ПАРОДОНТАЛЬНАЯ ПОВЯЗКА Российский патент 2004 года по МПК A61K6/00 A61K35/74 A61K38/39 

Изобретение относится к биотехнологии и медицине, в частности к стоматологии, и может использоваться при лечении пародонтальных тканей и слизистых оболочек.

Известно, что воспалительные процессы в тканях пародонта обусловлены развитием патогенной микрофлоры, среди которой основное значение имеют такие виды микроорганизмов, как Bacteroides forsithus, Prevotella intermedia, Porphyromonas gingivalis, Actinobacillus actinomycetemcommitans, Treponema denticola, Wolinella recta, Peptostreptococcus micros, Streptococcus intermedius, Actinomyces naeslundii, Actinomyces israelii, которые объединены в группу так называемой пародонтопатогенной микрофлоры.

Развитие патогенной микрофлоры обусловлено плохой гигиеной ротовой полости, нарушением окклюзионных соотношений зубных рядов, неадекватным протезированием, снижением иммунологических показателей и другими факторами.

Устранение неблагоприятных факторов в ротовой полости не всегда представляется возможным, в связи с чем у больных продолжается микробная колонизация тканей пародонта и воспалительный процесс прогрессирует. Поэтому в практической стоматологии широкое распространение получило применение бактерицидных препаратов (Барер Г.М., Царев В.Н., Янушевич O.O., Соловьева О.В. Эффективность применения геля “Коллост” в комбинации с антибактериальными препаратами для лечения пародонтита. Пародонтология. - 2002. - №3 (24). - С.62-64; Дедеян В.Р. Лечение воспалительных заболеваний пародонта с помощью биополимерных лекарственных форм пролонгированного действия: дис. канд. мед. наук. - М., 1997. - 145 с.; Дмитриева Л.А., Романов А.Е., Царев В.Н. Клинические и микробиологические аспекты применения реставрационных материалов и антисептиков в комплексном лечении заболеваний пародонта. М., МЕДпресс-информ. - 2002. - 94 с.; Ушаков Р.В., Царев В.Н., Чувилкин В.И. Современные принципы применения антибактериальных препаратов для лечения воспалительных заболеваний челюстно-лицевой области // Стоматология для всех - 1999.- №4 - с.31-37; Чухаджян Г.А., Чухаджян А.Г. Средство для лечения заболеваний полости рта”, Патент РФ №2075965, Бюл. Изобр., 1997.- №9).

Препараты используются в виде полосканий, аппликаций на пленках, в форме мазей и др. (Царев В.Н., Ушаков Р.В., Плахтий Л.Я., Чухаджан Г.А. Применение адгезивных пленок “Диплен-Дента” в комплексном лечении пародонтита. - М., УМО МЗ РФ. - 2002. - 89 с.; Ломакина Н.А. дис. д.м.н., М.2001; Плахтий Л.Я. дис. д.м.н., М. 2003). Основным недостатком этих препаратов является то, что они подавляют как патогенную, так и стабилизирующую микрофлору. В результате клиническая эффективность лечения воспалительного процесса непродолжительна, так как после окончания действия бактерицидного вещества снижается колонизационная резистентность, развивается патогенная микрофлора и возобновляется воспалительный процесс.

Известно применение для местного лечения заболеваний пародонта и слизистых фитосредства “Гингитек”, содержащего комплекс биологически активных веществ из шалфея и тысячелистника, настойки ромашки и календулы, экстракт шиповника, сангвиритрин и воду на биополимерной основе, при этом в качестве биополимерной основы используют 2%-ный уксусно-кислый раствор коллагена и альгинат натрия (Патент РФ №2190995, МПК 7 А 61 К 6/02, 7/26, 35/78. Средство “Гингитек” для местного лечения заболеваний пародонта и слизистых. Истратов Л.П. Московск. гос. мед. акад. им. И.М.Сеченова. Опубл. 11.01.2001 г.). Аппликации препарата проводят на десневой край со стороны преддверия полости рта утром и вечером после чистки зубов и оставляют до полного рассасывания. Курс лечения 7-10 ежедневных процедур. Недостатком данного средства является сравнительно небольшой период ремиссии после применения препарата - 5 месяцев (Т.Г. Симакова. Клинико-патогенетическое обоснование применения гирудотерапии и фитопрепарата “Гингитек” в комплексном лечении пародонтита: Автореф. дисс... к.м.н. (Московск. гос. медико-стомат. ун-т. - М., 2001, с.19-22). Фитопрепарат “Гингитек” выбран в качестве прототипа.

Задачей настоящего изобретения является увеличение сроков ремиссии при лечении генерализованного пародонтита, что обеспечивается сохранением стабилизирующей микрофлоры полости рта за счет применения повязки на основе коллагена и биологически активного вещества - клеток культуры Lactobacillus casei 37. Лечебное действие лактобацилл обусловлено действием продуктов их жизнедеятельности. Поставленная задача решается за счет того, что в раствор коллагена в качестве биологически активного вещества вводят суспензию живых клеток Lactobacillus casei 37 при следующем соотношении компонентов: Коллаген уксусно-кислый 2%-ный от 45 до 60 г. Суспензия клеток Lactobacillus casei 37·10⁸ КОЕ/мл от 15 до 30 г. Вода очищенная - до 100 г. Средство представляет собой пористые пластины желтого цвета в виде губки, толщиной 5-8 мм, хорошо приклеивающиеся к влажной слизистой оболочке.

Предлагается средство - пародонтальная повязка - в виде пористой пластины с живыми клетками Lactobacillus casei, высвобождающимися при медленной резорбции коллагена и воздействующими на микрофлору пародонта и продуцирующими комплекс биологически активных веществ, подавляющих патогенную микрофлору и стимулирующих процессы регенерации тканей. Сухая пародонтальная повязка в форме пористой пластины хорошо прилипает к влажным тканям и слизистым оболочкам, что удобно в употреблении как в клинике, так и амбулаторно.

Дополнительно в процессе изготовления повязки в ее состав включают до 10% от массы коллагена антиоксидантов, или противовоспалительных, или стимуляторов ранозаживления веществ. Они могут быть как в общем составе, так и виде отдельного слоя повязки (2-слойные повязки).

Доза лечебных веществ (Lactobacillus casei 37 и коллаген), а также соотношение лечебных инградиентов и основы установлены экспериментально. На основе результатов, полученных при проведении клинических и микробиологических исследований, доказано, что предлагаемая доза лекарственного вещества обеспечивает высокий противовоспалительный и противомикробный эффекты, а стабилизирующая микрофлора сохраняется.

Пародонтальную повязку по изобретению приготавливают следующим образом.

Пример 1.

1. В реактор-смеситель загружают 1,2 г коллагена, растворенного в 60 мл 2% уксусной кислоты, и при перемешивании добавляют 15 г суспензии клеток Lactobacillus casei, содержание клеток 10⁸ КОЕ/мл, и добавляют очищенной воды (25 мл) до 100 мл, тщательно перемешивают до получения однородной смеси.

2. Смесь разливают по кюветам с толщиной слоя 8-10 мм и переносят в камеру сублимационной сушки ТГ-15 или другой.

3. Замораживание - сублимационная сушка. Продукт замораживают до температуры -20°С и вакуумируют до вакуума 0,1 мм рт. ст. Сублимация растворителя осуществляется при температуре конденсатора -50-70°С. На стадии досушки температура повышается до 37°С. Общая продолжительность 22-26 час.

4. Сухие листы материала выдерживают при 20-25°С в течение 24 час и разрезают на полоски размером 50×9×8 мм или других размеров.

5. Полоски материала упаковывают в двойные полимерные пакеты, маркируют.

Пример 2.

1. В реактор-смеситель загружают 0,9 г коллагена, растворенного в 45 мл 2% уксусной кислоты, и при перемешивании добавляют 30 г суспензии клеток Lactobacillus casei, содержание клеток 10⁸ КОЕ/мл, и добавляют очищенной воды 25 мл (до 100 г), тщательно перемешивают до получения однородной смеси.

2. Далее, как в примере 1 по п.2-5.

Пример 3.

1. В реактор-смеситель загружают 1,2 г коллагена, растворенного в 60 мл 2% уксусной кислоты, и при перемешивании добавляют 15 г суспензии клеток Lactobacillus casei, содержание клеток 10⁸ КОЕ/мл, добавляют воды очищенной 25 мл (до 100 г), в которой растворен 1 г мексидола, тщательно перемешивают до получения однородной смеси.

2. Смесь разливают по кюветам с толщиной слоя 4-5 мм и переносят в камеру сублимационной сушки ТГ-15 или другой.

3. Замораживание до температуры продукта -20°С.

4. Далее, как в примере 1 по п.3-5.

Пример 4.

1. По п.1 в примере 1.

2. Смесь разливают по кюветам, толщина слоя 4-5 мм.

3. Замораживание смеси до температуры -20°С.

4. Вынимают кюветы и сверху наслаивают смесь коллагена с мексидолом (п.1, пример 3), толщина слоя 3-4 мм

5. Далее по п.3-5 примера 1.

Получаемые по предлагаемому изобретению пародонтальные повязки были испытаны на жизнеспособность клеток и их содержание. После извлечения клеток из 40 мг пластины физиологическим раствором методом серийных разведений получают конечное разведение 10⁸ и через 24 час. инкубации штамма отмечают рост колоний. Количество колониеобразующих единиц штамма в сухой повязке находится в пределах от 10⁶ до 10⁷ КОЕ/мл. Повязка, полученная по предлагаемому изобретению, использовалась при лечении хронического генерализованного пародонтита в стадии воспаления у 9 пациентов. После профессиональной гигиены местно применяли коллагеновую повязку с лактобактериями в течение 21 дня с ежедневной сменой повязки. Одновременно в контрольной группе (21 пациент) использовали Фитопрепарат “Гингитек”. До лечения и на 7, 14 и 21 день изучали микрофлору в пародонтальном кармане. Результаты определения пародонтопатогенной и стабилизирующей микрофлоры представлены в таблицах 1-4.

Из материала, представленного в таблицах 1-4, следует, что в обеих группах пациентов абсолютные и относительные показатели микробной обсемененности практически одинаковы. В процессе местного лечения наблюдали существенное снижение общего количества патогенной микрофлоры. Однако на 21-28 дни (через 2-3 недели) после завершения местного лечения фитопрепаратом “Гингитек” наблюдали ухудшение гигиены пародонта - логарифмическое микробное число достоверно увеличивалось до уровня начала лечения, что соответствовало и качественному составу микробной флоры. Также спустя 2 недели после завершения местного применения фитопрепарата “Гингитек” наблюдалось восстановление показателей стабилизирующей флоры - вновь появлялись представители вейллонелл и Prevotella oralis. Однако количество всех стабилизирующих видов было явно превышающим границы физиологической нормы и соответствовало таковому при обследовании пациентов до начала лечения. Высокими оставались также частота выделения и количество грибов рода Candida. Несколько увеличивалась частота выделения анаэробных бактерий пародонтопатогенной группы.

Полученные данные позволяют заключить, что положительные изменения состава микрофлоры пародонтального кармана, которые мы наблюдали после проведения профессиональной гигиены в условиях местного применения фитопрепарата “Гингитек”, носят временный характер. Через 2 недели после окончания лечения (на 21-28 дни) показатели состояния микробиоценоза вновь ухудшаются. При использовании пародонтальной повязки был достигнут высокий уровень содержания лактобацилл в десневых карманах, который отличался стабильностью даже после его отмены. Наиболее оптимальные показатели были достигнуты при использовании пародонтальной повязки с лиофилизированным лактобактерином, иммобилизованным в коллагеновой губке. Подобная стабильная характеристика микробиоценоза полости рта, соответствующая физиологической норме, сохранялась также и на 21-28 дни исследовании.

Частота выделения и количество грибов Candida, а также представителей пародонтопатогенных анаэробных видов бактерий были минимальными. Состав стабилизирующей флоры и ее количество соответствовали нормальным значениям для данной возрастной группы. Таким образом, в условиях применения экспериментальной коллагеновой повязки с лактобактериями наблюдались две характерные тенденции:

во-первых, резко сокращалась частота выделения представителей бактерий пародонтопатогенных видов, почти полностью исчезали дрожжеподобные грибы;

во-вторых, происходила постепенная нормализация большинства представителей стабилизирующей микробной флоры полости рта -коринебактерий, стрептококков и вейллонелл, чего не наблюдалось у пациентов контрольной группы.

Вышеизложенное позволяет заключить:

1. По сравнению с прототипом (срок ремиссии 6-8 мес.) применение предложенного средства позволяет достичь срока ремиссии 10-12 мес., что подтверждено испытаниями на 24 больных.

2. Эффективность местного лечения обострении хронического генерализованного пародонтита за счет использования повязки по изобретению может быть объяснена существенным снижением количества и частоты выделения из пародонтальных карманов представителей агрессивных видов микробов (пигментообразующих бактероидов, актиномицетов и S. intermedius), а также дрожжеподобных грибов Candida albicans.

3. Применение для местного лечения больных пародонтитом экспериментальной коллагеновой губкой с лактобактериями оптимально и более физиологично с точки зрения клинической эффективности и сохранности нормальной микробной флоры полости рта.

4. Эффект нормализации состава микробной флоры слизистой оболочки десны, наблюдающийся при применении лактобактерий, носит стойкий характер в отличие от частичного и весьма кратковременного эффекта при местном применении фитопрепарата “Гингитек”.

Изобретение относится к области медицины, а именно стоматологии. Пародонтальная повязка состоит из коллагена и суспензии клеток Lactobacillus casei 37, количество клеток 10⁸ КОЕ/мл. Компоненты берут в определенном количественном содержании. Дополнительно повязка может содержать до 10% от массы коллагена антиоксидантных, противовоспалительных или стимулирующих ранозаживление средств, которые могут быть выполнены отдельным слоем. Пародонтальная повязка обеспечивает период ремиссии длительностью до 10-12 месяцев. 2 з.п. ф-лы, 4 табл.

1.Пародонтальная повязка на основе 2%-ного уксуснокислого коллагена на очищенной воде и биологически активного вещества, высушенная лиофильно, отличающаяся тем, что в качестве биологически активного вещества используют суспензию клеток Lactobacillus casei 37 при следующих соотношениях компонентов, г:

2%-ный Уксуснокислый коллаген 45,0-60,0

Суспензия клеток Lactobacillus

casei 37, концентрация клеток

10⁸ КОЕ/мл 15,0-30,0

Вода очищенная До 100