СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ПРОЦЕССА ЖЕЛЧЕВЫВОДЯЩИХ ПУТЕЙ В ПОСЛЕОПЕРАЦИОННОМ ПЕРИОДЕ Российский патент 2003 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к медицине, в частности к физическому анализу жидких биологических материалов, и может быть использовано в качестве дополнительного теста для экспресс-диагностики состояния желчевыводящих путей больного, прооперированного по поводу гнойного холангита.

Известен способ оценки динамики воспалительного процесса желчевыводящих путей в послеоперационный период, заключающийся в поляризационно-оптическом исследовании свежих препаратов желчи из дренажа больного, у которого наружное дренирование было выполнено в связи с сопутствующим панкреатитом (В.М. Лисиенко и др. "Экстракорпоральная жидкокристаллическая диагностика холецистита", Свердловск: Издательство Уральского университета, 1989, с.91-93).

Наиболее близким к предлагаемому является способ оценки динамики воспалительного процесса желчевыводящих путей в послеоперационный период, заключающийся в поляризационно-оптическом исследовании свежих препаратов желчи из дренажа больного, оперированного по поводу желчно-каменной болезни (В.М. Лисиенко и др. "Экстракорпоральная жидкокристаллическая диагностика холецистита", Свердловск: Издательство Уральского университета, 1989, с.91-93).

Выявленные способы включает морфологическое исследование желчи путем изучения текстуры ее жидкокристаллической структуры в поляризованном свете в динамике заболевания. Для исследования берут желчь, начиная с первых суток после операции, и заканчивают четырнадцатыми сутками. По изменению текстур исследуемой желчи, по сравнению с текстурой, полученной в первые сутки послеоперационного периода, судят о наличии воспалительного процесса.

Недостаток известных способов прежде всего заключается в том, что они не позволяют диагностировать воспалительный процесс желчевыводящих путей в послеоперационном периоде при остром холангите.

Таким образом, выявленные в результате патентного поиска известные способы диагностики воспалительного процесса желчевыводящих путей в послеоперационный период, аналог и прототип заявленного способа, при осуществлении не позволяют достичь технического результата, заключающегося в возможности диагностики воспалительного процесса желчевыводящих путей в послеоперационный период при остром холангите.

Предлагаемое изобретение решает задачу создания способа диагностики воспалительного процесса желчевыводящих путей в послеоперационном периоде, осуществление которого обеспечивает достижение технического результата, заключающегося в возможности диагностики воспалительного процесса желчевыводящих путей в послеоперационный период при остром холангите.

Суть изобретения заключается в том, что в способе диагностики воспалительного процесса желчевыводящих путей в послеоперационном периоде, включающем морфологическое исследование холедохеальной желчи больного, путем изучения текстур ее жидкокристаллической структуры в динамике в поляризованном свете, анализ результатов и констатацию факта наличия или отсутствия воспаления, для исследования берут желчь больного с диагнозом острый холангит во время операции, методом пункции холедоха, и в последующие сутки послеоперационного периода - из наружного дренажа холедоха, при этом, для исследования на поверхность предметного стекла наносят каплю исследуемой желчи и накрывают покровным стеклом, затем, поддерживая условия окружающей среды постоянными, препарат выдерживают до появления на предметном стекле выраженных типичных текстур, после чего производят поляризационно-оптическое исследование препарата путем осмотра всей поверхности образца, результаты поляризационно-оптических исследований первой и последующих порций желчи фиксируют, сравнивают полученные текстуры с текстурой первой порции желчи и, если в результате сравнения в обеих текстурах наблюдают на фоне жидкокристаллических линий в среднем количестве малые и средние сферолиты и сферодендриты, единичные крупные сферолиты и/или сферодендриты, а также в среднем или в большом количестве игольчатые и пластинчатые кристаллы, конфокальные домены, недвулучепреломляющие, скелетные и тонкие дендриты и атипичные формы, то диагностируют наличие воспалительного процесса, если в результате сравнения в текстуре последующей порции желчи на фоне жидкокристаллических линий наблюдают единичные игольчатые кристаллы, пластинчатые кристаллы, конфокальные домены, недвулучепреломляющие дендриты и не наблюдают сферолиты, сферодендриты, скелетные и тонкие дендриты и атипичные формы, то диагностируют отсутствие воспалительного процесса.

Технический результат достигается следующим образом. Многие жидкие биологические среды организма человека способны кристаллизоваться, а в определенных условиях - переходить в промежуточное жидкокристаллическое состояние. В жидкокристаллическом состоянии среда, сохраняя текучесть, проявляет в поляризованном свете специфические картины - текстуры. Известно, что биологические жидкости представляют собой многокомпонентные системы, в большинстве своем проявляющие структурную гетерогенность (неоднородность) и обладающие высокой чувствительностью к составу и форме существования компонентов. Состав биологических жидкостей адекватно отражает физиологическое состояние организма человека, а также функциональную полноценность его отдельных органов и систем. Например, регуляторные механизмы и фармакологические факторы влияют на количественное содержание белка и солей кальция в моче, на соотношение насыщенных и ненасыщенных липидов в сыворотке крови, характер агрегирования липидного комплекса желчи, количество фосфолипидов, производных холестерина и его эфиров, проявляющих жидкокристаллические свойства. Эти изменения на тонком молекулярном уровне проявляются, в частности, в особенностях агрегирования биологических жидкостей на уровне микроструктур. Морфология текстур жидкокристаллической фазы коррелирует с состоянием организма и изменяется при наличии патологии, что и позволяет наблюдать это в динамике в поляризованном свете при оптических обычных увеличениях (В.М. Лисиенко и др. "Экстракорпоральная жидкокристаллическая диагностика холецистита", Свердловск: Издательство Уральского университета, 1989, с. 9-23; а.с. СССР 1209168, А 61 В 10/00, 07.02.86; а.с. СССР 1486932, G 01 N 33/92, 15.06.89; а.с. СССР 1723527, G 01 N 33/92, 30.03.92).

В предлагаемом способе для диагностики воспалительного процесса желчевыводящих путей используют морфологическое исследование биологической среды, а именно: желчь. Благодаря тому, что желчь способна кристаллизоваться, проходя промежуточное жидкокристаллическое состояние, обеспечивается возможность морфологического исследования путем изучения в динамике заболевания текстуры ее жидкокристаллической структуры в поляризационном свете: поляризационно-оптическое исследование препарата путем осмотра всей поверхности образца. При этом, поскольку в желчи при наличии воспалительного процесса в желчевыводящих путях изменяется количественное содержание практически каждой составляющей, то даже незначительные изменения в составляющих желчи вызывают заметные изменения текстур ее жидкокристаллической структуры, что и позволяет фиксировать наличие воспалительного процесса.

Из литературы известно, что ранее проведенные исследования желчи больных как с бескаменным, так и с калькулезным холециститом, на выявление сопутствующих заболеваний методом морфологического исследования желчи, путем изучения текстуры ее жидкокристаллической структуры в динамике в поляризованном свете, не выявили каких-либо особенностей структурообразования в желчи для случаев, когда сопутствующим заболеванием является холангит (В.М. Лисиенко и др. "Экстракорпоральная жидкокристаллическая диагностика холецистита", Свердловск: Издательство Уральского университета, 1989, с.62). Поскольку в предлагаемом способе для исследований берут желчь больного с диагнозом острый холангит и, кроме того, желчь для исследований берут во время операции непосредственно из места ее скопления в организме больного методом пункции холедоха, а в последующие сутки послеоперационного периода - из наружного дренажа холедоха, состав желчи адекватно отражает функциональное состояние желчевыводящих путей и иллюстрирует степень выраженности воспалительного процесса, что и обеспечивает в способе возможность диагностики воспаления желчевыводящих путей в послеоперационном периоде при остром холангите. Кроме того, благодаря тому, что желчь для исследования берут во время операции и в последующие сутки послеоперационного периода, обеспечивается возможность сравнения текстур первой и последующих порций желчи, полученных в результате поляризационно-оптического исследования, а по результатам сравнения текстур последующих порций желчи с текстурами первой порции - возможность диагностики наличия воспалительного процесса желчевыводящих путей в послеоперационном периоде при остром холангите. Причем, благодаря тому, что первую порцию желчи для исследования берут во время операции, а не в первый день после операции, как в прототипе, повышается достоверность диагностики. Это объясняется тем, что в этом случае состав желчи соответствует истинному составу желчи при воспалительном процессе, в то время как в первый день после операции уже идут процессы восстановительные и картина отличается от исходной, тем более, что на организм пациента уже воздействовали терапевтическими процедурами. В результате, сравнение текстур желчи, взятой во время операции и в последующие дни после операции, позволяет зафиксировать явные отличия и в большем количестве, что повышает достоверность диагностики.

В предлагаемом способе для исследований готовят препарат из желчи, для чего каплю желчи наносят на предметное стекло. Благодаря тому, что препарат накрывают покровными стеклом, исключается возможность его химического взаимодействия с окружающей средой, что обеспечивает достоверность результатов исследований, а следовательно, и возможность самой диагностики. Сохранение постоянных условий окружающей среды при выдержке препарата также обеспечивает достоверность результатов исследований. Образование выраженных типичных базовых текстур на предметном стекле означает окончание процесса агрегирования. Это делает нецелесообразным дальнейшее увеличение времени выдержки препарата и определяет время начала исследования текстуры. Результаты поляризационно-оптических исследований первой и второй порций желчи фиксируют, сравнивают полученные текстуры с текстурой первой порции желчи и, если в результате сравнения в обеих текстурах наблюдают на фоне жидкокристаллических линий в среднем количестве малые и средние сферолиты и сферодендриты, единичные крупные сферолиты и/или сферодендриты, а также в среднем или в большом количестве игольчатые и пластинчатые кристаллы, конфокальные домены, недвулучепреломляющие, скелетные и тонкие дендриты и атипичные формы, то диагностируют наличие воспалительного процесса, если в результате сравнения в текстуре последующей порции желчи на фоне жидкокристаллических линий наблюдают единичные игольчатые кристаллы, пластинчатые кристаллы, конфокальные домены, недвулучепреломляющие дендриты и не наблюдают сферолиты, сферодендриты, скелетные и тонкие дендриты и атипичные формы, то диагностируют отсутствие воспалительного процесса.

При этом присутствие во всех текстурах жидкокристаллических линий говорит о постоянном присутствии в желчи определенных составляющих, наиболее для нее характерных. Наличие этих кристаллов в сравниваемых текстурах может являться своеобразным тестом для правильного выполнения исследований, что повышает достоверность диагностики, в частности при констатации факта появления на предметном стекле выраженных типичных текстур.

Наличие в текстурах желчи в среднем количестве малых и средних сферолитов и сферодендритов, единичных крупных сферолитов и/или сферодендритов, а также в среднем или в большом количестве игольчатых и пластинчатых кристаллов, конфокальных доменов, недвулучепреломляющих, скелетных и тонких дендритов и атипичных форм указывает на присутствие в желчи не характерных для нее составляющих, которые являются результатом наличия воспалительного процесса в желчевыводящих путях.

Снижение количества до единичных игольчатых кристаллов, пластинчатых кристаллов, конфокальных доменов, недвулучепреломляющих дендритов указывает на изменение качественного состава желчи: появление в ней составляющих, соответствующих норме. Отсутствие сферолитов и сферодендритов, скелетных и тонких дендритов и атипичных форм также указывает на качественное изменение состава желчи: на исчезновение составляющих, характерных для патологии.

Отсюда следует, что сравниваемые текстуры отражают нарушения метаболизма разного вида, что обеспечивает достоверность способа и позволяет использовать его для диагностики воспалительного процесса желчевыводящих путей в послеоперационном периоде при остром холангите.

Кроме того, адекватность изменения характера текстуры при изменении качественного или количественного состава желчи или при их совокупном изменении, в сочетании с повышенной чувствительностью способа обеспечивают возможность использования заявленного способа для экспресс-оценки эффективности терапии, используемой при лечении воспалительного процесса желчевыводящих путей в послеоперационном периоде при остром холангите, а также позволяет использовать его для определения срока удаления дренажа из желчевыводящих путей при данном заболевании в послеоперационном периоде.

Поскольку в способе в качестве критерия оценки используют характер текстур (кристаллическую картину), который соответствует вполне определенному составу исследуемой биологической жидкости, предлагаемый способ при диагностировании автоматически принимает во внимание физиологический коридор, который позволяет учесть индивидуальные особенности организма конкретного пациента, что обеспечивает достоверность способа.

Предлагаемый способ позволяет сократить время для получения окончательных результатов исследований, поскольку последние являются результатом визуального обзора препарата и не требуют дополнительной обработки результатов исследований, что и позволяет использовать его для экспресс-диагностики.

Сравнительная простота выполнения способа обеспечивает его достоверность, так как уменьшает вероятность ошибки.

Таким образом, заявленный способ диагностики воспалительного процесса желчевыводящих путей в послеоперационном периоде при осуществлении обеспечивает достижение технического результата, заключающегося в возможности диагностики воспалительного процесса желчевыводящих путей в послеоперационном периоде при остром холангите.

Способ диагностики воспалительного процесса желчевыводящих путей в послеоперационном периоде осуществляют следующим образом. Проводят морфологические исследования желчи путем изучения текстуры ее жидкокристаллической структуры в динамике в поляризованном свете. Для исследования берут желчь больного с диагнозом острый холангит во время операции, методом пункции холедоха и в последующие сутки послеоперационного периода - из наружного дренажа холедоха. На поверхность предметного стекла наносят каплю желчи и накрывают покровным стеклом. Затем, поддерживая условия окружающей среды постоянными, препарат выдерживают до появления на предметном стекле выраженных типичных текстур. После чего производят поляризационно-оптическое исследование препарата путем осмотра всей поверхности образца. Результаты поляризационно-оптических исследований первой и последующих порций желчи фиксируют, сравнивают полученные текстуры с текстурой первой порции желчи. Если в результате сравнения в обеих текстурах наблюдают на фоне жидкокристаллических линий в среднем количестве малые и средние сферолиты и сферодендриты, единичные крупные сферолиты и/или сферодендриты, а также в среднем или в большом количестве игольчатые и пластинчатые кристаллы, конфокальные домены, недвулучепреломляющие, скелетные и тонкие дендриты и атипичные формы, то диагностируют наличие воспалительного процесса, если в результате сравнения в текстуре последующей порции желчи на фоне жидкокристаллических линий наблюдают единичные игольчатые кристаллы, пластинчатые кристаллы, конфокальные домены, недвулучепреломляющие дендриты и не наблюдают сферолиты, сферодендриты, скелетные и тонкие дендриты и атипичные формы, то диагностируют отсутствие воспалительного процесса.

Во всех примерах выполнения способа для приготовления препаратов из желчи брали предварительно прошедшие обработку предметные стекла. На стекло наносили каплю желчи и выдерживали на воздухе в течение 1 мин. Затем накрывали покровным стеклом. Препарат выдерживали, поддерживая постоянными условия окружающей среды, до появления на поверхности предметных стекол типичных текстур.

Обращали внимание на качество обработки предметного стекла, чтобы избежать артефактов при исследованиях. Формирование текстур происходит за счет испарения с краев препарата и, в первую очередь, проявляется в периферийных областях, поэтому просмотр начинали с периферийных областей. После чего просматривали центральные области. Просмотр производили в поляризованном свете при скрещенных николях при увеличении •150...•250. Осмотр всей поверхности образца производили продольно-поперечным сканированием с шагом, равным величине поля зрения. Все обнаруженные особенности фиксировали. Для исследований могут быть использованы микроскопы серий БИОЛАМ (с поляризованными фильтрами), ПОЛАМ, МБИ.

Пример 1. Пациент Н., возраст 71 год, клинический диагноз - флегмонозный калькулезный холецистит, осложненный гнойным холангитом, механической желтухой, печеночной недостаточностью первой степени по Э.И.Гальперину. Выполнена операция - холецистэктомия, холедохолитотомия, наружное дренирование холедоха.

Для исследования у больного был произведен забор желчи во время операции методом пункции холедоха и в динамике заболевания на третьи и на двенадцатые сутки после операции из наружного дренажа холедоха. Были приготовлены препараты из желчи. После появления на предметном стекле выраженных типичных текстур производили поляризационно-оптическое исследование препарата путем осмотра всей поверхности образца.

На предметном стекле первого образца наблюдали на фоне жидкокристаллических линий в среднем количестве малые и средние сферолиты и сферодендриты, единичные крупные сферолиты и сферодендриты, а также в среднем или в большом количестве игольчатые и пластинчатые кристаллы, конфокальные домены, недвулучепреломляющие, скелетные и тонкие дендриты и атипичные формы, что свидетельствовало о наличии воспалительного процесса желчевыводящих путей.

На предметном стекле с препаратом из желчи, взятой на третьи сутки из дренажа, наблюдали на фоне жидкокристаллических линий незначительное уменьшение количества малых и средних сферолитов и сферодендритов, единичных крупных сферолитов и сферодендритов, а также игольчатых и пластинчатых кристаллов, конфокальных доменов, недвулучепреломляющих, скелетных и тонких дендритов, а также наличие атипичных форм, что также свидетельствовало о наличии воспалительного процесса желчевыводящих путей.

На предметном стекле с препаратом желчи, взятой из дренажа на двенадцатые сутки после операции, на фоне жидкокристаллических линий наблюдали единичные игольчатые кристаллы, пластинчатые кристаллы, конфокальные домены, недвулучепреломляющие дендриты и не наблюдали сферолиты, сферодендриты, скелетные и тонкие дендриты и атипичные формы, что позволило диагностировать купирование воспалительного процесса в желчевыводящих путях.

Результаты диагностики подтверждены общеклиническими и лабораторными исследованиями. Дренаж из холедоха удален на 13 сутки. Пациент в удовлетворительном состоянии выписан домой на 14 сутки после операции.

Пример 2. Пациент Н. , возраст 22 года, клинический диагноз - флегмонозный калькулезный холецистит, осложненный гнойным холангитом, механической желтухой, печеночной недостаточностью первой степени по Э.И. Гальперину. Выполнена операция - холецистэктомия, холедохолитотомия, наружное дренирование холедоха.

Для исследования у больного был произведен забор желчи во время операции методом пункции холедоха и в динамике заболевания на пятнадцатые сутки после операции из наружного дренажа холедоха. Были приготовлены препараты из желчи. После появления на предметном стекле выраженных типичных текстур производили поляризационно-оптическое исследование препарата путем осмотра всей поверхности образца.

На предметном стекле первого образца наблюдали на фоне жидкокристаллических линий в среднем количестве малые и средние сферолиты и сферодендриты, единичные крупные сферодендриты и сферолиты, а также в среднем или в большом количестве игольчатые и пластинчатые кристаллы, конфокальные домены, недвулучепреломляющие, скелетные и тонкие дендриты и атипичные формы, что свидетельствовало о наличии воспалительного процесса желчевыводящих путей.

На предметном стекле с препаратом из желчи, взятой на пятнадцатые сутки из дренажа, наблюдали на фоне жидкокристаллических линий незначительное изменение в количестве малых и средних сферолитов и сферодендритов, единичных крупных сферолитов и сферодендритов, а также игольчатых и пластинчатых кристаллов, конфокальных доменов, недвулучепреломляющих, скелетных и тонких дендритов, а также наличие атипичных форм, что позволило диагностировать воспалительный процесс в желчевыводящих путях.

Результаты диагностики были подтверждены общеклиническими и лабораторными исследованиями. Дренаж из холедоха не удален. Больной выполнено повторное оперативное вмешательство. Продолжен курс антибактериальной терапии.

Изобретение относится к медицине, в частности к физическому анализу жидких биологических материалов, и может быть использовано для экспресс-диагностики состояния желчевыводящих путей больного, прооперированного по поводу гнойного холангита. Берут желчь больного с диагнозом острый холангит во время операции методом пункции холедоха и в последующие сутки послеоперационного периода - из наружного дренажа холедоха. Сравнивают полученные текстуры с текстурой первой порции желчи. Если наблюдают на фоне жидкокристаллических линий в среднем количестве малые и средние сферолиты и сферодендриты, единичные крупные сферолиты и/или сферодендриты, в среднем или в большом количестве игольчатые и пластинчатые кристаллы, конфокальные домены, недвулучепреломляющие, скелетные и тонкие дендриты и атипичные формы, то диагностируют воспалительный процесс, а если наблюдают единичные игольчатые кристаллы, пластинчатые кристаллы, конфокальные домены, недвулучепреломляющие дендриты и не наблюдают сферолиты, сферодендриты, скелетные и тонкие дендриты и атипичные формы, то диагностируют отсутствие воспалительного процесса. Технический результат: возможность диагностики воспалительного процесса желчевыводящих путей в послеоперационном периоде при остром холангите.

Способ диагностики воспалительного процесса желчевыводящих путей в послеоперационном периоде, включающий морфологическое исследование холедохеальной желчи больного путем изучения текстур ее жидкокристаллической структуры в динамике в поляризованном свете, анализ результатов и констатацию факта наличия или отсутствия воспаления, отличающийся тем, что для исследования берут желчь больного с диагнозом острый холангит во время операции методом пункции холедоха и в последующие сутки послеоперационного периода - из наружного дренажа холедоха, при этом для исследования на поверхность предметного стекла наносят каплю исследуемой желчи и накрывают покрывным стеклом, затем, поддерживая условия окружающей среды постоянными, препарат выдерживают до появления на предметном стекле выраженных типичных текстур, после чего производят поляризационно-оптическое исследование препарата путем осмотра всей поверхности образца, результаты поляризационно-оптических исследований первой и последующих порций желчи фиксируют, сравнивают полученные текстуры с текстурой первой порции желчи и, если в результате сравнения в обеих текстурах наблюдают на фоне жидкокристаллических линий в среднем количестве малые и средние сферолиты и сферодендриты, единичные крупные сферолиты и/или сферодендриты, а также в среднем или в большом количестве игольчатые и пластинчатые кристаллы, конфокальные домены, недвулучепреломляющие, скелетные и тонкие дендриты и атипичные формы, то диагностируют наличие воспалительного процесса, если в результате сравнения в текстуре последующей порции желчи на фоне жидкокристаллических линий наблюдают единичные игольчатые кристаллы, пластинчатые кристаллы, конфокальные домены, недвулучепреломляющие дендриты и не наблюдают сферолиты, сферодендриты, скелетные и тонкие дендриты и атипичные формы, то диагностируют отсутствие воспалительного процесса.