СПОСОБ ЛИМФОСТИМУЛЯЦИИ И ИММУНОМОДУЛЯЦИИ ПРИ РАССЕЯНОМ СКЛЕРОЗЕ Российский патент 2005 года по МПК A61K31/167 A61K31/573 A61K31/7004 A61K35/14 A61K38/00 A61K38/46 

Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии, и может быть использовано в качестве лечения рассеянного склероза (PC).

Известен способ лечения PC с использованием глюкокортикостероидов - преднизолон, метилпреднизолон, дексаметазон, бетаметазон (Goodin D.S., 1991, Завалишин И.А., 1991, 1996).

Существует способ лечения PC с применением цитостатиков - азатиоприн, циклофосфамид, циклоспорин A (Yudkin P.L. et al., 1991, Mackin G.A.etal., 1993).

Известен способ терапии PC с использованием цитокинов - роферона, реаферона (прототип №1), бетаферона (Femandez О. et al., 1995).

Известен способ лечения PC с использованием копаксона (Кеннет Джонсон, 1998 г., конгресс ECTRIMS 98, Стокгольм).

Недостатки способа прототипа №1 - побочные эффекты введения цитокинов - гриппоподобные реакции, гипертермический синдром, при внутримышечном введении - возможность некроза мышц. Высокая вероятность выработки блокирующих антител на вводимые внутривенно или внутримышечно цитокины и последующее снижение эффективности терапии, отсутствие эффекта элиминация продуктов аутоиммунных реакций (в т.ч. циркулирующих иммунных комплексов).

Известен метод иммунотерапии и лимфостимуляции при PC (прототип №2) с использованием эндолимфатического введения комплекса природных цитокинов (Хабаров Д.В. 1999 г.). Недостатком данного метода являются технические сложности: необходимость хирургической операции - выделение и катетеризация лимфатического сосуда, возможность миграции катетера и разрыва лимфатического сосуда, его тромбирование, необходимость использования дозатора введения лекарственных препаратов (инфузомат, линеамат), возможность развития инфекционных осложнений.

Предлагается способ, заключающийся во введении в межостистые связки позвоночного столба на уровнях, соответствующих грудному и поясничному утолщениям спинного мозга, лекарственной смеси: лидокаин 100 мг, лидаза 32 ед., дексаметазон 4 мг, лейкинферон 10000 ЕД, глюкоза 40%-4 мл с одновременным внутривенным введением экстракорпорально обработанных иммуномодулятором циклофероном (250 мг) при температуре 24-26°С в течение одного часа аутолимфоцитов в количестве 400-1000 клеток/мл. Процедуру повторяют трижды с интервалом 48-72 часа.

Технический результат предлагаемого способа заключается в лимфостимулирующем и иммуномодулирующем эффекте с помощью непрямых лимфостимулирующих инъекций комплексной лекарственной смесью, включающей лимфостимуляторы и цитокины в комбинации с воздействием на иммунную систему in vitro, а именно на аутолимфоциты препаратами класса иммуномодуляторов.

Поставленная цель достигается путем выполнения непрямых лимфостимулирующих инъекций в межостистые связки позвоночного столба. Уровень инъекций соответствует грудному и поясничному утолщениям спинного мозга в зависимости от неврологической симптоматики. Состав лекарственной смеси включает: лидазу (32 ед.), дексаметазон (4 мг), лидокаин (100 мг), 40% р-р глюкозы (4 мл) и лейкинферон (10000 ЕД). Данная инъекция повторяется 3-5 раз с интервалом 48-72 часа. Лимфоцитаферез проводится на сепараторе клеток крови AS-TEC 204 фирмы “Fresenius”. Полученные аутолимфоциты в концентрации 400-1000 клеток/мл экспонируются в течение 1 часа с иммуномодулятором (циклоферон 250 мг) при температуре 24-26°С, после чего аутолимфоциты возвращаются пациенту путем внутривенной инфузии. Данная процедура повторяется трижды с интервалом 48-72 часа.

Преимущества заявляемого решения:

- комбинация лимфостимулирующей и иммуномодулирующей терапии позволяет взаимно повышать эффективность каждого метода и потенцировать общий эффект воздействия;

- усиление лимфатического оттока от конечностей и печени;

- лимфотропное введение комплекса цитокинов - лейкинферона определяет лимфостимулирующее и иммуномодулирующее влияние на лимфатический регион позвоночного столба и спинного мозга;

- выделение точного количества аутолимфоцитов, клеток, занимающих одно из центральных мест в патогенезе заболевания;

- прицельное воздействие иммуномодулятором циклоферон-индуктором эндогенных интерферонов на аутолимфоциты в экстракорпоральных условиях;

- возможность элиминации из организма определенного количества аутолимфоцитов;

- возможность проводить одновременно экстракорпоральную детоксикацию - элиминацию плазмы, а с ней и части продуктов аутоиммунных реакций (в т.ч. циркулирующих иммунных комплексов). Оценка результатов лечения проводилась по следующему алгоритму:

- регистрация неврологической симптоматики;

- иммунологическое обследование больных;

- реовазолимфография печени.

Были проведены следующие исследования:

- определение динамики неврологического статуса по шкале оценки тяжести состояния больных по J. Kurtzke (1981, 1983): Disability Status Scale (DSS), Expanded Disability Status Scale (EDSS) в связи со шкалой функциональных систем (Functional System, FS). Учтены дополнения и модификации, внесенные H.I.Weiner и G.W.Ellison (1983) и авторами руководства M.R.D. (Minimal Record of Disability for Multiply Sclerosis, 1985).

- исследование общего иммунного статуса, который показывал состояние клеточного и гуморального иммунитета и включал в себя определение общего и относительного числа лимфоцитов и их субпопуляций: Т-лимфоцитов, Т-хелперов, Т-супрессоров, Т-киллеров, В-лимфоцитов, уровня иммуноглобулинов G, М, А, циркулирующих иммунных комплексов, сводного показателя - иммунорегуляторного индекса (ИРИ), определение общего количества лейкоцитов и лейкоцитарной формулы;

- определение экспрессии провоспалительных и противоспалительных цитокинов - интерлейкин (ИЛ) 1, ИЛ 6, ИЛ 4, ИЛ 10, фактор некроза опухоли - α (ФНОα);

- проведение реовазолимфографического исследования печени у пациентов с PC.

Данные обследования проводились при поступлении в клинику и перед выпиской.

Результаты

При использовании предлагаемого способа лечения отмечается положительная динамика по неврологической симптоматике у 75% пациентов, получавших лимфостимуляцию в сочетании с экстракорпоральной иммуномодуляцией аутолимфоцитов, полученных на сепараторе клеток крови. Неврологическая динамика по шкале J. Kurtzke была 1-4 балла по 2-3 показателям (симптомы поражения пирамидного пути, нарушения координации, нарушения функций тазовых органов, зрительные нарушения, нарушения функции черепных нервов). В группе сравнения, где проводился только лимфоцитаферез с эктракопоральной обработкой аутолимфоцитов, также отмечалась положительная неврологическая динамика, но в 70% случаев и в 1-2 балла по тем же показателям, но реже когда улучшение происходило одновременно по трем симптомам. Положительная неврологическая динамика в группе пациентов с эндолимфатическим введением комплекса природных цитокинов регистрировалась в 53% случаев. Иммунологическое обследование, проведенное до и после проведения предложенного способа, показало, что происходит увеличение общих Т-лимфоцитов (ЛТ-3) до нормальных показателей либо до значений близких к нижней границе нормы, причем за счет угнетенного звена - Т-супрессоров (ЛТ-8). Таким образом, нормализует иммунорегуляторный индекс. Отмечается снижение ЦИК в тех случаях, когда этот показатель повышен. Частота экспрессии провоспалительных цитокинов до лечения составляла: ИЛ-1 - 5,26%, ИЛ-6 - 33,3%, ФИО α -, а после завершения курса терапии с использованием предлагаемого способа - ИЛ-1 - 3,3%, ИЛ-6 - 16,5%, ФНО α -. Частота экспрессии противовоспалительных цитокинов до лечения составляла: ИЛ-4 - 13,3%, ИЛ-10 - 33,3%, а после завершения курса терапии с использованием предлагаемого способа - ИЛ-4 - 20%, ИЛ-10 - 40%. Положительные иммунологические сдвиги коррелировали с улучшением неврологической симптоматики.

Реовазография печени пациентов с PC показала, что в 80% случаев после лечения происходит возрастание скорости оттока лимфы и венозной крови, а также объема лимфатического и венозного оттока, что свидетельствует о повышение тонуса лимфо-венозной системы печени и увеличении детоксикационных возможностей данного органа.

Клинический пример. Пациентка А-ва, 26 лет. Диагноз: Рассеянный склероз. Церебральная форма. Мозжечковая атаксия, умеренный нижний парапарез, дизартрия. Умеренный кохлеавестибулярный синдром. Церебрастенический, неврастенический синдромы.

Через 2 месяца после ангины отметила нарушения речи. Обратилась к неврологу. Проведено МРТ головного мозга, получены данные за демиелинизирующее заболевание. Выставлен диагноз: рассеянный склероз.

При поступлении у пациентки по шкале повреждений функциональных систем по J. Kurtzke сумма баллов составила 9, после проведения предложенного способа лимфостимуляции и иммуномодуляции данный показатель стал равен 1 баллу (см. таблицу).

Шкала повреждении функциональных систем по J. Kurtzke (пациентка А-ва, оценка только патологической симптоматики)

ГруппаПри поступленииКлассификация в зависимости от нарушения функцииПри выпискеСимптомы поражения пирамидного пути31 - патологические пирамидные рефлексы без снижения силы12 - незначительное снижение силы 3 - незначительный или умеренный геми- или парапарез, тяжелый монопарез 4 - отчетливый геми- или парапарез умеренный тетрапарез 5 - параплегия, гемиплегия или отчетливый тетрапарез 6 - тетраплегия Нарушения координации21 - неврологические симптомы без нарушения функций02 - незначительная атаксия 3 - умеренная атаксия туловища или конечностей 4 - выраженная атаксия во всех конечностях 5 - невозможно выполнять направленных движений из-за атаксии Нарушения черепных нервов (кроме 2 пары)41 - симптомы без нарушений функций02 - умеренно выраженный нистагм или другие незначительные симптомы поражения других черепных нервов 3 - выраженный нистагм, отчетливые симптомы вовлечения глазодвигательных или лицевого нервов, умеренные симптомы поражения других черепных нервов 4 - выраженная дизартрия или другие выраженные нарушения 5 - невозможность глотать или говорить  9 1

Иммунологическое обследование, проведенное до лечения, выявило абсолютную Т-лимфопению главным образом за счет Т-супрессоров (CD-8) и нарушение ИРИ. После проведенного лечения у пациентки отмечалось увеличение общего числа Т-лимфоцитов за счет CD-8 и нормализация ИРИ. До лечения была выявлена экспрессия провосполительных цитокинов - ИЛ-6, ФНО α, и противовоспалительного - ИЛ-10. После лечения экспрессия провосполительные цитокинов не определялась, а экспрессия ИЛ-10 сохранялась.

Реовазографическое исследование печени до и после лечения показало возрастание скорости оттока лимфы и венозной крови, а также объема венозного оттока.

Использование данного способа позволяет эффективно воздействовать на патологически измененную иммунологическую реактивность организма, стимулировать лимфодетоксикационные механизмы. Улучшается и стимулируется взаимодействие иммунной и лимфатической систем. Таким образом, удается изменить течение заболевания, что выражается в улучшении неврологической симптоматики и показателей общего иммунного статуса, экспрессии противовоспалительных цитокинов, реовазографических характеристик.

Список литературы

1. Завалишин И.А., Невская О.М. Клинические критерии диагноза и лечение рассеянного склероза: методические рекомендации //Москва, - 1991.

2. Жученко Т.Д., Завалишин И.А. Лечение рассеянного склероза //Неврологический журнал, М: Медицина, 1996. - №1 - С.37-43.

3. Хабаров Д.В. Влияние эфферентной и эндолимфатической терапии на течение патологического процесса у больных рассеянным склерозом //Ав-тореф. дисс. канд. мед. наук, Новосибирск, 1999 г.

4. Kurizke J.F. Epidemiology of multiple sclerosis in US veterans; V. Ancestry and the risk of multiple sclerosis //Ann. Neurol, 1993. - N 33. - P.632-639.

5. Fernandez 0., Antiquetful A., Aribisu T. et al. Treatment of relapsing-remitting multiple sclerosis with natural interferon-beta: a multicenter, randomized clinical trial //Multiple Sclerosis, 1995. - N 1 (Suppl.). - P.67-69.

6. Goodin D.S. The use of immunosupressive agents in the treatment of multiple sclerosis //A critical review. Neurology, 1991. - №41. - P.980-985.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для лимфостимуляции и иммуномодуляции при рассеянном склерозе. Проводят внутривенное введение экстракорпорально обработанных иммуномодулятором аутолимфоцитов. В качестве иммуномодулятора используют циклоферон (250 мг). Одновременно в межостистые связки позвоночного столба на уровнях, соответствующих грудному и поясничному утолщениям спинного мозга, вводят лекарственную смесь: лидокаин 100 мг, лидаза 32 ед., дексаметазон 4 мг, лейкинферон 10000 ЕД, глюкоза 40%-4 мл. Процедуру повторяют трижды с интервалом 48-72 часа. Способ позволяет повысить эффективность лимфостимуляции и иммуномодуляции при рассеянном склерозе. 1 табл.

Способ иммуномодуляции и лимфостимуляции при рассеянном склерозе, заключающийся во внутривенном введении экстракорпорально обработанных иммуномодулятором аутолимфоцитов, отличающийся тем, что используют иммуномодулятор циклоферон (250 мг) и одновременно в межостистые связки позвоночного столба на уровнях, соответствующих грудному и поясничному утолщениям спинного мозга, вводят лекарственную смесь: лидокаин 100 мг, лидаза 32 ед., дексаметазон 4 мг, лейкинферон 10000 ЕД, глюкоза 40%-ная 4 мл, процедуру повторяют трижды с интервалом 48-72 ч.