ПРОИЗВОДНЫЕ БЕНЗОИЛГУАНИДИНА, СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ НА ИХ ОСНОВЕ Российский патент 2002 года по МПК C07D295/18 C07D295/125 C07D295/92 C07D403/06 C07D405/06 C07D409/06 A61K31/496 A61K31/497 A61P9/06 A61P9/10 

Данное изобретение относится к новым производным гуанидина, обладающим биологической активностью, более конкретно к производным бензоилгуанидина, способу их получения и фармацевтической композиции на их основе.

Известны производные бензоилгуанидина, обладающие биологической активностью, в частности обладающие ингибирующей активностью в отношении Na⁺/H⁺ обмена (см. заявку DE 4337611, кл. С 07 D 239/95, А 61 К 31/495, 11.05.1995 г. ).

Задачей изобретения является расширение арсенала производных бензоилгуанидина, обладающих высокой ингибирующей активностью в отношении Na⁺/H⁺ обмена.

Поставленная задача решается предлагаемыми производными бензоилгуанидина общей формулы (I)

где R¹ означает алкил с 1-8 атомами углерода,
А означает группу

В означает группу (-CH₂-)_a или (-СО-)_b, где
а означает целое число от 0 до 8, предпочтительно 1, 2, 3 или 4,
b означает 0, 1 или 2, предпочтительно 1,
R₂ означает незамещенный или замещенный алкил с 1-8 атомами углерода, незамещенный фенил, NR₃R₄, где R₃ и R₄ каждый означает алкил с 1-8 атомами углерода, или предпочтительно пятичленный гетероцикл

в котором U, V, W, Х и Y означают СН, NH, О или S.

Предпочитаются производные бензоилгуанидина общей формулы (I), у которых
R¹ означает алкил с 1 - 4 атомами углерода,
А означает группу

В означает группу (-СН₂-)_а или (-СО-)_b, где
а означает целое число от 0 до 4,
b означает 0 или целое число 1,
R₂ означает незамещенный или замещенный алкил с 1-4 атомами углерода, незамещенный фенил, NR₃R₄, где R₃ и R₄ каждый означает алкил с 1-4 атомами углерода, или предпочтительно пятичленный гетероцикл

в котором U, V, W, Х и Y означают СН, NH, О или S.

В частности предпочитаются производные бензоилгуанидина общей формулы (I),
у которых
R¹ означает метил,
А означает группу

В означает одну группу (-СН₂-)_а или (-СО-)_b, где
а означает целое число от 0 до 4,
b означает 0 или целое число 1,
R₂ означает пятичленный гетероцикл

в котором U, V, W, Х и Y означают СН, NH, О или S.

Производные бензоилгуанидина общей формулы (I) можно получать за счет того, что производное бензойной кислоты общей формулы (II)

где R¹ имеет вышеуказанное значение, а
Р означает уходящую нуклеофугную группу,
подвергают взаимодействию с соединением общей формулы (III),
B₂BAQ, (III)
где R₂, А и В имеют вышеуказанное значение, а
Q означает уходящую, замещаемую электрофилом группу, и образующееся производное бензойной кислоты общей формулы (IV)

суспендируют в подходящем, преимущественно безводном, растворителе, предпочтительно диметилформамиде, смешивают с N-метилморфолином и с карбонилдиимидазолом и затем смешивают со смесью раствора или суспензии основания, предпочтительно гидрида натрия, в подходящем безводном растворителе, предпочтительно диметилформамиде, с солью гуанидина, предпочтительно гуанидингидрохлоридом.

Данный способ является дополнительным объектом изобретения.

Активированные производные кислоты можно получать само по себе известным способом прямо из производных бензойной кислоты общей формулы (IV):

где R₁, R₂, А и В имеют вышеуказанное значение.

Ряд подходящих методов для получения активированных производных карбоновых кислот на основе производных бензойной кислоты общей формулы (IV) приведен в библиографических данных в работе J. March, Advanced Organic Chemistry, 3-е издание (John Wiley and Sons, 1985), стр. 350.

Взаимодействие активированного производного карбоновой кислоты с солью гуанидина происходит само по себе известным образом в протонном или апротонном полярном, но инертном органическом растворителе.

Часть производных бензойной кислоты формулы (IV) известна и описана в литературе. Неизвестные до сих пор соединения формулы (IV) можно получить известными в литературе методами.

Так, соответствующие бензойные кислоты получают, например, взаимодействием соответствующим образом замещенных пиперазинов с 4-хлор-3-метил-сульфонилбензойной кислотой, при этом замещается нуклеофильная группа в положении 4. Для этого 10 мМ 4-хлор-3-метилсульфонилбензойной кислоты и 50 мМ пиперазина нагревают 4 ч при 120^oС в атмосфере инертного газа. Кристаллизацией из метанола выделяют соответствующим образом замещенные бензойные кислоты.

Суспендируют 10 мМ соответствующего производного бензойной кислоты в 40 мл безводного диметилформамида и смешивают с 10 мМ N-метилморфолина. К полученному раствору добавляют 13 мМ карбонилдиимидазола и перемешивают 2 ч при комнатной температуре. Суспендируют 14 мМ гидрида натрия в 30 мл безводного диметилформамида в атмосфере инертного газа и смешивают с 14 мМ гуанидингидрохлорида. Перемешивают 1 ч при 80^oС и после охлаждения отфильтровывают от нерастворимых компонентов. Прозрачный гуанидиновый раствор прибавляют к вышеописанному раствору и перемешивают 12 ч при комнатной температуре. После отгонки диметилформамида под пониженным давлением остаток очищают хроматографией на силикагеле с подходящей системой растворителей. Обработка эфирным раствором соляной кислоты или другими фармакологически переносимыми кислотами превращает бензоилгуанидины в соответствующие соли.

По вышеприведенным данным получены следующие соединения:
Пример 1

Т.пл.>250^oC
Пример 2

Т.пл220-222^oC (разл.)
Пример 3

Т.пл.175-177^oC (разл.)
Пример 4

Т.пл.>250^oC
Пример 5

Т.пл.207-210^oC(разл.)
Пример 6

Т.пл.170-173^oC
Пример 7

Т.пл.170^oC (разл.)
Пример 8

Т.пл.243^oC (разл.)
Дальнейшим объектом изобретения является фармацевтическая композиция, обладающая ингибирующей активностью в отношении Na⁺/H⁺ обмена, которая содержит производное бензоилгуанидина вышеприведенной формулы (I) или его соль, являющуюся продуктом присоединения кислоты, и вспомогательное вещество и носитель.

Соединения согласно изобретению активны против аритмий, которые возникают при гипоксиях. Кроме того, их можно применять при заболеваниях, которые связаны с ишемиями (примеры: сердечная, мозговая, желудочно-кишечная, легочная, почечная ишемия, ишемия печени, ишемия скелетной мускулатуры). Соответствующими заболеваниями являются, например, коронарная болезнь сердца, стенокардия, эмболия в системе легочного кровообращения, острая или хроническая почечная недостаточность, хроническая почечная недостаточность, инфаркт головного мозга, реперфузионные поражения при восстановленном кровоснабжении участков головного мозга после ликвидации закупорки сосудов и острые и хронические нарушения кровоснабжения головного мозга. Упомянутые соединения могут также использоваться в комбинации с тромболитическими средствами, такими, как активатор тканевого плазминогена, стрептокиназа и урокиназа.

При реперфузии ишемического сердца (например, после приступа стенокардии или инфаркта сердца) в пораженной области могут появиться необратимые поражения кардиомиоцитов. В таком случае соединения согласно изобретению действуют и как кардиопротекторы.

При применении в области ишемии следует также учитывать предотвращение повреждения трансплантатов (например, в качестве защиты трансплантата до, во время и после имплантации, а также при хранении трансплантатов), которое может появиться в связи с трансплантациями. Кроме того, соединения являются лекарственными средствами с защитным действием при проведении ангиопластических оперативных вмешательств на сердце и на периферических сосудах.

При эссенциальной гипертонии и диабетической нефропатии усиливается Na⁺/H⁺-обмен в клетках. Поэтому указанные соединения пригодны в качестве ингибиторов этого обмена для профилактической терапии названных заболеваний.

Далее, соединения согласно изобретению отличаются высокой ингибирующей активностью в отношении пролиферации клеток. Поэтому соединения представляют интерес в качестве лекарственных средств при заболеваниях, при которых пролиферация клеток играет первичную или вторичную роль, и могут применяться в качестве средств против онкологических заболеваний, атеросклероза, гипертрофий и гиперплазии органов, фиброзных заболеваний и поздних осложнений, являющихся последствием диабета.

Фармакологические данные:
Ингибирование Na⁺/H⁺-обмена в раковых клетках кишечника человека (НТ-29):
Клетки НТ-29 инкубируют при 37^oС, 5% углекислого газа в среде для роста. Через 3-5 дней среду для роста удаляют, клетки промывают и добавляют к ним 7.5 мкМ BCECF-AM (чувствительный к рН флуоресцентный краситель) при 37^oС в отсутствие углекислого газа. Через 30 мин клетки промывают и подкисляют следующей смесью: 70 мМ холинхлорида, 20 мМ хлористого аммония, 1 мМ хлористого магния, 1.8 мМ хлористого кальция, 5 мМ глюкозы и 15 мМ N-2- гидроксиэтилпиперазин -N'-2-этансульфоновой кислоты, рН 7.5.

После 6 мин инкубации при 37^oС в отсутствие углекислого газа клетки промывают и в течение 5 мин инкубируют со средой для роста: 120 мМ холинхлорида, 5 мМ хлористого калия, 1 мМ хлористого магния, 1,8 мМ хлористого кальция, 5 мМ глюкозы и 15 мМ 4-морфолинпропансульфокислоты, рН 7.0.

Среду для роста удаляют и добавляют контрольную среду, содержащую или не содержащую испытуемое соединение: 120 мМ хлористого натрия, 5 мМ хлористого калия, 1 мМ хлористого магния, 1.8 мМ хлористого кальция, 5 мМ глюкозы и 15 мМ 4-морфолинпропансульфокислоты, рН 7.0.

Клетки инкубируют 4 мин при 37^oС в отсутствие углекислого газа и измеряют флуориметрически (цитофтор 2350). Флуоресценцию красителя BCECF измеряют при длинах волн возбуждения 485 нм (чувствительны к рН) и 440 нм (нечувствительны к рН) и при длине волны излучения 530 нм. Рассчитывают рН цитоплазмы исходя из соотношения флуоресценций при 485 и 440 нм. Коэффициент флуоресценции калибруют нигерицином путем измерения сигнала флуоресценции после уравновешивания внешнего и внутреннего рН.

Пример - ИК₅₀/10^-6 моль л^-1
1 - 0.500
3 - 0.029
4 - 0.031
Биологически активные вещества согласно общей формуле (I) могут применяться в виде водного раствора для инъекций (например, для внутривенного, внутримышечного или подкожного применения), в виде таблеток, свечей, мазей, пластырей для трансдермального применения, в виде аэрозоля для ингаляций через легкие или в виде спрея для носа.

Содержание биологически активного вещества в одной таблетке или свече находится между 5 и 200 мг, предпочтительно между 10 и 50 мг. При ингаляции разовая доза находится между 0,05 и 20 мг, предпочтительно между 0,2 и 5 мг. При парентеральной инъекции разовая доза находится между 0,1 и 50 мг, предпочтительно между 0,5 и 20 мг. В случае необходимости, указанные дозы можно назначать несколько раз в день.

Ниже приведены примеры фармацевтических препаратов с биологически активным веществом:
Таблетки
Биологически активное вещество согласно общей формуле (I) - 20,0 мг
Стеарат магния - 1,0 мг
Кукурузный крахмал - 62,0 мг
Лактоза - 83,0 мг
Поливинилпирролидон - 1,6 мг
Раствор для инъекции
Биологически активное вещество согласно общей формуле (I) - 0,3 г
Хлористый натрий - 0,9 г
Вода для инъекций - До 100 мл
Раствор можно стерилизовать с использованием стандартных методов.

Водный раствор для применения через нос или для ингаляции
Биологически активное вещество согласно общей формуле (I) - 0,3 г
Хлористый натрий - 0,9 г
Бензальконий хлорид - 0,01 мг
Вода очищенная - До 100 мл
Приведенный выше раствор пригоден для применения через нос в виде спрея или в комбинации с аппаратом, который производит аэрозоль с величиной частиц предпочтительно между 2 и 6 мкм, для применения через легкие.

Капсулы для ингаляции
Веществом общей формулы (I) в микронизированной форме (величина частиц, в основном, между 2 и 6 мкм), при необходимости, с добавкой микронизированного носителя, например, лактозы, наполняют твердые желатиновые капсулы. Для ингаляции используют обычные приборы для порошковой ингаляции. В каждую капсулу вносят, например, между 0,2 и 20 мг биологически активного вещества общей формулы (I) и от 0 до 40 мг лактозы.

Аэрозоль для ингаляции
Биологически активное вещество согласно общей формуле (I) - 1 часть
Лецитин сои - 0,2 части
Смесь рабочих газов - До 100 частей
Композицией предпочтительно наполняют емкость для аэрозолей с клапаном-дозатором, один ход которого так рассчитан, что выдается доза в 0,5 мг. Для других дозировок в указанном диапазоне целесообразно применять композиции с более высоким или более низким содержанием биологически активного вещества.

Мазь (состав г/100 г мази)
Биологически активное вещество согласно общей формуле (I) - 2 г
Дымящая соляная кислота - 0,011 г
Смесь из равных частей цетилового и стеарилового спиртов - 20 г
Белый вазелин - 5 г
Искусственное бергамотное масло - 0,075 г
Дистиллированная вода - До 100 гн

Изобретение относится к новым производным бензоилгуанидина общей формулы (I), где R₁ означает алкил с 1-8 атомами углерода, А означает группу, представленную в формуле изобретения, В означает (-СН₂-)_a или (-СO-)_b, а означает целое число 0 - 8, предпочтительно 1, 2, 3 или 4, b означает 0,1 или 2, предпочтительно 1, R₂ означает незамещенный или замещенный алкил с 1-8 атомами углерода, незамещенный фенил, NR₃R₄ или предпочтительно пятичленный гетероцикл, представленный в формуле изобретения, в котором U, V, W, Х и Z могут означать СН, NH, О или S, R₃ и R₄ означают алкил с 1-8 атомами углерода. Изобретение расширяет арсенал производных бензоилгуанидина, обладающих высокой ингибирующей активностью в отношении Na⁺/H⁺ обмена. Также раскрыты способ получения этих соединений и фармацевтическая композиция на основе новых производных бензоилгуанидина. 3 с. и 2 з.п. ф-лы.

1. Производное бензоилгуанидина общей формулы (I)

где R¹ означает алкил с 1 - 8 атомами углерода;
А означает группу

В означает группу (-СН₂-)_a, или (-СО-)_b, где а означает целое число 0 - 8, предпочтительно 1, 2, 3 или 4, b означает 0,1 или 2, предпочтительно 1,
R₂ означает незамещенный или замещенный алкил с 1 - 8 атомами углерода, незамещенный фенил, NR₃R₄, где R₃ и R₄ каждый означает алкил 1 - 8 атомами углерода, или предпочтительно пятичленный гетероцикл

в котором U, V, W, Х и Y означают СН, NH, О или S. 2. Производные бензоилгуанидина общей формулы (I) по п. 1, в которой R¹ означает алкил с 1 - 4 атомами углерода, А означает группу

В означает группу (-СН₂-)_a или (-СО-)_b, где а означает целое число 0 - 4, b означает 0 или целое число 1, R₂ означает незамещенный или замещенный алкил с 1 - 4 атомами углерода, незамещенный фенил, NR₃R₄, где R₃ и R₄ каждый означает алкил с 1 - 4 атомами углерода, или пятичленный гетероцикл

в котором U, V, W, Х и Y означают СН, NH, О или S. 3. Производные бензоилгуанидина общей формулы (I) по п. 1, в которой R¹ означает метил, А означает группу

В означает одну группу (-СН₂-)_а, или (-СО-)_b, где а означает целое число 0 - 4, b означает 0 или целое число 1, R₂ означает пятичленный гетероцикл

в котором U, V, W, Х и Y означают СН, NH, О или S. 4. Способ получения производных бензоилгуанидина общей формулы (I)

где R¹ означает алкил с 1 - 8 атомами углерода;
А означает группу

В означает группу (-СН₂-)_а, или (-СО-)_b, где а означает целое число 0 - 8, предпочтительно 1, 2, 3 или 4, b означает 0,1 или 2, предпочтительно 1;
R₂ означает незамещенный или замещенный алкил с 1 - 8 атомами углерода, незамещенный фенил, NR₃R₄, где R₃ и R₄ каждый означает алкил 1 - 8 атомами углерода, или предпочтительно пятичленный гетероцикл

в котором U, V, W, X и Y означают СН, NH, О или S,
отличающееся тем, что производное бензойной кислоты общей формулы (II)

где R¹ имеет вышеуказанное значение;
Р означает уходящую нуклеофугную группу,
подвергают взаимодействию с соединением общей формулы (III)
R₂ВАQ, (III)
где R₂, А и В имеют вышеуказанное значение;
Q означает уходящую, замещаемую электрофилом, группу,
и образующееся производное бензойной кислоты общей формулы (IV)

суспендируют в подходящем, преимущественно безводном, растворителе, предпочтительно диметилформамиде, смешивают с N-метилморфолином и с карбонилдиимидазолом и затем смешивают со смесью раствора или суспензии основания, предпочтительно гидрида натрия, в подходящем безводном растворителе, предпочтительно диметилформамиде, с солью гуанидина, предпочтительно гуанидингидрохлоридом. 5. Фармацевтическая композиция, обладающая ингибирующей активностью в отношении Na⁺/H⁺ обмена, которая содержит соединение по одному из пп. 1-3 или его соль, являющуюся продуктом присоединения кислоты и вспомогательное вещество и носитель.