отек является двуфазным случаем, причем ранняя гиперемия обуславливается выделением гистамина и серотонина и поздний отек обуславливается выделением брадикинина и простагландинов. Результаты, показанные в таблице 1, означают, что перорально введенный стандартизированный экстракт (200 мг/кг) эффективен против обеих фаз воспаления, ингибируя 76% отека, и эквивалентен 74% ингибирования 1 мг/кг индометацина (в. б.).

Результаты далее подкрепляются экспериментами, проводимыми на моделях отеков, индуцированных гистамином и брадикинином. Данные, показанные в таблице 2, означают 77% и 56% ингибирования отека при времени +60 и +120 мин на модели отека, индуцированного гистамином, тогда как на модели, индуцированной брадикинином, эффект был существенным (p < 0,001) только при времени +180 мин.

МЕСТНАЯ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ:
Испытание на индуцированных каррагенаном отеках стопы:
Зависимую от дозы противовоспалительную реакцию наблюдали с использованием стандартизированного экстракта (b = -0,0287, r = 0,991, p < 0,001) с величиной ED₅₀ = 9,6% (95% С.К. = 8,56-10,72), а также смеси апигенингликозида и лутеолингликозида (4:1) (b = 0,0169, r = 0,989, p < 0,001) с величиной ED₅₀ = 1,12% (95% С.К. = 0,045-2,195) при расчете с данными для +180 мин при местной аппликации у мышей с индуцированным каррагеном отеком ступни лапы.

Таким образом, сделан вывод, что стандартизированный экстракт является противовоспалительным средством против двух моделей острой воспалительной реакции, но, по-видимому, относительно менее сильным, чем индометацин, введенный другим путем (в.б.).

Продолжительность действия местного препарата определяли изучением действий разных концентраций лекарственного средства на отек в течение периода 8 часов. Как очевидно из таблицы 3, пиковое ингибирование наблюдали через 3-4 часа после инъекции каррагенана, начиная с 2 часов, для экстракта при низких концентрациях (0,5-2,0%) и начиная с 1 часа при концентрации 4%. Похожую кинетическую реакцию наблюдали для смеси апигенингликозида и лутеолингликозида (4: 1) (0,2-1%) и индометацина (1-2%). Максимальное действие препаратов смеси апигенингликозида и лутеолингликозида, наблюдаемое при концентрации 4% (ингибирование 37,1%) и концентрации 1% (ингибирование 46,8%) соответственно, сравнивали с максимальным действием индометацина при концентрации 2% (ингибирование 41,9%).

Местные действия индометацина сравнивали с опубликованными результатами индуцированного каррагенаном отека лап мышей (Schrier, D.J., Moniot, S., Gluckman, M.I. и Giberston, R.B., J. Pharm. Pharmacol., 39, 57, 1989).

Было найдено, что смесь апигенингликозида и лутеолингликозида обладает значительной ПВА при пероральном введении с величиной ED₅₀ = 5,98 мг/кг (1,12%) для индуцированной каррагенаном опухоли лап у крыс, которая сравнима с величиной ED₅₀ = -1,11%, полученной при оценке данных местной ПВА той же фракции, подтверждая, что эта смесь соединений имеет как местную, так и пероральную ПВА. Пероральное поглощение лекарственного средства в результате прининга можно принимать во внимание также при местном действии. Однако была описана также чрескожная абсорбция апигенингликозида. По сравнению с индометацином эта фракция демонстрирует более высокое противовоспалительное действие и несколько более высокое ингибирование последних фаз отека. Это приписывают активности лутеолингликозида, присутствующего во фракции, который, как описывается, понижает припухлость в последней фазе отечной реакции, тогда как апигенингликозид действует в более ранней фазе. На основании этого приходят к заключению, что стандартизированный экстракт и смесь апигенингликозида и лутеолингликозида имеют значительную ПВА. Кроме того, сравнимые величины ED₅₀ местного и перорального введения стандартизированного экстракта допускают, что местное действие, по-видимому, независимо от системного поглощения.

Испытание на ушах с кротоновым маслом:
Используемое испытание описывалось в опубликованной литературе, где апигенин-7-глюкозид использовали в качестве ссылочного примера. Лутеолингликозид (300 мг/ухо) значительно ингибировал индуцированную кротоновым маслом (72%) отечную реакцию и показал зависимое от дозы ингибирование отечной реакции на кротоновое масло. Активность этого соединения сравнима с активностью апигенин-7-глюкозида. Так как стандартизированный экстракт также содержит подобные гликозиды, поэтому он также активен, но в меньшей степени, чем смесь апигенингликозида и лутеолингликозида. Из этого факта можно заключить, что эти гликозиды обладают ПВА, аналогичной ПАВ, уже описанной для других химически подобных гликозидов.

Это сравнительное изучение стандартизированного экстракта, апигенингликозида, лутеолингликозида и смеси апигенингликозида и лутеолингликозида было подтверждено независимо Институтом фармакологии в Италии на инструкции авторов изобретения. Было найдено, что данные по испытанию на ушах мышей с использованием кретонового масла согласуются с данными, полученными в нашей лаборатории с использованием каррагенановой модели; любое различие в ответных реакциях относили к разным способам введения.

Некоторые из результатов, полученных Институтом Италии, воспроизводятся ниже (таблица 4). Индометацин и гидрокортизон использовали в качестве ссылочных лекарственных средств.

Апигенингликозид и лутеолингликозид, по-видимому, являются наиболее активными соединениями среди испытуемых соединений и похожи в активности индометацину, тогда как другие гликозиды менее активны. Было показано, что активность агликонов строго пропорциональна их полярности (данные не показаны), что предполагает, что чрескожная абсорбция может быть ограничивающим активность фактором.

Изучение продолжительности местной ПВА составных частей экстракта:
Действие апигенингликозида и лутеолингликозида, кроме того, исследовали на ПВА вне стандартного времени 6 часов; эту активность оценивали как ингибирование отека (таблица 5) и лейкоцитного инфильтрата (таблица 6) при дозах, которые обычно вызывают почти полное ингибирование отека через 6 часов после лечения.

Апигенингликозид и индометацин теряют их противовоспалительную активность через 18 часов после лечения, в то же время гидрокортизон и лутеолингликозид сохраняют до определенной степени их действие. Воспаление, по-видимому, естественно подавляется после 30 часов. Эти четыре соединения сильно и постоянно ингибируют лейкоцитную инфильтрацию, измеряемую как активность миелопероксидазы.

Чрескожная абсорбция топически активных флаваноидов:
Топическая ПВА апигенингликозида, одна из основных составных частей стандартизированного экстракта, по-видимому, более сильная, чем у индометацина. Эти открытия противоречат обычному мнению, что такие химические соединения ограниченно абсорбируются через интактную кожу. Чрескожную абсорбцию апигенингликозида изучали в тех же условиях испытания, которые использовали для оценки его ПВА (ингибирование индуцированного кротоновым маслом отека в ушах мышей). Для этой цели две дозы ³H-апигенингликозида (60 и 6 мкг/ухо) наносили на внутреннюю поверхность ушей мышей вместе с обычным количеством раздражающего средства (35 мкг/ухо) или без него. Устанавливали такую определенную активность меченых соединений, чтобы постоянное количество радиоактивности присутствовало в растворах для промывки после исчерпывающих промывок ушей в данные отрезки времени.

Эксперименты показывают кинетику абсорбции первого порядка. Более высокая доза апигенингликозида абсорбируется менее быстро (t_1/2 = 4,4 часа), чем более низкая доза (t_1/2 = 3,4 часа), присутствие кротонового масла усиливает абсорбцию соединения и скорость абсорбции становится идентичной для обеих доз (t_1/2 = 2,5 часа).

Высокая доза апигенингликозида почти полностью ингибирует отечную реакцию на кротоновое масло по меньшей мере в пределах первых 6 часов, тогда как низкая доза не оказывает действия на развитие воспалительной реакции. Следовательно, повышенная абсорбция, вызванная кротоновым маслом, не связана с повышенной проницаемостью воспаленной кожи. Наблюдаемое действие, вероятно, обусловлено липофильными свойствами кротонового масла, которое действует только в качестве наполнителя. Следовательно, можно заключить, что апигенингликозид абсорбируется через интактную кожу и что скорость абсорбции можно повысить приготовлением подходящей фармацевтической готовой препаративной формы.

МЕХАНИЗМ ПВА ЭКСТРАКТА
Флавоноиды имеют преимущество, состоящее в высокой степени безопасности и отсутствии побочного действия, например ульцерогенности, по сравнению с классическими противовоспалительными лекарственными средствами (Agarwal, О. P. , Agents Actions, 12, 298, 1982; Havsteen, В., Biochem. Pharmacol., 32, 1141, 1983). В последние годы были сделаны разные подходы к изучению противовоспалительного потенциала флаваноидов (Gabor, М., в "Handbook of Experimental Pharmacology: Antiinflammatory Drugs", J.R. Vane, S.H. Ferreira (Eds.) Springer, NY, 1979, p. 68: Parmar, N.S. and Ghosh, M.N., Ind. J. Pharmacol., 10, 277, 1978). Было предположено, что флавоноиды не только повышают проницаемость капилляров, они могут также ингибировать ряд стадий в воспалении, включая грануляцию, образование ткани и хронический артрит. Обычно напряженным механизмом действия противовоспалительных лекарственных средств является ингибирование путей метаболизма арахидоновой кислоты. Однако, хотя этот механизм могли применять для лутеолингликозида, апигенингликозид не способен влиять на эти процессы (опубликованная литература) и, следовательно, для этого соединения нужно учитывать другие механизмы действия, например ингибирование выделения гистамина и радикальной поглотительной активности. Апигенин и лутеолин снижают также лейкоцитную инфильтрацию и лутеолин сохраняет свое действие даже через 18 часов после лечения.

Экстенсивно изучали действие кверцетина и его гликозидов на воспаление, было найдено, что они существенно регулируют экссудативные и пролиферативные фазы гранулемы типа хлопковых гранул (cotton pellet) (Roschin, Yu. V. and Geraschenko, G. I., Vopr. Farm. Dolnem Vostoke, 1, 134, 1973; Chem. Abstr., 83, 37683, 1975; Kalshinkova, N. A. and Geraschenko, G.I., Aktual. Vopr. Farm. , 2, 353, 1974; Chem. Abstr., 84, 99346, 1976). Кверцетин ингибирует также секрецию гистамина тучными клетками (Benett, J.P., Gomperts, B.D., and Wollenweber, E. , Arzneim. Gorsch., 31, 433, 1981), нейтрофильные функции, например выделение лизосомных ферментов, потребление кислорода, генерацию свободных радикалов и хемотаксис (Busse, W.W., Kipp, D.E. and Middleton, E. Jr. , J. Allergy Clin. Pharmacol., 73, 801, 1984). Известно, что флавоноиды ингибируют ряд ферментов, включая циклоксигеназу (Sekiya, S. and Okuda, Н., Biochem. Biophys. Res. Commun., 105, 1090, 1982). Изобретателями было найдено, что флавоноиды, присутствующие в Euphorbia prostrata, активны в качестве пероральных и местных противовоспалительных средств (Sigia, А.К. and Pathak, К. , J. Ethanopharmacol., 27, 55, 1989; Sigia, А.К. and Pathak, К., J. Ethanopharmacol., 29, 291, 1990).

ПРИМЕРЫ
Способ приготовления и оценки стандартизированного экстракта:
Растения Euphorbia prosirata были собраны квалифицированными профессионалами с холмистых районов Рамгара в северной Индии. Растения идентифицировали и характеризовали методическими рекомендациями WHO (WHO/TRM/91.4, Programme Traditional Medicines World Health Organization Geneva, 1991), растения сушили при регулируемых условиях температуры и влажности. Целые растения размалывали в мелкий/грубый порошок.

Порошкообразное лекарственное средство (5 кг) укладывали в перколятор S. S. Экстракцию осуществляли путем проведения сначала холодной перколяции 15 л этилового спирта, 10 л растворителя отводили и равный объем заменяли свежим этиловым спиртом. Операцию повторяли 5 раз до истощения лекарственного средства. Спиртовые экстракты объединяли и концентрировали в вакууме при 60^oC. Концентрированный экстракт обрабатывали горячей водой (80-90^oC) и получали водорастворимый экстракт флавоноидных компонентов. Водный экстракт экстрагировали 5-10 объемами неполярного органического растворителя. Органическую фазу дегидратировали подходящими осушителями и концентрировали в вакууме при 60^oC. Концентрированный экстракт сушили полностью в течение нескольких часов при 60^oC в вакууме. Очищенный порошкообразный экстракт стандартизировали до дальнейшей обработки.

Экстракт Euphorbia prostrata характеризовали высокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЭЖХ). ВЭЖХ проводили при следующих условиях с использованием системы Waters, снабженной насосами М510 и блоком данных с программным обеспечением Millenium.

Подвижная фаза: Ацетонитрил: 2% уксусная кислота (17:23)
Колонка: C₁₈ (250х4 мм/5 мк)
Скорость потока: 1 мл/мин
Детектор: УФ-поглощение у 350 нм
Хроматограф (ВЭЖХ) показал пять пиков, соответствующих флавоноидным компонентам, лутеолину, 6-метоксикверцетингликозиду, кверцетину, лутеолингликозиду и апигенингликозиду. Из них основные пики соответствовали лутеолину и кверцетину (их подтверждали путем сравнения с аутентичными пробами лутеолина и кверцетина). Апигенингликозид и лутеолингликозид использовали в качестве химических и фармакологических маркеров для стандартизации продукта.

Способ получения капсул:
На основе фармакологических исследований было установлено, что каждая капсула должна содержать 15-50 мг экстракта Euphorbia с соединениями, имеющими на ВЭЖХ "отпечатки пальцев". Содержание соединения А было 35%, содержание соединения В было 9%, содержание остальных соединений было 6% и общее содержание флавоноидов было 50%.

Поэтому экстракт Euphorbia, используемый для каждой партии, характеризовали и количественно анализировали в отношении содержания флавоноидов, как указано выше. На основании полученных величин экстракта устанавливали экстрактное количество экстракта Euphorbia на капсулы. Типичные составы на основе средних величин флаваноидов приведены в примерах 1-3 в конце описания.

Стандартизированный экстракт растворяют в этиловом спирте. Лактозу, коллоидный диоксид кремния и очищенный тальк по отдельности пропускают через мелкие сита. Раствор стандартизированного экстракта в этиловом спирте адсорбируют на лактозе и хорошо смешивают до достижения однородности. Этот материал сушат при температуре 60-70^oC до достижения полной осушки. Коллоидный диоксид кремния и очищенный тальк в качестве смазывающих веществ смешивают с материалом. Смесь затем анализируют на содержание флаваноидов ВЭЖХ. На основании данных анализа порошок наполняют в пустые твердые желатиновые капсулы при средней массе наполнения 300 мг ± 10 мг. После испытания на контроль качества заполненные капсулы герметизируют в воздухонепроницаемых упаковках, содержащих лекарственное средство в дозах на один прием.

Способ приготовления мази:
Стандартизированный экстракт, используемый для приготовления мази, характеризовали способом, подобным описанному для приготовления капсул. На основании полученных для экстракта величин устанавливали экстрактное процентное содержание стандартизированного экстракта в мазях. Типичный пример состава на основе средних величин флаваноидов следующий:
Пример 4:
Экстракт - 1%
Цетиловый спирт - 20%
Пчелиный воск - 24%
Глицерин - 12%
Лаурилсульфат натрия - 1%
Пропилпарабен - 0,01%
Метилпарабен - 0,03%
Очищенная вода - Сколько нужно до 100%
Пример 5
Гидрофильная мазь
Экстракт - 1%
Метилпарабен - 0,026%
Пропилпарабен - 0,015%
Лаурилсульфат натрия - 1%
Пропиленгликоль - 12%
Стеариловый спирт - 25%
Белый вазелин - 25%
Очищенная вода - Сколько нужно до 100%
Пример 6
Полиэтиленгликолевая мазь
Экстракт - 3%
Полиэтиленгликоль 3350 - 40%
Полиэтиленгликоль 400 - 57%
Стандартизированный экстракт растворяют в глицерине и небольшой порции очищенной воды. В раствор вводят лаурилсульфат натрия, метилпарабен и пропилпарабен. Раствор нагревают до 65-75^oC. Цетиловый спирт и пчелиный воск одновременно расплавляют при около 75^oC. При постоянном перемешивании и поддерживании температуры между 65^oC и 75^oC в масляную фазу медленно добавляют водную фазу. Полученную эмульсию перемешивают далее в течение 1 часа и, если нужно, массу доводят до 100% добавлением теплой очищенной воды. Мазь выдерживают для охлаждения и деаэрируют. Конечный продукт испытывают для контроля качества и заполняют в покрытые лаком алюминиевые сжимаемые тюбики и герметизируют.

ОЦЕНКА КЛИНИЧЕСКОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ КАПСУЛ И МАЗИ
Клиническая оценка фармацевтической композиции данного изобретения была сделана University Institute Pharmaceutical Sciences с помощью University Health Centre, Punjab University, Chandigarh. После испытания на противовоспалительную активность и токсичность на животных и на основании безопасного использования растения в индийской традиционной медицине для других состояний лекарственное средство вводили в пероральной лекарственной форме и местной аппликацией пациентам с жалобами на геморрои и трещины. Большинство пациентов либо не реагировали, либо переносили рецидивы при других формах терапии. Пациентам обычно давали одну/две капсулы на день в течение периода 3-9 дней. Некоторые пациенты получали как пероральный, так и местный препарат. Лекарственное средство вводили приблизительно 32000 пациентам. Большинство пациентов реагировали на один курс лечения без какого-либо побочного действия.

Изобретение относится к медицине и касается композиций для лечения аноректальных и ободочно-кишечных болезней. Композиция включает приемлемую основу и флавоноидсодержащий экстракт из растения Euphorbia prostrate, включающий апигенин-7-гликозид, лутеолин-7-гликозид, 6-метокси-кверцитин-3-гликозид, кверцетин и лутеолин. Предложенные композиции более эффективны за счет того, что их свойства позволяют более равномерно наносить композиции на пораженные участки. 30 з.п.ф-лы, 6 табл., 1 ил.

1. Фармацевтическая композиция для лечения аноректальных и ободочно-кишечных заболеваний, включающая фармацевтически приемлемую основу и эффективное количество флавоноидсодержащего экстракта из растения Euphorbia prostate, в котором флавоноид составляет приблизительно от 35 до 62% от массы экстракта, при этом флавоноид представлен апигенин-7-гликозидом, лутеолин-7-гликозидом, 6-метоксикверцитин-3-гликозидом, кверцитином и лутеолином, где апигенин-7-гликозид присутствует в количестве приблизительно от 30 до 45% от массы экстракта, лутеолин-7-гликозид присутствует в количестве приблизительно от 3 до 9% от массы экстракта и 6-метоксикверцитин-3-гликозид присутствует в количестве приблизительно от 1 до 6% от массы экстракта, кверцитин присутствует в количестве приблизительно от 1 до 2% от массы экстракта и лутеолин присутствует в количестве приблизительно от 1 до 2% от массы экстракта. 2. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что аноректальным заболеванием являются геморрои, трещины, щели, свищи, абсцессы, воспалительное заболевание кишечника, неспецифический язвенный колит или болезнь Крона. 3. Композиция по п. 1, дополнительно включающая таннины в количестве приблизительно 5% от массы экстракта, смолы, камеди в количестве приблизительно от 10 до 15% от массы экстракта, пигменты, стерины или тритерпеноиды. 4. Композиция по п.1, включающая дополнительно терапевтическое средство. 5. Композиция по п.4, отличающаяся тем, что терапевтическим средством является вяжущее средство, анестезирующее средство, соль анестезирующего средства, анестезирующее средство в комбинации с солью анестезирующего средства, сосудосуживающее средство, защитное средство, противораздражающее средство, кератолитическое средство, антихолинергическое средство, ранозаживляющее средство или антимикробное средство. 6. Композиция по п.5, отличающаяся тем, что терапевтическим средством является вяжущее средство. 7. Композиция по п.6, отличающаяся тем, что вяжущее средство выбирают из группы, содержащей каламин, окись цинка, настойку гаммамелиса, соединение резорцина с висмутом, субгаллат висмута, перуанский бальзам, хлоргидроксиаллантоинат алюминия и дубильную кислоту. 8. Композиция по п.6, отличающаяся тем, что количество вяжущего средства составляет приблизительно от 0,2 до 60% по массе. 9. Композиция по п.5, отличающаяся тем, что терапевтическое средство выбирается из анестезирующего средства, соли анестезирующего средства или анестезирующего средства в комбинации с солью анестезирующего средства. 10. Композиция по п.9, отличающаяся тем, что терапевтическое средство выбирают из группы, состоящей из бензокаина, диперодона, прамоксина, камфоры, дибукаина, фенола, тетракаина и фенакаина. 11. Композиция по п.9, отличающаяся тем, что количество анестезирующего средства составляет приблизительно от 0,25 до 25% по массе. 12. Композиция по п.5, отличающаяся тем, что терапевтическое средство является сосудосуживающим средством. 13. Композиция по п.12, отличающаяся тем, что сосудосуживающее средство выбирают из эфедрина, фенилэфрина или фенилэфрина в комбинации с солью фенилэфрина. 14. Композиция по п.5, отличающаяся тем, что терапевтическим средством является противораздражающее средство. 15. Композиция по п. 14, отличающаяся тем, что противораздражающим средством является ментол, присутствующий в количестве приблизительно от 0,25 до 2,5% по массе. 16. Композиция по п.5, отличающаяся тем, что терапевтическим средством является защитное средство. 17. Композиция по п.16, отличающаяся тем, что защитное средство выбирают из группы, включающей гель гидроокиси алюминия, каламин, масло какао, тресковый жир, жир печени акулы, крахмал, белый вазелин, спирт шерстяного жира, окись цинка, растительное масло, касторовое масло, полиэтиленгликоль и пропиленгликоль. 18. Композиция по п.16, отличающаяся тем, что защитное средство присутствует в количестве приблизительно от 5,0 до 88,0% по массе. 19. Композиция по п.5, отличающаяся тем, что терапевтическим средством является средство для заживления ран. 20. Композиция по п.19, отличающаяся тем, что средство для заживления ран выбирают из витамина А, витамина D, перуанского бальзама, жира из печени трески и производных живых дрожжевых клеток. 21. Композиция по п. 19, отличающаяся тем, что витамин А и витамин D присутствуют в количестве приблизительно от 0,005 до 0,04% по массе, указанный перуанский бальзам присутствует в количестве приблизительно от 0,5 до 2,5% по массе, жир из печени трески присутствует в количестве приблизительно от 1,0 до 6,0% по массе и производные живых дрожжевых клеток присутствуют в количестве приблизительно от 2 до 50000 единиц на грамм. 22. Композиция по п.5, отличающаяся тем, что терапевтическое средство является антимикробным средством. 23. Композиция по п. 22, отличающаяся тем, что антимикробное средство выбирают из группы, состоящей из хлорида бензетония, хлорида бензалкония, фенола, ментола, хлортимола, камфоры и сульфата 8-гидроксихинолина. 24. Композиция по п. 22, отличающаяся тем, что антимикробное средство присутствует в количестве приблизительно от 0,02 до 40% по массе. 25. Композиция по п.5, отличающаяся тем, что терапевтическое средство является кератолитическим средством. 26. Композиция по п.25, отличающаяся тем, что кератолитическое средство выбирают из хлоргидроксиаллантоината алюминия и резорцина. 27. Композиция по п.25, отличающаяся тем, что кератолитическое средство присутствует в количестве приблизительно от 0,2 до 3,5% по массе. 28. Композиция по п.5, отличающаяся тем, что терапевтическое средство является антихолинергическим средством. 29. Композиция по п. 28, отличающаяся тем, что антихолинергическое средство выбирают из группы, состоящей из атропина, алкалоида соланинового типа или атропина в комбинации с алкалоидом соланинового типа. 30. Композиция по п.28, отличающаяся тем, что количество антихолинергического средства составляет приблизительно от 0,2 до 0,1% по массе. 31. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что находится в форме крема, мази, раствора, спрея, пены, суппозитория, лечебной прокладки, повязки, порошка, суспензии, пленки, хлопьев, пероральных твердых желатиновых капсул, мягких желатиновых капсул, покрытых оболочкой таблеток, таблеток без покрытия, лекарственной формы пролонгированного действия, жидкости, пастилок, буккальной лекарственной формы, капсул или облаток.