СПОСОБ АДАПТАЦИИ ПРОБИРОЧНЫХ РАСТЕНИЙ К НЕСТЕРИЛЬНЫМ УСЛОВИЯМ Российский патент 2002 года по МПК A01H4/00 

Изобретение относится к области с/х, в частности к биотехнологии, и может быть использовано в питомниководстве для производства посадочного материала с помощью клонального микроразмножения.

Биотехнологические методы ускоренного размножения оздоровленного посадочного материала широко используется в современном растениеводстве. Процесс размножения состоит из нескольких этапов, заключительным из которых является перевод пробирочных растений в нестерильные условия (Gresshoff P. Methods employed in planting out tissue culture rooted plant lets. The Horizons of tissue culture propagation. A seminar directed by Dr. R. A. Fossard for the N. S.W.A. association of Nurserymen Ltd. at the University of Sydney 3-4 December, 1977, p.106-108).

Недостатком этого способа является необходимость использования стерильных почвенных смесей, что снижает общую эффективность размножения и требует производства дополнительного объема пробирочных растений. Поэтому более перспективным является перенос пробирочных растений непосредственно в нестерильные условия. В том числе и в нестерильный грунт, где происходит их последующее доращивание. Однако использование нестерильных почвенных смесей без специальной подготовки пробирочных растений не позволяет достичь нужной эффективности.

Наиболее близким техническим решением из известных является "способ подготовки растений-регенерантов к посадке в нестерильные условия", при котором с целью повышения приживаемости растений в нестерильных условиях и снижения их инфицированности, акклиматизацию растений проводят на этапе укоренения, после удаления покрытия, культивационный сосуд устанавливают в горизонтальном положении на роллере и вращают в вертикальной плоскости в течение 10-14 дней, а затем растения-регенеранты выдерживают в течение суток в воде (Упадышев М. Т. , Высоцкий В.А., кл. М А 01 Н 5/00, авторское свидетельство 1720597, опубл. 23.03.1992, Бюл. 11 - прототип).

Однако этот известный способ имеет следующие недостатки. Для осуществления пересадки требуется специальный аппарат роллерного типа, процесс пересадки удлиняется на 11-15 суток, на первых этапах необходимо использовать стерильные почвенные субстраты.

Задачей, на решение которой направлено изобретение, является повышение выживаемости пробирочных растений и увеличение конечного выхода посадочного материала путем уменьшения лимитирующих факторов, обусловленных использованием нестерильных субстратов, за счет повышения общей устойчивости пробирочных растений и стимуляции полезной почвенной микрофлоры.

Поставленная задача достигается тем, что в способе адаптации пробирочных растений к нестерильным условиям, включающем укоренение побегов in vitro на искусственной питательной среде, подготовку растений к пересадке в нестерильные условия, посадку растений в почвенный субстрат проводят на питательной среде, содержащей растворимый препарат группы элиситоров.

Кроме этого, поставленная задача достигается и тем, что в предлагаемом способе адаптации пробирочных растений к нестерильным условиям, укоренение побегов осуществляют в питательной среде, содержащей эмистим в разведении 10^-6...10^-9.

В предлагаемом способе адаптации пробирочных растений к нестерильным условиям поставленная задача решается и тем, что корневую систему пробирочных растений перед посадкой в почвенный субстрат опудривают защитно-стимулирующим препаратом на гидрофобном кремнеземном носителе.

Помимо этого, поставленная задача достигается и тем, что в процессе подготовки пробирочных растений к пересадке в нестерильные условия их корневую систему опудривают экостом 1/3.

Кроме этого, поставленная задача решается и тем, что в предложенном способе адаптации пробирочных растений к нестерильным условиям пересадку пробирочных растений осуществляют в нестерильный почвенный субстрат.

Вследствие отсутствия необходимости использования стерильных субстратов, производительность существенно повышается, экономится электроэнергия и увеличивается выход растений. Кроме этого, упрощается весь процесс пересадки. Использование препаратов группы элиситоров как на этапе укоренения, так и пересадки, позволяет еще в большей степени увеличить выход готовой продукции.

Заявляемое техническое решение отличается от прототипа тем, что укоренение размноженных побегов проводят на средах, содержащих растворимый препарат из группы элиситоров, а корневую систему пересаживаемых растений опудривают гидрофобным препаратом из группы элиситоров перед высадкой, а саму пересадку осуществляют в почвенные субстраты, не подвергающиеся предварительной стерилизации.

Эти отличия позволяют сделать вывод о соответствии заявленного технического решения критерию "новизна".

Заявленное техническое решение обладает изобретательским уровнем, так как не является очевидным для специалистов питомниководов и биотехнологов, а является продуктом творческой деятельности авторов изобретения.

Заявленное техническое решение соответствует и другому требуемому критерию изобретения - промышленному применению, что подтверждено экспериментальными данными, полученными при реализации способа.

Способ включает укоренение побегов in vitro на искусственной питательной среде, подготовку растений к пересадке в нестерильные условия и посадку в почвенный субстрат. Укоренение побегов осуществляют на среде, в которую добавляют растворимый препарат из группы элиситоров, в разведении 10^-6...10^-9. В процессе подготовки к пересадке в нестерильные условия, корневую систему пробирочных растений опудривают гидрофобным препаратом из группы элиситоров. В качестве субстрата для пересадки используют нестерильный почвенный субстрат.

Пример осуществления способа
1. Пролиферирующие побеги ежевики сортов Агавам, Дарроу, Торнфри высаживали на стандартную среду MS. Добавляли растворимый препарат из группы элиситоров в разведениях 10^-9...10^-6. После развития корневой системы у пробирочных растений, корни опудривали гидрофобным препаратом из группы элиситоров и высаживали в нестерильные почвенные субстраты. Результаты наблюдений представлены в табл. 1. Как видно из приведенных данных, выживаемость обработанных растений по сравнению с контрольными значительно возросла. Так, например, у сорта Агавам она составила 96,4% по сравнению с 33,3% у контрольных, у растений сорта Торнфри 100% у обработанных и 70% у контрольных, у сорта Дарроу 100% у обработанных и 66,3% у контрольных.

2. Побеги земляники сорта Трибьют посадили на среду для укоренения, с добавлением растворимого препарата из группы элиситоров в разведении 10^-9... 10^-6. Перед высадкой в нестерильный субстрат корни растений опудривали гидрофобным препаратом из группы элиситоров. Полученные данные приведены в табл. 2. Выживаемость обработанных растений в оптимальных вариантах составила 90% по сравнению с 16% в контроле.

3. Побеги малины сорта Скромница, полученные на среде для размножения, для образования корней высаживали на среду для укоренения, в которую вводили растворимый препарат группы элиситоров в различных концентрациях (разведение от 10^-9 до 10^-6). После развития корневой системы у извлеченных из пробирок растений корни обрабатывали гидрофобным препаратом из группы элиситоров, после чего растения высаживали в нестерильный субстрат. Результаты приживаемости растений представлены в табл.3.

Как вывод, из приведенных данных следует, что комбинированное использование препаратов группы элиситоров существенно повышает процент приживаемости пробирочных растений в нестерильном почвенном субстрате.

Использование предложенного способа адаптации пробирочных растений к нестерильным условиям обеспечивает по сравнению с существующей технологией следующие преимущества:
1. Повышается до 90% приживаемость пробирочных растений в нестерильных условиях.

2. Упрощается техника пересадки и подготовки почвенных субстратов, так как отпадает необходимость в их стерилизации.

3. Уменьшается объем работ в системах клонального микроразмножения за счет исключения необходимости производить дополнительное количество растений.

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к биотехнологии, и может быть использовано в питомниководстве для производства посадочного материала с помощью клонального микроразмножения. Способ включает укоренение побегов in vitro на искусственной питательной среде, подготовку растений к пересадке в нестерильные условия, посадку растений в почвенный субстрат. Питательная среда для укоренения побегов содержит препарат из группы элиситоров. Изобретение позволяет повысить выживаемость пробирочных растений и увеличить конечный выход посадочного материала. 4 з.п. ф-лы, 3 табл.

1. Способ адаптации пробирочных растений к нестерильным условиям, включающий укоренение побегов in vitro на искусственной питательной среде, подготовку растений к пересадке в нестерильные условия, посадку растений в почвенный субстрат, отличающийся тем, что укоренение побегов проводят на питательной среде, содержащей препарат из группы элиситоров. 2. Способ адаптации пробирочных растений к нестерильным условиям по п. 1, отличающийся тем, что укоренение побегов осуществляют на питательной среде, содержащей эмистим в разведении 10^-6-10^-9. 3. Способ адаптации пробирочных растений к нестерильным условиям по п. 1 или 2, отличающийся тем, что в процессе подготовки пробирочных растений к пересадке в нестерильные условия их корневую систему опудривают гидрофобным препаратом группы элиситоров. 4. Способ адаптации пробирочных растений к нестерильным условиям по любому из пп. 1-3, отличающийся тем, что корни пробирочных растений перед пересадкой в почвенный субстрат опудривают экостом 1/3. 5. Способ адаптации пробирочных растений к нестерильным условиям по любому из пп. 1-4, отличающийся тем, что пересадку пробирочных растений осуществляют в нестерильный почвенный субстрат.