СПОСОБ ОЦЕНКИ СОДЕРЖАНИЯ ЛЕЙКОЦИТОВ, ЭРИТРОЦИТОВ И ТРОМБОЦИТОВ В КРОВИ С УЧЕТОМ ГЕМОКОНЦЕНТРАЦИИ Российский патент 2004 года по МПК G01N33/49 

Изобретение относится к медицине, к лабораторным методам исследования крови.

Аналогом является унифицированный метод подсчета числа лейкоцитов (эритроцитов, тромбоцитов) под микроскопом в определенном количестве квадратов счетной сетки и последующим пересчетом на 1 л крови (по системе СИ), исходя из объема квадратов и предшествующего разведения крови перед исследованием в счетной камере (Лабораторные методы исследования в клинике /Меньшиков В.В., Делекторская Л.Н., Золотницкая Р.П. и др. /Под ред. В.В.Меньшикова. - М.: Медицина, 1987).

Однако существующая унифицированная методика не учитывает исходного разведения (или сгущения) крови в кровеносных сосудах. Гемо-концентрационные сдвиги часто встречаются при неотложных состояниях у больных с различной патологией при снижении объема циркулирующей крови, связанного с потерей жидкости (но не крови), а также при увеличении объема циркулирующей крови при массивных вливаниях. Недоучет этих сдвигов может привести к грубым (до 25,5%) искажениям полученных результатов (Ю.Н.Сидельников, А.Ю.Мартыненко. Гематологические изменения при геморрагической лихорадке с почечным синдромом и их прогностическое значение. - Гематология и трансфузиология. - 2000. - Т.45, №1. - С.15-19).

Наиболее близким аналогом прототипом является метод стандартизации количества лейкоцитов в крови с учетом гематокрита, характеризующего гемоконцентрацию (Сидельников Ю.Н. Метод оценки содержания лейкоцитов в крови. Изобретения стран мира. - 1997. - №27. G 01 N 33/49 - Патент 2091795). Однако предложенный метод имеет ряд недостатков, обусловленных тем, что величина гематокрита во многом зависит от содержания форменных элементов крови (в основном эритроцитов), которое изменяется в широких пределах и в норме, и при патологии. Даже у здоровых людей значение гематокрита зависит от пола и возраста и колеблется в широких пределах. Так, нормальное количество эритроцитов для взрослых мужчин составляет (х10¹²/л) от 4,0 до 5,5, а для женщин - от 3,7 до 4,7, существуют также возрастные нормы (Лабораторные методы исследования в клинике /Меньшиков В.В., Делекторская Л.Н., Золотницкая Р.П. и др. /Под ред. В.В.Меньшикова. - М.: Медицина, 1987). Развитие внутрисосудистого гемолиза и анемии различного генеза могут привести к существенным искажениям стандартизуемого количества лейкоцитов.

Задачей изобретения является повышение достоверности лабораторного определения количества форменных элементов крови (лейкоцитов, эритроцитов, тромбоцитов) при состояниях, сопровождающихся внутрисосудистым сгущением или разведением крови.

Наиболее достоверным методом определения гемоконцентрационных сдвигов (и сгущения, и разведения) является изучение удельного веса плазмы крови - сравнение плотности плазмы с плотностью воды (относительная плотность плазмы). Высокая относительная плотность связана с потерями воды как почечного (полиурия), так и внепочечного происхождения (повторные рвоты, поносы, длительная лихорадка, снижение водопотребления). В отличие от гематокрита, относительная плотность плазмы является значительно более жесткой константой крови и не зависит от возраста и пола.

Способ осуществляется следующим образом: определяют содержание форменных элементов крови (лейкоцитов, эритроцитов, тромбоцитов) унифицированным методом, состоящим в подсчете количества клеток крови в счетной сетке с последующим пересчетом на 1 л крови, дополнительно определяют относительную плотность плазмы, а затем рассчитывают количество форменных элементов (лейкоцитов, эритроцитов, тромбоцитов) по формулам:

где Л_станд - стандартизированное количество лейкоцитов, Л_отн - количество лейкоцитов, полученное унифицированным методом, ρ - реальное значение относительной плотности плазмы крови, ρ_норм - среднее значение относительной плотности плазмы взрослого человека (1,025);

где Э_станд - стандартизированное количество эритроцитов, Э_отн - количество эритроцитов, полученное унифицированным методом, ρ - реальное значение относительной плотности плазмы крови, ρ_норм - среднее значение относительной плотности плазмы взрослого человека (1,025);

где Т_станд - стандартизированное количество тромбоцитов, Т_отн - количество тромбоцитов, полученное унифицированным методом, ρ - реальное значение относительной плотности плазмы крови, ρ_норм - среднее значение относительной плотности плазмы взрослого человека (1,025).

Способ позволяет получить достоверные результаты при любых изменениях гемоконцентрации (как при сгущении, так и при разведении крови) в организме человека и не зависит от колебания количества самих форменных элементов, возраста, пола.

Пример. Больной Б., история болезни №2224, 24 лет, сотрудник ВОХР, поступил в клинику инфекционных болезней ДВГМУ 24.11.2001 года с жалобами на нарушение зрения, понос, головную боль, озноб. В анамнезе имелись указания на тошноту, повторную рвоту, боли в пояснице.

При объективном осмотре выявлены гиперемия и одутловатость лица, инъекция сосудов склер, энантема на твердом небе, геморрагическая сыпь на боковых поверхностях туловища, боли в животе при пальпации. Симптом поколачивания по поясничной области положительный с двух сторон. Пульс был 80 уд/мин, артериальное давление - 110/70 мм рт.ст. В общем анализе крови лейкоцитов было 12,1×10⁹/л, тромбоцитов - 232×10⁹/л, плазматических клеток - 0,36×10⁹/л, относительная плотность плазмы была 1,035. В моче белка было 1,3 г/л, единичные эритроциты в поле зрения. Установлен диагноз: геморрагическая лихорадка с почечным синдромом.

При формальном анализе результатов лабораторного исследования складывалось впечатление о лейкоцитозе, однако высокая относительная плотность плазмы указывает на другую причину увеличения количества лейкоцитов - сгущение крови. При стандартизации содержания лейкоцитов с учетом относительной плотности плазмы получаем 8,6×10⁹/л, что соответствует норме (ошибка при определении 28,9%).

При формальном анализе гемограммы количество тромбоцитов не выходит за пределы возрастной нормы, в то время как стандартизация показателя (165,7×10⁹/л) однозначно указывает на уже развившуюся тромбоцитопению, свидетельствующую о диссеминированном внутрисосудистом свертывании крови, характерном для геморрагической лихорадки и требующем незамедлительного проведения корригирующей терапии.

Изобретение относится к области медицины, в частности к лабораторным методам исследования. Сущность изобретения состоит в подсчете форменных элементов крови унифицированным способом с учетом относительной плотности плазмы крови больного. Техническим результатом является повышение достоверности лабораторного определения количества форменных элементов крови при состояниях, сопровождающихся внутрисосудистым сгущением или разведением крови.

Способ оценки содержания лейкоцитов, эритроцитов, тромбоцитов в крови, состоящий в подсчете количества форменных элементов крови (лейкоцитов, эритроцитов, тромбоцитов) в счетной сетке с последующим пересчетом на 1 л крови, отличающийся тем, что дополнительно определяют относительную плотность плазмы, а содержание лейкоцитов, эритроцитов и тромбоцитов оценивают по формулам

где Л_станд - стандартизированное количество лейкоцитов;

Л_отн - количество лейкоцитов, полученное унифицированным методом;

ρ - реальное значение относительной плотности плазмы крови;

ρ_норм - среднее значение относительной плотности плазмы взрослого человека (1,025);

где Э_станд - стандартизированное количество эритроцитов;

Э_отн - количество эритроцитов, полученное унифицированным методом;

ρ - реальное значение относительной плотности плазмы крови;

ρ_норм - среднее значение относительной плотности плазмы взрослого человека (1,025);

где Т_станд - стандартизированное количество тромбоцитов;

Т_отн - количество тромбоцитов, полученное унифицированным методом;

ρ - реальное значение относительной плотности плазмы крови;

ρ_норм - среднее значение относительной плотности плазмы взрослого человека (1,025).