СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АМИНОКИСЛОТ, ШТАММ ESCHERICHIA COLI - ПРОДУЦЕНТ L-АМИНОКИСЛОТЫ (ВАРИАНТЫ) Российский патент 2004 года по МПК C12N1/21 C12P13/22 C12N1/21 C12R1/19 

Текст описания в факсимильном виде (см. графическую часть)5

Изобретение относится к биотехнологии. L-аминокислоты, такие как L-фенилаланин или L-триптофан, получают культивированием бактерии Escherichia coli с увеличенной способностью к продукции L-аминокислоты. Затем указанные аминокислоты выделяют из культуральной жидкости. Штаммы бактерии Escherichia coli AY 12739 (pYDDG2) и SU 164 P_L-yddG(pGH5) обладают увеличенной способностью к продукции L-фенилаланина и L-триптофана соответственно. Изобретение позволяет получать L-аминокислоты с высокой степенью эффективности. 3 с. и 4 з.п. ф-лы, 1 ил., 4 табл.

1. Способ получения L-фенилаланина или L-триптофана методом ферментации, включающий стадии выращивания бактерии Escherichia coli - продуцента L-аминокислоты в питательной среде и выделения L-фенилаланина или L-триптофана из культуральной жидкости, отличающийся тем, что в качестве бактерии-продуцента используют бактерию Escherichia coli, способность к продукции L-аминокислоты которой увеличена за счет увеличения активности белка, описанного в пункте (А) или (В): (A) белок, который представлен аминокислотной последовательностью, приведенной в списке последовательностей под номером 2; (B) белок, который представлен аминокислотной последовательностью, включающей делеции, замены, вставки или добавление одной или нескольких аминокислот в аминокислотную последовательность, приведенную в списке последовательностей под номером 2, и который обладает активностью, придающей бактерии устойчивость к L-фенилаланину и/или аналогам аминокислот, таким как, п-фторфенилаланин или 5-фтор-DL-триптофан.2. Способ по п.1, отличающийся тем, что активность белка повышена путем трансформации бактерии с помощью ДНК, кодирующей белок, описанный в пункте (А) или (В), или путем изменения регуляции экспрессии последовательности указанной ДНК в хромосоме упомянутой бактерии.3. Способ по п.2, отличающийся тем, что трансформация осуществляется с использованием многокопийного вектора.4. Способ по п.1, отличающийся тем, что у упомянутой бактерии дополнительно повышена экспрессия генов биосинтеза L-фенилаланина.5. Способ по п.1, отличающийся тем, что у упомянутой бактерии дополнительно повышена экспрессия генов биосинтеза L-триптофана.6. Штамм Escherichia coli AJ 12739 (pYDDG2), трансформированный плазмидой, содержащей ген yddG - продуцент L-фенилаланина.7. Штамм Escherichia coli SV164-Р_L-уddG (pGH5), обладающий повышенной экспрессией гена yddG, расположенного в хромосоме, - продуцент L-триптофана.