ЭШЕРИХИОЗНЫЙ АНАТОКСИН, СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И СПОСОБ АКТИВНОЙ ПРОФИЛАКТИКИ ОТЁЧНОЙ БОЛЕЗНИ ПОРОСЯТ-ОТЪЕМЫШЕЙ Российский патент 2003 года по МПК A61K39/108 A61K35/74 A61P1/00 

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к профилактике желудочно-кишечных болезней поросят-отъемышей.

Известен способ активной профилактики колибактериоза поросят с использованием эшерихиозной формол-тиомерсановой вакцины, представляющей собой инактивированную формалином смесь бульонных культур. Данный способ заключается в том, что препарат вводится трехкратно с интервалом 7-10 дней в дозах 1,0-1,5; 2,0-3,0; 3,0-4,0 мл (см. Ветеринарное законодательство, Москва, ВО, "Агропромиздат", 1988 г.).

Недостатком данного способа профилактики является то, что в вакцину включены множество серогрупп эшерихий, которые создают антимикробный, но не создают антитоксического иммунитета.

Известен способ получения анатоксина по принципу Ramon (1933), сущность которого сводится к выдерживанию препарата в присутствии 0,4% формалина (содержащего 40% формальдегида) при температуре 37-38^oС в течение 21-25 дней (П. Н. Бургасов. Руководство по вакцинному и сывороточному делу. М.: Медицина, 1973, с.115).

Поставленная задача - повышение эффективности способа профилактики за счет создания антитоксического иммунитета.

Данная задача достигается тем, что используют способ профилактики отечной болезни поросят-отъемышей путем двукратного парентерального введения эшерихиозного анатоксина - биопрепарата, содержащего фильтрат, инактивированный формалином смеси бульонных культур Е.соli серотипов 0141:К88ас; 0138: К88ас; 0139:К88ас. Введение осуществляют с 25-30-дневного возраста с интервалом в один месяц в дозах 1,0 и 1,5 мл.

Способ получения эшерихиозного анатоксина заключается в выдерживании биопрепарата в присутствии 0,4% формалина при температуре 37-38^oС. В качестве биопрепарата используют односуточные бульонные культуры Е.coli серотипов 0141:К88ас; 0139:К88ас; 0138:К88ас, культивируют их до 25 суток и пропускают через фильтр Сальникова.

По сравнению с прототипом новым в предлагаемом способе является то, что в качестве биопрепарата используют эшерихиозный анатоксин, содержащий фильтрат бульонных культур Е.coli серотипов 0141:К88ас; 0139:К88ас; 0138: К88ас.

Введение осуществляют двукратно с 25-30-дневного возраста с интервалом в один месяц в дозах 1,0 и 1,5 мл. Новым также является и способ получения нового биопрепарата, заключающийся в том, что в качестве биопрепарата используют односуточные бульонные культуры Е.coli серотипов 0141:К88ас; 0138: К88ас; 0139: К88ас, культивируют их до 25 суток, очищают его от балластных веществ через стерилизующие пластины в аппарате Сальникова.

Следовательно, можно сделать вывод о наличии признака "новизна".

Сопоставительный анализ с другими техническими решениями в области техники показал, что известно в медицине использование анатоксинов против инфекционных заболеваний (столбняка, дифтерии), но при отечной болезни поросят использование анатоксина не было выявлено. Признаки, отличающие предложенный способ от прототипа, также не были выявлены. Следовательно, можно сделать вывод о наличии признака "существенные отличия".

Пример осуществления способа. В хозяйстве, неблагополучном по отечной болезни, при бактериологическом исследовании материала от больных, убитых (с диагностической целью) с клиническими признаками отечной болезни поросят-отъемышей выделяют кишечную палочку - возбудителя данной болезни. Отобранные односуточные агаровые культуры эшерихий с антигенной формулой 0141:К88ас; 0138: К88ас; 0139:К88ас используют для получения односуточной мясо-пептонной бульонной культуры. Последние служат посевным материалом и используют их из расчета 10 мл на 1 литр мясо-пептонного бульона (МПБ).

Культивирование микробов кишечной палочки (эшерихий коли) осуществляют в течение 6 суток при 37-38^oС, помешивая 5-6 раз в сутки. В процессе роста эшерихиозного микроба один раз на второй день культивирования к питательной среде добавляют 0,6% глюкозы для повышения биологической функции микробной клетки и стабилизации pH среды.

По окончании культивирования производят проверку чистоты культуры методом посева на простые и элективные питательные среды. Затем добавляют 40-ный формалин из расчета 4,0 мл на 1 литр. Сменив ватно-марлевые пробки на резиновые, оставляют в термостате (37-38^oС) на 21-25 дней для перевода токсина в анатоксин. После этого пропускают через фильтр Сальникова со стерилизующими пластинами. Препарат расфасовывают во флаконы, проверяют на стерильность, токсичность, специфичность, иммуногенность.

Поросятам двукратно с интервалом в один месяц в дозах 1,0 и 1,5 мл внутримышечно вводят эшерихиозный анатоксин, приготовленный из местных возбудителей болезни. Перед введением анатоксина у 10% (от общего поголовья) поросят проводят клинический осмотр с термометрией. Через 10 дней после первого введения и через 14 дней после второго введения, выборочно, берут кровь и проводят серологические исследования в реакции Флокуляции. Снижение заболеваемости и падежа поросят от этой болезни указывает на позитивное влияние анатоксина.

Результаты экспериментальных исследований показали высокую профилактическую эффективность предложенного способа профилактики: наблюдается снижение заболеваемости и падежа поросят-отъемышей в 8,3 раза.

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к профилактике желудочно-кишечных болезней поросят-отъемышей. Поросятам-отъемышам двукратно парентерально вводят эшерихиозный анатоксин - биопрепарат, содержащий фильтрат инактивированной формалином смеси бульонных культур Е.coli серотипов 0141: К88ас; 0139: К88ас; 0138:К88ас. Введение осуществляют с 25-30-дневного возраста с интервалом в один месяц в дозах 1,0 и 1,5 мл. Эшерихиозный анатоксин получают путем выдерживания односуточных бульонных культур Е.coli серотипов 0141: К88ас; 0139: К88ас; 0138:К88ас в присутствии 0,4%-ного формалина при температуре 37-38^oС в течение до 25 суток, затем пропускают через фильтр Сальникова. Изобретение позволяет снизить заболеваемость и падеж поросят-отъемышей. 3 с.п.ф-лы.

1. Эшерихиозный анатоксин - биопрепарат, содержащий инактивированную формалином смесь бульонных культур, отличающийся тем, что является фильтратом культур Е.соli серотипов 0141:К88ас; 0139:К88ас; 0138:К88ас. 2. Способ получения эшерихиозного анатоксина, заключающийся в выдерживании биопрепарата в присутствии 0,4%-ного формалина при температуре 37-38^oС, отличающийся тем, что в качестве биопрепарата используют односуточные бульонные культуры Е.coli серотипов 0141:К88ас; 0139:К88ас; 0138:К88ас, культивируют их до 25 суток, пропускают через фильтр Сальникова, причем на второй день культивирования добавляют 0,6% глюкозы. 3. Способ активной профилактики отечной болезни поросят-отъемышей, включающий парентеральное двукратное введение биопрепарата с 25-30 дневного возраста, отличающийся тем, что в качестве биопрепарата используют эшерихиозный анатоксин по п.1, причем введение его осуществляют с интервалом в один месяц в дозах 1,0 мл и 1,5 мл.