ПРИМЕНЕНИЕ ЭПИНАСТИНА В КАЧЕСТВЕ БОЛЕУТОЛЯЮЩЕГО СРЕДСТВА Российский патент 2003 года по МПК A61K31/5517 A61P25/06 A61P29/00 

Изобретение касается новой области применения эпинастина для лечения и профилактики болей, в частности хронических и воспалительного характера, а также, и особенно, мигрени. Эпинастин (3-амино-9,13b-дигидро-1Н-дибенз-[с,f] -имидазо-[1,5-а] азепин гидрохлорид) описан Фюгнером и др. в журнале "Arzneimittelforschung" т. 38 (1988 г. ), стр.1446-1453. Это биологически активное вещество можно применять в форме его рацемата, или в форме чистых энантиомеров, или в виде смеси того и другого энантиомеров в различных количественных сочетаниях. В терапевтических целях эпинастин применяется в виде гидрохлорида; однако согласно изобретению не ограничиваются применением гидрохлорида, а возможно применение любой аддитивной соли приемлемой с фармакологической точки зрения кислоты, а также применение собственно свободных оснований.

По современному уровню развития медицины известно применение эпинастина и его аддитивных солей кислоты для лечения астмы. В Европейском патенте ЕР-В-O 035749 раскрывается еще одна возможность применения этого биологически активного вещества, а именно в качестве терапевтического средства при таких аллергических заболеваниях, как аллергический ринит, аллергический конъюнктивит и аллергический бронхит.

Часто симптомом этих заболеваний является головная боль. В большинстве случаев головная боль непродолжительна и хорошо поддается лечению с помощью слабых анальгетиков таких, как ацетилсалициловая кислота, парацетамол или ибупрофен. Конечно, такая головная боль обременительна, но она не сопряжена со значительными ухудшениями состояния здоровья. А вот такие хронические головные боли, как мигрень, могут осложнить жизнь человека настолько, что он будет вынужден обратиться к врачу за помощью. Часто головная боль в такой тяжелой форме не поддается адекватному лечению с помощью слабых анальгетиков.

С другой стороны, не существует общепринятой системы классификации головных болей. Согласно данному изобретению идет речь, в основном, о таких хронических головных болях, как мигрень и синдром Бинга - Хортона (гистоминовые головные боли). Сама по себе мигрень включает различные подвиды этой формы [см. статью J. Olesen и R.B. Lipton в журнале "Neuralagy" т.44 (1994 г.) стр.6-10, касающуюся классификации]. Хотя мигрень и головная боль вазомоторного характера представляют собой две разных формы головной боли, тем не менее некоторые ученые считают их звеньями одной цепи, на одном конце которой находится мигрень, а на другом - головные боли вазомоторного характера [см. статью K.L. Kumar и Т.О. Соопеу "Headaches" в журнале "Medical Clinics of North America" т.79, 2 (1955 г.) стр.261-286]. Поэтому вполне допустимо предположение, что многим пациентам с головной болью вазомоторного характера помогут средства от мигрени. Другие различные заболевания, сопровождающиеся хроническими болями, такие как невралгия, мышечные боли и боли при воспалительных процессах (как например, после солнечного ожога или при артрозе или после спортивных травм) имеют общий механизм с хронической болью [см. Dray A., Urban L. и Dickenson A. "Trends in Pharmacological Sciences" 1994,15, стр.190-197].

Современная терапия мигрени включает применение алкалоидов Secale (напр. , эрго-тамина) и суматриптана. Несмотря на то, что многим пациентам эти медикаменты помогают, все же они полезны далеко не для всех пациентов. Кроме того имеют место многочисленные побочные действия - такие, как оцепенение сознания и головокружение. Медикаментами, применяемыми в качестве профилактических средств против мигрени, являются метисергид, пизотифен, бетаблокаторы (например, пропанолол) и блокаторы кальциевых каналов (напр., флунаризин). Длительное применение этих медикаментов сопровождается побочными действиями, отрицательно сказывающимися на "качестве" жизни пациентов; при этом эти медикаменты в общем способны только понизить частоту приступов мигрени, но не исключить их совсем [см. статью Н.С. Diener в журнале "Eur. Neurol." т.34 (Supp 2) (1994 г.), стр.18 - 25].

Поэтому задача данного изобретения состоит в том, чтобы предложить такое биологически активное вещество, которое, с одной стороны, будет оказывать эффективное действие на мигрень, с другой стороны, будет свободно от сомнительных побочных действий. Другая задача настоящего изобретения состоит в том, чтобы предложить медикамент, который имел бы высокую степень безопасности для определенных категорий пациентов - детей и пациентов со слабо выраженной деятельностью печени и почек или заболеваниями сердечно-сосудистой системы.

Неожиданно было обнаружено, что биологически активное вещество эпинастин отвечает этим требованиям наилучшим образом, что подтверждается результатами следующих опытов.

На подопытных животных путем раздражения тройничного нервного узла (ганглий) головного мозга электрическим током можно вызвать воспалительную реакцию в наружной "твердой" оболочке мозга, обусловленную высвобождением из сенсорных нервных окончаний нейропептидов таких, как субстанции Р. Транссудацию плазмы можно определить с помощью красителя Эванс голубой (Evans Blau). Эта модель испытания на животных применяется, в основном, для обнаружения веществ, пригодных для лечения мигрени. Совершенно неожиданно эпинастин обнаружил в этой модели чрезвычайно хорошее действие.

Часто используемая модель испытаний на животных для изучения механизма воздействия на боли, обусловленные воспалительными процессами, впервые была описана Рандаллем и Селитто [L.O. Randall и J.J. Selitto "Arch. Int. Pharmacodyn" т. 111. (1957 г.), стр.409-419]. В лапе крысы индуцировали воспалительную реакцию внутрибрюшинной инъекцией дрожжевых клеток; затем замерялась обусловленная воспалением гипералгезия. И в этой модели эпинастин неожиданно оказался очень эффективным.

Современному уровню науки эпинастин известен как противогистаминное средство. Взаимодействие между лигандом (напр., биологически активным веществом) и рецептором определяется с помощью постоянной сродства (К_i). Чем ниже значение постоянной сродства, тем прочнее связь между биологически активным веществом и рецептором. Особое внимание уделяется связям, обнаруживающим параметр К_i в количестве ниже или того же порядка, что и предполагаемая концентрация биологически активного вещества в ткани-мишени (напр. плазмы). 5НТ₇ представляет собой особый тип рецептора, связывающего 5-гидрокситиптамин (по вопросу классификации см. "Trends in Pharmacological Sciences", 1994, "Receptor & Ion Channel Nomenclature Supplement"). Неожиданным образом обнаруживается хорошая связь эпинастина с рецептором 5НТ₇. Показатель К_i эпинастина и табл. 1.

Данное изобретение поясняется на следующих примерах. Из настоящего описания специалисту понятны возможные другие различные формы выполнения изобретения. Однако особо следует подчеркнуть, что здесь приводятся примеры и описание только для пояснения, и их не следует рассматривать как ограничение объема изобретения.

Примеры
1. Исследование связи эпинастина с рецептором 5HT₇
Связь 2 нМ ³H-ДНК с рецептором 5НТ₇ крысы, выделенным в СНО-клетках, замерялась в течение 60 мин. при температуре 37^oС в 50 нМ Tris-HC1 - буфере с рН= 7,4, содержащем кроме того 10 мМ хлористого магния и 0,5 мМ ЭДТК. За реакцией следовала быстрая вакуумная фильтрация через фильтр из стекловолокна, предварительно обработанный 0,1% полиэтилендиамином. Исследования связи проводились в отсутствие и в присутствии эпинастина, взятого в 6 до 8 концентрациях от 3 нМ до 10 мкМ, каждый раз по принципу двойного определения. Для каждой концентрации определялась проявлявшаяся на фильтре радиоактивность, которая сопоставлялась с контрольным показателем для определения взаимодействия вещества с клонированным рецептором 5НТ₇. Неспецифические связи определялись в присутствии 5-карбоксиамидотриптамина (5-СТ). IC₅₀ для вытеснения радиоактивных лигандов определялся методом графической экстраполяции, а показатель К_i был рассчитан по формуле Cheng и Prusoff [см. журнал "Biochem. Pharmacol", т. 22, (1973 г.), стр.3099-3108] после поправки на сдвиг в положении радиолигандов. Были проведены три эксперимента. В каждом из них эпинастин обнаружил неожиданно хорошую связь с рецептором 5НТ₇. Для эпинастина средний показатель К_i составил 33 нМ, для (+)-энантиомера - 28 нМ, а для (-)- энантиомера - 189 нМ. Индивидуальные показатели K_i для эпинастина и его энантиомеров, определенных в результате 3 испытаний, приведены в табл. 1 вместе с показателями К_i двух сопоставимых противогистаминных средств.

2. Исследование действия эпинастина на плазмаэкстравазацию в наружной "твердой" оболочке мозга в результате раздражения тройничного нервного узла (ганглий) головного мозга электрическим током
Самцам крыс Вистар весом от 175 до 190 г вводили обезболивающее нембутал в количестве 50 мг/кг внутрибрюшинно (i. p.). V-jugularis была расфасована по канюлям для внутривенной инъекции. Животные были помещены в стереотактическую рамку. Были просверлены симметричные отверстия размером 3,0 мм сбоку и 3,2 мм сзади темени, через которые были пропущены электроды на глубину 9,5 мм. За 10 минут до начала раздражения электрическим током правого тройничного нервного узла (5 мин; 2 мА, 5 Гц, 5 мс) были внутривенно введены тестируемые вещества (эпинастин или контрольный раствор). В качестве маркера, позволяющего обнаружить транссудацию протеинов плазмы, до начала раздражения электрическим током в течение 5 минут также внутривенно вводился краситель Эванс голубой Evans Blau (30 мг/кг). Через 15 мин после окончания электрической стимуляции животнsм было перфундировано 50 мл физиологического раствора поваренной соли через левый желудочек сердца для вымывания из внутренних сосудов красителя Evans Blau. Затем наружную твердую оболочку головного мозга удалили, промокнули досуха и взвесили. Из тканей Evans Blau выделяли с помощью 0,3 мл формамида при 50^oС 24 часа. Содержание красителя определяли с применением фотометрического метода при длине волн 620 нм, интерполировали с помощью стандартной кривой, а затем выражали в виде содержания красителя Evans Blau в нг на мг ткани.

Результаты обработки данных.

Транссудация была выражена в виде соотношения содержания Evans Blau на стороне, подвергавшейся стимулированию, к содержанию Evans Blau на стороне, не подвергавшейся стимуляции. Результаты были представлены в виде усредненного значения. Результаты представлены в табл. 2.

Из табл. 2 следует, что в модели испытания эпинастина на животных как средства от мигрени последний существенно тормозил транссудацию красителя Evans Blau, индуцированную стимуляцией тройничного нервного узла электрическим током.

3. Исследование действия эпинастина на индуцированную дрожжами гипералгезию в лапке крыс
Методика по Randall и Selitto была модифицирована применением анальгезиметра (Basile, Милан).

Группам из 10 крыс штамма Chbb: THOM (вес 110 - 140 г, 5 самцов, 5 самок) натощак перорально были введены 1% натрозол 250 НХ (1 мл/100 г веса), содержащий 0; 0,3; 1,0; 3,0 или 10 мг/кг эпинастина (рацемата). Через час животным через подошву в правую лапу ввели дрожжевую суспензию в объеме 0,1 мл. Через 3 часа после инъекции дрожжевой суспензии определили болевой порог, для чего на воспаленную лапу воздействовали давлением, увеличения его до выражения болевой реакции. Посредством регрессного анализа был определен ED50, болевого порога, замеренный при различных дозах эпинастина. Как показано на таблице 3 эпинастин поднимает порог болевой чувствительности. Доза эпинастина, поднимающая порог болевой чувствительности на 50%, составляет 1,1 мг/кг.

Эпинастин или его энантиомеры можно применять в качестве болеутоляющего средства в виде водного раствора для инъекций (напр., внутривенных, внутримышечных или подкожных применений), в форме таблеток, свечей, мазей, пластырей для трансдермального применения, в виде аэрозоли для ингаляции через легкие или спрея для введения через нос.

Содержание биологически активного вещества в таблетке или свече составляет от 5 до 200 мг, предпочтительно - 10 и 50 мг. При ингаляции единичная доза составляет от 0,05 до 20 мг, предпочтительно от 0,2 до 5 мг. При парентеральной инъекции единичная доза составляет от 0,1 до 5 мг, предпочтительно от 0,5 до 20 мг. Указанные дозы можно при необходимости принимать несколько раз в сутки. Особенно достойна внимания комбинация с другими терапевтическими средствами, например, с ацетилсилициловой кислотой, или парацетамолом, или нестероидальными противовоспалительными препаратами, такими как ибупрофен, мелоксикам, индометацин или напроксен; 5НТ_1D агонистами, такими как суматриптан, МК-462, наратрипта или 311С; СР-122, 288; UK 116,044; антагонистами рецептора допамин D₂ такими как, например, метоклопрамид; алакалоидами Скаля, такими как эрготамин, дигидроэрготамин или метерголин; клонидин; метизергид; дотарицин; лизурид; пизотифен; валпроат, аминотриптилин, бета-блокаторами (напр., пропранолол, метопролол) блокаторами канала кальция (напр., флунаризин или ломеризин) или антагонистами нейрокинина.

Ниже приведено несколько примеров фармацевтических препаратов с применением биологически активного вещества:
Таблетки:
эпинастин 20 мг
стеарат магния 1 мг
кукурузный крахмал 62 мг
лактоза 83 мг
поливинилпиролидон 1,6 мг
Раствор для инъекции
эпинастин 0,3 г
хлористый натрий 0,9 г
Aqua injectibillia до 100 мл
Раствор может быть стерилизован с применением стандартных способов.

Водный раствор для применения через нос или для ингаляции
эпинастин 0,3 г
хлористый натрий 0,9 г
бензалкониумхлорид 0,01 мг
Aqua purificata до 100 мл
Указанный выше раствор пригоден для применения в виде спрея через нос или для ингаляций в сочетании с прибором, позволяющим получить аэрозоль с частицами размером предпочтительно от 2 до 6 мкМ.

Капсулы для ингаляции
Эпинастином заполнены капсулы из твердого желатина в микронизированной форме (размер частиц, в основном, варьируется от 2 до 6 мкМ), при необходимости с добавлением микронизированных носителей, например лактозы. Для ингаляции пригодны обычные аппараты, применяемые для порошковой ингаляции. В каждую капсулу помещают примерно 0,2 - 20 мг эпинастина и от 0 до 40 мг лактозы.

Аэрозоль для ингаляции
эпинастин 1 часть
соевый лецитин 0,2 части
газообразующая добавка до 100 частей
Приготовленным составом предпочтительно заполняют аэрозольные емкости, оснащенные дозирующим клапаном, причем единичный ход клапана рассчитан так, чтобы выдаваемая доза составляла 0,5 мг. Для других дозировок в таком диапазоне целесообразно применять составы с более высоким или низким содержанием биологически активного вещества.

Мази
Состав (г/100 г мази):
эпинастин 2
дымящаяся соляная кислота 0,011
пиросульфит натрия 0,05
Смесь из равных частей цетилового и стеарилового спирта 20
Белый вазелин 5 г
Искусственное бергамотовое масло 0,075
Дистиллированная вода до 100
Компоненты перерабатываются в мазь обычным способом.

Изобретение относится к медицине. Предложено применение эпинастина в форме его рацемата, смеси энантиомеров или самих по себе энантимеров, каждый раз в виде свободного основания или аддитивной соли фармакологически приемлемой кислоты в качестве средства против болей. Средство поднимает порог болевой чувствительности. 6 з.п.ф-лы, 4 табл.

1. Применение эпинастина в форме его рацемата, смеси энантиомеров или самих по себе энантиомеров, каждый раз в виде свободного основания или аддитиивной соли фармакологически приемлемой кислоты в качестве средства против болей.2. Применение по п.1, в котором указанной болью является мигрень.3. Применение по п.1, в котором указанной болью является синдром Бинг-Хортона.4. Применение по п.1, в котором указанными болями являются головные боли вазомоторного характера.5. Применение по п.1, в котором указанными болями являются мышечные боли.6. Применение по п.1, в котором указанными болями являются боли при воспалительных процессах.7. Применение по п.1, в котором указанными болями являются невралгии.