ПРОИЗВОДНЫЕ 1-МЕТИЛКАРБАПЕНЕМА Российский патент 2005 года по МПК C07D477/20 A61K31/403 A61P31/04 

Область техники

Настоящее изобретение относится к производным 1-метилкарбапенема, которые обладают прекрасной антибактериальной активностью, их фармакологически приемлемым сложным эфирам или солям, фармацевтическим композициям (в частности, антибактериальным средствам), содержащих их в качестве активного ингредиента, к применению указанных соединений, их эфирных производных или солей для получения фармацевтических композиций или к способу профилактики или лечения заболеваний (в частности, бактериальных инфекций), который заключается во введении фармацевтически эффективных количеств указанных соединений, их эфирных производных или солей теплокровным животным (в частности, человеку).

Предпосылки изобретения

Существует необходимость в разработке производных карбапенема, которые обладают сильной и стабильной антибактериальной активностью в отношении широкого спектра патогенных бактерий. Соединения 1-метилкарбапенема, обладающие структурой, аналогичной структуре соединений по настоящему изобретению, описаны в японской патентной публикации (Kokai) No. Hei 8-53453.

Авторы настоящего изобретения в течение длительного периода проводили исследования производных 1-метилкарбапенема. В результате было обнаружено, что по сравнению с обычными производными 1-метилкарбапенема, соединения формулы (I) по данному изобретению обладают более сильной антибактериальной активностью и являются эффективными в качестве антибактериального средства для лечения или профилактики (особенно лечения) бактериальных инфекций, особенно респираторных инфекций, на основе чего было выполнено настоящее изобретение.

Подробное описание изобретения

Настоящее изобретение относится к производным 1-метилкарбапенема, представленным формулой (I):

или их фармацевтически приемлемым солям или сложным эфирам.

В формуле R¹ представляет собой

(1) группу, представленную формулой COOR³

[где R³ представляет собой атом водорода, C₁-C₆ алкильную группу или C₃-C₆ циклоалкильную группу],

(2) группу, представленную формулой CONR⁴R⁵

[где R⁴ и R⁵ могут быть одинаковыми или различными, и каждый представляет собой атом водорода, C₁-C₆ алкильную группу (которая может быть замещена одной или двумя группами, которые могут быть одинаковыми или различными и выбраны из группы заместителей A, описанной ниже), C₃-C₆ циклоалкильную группу или 3-6-членную гетероциклическую группу или C₆-C₁₀ арильную группу (которая может быть замещена одной или двумя группами, которые могут быть одинаковыми или различными и выбраны из группы заместителей B, описанной ниже), или вместе с атомом азота, к которому они присоединены, представляют собой 3-6-членный содержащий азот гетероцикл (который может быть замещен одной или двумя группами, которые могут быть одинаковыми или различными и выбраны из группы заместителей B, описанной ниже)],

(3) цианогруппу,

(4) группу, представленную формулой CH₂OR⁶

[где R⁶ представляет собой атом водорода, C₁-C₆ алкильную группу или C₃-C₆ циклоалкильную группу], или

(5) группу, представленную формулой CH₂NR⁷R⁸

[где R⁷ представляет собой атом водорода, C₁-C₆ алкильную группу или C₃-C₆ циклоалкильную группу, и R⁸ представляет собой атом водорода, C₁-C₆ алкильную группу, C₃-C₆ циклоалкильную группу, C₁-C₆ алканоильную группу, (C₆-C₁₀ арил)карбонильную группу (которая может быть замещена одной или двумя группами, которые могут быть одинаковыми или различными и выбраны из группы заместителей B, описанной ниже), (C₁-C₆ алкокси)карбонильную группу, 5- или 6-членную ароматическую гетероциклилкарбонильную группу, C₁-C₆ алкилсульфонильную группу или C₆-C₁₀ арилсульфонильную группу, или R⁷ и R⁸, вместе с атомом азота, которому они присоединены, представляют собой сукцинимидную группу (которая может быть конденсирована с фенильной группой)];

R² представляет собой атом водорода или C₁-C₆ алкильную группу;

n равно 1, 2 или 3;

X представляет собой атом серы или атом кислорода;

группа заместителей А включает в себя гидроксильную группу, аминогруппу (которая может быть замещена одной или двумя C₁-C₆ алкильными группами), карбамоильную группу (аминогруппа которой может быть замещена одной или двумя C₁-C₆ алкильными группами), карбоксильную группу, цианогруппу и C₁-C₆ алкоксигруппу; и

группа заместителей B включает в себя гидрокси-C₁-C₄-алкильную группу, амино-C₁-C₄-алкильную группу (аминогруппа которой может быть замещена одной или двумя C₁-C₆ алкильными группами), карбамоильную группу (аминогруппа которой может быть замещена одной или двумя C₁-C₆ алкильными группами), карбоксильную группу, гидроксильную группу, аминогруппу (которая может быть замещена одной или двумя C₁-C₆ алкильными группами), C₁-C₆ алкоксигруппу и C₁-C₆ алкильную группу].

В вышеприведенном описании “C₁-C₆ алкильная группа” в определениях R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, группы заместителей A и группы заместителей B представляет собой прямую или разветвленную насыщенную углеводородную группу, содержащую от 1 до 6 атомов углерода. Примеры такой группы включают в себя группы метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, н-пентил, изопентил, 2-метилбутил, неопентил, 1-этилпропил, н-гексил, изогексил, 4-метилпентил, 3-метилпентил, 2-метилпентил, 1-метилпентил, 3,3-диметилбутил, 2,2-диметилбутил, 1,1-диметилбутил, 1,2-диметилбутил, 1,3-диметилбутил, 2,3-диметилбутил, 2-этилбутил и 1-метил-2-метилпропил. В определениях R², R³, R⁶, R⁷, R⁸, группы заместителей A и группы заместителей B, C₁-C₃ алкильная группа является предпочтительной и метильная группа является особенно предпочтительной. В определении R⁴ C₁-C₃ алкильная группа является предпочтительной, и метильная или изопропильная группа является особенно предпочтительной. В определении R⁵ C₂-C₆ алкильная группа является предпочтительной, и 1-метил-2-метилпропильная группа является наиболее предпочтительной.

“C₃-C₆ Циклоалкильная группа” в определениях R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ и R⁸ представляет собой циклическую углеводородную группу, содержащую от 3 до 6 атомов углерода. Примеры такой группы включают в себя группы циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил, из которых циклопропильная группа является предпочтительной.

“3-6-членная гетероциклическая группа” в определениях R⁴ и R⁵ представляет собой насыщенную гетероциклическую группу, содержащую один или два атома кислорода, азота и серы. Примеры такой группы включают в себя группы азиридинил, азетидинил, пирролидинил, пиперидинил, оксиранил, оксетанил, тетрагидрофуранил, тетрагидропиранил, тетрагидротиенил, морфолинил, пиперазинил и тиоморфолинил, из которых 4-6-членная гетероциклическая группа, содержащая азот, является предпочтительной, и азетидинильная, пирролидинильная или пиперидинильная группа является наиболее предпочтительной.

Примеры “C₆-C₁₀ арильной группы” в определениях R⁴ и R⁵ и “C₆-C₁₀ арильной” группы “(C₆-C₁₀ арил)карбонильной группы” и “С₆-С₁₀арилсульфонильной группы” в определении R⁸ включают в себя группы фенил, инденил и нафтил, из которых фенильная группа является предпочтительной.

“Гетероцикл, содержащий азот”, из “3-6-членного гетероцикла, содержащего азот”, в определениях группы, образованной R⁴ и R⁵, вместе с атомом азота, к которому они присоединены, представляет собой насыщенную гетероциклическую группу, содержащую один или два атома азота, и которая может содержать атом кислорода или серы. Примеры такой группы включают в себя группы азиридино, азетидино, пирролидино, пиперидино, морфолинo, пиперазинo и тиоморфолинo, из которых 4-6-членный гетероцикл, содержащий азот, является предпочтительным, и группы азетидино, пиперазинo, морфолинo или тиоморфолинo являются более предпочтительными.

“C₁-C₆ Алканоильная группа” в определении R⁸ представляет собой прямую или разветвленную алканоильную группу, содержащую от 1 до 6 атомов углерода. Примеры такой группы включают в себя группы формил, ацетил, пропионил, бутирил, изобутирил, валерил, изовалерил, пивалоил и гексаноил, из которых C₁-C₃ алканоильная группа является предпочтительной и ацетильная группа является наиболее предпочтительной.

“C₁-C₆ Алкокси” группа из “(C₁-C₆ алкокси)карбонильной группы” в определении R⁸ и “C₁-C₆ алкоксигруппа” в определениях групп заместителей представляет собой прямую или разветвленную алкоксигруппу, содержащую от 1 до 6 атомов углерода. Примеры такой группы включают в себя группы метокси, этокси, пропокси, изопропокси, бутокси, пентилокси и гексилокси, из которых C₁-C₃ алкоксигруппа является предпочтительной и метоксигруппа является наиболее предпочтительной.

“5- или 6-членная ароматическая гетероциклическая” группа из “5- или 6-членной ароматической гетероциклилкарбонильной группы” в определении R⁸ представляет собой ароматический гетероцикл, содержащий от одного до трех атомов кислорода, азота и серы. Примеры такого гетероцикла включают в себя пиррол, имидазол, тиазол, оксазол, изоксазол, фуран, тиофен, триазол, тиадиазол, пиридин, пиримидин, пиридазин и триазин, из которых фуран, тиофен или пиридин является предпочтительным.

Примеры “гидрокси-C₁-C₄-алкильной группы” в группе B заместителей включают в себя группы гидроксиметил, гидроксиэтил, гидроксипропил и гидроксибутил, из которых гидрокси-C₁-C₂-алкильная группа является предпочтительной и гидроксиметильная группа является наиболее предпочтительной.

Примеры “амино-C₁-C₄-алкильной группы” в группе B заместителей включают в себя группы аминометил, аминоэтил, аминопропил и аминобутил, из которых амино-C₁-C₂-алкильная группа является предпочтительной и аминометильная группа является наиболее предпочтительной.

Предпочтительная группа заместителей A включает в себя гидроксильную группу, аминогруппу (которая может быть замещена одной или двумя C₁-C₃ алкильными группами) и карбамоильную группу, из которых аминогруппа (которая может быть замещена одной или двумя группами метила или этила) является наиболее предпочтительной.

Предпочтительно, группа заместителей B включает в себя гидрокси-C₁-C₄-алкильную группу, амино-C₁-C₄-алкильную группу (аминогруппа которой может быть замещена одной или двумя C₁-C₃ алкильными группами), карбамоильную группу (аминогруппа которой может быть замещена одной или двумя C₁-C₃ алкильными группами), гидроксильную группу и аминогруппу (которая может быть замещена одной или двумя C₁-C₃ алкильными группами), из которых группа, содержащая гидроксиметильную группу, аминометильную группу (аминогруппа которой может быть замещена одной или двумя группами метил или этил), карбамоильную группу (аминогруппа которой может быть замещена одной или двумя группами метил или этил), гидроксильную группу и аминогруппу (которая может быть замещена одной или двумя группами метил или этил), является более предпочтительной, где аминометильная группа и аминогруппа являются еще более предпочтительными.

“Фармакологически приемлемый сложный эфир” соединения (I) представляет собой сложный эфир, в котором некоторые карбоксильные группы или гидроксильные группы соединения (I) защищены группой, которая может отщепляться в организме человека или животного химическим или биологическим способом, таким как гидролиз, с получением исходного соединения (I) или его соли. Присутствие или отсутствие такого эфирного производного может быть определено пероральным или внутривенным введением производного экспериментальному животному, такому как крыса или мышь, исследованию жидкостей животного и обнаружением исходного соединения (I) или его соли.

Примеры защитной группы, которые образуют сложный эфир карбоксильной группы, включают в себя C₁-C₁₀ алкильную группу, C₃-C₆ циклоалкильную группу, C₃-C₆ циклоалкил-C₁-C₄-алкильную группу, C₂-C₁₀ алканоилокси-C₁-C₄-алкильную группу, (C₁-C₁₀ алкокси)карбонилокси-C₁-C₄-алкильную группу, фенильную группу (указанная фенильная группа может быть замещена одной или двумя группами, выбранными из атома водорода, группы C₁-C₄ алкил, C₁-C₄ алкоксигруппы, метилендиоксигруппы и C₁-C₆ алканоилоксигруппы), C₁-C₁₀ алканоилоксибензильную группу, фталидильнную группу и 5-метил-2-оксо-1,3-диокосолен-4-илметильную группу.

Примеры защитной группы, которая образует сложный эфир гидроксильной группы, включают в себя C₁-C₁₀ алканоильную группу, (C₆-C₁₀ арил)карбонильную группу, (C₁-C₁₀ алкокси)карбонильную группу и аминоацильную группу.

Примеры вышеуказанной “C₁-C₁₀ алкильной группы” включают в себя группы метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, пентил, 2-пентил, 3-пентил, изопентил, гексил, 2-гексил, 3-гексил, изогексил, гептил, октил, нонил и децил, из которых C₁-C₆ алкильная группа является предпочтительной, C₂-C₄ алкильная группа является более предпочтительной и этильная группа является наиболее предпочтительной.

Примеры “C₃-C₆ циклоалкильной группы” включают в себя группы циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил, из которых циклопентильная или циклогексильная группа является предпочтительной.

Примеры “C₃-C₆ циклоалкил-C₁-C₄-алкильной группы” включают в себя группы циклопропилметил, циклопропилэтил, циклопропилпропил, циклопропилбутил, циклобутилметил, циклобутилэтил, циклобутилпропил, циклопентилметил, циклопентилэтил, циклопентилпропил, циклогексилметил и циклогексилэтил, из которых циклопропилметильная группа является предпочтительной.

Примеры “C₂-C₁₀ алканоилокси-C₁-C₄-алкильной группы” включают в себя группы ацетоксиметил, 1-(ацетокси)этил, 1-(ацетокси)пропил, 1-(ацетокси)бутил, пропионилоксиметил, 1-(пропионилокси)этил, изопропионилоксиметил, 1-(изопропионилокси)этил, бутирилоксиметил, 1-(бутирилокси)этил, изобутирилоксиметил, 1-(изобутирилокси)этил, пивалоилоксиметил, 1-(пивалоилокси)этил, валерилоксиметил, 1-(валерилокси)этил, изовалерилоксиметил, 1-(изовалерилокси)этил, гексаноилоксиметил, 1-(гексаноилокси)этил, оканоилоксиметил, 1-(октаноилокси)этил, деканоилоксиметил, циклопентилкарбонилоксиметил, 1-метилциклопентилкарбонилоксиметил, циклогексилкарбонилоксиметил и 1-метилциклогексилкарбонилоксиметил, из которых C₂-C₆ алканоилоксиметильная или 1-(C₂-C₆ алканоилокси)этильная группа является предпочтительной.

Примеры “(C₁-C₁₀ алкокси)карбонилокси-C₁-C₄-алкильной группы” включают в себя группы метоксикарбонилоксиметил,

1-(метоксикарбонилокси)этил, этоксикарбонилоксиметил,

1-(этоксикарбонилокси)этил, 1-(этоксикарбонилокси)пропил,

1-(этоксикарбонилокси)бутил, пропоксикарбонилоксиметил,

1-(пропоксикарбонилокси)этил, изопропоксикарбонилоксиметил,

1-(изопропоксикарбонилокси)этил, бутоксикарбонилоксиметил,

1-(бутоксикарбонилокси)этил, изобутоксикарбонилоксиметил,

1-(изобутоксикарбонилокси)этил, втор-бутоксикарбонилоксиметил, 1-(втор-бутоксикарбонилокси)этил, трет-бутоксикарбонилоксиметил, 1-(трет-бутоксикарбонилокси)этил, пентилоксикарбонилоксиметил, 1-(пентилоксикарбонилокси)этил, (1-метилбутилоксикарбонилокси)метил, 1-(1-метилбутилоксикарбонилокси)этил,

(2-метилбутилоксикарбонилокси)метил, 1-(2-метилбутилоксикарбонилокси)этил, (3-метилбутилоксикарбонилокси)метил, 1-(3-метилбутилоксикарбонилокси)этил, (1-этилпропилоксикарбонилокси)метил, 1-(1-этилпропилоксикарбонилокси)этил, гексилоксикарбонилоксиметил, 1-(гексилоксикарбонилокси)этил,

(1-метилпентилоксикарбонилокси)метил,

1-(1-метилпентилоксикарбонилокси)этил, октилоксикарбонилоксиметил, 1-(октилоксикарбонилокси)этил, децилоксикарбонилоксиметил, 1-(децилоксикарбонилокси)этил, циклопентилкарбонилоксиметил, 1-(циклопентилоксикарбонилокси)этил, циклогексилкарбонилоксиметил и 1-(циклогексилоксикарбонилокси)этил, из которых (C₁-C₆ алкокси)карбонилоксиметильная или 1-(C₁-C₆ алкокси)карбонилокси)этильная группа является предпочтительной.

Примеры “фенильной группы, которая может быть замещена”, включают в себя группы фенил, 3-фторфенил, 4-фторфенил, 3,4-дифторфенил, 3-метилфенил, 4-метилфенил, 3-метоксифенил, 4-метоксифенил, 3,4-диметоксифенил, 3,4-метилендиоксифенил, 3-ацетоксифенил и 4-ацетоксифенил, из которых незамещенная фенильная группа является предпочтительной.

Примеры “C₂-C₁₀ алканоилоксибензильной группы” включают в себя группы 2-ацетоксибензил, 3-ацетоксибензил, 4-ацетоксибензил, 3-пропионилоксибензил, 4-пропионилоксибензил, 4-бутирилоксибензил, 4-валерилоксибензил, 4-гексаноилоксибензил, 4-октаноилоксибензил и 4-деканоилоксибензил, из которых 3- или 4-(C₂-C₄ алканоилокси)бензильная группа является предпочтительной.

Примеры “C₁-C₁₀ алканоильной группы” включают в себя группы формил, ацетил, пропионил, бутирил, пентаноил, гексаноил, октаноил и деканоил, из которых C₂-C₆ алканоильная группа является предпочтительной.

Примеры “(C₆-C₁₀ арил)карбонильной группы” включают в себя группы бензоил, 1-нафтоил и 2-нафтоил, из которых бензоильная группа является предпочтительной.

Примеры “(C₁-C₁₀ алкокси)карбонильной группы” включают в себя группы метоксикарбонил, этоксикарбонил, пропоксикарбонил, бутоксикарбонил, пентилоксикарбонил, гексилоксикарбонил, октилоксикарбонил и децилоксикарбонил, из которых C₂-C₆ алкоксикарбонильная группа является предпочтительной.

Примеры “аминоацильной группы” включают в себя аминокислотные группы, такие как глицил, аланил, β -аланил, лейцил, изолейцил, фенилаланил, гистидил, аспарагил, пропил и лизил, из которых глицильная группа является предпочтительной.

Соединения (I) и их фармакологически приемлемые сложные эфиры по настоящему изобретению, если необходимо, могут образовывать фармакологически приемлемые соли.

“Фармакологически приемлемая соль” представляет собой соль, в которую может быть преобразовано соединение (I) по настоящему изобретению. Предпочтительные примеры такой соли включают в себя соли щелочных металлов, такие как соль натрия, соль калия и соль лития; соли щелочно-земельных металлов, такие как соль кальция и соль магния; соли металлов, такие как соль алюминия, соль железа, соль цинка, соль меди, соль никеля и соль кобальта; соли аминов, такие как неорганические соли, такие как соль аммония, и органические соли, такие как соль трет-октиламина, соль дибензиламина, соль морфолина, соль глюкозамина, соль алкилового эфира фенилглицина, соль этилендиамина, соль N-метилглюкамина, соль гуанидина, соль диэтиламина, соль триэтиламина, соль дициклогексиламина, соль N,N’-дибензилэтилендиамина, соль хлорновокаина, соль новокаина, соль диэтаноламина, соль N-бензилфенэтиламина, соль пиперазина, соль тетраметиламмония и трис(гидроксиметил)аминометана; соли неорганических кислот, такие как соли галогенводородной кислоты, такие как гидрофторид, гидрохлорид, гидробромид или гидройодид, нитрат, перхлорат, сульфат или фосфат; низшие алкансульфонаты, такие как метансульфонат, трифторметансульфонат или этансульфонат; арилсульфонаты, такие как бензолсульфонат или п-толуолсульфонат; и соли органических кислот, такие как ацетат, малат, фумарат, сукцинат, цитрат, тартрат, оксалат или малеат; и соли аминокислот, такие как соль глицина, соль лизина, соль аргинина, соль орнитина, соль глютамата или аспаратата.

Соединения (I), их фармакологически приемлемые соли и сложноэфирные производные по настоящему изобретению включают в себя их гидраты или сольваты.

В соединениях формулы (I), следующие соединения являются предпочтительными.

(1) Что касается R¹:

(1-1) соединения, где R¹ представляет собой группу, представленную формулой CONR⁴R⁵, цианогруппу или группу, представленную формулой CH₂NR⁷R⁸;

(1-2) соединения, где R¹ представляет собой группу формулы CONR⁴R⁵ или группу, представленную формулой CH₂NR⁷R⁸;

(1-3) соединения, где R¹ представляет собой группу формулы CONR⁴R⁵.

(2) Что касается R²:

(2-1) соединения, где R² представляет собой атом водорода или C₁-C₃ алкильную группу;

(2-2) соединения, где R² представляет собой атом водорода.

(3) Что касается R³:

(3-1) соединения, где R³ представляет собой атом водорода или C₁-C₃ алкильную группу;

(3-2) соединения, где R³ представляет собой атом водорода, метильную группу или этильную группу.

(4) Что касается R⁴:

(4-1) соединения, где R⁴ представляет собой атом водорода или C₁-C₃ алкильную группу;

(4-2) соединения, где R⁴ представляет собой атом водорода, метильную группу или изопропильную группу.

(5) Что касается R⁵:

(5-1) соединения, в которых R⁵ представляет собой атом водорода, C₁-C₆ алкильную группу (которая может быть замещена одной или двумя группами, которые могут быть одинаковыми или различными и выбраны из группы заместителей A) или 4-6-членную гетероциклическую группу, содержащую азот;

(5-2) соединения, где R⁵ представляет собой атом водорода, C₁-C₆ алкильную группу (которая может быть замещена одной или двумя группами, которые могут быть одинаковыми или различными и выбраны из группы заместителей A) или группу азетидинил, пирролидинил или пиперидинил.

(6) Что касается R⁴ и R⁵:

(6-1) соединения, где R⁴ и R⁵, вместе с атомом азота, к которому они присоединены, представляют собой 4-6-членный гетероцикл, содержащий азот (который может быть замещен одной или двумя группами, которые могут быть одинаковыми или различными и выбраны из группы заместителей B);

(6-2) соединения, где R⁴ и R⁵, вместе с атомом азота, к которому они присоединены, представляют собой группу азетидино, пиперазинo, морфолинo или тиоморфолинo (которая может быть замещена одной или двумя группами, которые могут быть одинаковыми или различными и выбраны из группы заместителей B).

(7) Что касается R⁶:

(7-1) соединения, где R⁶ представляет собой атом водорода или C₁-C₃ алкильную группу;

(7-2) соединения, где R⁶ представляет собой атом водорода.

(8) Что касается R⁷:

(8-1) соединения, где R⁷ представляет собой атом водорода или C₁-C₃ алкильную группу;

(8-2) соединения, где R⁷ представляет собой атом водорода или метильную группу;

(8-3) соединения, где R⁷ представляет собой атом водорода.

(9) Что касается R⁸:

(9-1) соединения, где R⁸ представляет собой атом водорода, C₁-C₃ алкильную группу, C₁-C₃ алканоильную группу, бензоильную группу (которая может быть замещена одной или двумя группами, которые могут быть одинаковыми или различными и выбраны из группы заместителей B), (C₁-C₃ алкокси)карбонильную группу, тиенилкарбонильную группу, фурилкарбонильную группу или пиридилкарбонильную группу;

(9-2) соединения, где R⁸ представляет собой атом водорода, бензоильную группу (которая может быть замещена одной или двумя группами, которые могут быть одинаковыми или различными и выбраны из группы заместителей B), (2-тиенил)карбонильную группу, (2-фурил)карбонильную группу или (3-пиридил)карбонильную группу.

(10) Что касается n:

(10-1) соединения, где n равно 1.

(11) Что касается X:

(11-1) соединения, где X представляет собой атом кислорода.

Соединения, которые получают путем произвольного объединения 2 или нескольких вышеперечисленных предпочтительных заместителей, являются более предпочтительными. Более предпочтительные примеры соединений включают в себя следующие соединения:

(12) соединения, где R¹ представляет собой группу, представленную формулой CONR⁴R⁵ (где R⁴ представляет собой атом водорода или C₁-C₃ алкильную группу; и R⁵ представляет собой атом водорода, C₁-C₆ алкильную группу (которая может быть замещена одной или двумя группами, которые могут быть одинаковыми или различными и выбраны из группы заместителей A) или 4-6-членную гетероциклическую группу, содержащую азот); R² представляет собой атом водорода; n равно 1; и X представляет собой атом кислорода или атом серы.

(13) соединения, где R¹ представляет собой группу, представленную формулой CONR⁴R⁵ (где R⁴ представляет собой атом водорода, метильную группу или изопропильную группу; и R⁵ представляет собой атом водорода, C₁-C₆ алкильную группу (которая может быть замещена одной или двумя группами, которые могут быть одинаковыми или различными и выбраны из группы заместителей A), или группу азетидинил, пирролидинил или пиперидинил); n равно 1; и X представляет собой атом кислорода или атом серы.

(14) соединения, где R¹ представляет собой группу, представленную формулой CONR⁴R⁵ (где R⁴ и R⁵, вместе с атомом азота, к которому они присоединены, представляют собой 4-6-членный гетероцикл, содержащий азот (который может быть замещен одной или двумя группами, которые могут быть одинаковыми или различными и выбраны из группы заместителей B); R² представляет собой атом водорода; n равно 1; и X представляет собой атом кислорода или атом серы.

(15) соединения, где R¹ представляет собой группу, представленную формулой CONR⁴R⁵ (где R⁴ и R⁵, вместе с атомом азота, к которому они присоединены, представляют собой группу азетидино, пиперазинo, морфолинo или тиоморфолинo (которая может быть замещена одной или двумя группами, которые могут быть одинаковыми или различными и выбраны из группы заместителей B)); R² представляет собой атом водорода; n равно 1; и X представляет собой атом кислорода или атом серы.

(16) соединения, где R¹ представляет собой цианогруппу; R² представляет собой атом водорода; n равно 1; и X представляет собой атом кислорода или атом серы.

(17) соединения, где R¹ представляет собой группу, представленную формулой CH₂NR⁷R⁸ (где R⁷ представляет собой атом водорода или C₁-C₃ алкильную группу; и R⁸ представляет собой атом водорода, C₁-C₃ алкильную группу, C₁-C₃ алканоильную группу, бензоильную группу (которая может быть замещена одной или двумя группами, которые могут быть одинаковыми или различными и выбраны из группы заместителей B), (C₁-C₃ алкокси)карбонильную группу, тиенилкарбонильную группу, фурилкарбонильную группу или пиридилкарбонильную группу); R² представляет собой атом водорода; n равно 1; и X представляет собой атом кислорода или атом серы.

(18) соединения, где R¹ представляет собой группу, представленную формулой CH₂NR⁷R⁸ (где R⁷ представляет собой атом водорода или метильную группу; и R⁸ представляет собой атом водорода, бензоильную группу (которая может быть замещена одной или двумя группами, которые могут быть одинаковыми или различными и выбраны из группы заместителей B), (2-тиенил)-карбонильную группу, (2-фурил)-карбонильную группу или (3-пиридил)карбонильную группу); R² представляет собой атом водорода; n равно 1, и X представляет собой атом кислорода или атом серы.

Некоторые соединения (I) по настоящему изобретению более конкретно представлены в качестве примеров в таблицах 1-5. Следует заметить, что соединения (I) по настоящему изобретению не ограничены этими соединениями, приведенными в качестве примера.

В таблицах 1-5, Me представляет собой метильную группу, Et - этильную группу, Pr - пропильную группу, iPr - изопропильную группу, Bu - бутильную группу, Pen - пентильную группу, Hex - гексильную группу, cPr - циклопропильную группу, cBu - циклобутильную группу, cPen - циклопентильную группу, cHex - циклогексильную группу, Azt - азетидинильную группу, Pyr - пирролидинильную группу, Pip - пиперидинильную группу и Ph - фенильную группу. Термин “положение” обозначает положение связи атома серы.

Среди соединений, приведенных в таблицах выше в качестве примеров, предпочтительными соединениями в таблице 1 являются соединения по примерам с номерами: 1, 2, 3, 13, 14, 15, 26, 27, 28, 38, 39, 40, 51, 52, 53, 63, 64, 65, 76, 77, 78, 88, 89, 90, 101, 102, 103, 113, 114, 115, 126, 127, 128, 138, 139 и 140,

предпочтительными соединениями в таблице 2 являются соединения по примерам с номерами:

предпочтительными соединениями в таблице 3 являются соединения по примерам с номерами: 1, 3, 5, 7, 9 и 11,

предпочтительными соединениями в таблице 4 являются соединения по примерам с номерами: 1, 2, 11, 12, 21, 22, 31, 32, 41, 42, 51, 52, 61, 62, 71, 72, 81, 82, 91, 92, 101, 102, 111 и 112 и

предпочтительными соединениями в таблице 5 являются соединения по примерам с номерами:

Из них, более предпочтительными соединениями в таблице 1 являются соединения по примерам с номерами: 3, 28, 53, 78, 103 и 128,

более предпочтительными соединениями в таблице 2 являются соединения по примерам с номерами:

более предпочтительными соединениями в таблице 3 являются соединения по примерам с номерами: 1, 3, 7 и 11,

более предпочтительными соединениями в таблице 4 являются соединения по примерам с номерами: 1, 2, 21, 22, 41, 42, 61, 62, 81, 82, 101 и 102 и

более предпочтительными соединениями в таблице 5 являются соединения по примерам с номерами:

Наиболее предпочтительные соединения перечислены далее:

(1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-[1-(4-гидроксиметил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-[1-(4-гидроксиметил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-[1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-[1-(4-циано-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-[1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-[1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-[1-(4-азетидинокарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-[1-(4-азетидинокарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-аминоазетидино)карбонил-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-аминоазетидино)карбонил-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-гидроксиазетидино)карбонил-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-гидроксиазетидино)карбонил-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-[1-(4-тиоморфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-[1-(4-тиоморфолинoкарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(пиперидин-4-илкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(пиперидин-4-илкарбамоил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(азетидин-3-илкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(азетидин-3-илкарбамоил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3S)-пирролидин-3-илкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3S)-пирролидин-3-илкарбамоил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3R)-пирролидин-3-илкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3R)-пирролидин-3-илкарбамоил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(пиперазин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(пиперазин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-аминоэтилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-аминоэтилкарбамоил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-аминометил-2-метилпропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-аминометил-2-метилпропилкарбамоил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-аминоэтил)-N-изопропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-аминоэтил)-N-изопропилкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-гидроксиэтил)-N-изопропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-гидроксиэтил)N-изопропилкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-[1-(4-аминометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-[1-(4-аминометил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(бензоиламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(бензоиламинометил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(бензолсульфониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(бензолсульфониламинометил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(тиофен-2-карбониламино)метил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(тиофен-2-карбониламино)метил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(фуран-2-карбониламино)метил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота и

(1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(фуран-2-карбониламино)метил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота.

[Способы осуществления изобретения]

Производное 1-метилкарбапенема, представленное формулой (I), по настоящему изобретению может быть получено способами, описанными в способе A и способе B, ниже.

[Способ A]

Способ A является способом получения соединения формулы (I) путем взаимодействия производного карбапенема формулы (II) с меркаптосоединением формулы (III) и затем проведением реакции удаления защиты.

В вышеуказанных формулах R¹, R², X и n имеют те же значения, которые описаны выше; L¹ представляет собой удаляемую группу; P¹ представляет собой защитную группу карбоксильной группы; и R¹p представляет собой группу R¹, которая может иметь защитную группу.

Примеры “защитной группы карбоксильной группы”, подходящей для P¹, включают в себя бензильную группу, которая может иметь заместитель (заместитель представляет собой нитро, метил, хлор или метокси), такую как бензил, 4-метоксибензил, 4-нитробензил или 2-нитробензил; бензгидрильную группу; аллильную группу, которая может иметь заместитель во 2-положении (заместитель представляет собой хлор или метил), такую как аллил, 2-хлораллил или 2-метилаллил; и группу, образующую вышеуказанные фармакологически приемлемый сложный эфир, из которых бензильная группа, которая может иметь заместитель (в частности, 4-нитробензильная группа) является предпочтительной.

Примеры “удаляемой группы”, такой как L¹, включают в себя группу формулы -OR¹¹ или -S(O)R¹².

Примеры группы R¹¹ включают в себя C₁-C₄ алкансульфонильную группу, такую как группа метансульфонил, трифторметансульфонил, этансульфонил, пропансульфонил, изопропансульфонил или бутансульфонил; группу C₆-C₁₀ арилсульфонил, такую как фенилсульфонил, толилсульфонил или нафтилсульфонил; группу ди-C₁-C₆ алкилфосфорил, такую как диметилфосфорил, диэтилфосфорил, дипропилфосфорил, диизопропилфосфорил, дибутилфосфорил, дипентилфосфорил или дигексилфосфорил; или группу ди-C₆-C₁₀ арилфосфорил, такую как дифенилфосфорил или дитолилфосфорил, из которых дифенилфосфорильная группа является предпочтительной.

Примеры группы R¹² включают в себя C₁-C₄ алкильную группу, такую как метил, этил, пропил или изопропил; галоген C₁-C₄ алкильную группу, такую как фторметил, хлорметил, фторэтил, хлорэтил, фторпропил, дифторметил, дифторэтил, дихлорэтил, трифторметил или трифторэтил; 2-ацетиламиноэтильную группу; 2-ацетиламиновинильную группу; или C₆-C₁₀ арильную группу (арильная группа может иметь от 1 до 3 заместителей, которые могут быть одинаковыми или различными, и заместители могут включать в себя атом галогена, такой как фтор, хлор или бром; C₁-C₄ алкильную группу, такую как метил, этил, пропил или изопропил; C₁-C₄ алкоксигруппу, такую как метокси, этокси, пропокси или изопропокси; (C₁-C₄ алкокси)карбонильную группу, такую как метоксикарбонил, этоксикарбонил или трет-бутоксикарбонил; карбамоил, моно- или ди-(C₁-C₄ алкил)карбамоильную группу; нитрогруппу; гидроксильную группу; или цианогруппу), такую как фенил или нафтил, которая может иметь заместителей; или гетероарильную группу, которая может иметь один или два атома азота (гетероарильная группа может иметь от одного до трех заместителей, которые могут быть одинаковыми или различными, и заместители могут включать в себя атом галогена, такой как фтор, хлор или бром; C₁-C₄ алкильную группу, такую как метил, этил, пропил или изопропил; C₁-C₄ алкоксигруппу, такую как метокси, этокси, пропокси или изопропокси; (C₁-C₄ алкокси)карбонильную группу, такую как метоксикарбонил, этоксикарбонил или трет-бутоксикарбонил; карбамоил или моно- или ди-(C₁-C₄ алкил)карбамоильную группу; нитрогруппу; гидроксильную группу; или цианогруппу), такую как пиридил или пиримидинил, которая может иметь заместители.

Примеры “защитной группы гидроксильной группы”, включенной в определение R¹p, включают в себя бензилоксикарбонильную группу, которая может быть замещена (заместители могут включать нитро, метил, хлор или метокси), такую как бензилоксикарбонил, 4-нитробензилоксикарбонил, 4-хлорбензилоксикарбонил или 4-метоксибензилоксикарбонил; аллилоксикарбонильную группу, которая может быть замещена во 2-положении (заместители могут включать хлор или метил), такую как аллилоксикарбонил, 2-хлораллилоксикарбонил и 2-метилаллилоксикарбонил; три-(C₁-C₄ алкил)силилгруппу, такую как триметилсилил, триэтилсилил или трет-бутилдиметилсилил; и группу, образующую вышеуказанный фармакологически приемлемый сложный эфир, из которых три-(C₁-C₄ алкил)силильная группа (особенно трет-бутилдиметилсилильная группу) является предпочтительной.

Примеры “защитной группы аминогруппы”, включенной в R¹p, включают в себя аллилоксикарбонильную группу, которая может быть замещена во 2-положении (заместитель может включать в себя хлор или метил), такую как аллилоксикарбонил, 2-хлораллилоксикарбонил и 2-метилаллилоксикарбонил; и бензилоксикарбонильную группу, которая может быть замещена (заместитель может включать в себя метил, метокси, хлор или нитро), такую как бензилоксикарбонил, 4-метилбензилоксикарбонил, 4-метоксибензилоксикарбонил, 4-хлорбензилоксикарбонил или 4-нитробензилоксикарбонил, из которых аллилоксикарбонильная группа или 4-нитробензилоксикарбонильная группа является предпочтительной и 4-нитробензилоксикарбонильная группа является более предпочтительной.

Защитная группа, используемая вышеуказанная как P¹, может использоваться в качестве “защитной группы карбоксильной группы”, включенной в R¹p.

Настоящий способ представляет собой способ, в котором соединение формулы (IV) получают путем взаимодействия соединения формулы (II) с соединением формулы (III) в присутствии основания (стадия A1), и соединение формулы (I) затем получают путем удаления любых защитных групп (стадия A2). В случае, когда L¹ представляет собой группу, представленную формулой: -OR¹¹, соединение формулы (II), которое используют в качестве исходного вещества, получают способом, описанным D.H. Shih et al., Heterocycls 21, 29 (1984), или способом, аналогичным ему. В случае, когда L¹ представляет собой группу, представленную формулой: -S(O)R¹², исходное соединение (II) получают способом, описанным в японской патентной заявке (Kokai) No. Sho 62-30781 или способом, аналогичным ему. Каждая стадия описана ниже.

(Стадия A1)

Стадия A1 является стадией получения соединения формулы (IV), которую проводят путем взаимодействия соединения формулы (II) с меркаптановым производным формулы (III) в присутствии основания в инертном растворителе.

Нет конкретных ограничений в отношении природы используемого растворителя, при условии, что он не оказывает неблагоприятного воздействия на реакцию и что он в определенной степени растворяет исходные продукты. Примеры подходящих растворителей включают в себя гелогенированные углеводороды, такие как метиленхлорид, 1,2-дихлорэтан или хлороформ; нитрилы, такие как ацетонитрил; амиды, такие как N,N-диметилформамид или N,N-диметилацетамид; сложные эфиры, такие как этилацетат или метилацетат; и простые эфиры, такие как диэтиловый эфир, тетрагидрофуран или диоксан, из которых ацетонитрил, N,N-диметилформамид или тетрагидрофуран является предпочтительным и ацетонитрил является особенно предпочтительным.

Предпочтительные примеры используемого основания включают в себя органические амины, такие как триэтиламин, диизопропилэтиламин, пиридин или диметиламинопиридин; или неорганические основания, такие как карбонат калия, карбонат натрия или гидрокарбонат натрия, из которых предпочтительными являются органические амины (особенно диизопропилэтиламин).

Взаимодействие обычно проводят при температуре от -20° C до 40° C (предпочтительно, от -10° C до 20° C). Время реакции находится в области от 30 минут до 108 часов (предпочтительно от одного до 18 часов).

После завершения реакции, желаемое соединение формулы (IV), которое является продуктом данной стадии, выделяют из реакционной смеси известными способами; например, добавлением в реакционную смесь или к остатку, полученному путем отгонки растворителя из реакционной смеси органическим растворителем, который не смешивается с водой, с последующей промывкой водой и отгонкой растворителя. Если необходимо, желаемое соединение, полученное таким образом, может быть затем очищено известными способами, например, перекристаллизацией, переосаждением или хроматографией. Если желательно, соединение формулы (IV) также можно подвергнуть следующей стадии без выделения.

(Стадия A2)

Стадия A2 является стадией преобразования соединения формулы (IV) в соединение формулы (I), которую проводят удалением любых защитных групп, содержащихся в соединении формулы (IV).

Хотя способ удаления защитной группы зависит от типа защитной группы, его проводят способом, обычно используемым в области химии органического синтеза (например, способом, описанным в Protective Groups in Organic Synthesis, второе издание, John Wiley & Sons, Inc. 1991, T.W. Greene и P.G.M. Wuts).

(1) Если защитная группа представляет собой бензильную группу, которая может иметь заместитель, бензгидрильную группу или бензилоксикарбонильную группу, которая может иметь заместитель, эти защитные группы могут быть удалены путем взаимодействия с водородом в присутствии агента каталитического восстановления в растворителе.

Примеры используемого агента каталитического восстановления включают в себя катализатор палладий на угле, платиновый катализатор или катализатор родий на угле, из которых катализатор палладий на угле является предпочтительным.

Нет конкретных ограничений в отношении природы используемого растворителя, при условии, что он не оказывает неблагоприятного воздействия на реакцию и что он в определенной степени растворяет исходные продукты. Предпочтительные примеры подходящих растворителей включают в себя спирты, такие как метанол или этанол; простые эфиры, такие как тетрагидрофуран или диоксан; и смесь этих органических растворителей и воды, из которых смесь тетрагидрофурана и воды является предпочтительной.

Реакционная температура обычно находится в области от 0° C до 50° C (предпочтительно, от 10° C до 40° C). Хотя время реакции зависит от исходного продукта и природы катализатора, оно обычно составляет от 5 минут до 12 часов (предпочтительно, от 30 минут до 4 часов).

После завершения реакции желаемое соединение выделяют из реакционной смеси известными способами. Например, желаемое соединение может быть получено фильтрацией нерастворимых компонентов, таких как катализатор, из реакционной смеси и затем отгонкой растворителя. Если необходимо, соединение, полученное таким образом, может быть очищено с помощью обычных способов, таких как перекристаллизация, препаративная тонкослойная хроматография или колоночная хроматография.

(2) Если защитная группа представляет собой аллильную группу, которая может быть замещена, или аллилоксикарбонильную группу, которая может быть замещена, эти защитные группы могут быть удалены путем взаимодействия с три-(C₁-C₆ алкил)олово гидридом и щелочно-земельной солью органической карбоновой кислоты в присутствии соединения палладия в растворителе. Могут быть добавлены органические основания или органические вещества для захвата аллильных групп.

Соединение палладия может предпочтительно включают в себя хлорид бис(трифенилфосфин)палладия или тетракис(трифенилфосфин)палладий. Гидрид триалкилолова может предпочтительно включать в себя гидрид трибутилолова. Щелочно-земельная соль органической карбоновой кислоты может предпочтительно включать в себя калий 2-этилгексаноат или натрий 2-этилгексаноат. Органическое основание для захвата аллильных групп может предпочтительно включать в себя морфолин, и органические вещества для захвата аллильных групп могут предпочтительно включать в себя димедон.

Предпочтительные сочетания агентов снятия защиты могут включают в себя сочетание хлорида бис(трифенилфосфин)палладия и гидрида трибутилолова или сочетание тетракис(трифенилфосфин)палладия и калий 2-этилгексаноата.

Нет конкретных ограничений в отношении природы используемого растворителя, при условии, что он не оказывает неблагоприятного воздействия на реакцию и что он в определенной степени растворяет исходные продукты. Примеры подходящих растворителей включают в себя галогенированные углеводороды, такие как метиленхлорид, хлороформ или 1,2-дихлорэтан; сложные эфиры, такие как этилацетат; простые эфиры, такие как тетрагидрофуран, диоксан или 1,2-диметоксиэтан; нитрилы, такие как ацетонитрил; спирты, такие как метанол, этанол или пропанол; воду; или смесь этих растворителей, из которых метиленхлорид, этилацетат или смесь этих растворителей является предпочтительной.

Хотя не существует конкретного ограничения в отношении температуры реакции, реакцию обычно проводят при температуре от -20° C до 100° C (предпочтительно, от 0° C до 60° C). Время реакции обычно составляет от 30 минут до 48 часов (предпочтительно, от 30 минут до 12 часов).

После завершения реакции, желаемое соединение выделяют из реакционной смеси известными способами. Например, желаемое соединение может быть получено фильтрацией нерастворимых веществ, выпавших из реакционной смеси, и затем отгонкой растворителя. Если необходимо, соединение, полученное таким образом, может быть очищено с помощью обычных способов, таких как перекристаллизация, препаративная тонкослойная хроматография или колоночная хроматография.

(3) Когда защитной группой является защитная группа, основанная на силиле, эта защитная группа может быть удалена путем обработки источником фторид-анионов, таким как фторид тетрабутиламмония, фтористоводородная кислота, фтористоводородная кислота-пиридин или калий фторид, или обработкой органической кислотой, такой как уксусная кислота, метансульфоновая кислота, пара-толуолсульфоновая кислота, трифторуксусная кислота или трифторметансульфоновая кислота, или неорганической кислотой, такой как хлористоводородная кислота, в растворителе.

Если защитную группу удаляют с помощью фторид-аниона, реакцию иногда проводят в мягких условиях, путем добавления органической кислоты, такой как муравьиная кислота, уксусная кислота или пропионовая кислота.

Нет конкретных ограничений в отношении природы используемого растворителя, при условии, что он не оказывает неблагоприятного воздействия на реакцию и что он в определенной степени растворяет исходные продукты. Предпочтительные примеры подходящих растворителей включают в себя простые эфиры, такие как диэтиловый эфир, диизопропил эфир, тетрагидрофуран, диоксан, диметоксиэтан или диметиловый эфир диэтиленгликоля; нитрилы, такие как ацетонитрил или изобутиронитрил; воду; органические кислоты, такие как уксусная кислота; и смесь этих растворителей.

Реакционная температура обычно находится в области от 0° C до 100° C (предпочтительно, от 10° C до 30° C). Хотя нет конкретных ограничений в отношении времени реакции, оно обычно составляет от одного часа до 24 часов (предпочтительно, от одного часа до 4 часов).

После завершения реакции, желаемое соединение выделяют из реакционной смеси известными способами, например, добавлением в реакционную среду или к остатку, полученному после отгонки растворителя из реакционной смеси, органического растворителя, который является нерастворимым в воде, затем промывкой водой и отгонкой растворителя. Если необходимо, желаемое соединением, полученное таким образом, может быть в дальнейшем очищено известными способами, например, перекристаллизацией, переосаждением или хроматографией.

(4) Когда защитная группа представляет собой группу, образующую фармакологически приемлемый сложный эфир карбоксильной группы или гидроксильной группы, эти защитные группы удаляют путем последующего взаимодействия гидролазы в воде или в смеси воды и органического растворителя.

Предпочтительные примеры органического растворителя для смеси с водой включают в себя простые эфиры или спирты, растворимые в воде, такие как тетрагидрофуран, диоксан, метанол, этанол или пропанол.

Предпочтительно, чтобы в воду или в смесь воды и органического растворителя была добавлена соль щелочного метала, такая как фосфат натрия, ацетат натрия или гидрокарбонат натрия, или чтобы pH поддерживалось в области от 6 до 8, используя pH буферный раствор, такой как раствор, забуференный фосфорной кислотой.

Нет ограничений в отношении природы гидролазы, при условии, что она могла гидролизовать сложно-эфирную связь. Примеры такой гидролазы включают в себя эстеразу, полученную из печени свиньи.

Время реакции обычно находится в области от 10 минут до 8 часов (предпочтительно, от 30 минут до 2 часов) и температура реакции составляет от 10° C до 50° C (предпочтительно, от 30° C до 40° C).

После завершения реакции желаемое соединение может быть выделено и очищено с помощью ионно-обменной хроматографии, колоночной хроматографии с обращенными фазами, переосаждением, перекристаллизацией и тому подобное.

Когда соединение формулы (IV) содержит два или больше типов защитных групп, желаемое соединение формулы (I) может быть получено последовательным проведением вышеописанных реакций снятия защиты в сочетании. Когда желательным является фармакологически приемлемый сложный эфир соединения формулы (I), нет необходимости удалять группу, являющуюся защитной группой, образующую фармакологически приемлемый сложный эфир.

Соединение формулы (I), полученное таким образом, при необходимости может быть преобразовано в фармакологически приемлемую соль или сложный эфир в соответствии со способом или методом, известным в данной области медицинской химии, особенно в области антибиотиков, основанных на β -лактамном кольце.

Фармакологически приемлемые сложные эфиры карбоксильной группы соединения формулы (I) могут быть получены взаимодействием галогенированного соединения, соответствующего желаемому сложному эфирному остатку соединения формулы (I), в присутствии основания в растворителе.

Примеры используемого галогенированного соединения включают в себя хлорид, бромид или йодид, из которых йодид является предпочтительным. Когда используется хлорид или бромид, реакцию можно проводить путем добавления в реакционный раствор каталитического количества йодида натрия.

Примеры используемого основания включают в себя органические амины, такие как триэтиламин, диизопропилэтиламин, 4-диметиламинопиридин или пиридин; и карбонаты щелочных металлов, такие как карбонат калия, карбонат натрия или гидрокарбонат натрия, из которых органические амины (особенно 4-диметиламинопиридин) являются предпочтительными.

Нет конкретных ограничений в отношении природы используемого растворителя, при условии, что он не оказывает неблагоприятного воздействия на реакцию и что он в определенной степени растворяет исходные продукты. Примеры растворителя включают в себя нитрилы, такие как ацетонитрил; амиды, такие как N,N-диметилформамид; и галогенированные углеводороды, такие как метиленхлорид, из которых амиды (особенно диметилацетамид) или нитрилы (особенно ацетонитрил) являются предпочтительными.

Температура реакции обычно находится в области от -20° C до 50° C (предпочтительно, от -10° C до 20° C), и время реакции обычно составляет от 0,5 часов до 108 часов (предпочтительно, от одного часа до 24 часов).

Соединение сначала выделяют в виде соли путем взаимодействия соединения формулы (I) с основанием, которое также может взаимодействовать с галогенидами, указанными выше.

Альтернативно, соединение формулы (I) может быть получено путем взаимодействия спирта, соответствующего желаемому сложноэфирному остатку соединения формулы (I), в присутствии конденсирующего агента и основания.

Примеры конденсирующего агента включают в себя реактивы Мицунобу (Mitsunobu), такие как диэтилазодикарбоксилат; конденсирующие агенты на основе фосфорного эфира, такие как дифенилфосфорилазид; конденсирующие агенты на основе карбодиимида, такие как дициклогексилкарбодиимид или 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид; и ониевые конденсирующие агенты, такие как 2-хлор-1-метилпиридиний йодид.

Примеры используемого основания включают в себя органические амины, такие как триэтиламин, трибутиламин, диизопропилэтиламин или 4-диметиламинопиридин.

Примеры других добавок включают в себя фосфины, такие как трифенилфосфин и трибутилфосфин; и спирты для образования активных сложных эфиров, такие как 1-гидроксибензотриазол.

Примеры растворителя включают в себя галогенированные углеводороды, такие как метиленхлорид или дихлорэтан; амиды, такие как N,N-диметилформамид; нитрилы, такие как ацетонитрил; и простые эфиры, такие как тетрагидрофуран.

Примеры предпочтительного их сочетания включают в себя диэтилазодикарбоксилат и трифенилфосфин; 2-хлор-1-метилпиридиний йодид и трибутиламин или триэтиламин; 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид и 4-диметиламинопиридин или 1-гидроксибензотриазол.

После завершения реакции желаемое соединение выделяют из реакционной смеси известными способами, например, добавлением в реакционную смесь или в остаток, полученный отгонкой растворителя из реакционной смеси, органического растворителя, который нерастворим в воде, затем промывкой водой и отгонкой растворителя. Если необходимо, желаемое соединение, полученное таким образом, может быть затем очищено с помощью обычных способов, например, перекристаллизацией, переосаждением или хроматографией.

[Способ B]

Способ B представляет собой способ получения соединения формулы (III), используемого в качестве исходного продукта в способе A.

В вышеуказанной схеме:

R¹p, R², X и n имеют те же значения, которые указаны выше;

P² представляет собой защитную группу карбоксильной группы; примеры P² включают в себя C₁-C₄ алкильную группу, такую как метил, этил, пропил или бутил; и бензильную группу, которая может быть замещена, такую как бензил или 4-метоксибензил, из которых C₁-C₄ алкильная группа является предпочтительной и этильная группа является особенно предпочтительной;

P³ представляет собой защитную группу гидроксильной группы; примеры P³ включают в себя защитную группу на основе силила, такую как триметилсилил, триэтилсилил, трет-бутилдиметилсилил или трет-бутилдифенилсилил, из которых трет-бутилдифенилсилильная группа является предпочтительной;

L² представляет собой удаляемую группу; примеры L² включают в себя атом галогена, такой как атом хлора, атом брома или атом йода; C₁-C₄ алкилсульфонилоксигруппу, которая может быть замещена фтором или бензолсульфонилоксигруппой, которая может быть замещена алкилом, такую как метансульфонилокси, этансульфонилокси, трифторметансульфонилокси, бензолсульфонилокси или толуолсульфонилокси, из которых C₁-C₄ алкилсульфонилоксигруппа, которая может быть замещена фтором, является предпочтительной; и

P⁴ представляет собой защитную группу меркаптогруппы; примеры P⁴ включают в себя C₁-C₄ алканоильную группу, такую как группа формил, ацетил, пропионил или бутирил и бензоил, которая может быть замещена, такую как бензоил, толуоил или анизоил, из которых C₁-C₄ алканоильная группа (особенно ацетильная группа) является предпочтительной.

(Стадия B1)

Стадия B1 представляет собой стадию получения соединения формулы (VI) путем введения амидной группы, представленной формулой C(=X)NH₂ в атом азота соединения формулы (V).

(1) Эту стадию проводят путем взаимодействия цианата или тиоцианата с соединением формулы (V) в растворителе.

Нет конкретных ограничений в отношении природы используемого растворителя, при условии, что он не оказывает неблагоприятного воздействия на реакцию и что он в определенной степени растворяет исходные продукты. Примеры растворителя включают в себя простые эфиры, такие как тетрагидрофуран или диэтиловый эфир; галогенированные углеводороды, такие как метиленхлорид или дихлорэтан; и смеси этих растворителей и воды, из которых смесь простого эфира и воды (особенно смесь тетрагидрофурана и воды) являются предпочтительными.

Примеры солей циановой кислоты или тиоциановой кислоты включают в себя соли щелочных металлов, такие как соль натрия или соль калия; соль аммония; или соли органического аммония, такие как соль триэтиламмония, из которых соли щелочных металлов (особенно соль калия) являются предпочтительными.

Для преобразования цианата или тиоцианата в соответствующую кислоту в этой системе также могут использоваться кислоты. Примеры такой кислоты включают в себя органические кислоты, такие как уксусная кислота, и неорганические кислоты, такие как хлористоводородная кислота, из которых уксусная кислота или хлористоводородная кислота являются предпочтительными.

Температура реакции обычно находится в области от -20° C до 150° C (предпочтительно от -10° C до 100° C), и время реакции обычно составляет от 0,5 до 108 часов (предпочтительно, от 1 до 24 часов).

После завершения взаимодействия желаемое соединение выделяют из реакционной смеси известными способами. Например, желаемое соединение может быть выделено добавлением органического растворителя, нерастворимого в воде, к остатку, полученному отгонкой реакционной смеси, или растворителя в реакционную смесь, промывкой водой и отгонкой растворителя. Желаемое соединение, полученное таким образом, может затем, если необходимо, быть очищено обычными способами, такими как перекристаллизация, переосаждение или хроматография.

(2) Альтернативно, эта стадия может быть осуществлена следующим способом. Данный способ включает в себя взаимодействие с получением нижеуказанного соединения формулы (XIII) из соединения формулы (V) и взаимодействие с получением соединения формулы (VI) из соединения формулы (XIII).

В вышеуказанной формуле, X и n имеют те же значение, которые описаны выше, и R⁹ представляет собой C₁-C₄ алкильную группу (предпочтительно, этильную группу).

Стадию получения соединения (XIII) из соединения (V) проводят взаимодействием соединения, представленного формулой X=C=N-COOR⁹ (где X и R⁹ имеют те же значения, которые описаны выше) и соединения формулы (V) в растворителе.

Нет конкретных ограничений в отношении природы используемого растворителя, при условии, что он не оказывает неблагоприятного воздействия на реакцию и что он в определенной степени растворяет исходные продукты. Примеры растворителя включают в себя простые эфиры, такие как тетрагидрофуран или диэтиловый эфир; галогенированные углеводороды, такие как метиленхлорид или дихлорэтан; и смесь этих растворителей и воды, из которых простой эфир или смесь эфира и воды (особенно, тетрагидрофуран или смесь тетрагидрофурана и воды) являются предпочтительными.

Температура реакции обычно находится в области от -20° C до 150° C (предпочтительно, от -10° C до 50° C), и время реакции обычно составляет от 0,5 до 108 часов (предпочтительно от одного до 24 часов).

После завершения взаимодействия желаемое соединение выделяют из реакционной смеси известными способами. Например, желаемое соединение может быть выделено добавлением органического растворителя, нерастворимого в воде, к остатку, полученному отгонкой реакционной смеси, или растворителя в реакционную смесь, промывкой водой и отгонкой растворителя. Желаемое соединение, полученное таким образом, может затем, если необходимо, быть очищено обычными способами, такими как перекристаллизация, переосаждение или хроматография.

Стадию получения соединения формулы (VI) из соединения формулы (XIII) проводят взаимодействием основания с соединением (XIII) в растворителе.

Нет конкретных ограничений в отношении природы используемого растворителя, при условии, что он не оказывает неблагоприятного воздействия на реакцию и что он в определенной степени растворяет исходные продукты. Примеры растворителя включают в себя спирты, такие как метанол или этанол; простые эфиры, такие как тетрагидрофуран или диэтиловый эфир; и смесь этих растворителей и воды, из которых предпочтительными являются спирт или смесь спирта и воды (особенно этанол или смесь этанола и воды).

Примеры используемого основания включают в себя неорганические основания, такие как гидроксид натрия, гидроксид калия, гидрокарбонат натрия, карбонат натрия и карбонат калия; и органические основания, такие как метоксид натрия и этоксид натрия, из которых предпочтительным является гидроксид натрия.

Температура реакции обычно находится в области от -20° C до 150° C (предпочтительно, от -10° C до 100° C), и время реакции обычно составляет от 0,5 до 108 часов (предпочтительно от одного до 24 часов).

После завершения взаимодействия желаемое соединение выделяют из реакционной смеси известными способами. Например, желаемое соединение может быть выделено добавлением органического растворителя, нерастворимого в воде, к остатку, полученному отгонкой реакционной смеси, или растворителя в реакционную смесь, промывкой водой и отгонкой растворителя. Желаемое соединение, полученное таким образом, может затем, если необходимо, быть очищено обычными способами, такими как перекристаллизация, переосаждение или хроматография.

(Стадия B2)

Стадия B2 представляет собой стадию получения соединения формулы (VII), где амидную группу соединения формулы (VI) подвергают реакции замыкания кольца.

Эту стадию проводят взаимодействием соединения, представленного формулой R²CHL³COCOOP² (где R² и P² имеют те же значения, которые определены выше, и L³ представляет собой удаляемую группу) с соединением формулы (VI) в присутствии основания в растворителе. Предпочтительные примеры удаляемой группы L³ включают в себя атом галогена, из которых атом брома является особенно предпочтительным.

Нет конкретных ограничений в отношении природы используемого растворителя, при условии, что он не оказывает неблагоприятного воздействия на реакцию и что он в определенной степени растворяет исходные продукты. Примеры растворителя включают в себя спирты, такие как метанол или этанол; простые эфиры, такие как тетрагидрофуран или диэтиловый эфир; галогенированные углеводороды, такие как метиленхлорид или дихлорэтан; и амиды, такие как N,N-диметилформамид, из которых предпочтительными являются спирты (особенно этанол).

Примеры используемого основания включают в себя органические основания, такие как триэтиламин и диизопропиламин; и неорганические основания, такие как карбонат натрия, карбонат калия и гидрокарбонат натрия, из которых предпочтительными являются органические основания (особенно триэтиламин).

Температура реакции обычно находится в области от -20° C до 150° C (предпочтительно, от -10° C до 100° C), и время реакции обычно составляет от 0,5 до 108 часов (предпочтительно от одного до 24 часов).

После завершения взаимодействия желаемое соединение выделяют из реакционной смеси известными способами. Например, желаемое соединение может быть выделено добавлением органического растворителя, нерастворимого в воде, к остатку, полученному отгонкой реакционной смеси, или растворителя в реакционную смесь, промывкой водой и отгонкой растворителя. Желаемое соединение, полученное таким образом, может затем, если необходимо, быть очищено обычными способами, такими как перекристаллизация, переосаждение или хроматография.

(Стадия B3)

Стадия B3 представляет собой стадию получения соединения формулы (VIII) путем введения защитной группы P³ в гидроксильную группу соединения формулы (VII).

Эту стадию можно проводить способом, обычно используемом в области синтетической органической химии (например, способом, описанным в Protective Groups in Organic Synthesis, второе издание, John Wiley & Sons, Inc. 1991, авторы T.W. Greene и P.G.M. Wuts).

Введение защитной группы на основе силила проводят взаимодействием галогенида силила или трифлата силила, имеющего желаемый заместитель, с соединением формулы (VII) в присутствии основания в растворителе.

Примеры галогенида силила включают в себя хлорид триметилсилила, хлорид триэтилсилила, хлорид трет-бутилдиметилсилила и хлорид трет-бутилдифенилсилила, из которых предпочтительным является хлорид трет-бутилдифенилсилила.

Примеры трифлата силила включают в себя трифлат триметилсилила, трифлат триэтилсилила, трифлат трет-бутилдиметилсилила и трифлат трет-бутилдифенилсилила, из которых предпочтительным является трифлат трет-бутилдифенилсилила.

Нет конкретных ограничений в отношении природы используемого растворителя, при условии, что он не оказывает неблагоприятного воздействия на реакцию и что он в определенной степени растворяет исходные продукты. Примеры растворителя включают в себя амиды, такие как диметилформамид; галогенированные углеводороды, такие как метиленхлорид или дихлорэтан; и простые эфиры, такие как тетрагидрофуран или диэтиловый эфир, из которых предпочтительными являются амиды (особенно диметилформамид) или галогенированные углеводороды (особенно метиленхлорид).

Примеры используемого основания включают в себя органические основания, такие как имидазол, триэтиламин, лутидин, пиридин или диметиламинопиридин, из которых имидазол или 2,6-лутидин является предпочтительным.

Температура реакции обычно находится в области от -20° C до 50° C (предпочтительно, от -10° C до 40° C), и время реакции обычно составляет от 0,5 до 108 часов (предпочтительно от 1 до 24 часов).

После завершения взаимодействия желаемое соединение выделяют из реакционной смеси известными способами. Например, желаемое соединение может быть выделено добавлением органического растворителя, нерастворимого в воде, к остатку, полученному отгонкой реакционной смеси, или растворителя в реакционную смесь, промывкой водой и отгонкой растворителя. Желаемое соединение, полученное таким образом, может затем, если необходимо, быть очищено обычными способами, такими как перекристаллизация, переосаждение или хроматография.

(Стадия B4)

Стадия B4 представляет собой стадию получения соединения формулы (IX) путем преобразования группы, представленной формулой COOP² в соединении (VIII), в желаемую группу R¹p.

Эту стадию можно проводить, используя реакцию преобразования функциональных групп, обычно используемую в области синтетической органической химии. Более подробно она описана в нижеследующих способах C-H.

(Стадия B5)

Стадия B5 представляет собой стадию получения соединения формулы (X) удалением защитной группы P³ из гидроксильной группы соединения формулы (IX).

Эту стадию можно проводить способом, обычно используемым в области синтетической органической химии (например, способом, описанным в Protective Groups in Organic Synthesis, второе издание, John Wiley & Sons, Inc. 1991, авторы T.W. Greene и P.G.M. Wuts).

Если защитная группа P³ гидроксильной группы представляет собой защитную группу, основанную на силиле, ее удаление проводят тем же способом, описанным в стадии стадия A2 (3).

(Стадия B6)

Стадия B6 представляет собой стадию получения соединения (XI) путем преобразования гидроксильной группы соединения формулы (X) в удаляемую группу L².

(1) Если удаляемая группа L² является представителем сульфонилоксигруппы, эту стадию проводят взаимодействием сульфонилирующего агента с соединением формулы (X) в присутствии основания в растворителе.

Примеры используемого сульфонилирующего агента включают в себя метансульфонилхлорид, этансульфонилхлорид, трифторметансульфонилхлорид, бензолсульфонилхлорид или толуолсульфонилхлорид, из которых предпочтительным является метансульфонилхлорид.

Нет конкретных ограничений в отношении природы используемого растворителя, при условии, что он не оказывает неблагоприятного воздействия на реакцию и что он в определенной степени растворяет исходные продукты. Примеры растворителя включают в себя галогенированные углеводороды, такие как метиленхлорид, дихлорэтан или хлороформ; и простые эфиры, такие как тетрагидрофуран или диэтиловый эфир, из которых предпочтительными являются галогенированные углеводороды (особенно метиленхлорид).

Примеры используемого основания включают в себя органические основания, такие как триэтиламин, диизопропилэтиламин, пиридин или диметиламинопиридин, из которых предпочтительным является триэтиламин.

Температура реакции обычно находится в области от -20° C до 80° C (предпочтительно, от -10° C до 40° C), и время реакции обычно составляет от 0,5 до 108 часов (предпочтительно от одного до 24 часов).

После завершения взаимодействия желаемое соединение выделяют из реакционной смеси известными способами. Например, желаемое соединение может быть выделено добавлением органического растворителя, нерастворимого в воде, к остатку, полученному отгонкой реакционной смеси, или растворителя в реакционную смесь, промывкой водой и отгонкой растворителя. Желаемое соединение, полученное таким образом, может затем, если необходимо, быть очищено обычными способами, такими как перекристаллизация, переосаждение или хроматография.

(2) Если удаляемая группа L² представляет собой атом галогена, эту стадию проводят взаимодействием галогенирующего агента с соединением формулы (X) в растворителе.

Примеры используемого галогенирующего агента включают в себя пентахлорид фосфора, тионилхлорид, оксихлорид фосфора, йод, тетрабромид углерода, тетрахлорид углерода, N-хлорсукцинимид, N-бромсукцинимид или трифторид диэтиламиносеры, из которых предпочтительным является тетрабромид углерода.

Нет конкретных ограничений в отношении природы используемого растворителя, при условии, что он не оказывает неблагоприятного воздействия на реакцию и что он в определенной степени растворяет исходные продукты. Примеры растворителя включают в себя галогенированные углеводороды, такие как метиленхлорид или дихлорэтан; и простые эфиры, такие как тетрагидрофуран или диэтиловый эфир, из которых предпочтительными являются галогенированные углеводороды (особенно метиленхлорид).

Примеры используемых добавок включают в себя фосфины, такие как трифенилфосфин и трибутилфосфин, из которых предпочтительным является трифенилфосфин.

Температура реакции обычно находится в области от -20° C до 100° C (предпочтительно, от -10° C до 50° C), и время реакции обычно составляет от 10 минут до 108 часов (предпочтительно от 0,5 до 24 часов).

После завершения взаимодействия желаемое соединение выделяют из реакционной смеси известными способами. Например, желаемое соединение может быть выделено добавлением органического растворителя, нерастворимого в воде, к остатку, полученному отгонкой реакционной смеси, или растворителя в реакционную смесь, промывкой водой и отгонкой растворителя. Желаемое соединение, полученное таким образом, может затем, если необходимо, быть очищено обычными способами, такими как перекристаллизация, переосаждение или хроматография.

(Стадия B7)

Стадия B7 представляет собой стадию получения соединения формулы (XII) путем преобразования удаляемой группы L² соединения формулы (XI) в защищенную меркаптогруппу.

Эту стадию проводят взаимодействием агента, образующего меркаптогруппу, с соединением формулы (XI) в растворителе.

Примеры используемого агента, образующего меркаптогруппу, включают в себя соли щелочных металлов тиокарбоновых кислот, такие как тиоацетат натрия, тиоацетат калия, тиопропионат натрия или тиобензоат натрия; или соли щелочных металлов 4-метоксибензилмеркаптана, из которых предпочтительным является тиоацетат калия.

Нет конкретных ограничений в отношении природы используемого растворителя, при условии, что он не оказывает неблагоприятного воздействия на реакцию и что он в определенной степени растворяет исходные продукты. Примеры растворителя включают в себя простые эфиры, такие как тетрагидрофуран или диоксан; ацетаты, такие как этилацетат или метилацетат; нитрилы, такие как ацетонитрил; и амиды, такие как диметилформамид или диметилацетамид, из которых предпочтительным является амид (особенно диметилформамид).

Температура реакции обычно находится в области от -20° C до 150° C (предпочтительно от 0° C до 100° C), и время реакции обычно составляет от 0,5 до 108 часов (предпочтительно, от одного до 24 часов).

После завершения взаимодействия желаемое соединение выделяют из реакционной смеси известными способами. Например, желаемое соединение может быть выделено добавлением органического растворителя, нерастворимого в воде, к остатку, полученному отгонкой реакционной смеси, или растворителя в реакционную смесь, промывкой водой и отгонкой растворителя. Желаемое соединение, полученное таким образом, может затем, если необходимо, быть очищено обычными способами, такими как перекристаллизация, переосаждение или хроматография.

(Стадия B8)

Стадия B8 представляет собой стадию получения соединения формулы (III) путем удаляения защитной группы P⁴ меркаптогруппы соединения формулы (XII).

(1) Когда защитная группа P⁴ представляет собой алканоильную группу или арилкарбонильную группу, эту стадию проводят взаимодействием соли гидразинового соединения с соединением (XII) в растворителе.

Примеры соли гидразинового соединения включают в себя гидразин/уксусную кислоту или N,N-диметилгидразин/уксусную кислоту, из которых гидразин/уксусная кислота является предпочтительной.

В качестве используемого растворителя, могут использоваться растворители, используемые в вышеуказанной первой стадии.

Температура реакции конкретно не ограничена и обычно находится в области от -10° C до 40° C (предпочтительно, от 10° C до 30° C). Хотя время реакции зависит от растворителя, температуры реакции и природы реагента, оно обычно составляет от 30 минут до 24 часов (предпочтительно, от одного часа до 8 часов).

После завершения взаимодействия желаемое соединение выделяют из реакционной смеси известными способами. Например, желаемое соединение может быть выделено добавлением органического растворителя, нерастворимого в воде, к остатку, полученному отгонкой реакционной смеси, или растворителя в реакционную смесь, промывкой водой и отгонкой растворителя. Желаемое соединение, полученное таким образом, может затем, если необходимо, быть очищено обычными способами, такими как перекристаллизация, переосаждение или хроматография.

Когда в качестве агента для снятия защиты используется соль гидразинового соединения, в качестве исходного продукта может использоваться соединение формулы (III) вышеописанной стадии A1 без выделения его из реакционного раствора.

Данную стадию также проводят путем взаимодействия основания с соединением формулы (XII) в растворителе.

Примеры используемого основания включают в себя соли щелочных металлов, такие как гидроксид натрия, гидроксид калия, карбонат калия, карбонат натрия, метоксид натрия или этоксид натрия, из которых предпочтительной является метоксид натрия.

Нет конкретных ограничений в отношении природы используемого растворителя, при условии, что он не оказывает неблагоприятного воздействия на реакцию и что он в определенной степени растворяет исходные продукты. Примеры растворителя включают в себя спирты, такие как метанол или этанол; простые эфиры, такие как тетрагидрофуран или диэтиловый эфир; амиды, такие как диметилформамид; и галогенированные углеводороды, такие как метиленхлорид или дихлорэтан, из которых предпочтительными являются спирты (особенно метанол).

Температура реакции обычно находится в области от -20° C до 100° C (предпочтительно, от -10° C до 40° C), и время реакции обычно составляет от 10 минут до 108 часов (предпочтительно от 0,5 до 24 часов).

После завершения взаимодействия желаемое соединение выделяют из реакционной смеси известными способами. Например, желаемое соединение может быть выделено добавлением органического растворителя, нерастворимого в воде, к остатку, полученному отгонкой реакционной смеси, или растворителя в реакционную смесь, промывкой водой и отгонкой растворителя. Желаемое соединение, полученное таким образом, может затем, если необходимо, быть очищено обычными способами, такими как перекристаллизация, переосаждение или хроматография.

(2) Когда P⁴ представляет собой 4-метоксибензильную группу, данную стадию проводят путем взаимодействием кислоты с соединением формулы (XII) в растворителе.

Примеры используемой кислоты включают в себя сульфоновые кислоты, такие как метансульфоновая кислота или трифторметансульфоновая кислота, из которых предпочтительной является трифторметансульфоновая кислота. Взаимодействие может быть ускорено одновременным присутствием анизола или тиоанизола.

Нет конкретных ограничений в отношении природы используемого растворителя, при условии, что он не оказывает неблагоприятного воздействия на реакцию и что он в определенной степени растворяет исходные продукты. Примеры растворителя включают в себя галогенированные углеводороды, такие как метиленхлорид или дихлорэтан; простые эфиры, такие как тетрагидрофуран или диэтиловый эфир; и необязательно замещенные уксусные кислоты, такие как уксусная кислота и трифторуксусная кислота, из которых предпочтительными являются необязательно замещенные уксусные кислоты (особенно трифторуксусная кислота).

Температура реакции обычно находится в области от -20° C до 100° C (предпочтительно, от -10° C до 80° C), и время реакции обычно составляет от 10 минут до 108 часов (предпочтительно от 0,5 до 24 часов).

После завершения взаимодействия желаемое соединение выделяют из реакционной смеси известными способами. Например, желаемое соединение может быть выделено добавлением органического растворителя, нерастворимого в воде, к остатку, полученному отгонкой реакционной смеси, или растворителя в реакционную смесь, промывкой водой и отгонкой растворителя. Желаемое соединение, полученное таким образом, может затем, если необходимо, быть очищено обычными способами, такими как перекристаллизация, переосаждение или хроматография.

[Способ C]

Способ C представляет собой способ получения соединения формулы (IX-1), имеющего желаемый остаток сложноэфирной группы, путем преобразования защищенной карбоксильной группы соединения формулы (VIII).

В представленной выше схеме, R², X, n, P² и P³ имеют те же значения, которые определены выше, и R^3p представляет собой R³, которая может быть защищена.

(Стадия C1)

Стадия C1 представляет собой стадию получения соединения (XIV) путем восстановления карбоксильной эфирной группы соединения формулы (VIII) в гидроксиметильную группу. Данную стадию проводят путем взаимодействия восстанавливающего агента с соединением формулы (VIII) в растворе.

Используемый восстанавливающий агент конкретно не ограничен, при условии, что он может преобразовывать карбоксильную эфирную группу в гидроксиметильную группу путем восстановления. Примеры восстанавливающего агента включают в себя гидриды щелочного металла-алюминия, такие как литийалюминийгидрид; и боргидриды щелочного металла, такие как литийборгидрид или натрийборгидрид, из которых предпочтительным является литийалюминий гидрид.

Нет конкретных ограничений в отношении природы используемого растворителя, при условии, что он не оказывает неблагоприятного воздействия на реакцию и что он в определенной степени растворяет исходные продукты. Примеры растворителя включают в себя простые эфиры, такие как тетрагидрофуран или диэтиловый эфир, из которых предпочтительным является тетрагидрофуран.

Температура реакции обычно находится в области от -20° C до 100° C (предпочтительно, от -10° C до 40° C), и время реакции обычно составляет от 10 минут до 24 часов (предпочтительно от 0,5 до 24 часов).

После завершения взаимодействия желаемое соединение выделяют из реакционной смеси известными способами. Например, желаемое соединение может быть выделено добавлением органического растворителя, нерастворимого в воде, к остатку, полученному отгонкой реакционной смеси, или растворителя в реакционную смесь, промывкой водой и отгонкой растворителя. Желаемое соединение, полученное таким образом, может затем, если необходимо, быть очищено обычными способами, такими как перекристаллизация, переосаждение или хроматография.

(Стадия C2)

Стадия C2 представляет собой стадию получения соединения формулы (XV) путем окисления гидроксиметильной группы соединения формулы (XIV).

Данную стадию проводят с помощью реакционного окислительного агента с соединением формулы (XIV) в растворителе и она включает в себя стадию окисления гидроксиметильной группы в альдегидную группу и стадию окисления альдегидной группы в карбоксильную группу.

(1) Стадия окисления гидроксиметильной группы в альдегидную группу

Используемый окислительный агент конкретно не ограничен, при условии, что он может окислять гидроксиметильную группу до преобразования ее в альдегидную группу. Примеры включают в себя пиридин хлорхромат, оксалил хлорид-диметилсульфоксид, безводную трифторуксусную кислоту-диметил сульфоксид, активный диоксид марганца или реактив Десс-Мартина (Dess-Martin), из которых предпочтительным является активный диоксид марганца.

Нет конкретных ограничений в отношении природы используемого растворителя, при условии, что он не оказывает неблагоприятного воздействия на реакцию и что он в определенной степени растворяет исходные продукты. Примеры растворителя включают в себя галогенированные углеводороды, такие как метиленхлорид или дихлорэтан, из которых предпочтительным является метиленхлорид.

Температура реакции обычно находится в области от -100° C до 100° C (предпочтительно, от -100° C до 50° C), и время реакции обычно составляет от 30 минут до 108 часов (предпочтительно от одного до 24 часов).

После завершения взаимодействия желаемое соединение выделяют из реакционной смеси известными способами. Например, желаемое соединение может быть выделено добавлением органического растворителя, нерастворимого в воде, к остатку, полученному отгонкой реакционной смеси, или растворителя в реакционную смесь, промывкой водой и отгонкой растворителя. Желаемое соединение, полученное таким образом, может затем, если необходимо, быть очищено обычными способами, такими как перекристаллизация, переосаждение или хроматография.

(2) Стадия окисления альдегидной группы до карбоксильной группы

Используемый окислительный агент конкретно не ограничен, при условии, что он может окислять альдегидную группу до преобразования ее в карбоксильную группу. Примеры окислительного агента включают в себя перманганат калия, тетроксид рутения, натрий хлорит-натрий (или калий) дигидрогенфосфат-2-метил-2-бутен, из которых предпочтительным является натрий хлорит-натрий дигидрогенфосфат-2-метил-2-бутен.

Нет конкретных ограничений в отношении природы используемого растворителя, при условии, что он не оказывает неблагоприятного воздействия на реакцию и что он в определенной степени растворяет исходные продукты. Примеры растворителя включают в себя галогенированные углеводороды, такие как метиленхлорид или дихлорэтан; простые эфиры, такие как тетрагидрофуран или диэтиловый эфир; спирты, такие как трет-бутанол; и смесь этих растворителей и воды, из которых предпочтительной является смесь тетрагидрофуран-метиленхлорид-вода-трет-бутанол.

Температура реакции обычно находится в области от -20° C до 50° C (предпочтительно, от -10° C до 40° C), и время реакции обычно составляет от 10 минут до 108 часов (предпочтительно от 0,5 до 24 часов).

После завершения взаимодействия желаемое соединение выделяют из реакционной смеси известными способами. Например, желаемое соединение может быть выделено добавлением органического растворителя, нерастворимого в воде, к остатку, полученному отгонкой реакционной смеси, или растворителя в реакционную смесь, промывкой водой и отгонкой растворителя. Желаемое соединение, полученное таким образом, может затем, если необходимо, быть очищено обычными способами, такими как перекристаллизация, переосаждение или хроматография.

(Стадия C3)

Стадия C3 представляет собой стадию получения карбоновой кислоты соединения формулы (XV) альтернативным способом и ее проводят удалением защитной группы соединения (VIII). Данную стадию можно проводить тем же способом, который описан для стадии A2 способа A.

(Стадия C4)

Стадия C4 представляет собой стадию получения соединения формулы (IX-1) путем этерификации карбоксильной группы соединения формулы (XV).

(1) Данную стадию проводят с помощью взаимодействия желаемого спиртового соединения, представленного формулой R^3pOH, с соединением формулы (XV) в присутствии конденсирующего агента в растворителе.

В качестве используемого конденсирующего агента могут быть применены агенты, описанные в разделе получения сложного эфира стадии A2 способа A. Конденсация также может быть достигнута с помощью хлорангидрида, используя оксалил хлорид.

Нет конкретных ограничений в отношении природы используемого растворителя, при условии, что он не оказывает неблагоприятного воздействия на реакцию и что он в определенной степени растворяет исходные продукты. Примеры растворителя включают в себя галогенированные углеводороды, такие как метиленхлорид или дихлорэтан; простые эфиры, такие как тетрагидрофуран или диэтиловый эфир; амиды, такие как диметилформамид; и нитрилы, такие как ацетонитрил, из которых предпочтительными являются галогенированные углеводороды (особенно метиленхлорид).

Температура реакции обычно находится в области от -50° C до 100° C (предпочтительно, от -20° C до 50° C), и время реакции обычно составляет от 0,5 до 108 часов (предпочтительно от 1 до 24 часов).

После завершения взаимодействия желаемое соединение выделяют из реакционной смеси известными способами. Например, желаемое соединение может быть выделено добавлением органического растворителя, нерастворимого в воде, к остатку, полученному отгонкой реакционной смеси, или растворителя в реакционную смесь, промывкой водой и отгонкой растворителя. Желаемое соединение, полученное таким образом, может затем, если необходимо, быть очищено обычными способами, такими как перекристаллизация, переосаждение или хроматография.

(2) Данная стадия также может осуществляться путем взаимодействия желаемого соединения, представленного формулой R^3pL³, и соединения формулы (XV) в присутствии основания в растворителе. L³ представляет собой удаляемую группу, предпочтительно атом галогена (особенно атом йода или атом брома).

В качестве используемого основания могут быть использованы неорганические основания или органические основания. Неорганическое основание может включать в себя карбонат, такой как карбонат натрия, карбонат калия или карбонат цезия, или гидрокарбонат, такой как гидрокарбонат натрия или гидрокарбонат калия, предпочтительно карбонат цезия. Органическое основание может включать в себя третичный амин, такой как триэтиламин или диизопропилэтиламин; или бициклическое органическое основание, такое как DBU или DBN, предпочтительно диизопропилэтиламин.

Нет конкретных ограничений в отношении природы используемого растворителя, при условии, что он не оказывает неблагоприятного воздействия на реакцию и что он в определенной степени растворяет исходные продукты. Примеры растворителя включают в себя галогенированные углеводороды, такие как метиленхлорид или дихлорэтан; простые эфиры, такие как тетрагидрофуран или диэтиловый эфир; амиды, такие как диметилформамид; и нитрилы, такие как ацетонитрил, из которых предпочтительными являются амиды (особенно диметилформамид).

Температура реакции обычно находится в области от -50° C до 100° C (предпочтительно, от -20° C до 100° C), и время реакции обычно составляет от 0,5 до 108 часов (предпочтительно от одного до 24 часов).

После завершения взаимодействия желаемое соединение выделяют из реакционной смеси известными способами. Например, желаемое соединение может быть выделено добавлением органического растворителя, нерастворимого в воде, к остатку, полученному отгонкой реакционной смеси, или растворителя в реакционную смесь, промывкой водой и отгонкой растворителя. Желаемое соединение, полученное таким образом, может затем, если необходимо, быть очищено обычными способами, такими как перекристаллизация, переосаждение или хроматография.

[Способ D]

Способ D представляет собой способ получения соединения формулы (IX-2), содержащего желаемый амидный остаток, путем преобразования карбоксильной группы соединения (XV).

В вышеуказанной схеме, R², X, n и P³ имеют те же значения, которые определены выше, и R^4p и R^5p представляют собой R⁴ и R⁵, которые могут быть защищены.

(Стадия D1)

Эту стадию проводят путем взаимодействия желаемого соединения формулы HNR^4pR^5p с соединением формулы (XV) в присутствии конденсирующего агента в растворителе.

Данную стадию можно проводить с использованием аминосоединения формулы HNR^4pR^5p вместо спиртового соединения формулы R^3pOH, как в вышеописанной стадии C4 способа C.

Примеры конденсирующего агента включают в себя конденсирующий агент на основе сложного эфира фосфорной кислоты, такой как дифенилфосфорилцианид; конденсирующий агент на основе карбоната, такой как карбонилдимидазол, из которых предпочтительными являются диэтилфосфорилцианид или карбонилдиимидазол.

[Способ E]

Способ E представляет собой способ получения желаемого соединения формулы (IX-2), содержащего амидный остаток, путем преобразования группы карбоксильного эфира соединения (VIII).

В вышеуказанной схеме, R², X, n, P³, R^4p и R^5p имеют те же значения, которые определены выше, и P^2a представляет собой C₁-C₄ алкильную группу в качестве защитной группы P² вышеуказанной карбоксильной группы.

(Стадия E1)

Данную стадию проводят путем взаимодействия желаемого аминосоединения, представленного формулой HNR^4pR^5p, с соединением формулы (VIII) в присутствии катализатора в растворителе.

Примеры используемого катализатора включают в себя три-C₁-C₄ алкилы алюминия, такие как триметилалюминий, из которых триметилалюминий является предпочтительным.

Нет конкретных ограничений в отношении природы используемого растворителя, при условии, что он не оказывает неблагоприятного воздействия на реакцию и что он в определенной степени растворяет исходные продукты. Примеры растворителя включают в себя ароматические растворители, такие как бензол, толуол или мезитилен; и галогенированные углеводороды, такие как метиленхлорид или дихлорэтан, из которых предпочтительными являются ароматические растворители (особенно бензол или толуол).

Температура реакции обычно находится в области от -20° C до 150° C (предпочтительно, от -10° C до 100° C), и время реакции обычно составляет от 0,5 до 108 часов (предпочтительно от одного до 24 часов).

После завершения взаимодействия желаемое соединение выделяют из реакционной смеси известными способами. Например, желаемое соединение может быть выделено добавлением органического растворителя, нерастворимого в воде, к остатку, полученному отгонкой реакционной смеси, или растворителя в реакционную смесь, промывкой водой и отгонкой растворителя. Желаемое соединение, полученное таким образом, может затем, если необходимо, быть очищено обычными способами, такими как перекристаллизация, переосаждение или хроматография.

[Способ F]

Способ F представляет собой способ получения цианосоединения формулы (IX-3) путем преобразования группы карбонового эфира соединения формулы (VIII).

В вышеуказанной схеме, R², X, n, P³ и P^2a имеют те же значения, которые определены выше.

(Стадия F1)

Данную стадию проводят путем использования соли аммония вместо аминосоединения, как в вышеописанной стадии E1 способа E, и взаимодействием при более высокой температуре реакции.

Аммонийхлорид предпочтительно используется в виде соли аммония и температура реакции обычно находится в области от -20° C до 150° C (предпочтительно от -10° C до 100° C).

[Способ G]

Способ G представляет собой способ получения соединения формулы (IX-4) путем введения желаемого заместителя R⁶ в гидроксильную группу соединения формулы (XIV).

Данную стадию проводят путем взаимодействия алкилирующего агента с соединением формулы (XIV) в присутствии основания в растворителе или реакционного восстанавливающего агента и желаемого карбонильного соединения с соединением формулы (XIV) в присутствии кислого катализатора в растворителе.

(1) Способ алкилирования в щелочных условиях

Примеры используемого растворителя включают в себя амиды, такие как N,N-диметилформамид; и простые эфиры, такие как тетрагидрофуран или диэтиловый эфир, из которых предпочтительными являются амиды (особенно N,N-диметилформамид).

Примеры используемого основания включают в себя гидириды щелочных металлов, такие как гидрид натрия или гидрид калия; неорганические основания, такие как гидроксид натрия или гидроксид калия; и органические основания, такие как триэтиламин или диизопропиламин, из которых предпочтительными являются гидриды щелочных металлов (особенно гидрид натрия).

Примеры используемого алкилирующего агента включают в себя алкилгалогениды, такие как метилйодид или этилйодид; и диалкилсульфаты, такие как диметилсульфат и диэтилсульфат, из которых предпочтительными являются алкилгалогениды (особенно алкил йодид).

Температура реакции обычно находится в области от -50° C до 100° C (предпочтительно, от -10° C до 40° C), и время реакции обычно составляет от 10 минут до 108 часов (предпочтительно от 0,5 до 24 часов).

После завершения взаимодействия желаемое соединение выделяют из реакционной смеси известными способами. Например, желаемое соединение может быть выделено добавлением органического растворителя, нерастворимого в воде, к остатку, полученному отгонкой реакционной смеси, или растворителя в реакционную смесь, промывкой водой и отгонкой растворителя. Желаемое соединение, полученное таким образом, может затем, если необходимо, быть очищено обычными способами, такими как перекристаллизация, переосаждение или хроматография.

(2) Способ алкилирования в кислых условиях

Нет конкретных ограничений в отношении природы используемого растворителя, при условии, что он не оказывает неблагоприятного воздействия на реакцию и что он в определенной степени растворяет исходные продукты. Примеры растворителя включают в себя галогенированные углеводороды, такие как метиленхлорид или дихлорэтан; и простые эфиры, такие как тетрагидрофуран или диэтиловый эфир, из которых предпочтительными являются галогенированные углеводороды (особенно метиленхлорид).

Примеры кислого катализатора включают в себя триалкилсилил трифлаты, такие как триметилсилил трифлат, триэтилсилил трифлат или трет-бутилдиметилсилил трифлат, из которых предпочтительным является триметилсилил трифлат.

Примеры желаемого карбонильного соединения включают в себя кетоны, такие как ацетон, метилэтилкетон и циклогексилкетон; и алкилальдегиды, такие как ацетальдегид и пропиональдегид, из которых предпочтительными являются кетоны.

Примеры восстанавливающего агента включают в себя триалкилсиланы, такие как триэтилсилан и дифенилметилсилан, из которых предпочтительными являются триалкилсиланы (особенно триэтилсилан).

Температура реакции обычно находится в области от -50° C до 100° C (предпочтительно, от -10° C до 40° C), и время реакции обычно составляет от 10 минут до 108 часов (предпочтительно от 0,5 до 24 часов).

После завершения взаимодействия желаемое соединение выделяют из реакционной смеси известными способами. Например, желаемое соединение может быть выделено добавлением органического растворителя, нерастворимого в воде, к остатку, полученному отгонкой реакционной смеси, или растворителя в реакционную смесь, промывкой водой и отгонкой растворителя. Желаемое соединение, полученное таким образом, может затем, если необходимо, быть очищено обычными способами, такими как перекристаллизация, переосаждение или хроматография.

[Способ H]

Способ H представляет собой способ получения соединения формулы (IX-5) путем преобразования гидроксильной группы соединения формулы (XIV) в желаемую группу, представленную формулой NR^7pR^8p.

(Стадия H1)

Стадия H1 представляет собой стадию получения соединения формулы (XV) путем введения удаляемой группы L³ в соединение формулы (XIV), и ее можно проводить способом, аналогичным стадии B6 способа B, описанного выше.

(Стадия H2)

Стадия H2 представляет собой стадию получения аминосоединения формулы (IX-5a) из соединения формулы (XV) и получения соединение формулы (IX-5b), если необходимо, путем введения заместителя.

(A) Получение аминосоединения формулы (IX-5a)

Данная стадия может быть осуществлена путем взаимодействия аминирующего агента с соединением формулы (XV) в растворителе. Данная стадия также может быть осуществлена путем получения азидного соединения путем взаимодействия азидирующего агента с соединением формулы (XV) в растворителе, а затем взаимодействием с восстановительным агентом.

(1) Способ, в котором используется аминирующий агент

Нет конкретных ограничений в отношении природы используемого растворителя, при условии, что он не оказывает неблагоприятного воздействия на реакцию и что он в определенной степени растворяет исходные продукты. Примеры растворителя включают в себя амиды, такие как диметилформамид; спирты, такие как метанол или этанол; и простые эфиры, такие как тетрагидрофуран или диэтиловый эфир, предпочтительно, амиды (особенно диметилформамид).

Примеры используемого аминирующего агента включают в себя первичные алкиламины, которые могут быть замещены, такие как метиламин или этиламин; ароматические амины, которые могут быть замещены, такие как анилин или аминотиазол; вторичные алкиламины, которые могут быть замещены, такие как метилэтиламин или диметиламин; и соли этих аминов (например, гидрохлорид), из которых предпочтительными являются первичные или вторичные алкиламины, которые могут быть замещены, и их соли (особенно метиламин гидрохлорид или диметиламин гидрохлорид).

Температура реакции обычно находится в области от 0° C до 150° C (предпочтительно, от 10° C до 100° C), и время реакции обычно составляет от 0,5 до 108 часов (предпочтительно от одного до 24 часов).

После завершения взаимодействия желаемое соединение выделяют из реакционной смеси известными способами. Например, желаемое соединение может быть выделено добавлением органического растворителя, нерастворимого в воде, к остатку, полученному отгонкой реакционной смеси, или растворителя в реакционную смесь, промывкой водой и отгонкой растворителя. Желаемое соединение, полученное таким образом, может затем, если необходимо, быть очищено обычными способами, такими как перекристаллизация, переосаждение или хроматография.

(2) Способ, в котором используется азидирующий агент и восстановительный агент

Нет конкретных ограничений в отношении природы используемого растворителя, при условии, что он не оказывает неблагоприятного воздействия на реакцию и что он в определенной степени растворяет исходные продукты. Примеры растворителя включают в себя амиды, такие как диметилформамид; спирты, такие как метанол или этанол; и простые эфиры, такие как тетрагидрофуран или диэтиловый эфир, из которых предпочтительными являются амиды (особенно диметилформамид).

Примеры азидирующего агента включают в себя азиды щелочных металлов, такие как азид натрия или азид лития, из которых предпочтительными являются азиды щелочных металлов (особенно азид натрия).

Температура реакции обычно находится в области от 0° C до 150° C (предпочтительно, от 10° C до 100° C), и время реакции обычно составляет от 0,5 до 108 часов (предпочтительно от одного до 24 часов).

После завершения взаимодействия желаемое соединение выделяют из реакционной смеси известными способами. Например, желаемое соединение может быть выделено добавлением органического растворителя, нерастворимого в воде, к остатку, полученному отгонкой реакционной смеси, или растворителя в реакционную смесь, промывкой водой и отгонкой растворителя. Желаемое соединение, полученное таким образом, может затем, если необходимо, быть очищено обычными способами, такими как перекристаллизация, переосаждение или хроматография.

Полученный таким образом азид преобразуют в амин формулы (IX-5a) путем восстановительной реакции.

Примеры используемого восстанавливающего агента включают в себя алюмогидриды щелочного металла, такие как литийалюминийгидрид; фосфины, такие как трифенилфосфин; и каталитическое гидрирование, используя металлические катализаторы, такие как палладий на угле или платиновый катализатор, из которых предпочтительным является каталитическое гидрирование (особенно в случае, когда в качестве катализатора используется палладий на угле).

Нет конкретных ограничений в отношении природы используемого растворителя, при условии, что он не оказывает неблагоприятного воздействия на реакцию и что он в определенной степени растворяет исходные продукты. Примеры растворителя включают в себя простые эфиры, такие как тетрагидрофуран или диэтиловый эфир; и спирты, такие как метанол или этанол, из которых предпочтительными являются простые эфиры (особенно тетрагидрофуран).

Примеры используемого в каталитическом гидрировании растворителя включают в себя спирты, такие как метанол или этанол, из которых предпочтительным является метанол.

Температура реакции обычно находится в области от -10° C до 150° C (предпочтительно, от 0° C до 100° C), и время реакции обычно составляет от 0,5 до 108 часов (предпочтительно от одного до 24 часов).

После завершения взаимодействия желаемое соединение выделяют из реакционной смеси известными способами. Например, желаемое соединение может быть выделено добавлением органического растворителя, нерастворимого в воде, к остатку, полученному отгонкой реакционной смеси, или растворителя в реакционную смесь, промывкой водой и отгонкой растворителя. Желаемое соединение, полученное таким образом, может затем, если необходимо, быть очищено обычными способами, такими как перекристаллизация, переосаждение или хроматография.

(B) Получение соединения (IX-5b)

Данная стадия представляет собой стадию, которую проводят, если необходимо, с целью получения соединения формулы (IX-5b) путем введения заместителя в аминосоединение формулы (IX-5a).

Данную стадию осуществляют путем взаимодействия желаемого ацилирующего агента, сульфонилирующего агента, фосфорилирующего агента или сложного эфира хлормуравьиной кислоты с аминосоединением формулы (IX-5a) в присутствии основания в растворителе.

Примеры ацилирующего агента включают в себя кислые ангидриды, такие как уксусный ангидрид или бензойный ангидрид; и хлорангидриды кислот, такие как ацетилхлорид или бензоилхлорид, из которых предпочтительными являются хлорангидриды кислот (особенно ацетилхлорид).

Примеры сульфонилирующего агента включают в себя хлорангидриды кислот, такие как метансульфонилхлорид или п-толуолсульфонилхлорид; и ангидриды кислот, такие как ангидрид метансульфоновой кислоты или ангидрид п-толуолсульфоновой кислоты, из которых предпочтительными являются хлорангидриды кислот (особенно метансульфонилхлорид).

Примеры фосфорилирующего агента включают в себя хлорангидриды кислот, такие как диэтилфосфорилхлорид или диметилфосфорилхлорид, из которых предпочтительным является диэтилфосфорилхлорид.

Примеры сложного эфира хлормуравьиной кислоты включают в себя сложноэфирные соединения, такие как метилхлороформиат, этилхлороформиат или бензилхлороформиат, из которых предпочтительными являются сложные эфиры хлормуравьиной кислоты (особенно метилхлороформиат).

Примеры используемого основания включают в себя органические основания, такие как триэтиламин, диизопропилэтиламин или пиридин; и неорганические основания, такие как карбонат натрия, карбонат калия или гидрокарбонат натрия, из которых предпочтительными являются органические основания (особенно триэтиламин).

Нет конкретных ограничений в отношении природы используемого растворителя, при условии, что он не оказывает неблагоприятного воздействия на реакцию и что он в определенной степени растворяет исходные продукты. Примеры растворителя включают в себя простые эфиры, такие как тетрагидрофуран или диэтиловый эфир; и галогенированные углеводороды, такие как метиленхлорид или дихлорэтан, из которых предпочтительными являются простые эфиры (особенно тетрагидрофуран).

Температура реакции обычно находится в области от 0° C до 100° C (предпочтительно, от 10° C до 50° C), и время реакции обычно составляет от 0,5 до 108 часов (предпочтительно от одного до 24 часов).

После завершения взаимодействия желаемое соединение выделяют из реакционной смеси известными способами. Например, желаемое соединение может быть выделено добавлением органического растворителя, нерастворимого в воде, к остатку, полученному отгонкой реакционной смеси, или растворителя в реакционную смесь, промывкой водой и отгонкой растворителя. Желаемое соединение, полученное таким образом, может затем, если необходимо, быть очищено обычными способами, такими как перекристаллизация, переосаждение или хроматография.

(Стадия H3)

Стадия H3 представляет собой стадию получения аминосоединения формулы (IX-5a) из соединения формулы (XIV) с помощью азидосоединения и получения соединения формулы (IX-5b) путем введения заместителя, если необходимо.

(A) Получение азидного соединения

Данную стадию проводят путем взаимодействия азидирующего соединения (особенно дифенилфосфорилазида), диэтилазодикарбоксилата и трифенилфосфина с соединением формулы (XIV) в растворителе.

Нет конкретных ограничений в отношении природы используемого растворителя, при условии, что он не оказывает неблагоприятного воздействия на реакцию и что он в определенной степени растворяет исходные продукты. Примеры растворителя включают в себя амиды, такие как диметилформамид; и простые эфиры, такие как тетрагидрофуран или диэтиловый эфир, из которых предпочтительными являются простые эфиры (особенно тетрагидрофуран).

Температура реакции обычно находится в области от 0° C до 50° C (предпочтительно, от 10° C до 30° C), и время реакции обычно составляет от 0,5 до 108 часов (предпочтительно от одного до 24 часов).

После завершения взаимодействия желаемое соединение выделяют из реакционной смеси известными способами. Например, желаемое соединение может быть выделено добавлением органического растворителя, нерастворимого в воде, к остатку, полученному отгонкой реакционной смеси, или растворителя в реакционную смесь, промывкой водой и отгонкой растворителя. Желаемое соединение, полученное таким образом, может затем, если необходимо, быть очищено обычными способами, такими как перекристаллизация, переосаждение или хроматография.

(B) Получение аминосоединения

Данная стадия является стадией получения амина формулы (IX-5a) путем восстановления азидного соединения, и ее можно проводить способом, аналогичным способу восстановления, описанным в стадии H2 (A)(2).

(C) Получение соединения (IX-5b)

Данная стадия, которую осуществляют при необходимости, представляет собой стадию получения соединения формулы (IX-5b) путем введения заместителя в амин формулы (IX-5a) и она может осуществляться способом, аналогичным способу, вышеописанному в стадии H2 (B).

Соединения формул (IX-1)-(IX-5), полученные в способах C-H могут быть преобразованы в соединение формулы (III), которое используется в качестве исходного продукта для введения боковой цепи во 2-положении соединения формулы (I) в соответствии со стадиями после стадии B5 способа B.

[Способ I]

Способ I представляет собой другой способ получения соединения формулы (IX-6), которое представляет собой соединение формулы (IX) и является промежуточным в реакциях синтеза по способу B, где X представляет собой атом кислорода.

В представленной выше схеме, R¹p, R², P³ и n имеют те же значения, которые определены выше; Z представляет собой аминозащитную группу, предпочтительно бензилоксикарбонильную группу; и P⁵ представляет собой гидроксизащитную группу, предпочтительно защитную группу на основе ацила, такую ацетил, бензоил или пивалоил, и, наиболее предпочтительно, бензоильную группу.

(Стадия I-1)

Стадия I-1 представляет собой стадию получения соединения формулы (XVI) путем преобразования карбоксильной группы аминокислотного соединения (XVIa), где аминогруппа защищена с образованием желаемой R¹p.

Данная стадия может быть осуществлена в соответствии со способом, выбранным из вышеописанных способов C-H. Следует отметить, что в соединении формулы (XVIa), которое образует исходный продукт, соединение, где R² представляет собой атом водорода, может быть получено из серина, и соединение, где R² представляет собой метильную группу, может быть получено из треонина. Соединения, где R² представляет собой группу, отличную от атома водорода или группы метила, может также быть получно способом, известным специалисту в данной области.

(Стадия I-2)

Стадия I-2 представляет собой стадию получения соединения формулы (XVII) путем введения защитной группы в гидроксильную группу соединения формулы (XVI).

Данную стадию осуществляют способом, аналогичным способу стадии B3 способа B. Предпочтительные примеры защитной группы на основе силила, которая подходит в качестве P³ включают в себя трет-бутилдиметилсилильную группу.

(Стадия I-3)

Стадия I-3 представляет собой стадию получения соединения формулы (XVIII) путем удаления защитной группы из аминогруппы соединения формулы (XVII).

Эта стадия может быть осуществленная способом, аналогичным способу стадии A2 (1) способа A. Предпочтительным растворителем является метанол.

(Стадия I-4)

Стадия I-4 представляет собой стадию получения соединения формулы (XIX) путем преобразования аминогруппы соединения формулы (XVIII) в изотиоцианатную группу.

Данную стадию осуществляют путем взаимодействия дисульфида углерода и дегидросульфидирующего агента с соединением формулы (XVIII) в присутствии основания в растворителе.

Предпочтительные примеры растворителя включают в себя галогенированные углеводороды (особенно метиленхлорид).

Предпочтительные примеры дегидросульфидирующего агента включают в себя галогенированные сложные эфиры муравьиной кисоты (особенно этилхлорформиат) или реагенты, содержащие четвертичный азот (особенно 2-хлор-1-метилпиридиний йодид или 2-хлор-1-этилбензоксазолий тетрафторборат).

Предпочтительные примеры основания включают в себя третичные амины, такие как триэтиламин, диизопропилэтиламин или трибутиламин (особенно триэтиламин).

Температура реакции обычно находится в области от -20° C до 100° C (предпочтительно, от 0° C до 60° C), и время реакции обычно составляет от 0,5 до 48 часов (предпочтительно от одного до 12 часов).

После завершения взаимодействия желаемое соединение выделяют из реакционной смеси известными способами. Например, желаемое соединение может быть выделено добавлением органического растворителя, нерастворимого в воде, к остатку, полученному отгонкой реакционной смеси, или растворителя в реакционную смесь, промывкой водой и отгонкой растворителя. Желаемое соединение, полученное таким образом, может затем, если необходимо, быть очищено обычными способами, такими как перекристаллизация, переосаждение или хроматография.

(Стадия I-5)

Стадия I-5 представляет собой стадию получения соединения формулы (XX) путем взаимодействия желаемого циклического амина с соединением формулы (XIX). Эта стадия может быть осуществлена в соответствии со стадией B1 способа B.

(Стадия I-6)

Стадия I-6 представляет собой стадию получения соединения формулы (XXI) путем введения защитной группы P⁵, основанной на ациле, в гидроксильную группу соединения (XX) и затем удалением защитной группы P³, основанной на силиле.

(1) Введение защитной группы P⁵, основанной на ациле

Эта стадия может быть осуществлена в соответствии со стадией H2 (B) способа H.

(2) Стадия удаление защитной группы P³, основанной на силиле

Эта стадия может быть осуществлена в соответсвии со стадией A2 способа A.

(Стадия I-7)

Стадия I-7 представляет собой стадию получения соединения формулы (XXII), где соединение формулы (XXI) подвергают реакции замыкания кольца. Данную стадию осуществляют путем взаимодействия агента циклизации (дегидросульфидирующий агент) с соединением формулы (XXI) в присутствии основания в растворителе.

Примеры растворителя включают в себя амиды, такие как диметилформамид или диметилацетамид; галогенированные углеводороды, такие как метиленхлорид; и нитрилы, такие как ацетонитрил; из которых предпочтительным является ацетонитрил.

Предпочтительные примеры основания включают в себя третичные амины, такие как триэтиламин, диизопропилэтиламин или трибутиламин (особенно триэтиламин).

Предпочтительные примеры агента циклизации (дегидросульфидирующий агент) включают в себя соли ртути, такие как оксид ртути и хлорид ртути; или агенты, содержащие четвертичный азот (особенно 2-хлор-1-метилпиридиний йодид или 2-хлор-1-этилбензоксазолий тетрафторбор).

Температура реакции обычно находится в области от -20° C до 100° C (предпочтительно, от 0° C до 60° C), и время реакции обычно составляет от 0,5 до 48 часов (предпочтительно от одного до 12 часов).

После завершения взаимодействия желаемое соединение выделяют из реакционной смеси известными способами. Например, желаемое соединение может быть выделено добавлением органического растворителя, нерастворимого в воде, к остатку, полученному отгонкой реакционной смеси, или растворителя в реакционную смесь, промывкой водой и отгонкой растворителя. Желаемое соединение, полученное таким образом, может затем, если необходимо, быть очищено обычными способами, такими как перекристаллизация, переосаждение или хроматография.

(Стадия I-8)

Стадия I-8 представляет собой стадию получения соединения формулы (XXIII) путем дегидрирования соединения формулы (XXII).

Данную стадию осуществляли взаимодействие дегидрирующего агента с соединением формулы (XXII) в растворителе.

Примеры растворителя включают в себя ароматические углеводороды, такие как бензол или толуол; и галогенированные углеводороды, такие как метиленхлорид или дихлорэтан.

Примеры дегидрирующего агента включают в себя оксидирующие агенты, такие как диоксид марганца.

Температура реакции обычно находится в области от 0° C до 100° C (предпочтительно, от 0° C до 60° C), и время реакции обычно составляет от 0,5 до 48 часов (предпочтительно от одного до 12 часов).

После завершения взаимодействия желаемое соединение выделяют из реакционной смеси известными способами. Например, желаемое соединение может быть выделено добавлением органического растворителя, нерастворимого в воде, к остатку, полученному отгонкой реакционной смеси, или растворителя в реакционную смесь, промывкой водой и отгонкой растворителя. Желаемое соединение, полученное таким образом, может затем, если необходимо, быть очищено обычными способами, такими как перекристаллизация, переосаждение или хроматография.

(Стадия I-9)

Стадия I-9 представляет собой стадию получения соединения формулы (IX-6) путем удаления защитной группы P⁵, основанной на ациле, соединения формулы (XXIII) и затем введением защитной группы P³, основанной на силиле.

(1) Удаление защитной группы P⁵, основанной на ациле

Эту стадию проводили в соответствии со способом получения соединения формулы (VI) из соединения формулы (XIII) стадии B1 (2) способа В.

(2) Введение защитной группы P³, основанной на силиле

Данная стадия может проводиться в соответствии со стадией B3 способа B.

[Способ J]

Соединение формулы (I) могут быть также получены другим способом, отличающимся от способа A, а затем способом J. Способ J может быть использован для получения соединения формулы (I-1) или (I-2), где R¹ представлен формулой COOR³ или формулой CONR⁴R⁵.

В представленной выше схеме, R¹, R¹p, R², P¹, P³, X, L¹ и n имеют те же значения, которые определены выше. Предпочтительным примером P³ является трет-бутилдиметилсилильная группа.

(Стадия J1)

Стадия J1 представляет собой стадию получения соединения формулы (IV-1) путем конденсации соединения формулы (II-1), которое замещено защитной группой P³, на основе силила, и соединения формулы (III-1), в котором R¹p представляет собой карбоксильную группу, защищенную аллильной группой.

Данную стадию можно проводить способом, аналогичным способу стадии A1 способа A. Соединение формулы (II-1) используемое в качестве исходного продукта, может быть получено взаимодействием агента силилирования с соединением формулы (II), и эту стадию можно проводить в соответствии со стадией B3 способа B. Соединение формулы (III-1) может быть получено с помощью способа B.

(Стадия J2)

Стадия J2 представляет собой стадию получения соединения формулы (IV-2) путем удаления аллильной защитной группы соединения формулы (IV-1). Эту стадию можно проводить в соответствии со стадией A2 (2) способа A.

(Стадия J3)

Стадия J3 представляет собой стадию получения соединения формулы (IV-3) путем модификации карбоксильной группы соединения формулы (IV-2). Эту стадию можно проводить в соответствии со стадией B4 способа B (особенно способа C и способа D).

(Стадия J4)

Стадия J4 представляет собой стадию получения соединения формулы (I) путем удаления защитных групп P³ и P¹ соединения формулы (IV-3).

(1) Удаление защитной группы P³

Данную стадию можно проводить в соответствии со стадией A2 (3) способа A.

(2) Удаление защитной группы P¹

Данную стадию можно проводить способом, аналогичным способу стадии A2 способа A.

Соединения формулы (I) или их фармакологически приемлемые соли по настоящему изобретению обладают сильной антибактериальной активностью в отношении широкого спектра различных патогенных бактерий, включая Грам-положительные бактерии, такие как Staphylococcus и Bacillus subtilis, Грам-отрицательные бактерии, такие как Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Shigella, Proteus vulgaris, Serratia, Enterobacter и Pseudomonas aerginosa, и анаэробные бактерии, такие как Bacteroides fragilis и, в частности, обладают сильной антибактериальной активностью в отношении Streptococcus pneumoniae (включая бактерии, устойчивые к пенициллину) и Haemophilus influenzae (включая бактерии, синтезирующие β -лактамазу), которые вызывают инфекции дыхательных путей. Соединения формулы (I) по настоящему изобретению имеют высокую стабильную активность в отношении β -лактамаз, включая металло β -лактамазу. Соединения формулы (I) по настоящему изобретению при введении перорально или неперорально показывают хорошие фармакокинетические характеристики, такие как высокая максимальная концентрация в сыворотке и высокие показатели времени полужизни в сыворотке. Следовательно, предполагают, что соединения формулы (I) по настоящему изобретению будут иметь сильный терапевтический эффект даже при введении менее часто или уменьшенными дозами по сравнению с существующими препаратами. Соединения формулы (I) по настоящему изобретению обладают низкой токсичностью для почек. Соответственно, соединения формулы (I) или их фармакологически приемлемые соли или сложные эфиры по настоящему изобретению эффективны, например, в качестве фармацевтических препаратов, и особенно эффективны в качестве антибактериальных средств для лечения или профилактики (предпочтительно, лечении) бактериальных инфекций, вызванных различными патогенными бактериями, особенно, бактериями, которые вызывают инфекции дыхательных путей.

Когда соединения формулы (I), их фармакологически приемлемые сложные эфиры или соли используются в качестве фармацевтических препаратов, в частности, антибактериальных средств, их можно вводить перорально в виде таблеток, капсул, гранул, порошков или сиропов, используя их непосредственно или в смеси с соответствующими фармакологически приемлемыми добавками, такими как эксципиенты или разбавители, или их можно вводить парентерально в виде инъекций.

Эти композиции могут быть получены известными способами, используя добавки. Примеры добавок включают в себя эксципиенты (например, производные сахара, такие как лактоза, сахароза, глюкоза, манит и сорбит; производные крахмала, такие как кукурузный крахмал, картофельный крахмал, α -крахмал, декстрин и карбоксиметил крахмал; производные целлюлозы, такие как кристаллическая целлюлоза, низкой степени замещения гидроксипропил целлюлоза, гидроксипропилметил целлюлоза, карбоксиметил целлюлоза, кальций карбоксиметил целлюлоза и натрий карбоксиметил целлюлоза с внутренними сшивками; аравийская камедь; декстран; и пуллулан; силикатные производные, такие как легкий кремниевый ангидрид, синтетический алюмосиликат и магний алюмометасиликат; фосфатные производные, такие как фосфат кальция; карбонатные производные, такие как карбонат кальция; или сульфатные производные, такие как сульфат кальция), связывающие вещества (например, примеры, приведенные выше для эксципиентов; желатин; поливинилпирролидон; или макрогол); разрыхлители (например, примеры, приведенные выше для эксципиентов; или химически модифицированные производные крахмала или целлюлозы, такие как натрий кроскармелоза или натрий карбоксиметил крахмал; или поперечно-связанный поливинилпирролидон); смазывающие вещества (например, тальк; стеариновая кислота; соли металлов стеариновой кислоты, такие как стеарат кальция или стеарат магния; коллоидный силикагель; вигум; воски, такие как пчелиный воск и спермацет; борная кислота; гликоль; карбоновые кислоты, такие как фумаровая кислота или адипиновая кислота; карбоксилаты натрия, такие как натрий бензоат; сульфаты, такие как сульфат натрия; лейцин; лаурилсульфаты, такие как натрийлаурилсульфат или магнийлаурилсульфат; кремневые кислоты, такие как ангидрид кремниевой кислоты или гидрат кремниевой кислоты; или производные крахмала, примеры которых приведены выше в качестве эксципиентов), стабилизаторы (например, сложные эфиры п-гидроксибензойной кислоты, такие как метилпарабен или пропилпарабен; спирты, такие как хлорбутанол, бензиловый спирт или фенилэтиловый спирт; хлорид бензалкония; фенолы, такие как фенол и крезол; тимерозал; уксусный ангидрид; или сорбиновая кислота), корригирующие вещества (например, подсластители, которые обычно используются, сквашивающий агент или ароматизирующие вещества), суспендирующие агенты (например, полисорбат 80 или натрий карбоксиметилцеллюлоза), разбавители и растворители для композиций (например, вода, этанол или глицерин).

Дозы соединения формулы (I) изменяются в зависимости от состояния и возраста пациента. Единичная доза, вводимая перорально, минимально составляет 10 мг (предпочтительно 50 мг) и максимально составляет 2000 мг (предпочтительно 1000 мг), тогда как единичная доза, вводимая внутривенно, составляет минимально 10 мг (предпочтительно 100 мг) и максимально составляет 3000 мг (предпочтительно 2000 мг). Желательно, чтобы соединение вводили взрослому пациенту в виде единичной дозы или в выделении разделенных доз (на шесть раз) в день в зависимости от состояния пациента.

[Лучший способ осуществления изобретения]

Настоящее изобретение далее будет проиллюстрировано более подробно нижеследующими примерами, ссылочными примерами, экспериментальными примерами и примерами получения композиции. Объем настоящего изобретения не ограничивается этими примерами. В спектрах ядерно-магнитного резонанса в примерах и ссылочных примерах в качестве внутреннего стандарта для измерения в дейтерированной воде использовался натрий триметилсилилпропионат-d₄, а в качестве внутреннего стандарта для других растворителей использовался тетраметилсилан. Кстати, когда при измерениях в дейтерированной воде не использовался внутренний стандарт, измерение проводили на основании того, что сигнал HOD в дейтерированной воде возникает при 4,65 м.д.

Пример 1

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (468 мг, 1,71 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 1) в диметилформамиде (15 мл) добавляли гидразинацетат (171,0 мг, 1,86 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1,5 часов. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-дифенилфосфорилокси-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (1,02 г, 1,72 ммоль) в ацетонитриле (30 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (1,5 мл, 8,61 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в делительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата в виде светло-желтого твердого продукта (752 мг, выход 75%).

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,50 (1H, с), 5,50 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,7 Гц), 4,55 (2H, дд, J=14,4, 8,0 Гц), 4,36 (2H, кв., J=7,1 Гц), 4,35-4,20 (3H, м), 4,20-4,05 (2H, м), 3,29 (1H, дд, J=6,7, 2,4 Гц), 3,20 (1H, дкв., J=10,3, 8,3 Гц), 1,82 (1H, ушир. с), 1,42 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,40 (3H, т, J=7,1 Гц), 1,26 (3H, т, J=7,5 Гц).

Масс-спектр (FAB⁺): 589 [M+H]⁺

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (744 мг, 1,26 ммоль) (полученный, как описано в примере 1(1)) в смеси тетрагидрофурана (46 мл) и дистиллированной воды (23 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 20% гидроксида палладия (736 мг) на водяной бане (30° C) в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (106 мг), смесь этилацетата и тетрагидрофурана (1:1) и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли, промывали смесью этилацетата и тетрагидрофурана (1:1) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду - 3% ацетонитрил; дистиллированную воду - 5% ацетонитрил; дистиллированную воду - 7% ацетонитрил и дистиллированную воду. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натиевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (376 мг, выход 63%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,68 (1H, с), 4,50 (2H, т, J=12,6 Гц), 4,40-4,10 (5H, м, включая кв. при 4,30 м.д., J=8,4 Гц), 4,10-3,95 (2H, м), 3,45-3,35 (1H, м), 3,30-3,25 (1H, м), 1,30 (3H, т, J=8,4 Гц), 1,25 (3H, д, J=6,7 Гц), 1,15 (3H, д, J=9,2 Гц).

ИК (KBr): 1749, 1720, 1602, 1544, 1395, 1316 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 476 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₁₉H₂₃O₆N₃S₂Na:

Вычислено: 476,0912

Найдено: 476,0938 [M+H]⁺

Пример 2

Динатриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-п-нитробензилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-п-нитробензилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (380 мг, 1,0 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2) в диметилформамиде (15 мл) добавляли гидразинацетат (115 мг, 1,25 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 3 часов. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-дифенилфосфорилокси-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (695 мг, 1,17 ммоль) в ацетонитриле (30 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, затем добавляли диизопропилэтиламин (0,84 мл, 4,82 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-п-нитробензилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата в виде коричневого пенообразного твердого вещества (336 мг, выход 50%).

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,6 Гц), 8,22 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,59 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,57 (1H, с), 5,51 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,43 (2H, с), 5,25 (1H, д, J=13,7 Гц), 4,56 (2H, дд, J=15,7, 8,7 Гц), 4,31-4,20 (3H, м), 4,19-4,05 (3H, м), 3,29 (1H, дд, J=7,1, 2,9 Гц), 3,20 (1H, дкв., J=9,2, 7,4 Гц), 1,38 (3H, д, J=6,5 Гц), 1,27 (3H, д, J=7,2 Гц).

Масс-спектр (FAB⁺): 696 [M+H]⁺

(2) Динатриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-п-нитробензилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (330 мг, 0,474 ммоль) (полученный, как описано в примере 2(1)) в смеси тетрагидрофурана (16 мл) и дистиллированной воды (8 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 20% гидроксида палладия (325 мг) на водяной бане (30° C) в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (45 мг), смесь этилацетата и тетрагидрофурана (1:1) и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли, промывали смесью этилацетата и тетрагидрофурана (1:1) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения динатриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (86 мг, выход 41%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,10 (1H, с), 4,35 (2H, т, J=8,0 Гц), 4,20-4,10 (1H, м), 4,10-4,00 (2H, м), 3,90-3,80 (2H, м), 3,25-3,20 (1H, м), 3,15-3,00 (1H, м), 1,12 (3H, д, J=6,0 Гц), 1,00 (3H, д, J=9,2 Гц).

ИК (KBr): 1745, 1594, 1541, 1400, 1316, 1282 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 470 [M+H]⁺

Пример 3

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,13 г, 4,39 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 3) в диметилформамиде (57 мл) добавляли гидразинацетат (485 мг, 5,27 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-дифенилфосфорилокси-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (2,61 г, 4,39 ммоль) в ацетонитриле (130 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (3,1 мл, 17,6 ммоль). Смесь перемешивали в течение 3 часов пока температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М водным раствором хлорида натрия, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента метиленхлорид-3% метанол, метиленхлорид-6% метанол, метиленхлорид-9% метанол и метиленхлорид, с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата в виде светло-желтого твердого вещества (2,61 г,выход 94%).

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,48 (1H, с), 6,99 (1H, ушир. с), 5,55 (1H, ушир. с), 5,51 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,9 Гц), 4,50 (2H, дд, J=16,0, 8,0 Гц), 4,31-4,20 (3H, м), 4,10-4,00 (2H, м), 3,30 (1H, дд, J=6,6, 2,2 Гц), 3,21 (1H, дкв., J=10,6, 8,0 Гц), 1,83 (1H, ушир. с), 1,38 (3H, д, J=6,6 Гц), 1,28 (3H, д, J=7,3 Гц).

Масс-спектр (FAB⁺): 566 [M+H]⁺

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (2,2 г, 3,93 ммоль) (полученный, как описано в примере 3(1)) в смеси тетрагидрофурана (110 мл) и дистиллированной воды (110 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (2,2 г) при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (330 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду - 2% ацетонитрил; дистиллированную воду - 4% ацетонитрил; дистиллированную воду - 6% ацетонитрил; дистиллированную воду - 8% ацетонитрил и дистиллированную воду. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (1,12 г, выход 64%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O, TSP): δ (м.д.) 7,54 (1H, с), 4,56 (2H, т, J=8,6 Гц), 4,40-4,30 (1H, м), 4,52 (1H, квинтет, J=6,2 Гц), 4,21 (1H, дд, J=9,1, 2,5 Гц), 4,07 (2H, м), 3,44 (1H, дд, J=6,2, 2,5 Гц), 4,07 (2H, дт, J=8,6, 4,2 Гц), 3,44 (1H, дд, J=6,2, 2,5 Гц), 3,26 (1H, дд, J=9,1, 7,2 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,20 (3H, д, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 1749, 1671, 1598, 1546, 1394, 1287 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 447 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₁₇H₂₀O₅N₄S₂Na:

Вычислено: 447,0773

Найдено: 447,0734 [M+H]⁺

Пример 4

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (760 мг, 3,18 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 4) в диметилформамиде (38 мл) добавляли гидразинацетат (351 мг, 3,81 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-дифенилфосфорилокси-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (1,89 г, 3,18 ммоль) в ацетонитриле (95 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (2,21 мл, 12,7 ммоль). Смесь перемешивали в течение 4 часов пока температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М водным раствором хлорида натрия, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:4) и этилацетат, с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата в виде светло-желтого твердого продукта (1,65 г,выход 96%).

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,29 (1H, с), 5,51 (1H, д, 13,9 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,9 Гц), 4,54 (2H, дд, J=16,0, 8,0 Гц), 4,36-4,24 (3H, м), 4,12-4,04 (2H, м), 3,30 (1H, дд, J=6,6, 2,9 Гц), 3,20 (1H, дкв., J=9,4, 7,3 Гц), 1,80 (1H, ушир. с), 1,38 (3H, д, J=5,9 Гц), 1,27 (3H, д, J=7,3 Гц).

Масс-спектр (FAB⁺): 542 [M+H]⁺

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (600 мг, 1,11 ммоль) (полученный, как описано в примере 4(1)) в смеси тетрагидрофурана (30 мл) и дистиллированной воды (30 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (600 мг) при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (93 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду - 3% ацетонитрил; дистиллированную воду - 6% ацетонитрил; дистиллированную воду - 9% ацетонитрил; дистиллированную воду - 12% ацетонитрил; дистиллированную воду - 15% ацетонитрил; дистиллированную воду - 18% ацетонитрил и дистиллированную воду. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (285 мг, выход 60%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O, TSP): δ (м.д.) 7,68 (1H, с), 4,57 (2H, т, J=8,2 Гц), 4,44-4,32 (1H, м), 4,25 (1H, квинтет, J=6,2 Гц), 4,21 (1H, дд, J=9,0, 2,3 Гц), 4,07 (2H, дт, 8,2, 4,7 Гц), 3,44 (1H, дд, J=6,2, 2,3 Гц), 3,25 (1H, дкв., J=9,0, 7,2 Гц), 1,31 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,20 (3H, д, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 2231, 1750, 1599, 1549, 1470, 1397, 1307 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 429 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₁₇H₁₈O₄N₄S₂Na:

Вычислено: 429,0668

Найдено: 429,0662 [M+H]⁺

Пример 5

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (570 мг, 2,10 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 5) в диметилформамиде (28 мл) добавляли гидразин ацетат (291 мг, 3,16 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 2 часов. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-дифенилфосфорилокси-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (1,25 г, 2,10 ммоль) в ацетонитриле (25 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (1,83 мл, 10,5 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:ацетонитрил (2:3) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата в виде светло-желтого твердого вещества (774 мг, выход 64%).

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,21 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,43 (1H, с), 7,14 (1H, с), 5,51 (1H, д, J=13,8 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,8 Гц), 4,48 (2H, дд, J=17,2, 8,9 Гц), 4,35-4,20 (3H, м), 4,10-4,00 (2H, м), 3,35-3,15 (2H, м), 2,96 (3H, д, J=5,1 Гц), 1,70 (1H, ушир. с), 1,38 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,27 (3H, д, J=7,3 Гц).

Масс-спектр (FAB⁺): 574 [M+H]⁺

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (768 мг, 1,34 ммоль) (полученный, как описано в примере 5(1)) в смеси тетрагидрофурана (38 мл) и дистиллированной воды (19 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 20% гидроксида палладия (757 мг) на водяной бане (30° C) в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (115 мг), смесь этилацетата и тетрагидрофурана (1:1) и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой промывали смесью этилацетата и тетрагидрофурана (1:1), разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду - 3% ацетонитрил; дистиллированную воду - 5% ацетонитрил и дистиллированную воду. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (392 мг, выход 64%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,30 (1H, с), 4,40 (2H, т, J=8,0 Гц), 4,30-4,18 (1H, м), 4,18-4,00 (2H, м), 3,90-3,85 (2H, м), 3,30 (1H, дд, J=6,3, 3,8 Гц), 3,20-3,05 (1H, м), 1,18 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,06 (3H, д, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 1749, 1650, 1599, 1552, 1397, 1316 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺) 461 [M+H]⁺

Пример 6

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (563 мг, 1,49 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 6) в диметилформамиде (28 мл) добавляли гидразин ацетат (264 мг, 2,87 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 3 часов. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-дифенилфосфорилокси-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (1,15 г, 1,94 ммоль) в ацетонитриле (23 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (1,7 мл, 9,76 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:ацетонитрил (2:3) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата в виде светло-желтого твердого вещества (777 мг, выход 68%).

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=8,2 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,2 Гц), 7,09 (1H, с), 5,50 (1H, д, J=13,5 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,5 Гц), 4,60-4,40 (2H, м), 4,35-4,20 (3H, м), 4,20-4,00 (2H, м), 3,32-3,25 (1H, м), 3,25-3,12 (4H, м), 3,05 (3H, ушир. с), 1,57 (1H, ушир. с), 1,38 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,25 (3H, д, J=7,1 Гц).

Масс-спектр (FAB⁺): 588 [M+H]⁺

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (772 мг, 1,31 ммоль) (полученный, как описано в примере 6(1)) в смеси тетрагидрофурана (38 мл) и дистиллированной воды (19 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 20% гидроксида палладия (768 мг) на водяной бане (30° C) в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (112 мг), смесь этилацетата и тетрагидрофурана (1:1) и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли, промывали смесью этилацетата и тетрагидрофурана (1:1) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с Cosmosil. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (375 мг, выход 60%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,00 (1H, с), 4,56-4,36 (2H, м), 4,31-4,21 (1H, м), 4,21-4,06 (2H, м), 4,01-3,91 (2H, м), 3,41-3,32 (1H, м), 3,21-3,11 (1H, м), 3,00 (3H, с), 2,91 (3H, с), 1,21 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,11 (3H, д, J=7,1 Гц).

ИК (KBr): 1750, 1610, 1540, 1397, 1305 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 475 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₁₉H₂₄O₅N₄S₂Na:

Вычислено: 475,1087

Найдено: 475,1085 [M+H]⁺

Пример 7

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-этилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-этилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-N-этилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (450 мг, 1,58 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 7) в диметилформамиде (23 мл) добавляли гидразин ацетат (174 мг, 1,89 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-дифенилфосфорилокси-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (939 мг, 1,58 ммоль) в ацетонитриле (47 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (1,10 мл, 6,31 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат-10% метанол и этилацетат с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-этилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата в виде светло-желтого твердого продукта (753 мг, выход 81%).

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,43 (1H, с), 7,12 (1H, т, J=5,1 Гц), 5,51 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,9 Гц), 4,49 (2H, дд, J=16,1, 8,1 Гц), 4,32-4,20 (3H, м), 4,10-4,00 (2H, м), 3,44 (2H, дкв., J=7,3, 5,0 Гц), 3,29 (1H, дд, J=7,3, 2,9 Гц), 3,21 (1H, дкв., J=8,9, 7,3 Гц), 1,38 (3H, д, J=5,9 Гц), 1,28 (3H, д, J=7,3 Гц), 1,23 (3H, т, J=7,3 Гц).

Масс-спектр (FAB⁺): 588 [M+H]⁺

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-этилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-этилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (750 мг, 1,23 ммоль) (полученный, как описано в примере 7(1)) в смеси тетрагидрофурана (38 мл) и дистиллированной воды (38 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (750 мг) при комнатной температуре в течение 1,7 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (103 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду - 3% ацетонитрил; дистиллированную воду - 6% ацетонитрил; дистиллированную воду - 9% ацетонитрил; дистиллированную воду - 12% ацетонитрил; дистиллированную воду - 15% ацетонитрил; дистиллированную воду - 18% ацетонитрил; дистиллированную воду - 21% ацетонитрил; и дистиллированную воду. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-этилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (384 мг, выход 66%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O, TSP): δ (м.д.) 7,45 (1H, с), 4,60-4,48 (2H, м), 4,40-4,29 (1H, м), 4,25 (1H, квинтет, J=6,2 Гц), 4,20 (1H, дд, J=9,1, 2,3 Гц), 4,12-4,00 (2H, м), 3,43 (1H, дд, J=6,2, 2,3 Гц), 3,37 (3H, кв., J=7,2 Гц), 3,32-3,18 (1H, м), 1,30 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,20 (3H, д, J=7,2 Гц), 1,19 (3H, т, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 1750, 1659, 1604, 1548, 1394, 1315 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 475 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₁₉H₂₄O₅N₄S₂Na:

Вычислено: 475,1086

Найдено: 475,1070 [M+H]⁺

Пример 8

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-изопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-изопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-N-изопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (460 мг, 1,65 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 8) в диметилформамиде (23 мл) добавляли гидразин ацетат (182 мг, 1,98 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-дифенилфосфорилокси-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (981 мг, 1,65 ммоль) в ацетонитриле (49 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (1,15 мл, 6,60 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан: этилацетат (1:2); этилацетат – 5% метанол и этилацетат с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-изопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата в виде светло-желтого твердого вещества (790 мг, выход 80%).

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,42 (1H, с), 6,95 (1H, д, J=8,1 Гц), 5,51 (1H, д, J=13,6 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,6 Гц), 4,49 (2H, дд, J=14,6, 8,1 Гц), 4,32-3,40 (5H, м), 3,30 (1H, дд, J=7,3, 2,9 Гц), 3,21 (1H, дкв., J=8,8, 7,3 Гц), 1,60 (1H, ушир. с), 1,38 (1H, д, J=6,6 Гц), 1,30-1,20 (9H, м).

Масс-спектр (FAB⁺): 602 [M+H]

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-изопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-изопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (790 мг, 1,31 ммоль) (полученный, как описано в примере 8(1)) в смеси тетрагидрофурана (40 мл) и дистиллированной воды (40 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (790 мг) при комнатной температуре в течение 1,7 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (110 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду - 4% ацетонитрил; дистиллированную воду - 8% ацетонитрил; дистиллированную воду - 12% ацетонитрил; дистиллированную воду - 16% ацетонитрил; дистиллированную воду - 20% ацетонитрил и дистиллированную воду. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-изопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (389 мг, выход 61%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O, TSP): δ (м.д.) 7,45 (1H, с), 4,55 (2H, т, J=8,4 Гц), 4,40-4,30 (1H, м), 4,25 (1H, квинтет, J=6,3 Гц), 4,19 (1H, дд, J=9,0, 2,4 Гц), 4,14-4,03 (3H, м), 3,43 (1H, дд, J=6,3, 2,4 Гц), 3,25 (1H, дкв., J=9,0, 7,2 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,23 (6H, д, J=6,7 Гц), 1,20 (3H, д, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 1751, 1657, 1548, 1492, 1469, 1393, 1303, 1263

см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 489 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₂₀H₂₆O₅N₄S₂Na:

Вычислено: 489,1242

Найдено: 489,1234 [M+H]⁺

Пример 9

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-циклопентилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-циклопентилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-N-циклопентилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (550 мг, 1,67 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 9) в диметилформамиде (28 мл) добавляли гидразин ацетат (187 мг, 2,03 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-дифенилфосфорилокси-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (993 мг, 1,67 ммоль) в ацетонитриле (50 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (1,16 мл, 6,68 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-циклопентилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата в виде светло-желтого твердого вещества (346 мг, выход 33%).

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,24 (2H, д, J=8,0 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,0 Гц), 7,42 (1H, с), 7,05 (1H, ушир.д, J=8,0 Гц), 5,51 (1H, д, J=13,6 Гц), 5,26 (1H, д, J=13,6 Гц), 4,49 (2H, дд, J=15,6, 8,1 Гц), 4,38-4,24 (3H, м), 4,10-4,00 (2H, м), 3,30 (1H, дд, J=6,2, 2,1 Гц), 3,22 (1H, дкв., J=9,4, 8,3 Гц), 2,12-2,00 (2H, м), 1,81 (1H, ушир. с), 1,78-1,44 (6H, м), 1,38 (3H, д, J=5,8 Гц), 1,28 (3H, д, J=7,3 Гц).

Масс-спектр (FAB⁺): 628 [M+H]⁺

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-циклопентилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-циклопентилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (340 мг, 0,542 ммоль) (полученный, как описано в примере 9(1)) в смеси тетрагидрофурана (17 мл) и дистиллированной воды (17 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (340 мг) при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (46 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду - 4% ацетонитрил; дистиллированную воду - 8% ацетонитрил; дистиллированную воду - 12% ацетонитрил; дистиллированную воду - 16% ацетонитрил; дистиллированную воду - 20% ацетонитрил; дистиллированную воду - 24% ацетонитрил; дистиллированную воду - 28% ацетонитрил и дистиллированную воду. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-циклопентилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (159 мг, выход 57%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O, TSP): δ (м.д.) 7,45 (1H, с), 4,55 (1H, дт, J=8,1, 1,3 Гц), 4,40-4,30 (1H, м), 4,30-4,16 (3H, м, включая кв. при 4,25, J=6,3Hz, и дд при 4,19, J=9,1, 2,6 Гц), 4,12-4,00 (2H, м), 3,43 (1H, дд, J=6,3, 2,6 Гц), 3,24 (1H, дкв., J=9,1, 7,3 Гц), 2,06-1,94 (2H, м), 1,80-1,50 (6H, м), 1,30 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,19 (3H, д, J=7,3 Гц).

ИК(KBr): 1751, 1658, 1605, 1547, 1393, 1315 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 515 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₂₂H₂₈O₅N₄S₂Na:

Вычислено: 515,1399

Найдено: 515,1398 [M+H]⁺

Пример 10

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-Циклогексилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-циклогексилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-N-циклогексилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (121 мг, 1,09 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 10) в диметилформамиде (19 мл) добавляли гидразин ацетат (121 мг, 1,31 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-дифенилфосфорилокси-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (648 мг, 1,09 ммоль) в ацетонитриле (32 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (0,759 мл, 4,36 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:4); этилацетат – 5% метанол и этилацетат с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-циклогексилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата в виде светло-желтого твердого вещества (598 мг, выход 86%).

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,42 (1H, с), 7,00 (1H, д, J=8,8 Гц), 5,51 (1H, д, J=13,5 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,5 Гц), 4,49 (2H, дд, J=15,4, 8,8 Гц), 4,32-4,20 (3H, м), 4,11-4,00 (2H, м), 3,96-3,80 (1H, м), 3,29 (1H, дд, J=6,6, 2,2 Гц), 3,21 (1H, дкв., J=8,8, 7,3 Гц), 2,01-1,18 (16H, м, включая 3H, д при 1,38, J=5,9Hz и 3H, д при 1,28, J=7,3 Гц).

Масс-спектр (FAB⁺): 642 [M+H]⁺

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-Циклогексилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-циклогексилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (590 мг, 0,919 ммоль) (полученный, как описано в примере 10(1)) в смеси тетрагидрофурана (30 мл) и дистиллированной воды (30 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (590 мг) при комнатной температуре в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (77 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду - 4% ацетонитрил; дистиллированную воду - 8% ацетонитрил; дистиллированную воду - 12% ацетонитрил; дистиллированную воду - 16% ацетонитрил; дистиллированную воду - 20% ацетонитрил; дистиллированную воду - 24% ацетонитрил; дистиллированную воду - 28% ацетонитрил и дистиллированную воду. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-циклогексилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (318 мг, выход 66%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O, TSP): δ (м.д.) 7,45 (1H, с), 4,55 (2H, дт, J=8,5, 1,9 Гц), 4,40-4,30 (1H, м), 4,25 (1H, квинтет, J=6,3 Гц), 4,19 (1H, дд, J=9,0, 2,4 Гц), 4,10-4,00 (2H, м), 3,80-3,70 (1H, м), 3,43 (1H, дд, J=6,3, 2,4 Гц), 3,24 (1H, дкв., J=9,0, 7,1 Гц), 1,96-1,84 (2H, м), 1,83-1,70 (2H, м), 1,69-1,58 (1H, м), 1,46-1,10 (11H, м, включая 3H, д, при 1,30, J=6,3 Гц, и 3H, д, при 1,19, J=7,1 Гц).

ИК (KBr): 1751, 1660, 1605, 1545, 1492, 1393, 1310, 1296

см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 529 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₂₃H₃₀O₅N₄S₂Na:

Вычислено: 529,1555

Найдено: 529,1575 [M+H]⁺

Пример 11

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (410 мг, 1,50 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 11) в диметилформамиде (20 мл) добавляли гидразин ацетат (138 мг, 1,50 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-дифенилфосфорилокси-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (743 мг, 1,25 ммоль) в ацетонитриле (37 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (0,873 мл, 5,01 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат – 10% метанол и этилацетат с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата в виде светло-желтого твердого вещества (485 мг, выход 62%).

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,19 (1H, с), 5,51 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,9 Гц), 4,50 (2H, ддд, J=13,9, 8,1, 2,2 Гц), 4,35-4,20 (3H, м), 4,10-4,00 (2H, м), 3,95-3,60 (8H, м), 3,29 (1H, дд, J=6,6, 2,2 Гц), 3,20 (1H, дкв., J=8,8, 7,3 Гц), 1,38 (3H, д, J=6,6 Гц), 1,27 (3H, д, J=7,3 Гц).

Масс-спектр (FAB⁺): 630 [M+H]⁺

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (480 мг, 0,762 ммоль) (полученный, как описано в примере 11(1)) в смеси тетрагидрофурана (24 мл) и дистиллированной воды (24 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (480 мг) при комнатной температуре в течение 1,3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (64 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду - 3% ацетонитрил; дистиллированную воду - 6% ацетонитрил; дистиллированную воду - 9% ацетонитрил; дистиллированную воду - 12% ацетонитрил; дистиллированную воду - 15% ацетонитрил и дистиллированную воду. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (236 мг, выход 60%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O, TSP): δ (м.д.) 7,15 (1H, с), 4,56 (2H, дт, J=8,4, 0,9 Гц), 4,42-4,32 (1H, м), 4,25 (1H, квинтет, J=6,3 Гц), 4,21 (1H, дд, J=9,0, 2,3 Гц), 4,05 (2H, м), 3,90-3,60 (8H, м), 3,44 (1H, дд, J=6,3, 2,3 Гц), 3,25 (1H, дкв., J=9,0, 7,3 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,20 (3H, д, J=7,3 Гц).

ИК (KBr): 1799, 1608, 1536, 1392, 1311, 1236, 1113 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 517 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₂₁H₂₆O₆N₄S₂Na:

Вычислено: 517,1192

Найдено: 517,1186 [M+H]⁺

Пример 12

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-Этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин-4-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-этоксикарбонил-3-тиазол-2-ил)пиперидин-4-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 4-ацетилтио-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидина (400 мг, 1,27 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 13) в диметилформамиде (12 мл) добавляли гидразин ацетат (152 мг, 1,65 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 2,5 часов. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-дифенилфосфорилокси-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (755 мг, 1,27 ммоль) в ацетонитриле (21 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (1,11 мл, 6,37 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:2) и этилацетат с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин-4-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата в виде светло-желтого твердого вещества (296 мг, выход 38%).

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,27 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,71 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,51 (1H, с), 5,56 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,28 (1H, д, J=13,7 Гц), 4,40 (2H, кв., J=7,1 Гц), 4,39-4,30 (2H, м), 4,10-4,00 (2H, м), 3,60-3,20 (5H, м), 2,20-2,00 (2H, м), 1,90-1,70 (3H, м), 1,43 (3H, д, J=6,5 Гц), 1,41 (3H, т, J=7,1 Гц), 1,36 (7,2 Гц).

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин-4-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин-4-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (291 мг, 0,578 ммоль) (полученный, как описано в примере 12(1)) в смеси тетрагидрофурана (14 мл) и дистиллированной воды (7 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 20% гидроксида палладия (291 мг) на водяной бане (30° C) в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (42 мг), смесь этилацетата и тетрагидрофурана (1:1) и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли, промывали смесью этилацетата и тетрагидрофурана (1:1) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду - 5% ацетонитрил; дистиллированную воду - 7% ацетонитрил и дистиллированную воду. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин-4-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (69 мг, выход 29%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O, TSP): δ (м.д.) 7,69 (1H, с), 4,35 (2H, кв., J=7,1 Гц), 4,30-4,20 (2H, м, включая дд при 4,23, J=9,2, 2,5 Гц), 4,00-3,85 (2H, м), 3,55-3,20 (5H, м), 2,20-2,05 (2H, м), 1,75-1,60 (2H, м), 1,36 (3H, т, J=7,1 Гц), 1,31 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,23 (3H, д, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 1750, 1729, 1603, 1540, 1448, 1385, 1337, 1265, 1223, 1210 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 504 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₂₁H₂₇O₆N₃S₂Na:

Вычислено: 504,1239

Найдено: 504,1246 [M+H]⁺

Пример 13

Динатриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин-4-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-п-нитробензилоксикарбонил-3-тиазол-2-ил)пиперидин-4-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 4-ацетилтио-1-(4-п-нитробензилкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидина (150 мг, 0,353 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 14) в диметилформамиде (7,5 мл) добавляли гидразин ацетат (46 мг, 0,49 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-дифенилфосфорилокси-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (200 мг, 0,353 ммоль) в ацетонитриле (3,0 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (0,09 мл, 0,517 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-п-нитробензилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин-4-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата в виде светло-желтого твердого вещества (220 мг, выход 89%).

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,6 Гц), 8,22 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,59 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,53 (1H, с), 5,51 (1H, д, J=13,8 Гц), 5,43 (2H, с), 5,22 (1H, д, J=13,8 Гц), 4,35-4,20 (2H, м), 4,05-3,90 (2H, м), 3,50-3,10 (6H, м), 2,20-1,95 (2H, м), 1,90-1,50 (3H, м), 1,38 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,31 (3H, д, J=7,2 Гц).

Масс-спектр (FAB⁺): 724 [M+H]⁺

(2) Динатриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин-4-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-п-нитробензилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин-4-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (570 мг, 0,788 ммоль) (полученный, как описано в примере 13(1)) в смеси тетрагидрофурана (38 мл) и дистиллированной воды (19 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 20% гидроксида палладия (572 мг) на водяной бане (30° C) в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (132 мг), смесь этилацетата и тетрагидрофурана (1:1) и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли, промывали смесью этилацетата и тетрагидрофурана (1:1) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду - 3% ацетонитрил и дистиллированную воду. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения динатриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин-4-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (285 мг, выход 76%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,22 (1H, с), 4,30-4,10 (2H, м), 4,00-3,78 (2H, м), 3,60-3,05 (5H, м), 2,15-2,00 (2H, м), 1,80-1,55 (2H, м), 1,26 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,18 (3H, д, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 1747, 1597, 1532, 1397, 1289 см^-1

Пример 14

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин-4-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин-4-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 4-ацетилтио-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидина (400 мг, 1,40 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 15) в диметилформамиде (20 мл) добавляли гидразин ацетат (142 мг, 1,54 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 2 часов. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-дифенилфосфорилокси-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (1,25 г, 2,10 ммоль) в ацетонитриле (37 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (0,61 мл, 3,50 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат и этилацетат:метанол (10:1) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин-4-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата в виде светло-желтого твердого вещества (348 мг, выход 42%).

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,44 (1H, с), 6,99 (1H, ушир. с), 5,56 (1H, ушир. с), 5,51 (1H, д, J=13,8 Гц), 5,24 (1H, д, J=13,8 Гц), 4,35-4,20 (2H, м, включая дд при 4,28, J=9,7, 2,9 Гц), 4,04-3,85 (3H, м), 3,50-3,10 (6H, м), 2,20-2,00 (2H, м), 1,95-1,70 (3H, м), 1,39 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,31 (3H, д, J=7,3 Гц).

Масс-спектр (FAB+): 587 [M+H]⁺

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин-4-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин-4-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (493 мг, 0,839 ммоль) (полученный, как описано в примере 14(1)) в смеси тетрагидрофурана (30 мл) и дистиллированной воды (15 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 20% гидроксида палладия (0,50 г) на водяной бане (30° C) в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (71 мг), смесь этилацетата и тетрагидрофурана (1:1) и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли, промывали смесью этилацетата и тетрагидрофурана (1:1) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду - 3% ацетонитрил; дистиллированную воду - 5% ацетонитрил и дистиллированную воду. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин-4-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (127 мг, выход 32%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,70 (1H, с), 4,50-4,35 (2H, м, включая дд при 4,18, J=9,2, 2,8 Гц), 4,00-3,80 (2H, м), 3,50-3,10 (5H, м), 2,15-1,95 (2H, м), 1,75-1,55 (2H, м), 1,26 (3H, д, J=6,5 Гц), 1,19 (3H, д, J=9,0 Гц).

ИК (KBr): 1749, 1667, 1594, 1547, 1386 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 475 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₁₉H₂₄O₅N₄S₂Na:

Вычислено: 475,1086

Найдено: 475,1070 [M+H]⁺

Пример 15

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин-4-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин-4-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 4-ацетилтио-1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидина (1,21 г, 4,04 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 16) в диметилформамиде (36 мл) добавляли гидразин ацетат (408 мг, 4,43 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-дифенилфосфорилокси-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (3,12 г, 5,25 ммоль) в ацетонитриле (72 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (1,76 мл, 10,1 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (20:1), с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин-4-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата в виде светло-желтого твердого вещества (1,336 г, выход 55%).

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,21 (2H, д, J=8,0 Гц), 7,64 (2H, д, J=8,0 Гц), 7,40 (1H, с), 7,19 (1H, ушир. с), 5,50 (1H, д, J=12,8 Гц), 5,22 (1H, д, J=12,8 Гц), 4,40-4,20 (2H, м), 4,00-3,80 (2H, м), 3,50-3,10 (5H, м), 2,95 (3H, д, J=6,4 Гц), 2,15-1,90 (3H, м), 1,90-1,70 (2H, м), 1,39 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,20 (3H, д, J=9,6 Гц).

Масс-спектр (FAB⁺): 602 [M+H]⁺

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин-4-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин-4-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (857 мг, 1,424 ммоль) (полученный, как описано в примере 15(1)) в смеси тетрагидрофурана (40 мл) и дистиллированной воды (20 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 20% гидроксида палладия (853 мг) на водяной бане (30° C) в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (120 мг), смесь этилацетата и тетрагидрофурана (1:1) и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли, промывали смесью этилацетата и тетрагидрофурана (1:1) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду - 3% ацетонитрил; дистиллированную воду - 5% ацетонитрил; дистиллированную воду - 7% ацетонитрил; дистиллированную воду - 9% ацетонитрил и дистиллированную воду. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин-4-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (317 мг, выход 46%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,34 (1H, с), 4,25-4,10 (2H, м, включая дд при 4,16, J=9,2, 2,2 Гц), 3,95-3,80 (2H, м), 3,50-3,10 (5H, м), 2,84 (3H, с), 2,15-1,95 (2H, м), 1,75-1,50 (2H, м), 1,24 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,17 (3H, д, J=7,3 Гц).

ИК (KBr): 1750, 1654, 1602, 1553, 1385, 1266 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 489 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₂₀H₂₆O₅N₄S₂Na:

Вычислено: 489,1242

Найдено: 489,1255 [M+H]⁺

Пример 16

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин-4-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин-4-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 4-ацетилтио-1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидина (620 мг, 1,98 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 17) в диметилформамиде (35 мл) добавляли гидразин ацетат (201 мг, 2,18 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-дифенилфосфорилокси-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (2,35 г, 3,96 ммоль) в ацетонитриле (65 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (1,40 мл, 8,04 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат и этилацетат:метанол (10:1) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин-4-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата в виде светло-желтого твердого вещества (495 мг, выход 41%).

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,09 (1H, с), 5,51 (1H, д, J=13,8 Гц), 5,23 (1H, д, J=13,8 Гц), 4,35-4,20 (2H, м), 4,00-3,85 (2H, м), 3,50-3,00 (12H, м, включая 3H x2, каждый ушир. с при 3,22 и 3,07), 2,20-1,95 (2H, м), 1,93-1,70 (3H, м), 1,38 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,31 (3H, д, J=7,3 Гц).

Масс-спектр (FAB⁺): 616 [M+H]⁺

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин-4-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин-4-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (487 мг, 0,791 ммоль) (полученный, как описано в примере 16(1)) в смеси тетрагидрофурана (22 мл) и дистиллированной воды (11 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 20% гидроксида палладия (485 мг) на водяной бане (30° C) в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (67 мг), смесь этилацетата и тетрагидрофурана (1:1) и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли, промывали смесью этилацетата и тетрагидрофурана (1:1) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду - 5% ацетонитрил; дистиллированную воду - 7% ацетонитрил; дистиллированную воду - 9% ацетонитрил и дистиллированную воду. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин-4-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (183 мг, выход 46%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,00 (1H, с), 4,30-4,10 (2H, м, включая дд при 4,17, J=9,0, 2,3 Гц), 3,95-3,75 (2H, м), 3,50-3,10 (5H, м), 3,07 (3H, с), 3,00 (3H, с), 2,15-1,95 (2H, м), 1,80-1,50 (2H, м), 1,25 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,18 (3H, д, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 1750, 1612, 1538, 1395 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 503 [M+H]⁺

Пример 17

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор (3S)-3-ацетилтио-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидина (210 мг, 0,721 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 18) в диметилформамиде (10 мл) добавляли гидразин ацетат (80 мг, 0,865 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-дифенилфосфорилокси-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (429 мг, 0,721 ммоль) в ацетонитриле (20 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (0,502 мл, 2,88 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента метиленхлорид – 10% метанол и метиленхлорид с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата в виде светло-желтого твердого вещества (412 мг, выход 100%).

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,65 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,40 (1H, с), 7,03 (1H, ушир. с), 5,50 (1H, д, J=13,6 Гц), 5,48 (1H, ушир. с), 5,22 (1H, д, J=13,6 Гц), 4,36-4,25 (2H, м, включая дд при 4,32, J=9,5, 2,2 Гц), 3,71-3,60 (1H, м), 3,60-3,49 (2H, м), 3,40 (1H, дкв., J=9,5, 7,3 Гц), 3,30 (1H, дд, J=6,6, 2,2 Гц), 2,60-2,45 (1H, м), 2,40-2,05 (1H, м), 1,77 (1H, д, J=4,4 Гц), 1,39 (3H, д, J=6,6 Гц), 1,31 (3H, д, J=7,3 Гц).

Масс-спектр (FAB⁺): 574 [M+H]⁺

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (410 мг, 0,715 ммоль) (полученный, как описано в примере 17(1)) в смеси тетрагидрофурана (15 мл) и дистиллированной воды (15 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (410 мг) при комнатной температуре в течение 1,7 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (60 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду - 3% ацетонитрил; дистиллированную воду - 6% ацетонитрил; дистиллированную воду - 9% ацетонитрил; дистиллированную воду - 12% ацетонитрил и дистиллированную воду. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (150 мг, выход 46%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,41 (1H, с), 4,35-4,20 (2H, м), 4,05 (1H, квинтет, J=5,2 Гц), 3,90 (1H, дд, J=10,8, 5,9 Гц), 3,75-3,65 (1H, м), 3,60-3,40 (4H, м), 2,60-2,45 (1H, м), 2,20-2,15 (1H, м), 1,31 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,25 (3H, д, J=8,9 Гц).

ИК (KBr): 1749, 1669, 1599, 1557, 1391, 1289 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 461 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₁₈H₂₂O₅N₄S₂Na:

Вычислено: 461,0929

Найдено: 461,0926 [M+H]⁺

Пример 18

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)пирролидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)пирролидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор (3S)-3-ацетилтио-1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)пирролидина (137 мг, 0,541 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 19) в диметилформамиде (7 мл) добавляли гидразин ацетат (60 мг, 0,649 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-дифенилфосфорилокси-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (322 мг, 0,541 ммоль) в ацетонитриле (16 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (0,376 мл, 2,16 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 часов пока температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:3) и этилацетат с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)пирролидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата в виде светло-желтого твердого вещества (251 мг, выход 84%).

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,65 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,21 (1H, с), 5,50 (1H, д, J=13,6 Гц), 5,22 (1H, д, J=13,9 Гц), 4,35-4,24 (2H, м), 3,90 (2H, м), 3,74-3,45 (3H, м), 3,38 (1H, дкв., J=9,4, 4,7 Гц), 3,30 (1H, дд, J=7,3, 2,9 Гц), 2,60-2,48 (1H, м), 2,24-2,10 (1H, м), 1,62-1,50 (1H, ушир. с), 1,38 (3H, д, J=5,9 Гц), 1,31 (3H, д, J=7,3 Гц).

Масс-спектр (FAB⁺): 556 [M+H]⁺

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)пирролидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)пирролидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (250 мг, 0,450 ммоль) (полученный, как описано в примере 18(1)) в смеси тетрагидрофурана (12 мл) и дистиллированной воды (12 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (250 мг) при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (38 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду - 3% ацетонитрил; дистиллированную воду - 6% ацетонитрил; дистиллированную воду - 9% ацетонитрил; дистиллированную воду - 12% ацетонитрил; дистиллированную воду - 15% ацетонитрил и дистиллированную воду. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)пирролидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (128 мг, выход 64%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,56 (1H, с), 4,32-4,22 (2H, м), 4,10-4,00 (1H, м), 3,88 (1H, дд, J=10,8, 5,9 Гц), 3,74-3,62 (1H, м), 3,62-3,53 (1H, м), 3,52-3,38 (3H, м), 2,60-2,48 (1H, м), 2,19-2,08 (1H, м), 1,31 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,24 (3H, д, J=7,3 Гц).

ИК (KBr): 2229, 1751, 1604, 1560, 1391, 1310 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 443 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₁₈H₂₀O₄N₄S₂Na:

Вычислено: 443,0824

Найдено: 443,0799 [M+H]⁺

Пример 19

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[(3R)-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[(3R)-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор (3R)-3-ацетилтио-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидина (500 мг, 1,84 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 20) в диметилформамиде (25 мл) добавляли гидразин ацетат (204 мг, 2,21 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-дифенилфосфорилокси-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (1,09 г, 1,84 ммоль) в ацетонитриле (55 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (1,28 мл, 7,36 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента метиленхлорид – 9% метанол и метиленхлорид с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[(3R)-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата в виде светло-желтого твердого вещества (917 мг, выход 87%).

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=8,2 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,2 Гц), 7,40 (1H, с), 7,05 (1H, ушир. с), 5,55 (1H, ушир. с), 5,51 (1H, д, J=14,1 Гц), 5,24 (1H, д, J=14,1 Гц), 4,35-4,25 (2H, м), 4,05-3,90 (2H, м), 3,70-3,60 (1H, м), 3,60-3,40 (4H, м), 3,31 (1H, дд, J=6,9, 2,9 Гц), 2,60-2,40 (1H, м), 2,20-2,05 (1H, м), 1,95 (1H, ушир. с), 1,39 (3H, д, J=5,9 Гц), 1,33 (3H, д, J=6,8 Гц).

Масс-спектр (FAB⁺): 574 [M+H]⁺

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[(3R)-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[(3R)-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (917 мг, 1,60 ммоль) (полученный, как описано в примере 19(1)) в смеси тетрагидрофурана (45 мл) и дистиллированной воды (45 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (917 мг) при комнатной температуре в течение 1,7 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (134 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду - 2% ацетонитрил; дистиллированную воду - 4% ацетонитрил; дистиллированную воду - 6% ацетонитрил; дистиллированную воду - 8% ацетонитрил; дистиллированную воду - 10% ацетонитрил; дистиллированную воду - 12% ацетонитрил; дистиллированную воду - 14% ацетонитрил; дистиллированную воду - 16% ацетонитрил и дистиллированную воду. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[(3R)-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (338 мг, выход 46%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,41 (1H, с), 4,35-4,20 (2H, м), 4,10-4,00 (1H, м), 3,89 (1H, дд, J=11,2, 6,7 Гц), 3,70-3,60 (1H, м), 3,58-3,40 (4H, м), 2,60-2,45 (1H, м), 2,20-2,10 (1H, м), 1,31 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,25 (3H, д, J=7,3 Гц).

ИК (KBr): 1748, 1608, 1597, 1559, 1391, 1289 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 461 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₁₈H₂₂O₅N₄S₂Na:

Вычислено: 461,0929

Найдено: 461,0938 [M+H]⁺

Пример 20

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-Гидроксиметил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-трет-бутилдиметилсилилоксиметил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-трет-бутилдиметилсилилоксиметил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (415 мг, 1,16 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 12) в диметилформамиде (20,8 мл) добавляли гидразин ацетат (137,0 мг, 1,39 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-дифенилфосфорилокси-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (690 мг, 1,16 ммоль) в ацетонитриле (34,4 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (1,34 мл, 7,69 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-трет-бутилдиметилсилилоксиметил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата в виде светло-желтого сиропа (719 мг, выход 94%).

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=8,3 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 6,48 (1H, с), 5,50 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,9 Гц), 4,66 (2H, с), 4,46 (2H, дд, J=15,4, 8,1 Гц), 4,32-4,20 (3H, м), 4,08-4,00 (2H, м), 3,28 (1H, дд, J=6,6, 2,2 Гц), 3,21 (1H, д, дкв., J=9,1, 7,3 Гц), 1,95 (1H, ушир. с), 1,37 (3H, д, J=5,9 Гц), 1,26 (3H, д, J=7,3 Гц), 0,94 (9H, с), 0,10 (6H, с).

(2) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-гидроксиметил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-трет-бутилдиметилсилилоксиметил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (719 мг, 1,09 ммоль) (полученный, как описано в примере 20(1)) в безводном тетрагидрофуране (36 мл) последовательно добавляли уксусную кислоту (0,19 мл, 3,3 ммоль) и раствор фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (3,3 мл, 3,3 ммоль) на ледяной бане. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и водный слой затем экстрагировали этилацетатом. Органические слои промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (15:1) с получением желаемого соединения п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-гидроксиметил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (426,2 мг, выход 72%) в виде желтого сиропа.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,20 (2H, д, J=8,1 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,1 Гц), 6,50 (1H, с), 5,54 (1H, д, J=13,6 Гц), 5,27 (1H, д, J=13,6 Гц), 4,56 (1H, д, J=13,6 Гц), 4,53 (1H, д, J=13,6 Гц), 4,47 (1H, т, J=8,5 Гц), 4,41 (1H, т, J=8,5 Гц), 4,32 (1H, квинтет, J=6,4 Гц), 4,28-4,20 (2H, м), 4,08 (1H, дд, J=8,5, 5,4 Гц), 3,88 (1H, дд, J=5,4, 8,5 Гц), 3,304 (1H, дд, 6,2, 2,7 Гц), 3,204 (1H, дкв., J=9,2, 7,3 Гц), 1,35 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,25 (3H, д, J=7,3 Гц).

(3) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-гидроксиметил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-гидроксиметил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (426,2 мг, 0,78 ммоль) (полученный, как описано в примере 20(2)) в смеси тетрагидрофурана (20 мл) и дистиллированной воды (10 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 20% гидроксида палладия (530 мг) при комнатной температуре в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (65,5 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду - 3% ацетонитрил и дистиллированную воду. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-гидроксиметил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (156 мг, выход 46%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 6,50 (1H, с), 4,36-4,28 (4H, м), 4,19-4,10 (1H, м), 4,10-3,98 (2H, м, включая 1H, дд при 4,01, J=8,0, 3,0 Гц), 3,88-3,68 (2H, м), 3,24 (1H, дд, J=6,6, 2,9 Гц), 3,12-3,00 (1H, м), 1,11 (3H, д, J=5,9 Гц), 1,00 (3H, д, J=7,3 Гц).

ИК (KBr): 3357, 1748, 1600, 1528, 1470, 1396, 1311 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 434 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₁₇H₂₁O₅N₃S₂Na:

Вычислено: 434,0820

Найдено: 434,0796 [M+H]⁺

Пример 21

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (142 мг, 0,56 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 21) в диметилформамиде (7 мл) добавляли гидразин ацетат (62 мг, 0,67 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-дифенилфосфорилокси-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (333 мг, 0,56 ммоль) в ацетонитриле (7 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (0,39 мл, 2,24 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (10:1) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (274 мг, выход 88%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,77 (1H, с), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 6,78 (1H, ушир. с), 5,51 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,2 Гц), 4,51 (2H, кв., J=8,1 Гц), 4,30-4,21 (3H, м), 4,08 (2H, дд, J=5,9, 8,1 Гц), 3,30 (1H, дд, J=2,9, 7,3 Гц), 3,24, 3,16 (1H, м), 2,94 (3H, д, J=5,1 Гц), 1,38 (3H, д, J=5,9 Гц), 1,26 (3H, д, J=7,4 Гц).

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (344 мг, 0,62 ммоль) (полученный, как описано в примере 21(1)) в смеси тетрагидрофурана (17 мл) и дистиллированной воды (9 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 20% гидроксида палладия (344 мг) на водяной бане (30° C) в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (52 мг), смесь этилацетата и тетрагидрофурана (1:1) и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой промывали смесью этилацетата и тетрагидрофурана (1:1), разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду - 5% ацетонитрил. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (166 мг, выход 60%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,73 (1H, с), 4,44 (2H, т, J=8,1 Гц), 4,20-4,13 (1H, м), 4,10 (1H, т, J=6,6 Гц), 4,05 (1H, д, J=9,5 Гц), 3,94 (2H, квинт., J=4,4 Гц), 3,28 (1H, дд, J=2,2, 5,9 Гц), 3,09 (1H, квинт., J=7,3 Гц), 2,73 (3H, с), 1,15 (3H, д, J=6,6 Гц), 1,04 (3H, д, J=7,3 Гц).

ИК (KBr): 3415, 1750, 1625, 1531, 1388 см^-1

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₁₈H₂₂O₆N₄SNa:

Вычислено: 445,1157

Найдено: 445,1162 [M+H]⁺

Пример 22

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-карбамоил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (275 мг, 1,14 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 22) в диметилформамиде (14 мл) добавляли гидразин ацетат (126 мг, 1,37 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-дифенилфосфорилокси-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (677 мг, 1,14 ммоль) в ацетонитриле (14 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (0,79 мл, 4,56 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:ацетонитрил:метанол (10:10:1) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (313 мг, выход 51%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CD₃OD): δ (м.д.) 8,08 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,77 (1H, с), 7,55 (2H, д, J=8,8 Гц), 5,32 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,14 (1H, д, J=13,9 Гц), 4,43 (2H, т, J=8,8 Гц), 4,28-4,20 (1H, м), 4,13 (1H, дд, J=2,9, 9,5 Гц), 4,00 (1H, т, J=6,6 Гц), 3,90 (2H, дт, J=4,4, 9,5 Гц), 3,23-3,18 (2H, м), 1,18 (3H, д, J=5,9 Гц), 1,09 (3H, д, J=7,3 Гц).

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (313 мг, 0,582 ммоль) (полученный, как описано в примере 22(1)) в смеси тетрагидрофурана (16 мл) и дистиллированной воды (8 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 20% гидроксида палладия (313 мг) на водяной бане (30° C) в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (49 мг), смесь этилацетата и тетрагидрофурана (1:1) и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой промывали смесью этилацетата и тетрагидрофурана (1:1), разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду - 5% ацетонитрил. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (110 мг, выход 44%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,79 (1H, с), 4,46 (2H, т, J=8,1 Гц), 4,20-4,16 (1H, м), 4,10 (1H, т, J=5,9 Гц), 4,06 (1H, дд, J=2,9, 9,5 Гц), 3,95 (2H, квинт., J=4,4 Гц), 3,28 (1H, дд, J=2,9, 5,9 Гц), 3,12-3,08 (1H, м), 1,15 (3H, д, J=6,6 Гц), 1,05 (3H, д, J=7,3 Гц).

ИК (KBr): 3360, 1749, 1671, 1625, 1384, 1275 см^-1

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺):

Вычислено: 431,0992

Найдено: 431,1008 [M+H]⁺

Пример 23

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-циано-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-циано-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-циано-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (156 мг, 0,70 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 23) в диметилформамиде (8 мл) добавляли гидразин ацетат (77 мг, 0,84 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-дифенилфосфорилокси-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (416 мг, 0,70 ммоль) в ацетонитриле (8 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (0,49 мл, 2,80 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-циано-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (309 мг, выход 84%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,74 (1H, с), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 5,51 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,2 Гц), 4,56 (2H, кв., J=8,1 Гц), 4,29-4,22 (3H, м), 4,15-4,10 (2H, м), 3,30 (1H, дд, J=2,9, 7,3 Гц), 3,19 (1H, дт, J=7,3, 9,5 Гц), 1,37 (3H, д, J=6,6 Гц), 1,26 (3H, д, J=7,3 Гц).

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-циано-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-циано-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (309 мг, 0,59 ммоль) (полученный, как описано в примере 23(1)) в смеси тетрагидрофурана (16 мл) и дистиллированной воды (8 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 20% гидроксида палладия (309 мг) на водяной бане (30° C) в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (50 мг), смесь этилацетата и тетрагидрофурана (1:1) и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой промывали смесью этилацетата и тетрагидрофурана (1:1), разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду - 5% ацетонитрил. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-циано-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (150 мг, выход 60%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,92 (1H, с), 4,45 (2H, т, J=8,8 Гц), 4,20-4,16 (1H, м), 4,09 (1H, т, J=6,6 Гц), 4,05 (1H, д, J=8,8 Гц), 3,95 (2H, квинт., J=4,4 Гц), 3,28 (1H, д, J=6,6 Гц), 3,08 (1H, квинт., J=8,1 Гц), 1,14 (3H, д, J=6,6 Гц), 1,03 (3H, д, J=7,3 Гц).

ИК (KBr): 3372, 1750, 1628, 1394, 1283 см^-1

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺):

Вычислено: 413,0860

Найдено: 413,0921 [M+H]⁺

Пример 24

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-азетидинокарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-азетидинокарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-азетидинокарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (247 мг, 0,83 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 24) в диметилформамиде (12 мл) добавляли гидразин ацетат (92 мг, 1,0 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-дифенилфосфорилокси-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (493 мг, 0,83 ммоль) в ацетонитриле (25 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (0,58 мл, 3,32 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенный водный раствор хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента 10% метанол-этилацетат с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-азетидинокарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (321 мг, выход 65%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,41 (1H, с), 5,51 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,7 Гц), 4,56 (2H, т, J=7,4 Гц), 4,50-4,40 (2H, м), 4,35-4,10 (5H, м, включая 2H, т при 4,17, J=7,4 Гц), 4,04 (1H, т, J=5,4 Гц), 4,02 (1H, т, J=5,4 Гц), 3,29 (1H, дд, J=7,0, 2,5 Гц), 3,18 (1H, дкв., J=8,9, 7,3 Гц), 2,30 (2H, квинтет, J=7,4 Гц), 1,95-1,50 (скошенный с, включая 1H из OH группы), 1,38 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,26 (3H, д, J=7,3 Гц).

Масс-спектр (FAB⁺): 600 [M+H]⁺

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-азетидинокарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-азетидинокарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (321 мг, 0,54 ммоль) (полученный, как описано в примере 24(1)) в смеси тетрагидрофурана (15 мл) и дистиллированной воды (15 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (321 мг) при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (45 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой промывали смесью растворителей, описанных выше, разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду - 5% ацетонитрил; дистиллированную воду - 10% ацетонитрил; дистиллированную воду – 15% ацетонитрил и дистиллированную воду. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-азетидинокарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (162 мг, выход 65%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O, TSP): δ (м.д.) 7,34 (1H, с), 4,95-4,65 (4H, м), 4,40-4,30 (1H, м), 4,30-4,13 (4H, м, включая 1H, квинтет при 4,25, J=6,3Hz, и 1H, дд, при 4,19, J=14,4, 7,2 Гц), 4,10-4,00 (2H, м), 3,43 (1H, дд, J=6,3, 2,5 Гц), 3,26 (1H, квинтет, J=7,2 Гц), 2,37 (2H, квинтет, J=7,9 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,20 (3H, д, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 1750, 1607, 1538, 1455, 1435, 1393, 1308, 1292

см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 487 [M+H]⁺

Пример 25

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-тиоморфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-тиоморфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-тиоморфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (207 мг, 0,62 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 25) в диметилформамиде (8 мл) добавляли гидразин ацетат (68,4 мг, 0,74 ммоль) при 0° C в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-дифенилфосфорилокси-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (370,5 мг, 0,62 ммоль) в ацетонитриле (16 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (0,43 мл, 2,48 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента 5% метанол-этилацетат, с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(1-(1,3-тиазол-4-тиоморфолинoкарбонил-2-ил)азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (246 мг, выход 61%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,67 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,12 (1H, с), 5,51 (1H, д, J=13,8 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,8 Гц), 4,60-4,40 (2H, м), 4,35-4,22 (3H, м), 4,10-4,00 (2H, м), 4,00-3,90 (4H, м), 3,29 (1H, дд, J=6,4, 2,6 Гц), 3,21 (1H, дкв., J=9,2, 7,3 Гц), 2,80-2,60 (4H, м), 1,80-1,50 (скошенный с, включая 1H из OH группы), 1,38 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,27 (3H, д, J=7,3 Гц).

Масс-спектр (FAB⁺): 646 [M+H]⁺

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-тиоморфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-тиоморфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (543 мг, 0,84 ммоль) (полученный, как описано в примере 25(1)) в смеси тетрагидрофурана (30 мл) и дистиллированной воды (30 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (543 мг) при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (70,6 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду - 5% ацетонитрил; дистиллированную воду - 10% ацетонитрил; дистиллированную воду – 15% ацетонитрил; дистиллированную воду – 20% ацетонитрил и дистиллированную воду. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-тиоморфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (277 мг, выход 62%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O, TSP): δ (м.д.) 7,10 (1H, с), 4,56 (2H, т, J=8,0 Гц), 4,42-4,30 (1H, м), 4,25 (1H, квинтет, J=6,3 Гц), 4,21 (2H, дд, J=7,8, 2,4 Гц), 4,12-4,02 (2H, м), 3,96-3,85 (2H, м), 3,85-3,75 (2H, м), 3,44 (1H, дд, J=6,3, 2,4 Гц), 3,26 (1H, дкв., J=8,9, 7,8 Гц), 2,86-2,70 (2H, м), 2,70-2,60 (2H, м), 1,30 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,20 (3H, д, J=7,8 Гц).

ИК (KBr): 1749, 1608, 1535, 1454 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 533 [M+H]⁺

Пример 26

Этил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (357 мг, 0,80 ммоль) (полученный, как описано в примере 3) в диметилформамиде (5 мл) добавляли этил йодид (357 мг, 2,40 ммоль) при 0° C в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. Смесь затем перемешивали в течение 2 часов пока температура постепенно поднималась до комнатной температуры. В конце этого периода в реакционную смесь добавляли этилацетат и органический слой последовательно промывали 10% водным раствором хлорида натрия, 10% водным раствором тиосульфата натрия, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат-20% ацетонитрил; этилацетат – 40% ацетонитрил; этилацетат – 60% ацетонитрил и этилацетат с получением очищенного продукта, который растворяли в метиленхлориде и диэтиловом эфире и в раствор последовательно добавляли гексан с получением этил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (387 мг, выход 95%) в виде бесцветного порошка.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,48 (1H, с), 6,99 (1H, ушир. с), 5,61 (1H, ушир. с), 4,48 (2H, кв., J=8,5 Гц), 4,19-4,43 (4H, м), 4,02-4,13 (2H, м), 3,26 (2H, дд, J=7,1, 2,7 Гц), 3,10 (1H, дкв., J=9,0, 7,3 Гц), 2,07 (1H, д, J=4,8 Гц), 1,37 (3H, д, J=6,9 Гц), 1,36 (3H, т, J=7,5 Гц), 1,25 (3H, д, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 1770, 1669, 1602, 1543, 1324, 1283 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 453 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₁₉H₂₅O₅N₄S₂:

Вычислено: 453,1267

Найдено 453,1235 [M+H]⁺

Пример 27

Фенил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (162 мг, 0,36 ммоль) (полученный, как описано в примере 3) в смеси воды (1 мл) и тетрагидрофурана (1 мл) добавляли 1M хлористоводородную кислоту (0,33 мл, 0,36 ммоль) при 0° C. Смесь концентрировали при пониженном давлении. В раствор остатка в ацетонитриле (10 мл) добавляли фенол (102 мг, 1,1 ммоль), диметиламинопиридин (22 мг, 0,18 ммоль) и гидрохлорид 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (139 мг, 0,73 ммоль) при комнатной температуре. После перемешивания смеси в течение 30 минут, затем добавляли гидрохлорид 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (139 мг, 0,73 ммоль) и полученную смесь перемешивали в течение 30 минут. По завершении этого времени, в реакционную смесь добавляли этилацетат и органический слой последовательно промывали разведенной соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат-20% ацетонитрил; этилацетат – 40% ацетонитрил; этилацетат – 60% ацетонитрил и этилацетат, с получением фенил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (66 мг, выход 36%) в виде бесцветного порошка.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,48 (1H, с), 7,38-7,43 (2H, м), 7,23-7,28 (3H, м), 6,99 (1H, ушир. с), 5,60 (1H, ушир. с), 4,40-4,55 (2H, м), 4,24-4,36 (3H, м), 4,03-4,13 (2H, м), 3,32 (1H, дд, J=7,0, 2,6 Гц), 3,25 (1H, дкв., J=9,2, 7,3 Гц), 2,09 (1H, ушир. с), 1,39 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,30 (3H, д, J=7,3 Гц).

ИК (KBr): 1771, 1668, 1542, 1195 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 501 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₂₃H₂₅O₅N₄S₂:

Вычислено: 501,1266

Найдено 501,1266 [M+H]⁺

Пример 28

Пивалоилоксиметил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (402 мг, 0,90 ммоль) (полученный, как описано в примере 3) в диметилацетамиде (5 мл) добавляли йодометил пивалат (261 мг, 1,08 ммоль) при 0° C в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. По прошествии этого времени, в реакционную смесь добавляли этилацетат и органический слой последовательно промывали 10% водным раствором хлорида натрия, 10% водным раствором тиосульфата натрия, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. К остатку добавляли диэтиловый эфир с получением пивалоилоксиметил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (450 мг, выход 93%) в виде бесцветного порошка.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆): δ (м.д.) 7,47 (1H, с), 7,43 (1H, ушир. с), 7,32 (1H, ушир. с), 5,89 (1H, д, J=5,9 Гц), 5,74 (1H, д, J=5,9 Гц), 5,09 (1H, д, J=5,2 Гц), 4,42-4,58 (3H, м), 4,20 (1H, дд, J=9,4, 2,4 Гц), 3,89-4,02 (3H, м), 3,37 (1H, дкв., J=9,1, 7,4 Гц), 3,26 (1H, дд, J=6,3, 2,6 Гц), 1,14 (3H, д, J=7,4 Гц), 1,13 (9H, с), 1,11 (3H, д, J=6,5 Гц).

ИК (KBr): 1778, 1754, 1602, 1545, 1282, 1118 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 539 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₂₃H₃₁O₇N₄S₂:

Вычислено: 539,1634

Найдено 539,1634 [M+H]⁺

Пример 29

1-(Изопропоксикарбонилокси)этил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (245 мг, 0,55 ммоль), полученный, как описано в примере 3, в диметилацетамиде (5 мл) добавляли 1-йодоэтил изопропилкарбоната (317 мг, 1,21 ммоль) при 0° C в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1,5 часа. Полученную смесь затем перемешивали в течение 1,5 часа пока температура постепенно поднималась до комнатной температуры. По прошествии этого времени, в реакционную смесь добавляли этилацетат и органический слой последовательно промывали 10% водным раствором хлорида натрия, 0,1М соляной кислотой, 10% водным раствором тиосульфата натрия, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат-20% ацетонитрил; этилацетат – 40% ацетонитрил; этилацетат – 60% ацетонитрил и этилацетат, с получением очищенного продукта, который растворяли в метиленхлориде, и в раствор последовательно добавляли диэтиловый эфир и гексан с получением 1-(изопропоксикарбонилокси)этил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (266 мг, выход 88%) в виде бесцветного порошка.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,48 (1H, с), 7,00 (1H, ушир. с), 6,82-6,92 (1H, м), 5,65 (1H, ушир. с), 4,84-4,97 (1H, м), 4,43-4,52 (2H, м), 4,18-4,39 (3H, м), 4,02-4,07 (2H, м), 3,25 (1H, дд, J=7,0, 2,5 Гц), 3,17 (1H, дкв., J=9,3, 7,3 Гц), 2,16 (1H, ушир. с), 1,61 (3/2Н, д, J=5,5 Гц), 1,59 (3/2H, д, J=5,5 Гц), 1,18-1,39 (12H, м).

ИК(KBr): 1763, 1669, 1542, 1276, 1074 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 555 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₂₃H₃₁O₈N₄S₂:

Вычислено: 555,1584

Найдено 555,1570 [M+H]⁺

Пример 30

1-(3-Пентилоксикарбонилокси)этил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (402 мг, 0,90 ммоль) (полученный, как описано в примере 3) в диметилацетамиде (8 мл) добавляли 1-йодоэтил 3-пентилкарбонат (568 мг, 1,98 ммоль) при 0° C в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. Полученную смесь затем перемешивали в течение 2 часов пока температура постепенно поднималась до комнатной температуры. По прошествии этого времени, в реакционную смесь добавляли этилацетат и органический слой последовательно промывали 10% водным раствором хлорида натрия, 0,1М соляной кислотой, 10% водным раствором тиосульфата натрия, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат-20% ацетонитрил; этилацетат – 40% ацетонитрил; этилацетат – 60% ацетонитрил и этилацетат, с получением 1-(3-пентилоксикарбонилокси)этил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (506 мг, выход 96%) в виде бесцветного аморфного продукта.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,48 (1H, с), 7,00 (1H, ушир. с), 6,85-6,93 (1H, м), 5,58 (1H, ушир. с), 4,57-4,66 (1H, м), 4,42-4,52 (2H, м), 4,15-4,32 (3H, м), 4,02-4,10 (2H, м), 3,24 (1H, дд, J=7,1, 2,6 Гц), 3,17 (1H, дкв., J=9,3, 7,4 Гц), 2,00 (1H, ушир. с), 1,50-1,72 (7H, м), 1,34 (3/2H, д, J=6,5 Гц), 1,36 (3/2H, J=6,5 Гц), 1,24 (3/2H, д, J=7,1 Гц), 1,25 (3/2H, д, J=7,3 Гц), 0,84-0,98 (6H, м).

ИК (KBr): 1761, 1671, 1542, 1268, 1074 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 583 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₂₅H₃₅O₈N₄S₂:

Вычислено: 583,1896

Найдено 583,1907 [M+H]⁺

Пример 31

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-пирролидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-пирролидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-пирролидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (235 мг, 0,84 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 26) в диметилформамиде (12 мл) добавляли гидразин ацетат (103 мг, 110 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 3 часов. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (499 мг, 0,84 ммоль) в ацетонитриле (25 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (0,56 мл, 3,36 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат и этилацетат:метанол (9:1), с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-пирролидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (240 мг, выход 46%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,28 (1H, с), 5,51 (1H, д, J=13,8 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,8 Гц), 4,49 (2H, дд, J=14,6, 8,5 Гц), 4,35-4,20 (3H, м), 4,05 (1H, т, J=6,1 Гц), 4,04 (1H, т, J=6,1 Гц), 3,78 (2H, т, J=6,5 Гц), 3,62 (2H, т, J=6,5 Гц), 3,29 (1H, дд, J=7,2, 2,5 Гц), 3,20 (1H, дкв., J=9,0, 7,3 Гц), 1,82-1,98 (4H, м), 1,38 (3H, д, J=6,1 Гц), 1,27 (3H, д, J=7,2 Гц).

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-пирролидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-пирролидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (240 мг, 0,39 ммоль) (полученный, как описано в примере 31(1)) в смеси тетрагидрофурана (12 мл) и дистиллированной воды (12 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 7,5% палладия на угле (240 мг) на водяной бане (30° C) в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (33 мг), уксусную кислоту и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду - 3% ацетонитрил; дистиллированную воду - 6% ацетонитрил и дистиллированную воду. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-пирролидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (113 мг, выход 60%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,40 (1H, с), 4,56 (2H, т, J=8,6 Гц), 4,43-4,30 (1H, м), 4,25 (1H, квинт., J=6,4 Гц), 4,20 (1H, дд, J=8,9, 2,4 Гц), 4,10-3,98 (2H, м), 3,62 (2H, т, J=6,6 Гц), 3,54 (2H, т, J=6,6 Гц), 3,26 (1H, дкв., J=8,9, 7,4 Гц), 3,43 (1H, дд, J=8,9, 2,4 Гц), 2,05-1,85 (4H, м), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,27 (3H, д, J=7,4 Гц).

ИК (KBr): 3375,7, 1605,9, 1537,4, 1468,9, 1423,6, 1396,6, 1298,2 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 501 [M+H]⁺

Пример 32

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-пиперидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-пиперидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-пиперидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (276 мг, 0,85 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 27) в диметилформамиде (20 мл) добавляли гидразин ацетат (94 мг, 1,02 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 2 часов. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (505 мг, 0,85 ммоль) в ацетонитриле (20 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (0,59 мл, 3,40 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат и этилацетат:метанол (9:1), с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-пиперидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (464 мг, выход 87%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,02 (1H, с), 5,51 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,26 (1H, д, J=13,7 Гц), 4,51 (1H, т, J=8,1 Гц), 4,50 (1H, т, J=8,1 Гц), 4,32-4,20 (3H, м, включая 4,25 (1H, дд, J=8,0, 2,5 Гц)), 4,07 (1H, т, J=5,7 Гц), 4,05 (1H, т, J=5,7 Гц), 3,72-3,58 (4H, м), 3,28 (1H, дд, J=6,8, 2,5 Гц), 3,20 (1H, дкв., J=8,4, 7,3 Гц), 1,80-1,45 (6H, м), 1,38 (3H, д, J=6,8 Гц), 1,26 (3H, д, J=7,1 Гц).

(2) натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-пиперидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-пиперидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (464 мг, 0,74 ммоль) (полученный, как описано в примере 32(1)) в смеси тетрагидрофурана (20 мл) и дистиллированной воды (20 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 7,5% палладия на угле (464 мг) на водяной бане (35° C) в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (62 мг), уксусную кислоту и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду - 2% ацетонитрил; дистиллированную воду - 5% ацетонитрил; дистиллированную воду - 10% ацетонитрил; дистиллированную воду - 20% ацетонитрил; дистиллированную воду - 30% ацетонитрил и дистиллированную воду. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-пиперидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (171 мг, выход 45%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,04 (1H, с), 4,10-4,00 (2H, м), 4,42-4,30 (1H, м), 4,25 (1H, квинт., J=6,2 Гц), 4,21 (1H, дд, J=9,0, 2,4 Гц), 4,05 (2H, ддд, J=8,3, 5,4, 2,7 Гц), 3,62 (2H, т, J=5,3 Гц), 3,49 (2H, т, J=5,3 Гц), 3,44 (1H, дд, J=6,2, 2,4 Гц), 3,26 (1H, дкв., J=7,7, 7,4 Гц), 1,70-1,60 (4H, м), 1,60-1,50 (2H, м), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,27 (3H, д, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 3382,5, 1747,7, 1605,9, 1538,4, 1400,4, 1310,7, 1249,0 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 515 [M+H]⁺

Пример 33

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-циклопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-циклопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-N-циклопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (342 мг, 1,15 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 28) в диметилформамиде (12 мл) добавляли гидразин ацетат (127 мг, 1,38 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (684 мг, 1,15 ммоль) в ацетонитриле (25 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (0,80 мл, 4,60 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М водным раствором хлорида натрия, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат и этилацетат:метанол (9:1), с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-циклопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (606 мг, выход 88%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,44 (1H, с), 7,23 (1H, ушир. с), 5,51 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,7 Гц), 4,49 (2H, дд, J=14,3, 7,6 Гц), 4,37-4,19 (3H, м), 3,98-4,12 (3H, м), 3,30 (1H, дд, J=9,2, 7,3 Гц), 3,20 (1H, дкв., J=9,2, 7,3 Гц), 2,80-2,94 (1H, м), 1,38 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,27 (3H, д, J=7,3 Гц), 0,85 (1H, т, J=5,5 Гц), 0,83 (1H, т, J=5,5 Гц), 0,58-0,70 (2H, м).

(2) натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-циклопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-циклопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (606 мг, 1,01 ммоль) (полученный, как описано в примере 33(1)) в смеси тетрагидрофурана (30 мл) и дистиллированной воды (30 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 7,5% палладия на угле (606 мг) на водяной бане (35° C) в течение 2,5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (85 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду - 5% ацетонитрил; дистиллированную воду - 10% ацетонитрил и дистиллированную воду. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-циклопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (275 мг, выход 56%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,46 (1H, с), 4,54 (2H, т, J=8,2 Гц), 4,38-4,30 (1H, м), 4,25 (1H, квинт., J=6,3 Гц), 4,19 (1H, дд, J=8,9, 2,4 Гц), 4,10-4,19 (1H, дд, J=8,9, 2,4 Гц), 3,43 (1H, дд, J=6,3, 2,4 Гц), 3,24 (1H, дкв., J=8,9, 7,3 Гц), 2,78-2,70 (1H, м), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,19 (3H, д, J=7,2 Гц), 0,85 (1H, т, J=5,2 Гц), 0,84 (1H, т, J=5,2 Гц), 0,73-0,61 (2H, м).

ИК (KBr): 3397,0, 1750,1, 1603,5, 1545,7, 1489,7, 1470,5, 1393,3, 1312,3 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 465 [M+H]⁺

Пример 34

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-циклобутилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-циклобутилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-N-циклобутилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (398 мг, 1,28 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 29) в диметилформамиде (15 мл) добавляли гидразин ацетат (141 мг, 1,53 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 2,5 часов. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (761 мг, 1,28 ммоль) в ацетонитриле (30 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (0,88 мл, 5,12 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М водным раствором хлорида натрия, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат и этилацетат:метанол (9:1), с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-циклобутилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (578 мг, выход 74%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,41 (1H, с), 5,51 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,7 Гц), 4,60-4,42 (3H, м, включая 4,52 (2H, квинт., J=7,8 Гц)), 4,36 – 4,20 (3H, м), 3,30 (1H, дд, J=6,9, 2,5 Гц), 3,21 (1H, дкв., J=9,2, 7,4 Гц), 2,47-2,33 (2H, м), 2,10-1,92 (2H, м),1,85-1,65 (2H, м), 1,39 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,28 (3H, д, J=7,3 Гц).

(2) натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-циклобутилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-циклобутилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (578 мг, 0,94 ммоль) (полученный, как описано в примере 34(1)) в смеси тетрагидрофурана (30 мл) и дистиллированной воды (30 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 7,5% палладия на угле (578 мг) на водяной бане (35° C) в течение 2,5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (79 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду - 5% ацетонитрил; дистиллированную воду - 10% ацетонитрил и дистиллированную воду. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-циклобутилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (322 мг, выход 68%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,45 (1H, с), 4,56 (2H, т, J=8,0 Гц), 4,44-4,29 (2H, м), 4,25 (1H, квинт., J=6,3 Гц), 4,20 (1H, дд, J=8,8, 2,4 Гц), 4,12-4,00 (2H, м), 3,44 (1H, дд, J=6,3, 2,5 Гц), 3,26 (1H, дкв., J=8,8, 7,4 Гц), 2,41-2,28 (2H, м), 2,15-2,00 (2H, м), 1,87-1,72 (2H, м), 1,31 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,20 (3H, д, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 3395,1, 1750,1, 1659,4, 1604,5, 1545,7, 1490,7, 1470,5, 1393,8, 1310,4, 1251,6 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 501 [M+H]⁺

Пример 35

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(4-метилпиперазин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(4-метилпиперазин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-[4-(4-метилпиперазин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (1,35 г, 3,97 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 30) в диметилформамиде (40 мл) добавляли гидразин ацетат (438 мг, 4,76 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (2,36 г, 3,97 ммоль) в ацетонитриле (40 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (2,77 мл, 15,9 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат и этилацетат:метанол (1:5), с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(4-метилпиперазин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (828 мг, выход 60%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,16 (1H, с), 5,51 (1H, д, J=13,8 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,8 Гц), 4,50 (1H, т, J=4,9 Гц), 4,49 (1H, т, J=4,9 Гц), 4,33-4,20 (3H, м), 4,06 (1H, т, J=4,9 Гц), 4,05 (1H, т, J=4,9 Гц) 3,99-3,73 (4H, м), 3,29 (1H, дд, J=7,0, 2,5 Гц), 3,20 (1H, дкв., J=9,1, 7,3 Гц), 2,74-2,48 (4H, м), 1,38 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,27 (3H, д, J=7,3 Гц).

(2) натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(4-метилпиперазин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(4-метилпиперазин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (500 мг, 0,78 ммоль) (полученный, как описано в примере 35(1)) в смеси тетрагидрофурана (25 мл) и дистиллированной воды (25 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 7,5% палладия на угле (500 мг) на водяной бане (35° C) в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли уксусную кислоту и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли, промывали смесью растворителей, описанной выше и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду - 2% ацетонитрил; дистиллированную воду - 4% ацетонитрил; дистиллированную воду - 6% ацетонитрил; дистиллированную воду - 8% ацетонитрил; дистиллированную воду - 10% ацетонитрил; дистиллированную воду - 12% ацетонитрил и дистиллированную воду. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(4-метилпиперазин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (192 мг, выход 49%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,24 (1H, с), 4,57 (2H, т, J=8,4 Гц), 4,39-4,30 (1H, м), 4,25 (1H, квинт., J=6,3 Гц), 4,20 (1H, дд, J=9,0, 2,4 Гц), 4,15-3,05 (12H, м, включая 4,04 (2H, дд, J=8,4, 4,9 Гц), 3,44 (1H, дд, J=6,3, 2,6 Гц), 3,25 (1H, дкв., J=9,0, 7,0 Гц)), 2,88 (3H, с), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,20 (3H, д, J=7,1 Гц).

ИК (KBr): 3397,0, 1757,8, 1606,4, 1536,0, 1457,9, 1429,0, 1383,7, 1312,3 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 508 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FSI⁺) для C₂₂H₃₀O₅N₅S₂Na:

Вычислено: 508,1688

Найдено 508,1688 [M+H]⁺

Пример 36

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (350 мг, 1,07 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 31) в диметилформамиде (18 мл) добавляли гидразин ацетат (118 мг, 1,28 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (636 мг, 1,07 ммоль) в ацетонитриле (32 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (746 мкл, 4,28 ммоль). Смесь перемешивали в течение 6 часов пока температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 10% водным раствором хлорида натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (95:5 и 9:1), с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (636 мг, выход 94%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,44 (1H, с), 5,51 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,2 Гц), 4,75-4,69 (1H, м), 4,51-4,43 (2H, м), 4,42-4,37 (1H, м), 4,32-4,20 (5H, м), 4,04 (2H, дт, J=8,1, 5,1 Гц), 3,33 (3H, с), 3,29 (1H, дд, J=2,2, 6,6 Гц), 3,20 (1H, дкв., J=9,2, 7,3 Гц), 1,38 (3H, д, J=6,6 Гц), 1,27 (3H, д, J=7,3 Гц).

(2) натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (630 мг, 1,00 ммоль) (полученный, как описано в примере 36(1)) в смеси тетрагидрофурана (32 мл) и дистиллированной воды (32 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (630 мг) при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (84 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду и дистиллированная вода:ацетонитрил (92:8). Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (239 мг, выход 46%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,39 (1H, с), 4,76-4,69 (1H, м), 4,56 (2H, д, J=8,1 Гц), 4,44-4,31 (4H, м), 4,25 (1H, дкв., J=6,1, 6,4 Гц), 4,20 (1H, дд, J=2,4, 9,1 Гц), 4,09-3,99 (3H, м), 3,43 (1H, дд, J=2,4, 6,1 Гц), 3,37 (3H, с), 3,26 (1H, дкв., J=9,1, 7,2 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,20 (3H, д, J=7,2 Гц)

ИК (KBr): 1750, 1607, 1538, 1449, 1395, 1306 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 539 [M+Na]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FSI⁺) для C₂₁H₂₅O₆N₄S₂Na₂:

Вычислено: 539,0111

Найдено 539,1026 [M+Na]⁺

Элементный анализ для C₂₁H₂₅O₆N₄S₂Na • 3/2H₂O:

Вычислено: C 46,40%; H 5,19%; N 10,31%; S 11,80%

Найдено: C 46,48%; H 5,53%; N 10,60%; S 11,66%

Пример 37

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-фенилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-фенилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-фенилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (893 мг, 2,68 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 32) в диметилформамиде (40 мл) добавляли гидразин ацетат (296 мг, 3,21 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (1,59 г, 3,21 ммоль) в ацетонитриле (53 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (1,87 мл, 10,7 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат и этилацетат:метанол (9:1), с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-фенилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (1,2 г,выход 71%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,29-8,18 (2H, м), 7,73-7,62 (4H, м), 7,62-7,50 (1H, м), 7,42-7,82 (2H, м), 7,18-7,09 (1H, м), 5,51 (1H, д, J=13,8 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,8 Гц), 4,54 (2H, дд, J=15,6, 7,8 Гц), 4,40-4,21 (3H, м), 4,21-4,08 (2H, м), 3,31 (1H, дд, J=6,9, 2,5 Гц), 3,23 (1H, дкв., J=9,1, 7,3 Гц), 1,39 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,29 (3H, д, J=7,3 Гц).

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-фенилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-фенилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (400 мг, 0,63 ммоль) (полученный, как описано в примере 37(1)) в смеси тетрагидрофурана (120 мл) и дистиллированной воды (120 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 7,5% палладия на угле (400 мг) при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (53 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду – 4% ацетонитрил; дистиллированную воду – 8% ацетонитрил; дистиллированную воду – 12% ацетонитрил; дистиллированную воду – 16% ацетонитрил и дистиллированную воду. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-фенилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (211 мг, выход 64%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,60-7,51 (3H, м), 7,54-7,42 (2H, м), 7,36-7,27 (1H, м), 4,63-4,52 (2H, м), 4,29-4,39 (1H, м), 4,25 (1H, квинт., J=6,3 Гц), 4,20 (1H, дд, J=9,0, 2,3 Гц), 4,09 (1H, т, J=8,8 Гц), 4,08 (1H, т, J=8,8 Гц), 3,44 (1H, дд, J=6,6, 1,9 Гц), 3,25 (1H, дкв., J=6,3, 5,9 Гц), 1,3 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,20 (3H, дд, J=7,2, 2,4 Гц).

ИК (KBr): 3368,1, 1750,1, 1676,8, 1598,7, 1538,9, 1506,1, 1470,5, 1440,6, 1394,3, 1324,9, 1295,9, 1245,8 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 501 [M+H]⁺

Пример 38

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-гидроксиэтилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-{4-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (398,2 мг, 0,96 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 33) в диметилформамиде (20 мл) добавляли гидразин ацетат (110 мг, 1,19 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (561,4 мг, 0,94 ммоль) в ацетонитриле (38 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (0,7 мл, 4,02 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:ацетонитрил (2:1), с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (605,3 мг, выход 80%) в виде светло-желтого сиропа.

 ¹H-ЯМР (500 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,79 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,54 (1H, т, J=5,8 Гц), 7,42 (1H, с), 5,51 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,26 (1H, д, J=13,7 Гц), 4,48 (1H, дд, J=8,3, 7,3 Гц), 4,45 (1H, дд, J=8,3, 7,3 Гц), 4,32-4,23 (3H, м), 4,06 (1H, дд, J=8,3, 5,9 Гц), 4,03 (1H, дд, J=8,3, 5,9 Гц), 3,76 (2H, т, J=5,8 Гц), 3,52 (2H, кв., J=5,8 Гц), 3,30 (1H, дд, J=6,8, 2,0 Гц), 3,208 (1H, дкв., J=9,0, 7,4 Гц), 1,95 (1H, ушир. с), 1,38 (3H, д, J=5,7 Гц), 1,27 (3H, д, J=6,8 Гц), 0,91 (9H, с), 0,07 (6H, с).

(2) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-гидрокси-этилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (605,3 мг, 0,84 ммоль) в тетрагидрофуране (30 мл) добавляли уксусную кислоту (0,15 мл, 2,6 ммоль) и раствор 1М фторида тетрабутиламмония в тетрагидрофуране (2,5 мл, 2,5 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 1 часа при комнатной температуре. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:ацетонитрил (2:3), с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-гидроксиэтилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (383,7 мг, выход 75%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (500 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=7,9 Гц), 7,66 (2H, д, J=7,9 Гц), 7,53 (1H, т, J=5,3 Гц), 7,45 (1H, с), 5,508 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,255 (1H, д, J=13,7 Гц), 4,50 (1H, т, J=8,6 Гц), 4,48 (1H, т, J=8,6 Гц), 4,32-4,24 (3H, м), 4,07 (1H, дд, J=8,6, 5,3 Гц), 4,05 (1H, дд, J=8,6, 5,3 Гц), 3,807 (2H, т, J=5,3 Гц), 3,58 (2H, кв., J=5,3 Гц), 3,295 (1H, дд, J=7,6, 2,3 Гц), 3,21 (1H, дкв., J=9,1, 7,6 Гц), 2,78 (1H, ушир. с), 1,92 (1H, ушир. с), 1,38 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,24 (3H, д, J=7,6 Гц).

(3) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-гидроксиэтилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-гидроксиlэтилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (383,7 мг, 0,64 ммоль) (полученный, как описано в примере 38(2)) в смеси тетрагидрофурана (20 мл) и дистиллированной воды (9,6 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 20% гидроксида палладия на угле (400 мг) на водяной бане (30° C) в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (53,4 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду – 3% ацетонитрил; дистиллированную воду – 5% ацетонитрил; дистиллированную воду – 10% ацетонитрил и дистиллированную воду. Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-гидроксиэтилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (152,2 мг, выход 49%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,29 (1H, с), 4,36 (2H, т, J=8,4 Гц), 4,20-4,10 (1H, м), 4,05 (1H, квинтет, J=6,6 Гц), 4,00 (1H, дд, J=10,9, 2,2 Гц), 3,90-3,83 (2H, м), 3,55 (2H, т, J=5,5 Гц), 3,32 (2H, т, J=5,5 Гц), 3,24 (1H, дд, J=6,6, 2,2 Гц), 3,06 (1H, дкв., J=10,9, 8,6 Гц), 1,11 (3H, д, J=6,6 Гц), 1,00 (3H, д, J=8,6 Гц).

ИК (KBr): 3396, 1748, 1649, 1599, 1551, 1395, 1315, 1265

см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 491 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₁₉H₂₃O₆N₄S₂Na:

Вычислено: 491,1035

Найдено 491,1024 [M+H]⁺

Пример 39

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-гидроксиметил-пропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)пропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)пропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (610 мг, 1,37 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 34) в диметилформамиде (30 мл) добавляли гидразин ацетат (152 мг, 1,65 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (814 мг, 1,37 ммоль) в ацетонитриле (40 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (955 мкл, 5,48 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 10% водным раствором хлорида натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:2) и этилацетат, с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)пропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (928 мг, выход 89%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,42 (1H, с), 7,42-7,38 (1H, ушир. д, J=9,5 Гц), 5,51 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,9 Гц), 4,50 (1H, т, J=8,1 Гц), 4,45 (1H, т, J=8,1 Гц), 4,31-4,23 (2H, м), 4,27 (1H, дд, J=8,8, 2,6 Гц), 4,07-1,01 (2H, м), 4,00-3,94 (1H, м), 3,72 (1H, дд, J=10,3, 2,6 Гц), 3,65 (1H, дд, J=10,3, 4,0 Гц), 3,30 (1H, дд, J=7,3, 2,6 Гц), 3,21 (1H, дкв., J=8,8, 6,6 Гц), 1,72-1,56 (2H, м), 1,38 (3H, д, J=5,7 Гц), 1,27 (3H, д, J=6,6 Гц), 0,95 (3H, т, J=7,3 Гц), 0,90 (9H, с), 0,06 (6H, с).

(2) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-гидроксиметил-пропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)пропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (920 мг, 1,23 ммоль) (полученный, как описано в примере 39(1)) в тетрагидрофуране (46 мл) добавляли уксусную кислоту (208 мкл, 3,63 ммоль) и раствор 1M фторида тетрабутиламмония в тетрагидрофуране (3,63 мл, 3,63 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 2 дней при комнатной температуре. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат и этилацетат:метанол (95:5), с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-гидроксиметил-пропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (437 мг, выход 56%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (500 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,44 (1H, с), 7,24-7,19 (1H, ушир. д, J=7,8 Гц), 5,51 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,26 (1H, д, J=13,7 Гц), 4,50 (2H, дт, J=8,8, 4,9 Гц), 4,32-4,24 (3H, м), 4,07 (2H, дт, J=8,8, 5,9 Гц), 4,01-3,93 (1H, м), 3,81-3,75 (1H, м), 3,71-3,64 (1H, м), 3,30 (1H, дд, J=6,8, 2,9 Гц), 3,21 (1H, дкв., J=9,0, 6,8 Гц), 1,75-1,66 (1H, м), 1,65-1,55 (1H, м), 1,38 (3H, д, J=6,8 Гц), 1,28 (3H, д, J=7,8 Гц), 1,00 (3H, т, J=7,8 Гц).

(3) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-гидроксиметил-пропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-гидроксиметил-пропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (430 мг, 0,681 ммоль) (полученный, как описано в примере 39(2)) в смеси тетрагидрофурана (22 мл) и дистиллированной воды (22 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (430 мг) при комнатной температуре в течение 4 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (57 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду и дистиллированная вода:ацетонитрил (94:6). Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-гидроксиметил-пропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (212 мг, выход 60%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O, TSP): δ (м.д.) 7,49 (1H, с), 4,59-4,52 (2H, м), 4,39-4,31 (1H, м), 4,25 (1H, дкв., J=6,8, 6,3 Гц), 4,21 (1H, дд, J=9,0, 2,4 Гц), 4,10-4,03 (2H, м), 4,01-3,93 (1H, м), 3,71 (1H, дд, J=11,7, 4,5 Гц), 3,64 (1H, дд, J=11,7, 6,8 Гц), 3,43 (1H, дд, J=6,3, 2,4 Гц), 3,26 (1H, дкв., J=8,8, 7,2 Гц), 1,73-1,62 (1H, м), 1,57-1,44 (1H, м), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,20 (3H, д, J=7,2 Гц), 0,93 (3H, т, J=7,4 Гц).

ИК (KBr): 1750, 1650, 1602, 1547, 1393, 1313 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 519 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺):

Вычислено: 519,1348

Найдено 519,1339 [M+H]⁺

Элементный анализ для C₂₁H₂₇O₆N₄S₂Na • 7/4H₂O:

Вычислено: C 45,85%; H 5,79%; N 10,18%; S 11,66%

Найдено: C 46,07%; H 5,78%; N 10,29%; S 11,61%

Пример 40

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-гидроксиметилэтилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-2-(трет-бутилдиметилсилилокси)-1-метилэтилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-{4-[(1S)-2-(трет-бутилдиметилсилилокси)-1-метилэтилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (645 мг, 1,50 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 35) в диметилформамиде (32 мл) добавляли гидразин ацетат (166 мг, 1,80 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (892 мг, 1,50 ммоль) в ацетонитриле (45 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (1,05 мл, 6,0 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 10% водным раствором хлорида натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:2) и этилацетат, с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-2-(трет-бутилдиметилсилилокси)-1-метил]-этилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (949 мг, выход 86%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,44-7,38 (1H, ушир. д, J=5,9 Гц), 7,42 (1H, с), 5,51 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,9 Гц), 4,52-4,42 (2H, м), 4,33-4,22 (3H, м), 4,22-4,14 (1H, м), 4,04 (2H, ддд, J=14,0, 5,9, 2,9 Гц), 3,67 (1H, дд, J=10,3, 4,4 Гц), 3,62 (1H, дд, J=10,3, 2,9 Гц), 3,30 (1H, дд, J=6,6, 2,2 Гц), 3,21 (1H, дкв., J=7,3, 6,6 Гц), 1,38 (3H, д, J=5,9 Гц), 1,27 (3H, д, J=7,3 Гц), 1,25 (3H, д, J=6,6 Гц), 0,92 (9H, с), 0,07 (6H, с).

(2) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-2-гидрокси-1-метилэтилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-2-(трет-бутилдиметилсилилокси)-1-метилэтилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (940 мг, 1,28 ммоль) (полученный, как описано в примере 40(1)) в тетрагидрофуране (47 мл) добавляли уксусную кислоту (221 мкл, 3,85 ммоль) и раствор 1M фторида тетрабутиламмония в тетрагидрофуране (3,85 мл, 3,85 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 3 дней при комнатной температуре. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (99:1 и 9:1), с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-2-гидрокси-1-метилэтилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (462 мг, выход 58%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,44 (1H, с), 7,23-7,19 (1H, ушир. д, J=7,3 Гц), 5,51 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,9 Гц), 4,52-4,46 (2H, м), 4,31-4,24 (2H, м), 4,27 (1H, дд, J=9,5, 2,0 Гц), 4,22-4,15 (1H, м), 4,06 (2H, дт, J=8,1, 5,1 Гц), 3,79-3,71 (1H, м), 3,66-3,59 (1H, м), 3,30 (1H, дд, J=6,6, 2,2 Гц), 3,21 (1H, дкв., J=9,5, 7,3 Гц), 1,38 (3H, д, J=5,9 Гц), 1,28 (6H, д, J=7,3 Гц).

(3) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-2-гидрокси-1-метилэтилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-2-гидрокси-1-метилэтилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (460 мг, 0,745 ммоль) (полученный, как описано в примере 40(2)) в смеси тетрагидрофурана (23 мл) и дистиллированной воды (23 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (460 мг) при комнатной температуре в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (63 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду и дистиллированная вода:ацетонитрил (82:12). Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-2-гидрокси-1-метилэтилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (179 мг, выход 48%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O, TSP): δ (м.д.) 7,48 (1H, с), 4,56 (2H, дд, J=8,3, 8,3 Гц), 4,39-4,32 (1H, м), 4,25 (1H, дкв., J=6,3, 6,4 Гц), 4,20 (1H, дд, J=9,1, 2,4 Гц), 4,18-4,11 (1H, м), 4,10-4,03 (2H, м), 3,68 (1H, дд, J=11,6, 4,8 Гц), 3,61 (1H, дд, J=11,6, 6,7 Гц), 3,44 (1H, дд, J=6,3, 2,4 Гц), 3,26 (1H, дкв., J=9,1, 6,6 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,22 (3H, д, J=6,7 Гц), 1,20 (3H, д, J=6,6 Гц).

ИК (KBr): 1749, 1650, 1602, 1547, 1393, 1313, 1295 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 505 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₂₀H₂₆O₆N₄S₂Na:

Вычислено: 505,1191

Найдено: 505,1196 [M+H]⁺

Элементный анализ для C₂₀H₂₅O₆N₄S₂Na•4/3H₂O:

Вычислено: C 45,45%; H 5,28%; N 10,60%; S 12,13%

Найдено: C 45,63%; H 5,35%; N 10,66%; S 11,91%

Пример 41

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-гидроксиметил-2-метилпропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-2-метилпропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-2-метилпропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (500 мг, 1,09 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 36) в диметилформамиде (25 мл) добавляли гидразин ацетат (121 мг, 1,31 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (648 мг, 1,09 ммоль) в ацетонитриле (33 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (759 мкл, 4,36 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 10% водным раствором хлорида натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:2 и 1:4), с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-2-метилпропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (649 мг, выход 84%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,47-7,52 (1H, ушир. д, J=9,8 Гц), 7,43 (1H, с), 5,52 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,7 Гц), 4,51 (1H, т, J=7,8 Гц), 4,45 (1H, т, J=7,8 Гц), 4,28 (1H, дд, J=9,3, 2,0 Гц), 4,31-4,25 (2H, м), 4,05 (2H, ддд, J=7,8, 5,6, 1,2 Гц), 3,86-3,80 (2H, м), 3,62 (1H, дд, J=9,8, 3,9 Гц), 3,30 (1H, дд, J=6,8, 2,0 Гц), 3,22 (1H, дкв., J=9,3, 6,8 Гц), 2,05-1,95 (1H, м), 1,39 (3H, д, J=5,9 Гц), 1,28 (3H, д, J=6,8 Гц), 0,99 (3H, д, J=6,8 Гц), 0,97 (3H, д, J=6,8 Гц), 0,91 (9H, с), 0,06 (6H, с).

(2) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-гидроксиметил-2-метилпропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-2-метилпропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (690 мг, 0,914 ммоль) (полученный, как описано в примере 41(1)) в тетрагидрофуране (35 мл) добавляли уксусную кислоту (157 мкл, 2,74 ммоль) и раствор 1М фторида тетрабутиламмония в тетрагидрофуране (2,74 мл, 2,74 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 2 дней при комнатной температуре. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат и этилацетат:метанол (9:1), с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-гидроксиметил-2-метилпропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (388 мг, выход 66%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,44 (1H, с), 7,33-7,28 (1H, ушир. д, J=8,8 Гц), 5,51 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,9 Гц), 4,50 (2H, ддд, J=8,1, 8,1, 3,7 Гц), 4,32-4,24 (2H, м), 4,27 (1H, дд, J=9,2, 2,5 Гц), 3,88-3,76 (2H, м), 3,74 (1H, дд, J=11,0, 6,6 Гц), 3,30 (1H, дд, J=7,0, 2,5 Гц), 3,22 (1H, дкв., J=7,2, 7,3 Гц), 2,06-1,95 (1H, м), 1,38 (3H, д, J=6,6 Гц), 1,28 (3H, д, J=7,3 Гц), 1,02 (3H, д, J=7,3 Гц), 0,99 (3H, д, J=6,6 Гц).

(3) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-гидроксиметил-2-метилпропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-гидроксиметил-2-метилпропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (380 мг, 0,588 ммоль) полученный, как описано в примере 41(2), в смеси тетрагидрофурана (19 мл) и дистиллированной воды (19 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (380 мг) при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (49 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на колонке с Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду и дистиллированная вода:ацетонитрил (76:24). Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-гидроксиметил-2-метилпропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (164 мг, выход 52%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O, TSP): δ (м.д.) 7,49 (1H, с), 4,61-4,53 (2H, м), 4,39-4,31 (1H, м), 4,25 (1H, дкв., J=6,2, 6,3 Гц), 4,20 (1H, дд, J=2,4, 9,1 Гц), 4,11-4,04 (2H, м), 3,87-3,83 (1H, м), 3,80 (1H, дд, J=3,8, 11,7 Гц), 3,71 (1H, дд, J=7,5, 11,7 Гц), 3,43 (1H, дд, J=2,4, 6,2 Гц), 3,26 (1H, дкв., J=9,1, 7,2 Гц), 1,97-1,84 (1H, м), 1,30 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,20 (3H, д, J=7,2 Гц), 0,97 (3H, д, J=6,8 Гц), 0,93 (3H, д, J=6,9 Гц).

ИК (KBr): 1749, 1651, 1600, 1547, 1493, 1470, 1393, 1315

см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 555 [M+Na]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₂₂H₃₀O₆N₄S₂Na:

Вычислено: 533,1505

Найдено 533,1497 [M+H]⁺

Элементный анализ для C₂₂H₂₉O₆N₄S₂Na•5/3H₂O:

Вычислено: C 46,96%; H 5,79%; N 9,96%; S 11,40%

Найдено: C 46,89%; H 5,86%; N 10,41%; S 11,15%

Пример 42

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-гидроксиметил-3-метилбутилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-3-метил-бутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-3-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (450 мг, 0,954 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 37) в диметилформамиде (23 мл) добавляли гидразин ацетат (105 мг, 1,14 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (567 мг, 0,954 ммоль) в ацетонитриле (28 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (665 мкл, 3,82 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 10% водным раствором хлорида натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:2 и 1:4), с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдифенилсилилокси)-3-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (645 мг, выход 87%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,41 (1H, с), 7,35-7,30 (1H, ушир. д, J=9,5 Гц), 5,51 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,9 Гц), 4,50 (1H, дд, J=8,1 Гц), 4,45 (1H, дд, J=8,1 Гц), 4,31-4,24 (3H, м), 4,21-4,13 (1H, м), 4,06 (1H, дд, J=5,9, 2,9 Гц), 4,03 (1H, дд, J=5,9, 2,2 Гц), 3,66 (2H, д, J=2,9 Гц), 3,30 (1H, дд, J=7,3, 2,9 Гц), 3,21 (1H, дкв., J=6,6, 7,3 Гц), 1,68-1,57 (1H, м), 1,52 (1H, ддд, J=14,6, 8,8, 5,9 Гц), 1,44 (1H, ддд, J=14,6, 8,8, 5,9 Гц), 1,38 (3H, д, J=5,9 Гц), 1,28 (3H, д, J=7,3 Гц), 0,95 (6H, т, J=6,6 Гц), 0,91 (9H, с), 0,05 (6H, с).

(2) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-Гидроксиметил-3-метилбутилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-3-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (640 мг, 0,827 ммоль) (полученный, как описано в примере 42(1)) в тетрагидрофуране (32 мл) добавляли уксусную кислоту (142 мкл, 2,48 ммоль) и раствор 1M фторида тетрабутиламмония в тетрагидрофуране (2,48 мл, 2,48 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 2 дней при комнатной температуре. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат и этилацетат:метанол (9:1), с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-гидроксиметил-3-метилбутилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (302 мг, выход 55%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,44 (1H, с), 7,18-7,14 (1H, ушир. д, J=7,8 Гц), 5,51 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,26 (1H, д, J=13,7 Гц), 4,53-4,47 (2H, м), 4,31-4,25 (3H, м), 4,20-4,13 (1H, м), 4,07 (2H, ддд, J=8,8, 4,9, 4,9 Гц), 3,80-3,74 (1H, м), 3,66-3,60 (1H, м), 3,30 (1H, дд, J=6,8, 2,9 Гц), 3,22 (1H, дкв., J=6,8, 6,8 Гц), 2,79-2,74 (1H, ушир.т, J=5,9 Гц), 1,74-1,65 (1H, м), 1,51 (1H, ддд, J=14,7, 8,8, 5,9 Гц), 1,43 (1H, ддд, J=14,7, 8,8, 5,9 Гц), 1,38 (3H, д, J=6,8 Гц), 1,28 (3H, д, J=6,8 Гц), 0,96 (3H, д, J=4,9 Гц), 0,95 (3H, д, J=4,9 Гц).

(3) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-гидроксиметил-3-метилбутилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-гидроксиметил-3-метилбутилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (300 мг, 0,455 ммоль) полученный, как описано в примере 42(2), в смеси тетрагидрофурана (15 мл) и дистиллированной воды (15 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (380 мг) при комнатной температуре в течение 2,5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (38 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали очищали хроматографией на колонке Cosmosil, используя в качестве элюента дистиллированную воду и дистиллированная вода:ацетонитрил (76:24). Элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-гидроксиметил-3-метилбутилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (131 мг, выход 53%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O, TSP): δ (м.д.) 7,45 (1H, с), 4,60-4,53 (2H, м), 4,39-4,31 (1H, м), 4,25 (1H, дкв., J=6,0, 6,4 Гц), 4,19 (1H, дд, J=2,0, 9,1 Гц), 4,19-4,13 (1H, м), 4,06 (2H, дд, J=4,9, 8,4 Гц), 3,68 (1H, дд, J=4,7, 11,6 Гц), 3,59 (1H, дд, J=6,7, 11,6 Гц), 3,43 (1H, дд, J=2,0, 6,0 Гц), 3,26 (1H, дкв., J=9,1, 7,2 Гц), 1,69-1,57(1H, м), 1,50 (1H, ддд, J=4,5, 9,2, 14,1 Гц), 1,39 (1H, ддд, J=4,5, 9,2, 14,1 Гц), 1,39 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,20 (3H, д, J=7,2 Гц), 0,91 (6H, т, J=6,2 Гц).

ИК (KBr): 1750, 1651, 1604, 1547, 1492, 1470, 1390, 1311

см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 547 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺): С₂₃H₃₂O₆N₇S₂Na

Вычислено: 547,1661

Найдено: 547,1674 [M+H]⁺

Пример 43

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S,2S)-1-гидроксиметил-2-метилбутилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S,2S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-2-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-{4-[(1S,2S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-2-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (910 мг, 1,93 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 38) в диметилформамиде (46 мл) добавляли гидразин ацетат (213 мг, 2,31 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (1,15 г, 1,93 ммоль) в ацетонитриле (58 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (1,34 мл, 7,72 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 10% раствором хлорида натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: н-гексан:этилацетат (1:1-1:4)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S,2S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-2-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (765 мг, выход 51%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,50-7,45 (1H, ушир. д, J=9,5 Гц), 7,42 (1H, с), 5,66 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,9 Гц), 4,50 (1H, т, J=8,1 Гц), 4,44 (1H, т, J=8,1 Гц), 4,32-4,24 (2H, м), 4,27 (1H, дд, J=2,6, 9,7 Гц), 4,07-4,02 (2H, м), 3,91-3,85 (1H, м), 3,83 (1H, дд, J=2,9, 10,3 Гц), 3,63 (1H, дд, J=3,7, 10,3 Гц), 3,30 (1H, дд, J=2,6, 7,0 Гц), 3,21 (1H, дкв., J=9,7, 6,6 Гц), 1,88-1,84 (1H, ушир. с), 1,80-1,70 (1H, м), 1,58-1,50 (1H, м), 1,38 (3H, д, J=6,6 Гц), 1,27 (3H, д, J=7,3 Гц), 1,22-1,10 (1H, м), 0,95 (3H, д, J=7,3 Гц), 0,90 (3H, т, J=7,4 Гц), 0,91 (9H, с), 0,05 (6H, с).

(2) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S,2S)-1-гидроксиметил-2-метилбутилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S,2S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-2-метил-бутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (760 мг, 0,982 ммоль) (полученный, как описано в примере 43(1)) в тетрагидрофуране (38 мл) добавляли в уксусную кислоту (169 мкл, 2,95 ммоль) и раствор 1M фторида тетрабутиламмония (2,95 мл, 2,95 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 дней. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и воду. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат-этилацетат:метанол (9:1)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S,2S)-1-гидроксиметил-2-метилбутилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (390 мг, выход 60%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,44 (1H,s), 7,33-7,29 (1H, ушир. д, J=8,8 Гц), 5,51 (1H, д, J=13,8 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,8 Гц), 4,53-4,46 (2H, м), 4,31-4,28 (2H, м), 4,28 (1H, дд, J=9,5, 2,2 Гц), 4,10-4,03 (2H, м), 3,94-3,87 (1H, м), 3,85-3,79 (1H, м), 3,78-3,72 (1H, м), 3,30 (1H, дд, J=7,0, 2,2 Гц), 3,21 (1H, дкв., J=9,5, 7,3 Гц), 1,83-1,72 (1H, м), 1,61-1,48 (1H, м), 1,38 (3H, д, J=6,6 Гц), 1,28 (3H, д, J=7,3 Гц), 1,26-1,14 (1H, м), 0,99 (3H, д, J=6,6 Гц), 0,93 (3H, т, J=7,3 Гц).

(3) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S,2S)-1-гидроксиметил-2-метилбутилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S,2S)-1-гидроксиметил-2-метилбутилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (390 мг, 0,591 ммоль) (полученный, как описано в примере 43(2)) в смеси тетрагидрофурана (20 мл) и дистиллированной воды (20 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (390 мг) при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (50 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → дистиллированная вода:ацетонитрил (76:24)), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S,2S)-1-гидроксиметил-2-метилбутилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (136 мг, выход 42%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O, TSP): δ (м.д.) 7,49 (1H, с), 4,61-4,53 (2H, м), 4,39-4,31 (1H, м), 4,25 (1H, дкв., J=6,2, 6,3 Гц), 4,20 (1H, дд, J=9,0, 2,3 Гц), 4,11-4,04 (2H, м), 3,91 (1H, ддд, J=7,4, 3,6, 3,6 Гц), 3,81 (1H, дд, J=11,8, 3,6 Гц), 3,72 (1H, дд, J=11,8, 7,4 Гц), 3,43 (1H, дд, J=6,2, 2,3 Гц), 3,25 (1H, дкв., J=9,0, 7,2 Гц), 1,76-1,64 (1H, м), 1,55-1,44 (1H, м), 1,30 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,20 (3H, д, J=7,2 Гц), 1,22-1,11 (1H, м), 0,95 (3H, д, J=6,9 Гц), 0,88 (3H, т, J=7,4 Гц).

ИК (KBr): 1750, 1651, 1602, 1547, 1493, 1470, 1394, 1311

см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 547 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺): C₂₃H₃₂O₆N₄S₂Na

Вычислено: 547,1661

Найдено:547,1647 [M+H]⁺

Пример 44

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-гидрокси-1-(гидроксиметил)этилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(2-трет-бутилдиметилсилилокси)-(1-трет-бутилдифенилсилилоксиметил)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-{4-[(2-трет-бутилдиметилсилилокси)-(1-трет-бутилдифенилсилилоксиметил)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (770 мг, 1,45 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 39) в диметилформамиде (39 мл) добавляли гидразин ацетат (160 мг, 1,74 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (862 мг, 1,45 ммоль) в ацетонитриле (43 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (1,01 мл, 5,79 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции, в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 10% хлоридом натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: н-гексан: этилацетат (1:2 → 1:4)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(2-трет-бутилдиметилсилилокси)-(1-трет-бутилдиметилсилилоксиметил)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (951 мг, выход 76%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,57-7,52 (1H, ушир. д, J=8,8 Гц), 7,42 (1H, с), 5,52 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,9 Гц), 4,47 (1H, т, J=8,1 Гц), 4,44 (1H, т, J=8,1 Гц), 4,26 (1H, дд, J=3,6, 9,2 Гц), 4,31-4,23 (2H, м), 4,09-3,99 (3H, м), 3,86-3,81 (1H, м), 3,61 (1H, дд, J=6,6, 9,5 Гц), 3,30 (1H, дд, J=2,6, 7,0 Гц), 3,21 (1H, дкв., J=9,2, 6,6 Гц), 1,38 (3H, д, J=5,9 Гц), 1,27 (3H, д, J=6,6 Гц), 0,91 (9H, с), 0,07 (6H, с).

(2) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-гидрокси-1-гидроксиметил)этилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(2-трет-бутилдиметилсилилокси)-(1-трет-бутилдиметилсилилоксиметил)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (950 мг, 1,10 ммоль) (полученный, как описано в примере 44(1)) в тетрагидрофуране (48 мл) добавляли в уксусную кислоту (378 мкл, 6,60 ммоль) и раствор 1M фтортетрабутиламмония (6,60 мл, 6,60 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 дней. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и воду. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат:метанол (9:1 → 85:15)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-гидрокси-1-(гидроксиметил)этилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (499 мг, выход 72%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,73 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,49 (1H, с), 7,45 (1H, д, J=8,1 Гц), 5,46 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,31 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,09 (1H, д, J=4,4 Гц), 4,85-4,77 (2H, м), 4,57-4,42 (3H, м), 4,22 (1H, дд, J=1,7, 8,8 Гц), 4,01-3,95 (2H, м), 3,89-3,82 (1H, м), 3,56-3,50 (2H, м), 3,49-3,41 (2H, м), 3,41-3,27 (2H, м), 1,16 (3H, д, J=6,6 Гц), 1,14 (3H, д, J=6,6 Гц).

(3) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-гидрокси-1-(гидроксиметил)этилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-гидрокси-1-(гидроксиметил)этилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (490 мг, 0,773 ммоль) (полученный, как описано в примере 44(2)) в смеси тетрагидрофурана (25 мл) и дистиллированной воды (25 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (490 мг) при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (65 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → дистиллированная вода:ацетонитрил (9:1), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-гидрокси-1-(гидроксиметил)этилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (187 мг, выход 47%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O, TSP): δ (м.д.) 7,51 (1H, с), 4,56 (2H, т, J=8,2 Гц), 4,39-4,31 (1H, м), 4,25 (1H, дкв., J=6,3, 6,4 Гц), 4,20 (1H, дд, J=2,4, 9,0 Гц), 4,19-4,14 (1H, м), 4,06 (2H, ддд, J=3,6, 4,9, 8,6 Гц), 3,78 (2H, дд, J=5,1, 11,7 Гц), 3,72 (2H, дд, J=6,6, 11,7 Гц), 3,43 (1H, дд, J=2,4, 6,3 Гц), 3,25 (1H, дкв., J=9,0, 7,2 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,20 (3H, д, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 1748, 1649, 1599,1547, 1393, 1313 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 521 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₂₀H₂₆N₄O₇S₂Na:

Вычислено: 521,1141

Найдено: 521,1155 [M+H]⁺

Элементный анализ: C₂₀H₂₅N₄O₇S₂Na•4/3H₂O:

Вычислено: C 44,11%, H 5,12%, N 10,29%, S 11,78%

Найдено: C 44,21% H 5,12%, N 10,31%, S 11,46%

Пример 45

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-гидроксиэтил)-N-метилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-{2-[N-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил]-N-метилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-{2-[N-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил]-N-метилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (384 мг, 0,89 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 40) в диметилформамиде (11 мл) добавляли гидразин ацетат (99mg, 1,07 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (5,29 мг, 0,89 ммоль) в ацетонитриле (22 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (0,62 мл, 3,56 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент:этилацетат → этилацетат:метанол (9:1)), с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-{2-[N-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил]-N-метилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (263 мг, выход 50%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,21 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,63 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,14 (0,6H, с), 7,03 (0,4H, с), 5,48 (1H, д, J=1,3 Гц), 5,25 (1H, д, J=1,3 Гц), 4,50 (1H, т, J=8,0 Гц), 4,23 (2H, т, J=9,0 Гц), 4,31-4,18 (3H, м), 4,05 (1H, дд, J=8,3, 5,4 Гц), 3,89-3,80 (1H, м), 3,80-3,72 (1H, м), 3,72-3,63 (1H, м), 3,63-3,51 (1H, м), 3,26 (1H, дд, J=7,1, 2,5 Гц), 3,26 (1,8H, с), 3,18 (1H, дкв., J=8,3, 7,5 Гц), 3,07 (1,2H, с), 1,35 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,22 (3H, д, J=6,9 Гц), 0,86 (9H, дд, J=7,8, 1,4 Гц), 0,27 (6H, дд, J=12,4, 3,2 Гц).

(2) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-гидроксиэтил)-N-метилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-{2-[N-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил]-N-метилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (622 мг, 0,85 ммоль) (полученный, как описано в примере 45(1)) в тетрагидрофуране (30 мл) добавляли в уксусную кислоту (0,15 мл, 2,55 ммоль) и в 1M раствор фторида тетрабутиламмония (2,55 мл, 2,55 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат → этилацетат:метанол (9:1)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-гидроксиэтил)-N-метилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (263 мг, выход 50%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,25 (1H, с), 5,50 (1H, д, J=1,4 Гц), 5,26 (1H, д, J=1,4 Гц), 4,62-4,40 (2H, м), 4,36-4,20 (3H, м), 4,08 (1H, т., J=9,1 Гц), 4,06 (1H, т., J=9,1 Гц), 3,84 (2H, т, J=4,9 Гц), 3,63 (2H, дд., J=4,9 Гц), 3,29 (1H, дд, J=6,4, 2,6 Гц), 3,21 (1H, квинт., J=7,5 Гц),3,08 (3H, с), 1,38 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,26 (3H, д, J=7,3 Гц).

(3) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-гидроксиэтил)-N-метилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-гидроксиэтил)-N-метилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (401 мг, 0,65 ммоль) (полученный, как описано в примере 45(2)) в смеси тетрагидрофурана (20 мл) и дистиллированной воды (20 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 7,5% палладия на угле (401 мг) на водяной бане (35° C) в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (5 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → 2% ацетонитрил в дистиллированной воде → 4% ацетонитрил в дистиллированной воде), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(2-гидроксиэтил)метилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (134 мг, выход 41%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O, TSP): δ (м.д.) 7,31 (0,6H, с), 7,11 (0,4H, с), 4,56 (2H, т, J=8,2 Гц), 4,41-4,31 (2H, м), 4,25 (1H, квинт., J=6,2 Гц), 4,21 (1H, дд, J=9,1, 2,4 Гц), 4,12-4,00 (2H, м), 3,85 (1H, т, J=5,4 Гц), 3,74 (1H, т, J=5,4 Гц), 3,70-3,60 (2H, м), 3,44 (1H, дд, J=6,2, 2,4 Гц), 3,26 (1H, дкв., J=9,1, 7,4 Гц), 3,07 (1,2H, с), 3,08 (1,8H, с), 1,30 (3H, д, J=6,5 Гц), 1,20 (3H, д, J=7,3 Гц).

ИК (KBr): 3397,0, 1749,1, 1606,4, 1538,9, 1469,5, 1398,1, 1311,4, 1266,0 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 505 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (ESI⁺):для C₂₀H₂₅N₄O₆S₂Na₂:

Вычислено: 505,1191

Найдено: 505,1185 [M+Na]⁺

Элементный анализ: C₂₀H₂₅N₄O₇S₂Na•4/3H₂O:

Вычислено: C 44,11%, H 5,12%, N 10,29%, S 11,78%

Пример 46

Динатриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(карбоксиметилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(п-нитробензилоксикарбонилметилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(п-нитробензилоксикарбонилметил-карбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (209,7 мг, 0,24 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 41(10)) в тетрагидрофуране (10 мл) добавляли уксусную кислоту (0,042 мл, 0,7 ммоль) и раствор 1M фторида тетрабутиламмония в тетрагидрофуране (0,72 мл, 0,72 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 дней. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: толуол:ацетонитрил (2:1)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(п-нитробензилоксикарбонилметил-карбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (94,5 мг, выход 53%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=7,9 Гц), 8,22 (2H, д, J=7,9 Гц), 7,66 (2H, д, J=7,9 Гц), 7,60 (1H, т, J=6,6 Гц), 7,54 (2H, д, J=7,9 Гц), 7,47 (1H, с), 5,505 (1H, д, J=13,8 Гц), 5,30 (2H, с), 5,255 (1H, д, J=13,8 Гц), 4,50 (1H, т, J=8,3 Гц), 4,40 (1H, т, J=8,3 Гц), 4,32-4,24 (4H, м), 4,06 (1H, дд, J=8,3, 6,2 Гц), 4,05 (1H, дд, J=8,3, 6,2 Гц), 3,30 (1H, дд, J=7,0, 3,1 Гц), 3,21 (1H, дкв., J=9,0, 7,4 Гц), 1,98 (1H, ушир. с), 1,38 (3H, J=5,7 Гц), 1,27 (3H, д, J=7,4 Гц).

(2) Динатриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(карбоксиметилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(п-нитробензилоксикарбонилметилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (330,4 мг, 0,38 ммоль) полученный, как описано в примере 46(1) в смеси тетрагидрофурана (16,5 мл) и дистиллированной воды (8,3 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 20% гидроксида палладия на угле (350 мг) при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (63,9 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения динатриевой соли (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(карбоксиметилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (158,7 мг, выход 79%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,83 (1H, с), 4,45 (1H, т, J=8,3 Гц), 4,43 (1H, т, J=8,3 Гц), 4,28-4,21 (1H, м), 4,124 (1H, квинтет, J=5,8 Гц), 4,08 (1H, дд, J=8,8, 2,0 Гц), 3,99-3,92 (2H, м), 3,80 (2H, с), 3,31 (1H, дд, J=5,9, 2,0 Гц), 3,14 (1H, дкв., J=8,8, 6,8 Гц), 1,18 (3H, д, J=5,9 Гц), 1,08 (3H, д, J=6,8 Гц).

ИК (KBr): 3388, 1748, 1602, 1550, 1398, 1314, 1267 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 527 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺):для C₁₉H₂₁N₄O₇S₂Na:

Вычислено:

Найдено: [M+H]⁺

Пример 47

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-гидроксиазетидин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-гидроксиазетидин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[3-(трет-бутилдифенилсилилокси)азетидин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (850 мг, 0,878 ммоль) полученного, как описано в ссылочном примере 42(2), в тетрагидрофуране (43 мл) добавляли уксусную кислоту (301 мкл, 5,27 ммоль) и 1M раствор фторида тетрабутиламмония в тетрагидрофуране (5,27 мл, 5,27 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 дня. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и воду. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат:метанол (95:5) → метиленхлорид:метанол (9:1) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-гидроксиазетидин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (355 мг, выход 66%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,44 (1H, с), 5,51 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,7 Гц), 4,82-4,77 (1H, м), 4,71-4,65 (1H, м), 4,51-4,36 (4H, м), 4,31-4,23 (3H, м), 4,07-3,96 (3H, м), 3,29 (1H, дд, J=2,4, 7,0 Гц), 3,20 (1H, дкв., J=9,2, 7,1 Гц), 1,38 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,27 (3H, д, J=7,1 Гц).

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-гидроксиазетидин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-гидроксиазетидин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (350 мг, 0,568 ммоль) (полученный, как описано в примере 47(1)) в смеси тетрагидрофурана (18 мл) и дистиллированной воды (18 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (350 мг) при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (48 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → дистиллированная вода:ацетонитрил (9:1)), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-гидроксиазетидин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (118 мг, выход 42%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O, TSP): δ (м.д.) 7,33 (1H, с), 4,78-4,67 (2H, м), 4,56 (2H, т, J=8,0 Гц), 4,45-4,31 (3H, м), 4,25 (1H, дкв., J=6,3, 6,3 Гц), 4,20 (1H, дд, J=2,3, 9,0 Гц), 4,10-4,03 (2H, м), 3,97 (1H, дд, J=3,7, 11,5 Гц), 3,44 (1H, дд, J=2,3, 6,3 Гц), 3,25 (1H, дкв., J=9,0, 7,2 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,20 (3H, д, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 1749, 1603, 1540, 1452, 1394, 1306 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 503 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺):для C₂₀H₂₄N₄O₆S₂Na:

Вычислено:503,1035

Найдено: 503,1040 [M+H]⁺

Элементный анализ: C₂₀H₂₃N₄O₆S₂Na· 8/3H₂O:

Вычислено: C 43,63%, H 5,19%, N 10,18%, S 11,65%

Найдено: C 44,04% H 4,93%, N 9,86%, S 11,30%

Пример 48

Динатриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-карбокси-N-метилметилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-метил-N-п-нитробензилоксикарбонилметил-карбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-метил-N-п-нитробензилоксикарбонилметил-карбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (997 мг, 1,15 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 43(3)), в тетрагидрофуране (50 мл) добавляли уксусную кислоту (0,2 мл, 3,44 ммоль) и 1M раствор фторида тетрабутиламмония в тетрагидрофуране (3,44 мл, 3,44 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 дней. После контроля завершения реакции, в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат → этилацетат:метанол (19:1)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-метил-N-п-нитробензилоксикарбонилметил-карбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (413 мг, выход 47%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,32-8,10 (4H, м), 7,75-7,60 (2H, м), 7,60-7,45 (2H, м),7,75 (0,5H, с), 7,41 (0,5H, с), 5,51 (1H, д, J=13,6 Гц), 5,38-5,20 (3H, м, включая 5,26 (1H, д, J=13,6 Гц)), 4,75-3,71 (9H, м, включая 4,36 (1H, с), 4,56-4,46 (1H. м), 3,93-3,83 (1H, м)), 3,45-3,05 (4H, м, включая 3,36 (0,9H, с), 3,16 (2,1H, с)), 3,29 (1H, д, J=6,3 Гц), 1,38 (3H, д, J=6,1 Гц), 1,33-1,20 (3H, м).

(2) Динатриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-карбоксиметил-N-метилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-метил-N-п-нитробензилоксикарбонилметил-карбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (413 мг, 0,54 ммоль) (полученный, как описано в примере 48(1)) в смеси тетрагидрофурана (20 мл) и дистиллированной воды (20 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 7,5% палладия на угле (413 мг) при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (91 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения динатриевой соли (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-карбоксиметил-N-метилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (126 мг, выход 43%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O, TSP): δ (м.д.) 7,18 (0,6H, с), 7,03 (0,4H, с), 4,41-4,32 (0,2H, м), 4,25 (1H, квинт., J=6,3 Гц), 4,15-3,98 (4H, м), 3,43 (1H, дд, J=6,3, 2,2 Гц), 3,26 (1H, квинт., J=8,2 Гц), 3,11 (1,2H, с), 3,06 (1,8H, с), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,20 (3H, д, 7,1 Гц).

ИК (KBr): 3389,3, 1748,2, 1605,4, 1541,8, 1469,5, 1394,3

см^-1

Масс-спектр (ESI⁺): m/z: 519 [M-Na+2H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (ESI⁺) для C₂₀H₂₄N₄O₇S₂Na:

Вычислено:519,0984

Найдено: 519,0956 [M-Na+2H]⁺

Пример 49

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-карбамоилметил-N-метил-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-карбамоилметил-N-метилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-карбамоилметил-N-метилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (932 мг, 1,27 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 44(2)), в тетрагидрофуране (50 мл) добавляли уксусную кислоту (0,22 мл, 3,81 ммоль) и 1М раствор фторида тетрабутиламмония в тетрагидрофуране (3,81 мл, 3,81 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 дней. После контроля завершения реакции, в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат → этилацетат:метанол (10:1)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-карбамоилметил-N-метил-карбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (424 мг, выход 53%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=7,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=7,8 Гц), 7,36 (0,2H, с), 7,24 (0,8H, с), 5,51 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,7 Гц), 4,59-4,39 (2H, м), 4,39-3,94 (7H, м), 3,36 (0,6H, с), 3,29 (1H, дд, J=6,9, 3,3 Гц), 3,25-3,14 (1H, м), 3,11 (2,4H, с), 1,38 (3H, д, J=6,1 Гц), 1,26 (3H, д, J=7,1 Гц).

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-карбамоилметил-N-метилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-карбамоилметил-N-метил-карбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (424 мг, 0,67 ммоль) (полученный, как описано в примере 49(1)) в смеси тетрагидрофурана (20 мл) и дистиллированной воды (20 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 7,5% палладия на угле (424 мг) при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (57 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → 2% ацетонитрил в дистиллированной воде → 4% ацетонитрил в дистиллированной воде), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натиевой соли (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-карбамоилметил-N-метил-карбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (115 мг, выход 33%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O, TSP): δ (м.д.) 7,22 (0,5H, с), 7,20 (0,5H, с), 4,55 (2H, дд, J=17,4, 8,4 Гц), 4,41-4,32 (1H, м), 4,25 (1H, квинт., J=6,3 Гц), 4,23-4,18 (3H, м, включая 4,22 (2H, с)), 4,05 (2H, ддд, J=17,3, 8,8, 4,9 Гц), 3,44 (1H, дд, J=6,2, 2,4 Гц), 3,31-3,20 (1H, м), 3,18 (1,5H, с), 3,09 (1,5H, с), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,20 (3H, д, 7,1 Гц).

ИК (KBr): 3384,5, 1748,2, 1681,6, 1603,5, 1539,9, 1469,5, 1397,2, 1310,4 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 518 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (ESI⁺):для C₂₀H₂₅N₅O₆S₂Na:

Вычислено: 518,1144

Найдено: 518,1168 [M+H]⁺

Пример 50

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(карбамоилметил-карбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(карбамоилметил-карбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(карбамоилметил-карбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (428,6 мг, 0,6 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 45(2)) в тетрагидрофуране (21 мл) добавляли уксусную кислоту (0,11 мл, 1,9 ммоль) и 1М раствор фторида тетрабутиламмония в тетрагидрофуране (1,8 мл, 1,8 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 дней. После контроля завершения реакции, в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат:метанол (8:1)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(карбамоилметилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (310,5 мг, выход 85%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆): δ (м.д.) 8,24 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,96 (1H, т, J=5,7 Гц), 7,72 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,50 (1H, с), 7,40 (1H, ушир. с), 7,08 (1H, ушир. с), 5,46 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,32 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,09 (1H, д, J=5,1 Гц), 4,58-4,40 (3H, м), 4,22 (1H, дд, J=9,2, 2,7 Гц), 4,01-3,96 (3H, м), 3,81 (2H, д, J=5,7 Гц), 3,44-3,30 (2H, м), 1,16 (3H, д, J=6,6 Гц), 1,14 (3H, д, J=7,3 Гц).

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(карбамоилметил-карбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(карбамоилметилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (310,5 мг, 0,5 ммоль) (полученный, как описано в примере 50(1)) в смеси тетрагидрофурана (15,5 мл) и дистиллированной воды (7,8 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 20% гидроксида палладия на угле (360 мг) на водяной бане (35° C) в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (42,3 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → 5% ацетонитрил в дистиллированной воде → 10% ацетонитрил в дистиллированной воде), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(карбамоилметилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (157 мг, выход 62%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,43 (1H, с), 4,45 (2H, т, J=7,8 Гц), 4,28-4,18 (1H, м), 4,13 (1H, квинтет, J=5,9 Гц), 4,08 (1H, дд, J=9,3, 2,3 Гц), 4,00-3,92 (4H, м), 3,31 (1H, дд, J=5,9, 2,3 Гц), 3,14 (1H, дкв., J=9,3, 7,8 Гц), 1,13 (3H, д, J=5,9 Гц), 1,08 (3H, д, J=7,8 Гц).

ИК (KBr): 3384, 1748, 1660, 1600, 1549, 1492, 1471, 1394, 1315, 1264 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 504 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₁₉H₂₃O₆N₅S₂Na:

Вычислено: 504,0988

Найдено: 504,1018 [M+H]⁺

Пример 51

Динатриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-карбоксил-2-метилпропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-2-метил-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-2-метил-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (1,15 г, 1,29 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 46(3)), в тетрагидрофуране (58 мл) добавляли уксусную кислоту (222 мкл, 3,87 ммоль) и 1M раствор фторида тетрабутиламмония в тетрагидрофуране (3,87 мл, 3,87 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 дней. После контроля завершения реакции, в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор хлорида натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: н-гексан:этилацетат (1:2) → этилацетат) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-2-метил-1-(п-нитробензилоксикарбоксил)пропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (377 мг, выход 37%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 8,22 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,58-7,55 (1H, ушир. с), 7,54 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,45 (1H, с), 5,51 (1H, д, J=13,5 Гц), 5,28 (2H, с), 5,26 (1H, д, J=13,5 Гц), 4,74 (1H, дд, J=5,1, 8,8 Гц), 4,53-4,47 (2H, м), 4,32-4,26 (3H, м), 4,10-4,05 (2H, м), 3,30 (1H, дд, J=2,9, 6,6 Гц), 3,22 (1H, дкв., J=9,5, 6,6 Гц), 2,32-2,24 (1H, м), 1,39 (3H, д, J=5,8 Гц), 1,28 (3H, д, J=6,6 Гц), 1,00 (3H, д, J=7,3 Гц), 0,97 (3H, д, J=7,3 Гц).

(2) Динатриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-карбоксил-2-метилпропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-2-метил-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (370 мг, 0,465 ммоль) (полученный, как описано в примере 51(1)) в смеси тетрагидрофурана (19 мл) и дистиллированной воды (19 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (370 мг) при комнатной температуре в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (80 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → дистиллированная вода:ацетонитрил (96:4)), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения динатриевой соли (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-карбоксил-2-метилпропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (165 мг, выход 63%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O, TSP): δ (м.д.) 7,51 (1H, с), 4,59 (2H, дт, J=8,0, 5,6 Гц), 4,40-4,34 (1H, м), 4,29-4,23 (2H, м), 4,20 (1H, дд, J=2,4, 9,0 Гц), 4,10 (2H, дт, J=9,0, 5,2 Гц), 3,44 (1H, дд, J=2,4, 6,4 Гц), 3,27 (1H, дкв., J=9,0, 7,2 Гц), 2,28-2,16 (1H, м), 1,30 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,20 (3H, д, J=7,2 Гц), 0,98 (3H, д, J=6,8 Гц), 0,95 (3H, д, J=6,8 Гц).

ИК (KBr): 1749, 1599, 1547, 1491, 1471, 1400, 1314, 1292, 1264 см^-1

Масс-спектр (ESI⁺): m/z: 591 [M+Na]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (ESI⁺) для C₂₂H₂₆N₄O₇S₂Na₂:

Вычислено: 591,0936

Найдено: 591,0952 [M+Na]⁺

Элементный анализ: C₂₂H₂₆N₄O₇S₂Na₂•8/3H₂O:

Вычислено: C 42,85%, H 5,12%, N 9,09%, S 10,40%

Найдено: C 42,78% H 5,33%, N 9,14%, S 10,12%

Пример 52

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-карбамоил-2-метил-пропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-карбамоил-2-метилпропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-карбамоил-2-метилпропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (930 мг, 1,20 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 47(3)), в тетрагидрофуране (47 мл) добавляли уксусную кислоту (206 мкл, 3,60 ммоль) и 1M раствор фторида тетрабутиламмония в тетрагидрофуране (3,60 мл, 3,60 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 дней. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и воду. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат → этилацетат:метанол (95:5)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-карбамоил-2-метилпропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (383 мг, выход 48%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,61-7,56 (1H, ушир. д, J=9,5 Гц), 6,05-6,01 (1H, ушир. с), 5,51 (1H, д, J=13,5 Гц), 5,43-5,39 (1H, ушир. с), 5,26 (1H, д, J=13,5 Гц), 4,54-4,47 (2H, м), 4,38-4,33 (1H, м), 4,32-4,25 (2H, м), 4,10-4,04 (2H, м), 3,30 (1H, дд, J=6,6, 2,9 Гц), 3,22 (1H, дкв., J=9,5, 7,3 Гц), 2,33-2,24 (1H, м), 1,38 (3H, д, J=5,9 Гц), 1,28 (3H, д, J=7,3 Гц), 1,03 (3H, д, J=6,6 Гц), 10,1 (3H, д, J=6,6 Гц).

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-карбамоил-2-метилпропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-карбамоил-2-метил-пропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (380 мг, 0,577 ммоль) (полученный, как описано в примере 52(1)) в смеси тетрагидрофурана (19 мл) и дистиллированной воды (19 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (380 мг) при комнатной температуре в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (48 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → дистиллированная вода:ацетонитрил (81:9)), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-карбамоил-2-метилпропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (170 мг, выход 54%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O, TSP): δ (м.д.) 7,55 (1H, с), 4,58 (2H, т, J=8,2 Гц), 4,40-4,34 (1H, м), 4,29 (1H, д, J=6,9 Гц), 4,25 (1H, дкв., J=6,2, 6,4 Гц), 4,20 (1H, дд, J=2,4, 9,0 Гц), 4,09 (2H, дт, J=9,0, 4,6 Гц), 3,43 (1H, дд, J=2,4, 6,2 Гц), 3,26 (1H, дкв.,J=9,0, 7,2 Гц), 2,26-2,16 (1H, м), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 0,20 (3H, д, J=7,2 Гц), 1,02 (6H, д, J=6,8 Гц).

ИК (KBr): 1749, 1662, 1603, 1545, 1490, 1471, 1394, 1316, 1293, 1260 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 546 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (ESI⁺) для C₂₂H₂₈N₅O₆SNa₂:

Вычислено: 568,1276

Найдено: 568,1271 [M+Na]⁺

Элементный анализ: C₂₂H₂₈N₅O₆SNa· 3H₂O:

Вычислено: C 44,07%, H 5,72%, N 11,68%, S 10,69%

Найдено: C 44,17%, H 6,18%, N 11,84%, S 10,67%

Пример 53

Динатриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-карбоксиметил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) В раствор 3-ацетилтио-1-{4-[N-изопропил-N-(п-нитробензилоксикарбонилметил)карбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (312 мг, 0,63 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 48) в диметилформамиде (9 мл) добавляли гидразин ацетат (70 мг, 0,76 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа.

После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (452 мг, 0,76 ммоль) в ацетонитриле (20 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (0,44 мл, 2,52 ммоль). Смесь перемешивали в течение 4 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат → этилацетат:метанол (20:1)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-изопропил-N-(п-нитробензилоксикарбонилметил)карбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (193 мг, выход 39%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (4H, д, J=8,9 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,9 Гц), 7,56 (1H, д, J=8,0 Гц), 7,43-7,32 (1,4H, м), 7,15 (0,6H, ушир. с), 5,51 (1H, д, J=13,8 Гц), 5,28 (1,2H, ушир. с), 5,25 (1H, д, J=13,8 Гц), 5,20 (0,8H, ушир. с), 5,05-4,65 (0,4H, м), 4,85-4,65 (0,6H, м), 4,65-3,95 (8H, м, включая 4,50 (2H, т, J=7,4 Гц), 4,11 (2H, т, J=7,4 Гц)), 3,93-3,75 (1H, м), 3,29 (1H, дд, J=6,6, 2,0 Гц), 3,25-3,08 (1H, м), 1,38 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,35 (3H, д, J=7,2 Гц), 1,20 (6H, ушир. с).

(2) Динатриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-карбоксиметил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-1-{4-[N-изопропил-N-(п-нитробензилоксикарбонилметил)карбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (193 мг, 0,24 ммоль) (полученный, как описано в примере 53(1)) в смеси тетрагидрофурана (9 мл) и дистиллированной воды (9 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 7,5% палладия на угле (193 мг) на водяной бане (35° C) в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (40 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли, промывали вышеуказанной смесь растворителей и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения динатриевой соли (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-карбоксиметил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (63 мг, выход 45%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,08 (0,6H, ушир. с), 7,04 (0,4H, ушир. с), 4,70-4,69 (0,2H. м), 4,53 (2H, д, J=8,0 Гц), 4,42-4,31 (1H, м), 4,18-4,09 (0,8H, м), 4,25 (1H, квинт., J=6,4 Гц), 4,20 (1H, д, J=9,1 Гц), 4,09-4,02 (2H, м), 3,95 (2H, д, J=5,8 Гц), 3,43 (1H, дд, J=6,4, 0,8 Гц), 3,26 (1H, квинт., J=7,6 Гц), 1,31 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,26-1,10 (9H, м).

ИК (KBr): 3398,0, 1749,1, 1603,5, 1539,9, 1467, 1453,1, 1392,4, 1310,4, 1277,6 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 569 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₂₂H₂₇O₇N₄S₂Na₂:

Вычислено: 569,1116

Найдено: 569,1119 [M+H]⁺

Пример 54

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-карбамоилметил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-карбамоилметил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-[4-(N-карбамоилметил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (347 мг, 0,97 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 49) в диметилформамиде (10 мл) добавляли гидразин ацетат (108 мг, 1,17 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (696 мг, 1,17 ммоль) в ацетонитриле (20 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (0,68 мл, 3,88 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат:метанол (10:1) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-карбамоилметил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (359 мг, выход 56%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,05-6,72 (1H, м), 5,51 (1H, д, J=13,8 Гц), 5,25 (11H, д, J=13,8 Гц), 4,80-4,45 (1H, м), 4,45-4,35 (2H, м), 4,35-4,17 (3H, м), 4,03 (4H, м), 3,29 (1H, дд, J=7,0, 2,5 Гц), 3,25-3,05 (1H, м), 1,38 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,33-0,98 (9H, м, включая 1,25 (3H, д, J=7,1 Гц)).

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-карбамоилметил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-карбамоилметил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (359 мг, 0,55 ммоль) (полученный, как описано в примере 54(1)) в смеси тетрагидрофурана (12 мл) и дистиллированной воды (12 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 7,5% гидроксида палладия (359 мг) на водяной бане (35° C) в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (46 мг), уксусную кислоту и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → 2% ацетонитрил в дистиллированной воде), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-карбамоилметил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (195 мг, выход 65%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,17 (0,2H, ушир. с), 7,12 (0,8H, ушир. с), 4,56 (2H, дд, J=17,4, 9,0 Гц), 4,42-4,16 (4H, м, включая 4,25 (1H, квинт., J=6,3 Гц), 4,21 (1H, дд, J=8,4, 2,3 Гц), 4,09-3,97 (2H, м), 3,44 (1H, дд, J=6,3, 2,5 Гц), 3,26 (1H, квинт., J=8,4 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,25-1,08 (9H, м, включая 1,19 (3H, д, J=6,7 Гц)).

ИК (KBr): 3404,7, 1749,1, 1681,6, 1605,4, 1538,0, 1468,5, 1448,3, 1395,2, 1306,5, 1277,6 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 546 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₂₂H₂₉N₅O₆S₂Na:

Вычислено: 546,1457

Найдено: 546,1458 [M+H]⁺

Пример 55

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-цианометил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-цианометил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-[4-(N-цианометил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (344 мг, 1,01 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 50) в диметилформамиде (10 мл) добавляли гидразин ацетат (112 мг, 1,22 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (725 мг, 1,22 ммоль) в ацетонитриле (20 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (0,70 мл, 4,04 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат → этилацетат:метанол (10:1) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-цианометил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (245 мг, выход 39%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,6 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,48-7,15 (1H, м), 5,51 (1H, д, J=14, 0 Гц), 5,26 (1H, д, J=14, 0 Гц), 4,86 (1H, квинт., J=6,5 Гц), 4,72-3,76 (9H, м, включая 4,52 (2H, т, J=8,1 Гц), 4,27 (2H, дд, J=6,6, 2,5 Гц)), 3,29 (1H, дд, J=6,9, 2,5 Гц), 3,21 (1H, квинт., J=9,3, 7,3 Гц), 1,38 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,35-1,20 (9H, м, включая 1,25 (3H, д, J=7,3 Гц)).

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-цианометил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-цианометил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (245 мг, 0,39 ммоль) (полученный, как описано в примере 55(1)) в смеси тетрагидрофурана (12 мл) и дистиллированной воды (12 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 7,5% палладия на угле (245 мг) на водяной бане (35° C) в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (33 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли, промывали вышеуказанной смесью растворителей и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → 2% ацетонитрил в дистиллированной воде → 4% ацетонитрил в дистиллированной воде → 6% ацетонитрил в дистиллированной воде), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-цианометил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (87 мг, выход 42%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,20 (1H, ушир. с), 4,58 (2H, т, J=8,0 Гц), 4,49-4,31 (3H, м, включая 4,41 (2H, с)), 4,25 (1H, квинт., J=6,3 Гц), 4,21 (1Н, дд, J=9,0, 2,3 Гц), 4,19-3,80 (3H, м, включая 4,07 (2H, дд, J=8,6, 4,9 Гц), 3,44 (1H, дд, J=6,3, 2,4 Гц), 3,26 (1H, дкв., J=9,0, 7,2 Гц),1,43-1,25 (9H, м, включая 1,31 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,20 (3H, д, J=7,2 Гц)).

ИК (KBr): 3398,0, 1750,1, 1606,4, 1537,0, 1468,5, 1426,1, 1401,0, 1373,1, 1332,6, 1311,4, 1274,7 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 550 [M+Na]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₂₂H₂₆N₅O₅S₂Na₂:

Вычислено: 550,1171

Найдено: 550,1179 [M+Na]⁺

Пример 56

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(пиперидин-4-илкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[1-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперидин-4-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-{4-[1-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперидин-4-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (260 мг, 0,500 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 51) в диметилформамиде (13 мл) добавляли гидразин ацетат (55 мг, 0,600 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (297 мг, 0,500 ммоль) в ацетонитриле (15 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (348 мкл, 2,00 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат → этилацетат:метанол (9:1) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[1-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперидин-4-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (348 мг, выход 85%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (4H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,52 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,43 (1H, с), 7,05-7,01 (1H, ушир. д, J=8,8 Гц), 5,51 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,23 (2H, с), 4,52-4,46 (2H, м), 4,31-4,25 (3H, м), 4,23-4,04 (3H, м), 4,05 (2H, дт, J=8,8, 5,9 Гц), 3,30 (1H, дд, J=2,4, 7,3 Гц), 3,21 (1H, дкв., J=6,8, 8,8 Гц), 3,11-2,95 (2H, м), 2,07-2,00 (2H, м), 1,55-1,41 (2H, м), 1,38 (3H, д, J=6,8 Гц), 1,28 (3H, д, J=5,9 Гц).

(2) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(Пиперидин-4-илкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[1-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперидин-4-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (340 мг, 0,414 ммоль) (полученный, как описано в примере 56(1)) в смеси тетрагидрофурана (17 мл) и дистиллированной воды (17 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (340 мг) при комнатной температуре в течение 4,5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → дистиллированная вода:ацетонитрил (8:2)), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(пиперидин-4-илкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (70 мг, выход 33%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,50 (1H, с), 4,55 (2H, т, J=8,2 Гц), 4,36-4,29 (1H, м), 4,24 (1H, дкв., J=6,2, 6,4 Гц), 4,17 (1H, дд, J=2,2, 9,1 Гц), 4,17-4,08 (1H, м), 4,03 (1H, дд, J=5,0, 8,3 Гц), 3,53 (2H, дт, J=13,3, 3,1 Гц), 3,43 (1H, дд, J=2,2, 6,2 Гц), 3,25 (1H, дкв., J=9,1, 7,2 Гц), 3,17 (2H, дт, J=12,8, 2,9 Гц), 2,20 (1H, дд, J=2,9, 14,2 Гц), 1,93-1,80 (2H, м), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,19 (3H, д, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 1754, 1658, 1602, 1545, 1385, 1315 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 508 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₂₂H₃₀N₅O₅S₂:

Вычислено: 508,1688

Найдено: 508,1693 [M+H]⁺

Элементный анализ: C₂₂H₂₉N₅O₅S₂·_3H2O:

Вычислено: C 47,05%, H 6,28%, N 12,47%, S 11,42%

Найдено: C 47,07%, H 6,38%, N 12,37%, S 11,14%

Пример 57

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3S)-пирролидин-3-илкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (280 мг, 0,554 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 52) в диметилформамиде (14 мл) добавляли гидразин ацетат (61 мг, 0,665 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 2 часов. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (329 мг, 0,554 ммоль) в ацетонитриле (16 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (356 мкл, 2,22 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат → этилацетат:метанол (9:1)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (399 мг, выход 89%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 8,20 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,53 (2H, дд, J=8,8, 13,7 Гц), 7,45 (1H, с), 7,17-7,12 (1H, ушир. т, J=7,8 Гц), 5,51 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,30-5,18 (2H, м), 4,68-4,59 (1H, м), 4,54-4,46 (2H, м), 4,32-4,24 (3H, м), 4,09-4,00 (2H, м), 3,84-3,76 (1H, м), 3,65-3,53 (2H, м), 3,46-3,40 (1H, м), 3,30 (1H, дд, J=2,9, 6,8 Гц), 3,22 (1H, дкв., J=8,8, 6,6 Гц), 2,32-2,22 (1H, м), 2,09-1,94 (1H, м), 1,38 (3H, д, J=6,8 Гц), 1,28 (3H, д, J=6,8 Гц).

(2) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3S)-пирролидин-3-илкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (390 мг, 0,483 ммоль) (полученный, как описано в примере 57(1)) в смеси тетрагидрофурана (20 мл) и дистиллированной воды (20 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 20% гидроксида палладия на угле (390 мг) при комнатной температуре в течение 4,5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → дистиллированная вода:ацетонитрил (76:24)), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3S)-пирролидин-3-илкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (90 мг, выход 38%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,52 (1H,s), 4,69-4,62 (1H, м), 4,59-4,50 (2H, м), 4,37-4,39 (1H, м), 4,22 (1H, дкв., J=6,4, 6,4 Гц), 4,11 (1H, дд, J=2,4, 9,0 Гц), 4,07-4,01 (2H, м), 3,65-3,55 (2H, м), 3,48-3,39 (3H, м), 3,21 (1H, дкв., J=9,0, 7,2 Гц), 2,50-2,40 (1H, м), 2,23-2,14 (1H, м), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,18 (3H, д, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 1754, 1654, 1597, 1545, 1386, 1313 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 494 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺):для C₂₁H₂₈N₅O₅S₂:

Вычислено: 494,1532

Найдено: 494,1529 [M+H]⁺

Элементный анализ: C₂₁H₂₇N₅O₅S₂·_7/3H2O:

Вычислено: C 47,09%, H 5,96%, N 13,08%, S 11,97%

Найдено: C 47,04%, H 5,95%, N 13,04%, S 11,83%

Пример 58

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3R)-пирролидин-3-илкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(3R)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-{4-[(3R)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (280 мг, 0,554 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 53) в диметилформамиде (14 мл) добавляли гидразин ацетат (61 мг, 0,665 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (329 мг, 0,554 ммоль) в ацетонитриле (16 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (386 мкл, 2,22 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат → этилацетат:метанол (9:1)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(3R)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (416 мг, выход 93%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 8,19 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,53 (2H, дд, J=8,8, 15,6 Гц), 7,45 (1H, с), 7,17-7,11 (1H, ушир. с), 5,51 (1H, д, J=13,8 Гц), 5,30-5,18 (3H, м), 4,67-4,58 (1H, м), 4,53-4,47 (2H, м), 4,32-4,23 (3H, м), 4,06 (2H, дт, J=8,8, 5,9 Гц), 3,81-3,76 (1H, м), 3,65-3,53 (2H, м), 3,47-3,40 (1H, м), 3,30 (1H, дд, J=2,9, 6,8 Гц), 3,22 (1H, дкв., J=8,8, 7,8 Гц), 2,32-2,25 (1H, м), 2,09-1,95 (1H, м), 1,39 (3H, д, J=5,9 Гц), 1,28 (3H, д, J=7,8 Гц).

(2) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3R)-пирролидин-3-илкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(3R)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (410 мг, 0,508 ммоль) (полученный, как описано в примере 58(1)) в смеси тетрагидрофурана (21 мл) и дистиллированной воды (21 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 20% гидроксида палладия на угле (410 мг) при комнатной температуре в течение 4,5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли, промывали вышеуказанной смесью растворителей и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → дистиллированная вода:ацетонитрил (76:24)), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3R)-пирролидин-3-илкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (101 мг, выход 41%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,52 (1H, с), 4,69-4,62 (1H, м), 4,60-4,52 (2H, м), 4,38-4,30 (1H, м), 4,24 (1H, дкв., J=6,3, 6,3 Гц), 4,16 (1H, дд, J=2,3, 8,9 Гц), 4,09-4,02 (2H, м), 3,67-3,54 (2H, м), 3,49-3,40 (3H, м), 3,24 (1H, дкв., J=8,9, 7,2 Гц), 2,49-2,40 (1H, м), 2,24-2,14 (1H, м), 1,30 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,20 (3H, д, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 1756, 1656, 1598, 1544, 1384, 1313 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 494 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₂₁H₂₈N₅O₅S₂:

Вычислено: 494,1532

Найдено: 494,1519 [M+H]⁺

Элементный анализ: C₂₁H₂₇N₅O₅S₂·_3H2O:

Вычислено: C 46,06%, H 6,07%, N 12,79%, S 11,71%

Найдено: C 46,35%, H 5,75%, N 12,82%, S 11,68%

Пример 59

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(азетидин-3-илкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[1-(п-нитробензилоксикарбонил)азетидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-{4-[1-(п-нитробензилоксикарбонил)азетидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (400 мг, 0,814 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 54) в диметилформамиде (20 мл) добавляли гидразинацетат (90 мг, 0,977 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (484 мг, 0,814 ммоль) в ацетонитриле (25 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (568 мкл, 3,26 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат → этилацетат:метанол (9:1)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[1-(п-нитробензилоксикарбонил)азетидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (496 мг, выход 77%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,54 (1H, с), 8,23 (4H, д, J=8,8 Гц), 8,22 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,52 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,52-7,47 (1H, м), 7,45 (1H, с), 5,51 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,9 Гц), 4,90-4,80 (1H, м), 4,54-4,47 (2H, м), 4,47-4,38 (2H, м), 4,42 (2H, дд, J=8,8, 8,8 Гц), 4,13-4,25 (2H, м), 4,27 (1H, дд, J=2,2, 9,5 Гц), 4,09-3,96 (4H, м), 3,30 (1H, дд, J=2,2, 7,0 Гц), 3,21 (1H, дкв., J=9,5, 6,6 Гц), 1,38 (3H, д, J=6,6 Гц), 1,28 (3H, д, J=5,9 Гц).

(2) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(азетидин-3-илкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[1-(п-нитробензилоксикарбонил)азетидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (490 мг, 0,617 ммоль) (полученный, как описано в примере 59(1)) в смеси тетрагидрофурана (25 мл) и дистиллированной воды (25 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 20% гидроксида палладия на угле (490 мг) при комнатной температуре в течение 4,5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → дистиллированная вода:ацетонитрил (76:24)), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(азетидин-3-илкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (143 мг, выход 49%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,54 (1H, с), 4,97-4,87 (1H, м), 4,60-4,54 (2H, м), 4,44 (2H, дд, J=11,9, 8,4 Гц), 4,39-4,30 (3H, м), 4,23 (1H, кв.д, J=6,4, 6,2 Гц), 4,15 (1H, дд, J=9,0, 2,4 Гц), 4,10-4,03 (2H, м), 3,43 (1H, дд, J=6,3, 2,4 Гц), 3,23 (1H, дкв., J=9,0, 7,2 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,19 (3H, д, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 1753, 1655, 1600, 1545, 1387, 1314 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 480 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₂₀H₂₆N₅O₅S₂:

Вычислено: 480,1375

Найдено: 480,1391 [M+H]⁺

Элементный анализ: C₂₀H₂₅N₅O₅S₂·_9/4H2O:

Вычислено: C 46,19%, H 5,72%, N 13,47%, S 12,33%

Найдено: C 46,06%, H 5,38%, N 13,70%, S 12,33%

Пример 60

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(пиперазин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(4-п-нитробензилоксикарбонил)пиперазин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-{4-[(4-п-нитробензилоксикарбонил)пиперазин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (546 мг, 1,07 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 55) в диметилформамиде (15 мл) добавляли гидразинацетат (118 мг, 1,29 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (636 мг, 1,07 ммоль) в ацетонитриле(30 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (0,22 мл, 1,29 ммоль). Смесь перемешивали в течение 1 часа пока температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат → этилацетат:метанол (20:1)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(4-п-нитробензилоксикарбонил)пиперазин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (215 мг, выход 29%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (4H, дд, J=8,5, 5,2 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,52 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,22 (1H, с), 5,51 (1H, д, J=13,8 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,8 Гц), 5,25 (2H, с), 4,50 (1H, т, J=8,0 Гц), 4,49 (1H, т, J=8,0 Гц), 4,35-4,20 (3H, м), 4,04 (1H, т, J=8,5 Гц), 4,31 (1H, т, J=8,5 Гц), 3,98-3,69 (4H, м), 3,69-3,48 (4H, м), 3,29 (1H, дд, J=6,8, 2,6 Гц), 3,20 (1H, дкв., J=9,2, 7,2 Гц), 1,36 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,26 (3H, д, J=7,5 Гц).

(2) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(пиперазин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(4-п-нитробензилоксикарбонил)пиперазин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (539 мг, 0,79 ммоль) (полученный, как описано в примере 60(1)) в смеси тетрагидрофурана (30 мл) и дистиллированной воды (30 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 7,5% палладия на угле (539 мг) на водяной бане (35° C) в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → 2% ацетонитрил в дистиллированной воде → 4% ацетонитрил в дистиллированной воде → 6% ацетонитрил в дистиллированной воде → 8% ацетонитрил в дистиллированной воде → 10% ацетонитрил в дистиллированной воде → 13% ацетонитрил в дистиллированной воде → 16% ацетонитрил в дистиллированной воде → 20% ацетонитрил в дистиллированной воде), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(пиперазин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (107 мг, выход 27%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,23 (1H, с), 4,56 (2H, т, J=8,4 Гц), 4,40-4,30 (1H, м), 4,24 (1H, квинт., J=6,2 Гц), 4,20 (1H, дд, J=8,7, 2,2 Гц), 4,03 (2H, дд, J=8,7, 2,2 Гц), 3,95 (4H, т, J=5,2 Гц), 3,43 (1H, дд, J=6,2, 2,4 Гц), 3,40-3,29 (4H, м), 3,24 (1H, дкв., J=8,7, 7,3 Гц),1,29 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,19 (3H, д, J=7,9 Гц).

ИК (KBr): 3415,3, 1759,7, 1620,9, 1536,0, 1456,0, 1431,9, 1384,6, 1313,3, 1246,8 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 494 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (ESI⁺) для C₂₁H₂₈N₅O₅S₂:

Вычислено: 494,2532

Найдено: 494,1529 [M+H]⁺

Пример 61

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-((2-аминоэтил)карбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этил)карбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-{4-[(2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этил)карбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (330,6 мг, 0,68 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 56) в диметилформамиде (17 мл) добавляли гидразинацетат (82 мг, 0,89 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (426 мг, 0,72 ммоль) в ацетонитриле (21 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (0,5 мл, 2,9 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: толуол:ацетонитрил (1:2)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этил)карбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (348,1 мг, выход 66%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (500 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=7,8 Гц), 8,14 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=7,8 Гц), 7,47 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,43 (1H, с), 7,38 (1H, т, J=6,3 Гц), 5,51 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,51 (1H, т, J=6,3 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,18 (2H, с), 4,48 (1H, т, J=8,3 Гц), 4,46 (1H, т, J=8,3 Гц), 4,32-4,24 (3H, м), 4,05 (1H, дд, J=8,3, 5,6 Гц), 4,03 (1H, дд, J=8,3, 5,6 Гц), 3,55 (2H, д, 6,3 Гц), 3,44 (2H, кв., 6,3 Гц), 3,30 (1H, дд, J=6,9, 1,9 Гц), 3,22 (1H, дкв., J=8,8, 6,5 Гц), 1,73 (1H, ушир. с), 1,38 (3H, д, J=6,5 Гц), 1,28 (3H, д, J=6,5 Гц).

(2) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((2-аминоэтил)карбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этил)карбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (328,4 мг, 0,42 ммоль) (полученный, как описано в примере 61(1)) в смеси тетрагидрофурана (16,4 мл) и дистиллированной воды (8,2 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 20% гидроксида палладия на угле (328,4 мг) на водяной бане (30° C) в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли этилацетат-тетрагидрофуран (1:1) и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли, промывали вышеуказанной смесью растворителей и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → 5% ацетонитрил в дистиллированной воде → 10% ацетонитрил в дистиллированной воде → 15% ацетонитрил в дистиллированной воде), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((2-аминоэтил)карбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (96,4 мг, выход 49%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,37 (1H, с), 4,42 (1H, т, J=8,4 Гц), 4,42 (1H, т, J=8,4 Гц), 4,24-4,16 (1H, м), 4,10 (1H, квинтет, J=6,6 Гц), 4,00 (1H, дд, J=8,9, 2,4 Гц), 3,94 (1H, дд, J=8,4, 4,8 Гц), 3,90 (1H, дд, J=8,4, 4,8 Гц), 3,57 (2H, т, J=5,9 Гц), 3,26 (1H, дд, J=6,6, 2,4 Гц), 3,12 (2H, т, J=5,9 Гц), 3,08 (1H, дкв., J=8,9, 7,3 Гц), 1,16 (3H, д, J=6,6 Гц), 1,05 (3H, д, J=7,3 Гц).

ИК (KBr): 3383, 1755, 1652, 1599, 1547, 1387, 1314 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 468 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺):для C₁₉H₂₆O₅N₅S₂:

Вычислено: 468,1366

Найдено: 468,1365 [M+H]⁺

Пример 62

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-аминоазетидин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[3-(п-нитробензилоксикарбониламино)азетидин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-{4-[3-(п-нитробензилоксикарбониламино)азетидин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (390 мг, 0,793 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 57) в диметилформамиде (20 мл) добавляли гидразинацетат (88 мг, 0,952 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (471 мг, 0,793 ммоль) в ацетонитриле (24 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (552 мкл, 3,17 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 10% раствором хлорида натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат:метанол (93:7)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[3-(п-нитробензилоксикарбониламино)азетидин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (587 мг, выход 93%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (4H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,51 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,46 (2H, с), 5,51 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,40-5,37 (1H, м), 5,25 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,21 (2H, с), 4,92-4,86 (1H, м), 4,59-4,42 (4H, м), 4,40-4,32 (1H, м), 4,30-4,23 (3H, м), 4,04-3,92 (3H, м), 3,30 (1H, дд, J=2,2, 6,6 Гц), 3,21 (1H, дкв., J=7,3, 9,0 Гц), 1,38 (3H, д, J=6,6 Гц), 1,27 (3H, д, J=7,3 Гц).

(2) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-аминоазетидино-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-{4-[3-(п-нитробензилоксикарбонил)азетидин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (580 мг, 0,731 ммоль) (полученный, как описано в примере 62(1)) в смеси тетрагидрофурана (30 мл) и дистиллированной воды (30 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (580 мг) при комнатной температуре в течение 5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли, промывали вышеуказанной смесью растворителей и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → дистиллированная вода:ацетонитрил (8:2)), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-аминоазетидин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (135 мг, выход 39%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,45 (1H, с), 4,98-4,85 (1H, м), 4,64-4,49 (4H, м), 4,38-4,30 (1H, м), 4,31-4,17 (4H, м), 4,07-4,00 (2H, м), 3,44 (1H, дд, J=2,0, 5,9 Гц), 3,24 (1H, кв.д, J=7,2, 8,5 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,20 (3H, д, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 1756, 1607, 1537, 1449, 1387, 1309, 1291, 1261

см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 502 [M+Na]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (ESI⁺) для C₂₀H₂₅N₅O₅S₂Na:

Вычислено: 502,1195

Найдено: 502,1179 [M+Na]⁺

Элементный анализ: C₂₀H₂₅N₅O₅S₂·_3H2O:

Вычислено: C 45,02%, H 5,86%, N 13,12%, S 12,02%

Найдено: C 44,27%, H 5,28%, N 13,26%, S 12,68%

Пример 63

(1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-аминоэтил)-N-метилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-{N-метил-N-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этил]карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-{N-метил-N-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этил]карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (348,9 мг, 0,71 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 58) в диметилформамиде (17,5 мл) добавляли гидразинацетат (85,2 мг, 0,93 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (420,3 мг, 0,71 ммоль) в ацетонитриле (21 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (0,49 мл, 2,8 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: толуол:ацетонитрил (1:2)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-{N-метил-N-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этил]карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (267,5 мг, выход 47%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (4H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,56-7,46 (3H, м, включая 2H, д, при 7,49 м.д., J=8,8 Гц), 7,22 (0,7H, с), 7,21 (0,3H, с), 5,52 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,172 (2H, с), 4,52-4,38 (2H, м), 4,32-4,10 (3H, м), 4,10-3,98 (2H, м), 3,74-3,58 (2H, м), 3,56-3,40 (2H, м), 3,30-3,26 (1H, м), 3,16-3,06 (1H, м), 3,24 (0,9H, с), 3,04 (2,1H, с), 1,77 (1H, д, J=4,4 Гц), 1,38 (3H, д, J=5,9 Гц), 1,22 (3H, J=7,3 Гц).

(2) (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-аминоэтил)-N-метилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-{N-метил-N-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этил]карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (267,5 мг, 0,33 ммоль) (полученный, как описано в примере 63(1)) в смеси тетрагидрофурана (14 мл) и дистиллированной воды (6,7 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 20% гидроксида палладия на угле (300 мг) при 30° C на водяной бане в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли этилацетат-тетрагидрофуран (1:1) и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли, промывали вышеуказанной смесью растворителей и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → 5% ацетонитрил в дистиллированной воде → 10% ацетонитрил в дистиллированной воде → 15% ацетонитрил в дистиллированной воде), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-аминоэтил)-N-метилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (81,6 мг, выход 51%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,11 (0,4H, с), 7,05 (0,6H, с), 4,43 (2H, т, J=8,8 Гц), 4,26-4,18 (1H, м), 4,12 (1H, квинтет, J=5,9 Гц), 4,08 (1H, дд, J=8,8, 2,3 Гц), 3,91 (2H, дд, J=8,8, 4,9 Гц), 3,70 (2H, т, 5,9 Гц), 3,31 (1H, дд, J=5,9, 2,3 Гц), 3,23-3,16 (2H, м), 3,12 (1H, дкв., J=8,8, 7,8 Гц), 3,00 (1,8H, с), 2,94 (1,2H, с), 1,17 (3H, д, J=5,9 Гц), 1,07 (3H, д, J=7,8 Гц).

ИК (KBr): 3419, 2966, 1754, 1607, 1540, 1470, 1391, 1315

см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 482 [M+H]⁺

Пример 64

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-гидроксиэтил)-N-изопропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-{N-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил]-N-изопропилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-{N-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил]-N-изопропилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (618 мг, 1,35 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 59) в диметилформамиде (30 мл) добавляли гидразинацетат (149 мг, 1,62 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (963 мг, 1,62 ммоль) в ацетонитриле (60 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (0,94 мл, 5,40 ммоль). Смесь перемешивали в течение 8 часов, постепенно повышая температуру до комнатной. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат → этилацетат:метанол (10:1)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{[1-(4-{N-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил]-N-изопропилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (310 мг, выход 30%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,21 (2H, д, J=8,4 Гц), 7,64 (2H, д, J=8,4 Гц), 7,12-6,90 (1H, м), 5,45 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,7 Гц), 4,69-4,18 (6H, м, включая 4,45 (2H, дд, J=7,9, 6,5 Гц), 4,24 (1H, квинт., J=6,3 Гц), 4,22 (1H, дд., J=9,0, 2,5 Гц)), 3,89-3,72 (1H, м), 3,72-3,46 (2H, м), 3,46-3,32 (1H, м), 3,26 (1H, дд, J=6,3, 2,5 Гц), 3,17 (1H, дкв., J=9,0, 7,3 Гц), 1,36 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,31-1,09 (9H, м, включая 1,25 (3H, д, J=7,2 Гц)), 0,87 (9H, с), 0,06 (6H, д, J=2,9 Гц).

(2) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-гидроксиэтил)-N-изопропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-{N-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил]-N-изопропилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (4,47 г, 5,88 ммоль) (полученный, как описано в примере 64(1)) в смеси тетрагидрофурана (220 мл) добавляли в уксусную кислоту (0,40 мл, 7,06 ммоль) и 1M раствор фторида тетрабутиламмония в тетрагидрофуране (7,06 мл, 7,06 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 дня. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат → этилацетат:метанол (10:1)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(2-гидроксиэтил)изопропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (1,79 г,выход 47%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,20 (0,6H, ушир. с), 7,09 (0,4H, ушир. с), 5,50 (1H, д, J=13,8 Гц), 5,26 (1H, д, J=13,8 Гц), 4,62-4,18 (6H, м, включая 4,49 (2H, т., J=8,4 Гц), 4,26 (1H, дд, J=9,3, 2,6 Гц)), 4,04 (2H, дд, J=8,4, 5,4 Гц), 3,80 (2H, ушир. с), 3,56 (2H, ушир. с), 3,28 (1H, дд, J=7,5, 2,5 Гц), 3,19 (1H, ушир. с),1,38 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,35 (3,6H, ушир. с), 1,26 (3H, д, J=7,3 Гц), 1,21 (2,4H, ушир. с).

(3) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-гидроксиэтил)-N-изопропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(2-гидроксиэтил)изопропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (1,79 г, 2,77 ммоль) (полученный, как описано в примере 64(2)) в смеси тетрагидрофурана (90 мл) и дистиллированной воды (90 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 7,5% палладия на угле (1,79 г) на водяной бане (35° C) в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (23 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Смесь встряхивали в разделительной воронке. Водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → 2% ацетонитрил в дистиллированной воде → 4% ацетонитрил в дистиллированной воде), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(2-гидроксиэтил)изопропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (897 мг, выход 61%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,08 (0,2H, с), 7,02 (0,8H, с), 4,56 (2H, т, J=8,0 Гц), 4,50-4,40 (0,3H, м), 4,40-4,30 (1H, м), 4,25 (1H, квинт., J=6,5 Гц), 4,21 (1H, дд, J=8,4, 2,2 Гц), 4,16-4,06 (0,7H, м), 4,05 (2H, дд, J=8,0, 4,8 Гц), 3,84-3,76 (1Н, м), 3,69-3,60 (0,5H, м), 3,60-3,52 (0,5H, м), 3,52 (2H, т, J=6,3 Гц), 3,43 (1H, дд, J=6,5, 2,4 Гц), 3,25 (1H, квинт., J=8,4 Гц), 1,42-1,07 (6Н, м), 1,30 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,20 (3H, д, J=7,1 Гц)).

ИК (KBr): 3382,5, 1750,1, 1603,5, 1537,0, 1468,5, 1452,1, 1396,2, 1312,3, 1284,4 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 533 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (ESI⁺) для C₂₂H₂₉N₄O₅S₂Na:

Вычислено: 533,1504

Найдено: 533,1489 [M+H]⁺

Пример 65

(1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-аминоэтил)-N-изопропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-{N-изопропил-N-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этил]-карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-{N-изопропил-N-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этил]карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (746 мг, 1,43 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 60) в диметилформамиде (22 мл) добавляли гидразинацетат (158 мг, 1,72 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (1,02 г, 1,72 ммоль) в ацетонитриле (45 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (1,00 мл, 5,72 ммоль). Смесь перемешивали в течение 3 часов пока температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат → этилацетат:метанол (10:1)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-{N-изопропил-N-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этил]-карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (610 мг, выход 52%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,21 (4H, дд, J=11,0, 8,6 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,50 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,25-6,95 (1H, м), 5,51 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,19 (2H, с), 4,63-3,88 (8H, м), 3,91-3,35 (4H, м), 3,29 (1H, дд, J=6,8, 2,2 Гц), 3,25-3,08 (1H, м), 1,38 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,31 (3H, ушир. с), 1,25 (3H, д, J=7,3 Гц), 1,21 (3H, ушир. с).

(2) (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-аминоэтил)-N-изопропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-{N-изопропил-N-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этил]-карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (610 мг, 0,74 ммоль) (полученный, как описано в примере 65(1)) в смеси тетрагидрофурана (30 мл) и дистиллированной воды (30 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 7,5% палладия на угле (610 мг) на водяной бане (35° C) в течение 2 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и дистиллированную воду. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → 2% ацетонитрил в дистиллированной воде → 4% ацетонитрил в дистиллированной воде → 6% ацетонитрил в дистиллированной воде → 8% ацетонитрил в дистиллированной воде → 10% ацетонитрил в дистиллированной воде → 12% ацетонитрил в дистиллированной воде → 14% ацетонитрил в дистиллированной воде → 16% ацетонитрил в дистиллированной воде → 18% ацетонитрил в дистиллированной воде), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-аминоэтил)-N-изопропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (104 мг, выход 28%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,06 (1H, с), 4,56 (2H, т, J=8,4 Гц), 4,41-4,31 (1H, м), 4,29-4,09 (3H, м, включая 4,24 (1H, квинт., J=6,3 Гц), 4,20 (1H, дд, J=8,9, 2,4 Гц)), 4,03 (2H, дд, J=8,4, 4,8 Гц), 3,43 (1H, дд, J=6,3, 2,4 Гц), 3,37-3,16 (3H, м, включая 3,25 (1H, дкв., J=8,9, 7,4 Гц)), 1,29 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,25-1,15 (9H, м, включая 1,19 (3H, д, J=7,0 Гц))

ИК (KBr): 3381,6, 1759,7, 1597,7, 1537,0, 1469,5, 1424,2, 1388,5, 1371,1, 1314,3, 1282,4 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 510 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (ESI⁺) для C₂₂H₃₂N₅O₅S₂Na:

Вычислено: 510,1845

Найдено: 510,1826 [M+H]⁺

Пример 66

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-аминометил-2-метилпропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-{(1S)-2-метил-[1-(п-нитробензилоксикарбониламино)метил]пропилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-{(1S)-2-метил-[1-(п-нитробензилоксикарбониламино)метил]-пропилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (780 мг, 1,50 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 61) в диметилформамиде (40 мл) добавляли гидразинацетат (166 мг, 1,80 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (892 мг, 1,50 ммоль) в ацетонитриле (45 мл на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (1,05 мл, 6,00 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 10% раствором хлорида натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат → этилацетат:метанол (98:2)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-{(1S)-2-метил-[1-(п-нитробензилоксикарбониламино)метил]пропилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (950 мг, выход 77%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 8,09 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,43 (1H, с), 7,40 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,12 (1H, ушир. д, J=8,8 Гц), 5,51 (1H, д, J=13,2 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,2 Гц), 5,23 (1H, д, J=13,2 Гц), 5,05 (1H, д, J=13,2 Гц), 4,51 (1H, т, J=8,1 Гц), 4,44 (1H, т, J=8,1 Гц), 4,32-4,25 (3H, м), 4,06-3,96 (3H, м), 3,45-3,32 (2H, м), 3,30 (1H, дд, J=2,2, 6,6 Гц), 3,21 (1H, дкв., J=7,3, 9,5 Гц), 1,93-1,84 (1H, м), 1,38 (3H, д, J=5,9 Гц), 1,28 (3H, д, J=7,3 Гц), 1,00 (3H, д, J=6,6 Гц), 0,98 (3H, д, J=7,3 Гц).

(2) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-аминометил-2-метилпропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-{(1S)-2-метил-[1-(п-нитробензилоксикарбониламино)метил]пропилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (950 мг, 1,15 ммоль) (полученный, как описано в примере 66(1)) в смеси тетрагидрофурана (48 мл) и дистиллированной воды (48 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (950 мг) при комнатной температуре в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли этилацетат и дистиллированную воду. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и водный слой разделяли, промывали вышеуказанной смесью растворителей и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → дистиллированная вода:ацетонитрил (76:24)), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-аминометил-2-метилпропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (103 мг, выход 18%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 8,18-8,03 (1H, м), 7,51 (1H, с), 4,47 (2H, т, J=8,1 Гц), 4,24-4,14 (1H, м), 3,99-3,85 (4H, м), 3,84-3,77 (1H, м), 3,09-2,88 (4H, м), 1,94-1,84 (1H, м), 1,14 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,03 (3H, д, J=7,0 Гц), 0,89 (3H, д, J=6,6 Гц), 0,84 (3H, д, J=6,6 Гц).

ИК (KBr): 1752, 1660, 1605, 1545, 1494, 1471 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 510 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₂₂H₃₂N₅O₆S₂:

Вычислено: 510,1845

Найдено: 510,1846 [M+H]⁺

Элементный анализ: C₂₂H₃₁N₅O₆S₂·_13/7H2O:

Вычислено: C 48,65%, H 6,44%, N 12,90%, S 11,81%

Найдено: C 48,92%, H 6,29%, N 12,60%, S 12,04%

Пример 67

(1R,5S,6S)-2-[1-(4-аминометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(п-нитробензилкарбониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-[4-(п-нитробензил-карбониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (265,2 мг, 0,63 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 62) в диметилформамиде (14 мл) добавляли гидразинацетат (76,4 мг, 0,5 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 0,5 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (390 мг, 0,66 ммоль) в ацетонитриле (19 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (0,44 мл, 2,5 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5M соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: толуол:ацетонитрил (2:3)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(п-нитробензилкарбониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (268,4 мг, выход 59%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (4H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,51 (2H, д, J=8,8 Гц), 6,45 (1H, с), 5,51 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,37 (1H, ушир. с), 5,25 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,21 (2H, с), 4,48 (1H, т, J=7,8 Гц), 4,46 (1H, т, J=7,8 Гц), 4,35-4,20 (5H, м), 4,03 (2H, дд, J=7,8, 4,9 Гц), 3,29 (1H, дд, J=6,2, 2,5 Гц), 3,22 (1H, дкв., J=8,9, 7,3 Гц), 1,80 (1H, д, J=4,4 Гц), 1,38 (3H, д, J=5,9 Гц), 1,27 (3H, д, J=7,3 Гц).

(2) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-аминометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-1-[4-(п-нитробензилкарбониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (660 мг, 0,89 ммоль) (полученный, как описано в примере 67(1)) в смеси тетрагидрофурана (30 мл) и дистиллированной воды (30 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 7,5% палладия на угле (606 мг) на водяной бане (35° C) в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли этилацетат и дистиллированную воду. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → 2% ацетонитрил в дистиллированной воде → 4% ацетонитрил в дистиллированной воде → 6% ацетонитрил в дистиллированной воде → 8% ацетонитрил в дистиллированной воде → 10% ацетонитрил в дистиллированной воде → 13% ацетонитрил в дистиллированной воде → 15% ацетонитрил в дистиллированной воде), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения (1R,5S,6S)-2-[1-(4-аминометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (123 мг, выход 34%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 6,85 (1H, с), 4,54 (2H, т, J=8,1 Гц), 4,38-4,30 (1H, м), 4,25 (1H, квинт., J=6,3 Гц), 4,25 (1H, дд, J=8,9, 2,5 Гц), 4,07 (2H, с), 4,02 (2H, дд, J=8,1, 4,0 Гц), 3,44 (1H, дд, J=6,3, 2,5 Гц), 3,25 (1H, дкв., J=8,9, 7,3 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,20 (3H, д, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 3362,3, 1756,8, 1589,1, 1527,3, 1469,5, 1386,6, 1309,4, 1286,3, 1259,3 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 411 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (ESI⁺) для C₁₇H₂₃N₄O₄S₂:

Вычислено: 411,4161

Найдено: 411,1173 [M+H]⁺

Пример 68

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(метоксикарбониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(метоксикарбониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-[4-(метоксикарбониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (441 мг, 1,39 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 63) в диметилформамиде (13 мл) добавляли гидразинацетат (154 мг, 1,67 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (993 мг, 1,67 ммоль) в ацетонитриле (26 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (0,97 мл, 5,56 ммоль). Смесь перемешивали в течение 30 минут пока температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5M соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(метоксикарбониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (307 мг, выход 53%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,7 Гц), 6,45 (1H, с), 5,51 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,26 (1H, д, J=13,7 Гц), 4,48 (2H, т, J=8,0 Гц), 4,43-4,18 (5H, м), 4,09-3,99 (2H, м), 4,09-3,99 (2H, м), 3,69 (3H, с), 3,29 (1H, дд, J=6,7, 2,7 Гц), 3,21 (1H, дкв., J=9,0, 7,3 Гц), 1,38 (3H, д, J=6,1 Гц), 1,25 (3H, д, J=7,3 Гц).

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(метоксикарбониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(метоксикарбониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (307 мг, 0,52 ммоль) (полученный, как описано в примере 68(1)) в смеси тетрагидрофурана (15 мл) и дистиллированной воды (15 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 7,5% палладия на угле (307 мг) на водяной бане (35° C) в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (44 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → 2% ацетонитрил в дистиллированной воде → 4% ацетонитрил в дистиллированной воде → 6% ацетонитрил в дистиллированной воде), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(метоксикарбониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (135 мг, выход 53%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 6,59 (1H, с), 4,51 (2H, т, J=8,1 Гц), 4,38-4,29 (1H, м), 4,25 (1H, квинт., J=6,2 Гц), 4,20 (1H, дд, J=9,1, 2,5 Гц), 4,19 (2H, с), 4,05-3,98 (2H, м), 3,68 (3H, с), 3,43 (1H, дд, J=6,2, 2,4 Гц), 3,25 (1H, дкв., J=9,1, 7,4 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,20 (3H, д, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 3355,5, 1748,2, 1725,1, 1600,6, 1525,4, 1470,5, 1395,2, 1311,4, 1290,1, 1254,5 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 513 [M+Na]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₁₉H₂₃N₄O₅S₂Na₂:

Вычислено: 513,0855

Найдено: 513,0850 [M+Na]⁺

Пример 69

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(бензоиламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(бензоиламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-[4-(бензоиламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (698 мг, 2,01 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 64) в диметилформамиде (20 мл) добавляли гидразинацетат (222 мг, 2,41 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (1,43 г, 2,41 ммоль) в ацетонитриле (40 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (1,40 мл, 8,94 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2,5 часов пока температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5M соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат → этилацетат:метанол (20:1)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(бензоиламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (851 мг, выход 65%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,21 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,81 (2H, д, J=7,3 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,56-7,38 (3H, м), 6,79 (1H, ушир.с), 6,52 (1H, с), 5,51 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,7 Гц), 4,53 (2H, дд, J=5,3, 2,9 Гц), 4,47 (2H, т, J=8,3 Гц), 4,33-4,22 (3H, м), 4,10-3,95 (2H, м), 3,28 (1H, дд, J=6,7, 2,6 Гц), 3,19 (1H, дкв., J=7,9, 6,4 Гц), 1,37 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,26 (3H, д, J=7,3 Гц).

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(бензоиламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(бензоиламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (851 мг, 1,31 ммоль) (полученный, как описано в примере 69(1)) в смеси тетрагидрофурана (40 мл) и дистиллированной воды (40 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 7,5% палладия на угле (851 мг) на водяной бане (35° C) в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (110 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → 2% ацетонитрил в дистиллированной воде → 4% ацетонитрил в дистиллированной воде → 6% ацетонитрил в дистиллированной воде → 8% ацетонитрил в дистиллированной воде → 10% ацетонитрил в дистиллированной воде → 15% ацетонитрил в дистиллированной воде), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(бензоиламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (144 мг, выход 20%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,81 (2H, д, J=7,4 Гц), 7,70-7,55 (3H, м), 6,62 (1H, д, J=8,6 Гц), 4,52 (2H, т, J=7,9 Гц), 4,47 (2H, с), 4,37-4,28 (1H, м), 4,24 (1H, квинт., J=6,2 Гц), 4,19 (1H, дд, J=8,8, 2,2 Гц), 4,05-3,97 (2H, м), 3,43 (1H, дд, J=6,2, 2,2 Гц), 3,26 (1H, дкв., J=8,8, 7,2 Гц), 1,29 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,19 (3H, д, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 3336,2, 1750,2, 1645,9, 1601,6, 1526,4, 1488,8, 1470,5, 1396,2, 1308,5, 1294,0 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 537 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₂₄H₂₆N₄O₅S₂Na:

Вычислено: 537,1243

Найдено: 537,1246 [M+H]⁺

Пример 70

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(бензолсульфониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(бензолсульфониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-[4-(бензолсульфониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (1,00 г, 2,68 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 65) в диметилформамиде (30 мл) добавляли гидразинацетат (296 мг, 3,21 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (1,75 г, 2,94 ммоль) в ацетонитриле (60 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (1,87 мл, 10,7 ммоль). Смесь перемешивали в течение 3 часов пока температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: гексан:этилацетат (1:1)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(бензолсульфониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (1,13 г, выход 61%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,21 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,83 (2H, д, J=7,5 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,60-7,43 (3H, м), 6,33 (1H, с), 5,58 (1H, ушир. с), 5,51 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,26 (1H, д, J=13,7 Гц), 4,48 (2H, т, J=7,8 Гц), 4,44 (2H, т, J=7,8 Гц), 4,36-4,18 (3H, м), 4,13 (1H, квинт., J=7,2 Гц), 4,08 (1H, дд, J=12,7, 6,0 Гц), 4,01 (1H, дд, J=8,6, 5,6 Гц), 3,94 (1H, дд, J=8,6, 5,6 Гц), 3,30 (1H, дд, J=6,7, 2,6 Гц), 3,21 (1H, дкв., J=8,9, 7,4 Гц), 1,37 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,23 (3H, дд, J=7,2, 1,2 Гц).

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(бензолсульфониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(бензолсульфониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (1,13 г, 1,65 ммоль) (полученный, как описано в примере 70(1)) в смеси тетрагидрофурана (55 мл) и дистиллированной воды (55 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 7,5% палладия на угле (1,13 г) на водяной бане (35° C) в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (139 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → 2% ацетонитрил в дистиллированной воде → 4% ацетонитрил в дистиллированной воде → 8% ацетонитрил в дистиллированной воде → 12% ацетонитрил в дистиллированной воде → 16% ацетонитрил в дистиллированной воде → 20% ацетонитрил в дистиллированной воде), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(бензолсульфониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (627 мг, выход 66%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,71-7,68 (3H, м), 7,61-7,52 (2H, м), 6,52 (1H, с), 4,35-4,18 (5H, м, включая 4,22 (1H, дд, J=9,1, 2,4 Гц)), 4,12 (2H, с), 3,78-3,65 (2H, м), 3,36 (1H, дд, J=6,2, 2,4 Гц), 3,23 (1H, дкв., J=8,8, 7,2 Гц), 1,31 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,21 (3H, д, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 3293,8, 1748,2, 1597,7, 1528,3, 1470,5, 1447,3, 1397,2, 1314,3 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 573 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₂₃H₂₆N₄O₅S₂Na:

Вычислено: 573,0093

Найдено: 573,0911 [M+H]⁺

Пример 71

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(Тиофен-2-карбониламино)метил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(тиофен-2-карбониламино)метил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-{4-[(тиофен-2-карбониламино)метил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (490 мг, 1,52 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 66) в диметилформамиде (15 мл) добавляли гидразинацетат (169 мг, 1,83 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (1,09 г, 1,83 ммоль) в ацетонитриле (30 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (1,06 мл, 0,68 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2,5 часов пока температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(тиофен-2-карбониламино)метил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (997 мг, выход 100%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=8,0 Гц), 8,02 (2H, с), 7,66 (2H, д, J=8,0 Гц), 7,47 (1H, д, J=5,2 Гц), 7,07 (1H, д, J=4,2 Гц), 6,55 (1H, с), 5,50 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,26 (1H, д, J=13,7 Гц), 4,67-4,55 (2H, м), 4,51 (2H, д, J=5,3 Гц), 4,35-4,22 (2H, м), 4,22-4,03 (3H, м), 3,29 (1H, дд, J=6,8, 2,6 Гц), 3,18 (1H, дкв., J=9,0, 7,5 Гц), 1,37 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,25 (3H, д, J=7,3 Гц).

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(тиофен-2-карбониламино)метил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(тиофен-2-карбониламино)метил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (997 мг, 1,52 ммоль) (полученный, как описано в примере 71(1)) в смеси тетрагидрофурана (35 мл) и дистиллированной воды (35 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 7,5% палладия на угле (997 мг) на водяной бане (35° C) в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (128 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → 4% ацетонитрил в дистиллированной воде → 8% ацетонитрил в дистиллированной воде → 12% ацетонитрил в дистиллированной воде → 15% ацетонитрил в дистиллированной воде → 20% ацетонитрил в дистиллированной воде), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(тиофен-2-карбониламино)метил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (287 мг, выход 35%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,73 (2H, д, J=2,7 Гц), 7,19 (1H, т, J=4,4 Гц), 6,59 (1H, д, J=0,7 Гц), 4,49 (2H, т, J=7,5 Гц), 4,43 (2H, с), 4,35-4,27 (1H, м), 4,24 (1H, квинт., J=6,3 Гц), 4,18 (1H, дд, J=8,3, 2,4 Гц), 3,99 (1H, т, J=4,7 Гц), 3,97 (1H, т, J=4,7 Гц), 3,42 (1H, дд, J=6,3, 2,4 Гц), 3,22 (1H, квинт., J=8,3 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,18 (3H, д, J=7,1 Гц).

ИК (KBr): 3324,7, 1749,1, 1599,7, 1530,2, 1469,5, 1418,4, 1396,2 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 521 [M-Na+2H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (ESI⁺) для C₂₂H₂₅N₄O₅S₃:

Вычислено: 521,0942

Найдено: 521,0992 [M-Na+2H]⁺

Пример 72

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(фуран-2-карбониламино)метил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(фуран-2-карбониламино)метил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-{4-[(фуран-2-карбониламино)метил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (341 мг, 1,12 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 67) в диметилформамиде (10 мл) добавляли гидразинацетат (123 мг, 1,34 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (797 мг, 1,34 ммоль) в ацетонитриле (20 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (0,78 мл, 4,48 ммоль). Смесь перемешивали в течение 3 часов пока температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(фуран-2-карбониламино)метил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (641 мг, выход 89%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=7,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=7,8 Гц), 7,45 (1H, с), 7,13 (1H, д, J=3,5 Гц), 6,53 (1H, с), 6,49 (1H, д, J=5,1 Гц), 5,48 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,26 (1H, д, J=13,7 Гц), 4,60-4,40 (4H, м, включая 4,51 (2H, д, J=5,6 Гц)), 4,35-4,20 (2H, м), 4,20-4,00 (3H, м), 3,29 (1H, дд, J=6,9, 2,5 Гц), 3,19 (1H, дкв., J=9,3, 7,3 Гц), 1,37 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,26 (3H, д, J=7,3 Гц).

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(фуран-2-карбониламино)метил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(фуран-2-карбониламино)метил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (640 мг, 1,00 ммоль) (полученный, как описано в примере 72(1)) в смеси тетрагидрофурана (32 мл) и дистиллированной воды (32 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 7,5% палладия на угле (640 мг) на водяной бане (35° C) в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (84 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → 2% ацетонитрил в дистиллированной воде → 4% ацетонитрил в дистиллированной воде → 6% ацетонитрил в дистиллированной воде → 8% ацетонитрил в дистиллированной воде → 10% ацетонитрил в дистиллированной воде → 15% ацетонитрил в дистиллированной воде), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(фуран-2-карбониламино)метил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (218 мг, выход 41%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,69 (1H, дд, J=1,7, 0,8 Гц), 7,19 (1H, дд, J=3,6, 0,7 Гц), 6,64 (1H, дд, J=3,6, 1,7 Гц), 4,51 (2H, т, J=8,2 Гц), 4,44 (2H, с), 4,38-4,28 (1H, м), 4,25 (1H, квинт., J=6,3 Гц), 4,19 (1H, дд, J=8,9, 2,2 Гц), 4,02 (1H, дд, J=5,0, 3,2 Гц), 4,00 (1H, дд, J=5,0, 2,9 Гц), 3,43 (1H, дд, J=6,3, 2,5 Гц), 3,24 (1H, дкв., J=8,9, 7,1 Гц),1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,19 (3H, д, J=7,1 Гц).

ИК (KBr): 3367,1, 1749,1, 1653,7, 1594,8, 1524,5, 1472,4, 1395,2 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 505 [M-Na+2H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (ESI⁺) для C₂₂H₂₅N₄O₆S₂:

Вычислено: 505,1216

Найдено: 505,1208 [M-Na+2H]⁺

Пример 73

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-фталимидометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-фталимидометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-фталимидометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (599 мг, 1,60 ммоль) полученного, как описано в ссылочном примере 68, в диметилформамиде (18 мл) добавляли гидразинацетат (177 мг, 1,92 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (1,14 г, 1,92 ммоль) в ацетонитриле (36 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (1,11 мл, 6,40 ммоль). Смесь перемешивали в течение 30 минут пока температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5M соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-фталимидометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (640 мг, выход 59%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,88 (2H, дд, J=5,5, 3,1 Гц), 7,73 (2H, дд, J=5,5, 3,1 Гц), 7,65 (2H, д, J=8,7 Гц), 6,41 (1H, с), 5,49 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,7 Гц), 4,80 (2H, с), 4,46 (1H, т, J=8,1 Гц), 4,43 (1H, т, J=8,1 Гц), 4,32-4,18 (3H, м, включая 4,24 (1H, дд, J=9,2, 2,4 Гц)), 4,02 (1H, дд, J=5,5, 2,8 Гц), 4,00 (1H, дд, J=5,5, 2,8 Гц), 3,26 (1H, дд, J=6,9, 2,5 Гц), 3,19 (1H, дкв., J=9,2, 7,3 Гц), 1,38 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,25 (3H, дд, J=7,3, 2,1 Гц).

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-фталимидометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-фталимидометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (640 мг, 0,95 ммоль) (полученный, как описано в примере 73(1)) в смеси тетрагидрофурана (32 мл) и дистиллированной воды (32 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 7,5% палладия на угле (640 мг) на водяной бане (35° C) в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (80 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → 2% ацетонитрил в дистиллированной воде → 4% ацетонитрил в дистиллированной воде → 6% ацетонитрил в дистиллированной воде → 8% ацетонитрил в дистиллированной воде → 10% ацетонитрил в дистиллированной воде → 15% ацетонитрил в дистиллированной воде → 20% ацетонитрил в дистиллированной воде), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-фталимидометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (202 мг, выход 38%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,90-7,78 (4H, м), 6,56 (1H, д, J=2,7 Гц), 4,70 (2H, с), 4,43 (1H, т, J=7,9 Гц), 4,42 (1H, т, J=7,9 Гц), 4,31-4,19 (2H, м, включая 4,24 (1H, квинт., J=6,3 Гц)), 4,17 (1H, дд, J=8,7, 2,0 Гц), 3,94 (1H, т, J=7,9 Гц), 3,92 (1H, т, J=7,9 Гц), 3,18 (1H, дкв., J=8,7, 7,2 Гц), 1,29 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,15 (3H, д, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 3409,5, 1768,4, 1750,1, 1717,3, 1601,6, 1528,3, 1425,1, 1393,3, 1313,3 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 563 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₂₅H₂₃N₄O₆S₂Na₂:

Вычислено: 585,0864

Найдено: 585,0865 [M+Na]⁺

Пример 74

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-сукцинимидометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-сукцинимидометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-сукцинимидометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (238 мг, 0,73 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 69) в диметилформамиде (7 мл) добавляли гидразинацетат (81 мг, 0,88 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (523 мг, 0,88 ммоль) в ацетонитриле (14 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (0,51 мл, 2,92 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 часов пока температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат → этилацетат:метанол (20:1)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-сукцинимидометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (211 мг, выход 46%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,7 Гц), 6,42 (1H, с), 5,50 (1H, д, J=13,8 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,8 Гц), 4,61 (2H, с), 4,46 (1H, т, J=8,0 Гц), 4,45 (1H, т, J=8,0 Гц), 4,32-4,18 (3H, м, включая 4,25 (1H, дд, J=9,1, 2,3 Гц)), 4,02 (1H, т, J=4,8 Гц), 4,00 (1H, дд, J=4,8, 3,7 Гц), 3,28 (1H, дд, J=6,9, 2,5 Гц), 3,20 (1H, дкв., J=9,1, 7,3 Гц), 2,76 (4H, с), 1,38 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,27 (3H, д, J=7,3 Гц).

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-сукцинимидометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-сукцинимидометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (211 мг, 0,34 ммоль) (полученный, как описано в примере 74(1)) в смеси тетрагидрофурана (10 мл) и дистиллированной воды (10 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 7,5% палладия на угле (211 мг) на водяной бане (35° C) в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (29 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → 2% ацетонитрил в дистиллированной воде → 4% ацетонитрил в дистиллированной воде), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-сукцинимидометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (115 мг, выход 66%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 6,59 (1H, с), 4,57 (2H, с), 4,50 (2H, т, J=8,1 Гц), 4,38-4,29 (1H, м), 4,25 (1H, квинт., J=6,3 Гц), 4,20 (1H, дд, J=8,7, 2,3 Гц), 4,01 (1H, т, J=4,2 Гц), 3,99 (1H, т, J=4,2 Гц), 3,43 (1H, дд, J=6,3, 2,4 Гц), 3,24 (1H, дкв., J=8,7, 7,4 Гц), 2,48 (4H, с), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,19 (3H, д, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 3381,6, 1749,1, 1794,8, 1601,6, 1526,4, 1470,5, 1424,2, 1399,1, 1312,3, 1295,0, 1168,7 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 515 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₂₁H₂₄N₄O₆S₂Na:

Вычислено: 515,1035

Найдено: 515,1034 [M+H]⁺

Пример 75

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-азетидинокарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-азетидинокарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-азетидинокарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (330 мг, 1,17 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 71) в диметилформамиде (17 мл) добавляли гидразинацетат (130 мг, 1,41 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (696 мг, 1,17 ммоль) в ацетонитриле (35 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (815 мкл, 4,68 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 10% раствором хлорида натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат:метанол (9:1)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-азетидинокарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (605 мг, выход 89%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,71 (1H, с), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 5,51 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,9 Гц), 4,54-4,47 (4H, м), 4,29-4,12 (2H, м), 4,26 (1H, дд, J=2,2, 9,5 Гц), 4,09 (2H, т, J=8,8 Гц), 4,07 (2H, т, J=8,8 Гц), 3,29 (1H, дд, J=2,2, 6,6 Гц), 3,19 (1H, дкв., J=9,5, 7,3 Гц), 2,37-2,27 (2H, м), 1,38 (3H, д, J=5,9 Гц), 1,26 (3H, д, J=7,3 Гц).

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-азетидинокарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-азетидинокарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (600 мг, 1,03 ммоль) (полученный, как описано в примере 75(1)) в смеси тетрагидрофурана (30 мл) и дистиллированной воды (30 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (600 мг) при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (86 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → дистиллированная вода:ацетонитрил (9:1)), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-азетидинокарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (278 мг, выход 58%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O, TSP): δ (м.д.) 7,80 (1H, с), 4,59 (2H, т, J=8,3 Гц), 4,45 (2H, т, J=7,8 Гц), 4,35-4,27 (1H, м), 4,25 (1H, дкв., J=6,2, 6,4 Гц), 4,20 (1H, дд, J=2,4, 9,1 Гц), 4,16 (2H, т, J=7,8 Гц), 4,08 (2H, дт, J=9,2, 4,6 Гц), 3,43 (1H, дд, J=2,4, 6,2 Гц), 3,24 (1H, дкв., J=9,1, 7,2 Гц), 2,39 (1H, квинтет, J=7,8 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,19 (3H, д, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 1750, 1619, 1468, 1443, 1383 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 493 [M+Na]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (ESI⁺):для C₂₀H₂₃N₄O₆SNa₂:

Вычислено: 493,1133

Найдено: 493,1167 [M+Na]⁺

Элементный анализ: C₂₀H₂₃N₄O₆SNa· H₂O:

Вычислено: C 49,18%, H 5,16%, N 11,47%, S 6,56%

Найдено: C 49,04%, H 5,46%, N 11,57%, S 6,29%

Пример 76

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (260 мг, 0,835 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 72) в диметилформамиде (13 мл) добавляли гидразинацетат (92 мг, 1,00 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (496 мг, 0,835 ммоль) в ацетонитриле (25 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (582 мкл, 3,34 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 10% раствором хлорида натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат:метанол (9:1)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (552 мг, выход 100%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,73 (1H, с), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 5,51 (1H, д, J=13,2 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,2 Гц), 4,52 (2H, кв., J=8,1 Гц), 4,31-4,20 (3H, м), 4,13-4,06 (2H, м), 3,76-3,65 (8H, ушир. с), 3,29 (1H, дд, J2,5,7,0 Гц), 3,19 (1H, дкв., J=9,5, 7,3 Гц), 1,38 (3H, д, J=5,9 Гц), 1,26 (3H, д, J=7,3 Гц).

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-[1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (550 мг, 0,835 ммоль) (полученный, как описано в примере 76(1)) в смеси тетрагидрофурана (28 мл) и дистиллированной воды (28 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (550 мг) при комнатной температуре в течение 2,5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (70 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → дистиллированная вода:ацетонитрил (9:1)), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-[1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (193 мг, выход 46%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O, TSP): δ (м.д.) 7,77 (1H, с), 4,60 (2H, т, J=8,2 Гц), 4,36-4,28 (1H, м), 4,25 (1H, дкв., J=6,1, 6,3 Гц), 4,21 (1H, дд, J=2,2, 9,0 Гц), 4,09 (1H, дт, J=8,9, 4,5 Гц), 3,90-3,66 (8H, м), 3,43 (1H, дд, J=2,2, 6,1 Гц), 3,25 (1H, дкв., J=9,0, 7,2 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,19 (3H, д, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 1750, 1618, 1459, 1443, 1385, 1304 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 523 [M+Na]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (ESI⁺) для C₂₁H₂₅N₄O₇SNa₂:

Вычислено: 523,1240

Найдено: 523,1238 [M+Na]⁺

Элементный анализ: C₂₁H₂₅N₄O₇SNa/H₂O:

Вычислено: C 48,64%, H 5,25%, N 10,81%, S 6,18%

Найдено: C 48,45%, H 5,41%, N 10,45%, S 5,55%

Пример 77

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (330 мг, 1,06 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 73) в диметилформамиде (17 мл) добавляли гидразинацетат (117 мг, 1,27 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (630 мг, 1,06 ммоль) в ацетонитриле (32 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (739 мкл, 4,24 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 10% раствором хлорида натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат:метанол (95:5 → 9:1)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (550 мг, выход 85%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,74 (1H, с), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 5,55 (1H, д, J=13,2 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,2 Гц), 4,71-4,63 (1H, м), 4,51 (2H, кв., J=8,1 Гц), 4,38-4,20 (6H, м), 4,10-4,05 (2H, м), 4,04-3,98 (1H, м), 3,32 (3H, с), 3,29 (1H, дд, J=2,2, 6,6 Гц), 3,20 (1H, дкв., J=9,2, 7,3 Гц), 1,38 (3H, д, J=5,9 Гц), 1,26 (3H, д, J=7,3 Гц).

(2) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (550 мг, 0,896 ммоль) (полученный, как описано в примере 77(1)) в смеси тетрагидрофурана (28 мл) и дистиллированной воды (28 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (550 мг) при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (75 мг), уксусную кислоту и дистиллированную воду. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → дистиллированная вода:ацетонитрил (92:8)), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (276 мг, выход 62%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,84 (1H, с), 4,66 (1H, дд, J=6,4, 10,3 Гц), 4,60 (2H, т, J=8,3 Гц), 4,46-4,30 (4H, м), 4,25 (1H, дкв., J=6,2, 6,4 Гц), 4,20 (1H, дд, J=2,4, 9,0 Гц), 4,09 (2H, квинтет, J=4,5 Гц), 4,04-3,98 (1H, м), 3,43 (1H, дд, J=2,4, 6,2 Гц), 3,37 (3H, с), 3,25 (1H, дкв., J=9,0, 7,2 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,19 (3H, д, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 1750, 1622, 1457, 1385 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 523 [M+Na]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (ESI⁺) для C₂₁H₂₅N₄O₇SNa₂:

Вычислено: 523,1239

Найдено: 523,1227 [M+Na]⁺

Элементный анализ: C₂₁H₂₅N₄O₇SNa· 4/3H₂O:

Вычислено: C 48,09%, H 5,32%, N 10,68%, S 6,11%

Найдено: C 48,07%, H 5,61%, N 10,78%, S 6,03%

Пример 78

Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-гидроксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[3-(трет-бутилдифенилсилилокси)азетидин-1-илкарбонил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-{4-[3-(трет-бутилдифенилсилилокси)азетидин-1-илкарбонил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидина (860 мг, 1,61 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 74) в диметилформамиде (43 мл) добавляли гидразинацетат (178 мг, 1,93 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (957 мг, 1,61 ммоль) в ацетонитриле (48 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (1,12 мл, 6,44 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 10% раствором хлорида натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат → этилацетат:метанол (95:5)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[3-(трет-бутилдифенилсилилокси)азетидин-1-илкарбонил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (1,20 г,выход 89%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,69 (1H, с), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,64-7,59 (4H, м), 7,47-7,36 (6H, м), 5,51 (1H, д, J=13,5 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,5 Гц), 4,65-4,59 (1H, м), 4,69-4,50 (1H, м), 4,50 (2H, кв., J=8,1 Гц), 4,39-4,32 (1H, м), 4,30-4,20 (2H, м), 4,26 (1H, дд, J=2,9, 9,5 Гц), 4,18-3,99 (4H, м), 3,29 (1H, дд, J=2,9, 7,3 Гц), 3,20 (1H, дкв., J=9,5, 7,3 Гц), 1,38 (3H, д, J=6,5 Гц), 1,27 (3H, д, J=7,3 Гц), 1,06 (9H, с).

(2) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-гидроксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

п-Нитробензил(1R,5S,6S)-2-(1-{4-[3-(трет-бутилдифенилсилилокси)азетидин-1-илкарбонил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (1,20 г, 1,43 ммоль) (полученный, как описано в примере 78(1)) в тетрагидрофуране (60 мл) добавляли в уксусную кислоту (240 мкл, 4,30 ммоль) и 1M раствор фторида тетрабутиламмония в тетрагидрофуране (4,30 мл, 4,30 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 дней. После контроля завершения реакции, в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор хлорида натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат:метанол(95:5 → 9:1)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-гидроксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (325 мг, выход 38%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,74 (1H, с), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 5,51 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,7 Гц), 4,80-4,68 (2H, м), 4,50 (2H, кв., J=8,0 Гц), 4,43-4,29 (2H, м), 4,29-4,20 (3H, м), 4,13-4,05 (2H, м), 4,02-3,95 (1H, м), 3,29 (1H, дд, J=2,7, 6,9 Гц), 3,20 (1H, дкв., J=9,3, 7,3 Гц), 1,38 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,26 (3H, д, J=7,3 Гц).

(3) Натриевая соль (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-гидроксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-гидроксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (320 мг, 0,534 ммоль) (полученный, как описано в примере 78(2)) в смеси тетрагидрофурана (16 мл) и дистиллированной воды (16 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (320 мг) при комнатной температуре в течение 5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли гидрокарбонат натрия (45 мг), этилацетат и дистиллированную воду. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → дистиллированная вода:ацетонитрил (9:1)), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения натриевой соли (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-гидроксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (144 мг, выход 56%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O, TSP): δ (м.д.) 7,84 (1H, с), 4,75-4,66 (2H, м), 4,60 (2H, т, J=8,2 Гц), 4,44-4,38 (1H, м), 4,35-4,23 (3H, м), 4,20 (1H, дд, J=2,4, 9,0 Гц), 4,09 (2H, дт, J=8,9, 4,5 Гц), 3,98-3,93 (1H, м), 3,43 (1H, дд, J=2,4, 6,2 Гц), 3,24 (1H, дкв., J=9,0, 7,2 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,19 (3H, д, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 1750, 1621, 1470, 1385, 1294, 1277 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 509 [M+Na]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (ESI⁺):

Вычислено: 509,1083

Найдено: 509,1102 [M+Na]⁺

Элементный анализ:

Вычислено: C 49,38%, H 4,77%, N 11,52%, S 6,59%

Найдено: C 46,25%, H 6,23%, N 11,07%, S 5,90%

Пример 79

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-аминоазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-{4-[3-(п-нитробензилоксикарбониламино)азетидин-1-илкарбонил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-{4-[3-(п-нитробензилоксикарбониламино)азетидин-1-илкарбонил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидина (190 мг, 0,383 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 75) в диметилформамиде (10 мл) добавляли гидразинацетат (42 мг, 0,460 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (228 мг, 0,383 ммоль) в ацетонитриле (11 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (268 мкл, 1,53 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 10% раствором хлорида натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат:метанол (93:7)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-{4-[3-(п-нитробензилоксикарбониламино)азетидин-1-илкарбонил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (257 мг, выход 86%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (4H, д, J=8,8 Гц), 7,75 (1H, с), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,51 (2H, д, J=8,8 Гц), 5,51 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,34-5,31 (1H, м), 5,25 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,21 (2H, с), 4,87-4,82 (1H, м), 4,60-4,42 (2H, м), 4,49 (2H, кв., J=8,8 Гц), 4,38-4,30 (1H, м), 4,28-4,20 (3H, м), 4,06 (2H, дт, J=8,8, 4,9 Гц), 4,00-3,93 (1H, м), 3,29 (1H, дд, J=2,9, 6,8 Гц), 3,18 (1H, дкв., J=9,0, 6,8 Гц), 1,38 (3H, д, J=5,9 Гц), 1,26 (3H, д, J=6,8 Гц).

(2) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-аминоазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-{4-[3-(п-нитробензилоксикарбониламино)азетидин-1-илкарбонил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (250 мг, 0,321 ммоль) (полученный, как описано в примере 79(1)) в смеси тетрагидрофурана (13 мл) и дистиллированной воды (13 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (250 мг) при комнатной температуре в течение 3,5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли этилацетат и дистиллированную воду. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → дистиллированная вода:ацетонитрил (82:18)), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-аминоазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (68 мг, выход 46%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,88 (1H, с), 4,60 (2H, т, J=8,2 Гц), 4,57-4,49 (2H, м), 4,35-4,16 (6H, м), 4,08 (2H, дт, J=8,6, 4,5 Гц), 3,44 (1H, дд, J=2,5, 6,2 Гц), 3,24 (1H, дкв., J=9,0, 7,2 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,19 (3H, д, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 1754, 1624, 1457, 1380 см^-1

Масс-спектр (ESI⁺): m/z: 486 [M+Na]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (ESI⁺) для C₂₀H₂₆N₅O₆S:

Вычислено: 464,1603

Найдено: 464,1609 [M+H]⁺

Элементный анализ: C₂₀H₂₅N₅O₆S· 10/3H₂O:

Вычислено: C 45,85%, H 5,69%, N 13,62%, S 6,18%

Найдено: C 45,88%, H 6,10%, N 13,38%, S 6,12%

Пример 80

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3S)-пирролидин-3-илкарбамоил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидина (530 мг, 1,08 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 76) в диметилформамиде (27 мл) добавляли гидразинацетат (120 мг, 1,30 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (642 мг, 1,08 ммоль) в ацетонитриле (32 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (753 мкл, 4,32 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 10% раствором хлорида натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат → этилацетат:метанол (95:5)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (652 мг, выход 76%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (4H, д, J=8,8 Гц), 7,77 (1H, с), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,53 (2H, т, J=8,8 Гц), 6,82-6,78 (1H, м), 5,51 (1H, д, J=13,6 Гц), 5,25 (1H, д, J=13,6 Гц), 5,30-5,18 (2H, м), 4,66-4,58 (1H, м), 4,57-4,46 (2H, м), 4,11-4,20 (2H, м), 4,26 (1H, дд, J=2,2, 8,8 Гц), 4,14-4,04 (2H, м), 3,82-3,74 (1H, м), 3,64-3,55 (2H, м), 3,46-3,40 (1H, м), 3,29 (1H, дд, J=2,2, 6,6 Гц), 3,20 (1H, дкв., J=8,8, 7,2 Гц), 2,30-2,20 (1H, м), 2,10-1,92 (1H, м), 1,38 (3H, д, J=6,6 Гц), 1,27 (3H, д, J=7,2 Гц).

(2) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3S)-пирролидин-3-илкарбамоил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (650 мг, 0,821 ммоль) (полученный, как описано в примере 80(1)) в смеси тетрагидрофурана (33 мл) и дистиллированной воды (33 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (650 мг) при комнатной температуре в течение 4,5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли этилацетат и дистиллированную воду. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → дистиллированная вода:ацетонитрил (76:24)), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3S)-пирролидин-3-илкарбамоил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (129 мг, выход 33%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,94 (1H, с), 4,68-4,60 (1H, м), 4,60 (2H, т, J=8,2 Гц), 4,35-4,28 (1H, м), 4,25 (1H, дкв., J=6,2, 6,4 Гц), 4,19 (1H, дд, J=2,4, 9,1 Гц), 4,09 (2H, дт, J=8,9, 4,4 Гц), 3,63 (1H, дд, J=7,0, 12,6 Гц), 3,58 (1H, дт, J=12,0, 7,6 Гц), 3,50-2,98 (3H, м), 3,24 (1H, дкв., J=9,1, 7,2 Гц), 2,49-2,39 (1H, м), 2,22-2,13 (1H, м), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,19 (3H, д, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 1755, 1626, 1543, 1386 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 478 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₂₁H₂₈N₅O₆S:

Вычислено: 478,1761

Найдено: 478,1768 [M+H]⁺

Элементный анализ: C₂₁H₂₇N₅O₆S· 3H₂O:

Вычислено: C 47,45%, H 6,26%, N 13,17%, S 6,06%

Найдено: C 47,33%, H 5,52%, N 12,9 %, S 5,97%

Пример 81

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3R)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

(1) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3R)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-[4-((3R)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидина (280 мг, 0,572 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 77) в диметилформамиде (14 мл) добавляли гидразинацетат (63 мг, 0,686 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в полученную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (340 мг, 0,572 ммоль) в ацетонитриле (17 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, а затем добавляли диизопропилэтиламин (399 мкл, 2,29 ммоль). Смесь перемешивали в течение 4,5 часов пока температура постепенно поднималась до комнатной температуры. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и этилацетатный слой разделяли, промывали 10% раствором хлорида натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент: этилацетат → этилацетат:метанол (95:5)) с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-1-[4-((3R)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (323 мг, выход 73%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 8,22 (2H, дд, J=8,8, 12,7 Гц), 7,77 (1H, с), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,52 (2H, дд, J=8,8, 12,7 Гц), 6,82-6,78 (1H, бт, J=6,8 Гц), 5,51 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,23 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,25-5,19 (2H, м), 4,66-4,58 (1H, м), 4,56-4,49 (2H, м), 4,30-4,21 (3H, м), 4,13-4,04 (2H, м), 3,80-3,74 (1H, м), 3,64-3,53 (2H, м), 3,44-3,39 (1H, м), 3,29 (1H, дд, J=2,9, 6,8 Гц), 3,20 (1H, дкв., J=7,8,7,8 Гц), 2,30-2,20 (1H, м), 2,10-1,94 (1H, м), 1,38 (3H, д, J=5,9 Гц), 1,27 (3H, д, J=7,8 Гц).

(2) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3R)-пирролидин-3-илкарбамоил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3R)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат (320 мг, 0,404 ммоль) (полученный, как описано в примере 81(1)) в смеси тетрагидрофурана (16 мл) и дистиллированной воды (16 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (320 мг) при комнатной температуре в течение 4 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и в фильтрат добавляли этилацетат и дистиллированную воду. Полученную смесь встряхивали в разделительной воронке и водный слой разделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке Cosmosil (элюент: дистиллированная вода → дистиллированная вода:ацетонитрил (79:21)), и элюат лиофилизовали с получением желаемого соединения (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3R)-пирролидин-3-илкарбамоил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (88 мг, выход 46%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O): δ (м.д.) 7,94 (1H, с), 4,67-4,60 (1H, м), 4,60 (2H, т, J=8,3 Гц), 4,35-4,28 (1H, м), 4,25 (1H, дкв., J=6,2, 6,4 Гц), 4,20 (1H, дд, J=2,4, 9,1 Гц), 4,08 (2H, дт, J=8,8, 4,5 Гц), 3,63 (1H, дд, J=7,0, 12,6 Гц), 3,57 (1H, дт, J=12,0, 7,6 Гц), 3,49-3,37 (3H, м), 3,24 (1H, дкв., J=9,1, 7,2 Гц), 2,49-2,38 (1H, м), 2,22-2,13 (1H,m), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,19 (3H, д, J=7,2 Гц).

ИК (KBr): 1758, 1625, 1543, 1385 см^-1

Масс-спектр (ESI⁺): m/z: 478 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (ESI⁺) для C₂₁H₂₈N₅O₆S:

Вычислено: 478,1760

Найдено: 478,1739 [M+H]⁺

Элементный анализ: C₂₁H₂₇N₅O₆S· 3H₂O:

Вычислено: C 47,45%, H 6,26%, N 13,17%, S 6,03%

Найдено: C 47,30%, H 5,88%, N 13,14%, S 6,01%

Ссылочный пример 1

3-Ацетилтио-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

(1) Этиловый эфир (3-гидроксиазетидин-1-карботиоил)карбаминовой кислоты

Раствор N-бензгидрил-3-гидроксиазетидина (20 г, 83,6 ммоль) в метаноле (600 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (20 г) на водяной бане (50° C) в атмосфере водорода под давлением 1 атмосфера в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали для удаления катализатора и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток распределяли между этилацетатом и дистиллированной водой. Органический слой разделяли и затем экстрагировали дистиллированной водой. Водные слои концентрировали при пониженном давлении и сушили в вакууме с получением продукта в виде коричневого масла. В раствор продукта в смеси тетрагидрофурана (180 мл) и дистиллированной воды (60 мл) добавляли этоксикарбонилизотиоцианат (19,7 мл, 167 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси в течение 10 минут на ледяной бане, полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1) → этилацетат, с получением этилового эфира (3-гидроксиазетидин-1-карботиоил)карбаминовой кислоты (7,4 г, выход 43%) в виде желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,63 (1H, ушир. с), 4,80-4,50 (3H, м), 4,40-4,00 (4H, м, включая 2H, кв., при 4,18, J=7,3 Гц), 2,28 (1H, ушир. с), 1,29 (3H, т, 7,3 Гц).

(2) 1-(4-Этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидин

В раствор этилового эфира (3-гидроксиазетидин-1-карботиоил)карбаминовой кислоты (14,4 г, 70,5 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 1(1)) в смеси этанола (72 мл) и дистиллированной воды (72 мл) добавляли гидроксид натрия (14,1 г, 353 ммоль). Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 16 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. В реакционную смесь добавляли 4н хлористоводородный газ в диоксане (88 мл) на ледяной бане, а затем добавляли этил 2-бромпируват (17,7 мл, 141 ммоль) и триэтиламин (19,8 мл, 141 ммоль). Полученную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:ацетонитрил (3:1 → 1:1), с получением 1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (8,5 г, выход 53%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,46 (1H, с), 4,88-4,78 (1H, м), 4,42-4,32 (4H, м), 4,02 (2H, ддд, J=10,3, 5,6, 1,5 Гц), 2,05 (1H, ушир. с), 1,37 (3H, т, 7,3 Гц).

(3) 1-(4-Этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (676 мг, 2,96 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 1(2)) в метиленхлориде (20,5 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,28 мл, 3,63 ммоль) и триэтиламин (0,495 мл, 3,56 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этанол на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:2), с получением 1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (748 мг, выход 82%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,52 (1H, с), 5,50-5,30 (1H, м), 4,51 (2H, дд, J=9,9, 6,7 Гц), 4,37 (2H, кв., J=7,1 Гц), 4,32 (2H, дд, J=10,1, 3,7 Гц), 3,09 (3H, с), 1,37 (3H, т, J=7,1 Гц).

(4) 3-Ацетилтио-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (742 мг, 2,42 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 1(3)) в диметилформамиде (37 мл) добавляли тиоацетат калия (1,11 г, 9,72 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 6 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1), с получением 3-ацетилтио-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (494 мг, выход 71%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,49 (1H, с), 4,58 (2H, т, J=8,3 Гц), 4,50-4,30 (3H, м, включая 2H, кв., при 4,36, J=7,2 Гц), 4,03 (2H, дд, J=8,3, 5,7 Гц), 2,36 (3H, с), 1,37 (3H, т, J=7,2 Гц).

Масс-спектр (FAB⁺): 287 [M+H]⁺

Ссылочный пример 2

3-Ацетилтио-1-(4-п-нитробензилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (8,5 г, 37,2 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 1(2)) в диметилформамиде (255 мл) добавляли трет-бутилдифенилсилилхлорид (19,4 мл, 74,5 ммоль) и имидазол (5,07 г, 74,5 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2,5 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этанол (2,59 мл) на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (6:1 → 2:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (14,85 г, выход 86%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,64-7,58 (4H, м), 7,50-7,36 (6H, м), 7,43 (1H, с), 4,79-4,50 (1H, м), 4,35 (2H, кв., J=7,3 Гц), 4,13 (2H, дд, J=9,0, 6,6 Гц), 4,06 (2H. дд, J=9,0, 5,1 Гц), 1,36 (3H, т, J=7,1 Гц), 1,06 (9H, с).

(2) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-гидроксиметил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

Раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (5,0 г, 10,7 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(1)) в безводном тетрагидрофуране (100 мл) по каплям добавляли в раствор литий алюминий гидрида (1,22 г, 32,1 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (250 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1,5 часа при тех же условиях. После контроля завершения реакции в реакционную смесь медленно добавляли декагидрат сульфата магния на ледяной бане. После окончания пенообразования, полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. В реакционную смесь медленно добавляли этилацетат. Полученную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (3:1 → 1:2), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-гидроксиметил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (3,88 г, выход 86%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,66-7,58 (4H, м), 7,50-7,38 (6H, м), 6,40 (1H, с), 4,78-4,70 (1H, м), 4,53 (2H, с), 4,10 (2H, дд, J=9,2, 6,6 Гц), 4,01 (2H, ддд, J=9,2, 5,1, 1,3 Гц), 2,24 (1H, ушир. с), 1,06 (9H, с).

(3) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-формил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-гидроксиметил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (3,88 г, 9,15 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(2)) в безводном метиленхлориде (194 мл) добавляли активированный диоксид магния (19,4 г), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 7 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (3:1 → 1:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-формил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (3,54 г, выход 92%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 9,69 (1H, с), 7,64-7,59-(4H, м), 7,50-7,36 (7H, м), 4,80-4,72 (1H, м), 4,16 (2H, дд, J=9,5, 6,6 Гц), 4,08 (2H, ддд, J=9,5, 5,1, 1,5 Гц), 1,06 (9H, с).

(4) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-формил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (3,5 г, 8,28 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(3)) в безводном метиленхлориде (21 мл) добавляли трет-бутанол (105 мл) и раствор 2M 2-метил-2-бутена в тетрагидрофуране (41,4 мл), затем по каплям добавляли раствор хлорита натрия (1,88 г, 16,6 ммоль) и дигидрофосфата натрия (1,99 г, 16,6 ммоль) в воде (21 мл) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 1M хлористоводородную кислоту до pH от 2 до 3, полученную смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой разделяли, промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → 5% метанол в этилацетате, с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (2,34 г, выход 67%) в виде коричневого сиропа.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,62-7,56 (4H, м), 7,50 (1H, с), 7,49-7,36 (6H, м), 4,81-4,72 (1H, м), 4,16-4,08 (2H, м), 4,04 (2H, дд, J=9,5, 5,1 Гц), 2,00 (1H, ушир. с), 1,07 (9H, с).

(5) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-п-нитробензилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (224,8 мг, 0,51 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(4)) в безводном метиленхлориде (11,2 мл) добавляли оксалилхлорид (0,067 мл, 0,76 ммоль) и каталитическое количество диметилформамида (0,022 мл) на ледяной бане. Смесь перемешивали в течение 2 часов и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток сушили в вакууме с получением продукта. В раствор продукта в безводном дихлорметане (11,2 мл) добавляли п-нитробензиловый спирт (157 мг, 1,0 ммоль) и триэтиламин (0,14 мл, 1,0 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (3:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-п-нитробензилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (93 мг, выход 32%) в виде светло-желтого сиропа.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,64-7,56 (4H, м), 7,50 (1H, с), 7,48-7,36 (6H, м), 5,42 (2H, с), 4,79-4,72 (1H, м), 4,16 (2H, дд, J=8,8, 6,8 Гц), 4,07 (2H, дд, J=8,8, 4,8 Гц), 1,06 (9H, с).

(6) 1-(4-п-Нитробензилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-п-нитробензилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (93 мг, 0,16 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(5)) в безводном тетрагидрофуране (4,7 мл) добавляли уксусную кислоту (0,028 мл, 0,49 ммоль) и раствор 1M фторида тетрабутиламмония в тетрагидрофуране (0,48 мл, 0,48 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:ацетонитрил (2:1), с получением 1-(4-п-нитробензилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (42,4 мг, выход 81%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,59 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,53 (1H, с), 5,40 (2H, с), 4,90-4,78 (1H, м), 4,39-(2H, дд, J=9,7, 7,2 Гц), 4,03 (2H, дд, J=9,7, 5,1 Гц), 2,28 (1H, д, J=6,2 Гц).

(7) 1-(4-п-Нитробензилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-(4-п-нитробензилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (648 мг, 1,93 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(6)) в метиленхлориде (20 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,31 мл, 3,95 ммоль) и триэтиламин (0,55 мл, 3,95 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток перекристаллизовывали из смеси н-гексана и этилацетата с получением 1-(4-п-нитробензилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (789 мг, выход 99%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,59 (1H, с), 7,59 (2H, д, J=8,7 Гц), 5,50-5,40 (3H, м, включая 1H, s при 5,44), 4,52 (2H, дд, J=10,3, 6,6 Гц), 4,32 (2H, дд, J=10,3, 4,1 Гц), 3,10 (3H, с).

(8) 3-Ацетилтио-1-(4-п-нитробензилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 1-(4-п-нитробензилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (776 мг, 1,88 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(7)) в диметилформамиде (35 мл) добавляли тиоацетат калия (860 мг, 7,53 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (90° C) в течение 4 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1), с получением 3-ацетилтио-1-(4-п-нитрoбензилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (73,8 мг, выход 11%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,59 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,55 (1H, с), 5,43 (2H, с), 4,59 (2H, т, J=8,5 Гц), 4,50-4,40 (1H, м), 4,04 (2H, дд, J=8,5, 5,7 Гц), 2,36 (3H, с).

Ссылочный пример 3

3-Ацетилтио-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (5,85 г, 12,5 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(1)) в бензоле (290 мл) добавляли раствор 0,67M хлорида аммония-триметилалюминия в бензоле (56,4 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь перемешивали на водяной бане (40° C) в течение 17 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (100 мл) и этилацетат (50 мл) на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После добавления этилацетата, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:ацетонитрил (3:1 → 1:2), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (4,97 г, выход 91%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,66-7,58 (4H, м), 7,50-7,38 (7H, м), 6,99 (1H, ушир.с), 5,48 (1H, ушир. с), 4,80-4,72 (1H, м), 4,10 (2H, дд, J=8,8, 6,6 Гц), 4,01 (2H, дд, J=8,8, 5,1 Гц), 1,07 (9H, с).

(2) 1-(4-Карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (6,7 г, 15,3 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 3(1)) в безводном тетрагидрофуране (200 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (18,4 мл) на ледяной бане. Смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → 10% метанол в этилацетате, с получением 1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (2,78 г, выход 91%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,43 (1H, с), 7,05 (1H, ушир. с), 5,47 (1H, ушир. с), 4,90-4,80 (1H, м), 4,35 (2H, дд, J=9,5, 6,6 Гц), 3,97 (2H, дд, J=9,5, 4,4 Гц), 2,31 (1H, д, J=9,6 Гц).

(3) 1-(4-Карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (1,0 г, 5,02 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 3(2)) в смеси метиленхлорида (30 мл) и пиридина (5 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,967 мл, 12,5 ммоль) и триэтиламин (1,75 мл, 12,5 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2,5 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли метанол (0,405 мл) на ледяной бане и затем полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. К остатку добавляли изопропиловый эфир, и смесь фильтровали с получением 1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (1,30 г, выход 94%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,50 (1H, с), 6,99 (1H, ушир. с), 5,60-5,40 (2H, м), 4,46 (2H, ддд, J=9,5, 6,6, 1,5 Гц), 4,28 (2H, ддд, J=9,5, 4,4, 1,5 Гц), 3,11 (1H, с).

(4) 3-Ацетилтио-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (3,04 г, 11,0 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 3(3)) в диметилформамиде (152 мл) добавляли тиоацетат калия (7,5 г, 65,8 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 10 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → 4% метанол в этилацетате, с получением 3-ацетилтио-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,97 г, выход 70%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,46 (1H, с), 7,00 (1H, ушир. с), 5,55 (1H, ушир. с), 4,53 (2H, т, J=8,1 Гц), 4,50-4,40 (1H, м), 3,99 (2H, дд, J=8,1, 5,1 Гц), 2,37 (3H, с).

Ссылочный пример 4

3-Ацетилтио-1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (7,73 г, 16,6 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(1)) в бензоле (370 мл) добавляли раствор 0,67M хлорида аммония-триметилалюминия в бензоле (75 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь перемешивали на водяной бане (50° C) в течение 17 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (100 мл) и этилацетат (50 мл) на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (3:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (6,98 г, выход 76%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,64 (4H, м), 7,50-7,37 (6H, м), 7,20 (1H, с), 4,80-4,74 (1H, м), 4,13 (2H, дд, J=8,8, 6,8 Гц), 4,04 (2H, дд, J=8,8, 4,9 Гц), 1,07 (9H, с).

ИК (KBr): 2230, 1535, 1465, 1310, 1114 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 420 [M+H]⁺

(2) 1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (2,36 г, 5,62 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 4(1)) в безводном тетрагидрофуране (115 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (6,7 мл, 6,7 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали на ледяной бане в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:этилацетат (1:2), с получением 1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (0,78 г, выход 77%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,26 (1H, с), 4,92-4,86 (1H, м), 4,37 (2H, дд, J=9,8, 6,8 Гц), 4,02 (2H, дд, J=9,8, 4,9 Гц), 2,34 (1H, д, J=5,9 Гц).

(3) 1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (0,78 г, 4,3 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 4(2)) в метиленхлориде (40 мл) добавляли метансульфонилхлорид (1,0 мл, 12,9 ммоль) и триэтиламин (1,8 мл, 12,9 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 40 минут. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли метанол на ледяной бане и затем полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:этилацетат (1:1), с получением 1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (1,12 г, выход 100%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,31 (1H, с), 5,50-5,40 (1H, м), 4,50 (2H, дд, J=9,9, 6,6 Гц), 4,31 (2H, дд, J=9,9, 4,4 Гц), 3,11 (3H, с).

(4) 3-Ацетилтио-1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (1,12 г, 4,32 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 4(3)) в диметилформамиде (56 мл) добавляли тиоацетат калия (3,89 г, 27,0 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 4 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (2:1), с получением 3-ацетилтио-1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (0,767 г, выход 75%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,28 (1H, с), 4,57 (2H, т, J=8,3 Гц), 4,50-4,40 (1H, м), 4,03 (2H, дд, J=8,3, 5,5 Гц), 2,39 (3H, с).

Ссылочный пример 5

3-Ацетилтио-1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (500 мг, 1,07 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(1)) в бензоле (25 мл) добавляли раствор 0,67M гидрохлорида метиламина-триметилалюминия в бензоле (3,21 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (25 мл) и этилацетат (50 мл) на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (479 мг, выход 99%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,65-7,59 (4H, м), 7,50-7,34 (7H, м), 7,14 (1H, ушир. с), 4,80-4,70 (1H, м), 4,09 (2H, т, J=8,8 Гц), 4,00 (2H, дд, J=8,8, 5,1 Гц), 2,95 (3H, д, J=5,1 Гц), 1,06 (9H, с).

(2) 1-(4-N-Метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (4,74 г, 10,5 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 5(1)) в безводном тетрагидрофуране (240 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (12,6 мл, 12,6 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали в течение 30 минут. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (10:1), с получением 1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (2,10 г, выход 96%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,34 (2H, с), 7,20 (1H, ушир. с), 4,85-4,75 (1H, м), 4,31 (2H, дд, J=9,7, 6,4 Гц), 3,94 (2H, дд, J=9,7, 5,5 Гц), 3,10 (1H, ушир. с), 2,96 (3H, д, J=5,1 Гц).

Масс-спектр: 213 [M⁺]

(3) 1-(4-N-Метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (2,15 г, 10,1 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 5(2)) в метиленхлориде (45 мл) добавляли метансульфонилхлорид (3,12 мл, 40,3 ммоль) и триэтиламин (7,04 мл, 50,5 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли метанол на ледяной бане и затем полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (10:1), с получением 1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (2,95 г, выход 100%) в виде светло-желтого пенообразного твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,44 (1H, с), 7,18 (1H, ушир. с), 5,50-5,39 (1H, м), 4,45 (2H, дд, J=9,7, 6,6 Гц), 4,26 (2H, дд, J=9,7, 4,3 Гц), 3,11 (3H, с), 2,97 (3H, д, J=5,1 Гц).

Масс-спектр (FAB⁺): 292 [M+H]⁺

(4) 3-Ацетилтио-1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (3,0 г, 10,3 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 5(3)) в диметилформамиде (150 мл) добавляли тиоацетат калия (7,07 г, 61,9 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:4 → 1:10), с получением 3-ацетилтио-1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (2,41 г, выход 86%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,44 (1H, с), 7,18 (1H, ушир. с), 4,53 (2H, т, J=8,0 Гц), 4,50-4,40 (1H, м), 4,50-3,95 (2H, м), 2,95 (3H, д, J=6,0 Гц), 2,38 (3H, с).

Масс-спектр (FAB⁺): 272 [M+H]⁺

Ссылочный пример 6

3-Ацетилтио-1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (500 мг, 1,07 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(1)) в бензоле (25 мл) добавляли раствор 0,67M гидрохлорида диметиламина-триметилалюминия в бензоле (3,21 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 2 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (50 мл) и этилацетат (50 мл) на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (3:1 → 1:3), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (500 мг, выход 100%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,70-7,60 (4H, м), 7,52-7,40 (6H, м), 7,00 (1H, с), 4,79-4,70 (1H, м), 4,11 (2H, дд, J=9,5, 7,5 Гц), 4,02 (2H, дд, J=9,5, 5,0 Гц), 3,19 (3H, с), 3,05 (3H, с), 1,06 (9H, с).

(2) 1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (5,13 г, 10,7 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 6(1)) в безводном тетрагидрофуране (250 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (12,0 мл, 12,0 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали в течение 30 минут. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (10:1), с получением 1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (2,42 г, выход 100%) в качестве бесцветного сиропа.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,03 (1H, с), 4,90-4,70 (1H, м), 4,32 (2H, т, J=8,2 Гц), 3,95 (2H, дд, J=8,2, 4,5 Гц), 3,20 (3H, ушир. с), 3,05 (3H, ушир. с), 2,85 (1H, ушир. с).

Масс-спектр: 227 [M⁺]

(3) 1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (2,56 г, 10,7 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 6(2)) в метиленхлориде (50 мл) добавляли метансульфонилхлорид (2,4 мл, 31,0 ммоль) и триэтиламин (7,4 мл, 53,1 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2,5 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли метанол на ледяной бане и затем полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат и этилацетат:метанол (10:1), с получением 1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (3,28 г, выход 100%) в виде светло-коричневого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,13 (1H, с), 5,50-5,38 (1H, м), 4,46 (2H, дд, J=9,7, 6,6 Гц), 4,26 (2H, дд, J=9,7, 4,3 Гц), 3,21 (3H, ушир. с), 3,10 (3H, с), 3,07 (3H, ушир. с).

Масс-спектр (FAB⁺): 306 [M+H]⁺

(4) 3-Ацетилтио-1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (3,40 г, 11,1 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 6(3)) в диметилформамиде (170 мл) добавляли тиоацетат калия (7,62 г, 66,7 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:н-гексан (4:1 → 5:1 → 7:1), с получением 3-ацетилтио-1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (2,71 г, выход 85%) в виде коричневого сиропа.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,09 (1H, с), 4,53 (2H, дд, J=9,0, 7,9 Гц), 4,50-4,40 (1H, м), 3,99 (2H, дд, J=9,0, 5,5 Гц), 3,20 (3H, ушир. с), 3,06 (3H, ушир. с), 2,36 (3H, с).

Ссылочный пример 7

3-Ацетилтио-1-(4-N-этилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-N-этилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,0 г, 2,14 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(1)) в бензоле (50 мл) добавляли раствор 0,67M гидрохлорида этиламина-триметилалюминия в бензоле (6,42 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 2 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (50 мл) и этилацетат (100 мл),, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. После добавления этилацетата, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (5:1 → 1:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-N-этилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (997 мг, выход 100%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,66-7,58 (4H, м), 7,50-7,37 (6H, м), 7,35 (1H, с), 7,14 (1H, ушир. с), 4,80-4,76 (1H, м), 4,16-4,06 (2H, м), 4,01 (2H, дд, J=8,8, 5,1 Гц), 3,43 (2H, дкв., J=7,3, 5,6 Гц), 1,22 (3H, т, J=7,3 Гц), 1,07 (9H, с).

(2) 1-(4-N-Этилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-N-этилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (990 мг, 2,14 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 7(1)) в безводном тетрагидрофуране (30 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (2,56 мл, 2,56 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали на ледяной бане в течение 1,3 часов. После контроля завершения реакции, добавляли этилацетат и реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:2) → этилацетат → 5% метанол в этилацетате, с получением 1-(4-N-этилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (461 мг, выход 95%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,36 (1H, с), 7,20 (1H, ушир. с), 4,90-4,78 (1H, м), 4,32 (2H, дд, J=9,0, 7,3 Гц), 3,96 (2H, дд, J=9,0, 4,3 Гц), 3,44 (2H, дкв., J=7,2, 5,4 Гц), 2,61 (1H, д, J=6,6 Гц), 1,22 (3H, т, J=7,2 Гц).

(3) 1-(4-N-Этилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (460 мг, 2,02 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 7(2)) в метиленхлориде (23 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,469 мл, 6,06 ммоль) и триэтиламин (0,849 мл, 6,06 ммоль) на ледяной бане. Температуру реакционной смеси доводили комнатной в течение 10 минут и перемешивали в течение 1,3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:3) → этилацетат, с получением 1-(4-N-этилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (598 мг, выход 97%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,44 (1H, с), 7,13 (1H, ушир. с), 5,48-5,38 (1H, м), 4,46 (2H, ддд, J=9,5, 6,6, 1,5 Гц), 4,27 (2H, ддд, J=9,5, 4,4, 1,5 Гц), 3,45 (2H, дкв., J=7,3, 5,0 Гц), 3,10 (3H, с), 1,24 (3H, т, J=7,3 Гц).

(4) 3-Ацетилтио-1-(4-N-этилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 1-(4-N-этилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилазетидина (590 мг, 1,93 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 7(3)) в диметилформамиде (30 мл) добавляли тиоацетат калия (1,32 г, 11,6 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:3 → 1:2), с получением 3-ацетилтио-1-(4-N-этилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (453 мг, выход 82%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,40 (1H, с), 7,14 (1H, ушир. с), 4,53 (2H, т, J=8,8 Гц), 4,48-4,38 (1H, м), 3,98 (2H, дд, J=8,8, 5,6 Гц), 3,44 (2H, дкв., J=7,3, 5,9 Гц), 2,37 (3H,s), 1,23 (3H, т, J=7,3 Гц).

Ссылочный пример 8

3-Ацетилтио-1-(4-N-изопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-N-изопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,0 г, 2,14 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(1)) в бензоле (50 мл) добавляли раствор 0,67M гидрохлорида изопропиламина-триметилалюминия в бензоле (6,42 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 2,5 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (50 мл) и этилацетат (100 мл) на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. После добавления этилацетата, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-N-изопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,01 г, выход 99%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,66-7,58 (4H, м), 7,50-7,36 (6H, м), 7,34 (1H, с), 6,98 (1H, ушир. д, J=8,1 Гц), 4,80-4,70 (1H, м), 4,26-4,16 (1H, м), 4,11 (2H, дд, J=8,8, 7,3 Гц), 4,02 (2H, дд, J=8,8, 4,4 Гц), 1,24 (6H, д, J=6,6 Гц), 1,07 (9H, с).

(2) 1-(4-N-изопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-N-изопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,01 г, 2,11 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 8(1)) в безводном тетрагидрофуране (30 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония-тетрагидрофурана (2,53 мл) на ледяной бане. Смесь перемешивали в течение 30 минут. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:3) → этилацетат, с получением 1-(4-N-изопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (681 мг, выход 100%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,36 (1H, с), 7,00 (1H, ушир. д, J=8,0 Гц), 4,90-4,78 (1H, м), 4,32 (2H, дд, J=9,9, 8,7 Гц), 3,97 (2H, ддд, J=9,9, 7,3, 1,7 Гц), 2,55 (1H, д, J=8,0 Гц), 1,25 (6H, д, J=6,6 Гц).

(3) 1-(4-N-изопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-(4-N-изопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (490 мг, 2,03 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 8(2)) в метиленхлориде (15 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,471 мл, 6,09 ммоль) и триэтиламин (0,854 мл, 6,09 ммоль) на ледяной бане. Температуру реакционной смесь доводили до комнатной в течение 10 минут и перемешивали в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:3) → этилацетат, с получением 1-(4-N-изопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (681 мг, выход 100%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,44 (1H, с), 7,00 (1H, ушир. д, J=8,0 Гц), 5,48-5,38 (1H, м), 4,46 (2H, дд, J=9,5, 6,6 Гц), 4,32-4,18 (3H, м, включая 2H, дд, при 4,28, J=9,5, 5,1 Гц), 3,11 (3H, с), 1,25 (6H, д, J=6,6 Гц).

(4) 3-Ацетилтио-1-(4-N-изопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 1-(4-N-изопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (680 мг, 2,03 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 8(3)) в диметилформамиде (35 мл) добавляли тиоацетат калия (1,39 г, 12,2 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем с получением 3-ацетилтио-1-(4-N-изопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (461 мг, выход 81%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,40 (1H, с), 6,98 (1H, ушир. с), 4,54 (2H, т, J=8,8 Гц), 4,50-4,40 (1H, м), 4,26-4,16 (1H, м), 3,99 (2H, дд, J=8,8, 5,9 Гц), 2,37 (3H, с), 1,24 (6H, д, J=5,9 Гц).

Ссылочный пример 9

3-Ацетилтио-1-(4-N-циклопентилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-N-циклопентилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,0 г, 2,14 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(1)) в бензоле (50 мл) добавляли раствор 0,67M циклопентиламина-триметилалюминия в бензоле (6,42 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 5 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (50 мл) и этилацетат (100 мл) на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. После добавления этилацетата, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-N-циклопентилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,07 г, выход 99%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,66-7,60 (4H, м), 7,50-7,38 (6H, м), 7,34 (1H, с), 7,08 (1H, ушир. д, J=8,1 Гц), 4,80-4,70 (1H, м), 4,38-4,26 (1H, м), 4,11 (2H, дд, J=8,8, 5,6 Гц), 4,02 (2H, дд, J=8,8, 4,4 Гц), 2,12-2,20 (2H, м), 1,80-1,40 (6H, м), 1,07 (9H, с).

(2) 1-(4-N-Циклопентилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-N-циклопентилкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,07 г, 2,12 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 9(1)) в безводном тетрагидрофуране (32 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (2,54 мл, 2,54 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали на ледяной бане в течение 40 минут. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем с получением 1-(4-N-циклопентилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (528 мг, выход 93%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,36 (1H, с), 7,11 (1H, д, J=4,4 Гц), 4,88-4,78 (1H, м), 4,40-4,25 (3H, м), 3,96 (2H, дд, J=9,5, 4,4 Гц), 2,54 (1H, д, J=6,0 Гц), 2,12-2,00 (2H, м), 1,80-1,44 (6H, м).

(3) 1-(4-N-Циклопентилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-(4-N-циклопентилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (520 мг, 1,95 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 9(2)) в метиленхлориде (16 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,452 мл, 5,84 ммоль) и триэтиламин (0,818 мл, 5,84 ммоль) на ледяной бане. Температуру реакционной смесь доводили до комнатной в течение 10 минут и перемешивали в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:2) → этилацетат, с получением 1-(4-N-циклопентилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (691 мг, выход 100%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,43 (1H, с), 7,07 (1H, ушир. д, J=8,1 Гц), 5,48-5,38 (1H, м), 4,46 (2H, ддд, J=9,9, 6,6, 1,5 Гц), 4,40-4,20 (3H, м, включая 2H, ддд, J=9,9, 4,9, 1,5 Гц), 3,11 (3H, с), 2,15-1,98 (2H, м), 1,80-1,40 (6H, м).

(4) 3-Ацетилтио-1-(4-N-циклопентилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 1-(4-N-циклопентилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (670 мг, 1,95 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 9(3)) в диметилформамиде (34 мл) добавляли тиоацетат калия (1,34 г, 11,7 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (2:1 → 1:2), с получением 3-ацетилтио-1-(4-N-циклопентилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (550 мг, выход 87%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,40 (1H, с), 7,10 (1H, д, J=8,0 Гц), 4,53 (2H, дд, J=9,2, 6,9 Гц), 4,48-4,38 (1H, м), 4,38-4,26 (1H, м), 3,99 (2H, дд, J=9,2, 4,6 Гц), 2,36 (3H, с), 2,12-2,06 (2H, м), 1,80-1,40 (6H, м).

Ссылочный пример 10

3-Ацетилтио-1-(4-N-циклогексилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-N-циклогексилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,0 г, 2,14 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(1)) в бензоле (50 мл) добавляли раствор 0,67M циклогексиламина-триметилалюминия в бензоле (6,42 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота и затем смесь кипятили с обратным холодильником в течение 2 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (50 мл) и этилацетат (100 мл) на ледяной бане, и реакционную смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. В реакционную смесь постепенно добавляли этилацетат, и полученную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (5:1 → 1:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-N-циклогексилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,09 г, выход 99%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,66-7,58 (4H, м), 7,50-7,38 (6H, м), 7,34 (1H, с), 7,04 (1H, ушир. д, J=8,8 Гц), 4,80-4,70 (1H, м), 4,11 (2H, дд, J=8,8, 6,6 Гц), 4,02 (2H, дд, J=8,8, 5,1 Гц), 3,98-3,80 (1H, м), 2,02-1,94 (2H, м), 1,80-1,70 (2H, м), 1,70-1,10 (6H, м), 1,07 (9H, с).

(2) 1-(4-N-Циклогексилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-N-циклогексилкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,09 г, 2,10 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 10(1)) в безводном тетрагидрофуране (55 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (2,52 мл) на ледяной бане и затем смесь перемешивали на ледяной бане в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1) → этилацетат, с получением 1-(4-N-циклогексилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (570 мг, выход 97%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,36 (1H, с), 7,07 (1H, д, J=8,1 Гц), 4,99-4,78 (1H, м), 4,33 (2H, дд, J=9,0, 7,3 Гц), 4,00-3,80 (3H, м, включая 2H, дд, J=9,0, 4,4 Гц), 2,56 (1H, д, J=8,3 Гц), 2,02-1,92 (2H, м), 1,80-1,70 (2H, м), 1,70-1,10 (6H, м).

(3) 1-(4-N-Циклогексилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-(4-N-циклогексилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (570 мг, 2,03 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 10(2)) в метиленхлориде (17 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,471 мл, 6,08 ммоль) и триэтиламин (0,852 мл, 6,08 ммоль) на ледяной бане. Температуру реакционной смеси доводили до комнатной в течение 10 минут, и затем перемешивали при комнатной температуре в течение 17 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. К полученному остатку добавляли изопропиловый эфир, и полученную смесь фильтровали с получением 1-(4-N-циклогексилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (739 мг, выход 100%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,43 (1H, с), 7,02 (1H, ушир. д, J=8,1 Гц), 5,48-5,39 (1H, м), 4,46 (2H, ддд, J=9,5, 6,6, 1,5 Гц), 4,27 (2H, дд, J=9,5, 5,1 Гц), 3,98-3,84 (1H, м), 3,11 (3H, с), 2,01-1,94 (2H, м), 1,80-1,70 (2H, м), 1,70-1,10 (6H, м).

(4) 3-Ацетилтио-1-(4-N-циклогексилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 1-(4-N-циклогексилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (730 мг, 2,03 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 10(3)) в диметилформамиде (37 мл) добавляли тиоацетат калия (1,39 г, 12,2 ммоль) при комнатной температуре, и затем реакционную смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 15 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (2:1 → 1:2), с получением 3-ацетилтио-1-(4-N-циклогексилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (372 мг, выход 54%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,40 (1H, с), 7,06 (1H, ушир. д, J=8,0 Гц), 4,53 (1H, дд, J=9,5, 8,2 Гц), 4,48-4,40 (1H, м), 3,99 (2H, дд, J=9,5, 3,7 Гц), 3,95-3,85 (1H, м), 2,37 (3H, с), 2,01-1,96 (2H, м), 1,80-1,10 (8H, м).

Ссылочный пример 11

3-Ацетилтио-1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-N-морфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,0 г, 2,14 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(1)) в бензоле (50 мл) добавляли раствор 0,67M морфолина-триметилалюминия в бензоле (6,42 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 2 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (50 мл) и этилацетат (100 мл) на ледяной бане, и затем полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (3:1 → 1:3), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,05 г, выход 97%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,64-7,58 (4H, м), 7,50-7,36 (6H, м), 7,12 (1H, с), 4,80-4,70 (1H, м), 4,10 (2H, дд, J=9,6, 8,0 Гц), 4,00 (2H, дд, J=9,6, 4,8 Гц), 3,96-3,60 (8H, м), 1,06 (9H, с).

(2) 1-(4-N-Морфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,05 г, 2,07 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 11(1)) в безводном тетрагидрофуране (32 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (2,48 мл, 2,48 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → 10% метанол в этилацетате, с получением 1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (542 мг, выход 97%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,15 (1H, с), 4,90 (1H, м), 4,32 (2H, дд, J=8,8, 7,3 Гц), 3,95 (2H, дд, J=8,8, 4,4 Гц), 4,00-3,60 (8H, м), 2,45 (1H, ушир. с).

(3) 1-(4-N-Морфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (540 мг, 2,01 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 11(2)) в метиленхлориде (27 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,467 мл, 6,03 ммоль) и триэтиламин (0,845 мл, 6,03 ммоль) на ледяной бане. Температуру реакционной смесь доводили до комнатной в течение 10 минут и перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента 5% метанол в этилацетате, с получением 1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (688 мг, выход 99%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,23 (1H, с), 5,45-5,40 (1H, м), 4,45 (2H, дд, J=9,5, 6,6 Гц), 4,26 (2H, ддд, J=9,5, 4,4, 1,5 Гц), 4,00-3,60 (8H, м), 3,10 (3H, с).

(4) 3-Ацетилтио-1-(4-N-морфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (680 мг, 1,96 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 11(3)) в диметилформамиде (20 мл) добавляли тиоацетат калия (671 мг, 5,87 ммоль) при комнатной температуре, и затем реакционную смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 18 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:3) → этилацетат, с получением 3-ацетилтио-1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (411 мг, выход 64%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,20 (1H, с), 4,52 (2H, т, J=8,8 Гц), 4,48-4,38 (1H, м), 3,98 (2H, дд, J=8,8, 5,1 Гц), 4,00-3,60 (8H, м), 2,36 (3H, с).

Ссылочный пример 12

3-Ацетилтио-1-(4-трет-бутилдиметилсилилоксиметил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

(1) 1-(4-Гидроксиметил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-гидроксиметил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (548,5 мг, 1,29 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(2)) в безводном тетрагидрофуране (28 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (1,56 мл, 1,56 ммоль) на ледяной бане, и смесь затем перемешивали на ледяной бане в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (10:1), с получением 1-(4-гидроксиметил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (230 мг, выход 96%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CD₃OD): δ (м.д.) 6,54 (1H, с), 4,76-4,68 (1H, м), 4,46 (2H, с), 4,32-4,24 (2H, м), 3,88-3,82 (2H, м).

(2) 1-(4-Трет-бутилдиметилсилилоксиметил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидин

В раствор 1-(4-гидроксиметил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (226,5 мг, 1,22 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 12(1)) в диметилформамиде (11,5 мл) добавляли трет-бутилдиметилсилилхлорид (220 мг, 1,46 ммоль) и имидазол (120 мг, 1,76 ммоль) на ледяной бане. Температуру реакционной смесь доводили до комнатной в течение 10 минут и перемешивали в течение 5 часов. После контроля завершения реакции, добавляли метанол (2 мл) на ледяной бане, и затем реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1), с получением 1-(4-трет-бутилдиметилсилилоксиметил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (300,4 мг, выход 82%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 6,43 (1H, с), 4,86-4,78 (1H, м), 4,66 (2H, с), 4,30 (2H, дд, J=9,5, 7,0 Гц), 3,93 (2H, дд, J=9,5, 4,4 Гц), 2,80 (1H, ушир. с), 0,94 (9H, с), 0,10 (6H, с).

(3) 1-(4-Трет-бутилдиметилсилилоксиметил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-(4-трет-бутилдиметилсилилоксиметил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (300,4 мг, 1,00 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 12(2)) в метиленхлориде (15 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,2 мл, 2,49 ммоль) и триэтиламин (0,35 мл, 2,51 ммоль) на ледяной бане, и реакционную смесь затем перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1), с получением 1-(4-трет-бутилдиметилсилилоксиметил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (326,5 мг, выход 86%) в виде желтого сиропа.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 6,50 (1H, с), 5,44-5,38 (1H, м), 4,43 (2H, дд, J=9,9, 5,5 Гц), 4,23 (2H, дд, J=9,9, 4,1 Гц), 3,10 (3H, с), 0,90 (9H, с), 0,10 (6H, с).

(4) 3-Ацетилтио-1-(4-трет-бутилдиметилсилилоксиметил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 1-(4-трет-бутилдиметилсилилоксиметил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (326,5 мг, 0,86 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 12(3)) в диметилформамиде (16 мл) добавляли тиоацетат калия (780 мг, 5,41 ммоль) при комнатной температуре, и реакционную смесь затем перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (4:1), с получением 3-ацетилтио-1-(4-трет-бутилдиметилсилилоксиметил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (191 мг, выход 62%) в виде коричневого сиропа.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 6,45 (1H, с), 4,66 (2H, с), 4,50 (2H, т, J=8,6 Гц), 3,95 (2H, дд, J=8,6, 5,1 Гц), 2,35 (3H, с), 0,93 (9H, с), 0,10 (6H, с).

Ссылочный пример 13

4-Ацетилтио-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин

(1) Этиловый эфир (4-гидроксипиперидин-1-карботиоил)карбаминовой кислоты

В раствор 3-гидроксипиперидина (1,0 г, 9,89 ммоль) в тетрагидрофуране (50 мл) добавляли этоксикарбонилизотиоцианат (1,4 мл, 11,9 ммоль) на ледяной бане. Температуру реакционной смесь доводили до комнатной в течение 10 минут и затем перемешивали в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:этилацетат (1:2), с получением этилового эфира (4-гидроксипиперидин-1-карботиоил)карбаминовой кислоты (2,3 г, выход 100%) в виде желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 4,26 (1H, ушир. с), 4,19 (2H, кв., J=8,3 Гц), 4,06 (1H, м), 4,0-3,4 (3H, тупой с), 2,10 (2H, м), 1,80-1,60 (4H, м), 1,29 (3H, т, J=8,3 Гц).

(2) 1-(4-Этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-4-гидроксипиперидин

В раствор этилового эфира (4-гидроксипиперидин-1-карботиоил)карбаминовой кислоты (2,3 г, 9,89 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 13(1)) в этаноле (23 мл) и дистиллированной воды (23 мл) добавляли натрий гидроксид (1,98 г, 49,5 ммоль), и смесь затем кипятили с обратным холодильником в течение 15 часов. После контроля завершения реакции, температуру реакционной смеси доводили до комнатной и в реакционную смесь добавляли раствор 4н хлористого водорода в диоксане (12,4 мл) на ледяной бане, этил 2-бромпируват (2,5 мл, 19,8 ммоль) и добавляли триэтиламин (2,8 мл, 20,1 ммоль), и затем реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:этилацетат (2:1), с получением 1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-4-гидроксипиперидина (0,99 г, выход 39%) в виде светло-желтого сиропа.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,46 (1H, с), 4,35 (2H, кв., J=7,8 Гц), 3,96 (1H, м), 3,88 (2H, дт, J=13,5, 3,0 Гц), 3,31 (2H, ддд, J=13,5, 9,0, 3,0 Гц), 2,04-1,96 (2H,m), 1,74-1,56 (3H, м), 1,37 (3H, т, J=7,8 Гц).

Масс-спектр: 256 [M⁺]

(3) 1-(4-Этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-4-метансульфонилоксипиперидин

В раствор 1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-4-гидроксипиперидина (128 мг, 0,50 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 13(2)) в метиленхлориде (6,5 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,043 мл, 0,56 ммоль) и триэтиламин (0,084 мл, 0,60 ммоль) на ледяной бане. Температуру реакционной смесь доводили до комнатной в течение 10 минут и затем перемешивали в течение 30 минут. После контроля завершения реакции, добавляли этанол (1 мл) на ледяной бане и затем реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток перекристаллизовывали из раствора этилацетат:н-гексан (5:1) с получением 1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-4-метансульфонилоксипиперидина (81,0 мг, выход 49%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,49 (1H, с), 5,01-4,90 (1H, м), 4,45 (2H, кв., J=8,0 Гц), 3,80 (2H, ддд, J=12,6, 8,4, 4,2 Гц), 3,52 (2H, ддд, J=12,6, 8,4, 4,2 Гц), 3,05 (3H, с), 2,20-1,90 (4H, м), 1,36 (3H, т, J=8,0 Гц).

Масс-спектр: 334 [M⁺]

(4) 4-Ацетилтио-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин

В раствор 1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-4-метансульфонилоксипиперидина (76 мг, 0,23 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 13(3)) в диметилформамиде (4,0 мл) добавляли тиоацетат калия (145 мг, 1,3 ммоль) при комнатной температуре, и реакционную смесь затем перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 8 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1), с получением 4-ацетилтио-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидина (67 мг, выход 94%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,45 (1H, с), 4,34 (2H, кв., J=7,1 Гц), 3,88 (2H, дт, J=13,4, 3,2 Гц), 3,80-3,60 (1H, м), 3,33 (ддд, J=13,6, 8,5, 3,2 Гц), 2,33 (3H, с), 2,15-1,95 (2H, м), 1,85-1,65 (2H, м), 1,37 (3H, т, J=7,1 Гц).

Масс-спектр: 314 [M⁺]

Ссылочный пример 14

4-Ацетилтио-1-(4-п-нитробензилкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин

(1) 4-Трет-бутилдиметилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин

В раствор 1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-4-гидроксипиперидина (1,00 г, 3,90 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 13(2)) в диметилформамиде (50 мл) добавляли трет-бутилдиметилсилилхлорид (1,2 г, 7,96 ммоль) и имидазол (0,6 г, 8,8 ммоль) на ледяной бане. Температуру реакционной смесь доводили до комнатной в течение 10 минут и затем перемешивали в течение 18 часов. После контроля завершения реакции, добавляли этанол на ледяной бане, и реакционную смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (4:1), с получением 4-трет-бутилдиметилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,38 г, выход 95%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,42 (1H, с), 4,35 (2H, кв., J=7,1 Гц), 4,03-3,89 (1H, м), 3,70 (2H, ддд, J=12,4, 8,5, 3,7 Гц), 3,46 (2H, ддд, 12,4, 8,5, 3,7 Гц), 1,90-1,77 (2H, м), 1,71-1,59 (2H, м), 1,37 (3H, т, J=7,1 Гц), 0,90 (9H, с), 0,08 (6H, с).

Масс-спектр: 370 [M⁺]

(2) 4-Трет-бутилдиметилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин

В раствор 4-трет-бутилдиметилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидина (1,00 г, 2,7 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 14(1)) в этаноле (20 мл) добавляли 1н водный раствор гидроксида натрия (5,4 мл, 5,4 ммоль) на ледяной бане, и реакционную смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение 3,5 часов. После контроля завершения реакции, добавляли 2н водный раствор соляной кислоты (1,8 мл) на ледяной бане. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток перекристаллизовывали из раствора метанола в этилацетате с получением в качестве первичных кристаллов белых кристаллов (471 мг). Затем остаток, полученый концентрированием исходной жидкости, очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:2-пропанол:вода (10:4:1 → 5:2:1), с получением 4-трет-бутилдиметилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидина (440 мг, общее количество 911 мг, выход 99%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃ + D₂O): δ (м.д.) 7,35 (1H, с), 4,10-3,85 (1H, м), 3,75-3,50 (2H, м), 3,50-3,25 (2H, м), 1,90-1,70 (2H, м), 1,70-1,50 (2H, м), 0,90 (9H, с), 0,07 (6H, м).

Масс-спектр (FAB⁺): 343 [M+H]⁺

(3) 4-Трет-бутилдиметилсилилокси-1-(4-п-нитробензилоксикарбоксил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин

В раствор 4-трет-бутилдиметилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидина (902 мг, 2,63 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 14(2)) в безводном метиленхлориде (40 мл) добавляли гидроксибензотриазол (710 мг, 5,3 ммоль), гидрохлорид 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (WSC) (1,254 г, 6,6 ммоль) и п-нитробензиловый спирт (788 мг, 5,2 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота, и смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1), с получением 4-трет-бутилдиметилсилилокси-1-(4-п-нитробензилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидина (916 мг, выход 73%) в виде желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,5 Гц), 7,60 (2H, д, J=8,5 Гц), 7,49 (1H, с), 5,42 (2H, с), 4,05-3,95 (1H, м), 3,70 (2H, ддд, J=12,6, 8,6, 3,9 Гц), 3,48 (2H, ддд, J=12,6, 6,2, 4,2 Гц), 1,92-1,76 (2H, м), 1,75-1,50 (2H, м), 0,90 (9H, с), 0,07 (6H, с).

Масс-спектр (FAB⁺): 478 [M+H]⁺

(4) 1-(4-п-Нитробензилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-4-гидроксипиперидин

В раствор 4-трет-бутилдиметилсилилокси-1-(4-п-нитробензилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидина (300 мг, 0,628 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 14(3)) в безводном тетрагидрофуране (15 мл) добавляли уксусную кислоту (0,22 мл, 0,628 ммоль) и раствор 1M фторида тетрабутиламмония в тетрагидрофуране (3,76 мл, 3,76 ммоль) на ледяной бане, и смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение 21 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (10:1), с получением 1-(4-п-нитробензилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-4-гидроксипиперидина (123 мг, выход 54%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃ + D₂O): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=8,0 Гц), 7,60 (2H, д, J=8,0 Гц), 7,50 (1H, с), 5,42 (2H, с), 4,02-3,94 (1H, м), 3,89 (2H, дт, J=12,0, 4,0 Гц), 3,33 (2H, ддд, J=12,0, 8,0, 4,0 Гц), 2,05-1,94 (2H, м), 1,75-1,55 (2H, м).

Масс-спектр: 363 [M⁺]

(5) 4-Метансульфонилокси-1-(4-п-нитробензилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин

В раствор 1-(4-п-нитробензилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-4-гидроксипиперидина (0,75 г, 2,06 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 14(4)) в безводном метиленхлориде (38 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,18 мл, 2,33 ммоль) и триэтиламин (0,35 мл, 2,51 ммоль) на ледяной бане. Температуру реакционной смеси доводили до комнатной в течение 10 минут, и затем перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (2:1), с получением 4-метансульфонилокси-1-(4-п-нитробензилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидина (0,87 г, выход 96%) в виде бесцветного твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,5 Гц), 7,59 (2H, д, J=8,5 Гц), 7,54 (1H, с), 5,42 (2H, с), 5,05-4,95 (1H, м), 3,79 (2H, ддд, J=12,2, 7,6, 4,0 Гц), 3,55 (2H, ддд, J=12,2, 7,2, 4,0 Гц), 3,07 (3H, с), 2,18-2,06 (2H, м), 2,00-1,80 (2H, м).

Масс-спектр (FAB⁺): 441 [M+H]⁺

(6) 4-Ацетилтио-1-(4-п-нитробензилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин

В раствор 4-метансульфонилокси-1-(4-п-нитробензилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидина (1,2 г, 2,72 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 14(5)) в диметилформамиде (60 мл) добавляли тиоацетат калия (625 мг, 5,47 ммоль) при комнатной температуре, и реакционную смесь перемешивали на масляной бане (90° C) в течение 3,5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1), с получением 4-ацетилтио-1-(4-п-нитробензилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидина (769 мг, выход 88%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,4 Гц), 7,59 (2H, д, J=8,4 Гц), 7,51 (1H, с), 5,42 (2H, с), 3,95-3,80 (2H, м), 3,80-3,60 (1H, м), 3,34 (2H, ддд, J=13,1, 9,9, 3,1 Гц), 2,34 (3H, с), 2,25-1,95 (2H, м), 1,85-1,65 (2H, м).

Масс-спектр (FAB⁺): 422 [M+H]⁺

Ссылочный пример 15

4-Ацетилтио-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин

(1) 4-Трет-бутилдиметилсилилокси-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин

В раствор 4-трет-бутилдиметилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидина (4,99 г, 14,6 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 14(2)) в метиленхлориде (150 мл) добавляли карбонилдиимидазол (2,80 г, 17,3 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и реакционную смесь перемешивали в течение 1,5 часа при тех же условиях. После контроля завершения реакции, добавляли 28% водный раствор аммиака и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут.

Затем реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток разделяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1), с получением 4-трет-бутилдиметилсилилокси-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидина (2,90 г, выход 59%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,39 (1H, с), 7,03 (1H, ушир. с), 5,50 (1H, ушир. с), 4,05-3,95 (1H, м), 3,66 (2H, ддд, J=12,5, 8,6, 3,7 Гц), 3,43 (2H, ддд, J=12,5, 6,5, 4,2 Гц), 1,92-1,75 (2H, м), 1,75-1,55 (2H, м), 0,90 (9H, с), 0,08 (6H, с).

Масс-спектр (FAB⁺): 342 [M+H]⁺

(2) 1-(4-Карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-4-гидроксипиперидин

В раствор 4-трет-бутилдиметилсилилокси-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидина (1,226 г, 3,59 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 15(1)) в безводном тетрагидрофуране (30 мл) добавляли уксусную кислоту (1,85 мл) и раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (32,3 мл, 32,3 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 24 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем с получением 1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-4-гидроксипиперидина (0,82 г, выход 100%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CD₃OD): δ (м.д.) 7,38 (1H, с), 3,95-3,80 (1H, м), 3,40-3,20 (2H, м), 2,00-1,85 (2H, м), 1,75-1,50 (2H, м).

Масс-спектр (FAB⁺): 228 [M+H]⁺

(3) 1-(4-Карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-4-метансульфонилоксипиперидин

В раствор 1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-4-гидроксипиперидина (1,93 г, 8,49 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 15(2)) в метиленхлориде (100 мл) добавляли метансульфонилхлорид (10,0 мл, 129 ммоль) и триэтиламин (18,0 мл, 129 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли метанол на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (10:1), с получением 1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-4-метансульфонилоксипиперидина (1,59 г, выход 61%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CD₃OD): δ (м.д.) 7,42 (1H, с), 5,10-4,90 (1H, м), 3,77 (2H, ддд, J=13,0, 7,4, 4,0 Гц), 3,53 (2H, ддд, J=13,0, 7,7, 4,0 Гц), 3,12 (3H, с), 2,18-2,07 (2H, м), 2,00-1,89 (2H, м).

Масс-спектр: 305 [M⁺]

(4) 4-Ацетилтио-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин

В раствор 1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-4-метансульфонилоксипиперидина (1,59 г, 5,21 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 15(3)) в диметилформамиде (80 мл) добавляли тиоацетат калия (1,19 г, 10,4 ммоль) при комнатной температуре, и реакционную смесь перемешивали на масляной бане (90° C) в течение 2,5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:н-гексан (10:1), с получением 4-ацетилтио-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидина (1,01 г, выход 68%) в виде коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,41 (1H, с), 7,00 (1H, ушир. с), 5,55 (1H, ушир. с), 3,90-3,78 (2H, м), 3,78-3,64 (1H, м), 3,35-3,25 (2H, м), 2,32 (3H, с), 2,10-2,00 (2H, м), 1,80-1,65 (2H, м).

Масс-спектр (FAB⁺): 285 [M+H]⁺

Ссылочный пример 16

4-Ацетилтио-1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин

(1) 4-Трет-бутилдиметилсилилокси-1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин

В раствор 4-трет-бутилдиметилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидина (200 мг, 0,584 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 14(2)) в диметилформамиде (6,0 мл) добавляли карбонилдиимидазол (114 мг, 0,703 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и реакционную смесь затем перемешивали на масляной бане (50° C) в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, добавляли 40% водный раствор метиламина (0,23 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут.

Затем реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (5:4), с получением 4-трет-бутилдиметилсилилокси-1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидина (202,5 мг, выход 97%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,36 (1H, с), 7,20 (1H, ушир. с), 4,10-3,98 (1H, м), 3,68 (2H, ддд, J=12,6, 8,5, 3,7 Гц), 3,45 (2H, ддд, J=12,6, 6,4, 4,2 Гц), 2,99 (3H, д, J=4,8 Гц), 1,95-1,78 (2H, м), 1,78-1,60 (2H, м), 0,93 (H, с), 0,11 (6H, с).

Масс-спектр (FAB⁺): 356 [M+H]⁺

(2) 1-(4-N-Метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-4-гидроксипиперидин

В раствор 4-трет-бутилдиметилсилилокси-1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидина (1,69 г, 4,75 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 16(1)) в безводном тетрагидрофуране (85 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (23,8 мл, 23,8 ммоль) на ледяной бане, и затем смесь перемешивали на масляной бане (50° C) в течение 14,5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (10:1), с получением 1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-4-гидроксипиперидина (1,48 г, выход 97%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,35 (1H, с), 7,18 (1H, ушир. с), 4,05-3,90 (1H, м), 3,74 (2H, ддд, J=12,7, 4,7 Гц), 3,28 (2H, ддд, J=12,7, 9,0, 3,6 Гц), 2,10-1,90 (2H, м), 1,80-1,50 (3H, м).

Масс-спектр: 241 [M⁺]

(3) 4-Метансульфонилокси-1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин

В раствор 1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-4-гидроксипиперидина (1,143 г, 4,74 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 16(2)) в метиленхлориде (35 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,44 мл, 5,63 ммоль) и триэтиламин (0,86 мл, 5,68 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли метанол на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. К остатку добавляли этилацетат, и смесь фильтровали с получением 4-метансульфонилокси-1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидина (1,438 г, выход 95%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,38 (1H, с), 7,14 (1H, ушир. с), 5,06-4,93 (1H, м), 3,74 (2H, ддд, J=13,2, 7,5, 4,2 Гц), 3,48 (2H, ддд, J=13,2, 7,2, 4,2 Гц), 3,07 (3H, с), 2,97 (3H, д, J=5,1 Гц), 2,20-1,90 (4H, м).

Масс-спектр (FAB⁺): 320 [M+H]⁺

(4) 4-Ацетилтио-1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин

В раствор 4-метансульфонилокси-1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидина (1,438 г, 4,50 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 16(3)) в диметилформамиде (72 мл) добавляли тиоацетат калия (1,03 г, 9,00 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали на масляной бане (90° C) в течение 2,5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:н-гексан (10:1) → этилацетат, с получением 4-ацетилтио-1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидина (1,22 г, выход 91%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,38 (1H, с), 7,15 (1H, ушир. с), 3,82 (2H, дт, J=12,7, 4,8 Гц), 3,78-3,63 (1H, м), 3,30 (2H, ддд, J=12,7, 11,1, 4,7 Гц), 2,95 (3H, д, J=6,4 Гц), 2,35 (3H, с), 2,15-1,95 (2H, м), 1,85-1,35 (2H, м).

Масс-спектр (FAB⁺): 300 [M+H]⁺

Ссылочный пример 17

4-Ацетилтио-1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин

(1) 4-Трет-бутилдиметилсилилокси-1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин

В раствор 4-трет-бутилдиметилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидина (0,98 г, 2,86 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 14(2)) в диметилформамиде (30 мл) добавляли карбонилдиимидазол (559 мг, 3,45 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и реакционную смесь затем перемешивали на масляной бане (50° C) в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, добавляли 50% водный раствор диметиламина (100 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут.

Затем реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водным раствором. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (2:3), с получением 4-трет-бутилдиметилсилилокси-1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидина (440 мг, общее количество 995 мг, выход 94%) в виде желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,04 (1H, с), 4,05-3,95 (1H, м), 3,67 (2H, ддд, J=12,6, 8,4, 4,3 Гц), 3,41 (2H, ддд, J=12,6, 7,0, 4,3 Гц), 3,26 (3H, ушир. с), 3,07 (3H, ушир. с), 1,92-1,75 (2H, м), 1,72-1,50 (2H, м), 0,90 (9H, с), 0,08 (6H, с).

Масс-спектр (FAB⁺): 370 [M+H]⁺

(2) 1-(4-N,N-Диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-4-гидроксипиперидин

В раствор 4-трет-бутилдиметилсилилокси-1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидина (2,13 г, 5,76 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 17(1)) в безводном тетрагидрофуране (85 мл) добавляли уксусную кислоту (1,65 мл, 28,8 ммоль) и раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (28,8 мл, 28,8 ммоль) на ледяной бане, и смесь затем перемешивали на масляной бане (50° C) в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (10:1), с получением 1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-4-гидроксипиперидина (1,47 г, выход 100%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,07 (1H, с), 4,03-3,89 (1H, м), 3,83 (2H, ддд, J=12,0, 5,0 Гц), 3,35-3,20 (5H, м), 3,08 (3H, ушир. с), 2,05-1,90 (2H, м), 1,90-1,55 (3H, м).

Масс-спектр: 255 [M⁺]

(3) 1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-4-метансульфонилоксипиперидин

В раствор 1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-4-гидроксипиперидина (1,47 г, 5,76 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 17(2)) в метиленхлориде (60 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,82 мл, 10,6 ммоль) и триэтиламин (1,48 мл, 10,6 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли метанол на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (10:1), с получением 1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-4-метансульфонилоксипиперидина (1,38 г, выход 72%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,12 (1H, с), 5,05-4,90 (1H, м), 3,85-3,65 (2H, м), 3,60-3,40 (2H, м), 3,23 (3H, ушир. с), 3,08 (6H, ушир. с), 2,20-1,90 (4H, м).

Масс-спектр (FAB⁺): 334 [M+H]⁺

(4) 4-Ацетилтио-1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидин

В раствор 1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-4-метансульфонилоксипиперидина (1,33 г, 3,99 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 17(3)) в диметилформамиде (66 мл) добавляли тиоацетат калия (940 мг, 8,23 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (90° C) в течение 3,0 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:н-гексан (5:1 → 7:1), с получением 4-ацетилтио-1-(4-N,N-диметилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пиперидина (629 мг, выход 50%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,07 (1H, с), 3,90-3,78 (3H, м), 3,75-3,60 (2H, м), 3,40-3,15 (5H, м), 3,08 (3H, ушир. с), 2,32 (3H, с), 2,12-1,98 (2H, м), 1,82-1,60 (2H, м).

Масс-спектр (FAB⁺): 314 [M+H]⁺

Ссылочный пример 18

(3S)-3-Ацетилтио-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидин

(1) Этиловый эфир [(3R)-3-гидроксипирролидина-1-карботиоил]карбаминовой кислоты

Гидрохлорид (3R)-3-гидроксипирролидина (15 г, 121,4 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (450 мл) и добавляли этоксикарбонилизотиоцианат (15,7 мл) на ледяной бане. Температуру реакционной смеси доводили до комнатной в течение 10 минут и затем перемешивали в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток перекристаллизовывали из смеси этилацетат и н-гексан с получением этилового эфира [(3R)-3-гидроксипирролидин-1-карботиоил]карбаминовой кислоты (24,62 г, выход 93%) в виде желтых кристаллов.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,38-7,25 (1H, ушир. с), 4,35-3,63 (5H, м), 4,16 (2H, кв., J=6,8 Гц), 2,19-2,05 (2H, м), 1,30 (3H, т, J=6,8 Гц).

(2) (3R)-1-(4-Этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксипирролидин

В раствор гидрохлорида [(3R)-3-гидроксипирролидина-1-карботиоил]карбаминовой кислоты (24,6 г, 113 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 18(1)) в этаноле (125 мл) и дистиллированной воды (125 мл) добавляли гидроксид натрия (31,6 г, 789 ммоль), и смесь кипятили с обратным холодильником в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. В реакционную смесь добавляли раствор 4н хлориствого водорода в диоксане добавляли на ледяной бане до тех пор, пока pH реакционной смеси на становилась равной 7, добавляли этил 2-бромпируват (28,4 мл, 226 ммоль) и триэтиламин (31,7 мл, 226 ммоль), и реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:ацетонитрил (1:1 → 1:2), с получением (3R)-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксипирролидина (19,26 г, выход 70%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,39 (1H, с), 4,66-4,61 (1H, м), 4,36 (2H, кв., J=7,3 Гц), 3,72-3,65 (2H, м), 3,62-3,56 (2H, м), 2,23-2,15 (1H, м), 2,14-2,07 (1H, м), 1,37 (3H, т, J=7,3 Гц).

(3) (3R)-3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидин

В раствор (3R)-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксипирролидина (3,0 г, 12,4 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 18(2)) в диметилформамиде (90 мл) добавляли трет-бутилдифенилсилилхлорид (6,45 мл, 24,8 ммоль) и имидазол (1,69 г, 24,8 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этанол (2,59 мл) на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (4:1 → 1:1), с получением (3R)-3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидина (5,85 г, выход 90%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,69-7,60 (4H, м), 7,48-7,35 (6H, м), 7,39 (1H, с), 4,56-4,50 (1H, м), 4,12 (2H, кв., J=7,3 Гц), 3,77-3,70 (1H, м), 3,56-3,46 (3H, м), 2,06-1,90 (2H, м), 1,38 (3H, т, J=7,3 Гц), 1,05 (9H, с).

(4) (3R)-3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидин

В раствор (3R)-3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидина (300 мг, 0,624 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 18(3)) в смеси этанола (12 мл) и дистиллированной воды (3 мл) добавляли 1 н водный раствор гидроксида натрия (1,56 мл, 1,56 ммоль) при комнатной температуре, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 часов. После контроля завершения реакции, добавляли 1н водный растор соляной кислоты (1,8 мл) на ледяной бане до тех пор, пока pH реакционной смеси не становился равным 4-5, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением (3R)-3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидина (305 мг, выход 97%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,68-7,60 (4H, м), 7,48-7,35 (6H, м), 7,40 (1H, с), 4,57-4,50 (1H, м), 3,72-3,62 (1H, м), 3,50-3,36 (3H, м), 2,10-1,92 (2H, м), 1,05 (9H, с).

(5) (3R)-3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидин

В раствор (3R)-3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидина (910 мг, 2,01 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 18(4)) в диметилформамиде (30 мл) добавляли карбонилдиимидазол (652 мг, 4,02 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и реакционную смесь затем перемешивали на масляной бане (50° C) в течение 4 часов. После контроля завершения реакции, добавляли 28% водный раствор аммиака и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут.

Затем реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем с получением (3R)-3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-N-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидина (730 мг, выход 80%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,71-7,64 (4H, м), 7,48-7,38 (6H, м), 7,09-7,05 (1H, ушир. с), 5,50-5,44 (1H, ушир. с), 4,57-4,52 (1H, м), 3,72-3,66 (1H, м), 3,51-3,45 (1H, м), 3,45-3,43 (2H, м), 2,09-2,02 (1H, м), 2,08-1,93 (1H, м), 1,08 (9H, с).

(6) (3R)-1-(4-Карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксипирролидин

В раствор (3R)-3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидина (950 мг, 2,10 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 18(5)) в безводном тетрагидрофуране (20 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (2,52 мл, 2,52 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. После контроля завершения реакции реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1) → 10% метанол в этилацетате, с получением (3R)-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксипирролидина (428 мг, выход 96%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆): δ (м.д.) 7,42-7,36 (1H, ушир. с), 7,30-7,23 (1H, ушир. с), 7,27 (1H, с), 5,08 (1H, д, J=3,7 Гц), 4,42-4,37 (1H, м), 3,51 (1H, дд, J=11,0, 4,4 Гц), 3,90-3,43 (2H, м), 3,30-3,27 (1H, м), 2,14-2,01 (1H, м), 1,99-1,86 (1H, м).

(7) (3R)-1-(4-Карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксипирролидин и (3R)-1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксипирролидин

В раствор (3R)-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксипирролидина (290 мг, 1,36 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 18(6)), суспендированного в метиленхлориде (9 мл), добавляли метансульфонилхлорид (0,684 мл, 8,85 ммоль) и триэтиламин (1,24 мл, 8,85 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли метанол (0,33 мл) на ледяной бане, и затем полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента 5% метанол в этилацетате → 10% метанол в этилацетате, с получением (3R)-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксипирролидина (148 мг, выход 40%) в виде светло-желтого твердого вещества.

(3R)-1-(4-Карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилокси-пирролидин (a)

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,41 (1H, с), 7,10-6,98 (1H, ушир), 5,60-5,52 (1H, ушир. с), 5,50-5,40 (1H, м), 3,88-3,76 (2H, м), 3,65-3,60 (2H, м), 3,08 (3H, с), 2,50-2,41 (1H, м), 2,39-2,32 (1H, м).

(3R)-1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилокси-пирролидин (b)

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,23 (1H, с), 5,45-5,42 (1H, м), 3,88-3,76 (2H, м), 3,69-3,62 (2H, м), 3,08 (3H, с), 2,55-2,47 (1H, м), 2,43-2,32 (1H, м).

(8) (3S)-3-Ацетилтио-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидин

В раствор (3R)-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксипирролидина (190 мг, 0,652 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 18(7)) в ацетонитриле (6 мл) добавляли тиоацетат калия (223 мг, 1,96 ммоль) при комнатной температуре. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 4 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1) → этилацетат → 2% метанол в этилацетате, с получением (3S)-3-ацетилтио-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидина (135 мг, выход 77%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,37 (1H, с), 7,08-7,02 (1H, ушир. с), 5,50-5,44 (1H, ушир. с), 4,26-4,12 (1H, м), 3,94 (1H, дд, J=11,0, 6,6 Гц), 3,62-3,50 (2H, м), 3,44 (1H, дд, J=11,0, 5,1 Гц), 2,54-2,45 (1H, м), 2,36 (3H, с), 2,13-2,04 (1H, м).

Ссылочный пример 19

(3S)-3-Ацетилтио-1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)пирролидин

В раствор (3R)-1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксипирролидина (300 мг, 1,10 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 18(7)) в ацетонитриле (9 мл) добавляли тиоацетат калия (376 мг, 3,30 ммоль) при комнатной температуре. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (5:1 → 1:1), с получением (3S)-3-ацетилтио-1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)пирролидина (137 мг, выход 50%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,19 (1H, с), 4,19-4,12 (1H, м), 3,94 (1H, дд, J=11,0, 6,6 Гц), 3,64-3,53 (2H, м), 3,43 (1H, дд, J=11,0, 5,1 Гц), 2,55-2,48 (1H, м), 2,36 (3H, с), 2,15-2,06 (1H, м).

Ссылочный пример 20

(3R)-3-Ацетилтио-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидин

(1) (3R)-1-(4-Этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксипирролидин

В раствор (3R)-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксипирролидина (970 мг, 4,00 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 18(2)) в метиленхлориде (30 мл) добавляли метансульфонилхлорид (1,24 мл, 16,0 ммоль) и триэтиламин (2,24 мл, 16,0 ммоль) на ледяной бане, и затем смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, добавляли этанол (0,81 мл) и затем полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:ацетонитрил (4:1 → 1:1), с получением (3R)-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксипирролидина (1,00 г, выход 78%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,43 (1H, с), 5,44-5,41 (1H, м), 4,36 (2H, кв., J=7,0 Гц), 3,92 (1H, дд, J=12,5, 1,5 Гц), 3,85 (1H, дд, J=12,5, 3,7 Гц), 3,72-3,65 (2H, м), 3,06 (3H, с), 2,52-2,46 (1H, м), 2,40-2,31 (1H, м), 1,38 (3H, т, J=7,0 Гц).

(2) (3S)-3-Ацетил-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидин

В раствор (3R)-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксипирролидина (1,0 г, 3,12 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 20(1)) в диметилформамиде (30 мл) добавляли тиоацетат калия (919 мг, 9,36 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 5,5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:ацетонитрил (3:1 → 1:1), с получением (3S)-3-ацетил-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидина (877 мг, выход 99%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,41 (1H, с), 5,45-5,41 (1H, м), 4,36 (2H, кв., J=7,3 Гц), 3,44 (1H, дд, J=11,7, 5,1 Гц), 3,70-3,60 (3H, м), 2,35-2,17 (2H, м), 2,05 (3H, с), 1,38 (3H, т, 7,3 Гц).

(3) (3S)-1-(4-Этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксипирролидин

В раствор (3S)-3-ацетил-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидина (5,0 г, 17,6 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 20(2)) в этаноле (150 мл) добавляли этоксид натрия (60 мг, 0,879 ммоль) при комнатной температуре, и смесь перемешивали в течение ночи при тех же условиях. После контроля завершения реакции, добавляли раствор 4 н хлористого водорода в 1,4-диоксане (0,22 мл) для нейтрализации реакционной смеси. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:ацетонитрил (1:1 → 1:2), с получением (3S)-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксипирролидина (4,16 г, выход 98%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,39 (1H, с), 4,67-4,61 (1H, м), 4,36 (2H, кв., J=7,3 Гц), 3,72-3,56 (4H, м), 2,24-2,07 (2H, м), 1,37 (3H, т, J=7,3 Гц).

(4) (3S)-3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидин

В раствор (3S)-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксипирролидина (4,1 г, 16,9 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 20(3)) в диметилформамиде (120 мл) добавляли трет-бутилдифенилсилилхлорид (8,8 мл, 33,8 ммоль) и имидазол (2,3 г, 33,8 ммоль) на ледяной бане, и затем температуру реакционной смесь доводили до комнатной в течение 10 минут и перемешивали в течение в течение ночи. После контроля завершения реакции, добавляли этанол (1,18 мл) на ледяной бане, и затем реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (4:1 → 1:1), с получением (3S)-3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидина (7,60 г, выход 94%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,68-7,61 (4H, м), 7,52-7,35 (6H, м), 7,37 (1H, с), 4,56-4,51 (1H, м), 4,36 (2H, кв., J=7,0 Гц), 3,77-3,69 (1H, м), 3,58-3,48 (3H, м), 2,05-1,88 (2H, м), 1,38 (3H, т, J=7,0 Гц), 1,05 (9H, с).

(5) (3S)-3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидин

В раствор (3S)-3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидина (5,0 г, 10,4 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 20(4)) в смеси этанола (200 мл) и дистиллированной воды (50 мл) добавляли 1н водный раствор гидроксида натрия (26,0 мл, 26,0 ммоль) при комнатной температуре, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 7,5 часов. После контроля завершения реакции, добавляли 1н водный раствор соляной кислоты на ледяной бане до тех пор, пока pH реакционной смеси не становилась 4-5, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением (3S)-3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидина (4,71 г, выход 100%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,70-7,52 (4H, м), 7,52-7,25 (6H, м), 7,40 (1H, с), 4,57-4,40 (1H, м), 3,68-3,55 (1H, м), 3,48-3,24 (3H, м), 2,04-1,86 (2H, м), 1,07 (9H, с).

(6) (3S)-3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидин

В раствор (3S)-3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидина (4,7 г, 10,4 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 20(5)) в диметилформамиде (140 мл) добавляли карбонилдиимидазол (3,37 г, 20,8 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и затем реакционную смесь перемешивали на масляной бане (50° C) в течение 3,5 часов. После контроля завершения реакции, добавляли 28% водный раствор аммония и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:ацетонитрил (4:1 → 2:1), с получением (3S)-3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-N-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидина (3,14 г, выход 67%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,68-7,62 (4H, м), 7,48-7,36 (6H, м), 7,34 (1H, с), 7,08-7,05 (1H, ушир. с), 5,49-5,44 (1H, ушир. с), 4,57-4,51 (1H, м), 2,10-1,93 (2H, м), 1,06 (9H, с).

(7) (3S)-1-(4-Карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксипирролидин

В раствор (3S)-3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидина (3,1 г, 6,86 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 20(6)) в безводном тетрагидрофуране (90 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (8,24 мл, 8,24 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → 10% метанол в этилацетате, с получением (3S)-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксипирролидина (1,42 г, выход 98%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆): δ (м.д.) 7,43-7,36 (1H, ушир. с), 7,74-7,22 (1H, ушир. с), 7,27 (1H, с), 5,09 (1H, д, J=3,7 Гц), 4,44-4,38 (1H, м), 3,51 (1H, дд, J=11,0, 4,4 Гц), 3,49-3,42 (2H, м), 3,33-3,28 (1H, м), 2,15-2,02 (1H, м), 1,97-1,89 (1H, м).

(8) (3S)-1-(4-Карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксипирролидин

В раствор (3S)-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксипирролидина (1,42 г, 6,66 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 20(7)), суспендированного в смеси метиленхлорида (40 мл) и пиридина (9 мл), добавляли метансульфонилхлорид (2,58 мл, 33,3 ммоль) и триэтиламин (4,67 мл, 33,3 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, добавляли метанол (1,2 мл) на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента 5% метанол в этилацетате → 10% метанол в этилацетате, с получением (3S)-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксипирролидина (1,15 г, выход 60%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,41 (1H, с), 7,08-7,02 (1H, ушир. с), 5,57-5,46 (1H, ушир. с), 5,45-5,43 (1H, м), 3,86 (1H, дд, J=12,5 Гц), 3,80 (1H, дд, J=12,5, 4,4 Гц), 3,68-3,60 (2H, м), 3,08 (3H, с), 2,52-2,40 (1H, м), 2,39-2,31 (1H, м).

(9) (3R)-3-Ацетилтио-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидин

В раствор (3S)-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксипирролидина (1,15 г) (полученного, как описано в ссылочном примере 20(8)) в ацетонитриле (35 мл) добавляли тиоацетат калия (1,35 г, 11,8 ммоль) при комнатной температуре, и смесь кипятили с обратным холодильником в течение 6 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → 2% метанол в этилацетате, с получением (3R)-3-ацетилтио-1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)пирролидина (962 мг, выход 90%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,37 (1H, с), 7,13-6,99 (1H, ушир. с), 5,59-5,45 (1H, ушир. с), 4,19-4,09 (1H, м), 3,94 (1H, дд, J=11,0, 6,6 Гц), 3,61-3,50 (2H, м), 3,44 (1H, дд, J=11,0, 5,1 Гц), 2,54-2,45 (1H, м), 2,37 (3H, с), 2,14-2,05 (1H, м).

Ссылочный пример 21

3-Ацетилтио-1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

(1) 1-Карбамоил-3-гидроксиазетидин

Раствор N-бензгидрил-3-гидроксиазетидина (5,36 г, 22,4 ммоль) в метаноле (250 мл) подвергали катилитическому гидрированию в присутствии 10% гидроксида палладия (5,36 г) на водяной бане (50° C) в атмосфере водорода под давлением 1 атмосфера. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали для удаления катализатора. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток разделяли между этилацетатом и дистиллированной водой. Органический слой экстрагировали дистиллированной водой. Полученный водный слой концентрировали при пониженном давлении с получением продукта в виде красновато-коричнывого масла.

Затем продукт сушили при пониженном давлении и растворяли в смеси уксусной кислоты (10 мл) и дистиллированной воды (20 мл), добавляли водный раствор (20 мл) цианида натрия (2,91 г) при комнатной температуре и реакционную смесь перемешивали в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали. Полученный остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента метиленхлорид:метанол (5:1), с получением 1-карбамоил-3-гидроксиазетидина в виде бесцветного масла.

 ¹H-ЯМР (500 МГц, CD₃OD): δ (м.д.) 4,54-4,50 (1H, м), 4,16-4,12 (2H, м), 3,74 (2H, дд, J=4,4, 9,7 Гц).

(2) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-карбамоилазетидин

В раствор 1-карбамоил-3-гидроксиазетидина (полученного, как описано в ссылочном примере 21(1)) в диметилформамиде (100 мл) добавляли трет-бутилдифенилсилилхлорид (18,0 мл, 66,9 ммоль) и имидазол (4,55 г, 66,9 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли этанол (1 мл) на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (10:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-карбамоилазетидина (1,45 г, общий выход 18%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,60 (4H, д, J=8,1 Гц), 7,46-7,36 (6H, м), 4,59-4,54 (1H, м), 4,26 (2H, ушир. с), 3,96 (2H, т, J=8,8 Гц), 3,91 (2H, дд, J=5,1, 8,8 Гц), 1,06 (9H, с).

(3) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-карбамоилазетидина (3,47 г, 9,79 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 21(2)) в тетрагидрофуране (170 мл) добавляли гидрокарбонат натрия (4,11 г, 48,95 ммоль) и этил-2-бромпируват (2,5 мл, 19,58 ммоль), и реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 8 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (5:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (2,96 г, выход 45%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,76 (1H, с), 7,60 (4H, д, J=7,8 Гц), 7,46-7,37 (6H, м), 4,71-4,67 (1H, м), 4,34 (2H, кв., J=6,8 Гц), 4,14 (2H, т, J=8,8 Гц), 4,09 (2H, дд, J=5,9, 9,8 Гц), 1,34 (3H, т, J=6,8 Гц), 1,05 (9H, с).

(4) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (325 мг, 0,72 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 21(3)) в бензоле (7 мл) добавляли раствор 0,67M метиламина-триметилалюминия в бензоле (2,7 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (20 мл) на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (236 мг, выход 75%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,72 (1H, с), 7,61 (4H, д, J=7,8 Гц), 7,47-7,38 (6H, м), 6,88 (1H, ушир.с), 4,74-4,68 (1H, м), 4,10 (2H, т, J=8,7 Гц), 4,04 (2H, дд, J=5,6, 8,8 Гц), 2,92 (3H, д, J=5,0 Гц), 1,06 (9H, с).

(5) 1-(4-N-Метилкарбамоил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (662 мг, 1,52 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 21(4)) в тетрагидрофуране (33 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (1,5 мл, 1,5 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (10:1), с получением 1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (210 мг, выход 70%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CD₃OD): δ (м.д.) 7,83 (1H, с), 4,86-4,66 (1H, м), 4,33 (2H, дд, J=6,6, 8,1 Гц), 3,93 (2H, дд, J=5,1, 8,8 Гц), 2,85 (3H, с).

(6) 1-(4-N-Метилкарбамоил-1,3-оксазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (209 мг, 1,06 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 21(5)) в смеси метиленхлорида (5 мл) и пиридина (15 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,41 мл, 5,30 ммоль) и триэтиламин (0,74 мл, 5,30 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, добавляли метанол (1 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (10:1), с получением 1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-оксазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (253 мг, выход 86%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,78 (1H, с), 6,80 (1H, ушир.с), 5,41-5,35 (1H, м), 4,48 (2H, дд, J=6,6, 10,3 Гц), 4,30 (2H, дд, J=4,4, 10,3 Гц), 3,10 (3H, с), 2,94 (3H, д, J=5,1 Гц).

(7) 3-Ацетилтио-1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин

В раствор 1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-оксазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (252 мг, 0,92 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 21(6)) в диметилформамиде (12 мл) добавляли тиоацетат калия (0,63 г, 5,52 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 8 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат, с получением 3-ацетилтио-1-(4-N-метилкарбамоил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (136 мг, выход 58%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (500 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,75 (1H, с), 6,79 (1H, ушир.с), 4,55 (2H, т, J=8,4 Гц), 4,43-4,37 (1H, м), 4,02 (2H, дд, J=5,8, 8,9 Гц), 2,94 (3H, д, J=5,1 Гц), 2,36 (3H, с).

Ссылочный пример 22

3-Ацетилтио-1-(4-N-карбамоил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбамоил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (1,70 г, 3,77 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 21(3)) в бензоле (38 мл) добавляли раствор 0,67M метиламина-триметилалюминия в бензоле (13,7 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота, и затем смесь перемешивали на водяной бане (50° C) в течение 4 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (100 мл) на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат, с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбамоил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (0,83 г, выход 52%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (500 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,75 (1H, с), 7,61 (4H, д, J=6,7 Гц), 7,47-7,36 (6H, м), 6,72 (1H, ушир.с), 5,69 (1H, ушир.с), 4,74-4,69 (1H, м), 4,12 (2H, т, J=6,7 Гц), 4,05 (2H, дд, J=5,0, 7,8 Гц), 1,06 (9H, с).

(2) 1-(4-Карбамоил-1,3-оксазол-2-ил)-3-гидроксиазетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбамоил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (1,30 г, 3,08 ммоль) в тетрагидрофуране (60 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (3,1 мл) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (10:1), с получением 1-(4-карбамоил-1,3-оксазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (0,43 г, выход 75%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CD₃OD): δ (м.д.) 7,87 (1H, с), 4,70-4,65 (1H, м), 4,34 (2H, дд, J=6,6, 9,5 Гц), 3,94 (2H, дд, J=5,9, 9,5 Гц).

(3) 1-(4-Карбамоил-1,3-оксазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-(4-карбамоил-1,3-оксазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (423 мг, 2,31 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 22(2)) в смеси метиленхлорида (10 мл) и пиридина (30 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,90 мл, 11,55 ммоль) и триэтиламин (1,60 мл, 11,55 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли метанол (1 мл) на ледяной бане и затем полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (10:1), с получением 1-(4-карбамоил-1,3-оксазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (470 мг, выход 78%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CD₃OD): δ (м.д.) 7,91 (1H, с), 5,45-5,42 (1H, м), 4,51 (2H, дд, J=6,6, 9,5 Гц), 4,28 (2H, дд, J=4,4, 9,5 Гц), 3,16 (3H, с).

(4) 3-Ацетилтио-1-(4-карбамоил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин

В раствор 1-(4-карбамоил-1,3-оксазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (469 мг, 1,80 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 22(3)) в диметилформамиде (23 мл) добавляли тиоацетат калия (1,23 г, 10,80 ммоль) при комнатной температуре, и смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 8 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (10:1), с получением 3-ацетилтио-1-(4-карбамоил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (275 мг, выход 63%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,79 (1H, с), 6,69 (1H, ушир.с), 5,60 (1H, ушир.с), 4,56 (2H, т, J=8,8 Гц), 4,44-4,37 (1H, м), 4,03 (2H, дд, J=5,1, 8,8 Гц), 2,36 (3H, с).

Ссылочный пример 23

3-Ацетилтио-1-(4-циано-1,3-оксазол-2-ил)азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-циано-1,3-оксазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (357 г,0,79 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 21(3)) в бензоле (8 мл) добавляли раствор 0,67M метиламина-триметилалюминия в бензоле (2,8 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь перемешивали на водяной бане (60° C) в течение 7 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (10 мл) на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (5:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-циано-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (130 мг, выход 41%) в виде бесцветного масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,66 (1H, с), 7,60 (4H, д, J=8,1 Гц), 7,48-7,38 (6H, м), 4,73-4,70 (1H, м), 4,14 (2H, дд, J=6,6, 8,8 Гц), 4,08 (2H, дд, J=5,1, 9,5 Гц), 1,06 (9H, с).

(2) 1-(4-циано-1,3-оксазол-2-ил)-3-гидроксиазетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-циано-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (0,61 г, 1,51 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 23(1)) в тетрагидрофуране (30 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (1,5 мл) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат, с получением 1-(4-циано-1,3-оксазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (0,21 г, выход 86%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,70 (1H, с), 4,83-4,81 (1H, м), 4,40 (2H, дд, J=6,6, 9,5 Гц), 4,06 (2H, дд, J=4,4, 8,8 Гц), 2,26 (1H, д, J=5,9 Гц).

(3) 1-(4-циано-1,3-оксазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-(4-циано-1,3-оксазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (214 мг, 1,30 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 23(2)) в смеси метиленхлорида (10 мл) и пиридина (5 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,50 мл, 6,50 ммоль) и триэтиламин (0,90 мл, 6,50 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, добавляли метанол (1 мл) на ледяной бане и затем полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат, с получением 1-(4-циано-1,3-оксазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (310 мг, выход 98%) в виде бесцветного масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,76 (1H, с), 5,42-5,36 (1H, м), 4,53 (2H, дд, J=6,6, 11,0 Гц), 4,34 (2H, дд, J=4,4, 11,0 Гц), 3,11 (3H, с).

(4) 3-Ацетилтио-1-(4-циано-1,3-оксазол-2-ил)азетидин

В раствор 1-(4-циано-1,3-оксазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (309 мг, 1,27 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 23(3)) в диметилформамиде (15 мл) добавляли тиоацетат калия (0,87 г, 7,62 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (2:1), с получением 3-ацетилтио-1-(4-циано-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (157 мг, выход 55%) в виде бесцветного масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,72 (1H, с), 4,60 (2H, т, J=8,8 Гц), 4,45-4,38 (1H, м), 4,07 (2H, дд, J=5,9, 8,8 Гц), 2,37 (3H, с).

Ссылочный пример 24

3-трет-Ацетилтио-1-(4-циано-1,3-оксазол-2-ил)азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-азетидинокарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,0 г, 2,14 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(1)) в бензоле (50 мл) добавляли раствор 0,67M азетидина-триметилалюминия в бензоле (4,6 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 4 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (50 мл) и этилацетат (100 мл) на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-азетидинокарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (0,60 г, выход 55%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,62 (4H, дд, J=8,0, 1,4 Гц), 7,51-7,36 (6H, м), 7,42 (1H, с), 4,80-4,68 (1H, м), 4,56 (2H, т, J=7,7 Гц), 4,16 (2H, т, J=7,7 Гц), 4,09 (2H, т, J=8,7 Гц), 4,00 (2H, дд, J=8,7, 4,9 Гц), 2,28 (2H, квинтет, J=7,7 Гц), 1,06 (9H, с).

(2) 1-(4-Азетидинокарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-азетидинокарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (0,60 г, 1,18 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 24(1)) в безводном тетрагидрофуране (25 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (1,42 мл, 1,42 ммоль) на ледяной бане, и затем смесь перемешивали в течение 30 минут. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента 5% метанол в этилацетате, с получением 1-(4-азетидинокарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (242 мг, выход 86%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,35 (1H, с), 4,86-4,78 (2H, т, J=7,7 Гц), 4,30 (2H, дд, J=9,5, 6,6 Гц), 4,16 (2H, т, J=7,7 Гц), 3,93 (2H, дд, J=9,5, 5,0 Гц), 2,29 (2H, квинтет, J=7,7 Гц), 1,95-1,5 (тупой с, включая 1H группы OH).

(3) 1-(4-Азетидинокарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-(4-азетидинокарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (242 мг, 1,01 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 24(2)) в метиленхлориде (10 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,43 мл, 3,04 ммоль) и триэтиламин (0,24 мл, 3,04 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. К остатку добавляли изопропиловый эфир, и полученную смесь фильтровали с получением 1-(4-азетидинокарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (302 мг, выход 94%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,44 (1H, с), 5,46-5,38 (1H, м), 4,58 (2H, т, J=7,8 Гц), 4,43 (2H, ддд, J=9,6, 6,6, 1,0 Гц), 4,24 (1H, ддд, J=9,6, 4,6, 1,0 Гц), 4,17 (2H, т, J=7,8 Гц), 3,10 (3H, с), 2,30 (2H, квинтет, J=7,8 Гц).

(4) 3-Ацетилтио-1-(4-азетидинокарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 1-(4-азетидинокарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (302 мг, 0,95 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 24(3)) в диметилформамиде (10 мл) добавляли тиоацетат калия (0,65 г, 5,70 ммоль) при комнатной температуре, и реакционную смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 6 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (2:1), с получением 3-ацетилтио-1-(4-азетидинокарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (247 мг, выход 87%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,40 (1H, с), 4,57 (2H, т, J=7,8 Гц), 4,51 (2H, т, J=8,4 Гц), 4,46-4,36 (1H, м), 4,16 (2H, т, J=7,8 Гц), 3,96 (2H, дд, J=8,4, 5,3 Гц), 2,36 (3H, с), 2,29 (2H, квинтет, J=7,8 Гц).

Ссылочный пример 25

3-Ацетилтио-1-(4-тиоморфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-тиоморфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,0 г, 2,14 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(1)) в бензоле (50 мл) добавляли раствор 0,67M тиоморфолина-триметилалюминия в бензоле (4,6 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 4 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (50 мл) и этилацетат (100 мл) на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-тиоморфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,16 г, выход 98%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,32 (4H, дд, J=7,9, 1,4 Гц), 7,54-7,35 (6H, м), 7,07 (1H, с), 4,80-4,70 (1H, м), 4,10 (2H, дд, J=8,8, 6,5 Гц), 4,10-3,86 (6H, м, включая 2H, дд при 4,00, J=8,8, 4,8 Гц), 2,80-2,55 (4H, м), 1,06 (9H, с).

(2) 1-(4-тиоморфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-тиоморфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,16 г, 2,10 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 25(1)) в безводном тетрагидрофуране (35 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (2,52 мл, 2,52 ммоль), и реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, и остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат, с получением 1-(4-тиоморфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (599 мг, выход 100%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,09 (1H, с), 4,89-4,77 (1H, м), 4,32 (2H, дд, J=9,1, 6,7 Гц), 4,10-3,90 (6H, м, включая 2H, дд при 3,96, J=9,1, 4,3 Гц), 2,80-2,58 (4H, м), 2,50 (1H, ушир. с).

(3) 1-(4-тиоморфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-(4-тиоморфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (599 г, 2,50 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 25(2)) в метиленхлориде (30 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,49 мл, 6,30 ммоль) и триэтиламин (0,88 мл, 6,30 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 40 минут. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента 5% метанол в этилацетате, с получением 1-(4-тиоморфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (709 мг, выход 93%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,17 (1H, с), 5,46-5,38 (1H, м), 4,45 (2H, дд, J=9,8, 6,7 Гц), 4,26 (2H, ддд, J=9,8, 4,4, 1,1 Гц), 4,08-3,93 (4H, м), 3,11 (3H, с), 2,80-2,60 (4H, м).

(4) 3-Ацетилтио-1-(4-тиоморфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 1-(4-тиоморфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (709 г, 1,95 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 25(3)) в диметилформамиде (20 мл) добавляли тиоацетат калия (1,34 г, 11,7 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:н-гексан:метиленхлорид (1:1:1), с получением 3-ацетилтио-1-(4-тиоморфолинoкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (413 мг, выход 64%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,13 (1H, с), 4,53 (2H, т, J=8,4 Гц), 4,48-4,40 (1H, м), 4,13-3,86 (6H, м, включая 2H, дд при 3,98, J=8,4, 5,2 Гц), 2,80-2,60 (4H, м), 2,36 (3H, с).

Ссылочный пример 26

3-Ацетилтио-1-(4-пирролидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-пирролидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,00 г, 2,14 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(1)) в бензоле (50 мл) добавляли раствор 0,67M пирролидина-триметилалюминия в бензоле (7,6 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 6 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (50 мл) и этилацетат (100 мл) на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После добавления этилацетата, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-пирролидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (775 мг, выход 78%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,70-7,56 (4H, м), 7,35-7,50 (6H, м), 7,21 (1H, с), 4,80-4,70 (1H, м), 4,18-4,06 (2H, м), 4,00 (2H, дд, J=8,6, 5,1 Гц), 3,80 (2H, т, J=6,5 Гц), 3,60 (2H, т, J=6,5 Гц), 1,83-1,98 (4H, м), 1,06 (9H, с).

(2) 3-Гидрокси-1-(4-пирролидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-пирролидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (775 мг, 1,58 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 26(1)) в безводном тетрагидрофуране (30 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (2,01 мл, 2,01 ммоль) на ледяной бане, и затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → этилацетат:метанол (20:1), с получением 3-гидрокси-1-(4-пирролидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (290 мг, выход 72%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,42 (1H, с), 4,88-4,78 (1H, м), 4,32 (2H, дд, J=9,0, 6,8 Гц), 3,95 (2H, дд, J=9,0, 4,3 Гц), 3,82 (2H, т, J=6,5 Гц), 3,61 (2H, т, J=6,5 Гц), 2,43 (1H, д, J=6,8 Гц), 1,83-1,97 (4H, м).

(3) 3-Метансульфонилокси-1-(4-пирролидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-гидрокси-1-(4-пирролидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (290 мг, 1,14 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 26(2)) в метиленхлориде (9 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,30 мл, 5,12 ммоль) и триэтиламин (0,70 мл, 5,12 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента метиленхлорид:этилацетат (1:1) → этилацетат, с получением 3-метансульфонилокси-1-(4-пирролидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (335 мг, выход 89%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,33 (1H, с), 5,48-5,38 (1H, м), 4,45 (2H, ддд, J=10,1, 6,6, 1,2 Гц), 4,26 (2H, ддд, J=10,1, 4,4, 1,1 Гц), 3,82 (2H, т, J=6,6 Гц), 3,62 (2H, т, J=6,6 Гц), 3,10 (3H, с), 2,00-1,83 (4H, м).

(4) 3-Ацетилтио-1-(4-пирролидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-метансульфонилокси-1-(4-пирролидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (335 мг, 1,01 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 26(3)) в диметилформамиде (15 мл) добавляли тиоацетат калия (1,10 г, 8,80 ммоль) при комнатной температуре, и реакционную смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат, с получением 3-ацетилтио-1-(4-пирролидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (235 мг, выход 75%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,28 (1H, с), 4,52 (2H, дд, J=8,4, 8,4 Гц), 4,39-4,48 (1H, м), 3,98 (2H, дд, J=8,4, 5,2 Гц), 3,82 (2H, т, J=6,5 Гц), 3,61 (2H, т, J=6,5 Гц), 2,36 (3H, с), 1,98-1,82 (4H, м).

Ссылочный пример 27

3-Ацетилтио-1-(4-пиперидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-пиперидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,00 г, 2,14 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(1)) в бензоле (50 мл) добавляли раствор 0,67M пиперидина-триметилалюминия в бензоле (7,3 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 5 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (50 мл) и этилацетат (100 мл) на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После добавления этилацетата, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:2), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-пиперидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (607 мг, выход 56%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,61 (4H, дд, J=6,2 Гц), 7,35-7,50 (6H, м), 6,95 (1H, с), 4,78-4,70 (1H, м), 4,17-4,05 (2H, м), 4,01 (2H, дд, J=8,6, 4,9 Гц), 3,64 (4H, т, J=5,4 Гц), 1,75-1,48 (6H, м), 1,06 (9H, с).

(2) 3-Гидрокси-1-(4-пиперидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-пиперидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (607 мг, 1,20 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 27(1)) в безводном тетрагидрофуране (25 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (1,40 мл, 1,40 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → этилацетат:метанол (9:1), с получением 3-гидрокси-1-(4-пиперидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (310 мг, выход 97%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 6,97 (1H, с), 4,87-4,77 (1H, м), 4,33 (2H, ддд, J=9,8, 6,6, 1,1 Гц), 3,96 (2H, дд, J=9,8, 4,4 Гц), 3,57-3,72 (4H, т, J=5,4 Гц), 1,81-1,45 (6H, м).

(3) 3-Метансульфонилокси-1-(4-пиперидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-гидрокси-1-(4-пиперидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (310 мг, 1,16 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 27(2)) в метиленхлориде (10 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,27 мл, 3,48 ммоль) и триэтиламин (0,49 мл, 3,48 ммоль) на ледяной бане, и затем смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат, с получением 3-метансульфонилокси-1-(4-пиперидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (346 мг, выход 86%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,06 (1H, с), 5,37-5,47 (1H, м), 4,46 (2H, дд, J=9,8, 6,7 Гц), 4,27 (2H, дд, J=9,8, 4,3 Гц), 3,65 (4H, т, J=5,2 Гц), 3,10 (3H, т, J=5,2 Гц), 1,78-1,47 (6H, м).

(4) 3-Ацетилтио-1-(4-пиперидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-метансульфонилокси-1-(4-пиперидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (346 мг, 1,00 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 27(3)) в диметилформамиде (15 мл) добавляли тиоацетат калия (687 г, 6,01 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали на масляной бане (90° C) в течение 4 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат, с получением 3-ацетилтио-1-(4-пиперидинкарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (276 мг, выход 85%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,02 (1H, с), 4,54 (2H, дд, J=8,5 Гц), 4,39-4,49 (1H, м), 3,99 (2H, дд, J=8,5, 5,4 Гц), 3,65 (4H, т, J=5,4 Гц), 2,36 (3H, с), 1,90-1,40 (6H, м).

Ссылочный пример 28

3-Ацетилтио-1-(4-N-циклопентилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-N-циклопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,00 г, 2,14 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(1)) в бензоле (50 мл) добавляли раствор 0,67M циклопропиламина-триметилалюминия в бензоле (7,20 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 2 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (50 мл) и этилацетат (100 мл) на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После добавления этилацетата, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:2), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-N-циклопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (979 мг, выход 90%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,70-7,60 (4H, м), 7,33-7,50 (6H, м), 7,36 (1H, с), 4,80-4,68 (1H, м), 4,18-4,06 (3H, м), 4,02 (2H, дд, J=8,2, 5,8 Гц), 3,80-3,70 (1H, м), 1,06 (9H, с), 0,83 (1H, т, J=6,9 Гц), 0,82 (1H, т, J=6,9 Гц), 0,70-0,58 (2H, м).

(2) 1-(4-N-Циклопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-N-циклопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (907 мг, 1,94 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 28(1)) в безводном тетрагидрофуране (40 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (2,30 мл, 2,30 ммоль) на ледяной бане, и затем смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат, с получением 1-(4-N-циклопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (367 мг, выход 81%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,37 (1H, с), 7,23 (1H, с), 4,67-4,80 (1H, м), 4,32 (2H, дд, J=9,0, 6,7 Гц), 3,96 (2H, дд, J=9,0, 4,3 Гц), 2,82-2,70 (1H, м), 0,84 (1H, т, J=7,1 Гц), 0,83 (1H, т, J=7,1 Гц), 0,55-0,70 (2H, м).

(3) 1-(4-N-Циклопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-(4-N-циклопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (376 мг, 1,57 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 28(2)) в метиленхлориде (10 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,36 мл, 4,71 ммоль) и триэтиламин (0,66 мл, 4,71 ммоль) на ледяной бане, и затем реакционную смесь перемешивали в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:1), с получением 1-(4-N-циклопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (343 мг, выход 88%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,45 (1H, с), 7,18 (1H, с), 5,48-5,36 (1H, м), 4,44 (2H, дд, J=10,2, 6,6 Гц), 4,26 (2H, дд, J=10,2, 4,4 Гц), 3,11 (3H, с), 2,91-2,79 (1H, м), 0,85 (1H, д, J=6,9 Гц), 0,84 (1H, д, J=6,9 Гц), 0,72-0,66 (2H, м).

(4) 3-Ацетилтио-1-(4-N-циклопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 1-(4-N-циклопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (433 мг, 1,31 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 28(3)) в диметилформамиде (20 мл) добавляли тиоацетат калия (895 мг, 7,84 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (90° C) в течение 5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:1), с получением 3-ацетилтио-1-(4-N-циклопропилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (343 мг, выход 88%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,14 (1H, с), 7,20 (1H, ушир. с), 4,52 (2H, т, J=8,6 Гц), 4,49-4,38 (1H, м), 3,98 (2H, дд, J=8,6, 5,9 Гц), 2,90-2,82 (1H, м), 2,36 (3H, с), 0,84 (1H, т, J=7,0 Гц), 0,83 (1H, т, J=7,0 Гц), 0,70-0,56 (2H, м).

Ссылочный пример 29

3-Ацетилтио-1-(4-N-циклобутилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-N-циклобутилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-N-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,00 г, 2,14 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(1)) в бензоле (50 мл) добавляли раствор 0,67M циклобутиламина-триметилалюминия в бензоле (7,30 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 2 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (50 мл) и этилацетат (100 мл) на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После добавления этилацетата, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-N-циклобутилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (965 мг, выход 87%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,62 (4H, д, J=8,0 Гц), 7,28-7,39 (6H, м), 7,34 (1H, с), 4,70-4,80 (1H, м), 4,58-4,46 (1H, м), 4,11 (2H, дд, J=8,8, 6,5 Гц), 4,02 (2H, дд, J=8,8, 4,0 Гц), 2,35-2,20 (2H, м), 2,05-1,92 (2H, м), 1,69-1,80 (2H, м), 1,07 (9H, с).

(2) 1-(4-N-Циклобутилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-N-циклобутилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (966 мг, 1,86 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 29(1)) в безводном тетрагидрофуране (40 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (2,20 мл, 2,20 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:1) → этилацетат, с получением 1-(4-N-циклобутилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (433 мг, выход 95%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,35 (1H, с), 4,89-4,78 (1H, м), 4,60-4,45 (1H, м), 4,34 (2H, дд, J=9,3, 6,7 Гц), 3,96 (2H, дд, J=9,3, 6,7 Гц), 2,32-2,48 (2H, м), 2,48-2,32 (1H, м), 1,72-1,68 (2H, м).

(3) 1-(4-N-Циклобутилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-(4-N-циклобутилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (433 мг, 1,71 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 29(2)) в метиленхлориде (10 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,30 мл, 5,12 ммоль) и триэтиламин (0,70 мл, 5,12 ммоль) на ледяной бане, и реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат, с получением 1-(4-N-циклобутилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (567 мг, выход 100%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,43 (1H, с), 5,48-5,38 (1H, м), 4,60-4,38 (3H, м, включая 4,47 (2H, дд, J=9,6, 6,6 Гц)), 4,28 (2H, дд, J=9,6, 4,6 Гц), 3,11 (3H, с), 2,48 – 2,33 (2H, м), 2,07-1,92 (2H, м), 1,85-1,68 (2H, м).

(4) 3-Ацетилтио-1-(4-N-циклобутилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 1-(4-N-циклобутилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (567 мг, 1,71 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 29(3)) в диметилформамиде (10 мл) добавляли тиоацетат калия (1,17 г, 10,3 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (90° C) в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:3), с получением 3-ацетилтио-1-(4-N-циклобутилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (318 мг, выход 75%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,33 (1H, с), 4,62-4,37 (4H, м, включая 4,54 (2H, т, J=8,6 Гц), 4,00 (2H, дд, J=8,6, 2,5 Гц)), 2,31-2,48 (5H,м, включая 2,37 (3H, с)), 2,07-1,93 (2H, м), 1,84-1,67 (2H, м).

Ссылочный пример 30

3-Ацетилтио-1-[4-(4-метилпиперазин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-[4-(4-метилпиперазин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,00 г, 2,14 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(1)) в толуоле (50 мл) добавляли раствор 0,67M 1-метилпиперазина-триметилалюминия в толуоле (7,40 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 3 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (50 мл) и этилацетат (100 мл) на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После добавления этилацетата, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (10:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-[4-(4-метилпиперазин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (941 мг, выход 85%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,62 (4H, дд, J=8,0, 1,4 Гц), 7,50-7,36 (6H, м), 7,08 (1H, с), 4,10 (2H, дд, J=10,3, 6,9 Гц), 4,00 (2H, дд, J=10,3, 5,0 Гц)), 3,98-3,65 (4H, м), 2,63-2,42 (4H, м), 2,37 (3H, м), 1,06 (9H, с).

(2) 3-Гидрокси-1-[4-(4-метилпиперазин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-[4-(4-метилпиперазин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (941 мг, 1,81 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 30(1)) в безводном тетрагидрофуране (47 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (2,17 мл, 2,17 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (3:1), с получением 3-гидрокси-1-[4-(4-метилпиперазин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (422 мг, выход 83%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,01 (1H, с), 4,88-4,80 (1H, м), 4,26 (2H, дд, J=8,6, 7,1 Гц), 3,96 (2H, дд, J=8,6, 4,8 Гц), 3,89-3,68 (4H, м), 2,80-2,58 (4H, м), 2,31 (3H, с).

(3) 3-Метансульфонилокси-1-[4-(4-метилпиперазин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

В раствор 3-гидрокси-1-[4-(4-метилпиперазин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (422 мг, 1,49 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 30(2)) в метиленхлориде (21 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,14 мл, 1,79 ммоль) и триэтиламин (0,25 мл, 1,79 ммоль) на ледяной бане, и затем смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:метанол (3:1), с получением 3-метансульфонилокси-1-[4-(4-метилпиперазин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (537 мг, выход 100%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,36 (1H, с), 5,47-5,40 (1H, м), 4,46 (2H, дд, J=10,0, 6,6 Гц), 4,27 (2H, дд, J=10,0, 4,3 Гц), 3,56-3,47 (4H, м), 3,11 (3H, с), 2,96-2,86 (4H, м), 2,81 (3H, с).

(4) 3-Ацетилтио-1-[4-(4-метилпиперазин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

В раствор 3-метансульфонилокси-1-[4-(4-метилпиперазин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (537 мг, 1,49 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 20(3)) в диметилформамиде (16 мл) добавляли тиоацетат калия (1,02 г, 8,94 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (90° C) в течение 4 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (10:1), с получением 3-ацетилтио-1-[4-(4-метилпиперазин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (261 мг, выход 51%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,15 (1H, с), 4,53 (2H, т, J=8,5 Гц), 4,48-4,38 (1H, м), 3,98 (2H, дд, J=8,5, 5,4 Гц), 3,96-3,74 (4H, м), 2,63-2,42 (4H, м), 3,49 (6H, с).

Ссылочный пример 31

3-Ацетилтио-1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

(1) 1-Трет-бутоксикарбонил-3-метоксиазетидин

Раствор 1-бензгидрил-3-гидроксиазетидина (10,0 г, 41,8 ммоль) в метаноле (300 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладий (10,0 г) на угле при комнатной температуре в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали для удаления катализатора. К фильтрату добавляли ди-трет-бутоксикарбоновый ангидрид (18,2 г, 83,6 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1 → 1:2), с получением 1-трет-бутоксикарбонил-3-гидроксиазетидина (7,05 г, выход 97%).

Затем в раствор 1-трет-бутоксикарбонил-3-гидроксиазетидина (2,5 г, 14,4 ммоль) в диметилформамиде (125 мл) добавляли гидрид натрия (55% масляная суспензия) на ледяной бане. После перемешивания смеси в течение 10 минут на ледяной бане, полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. В реакционную смесь добавляли метилйодид (1,79 мл, 28, ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты на ледяной бане и реакционную смесь перемешивали на ледяной бане в течение 30 минут. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (2:1), с получением 1-трет-бутоксикарбонил-3-метоксиазетидина (2,18 г, выход 81%) в виде бесцветного масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 4,16-4,10 (1H, м), 4,09-4,03 (2H, м), 3,82 (2H, дд, J=10,2, 4,4 Гц), 3,28 (3H, с), 1,44 (9H, с).

(2) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

В раствор 1-трет-бутоксикарбонил-3-метоксиазетидина (2,60 г, 13,9 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 31(1)) в 1,4-диоксане (26 мл) добавляли раствор 4н хлористого водорода в 1,4-диоксане (26 мл) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали, и к остатку добавляли этилацетат и диизопропиловый эфир. Полученную смесь фильтровали, и остаток промывали диизопропиловым эфиром и затем сушили при пониженном давлении с получением гидрохлорид 3-метоксиазетидина (1,84 г, выход 100%) в виде белых кристаллов.

Затем в раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (500 мг, 1,07 ммоль) в толуоле (25 мл) добавляли раствор 0,67M 3-метоксиазетидин-триметилалюминия в бензоле (3,21 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь перемешивали на водяной бане (80° C) в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (20 мл) и этилацетат (50 мл) на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. После добавления этилацетата, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат, с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (366 мг, выход 67%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,64-7,60 (4H, м), 7,49-7,38 (6H, м), 7,36 (1H, с), 4,78-4,70 (2H, м), 4,42-4,36 (1H, м), 4,32-4,25 (1H, м), 4,24-4,18 (1H, м), 4,09 (2H, т, J=7,3 Гц), 4,03-3,96 (3H, м), 3,33 (3H, с), 1,07 (9H, с).

(3) 3-Гидрокси-1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (870 мг, 1,71 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 31(2)) в безводном тетрагидрофуране (45 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (2,06 мл, 2,06 ммоль) на ледяной бане, и затем смесь перемешивали в течение 30 минут. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (9:1), с получением 3-гидрокси-1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (481 мг, выход 100%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,38 (1H, с), 4,85-4,79 (1H, м), 4,75 (1H, дд, J=10,3, 5,9 Гц), 4,41 (1H, дд, J=11,0, 2,9 Гц), 4,34-4,25 (3H, м), 4,22 (1H, тт, J=6,6, 4,4 Гц), 4,01 (1H, дд, J=10,3, 2,9 Гц), 3,93 (2H, дд, J=8,8, 4,4 Гц), 3,32 (3H, с).

(4) 3-Метансульфонилокси-1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

В раствор 3-гидрокси-1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (480 мг, 1,71 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 31(3)) в метиленхлориде (25 мл) добавляли метансульфонилхлорид (397 мкл, 5,13 ммоль) и триэтиламин (719 мкл, 5,13 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (95:5), с получением 3-метансульфонилокси-1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (568 мг, выход 96%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,46 (1H, с), 5,45-5,39 (1H, м), 4,74 (1H, дд, J=10,6, 6,2 Гц), 4,47-4,37 (3H, м), 4,33-4,19 (4H, м), 4,04-3,99 (1H, м), 3,33 (3H, с), 3,10 (3H, с).

(5) 3-Ацетилтио-1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

В раствор 3-метансульфонилокси-1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (560 мг, 1,61 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 31(4)) в диметилформамиде (28 мл) добавляли тиоацетат калия (1,10 г, 9,67 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 4,5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → этилацетат:метанол (97:3), с получением 3-ацетилтио-1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (356 мг, выход 68%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,43 (1H, с), 4,73 (1H, дд, J=10,3, 5,1 Гц), 4,51 (2H, т, J=8,1 Гц), 4,46-4,37 (2H, м), 4,32-4,26 (1H, м), 4,21 (1H, тт, J=6,6, 4,4 Гц), 4,00-3,93 (2H, м), 3,78-3,72 (1H, м), 3,32 (3H, с), 2,36 (3H, с).

Ссылочный пример 32

3-Ацетилтио-1-(4-фенилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-фенилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (2,00 г, 4,29 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(1)) в толуоле (100 мл) добавляли раствор 0,67M анилилина-триметилалюминия в бензоле (14,6 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 3 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (100 мл) и этилацетат (200 мл) на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. После добавления этилацетата, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (2:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-фенилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (2,20 г, выход 100%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,73-7,61 (6H, м), 7,51-7,30 (9H, м), 7,14-7,08 (1H, м), 4,82-4,76 (1H, м), 4,14 (2H, дд, J=15,2, 8,2 Гц), 4,06 (2H, дд, J=8,9, 4,6 Гц), 1,08 (9H, с).

(2) 3-Гидрокси-1-(4-фенилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-фенилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (2,20 г, 4,29 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 32(1)) в безводном тетрагидрофуране (110 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (5,15 мл, 5,15 ммоль) на ледяной бане, и затем смесь перемешивали в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат, с получением 3-гидрокси-1-(4-фенилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,18 г, выход 100%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 9,04 (1H, ушир. с), 7,76-7,65 (2H, м), 7,51-7,37 (3H, м), 7,18-7,08 (1H, м), 4,90-4,80 (1H, м), 4,36 (2H, дд, J=9,1, 6,6 Гц), 3,99 (2H, дд, J=9,1, 4,3 Гц).

(3) 3-Метансульфонилокси-1-(4-фенилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-гидрокси-1-(4-фенилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,18 г, 4,29 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 32(2)) в метиленхлориде (60 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,50 мл, 6,44 ммоль) и триэтиламин (0,90 мл, 6,44 ммоль) на ледяной бане, и затем смесь перемешивали на ледяной бане в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента метиленхлорид:этилацетат (9:1), с получением 3-метансульфонилокси-1-(4-фенилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,36 г, выход 89%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,98 (1H, ушир. с), 7,68 (2H, д, J=7,6 Гц), 7,55 (1H, с), 7,36 (2H, д, J=8,0 Гц), 7,18-7,08 (1H, м), 5,50-5,40 (1H, м), 4,51 (2H, ддд, J=9,6, 6,6, 1,0 Гц), 4,32 (2H, ддд, J=9,6, 4,3, 1,0 Гц), 3,12 (3H, с).

(4) 3-Ацетилтио-1-(4-фенилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-метансульфонилокси-1-(4-фенилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,28 г, 3,85 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 32(3)) в диметилформамиде (40 мл) добавляли тиоацетат калия (2,60 г, 23,1 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (90° C) в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:2), с получением 3-ацетилтио-1-(4-фенилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (893 мг, выход 70%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 9,01 (1H, ушир. с), 7,68 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,35 (2H, т, J=7,5 Гц), 7,20-7,28 (1H, м), 4,58 (2H, т, J=8,5 Гц), 4,52-4,02 (1H, м), 4,04 (2H, дд, J=8,5, 5,3 Гц), 2,83 (3H, с).

Ссылочный пример 33

3-Ацетилтио-1-{4-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

(1) Бензиловый эфир [2-(трет-бутилдифенилсилилокси)этил]карбаминовой кислоты

В раствор аминоэтанола (2,0 г, 32,7 ммоль) в метиленхлориде (60 мл) добавляли бензиловый эфир хлороформной кислоты (5,6 мл, 41,3 ммоль) и триэтиламин (5,5 мл, 39,5 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:ацетонитрил (3:2), с получением бензилового эфира (2-гидроксиэтил)карбаминовой кислоты (5,37 г, выход 840%) в виде белого твердого вещества.

Затем в раствор бензилового эфира (2-гидроксиэтил)карбаминовой кислоты (5,37 г, 27,5 ммоль) в диметилформамиде (160 мл) добавляли трет-бутилдифенилсилилхлорид (8,6 мл, 33,0 ммоль) и имидазол (2,3 г, 33,8 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции, добавляли этанол и реакционную смесь перемешивали в течение 2 часов. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (5: 1), с получением бензилового эфира [2-(трет-бутилдифенилсилилокси)этил]карбаминовой кислоты (11,93 г, выход 100%) в виде бесцветного, прозрачного сиропа.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,64 (4H, д, J=6,8 Гц), 7,46-7,28 (12H, м), 5,10 (2H, с), 3,73 (2H, т, J=4,9 Гц), 3,35 (2H, кв., J=4,9 Гц), 1,05 (9H, с).

(2) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[2-(трет-бутилдифенилсилилокси)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

Раствор бензилового эфира [2-(трет-бутилдифенилсилилокси)этил]карбаминовой кислоты (3,01 г, 6,9 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 33(1)) в метаноле (150 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 20% гидроксида палладия на угле (3,0 г) при комнатной температуре. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали для удаления катализатора и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента метиленхлорид:метанол (10:1), с получением 2-(трет-бутилдифенилсилилокси)этиламина (1,49 г, выход 72%) в виде светло-коричневого сиропа.

Затем в раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,16 г, 2,49 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(1)) в бензоле (8,5 мл) добавляли раствор 0,67M 2-(трет-бутилдифенилсилилокси)этиламинтриметилалюминия в бензоле (6,42 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 5 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (50 мл) и этилацетат (200 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. После добавления этилацетата, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (3:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[2-(трет-бутилдифенилсилилокси)-этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (1,68 г, выход 94%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,74 (1H, ушир. т, J=4,6 Гц), 7,67 (4H, д, J=7,5 Гц), 7,60 (4H, д, J=7,5 Гц), 7,42-7,32 (13H, м), 4,78-4,68 (1H, м), 4,08 (2H, т, J=7,8 Гц), 4,03-3,98 (2H, м), 3,79 (2H, т, J=4,6 Гц), 3,56 (2H, т, J=4,6 Гц), 1,08 (9H, с), 1,06 (9H, с).

(3) 3-Гидрокси-1-(4-гидроксиэтилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[2-(трет-бутилдифенилсилилокси)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (1,68 г, 2,33 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 33(2)) в безводном тетрагидрофуране (75 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (5,6 мл, 5,6 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали на ледяной бане в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (10:1), с получением 3-гидрокси-1-(4-гидроксиэтилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (481,2 мг, выход 85%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CD₃OD): δ (м.д.) 7,39 (1H, с), 4,78 (1H, м), 4,31 (2H, дд, J=8,4, 7,0 Гц), 3,89 (2H, дд, J=8,4, 4,8 Гц), 3,67 (2H, т, J=5,9 Гц), 3,46 (2H, т, J=5,9 Гц).

(4) 1-{4-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-гидроксиазетидин

В раствор 3-гидрокси-1-(4-гидроксиэтилкарбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (481,2 мг, 1,98 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 33(3)) в диметилформамиде (24,0 мл) добавляли трет-бутилдиметилсилилхлорид (352 мг, 2,3 ммоль) и имидазол (116,3 мг, 2,4 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали на ледяной бане в течение 4 часов. После контроля завершения реакции, добавляли метанол и реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (2: 3), с получением 1-{4-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-гидроксиазетидина (531,1 мг, выход 75%) в виде бесцветного, прозрачного сиропа.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,60 (1H, т, J=5,9 Гц), 7,35 (1H, с), 4,88-4,76 (1H, м), 4,30 (2H, дд, J=9,8, 7,8 Гц), 3,93 (2H, дд, J=9,8, 4,9 Гц), 3,75 (2H, т, J=5,9 Гц), 3,52 (2H, кв., J=5,9 Гц), 2,85 (1H, д, J=6,8 Гц), 0,92 (9H, с), 0,08 (6H, с).

(5) 1-{4-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-{4-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-гидроксиазетидина (531,1 мг, 1,49 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 33(4)) в метиленхлориде (26,6 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,3 мл, 3,9 ммоль) и триэтиламин (0,52 мл, 3,7 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали на ледяной бане в течение 2 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли метанол, и полученную смесь перемешивали в течение 30 минут. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:этилацетат (1:1), с получением 1-{4-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-метансульфонилоксиазетидина (647,1 мг, выход 100%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,54 (1H, ушир. т, J=5,9 Гц), 7,44 (1H, с), 5,46-5,39 (1H, м), 4,43 (2H, дд, J=9,7, 6,8 Гц), 4,24 (2H, дд, J=9,7, 3,9 Гц), 3,76 (2H, т, J=5,9 Гц), 3,53 (2H, т, J=5,9 Гц), 3,11 (3H, с), 0,93 (9H, с), 0,08 (6H, с).

(6) 3-Ацетилтио-1-{4-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 1-{4-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-метансульфонилоксиазетидина (647,1 мг, 1,49 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 33(5)) в диметилформамиде (32,0 мл) добавляли тиоацетат калия (1,28 мг, 8,9 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 4 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (3:2), с получением 3-ацетилтио-1-{4-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (398,2 мг, выход 65%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,55 (1H, ушир. т, J=5,4 Гц), 7,40 (1H, с), 4,51 (2H, дд, J=8,8, 7,8 Гц), 4,48-4,40 (1H, м), 3,96 (2H, дд, J=8,8, 4,9 Гц), 3,75 (2H, т, J=5,4 Гц), 3,52 (2H, кв., J=5,4 Гц), 2,37 (3H, с), 0,92 (9H, с), 0,08 (6H, с).

Ссылочный пример 34

3-Ацетилтио-1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)пропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

(1) Бензиловый эфир [(1S)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)пропил]карбаминовой кислоты

В раствор L-этилглицинола (2,00 г, 22,4 ммоль) в метиленхлориде (60 мл) добавляли бензиловый эфир хлороформной кислоты (3,84 мл, 26,9 ммоль) и триэтиламин (3,77 мл, 26,9 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (2:1 → 1:2), с получением бензилового эфира [(1S)-1-(гидроксиметил)пропил]карбаминовой кислоты (4,27 г, 85%) в виде бесцветного масла.

Затем в раствор бензилового эфира [(1S)-1-(гидроксиметил)пропил]карбаминовой кислоты (4,27 г, 19,1 ммоль) в диметилформамиде (128 мл) добавляли трет-бутилдифенилсилилхлорид (5,97 мл, 22,9 ммоль) и имидазол (1,56 г, 22,9 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (6:1 → 4:1), с получением бензилового эфира [(1S)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)пропил]карбаминовой кислоты (9,48 г, выход 100%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,65-7,60 (4H, м), 7,44-7,29 (11H, м), 5,09 (2H, с), 4,92-4,86 (1H, ушир. д, J=8,8 Гц), 3,71-3,47 (3H, м), 1,68-1,60 (2H, м), 1,05 (9H, с), 0,88 (3H, т, J=7,3 Гц).

(2) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)пропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

Раствор бензилового эфира [(1S)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)пропил]карбаминовой кислоты (3,70 г, 8,00 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 34(1)) в метаноле (185 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (3,70 г) при комнатной температуре в течение 4 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали для удаления катализатора и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента метиленхлорид:метанол (9:1), с получением (1S)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)пропиламина (2,32 г, выход 88%) в виде бесцветного масла.

Затем в раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (2,00 г, 4,29 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(1)) в бензоле (100 мл) добавляли раствор 0,67M (1S)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)пропиламинтриметилалюминия в бензоле (12,9 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение ночи. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (100 мл) и этилацетат (200 мл) на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (6:1 → 2:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)пропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (2,52 г, выход 79%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,57-7,69 (8H, м), 7,28-7,46 (12H, м), 7,36 (1H, с), 4,69-4,74 (1H, м), 3,76-4,11 (5H, м), 3,74 (1H, дд, J=10,3, 2,9 Гц), 3,70 (1H, дд, J=10,3, 4,1 Гц), 1,08 (9H, с), 1,05 (9H, с), 0,93 (3H, т, J=7,3 Гц).

(3) 3-Гидрокси-1-{4-[(1S)-1-(гидроксиметил)пропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)пропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (2,52 г, 3,50 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 34(2)) в безводном тетрагидрофуране (126 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (8,40 мл, 8,40 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → этилацетат:метанол (9:1), с получением 3-гидрокси-1-{4-[(1S)-1-(гидроксиметил)пропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (947 мг, выход 100%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,36 (1H, с), 4,86-4,75 (1H, м), 4,33 (2H, дд, J=8,1, 6,6 Гц), 4,02-3,91 (3H, м), 3,79 (1H, дд, J=11,0, 1,2 Гц), 3,67 (1H, дд, J=11,0, 6,6 Гц), 3,19-3,10 (1H, ушир. с), 3,02-2,97 (1H, ушир. с), 1,73-1,64 (2H, м), 1,00 (3H, т, J=7,3 Гц).

(4) 1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)пропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-гидроксиазетидин

В раствор 3-гидрокси-1-{4-[(1S)-1-(гидроксиметил)пропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (940 мг, 3,50 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 34(3)) в диметилформамиде (47 мл) добавляли трет-бутилдиметилсилилхлорид (633 мг, 4,20 ммоль) и имидазол (286 мг, 4,20 ммоль) на ледяной бане, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (2:1 → 1:3), с получением 1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)пропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-гидроксиазетидина (1,00 г, выход 74%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,50-7,44 (1H, м), 7,36 (1H, с), 4,86-4,79 (1H, м), 4,33-4,27 (2H, м), 4,01-3,92 (3H, м), 3,72 (1H, дд, J=9,9, 2,6 Гц), 3,65 (1H, дд, J=9,9, 4,0 Гц), 1,70-1,60 (2H, м), 0,95 (3H, т, J=7,3 Гц), 0,92 (9H, с), 0,06 (6H, с).

(5) 1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)пропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)пропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-гидроксиазетидина (1,00 мг, 2,59 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 34(4)) в метиленхлориде (50 мл) добавляли метансульфонилхлорид (602 мкл, 7,78 ммоль) и триэтиламин (1,09 мл, 7,78 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (2:1 → 1:2), с получением 1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)пропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-метансульфонилоксиазетидина (1,02 г, выход 85%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,44 (1H, с), 7,44-7,38 (1H, м), 5,45-5,39 (1H, м), 4,47-4,40 (2H, м), 4,29-4,21 (2H, м), 4,02-3,95 (1H, м), 3,73 (1H, дд, J=10,3, 2,9 Гц), 3,65 (1H, дд, J=10,3, 4,4 Гц), 3,11 (3H, с), 0,95 (3H, т, J=7,3 Гц), 0,92 (9H, с), 0,06 (6H, с).

(6) 3-Ацетилтио-1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилокси-метил)пропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилокси-метил)пропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-метансульфонилоксиазетидина (1,02 г, 2,20 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 34(5)) в диметилформамиде (50 мл) добавляли тиоацетат калия (1,51 мг, 13,2 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (4:1 → 2:1), с получением 3-ацетилтио-1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)пропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (618 мг, выход 63%) в виде светло-коричневого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,43-7,39 (1H, м), 7,40 (1H, с), 4,53-4,47 (2H, м), 4,46-4,41 (1H, м), 4,00-3,93 (3H, м), 3,74-3,70 (1H, м), 3,67-3,62 (1H, м), 2,37 (3H, с), 1,72-1,56 (2H, м), 0,95 (3H, т, J=7,3 Гц), 0,91 (9H, с), 0,06 (6H, с).

Ссылочный пример 35

3-Ацетилтио-1-{4-[(1S)-2-(трет-бутилдиметилсилилокси)-1-метилэтилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

(1) Бензиловый эфир [(1S)-2-(трет-бутилдифенилсилилокси)-1-метилэтил]карбаминовой кислоты

В раствор L-аланинола (2,00 г, 26,6 ммоль) в метиленхлориде (60 мл) добавляли бензиловый эфир хлороформной кислоты (4,57 мл, 32,0 ммоль) и триэтиламин (4,48 мл, 32,0 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (2:1 → 1:2), с получением бензилового эфира [(1S)-2-гидрокси-1-метилэтил]карбаминовой кислоты (4,61 г, выход 83%) в виде белых кристаллов.

Затем в раствор бензилового эфира [(1S)-1-(гидроксиметил)этил]карбаминовой кислоты (4,61 г, 22,0 ммоль) в диметилформамиде (140 мл) добавляли трет-бутилдифенилсилилхлорид (6,87 мл, 26,4 ммоль) и имидазол (1,80 г, 26,4 ммоль) на ледяной бане. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (8:1 → 6:1), с получением бензилового эфира [(1S)-2-(трет-бутилдифенилсилилокси)-1-метилэтил]карбаминовой кислоты (10,7 г, выход 100%) в виде бесцветного масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,67-7,60 (4H, м), 7,42-7,29 (11H, м), 5,10 (2H, с), 4,96-4,85 (1H, ушир. с), 3,91-3,80 (1H, м), 3,67 (1H, дд, J=10,3, 2,6 Гц), 3,56 (1H, дд, J=10,3, 3,7 Гц), 1,55 (3H, д, J=11,7 Гц), 1,09 (9H, с).

(2) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(1S)-2-(трет-бутилдифенилсилилокси)-1-метилэтилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

Раствор бензилового эфира [(1S)-2-(трет-бутилдифенилсилилокси)-1-метилэтил]карбаминовой кислоты (6,71 г, 15,0 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 35(1)) в метаноле (340 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (6,71 г) при комнатной температуре в течение 2,5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали для удаления катализатора и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента метиленхлорид → метиленхлорид:метанол (85:15), с получением (1S)-2-(трет-бутилдифенилсилилокси)-1-метил-этиламина (3,93 г, выход 84%) в виде светло-желтого масла.

Затем в раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (2,0 г, 4,29 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(1)) в бензоле (100 мл) добавляли раствор 0,67M (1S)-2-(трет-бутилдифенилсилилокси)-1-метилэтиламинтриметилалюминия в бензоле (12,9 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение ночи. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (100 мл) и этилацетат (200 мл) на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. После добавления этилацетата, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (6:1 → 2:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(1S)-2-(трет-бутилдифенилсилилокси)-1-метилэтилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (2,77 г, выход 88%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,69-7,65 (4H, м), 7,61-7,57 (4H, м), 7,46-7,30 (12H, м), 7,35 (1H, с), 4,75-4,68 (1H, м), 4,28-4,18 (1H, м), 4,10-4,03 (H, м), 4,03-3,97 (2H, м), 3,72 (1H, дд. J=9,9, 4,1 Гц), 3,64 (1H, дд, J=9,9, 3,3 Гц), 1,31 (3H, д, J=6,6 Гц), 1,09 (9H, с), 1,05 (9H, с).

(3) 3-Гидрокси-1-[4-((1S)-2-гидрокси-1-метилэтилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(1S)-2-(трет-бутилдифенилсилилокси)-1-метилэтилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (2,77 г, 3,77 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 35(2)) в безводном тетрагидрофуране (140 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (9,06 мл, 9,06 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали на ледяной бане в течение 3,5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → этилацетат:метанол (9:1), с получением 3-гидрокси-1-[4-((1S)-2-гидрокси-1-метилэтилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (911 мг, выход 94%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,34 (1H, с), 7,26-7,10 (1H, ушир. с), 4,86-4,77 (1H, м), 4,32 (2H, дд, J=8,8, 6,6 Гц), 4,24-4,12 (1H, м), 3,99-3,92 (2H, м), 3,79-3,71 (1H, м), 3,66-3,58 (1H, м), 3,28-3,21 (1H, ушир. с), 2,99-2,92 (1H, ушир. д, J=5,1 Гц), 1,25 (3H, д, J=7,2 Гц).

(4) 1-{4-[(1S)-2-(трет-бутилдиметилсилилокси)-1-метилэтилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-гидроксиазетидин

В раствор 3-гидрокси-1-[4-((1S)-2-гидрокси-1-метилэтилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (910 мг, 3,54 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 35(3)) в диметилформамиде (46 мл) добавляли трет-бутилдиметилсилилхлорид (586 мг, 3,89 ммоль) и имидазол (265 мг, 3,89 ммоль) на ледяной бане, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1 → 1:4), с получением 1-{4-[(1S)-2-(трет-бутилдиметилсилилокси)-1-метилэтилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-гидроксиазетидина (935 мг, выход 71%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,48-7,42 (1H, ушир. д, J=8,8 Гц), 7,36 (1H, с), 4,86-4,79 (1H, м), 4,30 (2H, ддд, J=15,6, 5,9, 2,9 Гц), 4,34-4,27 (1H, м), 3,97-3,91 (2H, м), 3,68 (1H, дд, J=9,5, 4,4 Гц), 3,63 (1H, дд, J=9,5, 2,9 Гц), 1,25 (3H, д, J=7,3 Гц), 0,93 (9H, с), 0,07 (6H, с).

(5) 1-{4-[(1S)-2-(трет-бутилдиметилсилилокси)-1-метилэтилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-{4-[(1S)-2-(трет-бутилдиметилсилилокси)-1-метилэтилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-гидроксиазетидина (930 мг, 2,50 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 35(4)) в метиленхлориде (47 мл) добавляли метансульфонилхлорид (480 мкл, 6,20 ммоль) (получен, как описано в ссылочном примере 35(4)) и триэтиламин (869 мкл, 6,20 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (2:1 → 1:2), с получением 1-{4-[(1S)-2-(трет-бутилдиметилсилилокси)-1-метилэтилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-метансульфонил-оксиазетидина (1,16 г, выход 100%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,43 (1H, с), 7,43-7,39 (1H, ушир. с), 5,44-5,39 (1H, м), 4,43 (2H, ддд, J=6,6, 5,9, 1,5 Гц), 4,27-4,21 (2H, м), 4,21-4,13 (1H, м), 3,68 (1H, дд, J=9,5, 4,4 Гц), 3,63 (1H, дд, J=9,5, 2,9 Гц), 3,11 (3H, с), 1,25 (3H, д, J=6,6 Гц), 0,93 (9H, с), 0,07 (6H, с).

(6) 3-Ацетилтио-1-{4-[(1S)-2-(трет-бутилдиметилсилилокси)-1-метилэтилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 1-{4-[(1S)-2-(трет-бутилдиметилсилилокси)-1-метилэтилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-метансульфонилоксиазетидина (1,16 г, 2,50 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 35(5)) в диметилформамиде (60 мл) добавляли тиоацетат калия (1,71 мг, 15,0 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (4:1 → 2:1), с получением 3-ацетилтио-1-{4-[(1S)-2-(трет-бутилдиметил-силилокси)-1-метилэтилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (709 мг, выход 60%) в виде светло-коричневого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,45-7,40 (1H, ушир с), 7,39 (1H, с), 4,54-4,47 (2H, м), 4,46-4,41 (1H, м), 4,20-4,15 (1H, м), 4,00-3,93 (2H, м), 3,67 (1H, дд, J=10,3, 4,4 Гц), 3,62 (1H, дд, J=10,3, 3,7 Гц), 2,37 (3H, с), 1,24 (3H, д, J=6,6 Гц), 0,92 (9H, с), 0,07 (6H, с).

Ссылочный пример 36

3-Ацетилтио-1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилокси)-2-метилпропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

(1) Бензиловый эфир [(1S)-1-(трет-бутилдифенилсилилокси)-2-метилпропил]карбаминовой кислоты

В раствор L-валинола (2,00 г, 19,4 ммоль) в метиленхлориде (60 мл) добавляли бензиловый эфир хлороформной кислоты (3,32 мл, 23,3 ммоль) и триэтиламин (3,27 мл, 23,3 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4,5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (2:1 → 1:2), с получением бензилового эфира [(1S)-1-(гидроксиметил)-2-метилпропил]карбаминовой кислоты (4,56 г, выход 99%) в виде белых кристаллов.

Затем в раствор бензилового эфира [(1S)-1-(гидроксиметил)-2-метилпропил]карбаминовой кислоты (4,56 г, 19,2 ммоль) в диметилформамиде (140 мл) добавляли трет-бутилдифенилсилилхлорид (6,00 мл, 23,1 ммоль) и имидазол (1,57 г, 23,1 ммоль) на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (8:1 → 6:1), с получением бензилового эфира [(1S)-1-(трет-бутилдифенилсилилокси)-2-метил-пропил]карбаминовой кислоты (10,1 г, выход 100%) в виде белых кристаллов.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,65-7,60 (4H, м), 7,45-7,29 (11H, м), 5,09 (2H, с), 4,92-4,84 (1H, ушир. д, J=9,5 Гц), 3,71 (1H, дд, J=10,3, 4,4 Гц), 3,66 (1H, дд, J=10,3, 4,4 Гц), 3,55-3,46 (1H, м), 1,99-1,87 (1H, м), 1,05 (9H, с), 0,89 (6H, д, J=7,3 Гц).

(2) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдифенилсилилокси)-2-метилпропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

Раствор бензилового эфира [(1S)-1-(трет-бутилдифенилсилилокси)-2-метилпропил]карбаминовой кислоты (7,14 г, 15,0 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 36(1)) в метаноле (215 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (7,14 г) при комнатной температуре в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали для удаления катализатора и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента метиленхлорид:метанол (98:2 → 9:1), с получением (1S)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)-2-метилпропиламина (3,73 г, выход 73%) в виде бесцветного масла.

Затем в раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (2,0 г, 4,29 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(1)) в бензоле (100 мл) добавляли раствор 0,67M (1S)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)-2-метилпропиламинтриметилалюминия в бензоле (12,9 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение ночи. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (100 мл) и этилацетат (200 мл) на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. После добавления этилацетата, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (6:1 → 4:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдифенилсилилокси)-2-метилпропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (1,98 г, выход 61%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,69-7,56 (8H, м), 7,44-7,31 (12H, м), 7,37 (1H, с), 4,74-4,67 (1H, м), 4,09-3,94 (4H, м), 3,87-3,78 (1H, м), 3,85 (1H, дд, J=10,3, 2,1 Гц), 3,67 (1H, дд, J=10,3, 3,9 Гц), 2,17-2,05 (1H, м), 1,09 (9H, с), 1,06 (9H, с), 0,99 (3H, д, J=6,9 Гц), 0,97 (3H, д, J=6,8 Гц).

(3) 3-Гидрокси-1-{4-[(1S)-1-(гидроксиметил)-2-метилпропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдифенилсилилокси)-2-метилпропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (1,98 г, 2,60 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 36(2)) в безводном тетрагидрофуране (100 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (6,23 мл, 6,23 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали на ледяной бане в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → этилацетат:метанол (95:5), с получением 3-гидрокси-1-{4-[(1S)-1-(гидроксиметил)-2-метилпропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (755 мг, выход 100%) в виде бесцветного масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,34 (1H, с), 7,35-7,31 (1H, ушир. с), 4,84-4,75 (1H, м), 4,32 2H, дд, J=8,8, 6,8 Гц), 3,97 (1H, дд, J=8,8, 4,4 Гц), 3,94 (1H, дд, J=8,8, 4,4 Гц), 3,87-3,77 (2H, м), 3,73 (1H, дд, J=10,7, 6,8 Гц), 3,33-3,21 (1H, ушир. с), 3,24-2,94 (1H, ушир. с), 1,98 (1H, септет, J=6,8 Гц), 1,01 (3H, д, J=6,8 Гц), 0,98 (3H, д, J=6,8 Гц).

(4) 1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-2-метилпропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-гидроксиазетидин

В раствор 3-гидрокси-1-{4-[(1S)-1-(гидроксиметил)-2-метилпропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (750 мг, 2,60 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 36(3)) в диметилформамиде (38 мл) добавляли трет-бутилдиметилсилилхлорид (470 мг, 3,12 ммоль) и имидазол (212 мг, 3,12 ммоль) на ледяной бане, и затем реакционную смесь перемешивали на ледяной бане в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (2:1 → 1:3), с получением 1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-2-метилпропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-гидроксиазетидина (700 мг, выход 67%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,54-7,50 (1H, ушир. д, J=9,8 Гц), 7,37 (1H, с), 4,86-4,80 (1H, м), 4,35-4,27 (2H, м), 3,98-3,92 (2H, м), 3,84 (1H, дд, J=9,8, 2,9 Гц), 3,84-3,79 (1H, м), 3,62 (1H, дд, J=9,8, 3,9 Гц), 2,00 (1H, септет, J=6,8 Гц), 0,98 (3H, д, J=6,8 Гц), 0,96 (3H, д, J=6,8 Гц), 0,91 (9H, с), 0,06 (6H, с).

(5) 1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-2-метилпропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-2-метилпропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-гидроксиазетидина (700 мг, 1,75 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 36(4)) в метиленхлориде (35 мл) добавляли метансульфонилхлорид (406 мкл, 5,25 ммоль) и триэтиламин (736 мкл, 5,25 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (2:1 → 1:2), с получением 1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-2-метилпропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-метансульфонилоксиазетидина (895 мг, выход 100%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,50-7,45 (1H, ушир. д, J=9,5 Гц), 7,44 (1H, с), 5,45-5,39 (1H, м), 4,43 (2H, ддд, J=11,0, 6,6, 1,5 Гц), 4,24 (2H, ддд, J=11,0, 4,4, 1,5 Гц), 3,83 (1H, дд, J=10,7, 2,6 Гц), 3,84-3,79 (1H, м), 3,62 (1H, дд, J=10,7, 4,8 Гц), 3,11 (3H, с), 2,04-1,94 (1H, м), 0,98 (3H, д, J=7,3 Гц), 0,96 (3H, д, J=6,6 Гц), 0,91 (9H, с), 0,06 (6H, с).

(6) 3-Ацетилтио-1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-2-метилпропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-2-метилпропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-метансульфонилоксиазетидина (890 мг, 1,75 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 36(5)) в диметилформамиде (45 мл) добавляли тиоацетат калия (1,20 г, 10,5 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (3:1 → 1:1), с получением 3-ацетилтио-1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-2-метилпропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (502 мг, выход 63%) в виде светло-коричневого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,50-7,45 (1H, ушир. д, J=9,5 Гц), 7,40 (1H, с), 4,54-4,43 (2H, м), 4,47-4,40 (1H, м), 4,00-3,93 (2H, м), 3,86-3,78 (2H, м), 3,64-3,59 (1H, м), 2,04-1,94 (1H, м), 0,98 (3H, д, J=6,6 Гц), 0,96 (3H, д, J=6,6 Гц), 0,91 (9H, с), 0,05 (6H, с).

Ссылочный пример 37

3-Ацетилтио-1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-3-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

(1) Бензиловый эфир [(1S)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)-3-метилбутил]карбаминовой кислоты

В раствор L-лейцинола (1,00 г, 8,53 ммоль) в метиленхлориде (30 мл) добавляли бензиловый эфир хлороформной кислоты (1,46 мл, 10,2 ммоль) и триэтиламин (1,43 мл, 10,2 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 дней. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (2:1 → 1:1), с получением бензилового эфира [(1S)-1-(гидроксиметил)-3-метилбутил]карбаминовой кислоты (2,31 г, выход 100%) в виде бесцветного масла.

Затем в раствор бензилового эфира [(1S)-1-(гидроксиметил)-3-метилбутил]карбаминовой кислоты (4,84 г, 19,3 ммоль) в диметилформамиде (145 мл) добавляли трет-бутилдифенилсилилхлорид (6,01 мл, 23,1 ммоль) и имидазол (1,57 г, 23,1 ммоль) на ледяной бане, и затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 8 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (19:1 → 7:1), с получением бензилового эфира [(1S)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)-3-метилбутил]карбаминовой кислоты (9,22 г, выход 98%) в виде бесцветного масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,65-7,61 (4H, м), 7,45-7,32 (11H, м), 5,09 (2H, д, J=2,9 Гц), 4,85-4,80 (1H, ушир. д, J=8,8 Гц), 3,86-3,77 (1H, м), 3,70 (1H, дд, J=9,8, 2,9 Гц), 3,59 (1H, дд, J=9,8, 2,9 Гц), 1,63-1,54 (1H, м), 1,43-1,37 (2H, м), 1,06 (9H, с), 0,91 (3H, д, J=6,8 Гц), 0,89 (3H, д, J=6,8 Гц).

(2) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)-3-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

Раствор бензилового эфира [(1S)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)-3-метилбутил]карбаминовой кислоты (7,35 г, 15,0 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 37(1)) в метаноле (220 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (7,35 г) при комнатной температуре в течение 4 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали для удаления катализатора и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента метиленхлорид:метанол (98:2 → 9:1), с получением (1S)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)-3-метилбутиламина (4,50 г, выход 84%) в виде бесцветного масла.

Затем в раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (2,00 г, 4,29 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(1)) в бензоле (100 мл) добавляли раствор 0,67M (1S)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)-3-метилбутиламинтриметилалюминия в бензоле (12,9 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение ночи. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (100 мл) и этилацетат (200 мл) на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали на ледяной бане в течение 0,5 часа. После добавления этилацетата, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (6:1 → 4:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)-3-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (2,14 г, выход 64%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,68-7,62 (4H, м), 7,62-7,56 (4H, м), 7,46-7,28 (12H, м), 7,37 (1H, с), 4,74-4,69 (1H, м), 4,24-4,16 (1H, м), 4,11-4,03 (2H, м), 1,00 (1H, дд, J=10,7, 4,9 Гц), 3,98 (1H, дд, J=11,7, 4,9 Гц), 3,72 (1H, дд, J=9,8, 3,9 Гц), 3,67 (1H, дд, J=9,8, 2,9 Гц), 1,65-1,46 (3H, м), 1,08 (9H, с), 1,05 (9H, с), 0,94 (3H, д, J=5,9 Гц), 0,92 (3H, д, J=5,9 Гц).

(3) 3-Гидрокси-1-{4-[(1S)-1-(гидроксиметил)-3-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)-3-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (2,14 г, 3,72 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 37(2)) в безводном тетрагидрофуране (107 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (8,94 мл, 8,94 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали на ледяной бане в течение 4 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → этилацетат:метанол (9:1), с получением 3-гидрокси-1-{4-[(1S)-1-(гидроксиметил)-3-метил-бутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (825 мг, выход 74%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,36 (1H, с), 7,24-7,17 (1H, ушир. д, J=8,8 Гц), 4,85-4,77 (1H, м), 4,32 (2H, дд, J=8,8, 7,3 Гц), 4,20-4,12 (1H, м), 3,96 (2H, ддд, J=8,8, 8,8, 4,4 Гц), 3,77 (1H, дд, J=10,9, 1,3 Гц), 3,61 (1H, дд, J=10,9, 5,9 Гц), 3,17-3,08 (1H, ушир. с), 3,08-2,95 (1H, ушир. с), 1,75-1,65 (1H, м), 1,55-1,46 (1H, м), 1,46-1,37 (1H, м), 0,95 (3H, д, J=6,6 Гц), 0,94 (3H, д, J=6,6 Гц).

(4) 1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-3-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-гидроксиазетидин

В раствор 3-гидрокси-1-{4-[(1S)-1-(гидроксиметил)-3-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (820 мг, 2,74 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 37(3)) в диметилформамиде (41 мл) добавляли трет-бутилдиметилсилилхлорид (495 мг, 3,29 ммоль) и имидазол (224 мг, 3,29 ммоль) на ледяной бане, и затем реакционную смесь перемешивали на ледяной бане в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (2:1 → 1:2), с получением 1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-3-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-гидроксиазетидина (731 мг, выход 65%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,40-7,37 (1H, ушир. с), 7,36 (1H, с), 4,87-4,79 (1H, м), 4,31 (2H, дд, J=15,0, 8,4 Гц), 4,21-4,12 (1H, м), 3,98-3,92 (2H, м), 3,68-3,65 (2H, м), 1,68-1,60 (1H, м), 1,56-1,40 (2H, м), 0,95 (3H, д, J=6,6 Гц), 0,94 (3H, д, J=6,6 Гц), 0,92 (9H, s,), 0,06 (6H, с).

(5) 1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-3-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-3-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-гидроксиазетидина (730 мг, 1,76 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 37(4)) в метиленхлориде (37 мл) добавляли метансульфонилхлорид (409 мкл, 5,29 ммоль) и триэтиламин (741 мкл, 5,29 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (2:1 → 1:2), с получением 1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-3-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-метансульфонилоксиазетидина (846 мг, выход 98%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,43 (1H, с), 7,36-7,30 (1H, ушир. д, J=9,5 Гц), 5,45-5,39 (1H, м), 4,47-4,39 (2H, м), 4,28-4,20 (2H, м), 4,20-4,14 (1H, м), 3,66 (2H, д, J=3,7 Гц), 3,11 (3H, с), 1,70-1,58 (1H, м), 1,53 (1H, ддд, J=13,9, 8,8, 5,9 Гц), 1,44 (1H, ддд, J=13,9, 8,8, 5,9 Гц), 0,95 (6H, т, J=6,3 Гц), 0,92 (9H, с), 0,09 (6H, с).

(6) 3-Ацетилтио-1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилил-оксиметил)-3-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-3-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-метансульфонилоксиазетидина (840 мг, 1,71 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 37(5)) в диметилформамиде (42 мл) добавляли тиоацетат калия (1,17 мг, 10,2 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (3:1 → 1:1), с получением 3-ацетилтио-1-{4-[(1S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-3-метил-бутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (452 мг, выход 56%) в виде светло-коричневого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,39 (1H, с), 7,36 – 7,31 (1H, ушир. д, J=9,5 Гц), 4,54-4,39 (3H, м), 4,20-4,12 (1H, м), 3,97 (1H, дд, J=8,8 Гц), 3,96 (1H, дд, J=8,8 Гц), 3,66 (2H, д, J=3,7 Гц), 1,70-1,60 (1H, м), 1,58-1,40 (2H, м), 0,95 (3H, д, J=6,6 Гц), 0,94 (3H, д, J=6,6 Гц), 0,91 (9H, с), 0,05 (6H, с).

Ссылочный пример 38

3-Ацетилтио-1-{4-[(1S, 2S)-1-(трет-бутилдиметилсилил-оксиметил)-2-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

(1) Бензиловый эфир [(1S, 2S)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)-2-метилбутил]карбаминовой кислоты

В раствор L-изолейцинола (2,20 г, 18,8 ммоль) в метиленхлориде (66 мл) добавляли бензиловый эфир хлороформной кислоты (3,22 мл, 22,5 ммоль) и триэтиламин (3,15 мл, 22,5 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (2:1 → 1:1), с получением бензилового эфира [(1S, 2S)-1-(гидроксиметил)-2-метилбутил]карбаминовой кислоты (4,17 г, выход 88%) в виде бесцветного масла.

Затем в раствор [(2S)-(N-бензилоксикарбонил)-2-амино-3-метилбутанола (4,17 г, 16,6 ммоль) в диметилформамиде (125 мл) добавляли трет-бутилдифенилсилилхлорид (5,18 мл, 19,9 ммоль) и имидазол (1,35 г, 19,9 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (19:1 → 5:1), с получением бензилового эфира [(1S, 2S)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)-2-метилбутил]карбаминовой кислоты (6,72 г, выход 83%) в виде бесцветных кристаллов.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,65-7,60 (4H, м), 7,45-7,30 (11H, м), 5,09 (2H, м), 4,93-4,84 (1H, ушир. д, J=8,8 Гц), 3,74-3,60 (2H, м), 3,60-3,52 (1H, м), 1,74-1,64 (1H, м), 1,53-1,44 (1H, м), 1,14-1,06 (1H, м), 1,04 (9H, с), 0,92-0,8 (6H, м).

(2) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(1S,2S)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)-2-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

Раствор бензилового эфира [(1S,2S)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)-2-метилбутил]карбаминовой кислоты (6,72 г, 13,7 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 38(1)) в метаноле (200 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (6,72 г) при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали для удаления катализатора и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента метиленхлорид:метанол (98:2 → 9:1), с получением (1S, 2S)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)-2-метилбутиламина (4,04 г, выход 83%).

Затем в раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (2,00 г, 4,29 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(1)) в бензоле (100 мл) добавляли раствор 0,67M (1S,2S)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)-2-метилбутиламинтриметилалюминия в бензоле (12,9 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение ночи. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (100 мл) и этилацетат (200 мл) на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. После добавления этилацетата, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (6:1 → 1:3), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(1S,2S)-1-(трет-бутилдифенил-силилоксиметил)-2-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (1,89 г, выход 57%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,70-7,57 (8H, м), 7,46-7,26 (12H, м), 7,36 (1H, с), 4,73-4,67 (1H, м), 4,09-3,94 (4H, м), 3,93-3,86 (1H, м), 3,84 (1H, дд, J=10,7, 2,0 Гц), 3,67 (1H, дд, J=10,7, 3,4 Гц), 1,90-1,82 (1H, м), 1,22-1,11 (1H, м), 1,07 (9H, с), 1,04 (9H, с), 0,93 (3H, д, J=6,9 Гц), 0,90 (3H, т, J=7,3 Гц).

(3) 3-Гидрокси-1-{4-[(1S, 2S)-1-(гидроксиметил)-2-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(1S,2S)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)-2-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (1,89 г, 2,45 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 38(2)) в безводном тетрагидрофуране (95 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (5,87 мл, 5,87 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали на ледяной бане в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → этилацетат:метанол (9:1), с получением 3-гидрокси-1-{4-[(1S, 2S)-1-(гидроксиметил)-2-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-азетидина (811 мг, выход 100%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,37 (1H, с), 7,35-7,31 (1H, ушир. с), 4,87-4,78 (1H, м), 4,33 (2H, дд, J=10,3, 6,6 Гц), 4,00-3,93 (2H, м), 3,92-3,86 (1H, м), 3,86-3,78 (1H, м), 3,78-3,70 (1H, м), 3,05-2,98 (1H, ушир. с), 2,75-2,71 (1H, ушир. д, J=7,3 Гц), 1,80-1,70 (1H, м), 1,59-1,50 (1H, м), 1,27-1,13 (1H, м), 0,98 (3H, д, J=7,3 Гц), 0,93 (3H, т, J=7,3 Гц).

(4) 3-Гидрокси-1-{4-[(1S,2S)-1-(трет-бутилдиметилсилил-оксиметил)-2-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-гидрокси-1-{4-[(1S,2S)-1-(гидроксиметил)-2-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (1,34 г, 4,48 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 38(3)) в диметилформамиде (67 мл) добавляли трет-бутилдиметилсилилхлорид (810 мг, 5,37 ммоль) и имидазол (527 мг, 5,37 ммоль) на ледяной бане, и затем реакционную смесь перемешивали на ледяной бане в течение 2,5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:ацетонитрил (5:1 → 3:1), с получением 3-гидрокси-1-{4-[(1S,2S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-2-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (1,35 г, выход 97%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,57-7,51 (1H, ушир. д, J=8,8 Гц), 7,36 (1H, с), 4,86-4,79 (1H, м), 4,34-4,26 (2H, м), 3,98-3,91 (2H, м), 3,90-3,84 (1H, м), 3,84 (1H, дд, J=9,8, 2,4 Гц), 3,63 (1H, дд, J=9,8, 3,9 Гц), 2,63-2,59 (1H, ушир. д, J=5,9 Гц), 1,80-1,71 (1H, м), 1,60-1,51 (1H, м), 1,20-1,12 (1H, м), 0,95 (3H, д, J=6,8 Гц), 0,91 (9H, с), 0,90 (2H, т, J=6,8 Гц), 0,05 (6H, с).

(5) 1-{4-[(1S, 2S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-2-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-метансульфонилокси-азетидин

В раствор 3-гидрокси-1-{4-[(1S,2S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-2-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (1,35 г, 3,26 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 38(4)) в метиленхлориде (68 мл) добавляли метансульфонилхлорид (758 мкл, 9,79 ммоль) и триэтиламин (1,37 мл, 9,79 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (2:1 → 1:2), с получением 1-{4-[(1S,2S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-2-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-метансульфонилоксиазетидина (1,55 г, выход 97%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,50-7,46 (1H, ушир. д, J=9,8 Гц), 7,43 (1H, с), 5,45-5,39 (1H, м), 4,45 (1H, дд, J=8,8, 6,8 Гц), 4,42 (1H, дд, J=8,8, 6,8 Гц), 4,26 (1H, дд, J=9,8, 3,9 Гц), 4,23 (1H, дд, J=9,8, 3,9 Гц), 3,91-3,85 (1H, м), 3,84 (1H, дд, J=10,3, 2,4 Гц), 3,63 (1H, дд, J=10,3, 3,4 Гц), 3,11 (3H, с), 1,80-1,71 (1H, м), 1,59-1,51 (1H, м), 1,22-1,12 (1H, м), 0,95 (3H, д, J=3,8 Гц), 0,91 (9H, с), 0,91 (3H, т, J=6,8 Гц), 0,05 (6H, с).

(6) 3-Ацетилтио-1-{4-[(1S, 2S)-1-(трет-бутилдиметилсилил-оксиметил)-2-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 1-{4-[(1S,2S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-2-метилбутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-метансульфонил-оксиазетидина (1,55 г, 3,15 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 38(5)) в диметилформамиде (78 мл) добавляли тиоацетат калия (2,16 г, 18,9 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (3:1 → 2:1), с получением 3-ацетилтио-1-{4-[(1S,2S)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)-2-метил-бутилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (910 мг, выход 61%) в виде светло-коричневого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,52-7,46 (1H, ушир. д, J=9,5 Гц), 7,39 (1H, с), 4,54-4,40 (3H, м), 4,00-3,92 (2H, м), 3,91-3,84 (1H, м), 3,83 (1H, дд, J=10,3, 2,2 Гц), 3,63 (1H, дд, J=10,3, 3,7 Гц), 2,37 (3H, с), 1,81-1,70 (1H, м), 1,58-1,50 (1H, м), 1,20-1,09 (1H, м), 0,95 (3H, д, J=6,6 Гц), 0,91 (9H, с), 0,90 (3H, т, J=7,3 Гц), 0,05 (6H, с).

Ссылочный пример 39

3-Ацетилтио-1-{4-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

(1) Метиловый эфира трет-бутилдифенилсилилокси-N-карбобензилокси-L-серина

В раствор N-карбобензилокси-L-серина (4,0 г, 16,7 ммоль) в бензоле (200 мл) и метанол (50 мл) добавляли раствор 2M триметилсилилдиазометана в гексане (10,9 мл, 21,7 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1 → 1:3), с получением метилового эфира N-карбобензилокси-L-серина (4,40 г, выход 100%)в виде бесцветного масла.

Затем в раствор метилового эфира N-карбобензилокси-L-серина (4,40 г, 16,7 ммоль) в диметилформамиде (210 мл) добавляли трет-бутилдифенилсилилхлорид (5,20 мл, 20,0 ммоль) и имидазол (1,36 г, 20,0 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 дней. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (8:1 → 6:1), с получением метилового эфира трет-бутилдифенилсилилокси-N-карбобензилокси-L-серина (18,8 г, 99%).

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,61-7,56 (4H, м), 7,45-7,31 (11H, м), 5,69-5,62 (1H, ушир. д, J=8,8 Гц), 5,12 (2H, с), 4,45 (1H, дт, J=8,1, 2,9 Гц), 4,09 (1H, дд, J=10,3, 2,9 Гц), 3,90 (1H, дд, J=10,3, 2,9 Гц), 3,74 (3H, с).

(2) Бензиловый эфир [2-(трет-бутилдифенилсилилокси)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)этил]карбаминовой кислоты

В раствор метилового эфира трет-бутилдифенилсилилокси-N-карбобензилокси-L-серина (11,5 г, 24,8 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 39(1)) в смеси тетрагидрофурана (115 мл) и этанол (230 мл) добавляли боргидрид натрия (1,88 г, 49,6 ммоль) и хлорид лития (2,10 г, 49,6 ммоль) на ледяной бане, и затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между метиленхлоридом и 10% водным раствором уксусной кислоты. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (3:1 → 1:1), с получением бензилового эфира [2-(трет-бутилдифенилсилилокси)-1-(гидроксиметил)этил]карбаминовой кислоты (9,26 г, выход 81%) в виде бесцветного масла.

Затем в раствор бензилового эфира [2-(трет-бутилдифенилсилилокси)-1-(гидроксиметил)этил]карбаминовой кислоты (9,26 г, 20,0 ммоль) в диметилформамиде (280 мл) добавляли трет-бутилдифенилсилилхлорид (7,79 мл, 30,0 ммоль) и имидазол (2,04 г, 30,0 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (19:1 → 9:1), с получением бензилового эфира [2-(трет-бутилдифенилсилилокси)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)этил]карбаминовой кислоты (13,6 г, 97%) в виде бесцветного масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,65-7,60 (8H, м), 7,44-7,29 (17H, м), 5,05 (2H, с), 4,99-4,93 (1H, ушир. д, J=8,8 Гц), 3,94-3,87 (1H, м), 3,85 (2H, дд, J=9,8, 3,9 Гц), 3,76 (2H, дд, J=9,8, 5,9 Гц), 1,02 (18H, с).

(3) 3-Трет-бутилдифенилокси-1-{4-[2-(трет-бутилдифенилсилилокси)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

Раствор бензилового эфира [2-(трет-бутилдифенилсилилокси)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)этил]карбаминовой кислоты (13,6 г, 19,5 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 39(2)) в метаноле (410 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (13,6 г) при комнатной температуре в течение 3,5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали для удаления катализатора и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента метиленхлорид:метанол (98:2 → 9:1), с получением 2-(трет-бутилдифенилсилилокси)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)этиламина (9,34 г, выход 84%) в виде бесцветного масла.

Затем в раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (2,00 г, 4,29 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(1)) в бензоле (100 мл) добавляли раствор 0,67M 2-(трет-бутилдифенилсилилокси)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)этиламинтриметилалюминия в бензоле (12,9 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение ночи. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (200 мл) и этилацетат (200 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. После добавления этилацетата, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (6:1 → 4:1), с получением 3-трет-бутилдифенилокси-1-{4-[2-(трет-бутилдифенилсилилокси)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (3,19 г, выход 75%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,70-7,65 (8H, м), 7,59-7,55 (4H, м), 7,44-7,28 (18H, м), 7,33 (1H, с), 4,71-4,64 (1H, м), 4,31-4,22 (1H, м), 4,04-3,97 (4H, м), 3,94 (2H, дд, J=9,2, 4,4 Гц), 3,82 (2H, дд, J=9,2, 6,2 Гц).

(4) 3-Гидрокси-1-{4-[2-гидрокси-1-(гидроксиметил)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилокси-1-{4-[2-(трет-бутилдифенилсилилокси)-1-(трет-бутилдифенилсилилоксиметил)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (3,19 г, 3,23 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 39(3)) в безводном тетрагидрофуране (160 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (11,6 мл, 11,6 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали на ледяной бане в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (9:1 → 8:2), с получением 3-гидрокси-1-{4-[2-гидрокси-1-(гидроксиметил)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (1,21 г, выход 100%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆): δ (м.д.) 7,47-7,41 (1H, ушир. д, J=8,8 Гц), 7,42 (1H, с), 5,84 (1H, д, J=6,6 Гц), 4,80 (2H, т, J=5,5 Гц), 4,66-4,58 (1H, м), 4,28-4,21 (2H, м), 3,88-3,81 (1H, м), 3,80 (2H, дд, J=8,8, 4,4 Гц), 3,53 (2H, м), 3,45 (2H, м).

(5) 1-{4-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-гидроксиазетидин

В раствор 3-гидрокси-1-{4-[2-гидрокси-1-(гидроксиметил)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (750 мг, 2,74 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 39(4)) в диметилформамиде (38 мл) добавляли трет-бутилдиметилсилилхлорид (951 мг, 6,31 ммоль) и имидазол (430 мг, 6,31 ммоль) на ледяной бане, и реакционную смесь перемешивали на ледяной бане в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (3:1 → 1:1), с получением 1-{4-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-гидроксиазетидина (070 мг, выход 71%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆): δ (м.д.) 7,62-7,57 (1H, ушир. д, J=8,1 Гц), 7,38 (1H, с), 4,87-4,78 (1H, м), 4,30 (2H, дд, J=10,3, 6,6 Гц), 4,12-4,04 (1H, м), 3,93 (2H, дд, J=9,5, 4,4 Гц), 3,84 (2H, дд, J=9,5, 3,7 Гц), 3,62 (2H, дд, J=9,5, 6,6 Гц), 2,26-2,22 (1H, ушир. д, J=6,6 Гц), 0,92 (18H, с), 0,08 (12H, с).

(6) 1-{4-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-{4-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-гидроксиазетидина (1,27 г, 2,53 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 39(5)) в метиленхлориде (64 мл) добавляли метансульфонилхлорид (587 мкл, 7,59 ммоль) и триэтиламин (1,06 мл, 7,59 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (3:1 → 1:2), с получением 1-{4-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-метансульфонилоксиазетидина (1,56 г, выход 100%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃):δ (м.д.) 7,58-7,53 (1H, ушир. д, J=8,8 Гц), 7,44 (1H, с), 5,43-5,38 (1H, м), 4,41 (2H, дд, J=9,5, 6,6 Гц), 4,23 (2H, дд, J=9,5, 5,9 Гц), 4,12-4,03 (1H, м), 3,84 (1H, дд, J=9,5, 2,9 Гц), 3,64 (2H, дд, J=9,5, 5,9 Гц), 3,11 (3H, с), 0,91 (18H, с), 0,07 (12H, с).

(7) 3-Ацетилтио-1-{4-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 1-{4-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-метансульфонилоксиазетидина (1,56 г, 2,53 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 39(6)) в диметилформамиде (78 мл) добавляли тиоацетат калия (1,73 г, 15,2 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (4:1 → 2:1), с получением 3-ацетилтио-1-{4-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)-1-(трет-бутилдиметилсилилоксиметил)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (773 мг, выход 57%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,59-7,53 (1H, ушир. д, J=8,8 Гц), 7,40 (1H, с), 4,52-4,42 (3H, м), 4,11-4,06 (1H, м), 3,94 (2H, дд, J=8,4, 4,8 Гц), 3,83 (2H, дд, J=9,5, 3,3 Гц), 3,61 (2H, дд, J=9,5, 6,6 Гц), 2,37 (3H, с), 0,91 (18H, с), 0,07 (12H, с).

Ссылочный пример 40

3-Ацетилтио-1-4-{N-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил]-N-метилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

(1) Бензиловый эфир N-[2-(трет-бутилдифенилсилилокси)этил]-N-метилкарбаминовой кислоты

В раствор N-метиламиноэтанола (1,20 мл, 15,0 ммоль) в метиленхлориде (36 мл) добавляли бензиловый эфир хлороформной кислоты (2,56 мл, 18,0 ммоль) и триэтиламин (2,52 мл, 18,0 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат, с получением бензилового эфира N-(2-гидроксиэтил)-N-метилкарбаминовой кислоты (2,8 г, выход 90%) в виде светло-желтого масла.

Затем в раствор бензилового эфира N-(2-гидроксиэтил)-N-метилкарбаминовой кислоты (2,82 г, 13,5 ммоль) в диметилформамиде (85 мл) добавляли трет-бутилдифенилсилилхлорид (4,21 мл, 16,2 ммоль) и имидазол (1,10 г, 16,2 ммоль) на ледяной бане. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, добавляли метанол и реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (9:1), с получением бензилового эфира N-[2-(трет-бутилдифенилсилилокси)этил]-N-метилкарбаминовой кислоты (5,7 г, выход 94%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,72 (1H, дд, J=7,4, 1,6 Гц), 7,47-7,20 (11H, м), 7,64 (4H, т, J=6,1 Гц), 5,12 (1H, с), 5,05 (1H, с), 3,80 (1H, т, J=5,5 Гц), 3,73 (1H, т, J=5,5 Гц), 3,45 (1H, т, J=5,6 Гц), 3,41 (1H, т, J=5,6 Гц), 2,99 (3H, с), 1,03 (9H, с).

(2) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-{N-[2-(трет-бутилдифенилсилилокси)этил]-N-метилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

Раствор бензилового эфира N-[2-(трет-бутилдифенилсилилокси)этил]-N-метилкарбаминовой кислоты (5,7 г, 12,7 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 40(1)) в метаноле (285 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (5,7 г) при комнатной температуре. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали для удаления катализатора и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (19:2) → этилацетат:метанол (1:1), с получением [2-(трет-бутилдифенилсилилокси)этил]метиламина (2,67 г, выход 69%) в виде прозрачного масла.

Затем в раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-этоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,91 г, 4,09 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(1)) в бензоле (100 мл) добавляли раствор 0,67M [2-(трет-бутилдифенилсилилокси)этил]метиламинтриметилалюминия в бензоле (13,6 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение ночи. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (100 мл) и этилацетат (100 мл) на ледяной бане, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После добавления этилацетата, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-{N-[2-(трет-бутилдифенилсилилокси)этил]-N-метилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (2,54 г, выход 85%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,74-7,55 (8H, м), 7,50-7,31 (12H, м), 7,00 (1H, с), 4,79-4,64 (1H, м), 4,08-3,59 (7H, м, включая 4,80-4,00 (2H, м), 3,85-3,73 (2H, м)), 3,27 (0,3 H, с), 3,07 (0,7 H, с), 1,06 (9H, с), 1,02 (9H, с).

(3) 3-Гидрокси-1-{4-[N-(2-гидроксиэтил)-N-метилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-{N-[2-(трет-бутилдифенилсилилокси)этил]-N-метилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (2,24 г, 3,05 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 40(2)) в безводном тетрагидрофуране (70 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (7,32 мл, 7,32 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали на ледяной бане в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (20:1) → этилацетат:метанол (15:1), с получением 3-гидрокси-1-{4-[N-(2-гидроксиэтил)-N-метилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (833 мг, выход 94%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,18 (1H, с), 4,86-4,74 (1H, м), 4,29 (2H, т, J=8,4 Гц), 3,94 (2H, дд, J=8,4, 4,9 Гц), 3,86 (2H, т, J=5,0 Гц), 3,65 (2H, т, J=5,0 Гц), 3,07 (3H, с).

(4) 1-(4-{N-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил]-N-метил-карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидин

В раствор 3-гидрокси-1-{4-[N-(2-гидроксиэтил)-N-метилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (576 мг, 2,24 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 40(3)) в диметилформамиде (29 мл) добавляли трет-бутилдиметилсилилхлорид (354 мг, 2,35 ммоль) и имидазол (160 мг, 2,35 ммоль) на ледяной бане, и затем реакционную смесь перемешивали на ледяной бане в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (3:1) → этилацетат, с получением 1-(4-{N-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил]-N-метилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (489 мг, выход 60%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,11 (0,7H, с), 7,01 (0,3H, с), 4,87-4,76 (1H, м), 4,31 (2H, т, J=8,3 Гц), 3,96 (2H, дд, J=8,3, 4,5 Гц), 3,91-3,83 (1H, м), 3,79 (1H, д, J=4,5 Гц), 3,74 (1H, д, J=4,5 Гц), 3,66-3,52 (1H, м), 3,28 (0,9H, с), 3,11 (2,1H, с), 0,88 (9H, с), 0,05 (6H, д, J=14,0 Гц).

(5) 1-(4-{N-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил]-N-метил-карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-(4-{N-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил]-N-метилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (442 мг, 1,19 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 40(4)) в метиленхлориде (15 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,12 мл, 1,49 ммоль) и триэтиламин (0,20 мл, 1,49 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали на ледяной бане в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:2), с получением 1-(4-{N-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил]-N-метилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (517 мг, выход 97%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,18 (0,6H, с), 7,08 (0,4H, с), 5,45-5,35 (1H, м), 4,42 (2H, т, J=8,7 Гц), 4,23 (2H, дд, J=8,7, 3,7 Гц), 3,91-3,81 (1H, м), 3,81-3,74 (1H, м), 3,74-3,67 (1H, м), 3,62-3,53 (1H, м), 3,26 (1,2H, с), 3,09 (1,8H, с), 0,85 (9H, с), 0,01 (6H, с).

(6) 3-Ацетилтио-1-(4-{N-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил]-N-метилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 1-(4-{N-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил]-N-метилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (516 мг, 1,14 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 40(5)) в диметилформамиде (15 мл) добавляли тиоацетат калия (815 мг, 7,14 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (90° C) в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:2), с получением 3-ацетилтио-1-(4-{N-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил]-N-метил-карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (279 мг, выход 57%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,08 (0,7H, с), 7,16 (0,4H, с), 4,52 (2H, т, J=7,3 Гц), 4,48-4,39 (1H, м), 3,97 (2H, т, J=7,3 Гц), 3,92-3,82 (1H, м), 3,78 (1H, д, J=4,1 Гц), 3,75 (1H, д, J=4,1 Гц), 3,66-3,50 (1H, м), 3,59 (0,9H, с), 3,92 (2,1H, с), 2,39 (3H, с), 0,88 (9H, д, J=4,7 Гц), 0,04 (6H, д, J=1,5 Гц).

Ссылочный пример 41

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(п-нитробензилоксикарбонилметил)карбамоил-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

(1) 1-(4-Аллилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-трет-бутилдифенилсилилоксиазетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (6,73 г, 15,3 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(4)) в диметилформамиде (330 мл) добавляли аллилбромид (1,59 мл, 18,4 ммоль) и диизопропилэтиламин (3,21 мл, 18,4 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 10 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (5:1), с получением 1-(4-аллилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-трет-бутилдифенилсилилоксиазетидина (5,31 г, выход 73%) в виде коричневого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,63-7,59 (4H, м), 7,46 (1H, с), 7,47-7,36 (6H, м), 6,04-5,95 (1H, м), 5,40-5,35 (1H, м), 5,28-5,24 (1H, м), 4,80-4,78 (2H, м), 4,77-4,71 (1H, м), 4,16 (2H, дд, J=8,8, 6,6 Гц), 4,06 (2H, дд, J=8,8, 4,4 Гц), 1,06 (9H, с).

(2) 1-(4-Аллилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидин

В раствор 1-(4-аллилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-трет-бутилдифенилсилилоксиазетидина (5,31 г, 11,1 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 41(1)) в безводном тетрагидрофуране (266 мл) добавляли раствор 1M фторида тетрабутиламмония в тетрагидрофуране (13,3 мл, 13,3 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат, с получением 1-(4-аллилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (2,91 г, выход 100%) в виде светло-коричневых кристаллов.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,49 (1H, с), 6,06-5,96 (1H, м), 5,42-5,35 (1H, м), 5,29-5,24 (1H, м), 4,87-4,80 (1H, м), 4,79 (2H, д, J=5,9 Гц), 4,38 (2H, т, J=8,8 Гц), 4,02 (2H, дд, J=9,8, 3,9 Гц), 2,52-2,37 (1H, ушир. с).

(3) 1-(4-Аллилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-(4-аллилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (2,91 г, 11,1 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 41(2)) в метиленхлориде (146 мл) добавляли метансульфонилхлорид (2,58 мл, 33,3 ммоль) и триэтиламин (4,67 мл, 33,3 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. К остатку добавляли этилацетат и диизопропиловый эфир, и затем смесь фильтровали и полученный остаток промывали диизопропиловый эфир с получением 1-(4-аллилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (2,71 г, выход 77%) в виде светло-коричневых кристаллов.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,55 (1H, с), 6,07-5,96 (1H, м), 5,45-5,35 (2H, м), 5,30-5,25 (1H, м), 4,81 (2H, дт, J=5,9, 1,5 Гц), 4,51 (2H, дд, J=11,0, 6,6, 1,5 Гц), 4,31 (2H, ддд, J=11,0, 4,4, 1,5 Гц), 3,10 (3H, с).

(4) 3-Ацетилтио-1-(4-аллилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 1-(4-аллилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (2,70 г, 8,51 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 41(3)) в диметилформамиде (135 мл) добавляли тиоацетат калия (5,83 г, 51,1 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 10 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (2:1), с получением 3-ацетилтио-1-(4-аллилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,61 г, выход 63%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,51 (1H, с), 6,06-5,96 (1H, м), 5,41-5,35 (1H, м), 5,29-5,26 (1H, м), 4,58 (2H, т, J=8,1 Гц), 4,47-4,40 (1H, м), 4,04 (2H, дд, J=9,5, 5,9 Гц), 2,36 (3H, с).

(5) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-2-(дифенилфосфорилокси)-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор п-нитробензил(1R,5S,6S)-2-(дифенилфосфорилокси)-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (5,00 г, 8,41 ммоль) в диметилформамиде (250 мл) добавляли трет-бутилдиметилсилилхлорид (2,54 г, 16,8 ммоль) и имидазол (1,14 г, 16,8 ммоль) на ледяной бане, и реакционную смесь перемешивали на ледяной бане в течение 7 часов. После контроля завершения реакции, добавляли метанол, и полученную смесь перемешивали в течение 30 минут. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (3:1), с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-2-(дифенилфосфорилокси)-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (5,27 г, выход 88%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,14 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,56 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,39-7,29 (4H, м), 7,28-7,17 (6H, м), 5,34 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,23 (1H, д, J=13,9 Гц), 4,24 (1H, дкв., J=5,9, 5,9 Гц), 4,20 (1H, дд, J=10,3, 2,9 Гц), 3,43 (1H, дкв., J=10,3,7,3 Гц), 3,28 (1H, дд, J=5,9, 2,9 Гц), 1,23 (3H, д, J=5,9 Гц), 1,20 (3H, д, J=7,3 Гц), 0,86 (9H, с), 0,06 (6H, д, J=3,7 Гц).

(6) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-аллилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор 3-ацетилтио-1-(4-аллилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,61 г, 5,40 ммоль) (полученного в ссылочном примере 41(4)) в диметилформамиде (80 мл) добавляли гидразинацетат (596 мг, 6,47 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1,5 часа при тех же условиях. После контроля завершения реакции в реакционную смесь по каплям добавляли раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-2-(дифенилфосфорилокси)-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (3,83 г, 5,40 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 41(5)) в ацетонитриле (190 мл) на ледяной бане в атмосфере азота.

Затем в реакционную смесь добавляли диизопропилэтиламин (3,76 мл, 21,6 ммоль), и смесь перемешивали в течение ночи, при этом температура реакционной смеси постепенно поднималась до комнатной. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и затем промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1), с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-аллилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (3,73 г, выход 97%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,21 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,65 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,53 (1H, с), 6,07-5,96 (1H, м), 5,45 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,42-5,35 (1H, м), 5,30-5,25 (1H, м), 5,26 (1H, д, J=13,9 Гц), 4,80 (2H, д, J=5,1 Гц), 4,55 (2H, кв., J=8,1 Гц), 4,32-4,22 (3H, м), 4,15-4,09 (3H, м), 3,26 (1H, дд, J=5,1, 2,9 Гц), 3,13 (1H, J=9,5, 7,3 Гц), 1,25 (3H, д, J=5,9 Гц), 1,24 (3H, д, J=7,3 Гц), 0,87 (9H, с), 0,08 (6H, д, J=5,1 Гц).

(7) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбокси-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-аллилоксикарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (3,73 г, 5,2 ммоль) (полученный в ссылочном примере 41(6)) в метиленхлориде (180 мл) добавляли димедон (1,46 г, 10,4 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (603 мг, 0,522 ммоль) и трифенилфосфин (205 мг, 0,783 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (10:1) → метиленхлорид:метанол (10:1), с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбокси-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (1,91 г, выход 54%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

Масс-спектр (FAB⁺): m/z:675 [M+H]⁺

(8) п-Нитробензиловый эфир N-(трет-бутоксикарбонил)глицина

В раствор N-(трет-бутоксикарбонил)глицина (1,51 г, 8,62 ммоль) в безводном метиленхлориде (75 мл) добавляли п-нитробензиловый спирт (2,63 мл, 17,2 ммоль), гидрохлорид 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (здесь и далее обозначен как WSC) (3,3 г, 17,2 ммоль) и 4-диметиламинопиридин (106 мг, 0,87 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (2:1), с получением п-нитробензилового эфира N-(трет-бутоксикарбонил)глицина (2,67 г, выход 100%) в виде белых кристаллов.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=7,5 Гц), 7,53 (2H, д, J=7,5 Гц), 5,28 (2H, с), 5,02 (1H, ушир. т, J=3,3 Гц), 4,00 (2H, д, J=3,3 Гц), 1,46 (9H, с).

(9) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(п-нитробензилоксикарбонилметил)карбамоил-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метил-карбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор нитробензилового эфира N-(трет-бутоксикарбонил)глицина (2,67 г, 8,62 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 41(8)) в 1,4-диоксане (27 мл) добавляли раствор 4н хлориствого водорода в 1,4-диоксане (27 мл) на ледяной бане. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. После контроля завершения реакции, добавляли диэтиловый эфир и реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут. Полученную реакционную смесь фильтровали, и полученный остаток промывали диэтиловым эфиром и сушили с получением гидрохлорида п-нитробензилового эфира глицина (1,59 г, выход 75%) в виде белых кристаллов.

Затем в суспензию п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбокси-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (207,4 мг, 0,31 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 41(7)) и гидрохлорида п-нитробензилового эфира глицина (116 мг, 0,47 ммоль) (полученного, как описано выше) в диметилформамиде (10,5 мл) добавляли диэтилфосфорилцианид (0,072 мл, 0,47 ммоль) и триэтиламин (0,14 мл, 1,00 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой последовательно промывали 0,5M водным раствором соляной кислоты, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия, и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:ацетонитрил (3:1), с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(п-нитробензилоксикарбонилметил)карбамоил-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (209,7 мг, выход 77%) в виде светло-желтого сиропа.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 8,22 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,65 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,59 (1H, т, J=3,3 Гц), 7,54 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,47 (1H, с), 5,46 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,30 (2H, с), 5,27 (1H, д, J=13,9 Гц), 4,51 (1H, т, J=8,3 Гц), 4,47 (1H, т, J=8,3 Гц), 4,37-4,23 (5H, м), 4,08 (1H, дд, J=8,3, 3,3 Гц), 4,06 (1H, дд, J=8,3, 3,3 Гц), 3,27 (1H, дд, J=6,2, 3,6 Гц), 3,16 (1H, дкв., J=11,5, 8,8 Гц), 1,27 (3H, д, J=8,8 Гц), 1,25 (3H, д, J=8,8 Гц), 0,87 (9H, с), 0,09 (3H, с), 0,08 (3H, с).

Ссылочный пример 42

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-трет-бутилдифенилсилилоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

(1) 1-Бензилоксикарбонил-3-трет-бутилдифенилсилилоксиазетидин

Раствор 1-бензгидрил-3-гидроксиазетидина (10 г, 41,8 ммоль) в метаноле (300 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия (10 г) на угле на водяной бане (50° C) в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и остаток промывали метанолом. Объединенный фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток разделяли между этилацетатом и дистиллированной водой. Органический слой концентрировали при пониженном давлении, и полученный остаток сушили при пониженном давлении. Полученный сырой продукт растворяли в смеси метиленхлорида (120 мл) и метанола (120 мл), добавляли бензиловый эфир хлороформной кислоты (8,95 мл, 62,7 ммоль) и триэтиламин (8,79 мл, 62,7 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1) → этилацетат, с получением 1-бензилоксикарбонил-3-гидроксиазетидина (1,91 г, выход 22%).

Затем в раствор 1-бензилоксикарбонил-3-гидроксиазетидина (1,91 г, 9,22 ммоль) в диметилформамиде (96 мл) добавляли трет-бутилдифенилсилилхлорид (2,88 мл, 11,1 ммоль) и имидазол (756 мг, 11,1 ммоль) на ледяной бане. Полученную смесь перемешивали на ледяной бане в течение 6 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (6:1), с получением 1-бензилоксикарбонил-3-трет-бутилдифенилсилилоксиазетидина (4,04 г, выход 98%) в виде бесцветного масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,73-7,70 (1H, м), 7,60-7,56 (4H, м), 7,46-7,29 (10H, м), 5,07 (2H, с), 4,58-4,52 (1H, м), 4,01 (2H, м), 3,95 (2H, дд, J=9,8, 4,9 Гц), 1,05 (9H, с).

(2) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-трет-бутилдифенилсилилоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

Раствор 1-бензилоксикарбонил-3-трет-бутилдифенилсилилоксиазетидина (4,04 г, 9,07 ммоль) в метаноле (200 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (4,04 г) при комнатной температуре в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный остаток сушили при пониженном давлении с получением 3-трет-бутилдифенилсилилоксиазетидина (2,70 г, выход 96%) в виде бесцветного масла.

Затем в раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбокси-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (1,71 г, 2,53 ммоль) и 3-трет-бутилдифенилсилилоксиазетидина (947 мг, 3,04 ммоль) (полученного, как описано выше) в диметилформамиде (86 мл) добавляли диэтилфосфорилцианид (461 мкл, 3,04 ммоль) и триэтиламин (426 мкл, 3,04 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5,5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой последовательно промывали 0,5M водным раствором соляной кислоты, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:ацетонитрил (4:1), с получением п-нитробензил(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-трет-бутилдифенилсилил-оксиазетидин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (789 мг, выход 32%).

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,66 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,62 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,47-7,36 (6H, м), 7,39 (1H, с), 5,46 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,27 (1H, д, J=13,7 Гц), 4,65-4,52 (2H, м), 4,50-4,42 (2H, м), 4,40-4,34 (1H, м), 4,32-4,26 (3H, м), 4,19-4,11 (1H, м), 4,06-4,00 (3H, м), 3,28 (1H, дд, J=4,9, 2,9 Гц), 3,18 (1H, дкв., J=8,8, 7,8 Гц), 1,27 (3H, д, J=7,8 Гц), 1,26 (3H, д, J=5,9 Гц), 1,07 (9H, с), 0,87 (9H, с), 0,09 (6H, д, J=5,9 Гц).

Ссылочный пример 43

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-метил-N-(п-нитробензилоксикарбонил)метилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

(1) п-Нитробензиловый эфир (N-трет-бутоксикарбонил-N-метиламино)уксусной кислоты

В раствор саркозина (3,56 г, 40 ммоль) в смеси метанола (180 мл) и дистиллированной воды (90 мл) добавляли 1M водный раствор гидроксида натрия (80 мл) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, добавляли Dowex-50W на ледяной бане с тем, чтобы довести рН реакционной среды до 5-4, реакционную смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением (N-трет-бутоксикарбонил-N-метиламино)уксусной кислоты (7,57 г) в виде неочищенного продукта.

Затем в раствор (N-трет-бутоксикарбонил-N-метиламино)уксусной кислоты (2,52 г, 13,3 ммоль) и п-нитробензилового спирта (4,07 г, 26,6 ммоль) в метиленхлориде (125 мл) добавляли WSC (5,10 г, 26,6 ммоль) и 4-диметиламинопиридин (252 мг, 1,33 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:1), с получением п-нитробензилового эфира (N-трет-бутоксикарбонил-N-метиламино)уксусной кислоты (4,30 г, выход 88%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,28-8,29 (2H, м), 7,58-7,47 (2H, м), 5,72 (2H, д, J=2,2 Гц), 4,07 (1,2H, с), 3,99 (0,8H, с), 2,95 (3H, д, J=5,8 Гц), 1,47 (5,4H, с), 1,39 (3,6H, с).

(2) Гидрохлорид п-нитробензилового эфира саркозина

В раствор п-нитробензилового эфира (N-трет-бутоксикарбонил-N-метиламино)уксусной кислоты (4,30 г, 133 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 43(1)) добавляли раствор 4н хлористого водорода в 1,4-диоксане (4,3 мл) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2,5 часов. После контроля завершения реакции, добавляли диэтиловый эфир и реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут. Полученную реакционную смесь фильтровали и полученный остаток промывали диэтиловым эфиром и сушили с получением гидрохлорида п-нитробензилового эфира саркозина (3,04 г, выход 88%).

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,32-8,23 (2H, м), 7,72-7,60 (2H, м), 5,42 (2H, с), 4,08 (2H, с), 2,77 (3H, с).

(3) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-метил-N-(п-нитробензилоксикарбонил)метилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В суспензию п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбокси-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилил-оксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (1,00 г, 1,51 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 41(7)) и гидрохлорид п-нитробензилового эфира саркозина (590 мг, 2,26 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 43(2)) в диметилформамиде (30 мл) добавляли диэтилфосфорилцианид (0,37 мл, 2,26 ммоль) и триэтиламин (0,95 мл, 6,80 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой последовательно промывали 0,5M водным раствором соляной кислоты, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:1) → этилацетат, с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-метил-N-(п-нитробензилоксикарбонил)метилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (997 мг, выход 76%).

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,29-8,15 (4H, м), 7,71-7,62 (2H, м), 7,58-7,42 ( 2H, м), 7,40 (0,6H, с), 7,25 (0,4H, с), 5,46 (1H, д, J=13,8 Гц), 5,34-5,22 (3H, м, включая 5,26 (1H, д, J=13,9 Гц)), 4,63 (1H, с), 4,57-4,45 (1H, м), 4,27 (2H, т, J=9,6 Гц), 4,26 (2H, т, J=9,6 Гц), 3,89 (1H, дд, J=7,7, 5,8 Гц), 3,36 (1,2H, с), 3,15 (1,8H, с), 3,26 (1H, дд, J=5,0, 2,6 Гц), 1,25 (6H, д, J=7,2 Гц), 0,86 (9H, с), 0,08 (6H, д, J=5,0 Гц).

Ссылочный пример 44

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-метил-N-(карбамоил)метилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

(1) Трет-бутиловый эфир N-карбамоилметил-N-метилкарбаминовой кислоты

В раствор N-(трет-бутоксикарбонил-N-метиламино)уксусной кислоты (5,03 г, 26,6 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 43(1)) в метиленхлориде (250 мл) добавляли 1-гидроксибензотриазол (7,19 г, 53,2 ммоль), WSC (10,2 г, 53,2 ммоль) и 4-диметиламинопиридин (325 мг, 2,66 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 2 дней. После контроля завершения реакции, добавляли 28% водный раствор аммония и реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента метиленхлорид:метанол (10:1), с получением трет-бутилового эфира N-карбамоилметил-N-метилкарбаминовой кислоты (848 мг, выход 17%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 3,87 (2H, с), 2,96 (3H, с), 1,47 (9H, с).

(2) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-метил-N-(карбамоил)метилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор трет-бутилового эфира N-карбамоилметил-N-метилкарбаминовой кислоты (848 мг, 4,50 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 44(1)) в 1,4-диоксане (8,50 мл) добавляли раствор 4н хлориствого водорода в 1,4-диоксане (8,50 мл) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2,5 часов. После контроля завершения реакции, добавляли диэтиловый эфир, и реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут. Полученную реакционную смесь фильтровали, и полученный остаток промывали диэтиловым эфиром и сушили с получением гидрохлорида 2-метиламиноацетамида (421 мг, выход 75%).

Затем в суспензию п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбокси-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (1,00 г, 1,51 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 41(7)) и гидрохлорид 2-метиламино-ацетамида (282 мг, 2,26 ммоль) (полученного, как описано выше) в диметилформамиде (30 мл) добавляли диэтилфосфорилцианид (0,37 мл, 2,26 ммоль) и триэтиламин (0,95 мл, 6,80 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3,5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой последовательно промывали 0,5M водным раствором соляной кислоты, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия, и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → этилацетат:метанол (10:1), с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-метил-N-(карбамоил)метилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (932 мг, выход 84%).

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=7,9 Гц), 7,65 (2H, д, J=7,9), 7,35 (0,7H, с), 7,23 (0,3H, с), 5,46 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,26 (1H, д, J=13, 9 Гц), 4,62 = 4,40 (2H, м), 4,40-4,22 (3H, м), 4,20 (1H, с), 4,12 (2H, дд, J=14,2, 7,1 Гц), 4,07-3,97 (1H, м), 4,04 (0,6H, ушир. с), 3,27 (1H, дд, J=5,0, 2,8 Гц), 3,15 (1H, дкв., J=9,5, 7,3 Гц), 3,11 (2,4H, ушир. с), 1,25 (6H, д, J=5,8 Гц), 0,87 (9H, с), 0,08 (6H, д, J=5,0 Гц).

Ссылочный пример 45

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(карбамоилметил)карбамоил-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

(1) Трет-бутиловый эфир (карбамоилметил)карбаминовой кислоты

В раствор N-(трет-бутоксикарбонил)глицина (3,01 г, 17,2 ммоль) в безводном метиленхлориде (150 мл) добавляли 1-гидроксибензотриазол (4,63 г, 34,3 ммоль), WSC (6,60 г, 34,4 ммоль) и 4-диметиламинопиридин (210 мг, 1,72 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение ночи. После контроля завершения реакции, добавляли 28% водный раствор аммония, и полученную смесь перемешивали в течение 15 минут. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между метиленхлоридом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (10:1), с получением трет-бутилового эфира (карбамоилметил)карбаминовой кислоты (717,7 мг, выход 24%) в виде бесцветного, прозрачного сиропа.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 6,202 (1H, ушир. с), 5,763 (1H, ушир. с), 5,267 (1H, ушир. т, J-5,1 Гц), 3,820 (2H, д, J=5,1 Гц), 1,456 (9H, с).

(2) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(карбамоилметил)карбамоил-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор трет-бутилового эфира (карбамоилметил)карбаминовой кислоты (717,2 мг, 4,12 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 45(1)) в 1,4-диоксане (7,2 мл) добавляли раствор 4н хлориствого водорода в 1,4-диоксане (7,2 мл) на ледяной бане. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции, добавляли диэтиловый эфир, и реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут. Полученную реакционную смесь фильтровали, и полученный остаток промывали диэтиловым эфиром и сушили с получением гидрохлорида глицинамида (389 мг, выход 86%) в виде белых кристаллов. Затем в суспензию п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбокси-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (566,6 мг, 0,85 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 41(7)) и гидрохлорида глицинамида (154,3 мг, 1,40 ммоль) (полученного, как описано выше) в диметилформамиде (28,0 мл) добавляли диэтилфосфорилцианид (0,2 мл, 1,32 ммоль) и триэтиламин (0,36 мл, 2,6 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой последовательно промывали 0,5M водным раствором соляной кислоты, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:ацетонитрил (2:3), с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(карбамоилметил)карбамоил-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (428,6 мг, выход 70%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,21 (2H, д, J=8,4 Гц), 7,70 (1H, т, J=5,3 Гц), 7,65 (2H, д, J=8,4 Гц), 7,46 (1H, с), 6,15 (1H, ушир. с), 5,46 (1H, д, J=13,4 Гц), 5,43 (1H, ушир. с), 5,27 (1H, д, J=13,4 Гц), 4,52 (1H, т, J=8,3 Гц), 4,50 (1H, т, J=8,3 Гц), 4,345-4,24 (3H, м), 4,12-4,04 (4H, м), 3,265 (1H, дд, J=5,1, 2,7 Гц), 3,155 (1H, дкв., J=9,4, 7,0 Гц), 1,264 (3H, д, J=7,0 Гц), 1,22 (3H, д, J=4,8 Гц), 0,86 (9H, с), 0,09 (3H, с), 0,08 (3H, с).

Ссылочный пример 46

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-2-метил-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

(1) п-Нитробензиловый эфир N-(трет-бутоксикарбонил)-L-валина

В раствор N-(трет-бутоксикарбонил)-L-валина (2,50 г, 11,5 ммоль) в метиленхлориде (125 мл) добавляли п-нитробензиловый спирт (3,52 г, 23,0 ммоль), WSC (4,41 г, 23,0 ммоль) и 4-диметиламинопиридин (140 мг, 1,15 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 4,5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (2:1), с получением п-нитробензилового эфира N-(трет-бутоксикарбонил)-L-валина (3,07 г, выход 76%) в виде белых кристаллов.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,53 (2H, д, J=8,8 Гц), 5,26 (2H, д, J=5,1 Гц), 5,00-4,94 (1H, м), 2,21-2,10 (1H, м), 1,45 (9H, с), 0,97 (3H, д, J=7,3 Гц), 0,88 (3H, д, J=6,6 Гц).

(2) Гидрохлорид п-нитробензилового спирта L-валина

В раствор п-нитробензилового эфира N-(трет-бутоксикарбонил)-L-валина (3,07 г, 8,71 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 46(1)) в 1,4-диоксане (31 мл) добавляли раствор 4н хлориствого водорода в 1,4-диоксане (31 мл) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, к полученному остатку добавляли этилацетат, и смесь фильтровали. Полученный остаток промывали этилацетатом и сушили с получением гидрохлорида п-нитробензилового эфира L-валина (2,21 г, выход 88%).

Элементный анализ:

Полученные значения: C 48,77%, H 5,63%, N 9,49%, Cl 12,38%

Вычисленные значения: C 49,92%, H 5,93%, N 9,70%, Cl 12,28%

(3) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-2-метил-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбокси-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (1,00 г, 1,48 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 41(7)) и гидрохлорида п-нитробензилового эфира L-валина (514 мг, 1,78 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 46(2)) в диметилформамиде (50 мл) добавляли диэтилфосфорилцианид (275 мкл, 1,78 ммоль) и диизопропилэтиламин (620 мкл, 3,56 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (2:1 → 1:1), с получением п-нитробензил(1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-2-метил-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (1,15 г, выход 86%).

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 8,21 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,65 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,58-7,55 (1H, ушир. с), 7,54 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,45 (1H, с), 5,46 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,28 (2H, с), 5,27 (1H, д, J=13,9 Гц), 4,74 (1H, дд, J=9,5, 5,9 Гц), 4,51 (2H, т, J=8,8 Гц), 4,33-4,24 (3H, м), 4,08 (2H, дд, J=8,8, 5,9 Гц), 3,27 (1H, дд, J=5,1, 2,9 Гц), 3,17 (1H, дкв., J=9,5, 7,3 Гц), 2,33-2,24 (1H, м), 1,26 (3H, д, J=7,3 Гц), 1,25 (3H, д, J=5,9 Гц), 1,01 (3H, д, J=6,6 Гц), 0,97 (3H, д, J=7,3 Гц), 0,87 (9H, с), 0,09 (6H, д, J=5,1 Гц).

Ссылочный пример 47

п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-карбамоил-2-метилпропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

(1) Трет-бутиловый эфир (1S)-1-карбамоил-2-метилкарбаминовой кислоты

В раствор N-(трет-бутоксикарбонил)-L-валина (3,00 г, 13,8 ммоль) в безводном метиленхлориде (150 мл) добавляли 1-гидроксибензотриазол (3,73 г, 27,6 ммоль), WSC (5,29 г, 27,6 ммоль) и 4-диметиламинопиридин (169 мг, 1,38 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, добавляли 28% водный раствор аммиака и реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента метиленхлорид:метанол (9:1), с получением трет-бутилового эфира (1S)-1-карбамоил-2-метилкарбаминовой кислоты (2,81 г, выход 94%) в виде белых кристаллов.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 5,93-5,84 (1H, ушир. с), 5,45-5,36 (1H, ушир. с), 5,06-5,00 (1H, ушир. с), 3,98-3,91 (1H, м), 2,21-2,12 (1H, м), 1,45 (9H, с), 0,99 (3H, д, J=6,6 Гц), 0,94 (3H, д, J=6,6 Гц).

(2) Гидрохлорид (2S)-2-амино-3-метилбутирамида

В раствор трет-бутилового эфира (1S)-1-карбамоил-2-метилкарбаминовой кислоты (2,81 г, 13,0 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 47(1)) в 1,4-диоксане (28 мл) добавляли раствор 4н хлориствого водорода в 1,4-диоксане (28 мл) на ледяной бане, и затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции, добавляли этилацетат, реакционную смесь фильтровали и полученный остаток промывали этилацетат и сушили с получением гидрохлорида (2S)-2-амино-3-метилбутирамида (1,94 г, выход 98%).

Элементный анализ:

Полученные значения: C 39,21%, H 8,34%, N 18,31%, Cl 23,38%

Вычисленные значения: C 39,35%, H 8,59%, N 18,35%, Cl 23,23%

(3) п-Нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-карбамоил-2-метилпропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилат

В раствор п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбокси-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (1,00 г, 1,48 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 41(7)) и гидрохлорида L-валинамида (272 мг, 1,78 ммоль) полученного, как описано в ссылочном примере 47(2) в диметилформамиде (50 мл) добавляли диэтилфосфорилцианид (275 мкл, 1,78 ммоль) и диизопропилэтиламин (620 мкл, 3,56 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2,5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:3) → метиленхлорид:этилацетат (3:1), с получением п-нитробензил (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-карбамоил-2-метилпропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-трет-бутилдиметилсилилоксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоксилата (934 мг, выход 82%).

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,65 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,61-7,56 (1H, ушир. д, J=9,5 Гц), 7,43 (1H, с), 6,06-6,00 (1H, ушир. с), 5,46 (1H, д, J=13,9 Гц), 5,42-5,37 (1H, ушир. с), 5,27 (1H, д, J=13,9 Гц), 4,50 (1H, дт, J=8,1,4,4 Гц), 4,36 (1H, дд, J=8,8, 6,6 Гц), 4,32-4,25 (3H, м), 4,08 (2H, дд, J=8,1, 5,1 Гц), 3,27 (1H, дд, J=5,1, 2,2 Гц), 3,16 (1H, дкв., J=9,5, 7,3 Гц), 2,34-2,24 (1H, м), 1,26 (3H, д, J=7,3 Гц), 1,25 (3H, д, J=6,6 Гц), 1,03 (3H, д, J=6,6 Гц), 1,01 (3H, д, J=6,6 Гц), 0,87 (9H, с), 0,08 (6H, д, J=4,4 Гц).

Ссылочный пример 48

3-Ацетилтио-1-{4-[N-изопропил-N-(п-нитробензилоксикарбонилметил)карбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

(1) Метиловый эфир N-(трет-бутоксикарбонил-N-изопропиламино)уксусной кислоты

В раствор гидрохлорида метилового эфира глицина (3,03 г, 24,1 ммоль) в метаноле (150 мл) добавляли триэтиламин (3,4 мл, 24,4 ммоль) и ацетон (17,7 мл, 241,1 ммоль), и смесь перемешивали на водяной бане (50° C) в течение 1,5 часа. Затем добавляли натрий цианоборгидрид (3,03 г, 48,2 ммоль) на ледяной бане, и в реакционную смесь добавляли раствор 10% хлористого водорода в метаноле с тем, чтобы довести рН реакционной среды до 3-4, и полученную реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, и остаток сушили при пониженном давлении. В суспензию полученного неочищенного продукта в смеси метанола (45 мл) и метиленхлорида (90 мл) добавляли ди-трет-бутоксикарбоновый ангидрид (10,5 г, 48,1 ммоль) и триэтиламин (13,5 мл, 96,9 ммоль) на ледяной бане, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:этилацетат (5:1), с получением метилового эфира (N-трет-бутоксикарбонил-N-изопропиламино)уксусной кислоты (3,93 г, выход 70%) в виде бесцветного прозрачного сиропа.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 4,54-4,40 (0,6H, м), 4,24-4,10 (0,4H, м), 3,86 (0,8H, с), 3,74 (1,2H, с), 3,72 (3H, с), 1,48 (3,6H, с), 1,42 (5,4H, с), 1,11 (2,4H, д, J=7,7 Гц), 1,09 (3,6H, д, J=7,7 Гц).

(2) п-Нитробензиловый эфир (N-трет-бутоксикарбонил-N-изопропиламино)уксусной кислоты

В раствор метилового эфира (N-трет-бутоксикарбонил-N-изопропиламино)уксусной кислоты (5,59 г, 24,2 ммоль) в смеси метанола (112 мл) и дистиллированной воды (56 мл) добавляли 1M водный раствор гидроксида натрия (37 мл) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 7 часов. После контроля завершения реакции, добавляли Dowex-50W на ледяной бане с тем, чтобы довести рН реакционной среды до 5-4, реакционную смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением (N-трет-бутоксикарбонил-N-изопропиламино)уксусной кислоты (5,25 г) в виде неочищенного продукта.

Затем в раствор (N-трет-бутоксикарбонил-N-изопропиламино)уксусной кислоты (2,05 г, 9,44 ммоль) и п-нитробензилового спирта (2,89 г, 18,9 ммоль) в метиленхлориде (100 мл) добавляли WSC (3,62 г, 18,9 ммоль) и 4-диметиламинопиридин (120 мг, 0,98 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота, и затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (5:2), с получением п-нитробензилового эфира (N-трет-бутоксикарбонил-N-изопропиламино)уксусной кислоты (1,93 г, выход 58%) в виде светло-желтого прозрачного сиропа.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,24 (1H, д, J=8,0 Гц), 8,22 (1H, д, J=8,0 Гц), 7,53 (2H, д, J=8,0 Гц), 5,26 (2H, с), 4,54-4,42 (0,5H, м), 4,28-4,16 (0,5H, м), 3,94 (1H, с), 3,84 (1H, с), 1,48 (4,5H, с), 1,36 (4,5H, с), 1,12 (3H, д, J=7,7 Гц), 1,10 (3H, д, J=7,7 Гц).

(3) Гидрохлорид п-нитробензилового эфира (изопропиламино)уксусной кислоты

В раствор п-нитробензилового эфира (N-трет-бутоксикарбонил-N-изопропиламино)уксусной кислоты (1,93 г, 5,48 ммоль) в 1,4-диоксане (20 мл) добавляли раствор 4н хлористого водорода в 1,4-диоксане (20 мл) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции, добавляли диэтиловый эфир, реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут и фильтровали, и полученный остаток промывали диэтиловым эфиром и сушили с получением гидрохлорида п-нитробензилового эфира (изопропиламино)уксусной кислоты (1,50 г, выход 95%) в виде белых кристаллов.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,26 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,67 (2H, д, J=8,8 Гц), 5,43 (2H, с), 4,11 (2H, с), 3,50-3,40 (1H, м), 1,34 (6H, д, J=5,9 Гц).

(4) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[N-изопропил-N-(п-нитробензилоксикарбонилметил)карбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор гидрохлорида п-нитробензилового эфира (изопропиламино)уксусной кислоты (500 мг, 1,73 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 48(3)) и 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (506 мг, 1,15 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(4)) в диметилформамиде (15 мл) добавляли диэтилфосфорилцианид (0,28 мл, 1,73 ммоль) и триэтиламин (0,60 мл, 4,32 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой последовательно промывали 0,5M водным раствором соляной кислоты, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[N-изопропил-N-(п-нитробензилокси-карбонилметил)карбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (578 мг, выход 75%) в виде светло-желтого сиропа.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,28-8,18 (2H, м), 7,70-7,30 (12H, м), 7,38 (0,4H, ушир. с), 7,10 (0,6H, ушир. с), 5,29 (0,8H, ушир. с), 5,16 (1,2H, ушир. с), 5,04-4,44 (3H, м), 4,20-3,85 (5H, м), 1,17 (6H, ушир. с), 1,06 (9H, ушир. с).

(5) 3-Гидрокси-1-{4-[N-изопропил-N-(п-нитробензилоксикарбонилметил)карбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4- [N-изопропил-N-(п-нитробензилоксикарбонилметил)карбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (1,81 г, 2,69 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 48(4)) в безводном тетрагидрофуране (90 мл) добавляли уксусную кислоту (0,18 мл, 3,23 ммоль) и раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (3,23 мл, 3,23 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали на ледяной бане в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента метиленхлорид:этилацетат (1:1), с получением 3-гидрокси-1-{4-[N-изопропил-N-(п-нитробензилоксикарбонилметил)карбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (968 мг, выход 83%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,22 (2H, д, J=8,0 Гц), 7,55 (1H, д, J=8,0 Гц), 7,42 (1H, д, J=8,0 Гц), 7,39 (0,4H, с), 7,12 (0,6H, с), 5,29 (1,2H, ушир. с), 5,22 (0,8H, ушир. с), 5,03-4,89 (0,5H, м), 4,89-4,76 (1H, м), 4,59 (1H, ушир. с), 4,32 (1H, т, J=7,3 Гц), 4,22-4,02 (2H, м), 4,02-3,85 (1H, м), 3,85 (1H, м), 1,10-1,03 (6H, м).

(6) 1-{4-[N-Изопропил-N-(п-нитробензилоксикарбонилметил)карбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 3-гидрокси-1-{4-[N-изопропил-N-(п-нитробензилоксикарбонилметил)карбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (968 мг, 2,23 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 48(5)) в метиленхлориде (50 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,42 мл, 5,34 ммоль) и триэтиламин (0,37 мл, 2,67 ммоль) на ледяной бане. Реакционную смесь перемешивали на ледяной бане в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента метиленхлорид:этилацетат (1:1), с получением 1-{4-[N-изопропил-N-(п-нитробензилоксикарбонилметил)карбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-метансульфонилоксиазетидина (835 мг, выход 73%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=7,9 Гц), 7,55 (1H, д, J=7,9 Гц), 7,48 (0,4H, ушир. с), 7,43 (1H, д, J=7,9 Гц), 7,26 (0,6H, ушир. с), 5,51-5,16 (3H, м, включая 5,29 (1,2H, с), 5,22 (0,8H, с)), 5,04-4,89 (0,4H, м), 4,89-4,72 (1H, м), 4,59-4,48 (1H, м), 4,48-4,37 (1H, м), 4,37-4,18 (2H, м), 4,18-3,96 (2H, м), 3,11 (3H, с), 1,30-1,17 (6H, м).

(7) 3-Ацетилтио-1-{4-[N-изопропил-N-(п-нитробензилоксикарбонилметил)карбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 1-{4-[N-изопропил-N-(п-нитробензилокси-карбонилметил)карбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}-3-метансульфонилоксиазетидина (835 мг, 1,63 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 48(6)) в диметилформамиде (42 мл) добавляли тиоацетат калия (1,12 г, 9,77 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (90° C) в течение 7 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:1), с получением метиленхлорид (50 мл) добавляли 3-ацетилтио-1-{4-[N-изопропил-N-(п-нитробензилоксикарбонилметил)карбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (312 мг, выход 39%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,21 (2H, д, J=6,9 Гц), 7,55 (1H, д, J=8,3 Гц), 7,44 (0,6H, ушир. с), 7,43 (1H, д, J=8,3 Гц), 7,17 (0,6H, ушир. с), 5,19 (1,2H, с), 5,22 (0,8H, ушир. с), 5,02-4,90 (0,6H, м), 4,90-4,78 (0,4H, м), 4,65-3,65 (7H, м), 2,36 (3H, ушир. с), 1,40-1,18 (6H, м).

Ссылочный пример 49

3-Ацетилтио-1-[4-(N-карбамоилметил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

(1) Трет-бутиловый эфир N-карбамоилметил-N-изопропил-карбаминовой кислоты

В раствор (N-трет-бутоксикарбонил-N-изопропиламино)уксусной кислоты (3,20 мг, 14,7 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 48(2)) и 1-гидроксибензотриазола (4,0 г, 29,6 ммоль) в метиленхлориде (150 мл) добавляли WSC (5,6 г, 29,2 ммоль) и 4-диметиламинопиридин (200 мг, 1,64 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции, добавляли 28% водный раствор аммония (40 мл), и полученную смесь перемешивали в течение 30 минут. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между метиленхлоридом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента метиленхлорид:метанол (10:1), с получением трет-бутилового эфира N-карбамоилметил-N-изопропил-карбаминовой кислоты (2,67 г, выход 84%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 5,434 (1H, ушир. с), 4,25 (1H, ушир. с), 3,735 (2H, с), 1,478 (9H, с), 1,14 (6H, д, J=6,6 Гц).

(2) Гидрохлорид 2-изопропиламиноацетамида

В раствор трет-бутилового эфира N-карбамоилметил-N-изопропил-карбаминовой кислоты (2,67 г, 12,3 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 49(1)) в 1,4-диоксане (30 мл) добавляли раствор 4н хлориствого водорода в 1,4-диоксане (30 мл) на ледяной бане, и затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции, добавляли диэтиловый эфир, и реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут. Полученную смесь фильтровали, и остаток промывали диэтиловым эфиром и затем сушили при пониженном давлении с получением гидрохлорида 2-изопропиламиноацетамида (1,82 г, выход 97%) в виде белых кристаллов.

 ¹H-ЯМР (500 МГц, CD₃OD): δ (м.д.) 3,80 (2H, с), 3,46-3,38 (1H, м), 1,34 (6H, д, J=6,8 Гц)

(3) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-[4-(N-карбамоилметил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

В раствор гидрохлорида 2-изопропиламино-ацетамида (500 мг, 3,28 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 49(2)) и 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (961 мг, 2,19 ммоль) в диметилформамиде (29 мл) добавляли диэтилфосфорилцианид (0,54 мл, 3,29 ммоль) и триэтиламин (1,15 мл, 8,19 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой последовательно промывали 0,5M водным раствором соляной кислоты, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат, с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-[4-(N-карбамоилметил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (1,18 г, выход 100%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,62 (4H, д, J=6,6 Гц), 7,52-7,36 (6H, м), 7,21-6,85 (1H, м), 4,80-4,72 (1H, м), 4,28 (1H, т, J=7,3 Гц), 4,24 (1H, т, J=7,3 Гц), 4,16-4,01 (2H, м), 4,01-3,88 (2H, м), 1,25 (6H, д, J=6,7 Гц), 1,07 (9H, ушир. с).

(4) 1-[4-(N-Карбамоилметил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]-3-гидроксиазетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-[4-(N-карбамоилметил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (6,52 г, 11,8 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 49(3)) в безводном тетрагидрофуране (326 мл) добавляли 1,0M раствор фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (14,2 мл, 14,2 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали на ледяной бане в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (10:1), с получением 1-[4-(N-карбамоилметил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]-3-гидроксиазетидина (2,35 г, выход 67%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,20-7,02 (0,6H, м), 7,02-6,80 (0,6H, м), 5,86-5,62 (0,4H, м), 5,62-5,32 (0,6H, м), 5,25-5,14 (0,3H, м), 4,90-4,75 (0,7H, м), 4,67 (0,7H, квинт., J=6,6 Гц), 4,43-4,34 (0,4H, м), 4,34-4,22 (0,6H, м),4,03 (2H, с), 4,00-3,91 (2H, м), 3,89 (0,3H, квинт., J=6,0 Гц), 1,26 (6H, дд, J=6,7, 2,4 Гц).

(5) 1-[4-(N-Карбамоилметил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]-3-метансульфонилоксиазетидин и 1-[4-(N-цианометил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]-3- метансульфонилокси-азетидин

В раствор 1-[4-(N-карбамоилметил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]-3-гидроксиазетидина (2,35 г, 7,88 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 49(4)) в метиленхлориде (120 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,91 мл, 11,8 ммоль) и триэтиламин (1,66 мл, 11,8 ммоль) на ледяной бане. Реакционную смесь перемешивали на ледяной бане в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (10:1), с получением 1-[4-(N-карбамоилметил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]-3-метансульфонилоксиазетидина (516 мг, выход 17%) в виде светло-желтого твердого вещества и 1-[4-(N-цианометил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]-3- метансульфонилоксиазетидина (634 мг, выход 22%) в виде светло-желтого твердого вещества.

1-[4-(N-карбамоилметил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]-3-метансульфонилоксиазетидин

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,15-6,72 (1H, м), 5,65-5,15 (1H, м), 4,79-4,62 (1H, м), 4,44 (2H, т, J=6,7 Гц), 4,26 (2H, д, J=6,7 Гц), 4,05 (2H, м), 3,11 (3H, с), 1,26 (6H, м).

1-[4-(N-Цианометил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]-3-метансульфонилоксиазетидин

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,55-7,10 (1H, м), 5,50-5,38 (1H, м), 4,93-4,78 (1H, м), 4,60-4,00 (6H, м, включая 4,51 (2H, т, J=9,6 Гц), 4,32 (2H, дд, J=9,6, 3,7 Гц)), 3,11 (3H, с), 1,31 (6H, д, J=6,8 Гц).

(6) 3-Ацетилтио-1-[4-(N-карбамоилметил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

В раствор 1-[4-(N-карбамоилметил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]-3-метансульфонилоксиазетидина (516 мг, 1,37 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 49(5)) в диметилформамиде (15 мл) добавляли тиоацетат калия (939 мг, 8,22 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (90° C) в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → этилацетат:метанол (20:1), с получением 3-ацетилтио-1-[4-(N-карбамоилметил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (347 мг, выход 71%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,45-6,72 (1H, м), 4,76-4,61 (1H, м), 4,51 (2H, т, J=7,4 Гц), 4,47-4,40 (1H, м), 4,40 (2H, с), 3,98 (2H, т, J=7,4 Гц), 2,37 (3H, с), 1,26 (6H, д, J=6,8 Гц).

Ссылочный пример 50

3-Ацетилтио-1-[4-(N-цианометил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

(1) 3-Ацетилтио-1-[4-(N-цианометил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

В раствор 1-[4-(N-цианометил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]-3-метансульфонилоксиазетидина (635 мг, 1,77 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 49(5)) в диметилформамиде (19 мл) добавляли тиоацетат калия (1,21 г, 10,6 ммоль) при комнатной температуре, и реакционную смесь перемешивали на масляной бане (90° C) в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:1) → этилацетат, с получением 3-ацетилтио-1-[4-(N-цианометил-N-изопропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (344 мг, выход 57%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,58-7,18 (1H, м), 4,96-4,82 (1H, м), 4,82-4,10 (5H, м, включая 4,54 (2H, т, J=8,4 Гц), 4,50-4,40 (1H, м)), 4,01 (2H, т, J=8,4 Гц), 2,36 (3H, с), 1,30 (6H, д, J=6,8 Гц).

Ссылочный пример 51

3-Ацетилтио-1-{4-[1-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперидин-4-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

(1) 4-Гидрокси-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперидин

В раствор гидрохлорида 4-гидроксипиперидина (3,0 г, 21,8 ммоль) в смеси метиленхлорида (90 мл) и пиридина (15 мл) добавляли п-нитробензиловый эфир хлороформной кислоты (15,4 г, 72,0 ммоль) и триэтиламин (13,1 мл, 93,8 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 дней. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1) → этилацетат, с получением 4-гидрокси-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперидина (2,96 г, выход 48%) в виде светло-желтых кристаллов.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,1 Гц), 8,51 (2H, д, J=8,1 Гц), 5,23 (2H, с), 3,98-3,87 (3H, м), 3,30-3,15 (2H, м), 1,96-1,85 (2H, м), 1,59-1,48 (2H, м).

(2) 4-Метансульфонилокси-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперидин

В раствор 4-гидрокси-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперидина (2,96 г, 14,8 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 51(1)) в метиленхлориде (90 мл) добавляли метансульфонилхлорид (1,15 мл, 14,8 ммоль) и триэтиламин (2,07 мл, 14,8 ммоль) на ледяной бане. Температуру реакционной смесь доводили до комнатной в течение 10 минут, и затем перемешивали в течение 6 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток перекристаллизовывали из раствора н-гексан:этилацетат (1:1) с получением 4-метансульфонилокси-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперидина (3,31 г, выход 87%) в виде светло-желтых кристаллов.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,51 (2H, д, J=8,8 Гц), 5,23,(2H,s), 4,96-4,90 (1H, м), 3,79-3,72 (2H, м), 3,51-3,44 (2H, м), 3,05 (3H, с), 2,10-1,96 (2H, м), 1,92-1,84 (2H, м).

(3) 4-Азидо-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперидин

В раствор 4-метансульфонилокси-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперидина (3,31 г, 9,24 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 51(2)) в диметилформамиде (100 мл) добавляли азид натрия (660 мг, 10,2 ммоль), и смесь перемешивали на масляной бане (100° C) в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (3:1 → 1:1), с получением 4-азидо-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперидина (2,81 г, выход 100%) в виде светло-желтых кристаллов.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,51 (2H, д, J=8,8 Гц), 5,22 (2H, с), 3,86 (2H, дт, J=13,9, 5,1 Гц), 3,68-3,62 (1H, м), 3,32-3,20 (2H, м), 1,98-1,85 (2H, м), 1,68-1,61 (2H, м).

(4) 4-Амино-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперидин

В раствор 4-азидо-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперидина (2,81 г, 9,17 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 51(3)) в ацетонитриле (84 мл) добавляли трифенилфосфин (2,53 г, 9,63 ммоль), и смесь перемешивали на масляной бане (70° C) в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, добавляли декагидрат сульфата натрия (3,10 г, 9,63 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и разделяли между метиленхлоридом и 0,1M водным раствором хлористого водорода. К полученному водному слою добавляли метиленхлорид и гидрокарбонат натрия, и водный слой экстрагировали метиленхлоридом. Полученный органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток сушили при пониженном давлении с получением 4-амино-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперидина (2,33 г, выход 91%) в виде светло-желтых кристаллов.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, 8,8 Гц), 7,51 (2H, д, 8,8 Гц), 5,22 (2H, с), 4,18-4,06 (2H, м), 3,01-2,83 (2H, м), 1,88-1,80 (2H, м), 1,34-1,22 (2H, м).

(5) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[1-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперидин-4-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 4-амино-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперидина (382 мг, 1,37 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 51(4)) и 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (500 мг, 1,14 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(4)) в диметилформамиде (25 мл) добавляли диэтилфосфорилцианид (208 мкл, 1,37 ммоль) и триэтиламин (192 мкл, 1,37 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1 → 1:3), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[1-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперидин-4-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (574 мг, выход 72%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,24 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,62 (4H, д, J=8,8 Гц), 7,54-7,38 (6H, м), 7,36 (1H, с), 7,09-7,04 (1H, ушир. д, J=8,8 Гц), 5,23 (2H, с), 4,79-4,72 (1H, м), 4,22-4,04 (5H, м), 4,01 (2H, дд, J=8,8, 5,1 Гц), 3,08-2,97 (2H, м), 2,08-2,00 (2H, м), 1,55-1,42 (2H, м), 1,07 (9H, с).

(6) 3-Гидрокси-1-{4-[1-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперидин-4-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[1-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперидин-4-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (570 мг, 0,820 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 51(5)) в безводном тетрагидрофуране (17 мл) последовательно добавляли уксусную кислоту (56 мкл, 0,984 ммоль) и 1,0M раствор фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (984 мкл, 0,984 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали на ледяной бане в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:3) → этилацетат:метанол (95:5), с получением 3-гидрокси-1-{4-[1-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперидин-4-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (360 мг, выход 95%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,51 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,39 (1H, с), 7,11-7,06 (1H, ушир. д, J=8,1 Гц), 5,23 (2H, с), 4,88-4,80 (1H, м), 4,32 (2H, дд, J=8,8, 6,6 Гц), 4,24-4,04 (3H, м), 3,96 (2H, дд, J=9,5, 4,4 Гц), 3,12-2,95 (2H, м), 2,37-2,32 (1H, д, J=5,9 Гц), 2,04-1,99 (2H, м), 1,55-1,43 (2H, м).

(7) 3-Метансульфонилокси-1-{4-[1-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперидин-4-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-гидрокси-1-{4-[1-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперидин-4-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (360 мг, 0,780 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 51(6)) в метиленхлориде (18 мл) добавляли метансульфонилхлорид (181 мкл, 2,34 ммоль) и триэтиламин (328 мкл, 2,34 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → этилацетат:метанол (98:2), с получением 3-метансульфонилокси-1-{4-[1-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперидин-4-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (390 мг, выход 93%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,52 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,52 (1H, с), 7,06-7,02 (1H, ушир. д, J=7,7 Гц), 5,45-5,40 (1H, м), 5,23 (2H, с), 4,45 (2H, дд, J=10,3, 6,8 Гц), 4,27 (2H, дд, J=10,3, 4,3 Гц), 4,24-4,06 (3H, м), 3,11 (3H, с), 3,10-2,95 (2H, м), 2,07-2,00 (2H, м), 1,56-1,44 (2H, м).

(8) 3-Ацетилтио-1-{4-[1-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперидин-4-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-метансульфонилокси-1-{4-[1-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперидин-4-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (390 мг, 0,723 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 51(7)) в диметилформамиде (20 мл) добавляли тиоацетат калия (496 мг, 4,34 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:2) → этилацетат, с получением 3-ацетилтио-1-{4-[1-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперидин-4-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (262 мг, выход 70%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,1 Гц), 7,51 (2H, д, J=8,1 Гц), 7,41 (1H, с), 7,08-7,04 (1H, ушир. д, J=7,8 Гц), 5,23 (2H, с), 4,53 (2H, т, J=8,8 Гц), 4,46-4,40 (1H, м), 4,22-4,04 (3H, м), 3,98 (2H, дд, J=8,8, 5,9 Гц), 3,12-2,96 (2H, м), 2,37 (3H, с), 2,06-2,00 (2H, м), 1,55-1,43 (2H, м).

Ссылочный пример 52

3-Ацетилтио-1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

(1) (3R)-3-Гидрокси-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин

В суспензию гидрохлорида (3R)-3-гидроксипирролидина (7,00 г, 56,6 ммоль) в метиленхлориде (210 мл) добавляли п-нитробензиловый эфир хлороформной кислоты (13,4 г, 62,3 ммоль) и триэтиламин (17,4 мл, 125 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1) → этилацетат, с получением (3R)-3-гидрокси-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидина (13,6 г, выход 90%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=8,1 Гц), 7,53 (2H, д, J=8,1 Гц), 5,24 (2H, с), 4,55-4,50 (1H, м), 3,63-3,53 (3H, м), 3,51-3,44 (1H, м), 2,09-1,93 (2H, м)

(2) (3R)-3-Метансульфонилокси-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин

В раствор (3R)-3-гидрокси-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидина (9,0 г, 33,8 ммоль) в метиленхлориде (270 мл) добавляли метансульфонилхлорид (2,88 мл, 37,2 ммоль) и триэтиламин (5,21 мл, 37,2 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:2) → этилацетат, с получением (3R)-3-метансульфонилокси-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидина (11,5 г, выход 99%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,1 Гц), 7,53 (2H, м), 5,33-5,23 (1H, м) 5,24 (2H, с), 3,82 (1H, дд, J=12,5, 5,1 Гц), 3,72-3,53 (3H, м), 3,06 (3H, с), 2,42-2,26 (1H, м), 2,26-2,11 (1H, м).

(3) (3S)-3-Азидо-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин

В раствор (3R)-3-метансульфонилокси-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидина (4,00 г, 11,6 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 52(2)) в диметилформамиде (120 мл) добавляли азид натрия (831 мг, 12,8 ммоль), и смесь перемешивали на масляной бане (100° C) в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (3:1 → 1:2), с получением (3S)-3-азидо-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидина (3,43 г, выход 100%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,54 (2H, д, J=8,7 Гц), 5,18 (2H, с), 4,24-4,38 (1H, м), 3,62-3,48 (4H, м), 2,19-2,11 (2H, м).

(4) (3S)-3-Амино-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин

В раствор (3S)-3-азидо-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидина (3,43 г, 11,6 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 52(3)) в ацетонитриле (103 мл) добавляли трифенилфосфин (3,19 г, 12,2 ммоль), и смесь перемешивали на масляной бане (70° C) в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, добавляли декагидрат сульфата натрия (3,93 г, 12,2 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и разделяли между метиленхлоридом и 0,1M водным раствором хлористого водорода. К полученному водному слою добавляли метиленхлорид и гидрокарбонат натрия, и водный слой экстрагировали метиленхлоридом. Полученный органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток сушили при пониженном давлении с получением (3S)-3-амино-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидина (2,83 г, выход 92%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,52 (2H, д, J=8,7 Гц), 5,23 (2H, с), 3,68-3,57 (3H, м), 3,52-3,44 (1H, м), 3,19-3,11 (1H, м), 2,14-2,04 (1H, м), 1,77-1,64 (1H, м).

(5) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В суспензию (3S)-3-амино-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидина (363 мг, 1,37 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 52(4)) и 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (500 мг, 1,14 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(4)) в диметилформамиде (25 мл) добавляли диэтилфосфорилцианид (208 мкл, 1,37 ммоль) и триэтиламин (192 мкл, 1,37 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1 → 1:3), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (566 мг, выход 72%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, м), 7,61 (4H, д, J=8,8 Гц), 7,53 (2H, м), 7,48-7,38 (6H, м), 7,37 (1H, с), 7,22-7,15 (1H, ушир. т, J=8,3 Гц), 5,24 (2H, д, J=10,7 Гц), 4,80-4,74 (1H, м), 4,67-4,59 (1H, м), 4,11 (2H, т, J=7,3 Гц), 4,07-4,00 (2H, м), 3,81 (1H, дт, J=10,7, 5,9 Гц), 3,67-3,52 (2H, м), 3,40 (1H, дд, J=11,2, 5,4 Гц), 2,33-2,22 (1H, м), 2,08-1,92 (1H, м), 1,07 (9H, с).

(6) 3-Гидрокси-1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (560 мг, 0,816 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 52(5)) в безводном тетрагидрофуране (17 мл) последовательно добавляли уксусную кислоту (56 мкл, 0,980 ммоль) и раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (980 мкл, 0,980 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали на ледяной бане в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, добавляли этилацетат и воду, и водный слой экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → этилацетат:метанол (95:1), с получением 3-гидрокси-1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (359 мг, выход 98%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, м), 7,53 (2H, м), 7,40 (1H, с), 7,24-7,17 (1H, ушир. с), 5,30-5,18 (2H, м), 4,89-4,82 (1H, м), 4,66-4,58 (1H, м), 4,33 (2H, т, J=7,8 Гц), 3,96 (2H, дд, J=8,8, 3,9 Гц), 3,80 (1H, дт, J=11,2, 5,8 Гц), 3,66-3,52 (2H, м), 3,46-3,39 (1H, м), 2,44-2,37 (1H, ушир. с), 2,33-2,22 (1H, м), 2,10-1,95 (1H, м).

(7) 3-Метансульфонилокси-1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилокси-карбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-гидрокси-1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (350 мг, 0,782 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 52(6)) в метиленхлориде (18 мл) добавляли метансульфонилхлорид (182 мкл, 2,35 ммоль) и триэтиламин (329 мкл, 2,35 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → этилацетат:метанол (98:2), с получением 3-метансульфонилокси-1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (410 мг, выход 99%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,21 (2H, м), 7,53 (2H, м), 7,46 (1H, с), 7,20-7,14 (1H, ушир. с), 5,45-5,40 (1H, м), 5,24 (2H, д, J=8,8 Гц), 4,66-4,59 (1H, м), 4,46 (2H, т, J=8,1 Гц), 4,27 (2H, дд, J=9,9, 4,0 Гц), 3,81 (1H, дт, J=11,0, 6,3 Гц), 3,67-3,52 (2H, м), 3,42 (1H, дд, J=11,0, 5,1 Гц), 3,12 (3H, с), 2,31-2,24 (1H, м), 2,07-1,95 (1H, м).

(8) 3-Ацетилтио-1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-метансульфонилокси-1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (410 мг, 0,780 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 52(7)) в диметилформамиде (21 мл) добавляли тиоацетат калия (534 мг, 4,68 ммоль) при комнатной температуре, и реакционную смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:2) → этилацетат, с получением 3-ацетилтио-1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (287 мг, выход 73%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, м), 7,52 (2H, м), 7,42 (1H, с), 7,20-7,15 (1H, ушир. с), 5,24 (2H, д, J=10,7 Гц), 4,66-4,59 (1H, м), 4,53 (2H, т, J=8,3 Гц), 4,47-4,41 (1H, м), 3,99 (2H, т, J=6,4 Гц), 3,84-3,76 (1H, м), 3,65-3,53 (2H, м), 3,41 (1H, дд, J=11,7, 4,9 Гц), 2,37 (3H, с), 2,33-2,20 (1H, м), 2,07-1,93 (1H, м).

Ссылочный пример 53

3-Ацетилтио-1-{4-[(3R)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

(1) (3S)-3-Ацетокси-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин

В раствор (3R)-3-метансульфонилокси-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидина (7,50 г, 21,8 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 52(2)) в диметилформамиде (225 мл) добавляли ацетат калия (6,41 г, 65,3 ммоль), и смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой последовательно промывали 10% водным раствором хлорида натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (2:1 → 1:2), с получением (3S)-3-ацетокси-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидина (5,51 г, выход 82%) в виде белых кристаллов.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,1 Гц), 7,53 (2H, д, J=8,1 Гц), 5,33-5,29 (1H, м), 5,24 (2H, с), 3,68-3,50 (4H, м), 2,19-2,02 (2H, м), 2,04 (3H, с).

(2) (3S)-3-Гидрокси-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин

В раствор (3S)-3-ацетокси-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидина (5,51 г, 17,8 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 53(1)) в метаноле (200 мл) добавляли каталитическое количество метоксида натрия, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4,5 часов. После контроля завершения реакции, в реакционную смесь добавляли раствор 4н хлористого водорода в 1,4-диоксане (4,3 мл). Полученную реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:2) → этилацетат, с получением (3S)-3-гидрокси-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидина (4,00 г, выход 84%) в виде белых кристаллов.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=8,1 Гц), 7,53 (2H, д, J=8,1 Гц), 5,24 (2H, с), 4,55-4,50 (1H, м), 3,63 – 3,52 (3H, м), 3,52-3,44 (1H, м), 2,09-1,92 (2H, м).

(3) (3S)-3-Метансульфонилокси-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин

В раствор (3S)-3-гидрокси-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидина (4,00 г, 15,0 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 53(2)) в метиленхлориде (120 мл) добавляли метансульфонилхлорид (1,28 мл, 16,5 ммоль) и триэтиламин (2,31 мл, 16,5 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2,5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:2) → этилацетат, с получением (3S)-3-метансульфонилокси-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидина (5,33 г, выход 100%) в виде бесцветного, прозрачного сиропа.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,53 (2H, дд, J=8,1, 3,7 Гц), 5,33-5,23 (1H, м), 5,24 (2H, с), 3,82 (1H, дд, J=12,5, 5,1 Гц), 3,72-3,53 (3H, м), 3,06 (3H, с), 2,42-2,26 (1H, м), 2,26-2,11 (1H, м).

(4) (3R)-3-Азидо-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин

В раствор (3S)-3-метансульфонилокси-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидина (5,33 г, 15,0 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 53(3)) в диметилформамиде (159 мл) добавляли азид натрия (1,07 г, 16,5 ммоль), и смесь перемешивали на масляной бане (100° C) в течение 3,5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой последовательно промывали 10% водным раствором хлорида натрия и насыщенный водный раствор хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (3:1 → 1:2), с получением (3R)-3-азидо-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидина (4,48 г, выход 100%) в виде бесцветного масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,53 (2H, д, J=8,8 Гц), 5,24 (2H, с), 4,24-4,18 (1H, м), 3,62-3,48 (4H, м), 2,19-2,02 (2H, м).

(5) (3R)-3-Амино-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин

В раствор (3R)-3-азидо-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидина (4,48 г, 15,4 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 53(4)) в ацетонитриле (134 мл) добавляли трифенилфосфин (4,22 г, 16,1 ммоль), и смесь перемешивали на масляной бане (70° C) в течение 1,5 часа. После проверки исчезновения сырых продуктов, добавляли декагидрат сульфата натрия (5,19 г, 16,1 ммоль) и затем реакционную смесь перемешивали в течение 5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и разделяли между метиленхлоридом и 0,1M водным раствором хлористого водорода. К полученному водному слою добавляли метиленхлорид и гидрокарбонат натрия, и водный слой экстрагировали метиленхлоридом. Полученный органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток сушили при пониженном давлении с получением (3R)-3-амино-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидина (3,53 г, выход 86%) в виде светло-желтых кристаллов.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,52 (2H, д, J=8,8 Гц), 5,23 (2H, с), 3,66-3,58 (3H, м), 3,52-3,45 (1H, м), 3,19-3,12 (1H, м), 2,13-2,04 (1H, м), 1,76-1,66 (1H, м).

(6) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(3R)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В суспензию (3R)-3-амино-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидина (363 мг, 1,37 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 53(5)) и 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (500 мг, 1,14 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(4)) в диметилформамиде (25 мл) добавляли диэтилфосфорилцианид (208 мкл, 1,37 ммоль) и триэтиламин (192 мкл, 1,37 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1 → 1:3), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(3R)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (598 мг, выход 51%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,62 (4H, д, J=8,1 Гц), 7,56-7,38 (8H, м), 7,37 (1H, с), 7,22-7,16 (1H, ушир. с), 5,24 (2H, д, J=8,8 Гц), 4,76 (1H, ддд, J=6,6, 5,1 Гц), 4,67-4,58 (1H, м), 4,15-4,07 (2H, м), 4,06-3,98 (2H, м), 3,86-3,78 (1H, м), 3,67-3,52 (2H, м), 3,40 (1H, дд, J=11,0, 5,1 Гц), 2,34-2,20 (1H, м), 2,02-1,90 (1H, м), 1,07 (9H, с).

(7) 3-Гидрокси-1-{4-[(3R)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В суспензию 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(3R)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (590 мг, 0,860 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 53(6)) в безводном тетрагидрофуране (18 мл) последовательно добавляли уксусную кислоту (59 мкл, 1,03 ммоль) и раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (1,03 мл, 1,03 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали на ледяной бане в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → этилацетат:метанол (95:5), с получением 3-гидрокси-1-{4-[(3R)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (378 мг, выход 98%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,21 (2H, м), 7,53 (2H, м), 7,40 (1H, с), 7,24-7,18 (1H, ушир. с), 5,30-5,18 (2H, м), 4,88-4,81 (1H, м), 4,66-4,58 (1H, м), 4,32 (2H, т, J=7,8 Гц), 3,96 (2H, дд, J=8,8, 4,9 Гц), 3,80 (1H, дт, J=12,2, 6,8 Гц), 3,66-3,52 (2H, м), 3,46-3,40 (1H, м), 2,49-2,41 (1H, ушир. с), 2,33-2,22 (1H, м), 2,09-1,95 (1H, м).

(8) 3-Метансульфонилокси-1-{4-[(3R)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-гидрокси-1-{4-[(3R)-1-(п-нитробензилокси-карбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (370 мг, 0,827 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 53(7)) в метиленхлориде (19 мл) добавляли метансульфонилхлорид (192 мкл, 2,48 ммоль) и триэтиламин (348 мкл, 2,48 ммоль) на ледяной бане. Температуру реакционной смеси доводили до комнатной в течение 10 минут, и затем перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → этилацетат:метанол (98:2), с получением 3-метансульфонилокси-1-{4-[(3R)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (422 мг, выход 97%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,21 (2H, м), 7,53 (2H, м), 7,46 (1H, с), 7,19-7,13 (1H, ушир. с), 5,45-5,40 (1H, м), 5,24 (2H, д, J=10,7 Гц), 4,66-4,59 (1H, м), 4,46 (2H, т, J=7,8 Гц), 4,27 (2H, дд, J=9,8, 2,9 Гц), 3,81 (1H, дт, J=13,7,5,9 Гц), 3,66-3,54 (2H, м), 3,43 (1H, дд, J=11,2, 4,4 Гц), 3,12 (3H, с), 2,30-2,22 (1H, м), 2,09-1,95 (1H, м).

(9) 3-Ацетилтио-1-{4-[(3R)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-метансульфонилокси-1-{4-[(3R)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (420 мг, 0,799 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 53(8)) в диметилформамиде (21 мл) добавляли тиоацетат калия (548 мг, 4,79 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:2) → этилацетат:метанол (99:1), с получением 3-ацетилтио-1-{4-[(3R)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (280 мг, выход 69%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, м), 7,3 (2H, м), 7,42 (1H, с), 7,21-7,15 (1H, ушир. с), 5,24 (2H, д, J=10,7 Гц), 4,66-4,58 (1H, м), 4,53 (2H, дд, J=8,8, 7,8 Гц), 4,47-4,41 (1H, м), 3,99 (2H, дд, J=6,8, 5,9 Гц), 3,84-3,76 (1H, м), 3,66-3,53 (2H, м), 3,41 (1H, дд, J=11,7, 4,9 Гц), 2,37 (3H, с), 2,33-2,23 (1H, м), 2,03-1,94 (1H, м).

Ссылочный пример 54

3-Ацетилтио-1-{4-[(1-п-нитробензилоксикарбонил)азетидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

(1) 3-Гидрокси-1-(п-нитробензилоксикарбонил)азетидин

Раствор 1-бензгидрил-3-гидроксиазетидина (9,00 г, 37,6 ммоль) в метаноле (270 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (9,00 г) на водяной бане (50° C) в течение 5,5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали для удаления катализатора и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток разделяли между этилацетатом и дистиллированной водой. Органический слой концентрировали при пониженном давлении и сушили в вакууме с получением неочищенного продукта. В раствор неочищенного продукта в смеси метиленхлорида (82 мл) и метанола (55 мл) добавляли п-нитробензиловый эфир хлороформной кислоты (8,90 г, 41,3 ммоль) и триэтиламин (5,79 мл, 41,3 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1) → этилацетат, с получением 3-гидрокси-1-(п-нитробензилоксикарбонил)азетидина (3,52 г, выход 37%) в виде светло-желтых кристаллов.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,50 (2H, д, J=8,8 Гц), 5,19 (2H, с), 4,71-4,64 (1H, м), 4,27 (2H, дд, J=9,9, 7,0 Гц), 3,93 (2H, дд, J=9,9, 4,0 Гц), 2,20-2,16 (1H, ушир. д, J=5,9 Гц).

(2) 3-Метансульфонилокси-1-(п-нитробензилоксикарбонил)азетидин

В раствор 3-гидрокси-1-(п-нитробензилоксикарбонил)азетидина (3,52 г, 14,0 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 54(1)) в метиленхлориде (106 мл) добавляли метансульфонилхлорид (1,19 мл, 15,4 ммоль) и триэтиламин (2,16 мл, 15,4 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1 → 1:3), с получением 3-метансульфонилокси-1-(п-нитробензилоксикарбонил)азетидина (4,63 г, выход 100%) в виде светло-желтых кристаллов.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,50 (2H, д, J=8,8 Гц), 5,29-5,22 (1H, м), 5,20 (2H, с), 4,40 (2H, дд, J=10,2, 6,2 Гц), 4,22 (2H, дд, J=10,2, 4,0 Гц), 3,08 (3H, с).

(3) 3-Азидо-1-(п-нитробензилоксикарбонил)азетидин

В раствор 3-метансульфонилокси-1-(п-нитробензилокси-карбонил)азетидина (4,63 г, 14,0 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 54(2)) в диметилформамиде (140 мл) добавляли азид натрия (1,37 г, 21,0 ммоль), и смесь перемешивали на масляной бане (100° C) в течение 4 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (2:1 → 1:1), с получением 3-азидо-1-(п-нитробензилоксикарбонил)азетидина (2,15 г, выход 55%) в виде светло-желтых кристаллов.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,50 (2H, д, J=8,8 Гц), 5,19 (2H, с), 4,33-4,28 (3H, м), 4,03-3,96 (2H, м).

(4) 3-Амино-1-(п-нитробензилоксикарбонил)азетидин

В раствор 3-азидо-1-(п-нитробензилоксикарбонил)азетидина (2,15 г, 7,76 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 54(3)) в ацетонитриле (65 мл) добавляли трифенилфосфин (2,14 г, 8,14 ммоль), и смесь перемешивали на масляной бане (70° C) в течение 2 часов. После проверки исчезновения сырых продуктов, добавляли декагидрат сульфата натрия (2,62 г, 8,14 ммоль) и затем реакционную смесь перемешивали в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали и разделяли между метиленхлоридом и 0,1M водным раствором хлористого водорода. К полученному водному слою добавляли метиленхлорид и гидрокарбонат натрия, и водный слой экстрагировали метиленхлоридом. Полученный органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток сушили при пониженном давлении с получением 3-амино-1-(п-нитробензилоксикарбонил)азетидина (1,87 г, выход 96%) в виде светло-желтых кристаллов.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,50 (2H, д, J=8,8 Гц), 5,18 (2H, с), 4,27 (2H, дд, J=8,6, 8,6 Гц), 3,87 (1H, тт, J=5,1,7,3 Гц), 3,70 (2H, дд, J=8,8, 5,1 Гц).

(5) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(1-п-нитробензилоксикарбонил)азетидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-амино-1-(п-нитробензилоксикарбонил)азетидина (549 мг, 2,18 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 54(4)) и 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (800 мг, 1,82 ммоль) в диметилформамиде (40 мл) добавляли диэтилфосфорилцианид (331 мкл, 2,18 ммоль) и триэтиламин (306 мкл, 2,18 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1 → 1:3), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(1-п-нитробензилоксикарбонил)азетидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (1,06 г, выход 49%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,1 Гц), 7,62 (4H, д, J=8,1 Гц), 7,54-7,39 (8H, м), 7,37 (1H, с), 5,21 (2H, с), 4,89-4,81 (1H, м), 4,81-4,73 (1H, м), 4,41 (2H, дд, J=8,8, 8,8 Гц), 4,12 (2H, дд, J=8,8, 8,8 Гц), 4,05-3,98 (4H, м), 1,07 (9H, с).

(6) 3-Гидрокси-1-{4-[(1-п-нитробензилоксикарбонил)азетидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(1-п-нитробензилоксикарбонил)азетидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (1,06 г, 1,58 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 54(5)) в безводном тетрагидрофуране (53 мл) последовательно добавляли уксусную кислоту (109 мкл, 1,90 ммоль) и 1,0M раствор фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (1,90 мл, 1,90 ммоль) на ледяной бане, и затем смесь перемешивали на ледяной бане в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → этилацетат:метанол (95:5), с получением 3-гидрокси-1-{4-[(1-п-нитробензилоксикарбонил)азетидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (649 мг, выход 95%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,58-7,50 (1H, ушир. с), 7,52 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,40 (1H, с), 5,20 (2H, с), 4,90-4,80 (1H, м), 4,42 (2H, дд, J=8,8, 8,8 Гц), 4,34 (2H, дд, J=9,5, 6,6 Гц), 4,02 (2H, дд, J=9,5, 5,2 Гц), 4,00-3,96 (2H, м).

(7) 3-Метансульфонилокси-1-{4-[(1-п-нитробензилоксикарбонил)азетидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-гидрокси-1-{4-[(1-п-нитробензилоксикарбонил)азетидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (640 мг, 1,48 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 54(6)) в метиленхлориде (20 мл) добавляли метансульфонилхлорид (343 мкл, 4,43 ммоль) и триэтиламин (621 мкл, 4,43 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → этилацетат:метанол (98:2), с получением 3-метансульфонилокси-1-{4-[(1-п-нитробензилоксикарбонил)азетидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (611 мг, выход 81%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,51 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,50-7,46 (1H, ушир. с), 7,46 (1H, с), 5,46-5,41 (1H, м), 5,20 (2H, с), 4,89-4,80 (1H, м), 4,49-4,38 (4H, м), 4,28 (2H, дд, J=11,8, 4,4 Гц), 4,01 (2H, дд, J=9,5, 5,3 Гц), 3,12 (3H, с).

(8) 3-Ацетилтио-1-{4-[(1-п-нитробензилоксикарбонил)азетидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-метансульфонилокси-1-{4-[(1-п-нитробензилоксикарбонил)азетидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (610 мг, 1,19 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 54(7)) в диметилформамиде (81 мл) добавляли тиоацетат калия (817 мг, 7,15 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:2) → этилацетат, с получением 3-ацетилтио-1-{4-[(1-п-нитробензилоксикарбонил)азетидин-3-илкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (405 мг, выход 69%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,53-7,49 (1H, м), 7,51 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,43 (1H, с), 5,20 (2H, с), 4,89-4,79 (1H, м), 4,54 (2H, дд, J=8,1, 8,1 Гц), 4,48-4,18 (3H, м), 4,04-3,97 (2H, м), 2,37 (3H, с).

Ссылочный пример 55

3-Ацетилтио-1-{4-[(4-п-нитробензилоксикарбонил)пиперазин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

(1) Гидрохлорид 4-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперазина

В раствор 4-(трет-бутоксикарбонил)пиперазина (1,50 г, 8,05 ммоль) в метиленхлориде (68 мл) добавляли п-нитробензиловый эфир хлороформной кислоты (1,90 г, 8,86 ммоль) и триэтиламин (1,24 мл, 8,86 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали на ледяной бане в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат = (1:3), с получением 1-(трет-бутоксикарбонил)-4-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперазина (2,60 г, выход 89%) в виде светло-желтого масла.

Затем в раствор этого продукта (2,60 г, 7,12 ммоль) в ацетонитриле (100 мл) добавляли 4н раствор хлористого водорода в этилацетате (15,0 мл) на ледяной бане, и затем реакционную смесь перемешивали на ледяной бане в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, добавляли диэтиловый эфир и реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут. Реакционную смесь отфильтровали и промывали диэтиловым эфиром с получением гидрохлорида 4-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперазина (2,4 г, выход 86%) в виде белого твердого вещества.

(2) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(4-п-нитробензилоксикарбонил)пиперазин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор гидрохлорида 4-(п-нитробензилоксикарбонил)пиперазина (874 мг, 2,19 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 55(1)) и 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (800 мг, 1,82 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(4)) в диметилформамиде (40 мл) добавляли диэтилфосфорилцианид (0,33 мл, 2,19 ммоль) и триэтиламин (0,30 мл, 2,19 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота. Смесь перемешивали на ледяной бане в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой последовательно промывали 0,5M водным раствором соляной кислоты, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия, и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(4-п-нитробензилоксикарбонил)пиперазин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (915 мг, выход 73%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,24 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,61 (4H, дд, J=7,9, 1,4 Гц), 7,52 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,49-7,37 (6H, м), 7,14 (1H, с), 5,25 (2H, с), 4,80-4,71 (1H, м), 4,11 (2H, дд, J=8,7, 6,6 Гц), 4,01 (2H, дд, J=8,7, 4,9 Гц), 3,95-3,66 (4H, м), 3,65-3,52 (4H, м), 1,06 (9H, с).

(3) 3-Гидрокси-1-{4-[(4-п-нитробензилоксикарбонил)пиперазин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(4-п-нитробензилоксикарбонил)пиперазин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (1,77 г, 1,71 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 55(2)) в безводном тетрагидрофуране (35 мл) последовательно добавляли уксусную кислоту (0,11 мл, 1,88 ммоль) и раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (1,88 мл, 1,88 ммоль) на ледяной бане, и затем смесь перемешивали на ледяной бане в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → этилацетат:метанол (9:1), с получением 3-гидрокси-1-{4-[(4-п-нитробензилоксикарбонил)пиперазин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (726 мг, выход 95%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,24 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,52 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,17 (1H, с), 5,25 (2H, с), 4,89-4,79 (1H, м), 4,32 (2H, дд, J=9,1, 6,7 Гц), 3,96 (2H, дд, J=9,1, 4,5 Гц), 3,93-3,68 (4H, м), 3,66-3,52 (4H, м).

(4) 3-Метансульфонилокси-1-{4-[(4-п-нитробензилокси-карбонил)пиперазин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-гидрокси-1-{4-[(4-п-нитробензилоксикарбонил)пиперазин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (804 мг, 1,80 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 55(3)) в метиленхлориде (40 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,30 мл, 2,15 ммоль) и триэтиламин (0,17 мл, 2,15 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали на ледяной бане в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → этилацетат:метанол (9:1), с получением 3-метансульфонилокси-1-{4-[(4-п-нитробензилокси-карбонил)пиперазин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (550 мг, выход 58%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,5 Гц), 7,53 (2H, д, J=8,5 Гц), 7,25 (1H, с), 5,50-5,39 (1H, м), 5,26 (2H, с), 4,49 (2H, т, J=9,6 Гц), 4,26 (2H, дд, J=9,6, 4,2 Гц), 4,00-3,66 (4H, м), 3,66-3,47 (4H, м), 3,11 (3H, с).

(5) 3-Ацетилтио-1-{4-[(4-п-нитробензилоксикарбонил)пиперазин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-метансульфонилокси-1-{4-[(4-п-нитробензилоксикарбонил)пиперазин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (550 мг, 1,05 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 55(4)) в диметилформамиде (40 мл) добавляли тиоацетат калия (717 мг, 6,28 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали на масляной бане (90° C) в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:1), с получением 3-ацетилтио-1-{4-[(4-п-нитробензилоксикарбонил)пиперазин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (345 мг, выход 64%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,53 (2H, д, J=8,7 Гц), 7,22 (1H, с), 5,25 (2H, с), 4,52 (2H, т, J=8,4 Гц), 4,48-4,39 (1H, м), 3,98 (2H, дд, J=8,4, 5,3 Гц), 3,95-3,68 (4H, м), 3,45-3,68 (4H, м), 2,33 (3H, с).

Ссылочный пример 56

3-Ацетилтио-1-{4-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

(1) трет-бутиловый эфир (2-Гидроксиэтил)карбаминовой кислоты

В раствор аминоэтанола (2,51 г, 41,1 ммоль) в смеси метиленхлорида (50 мл) и метанола (50 мл) добавляли ди-трет-бутоксикарбоновый ангидрид (13,5 г, 61,9 ммоль) и триэтиламин (8,6 мл, 61,7 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток разделяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:1), с получением трет-бутилового эфира (2-гидроксиэтил)карбаминовой кислоты (6,18 г, выход 93%) в виде бесцветного, прозрачного сиропа.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 5,01 (1H, ушир. с), 3,70 (2H, ушир. с), 3,29 (2H, кв., J=5,1 Гц), 2,65 (1H, ушир. с), 1,45 (9H, с).

(2) Трет-бутиловый эфир (2-азидоэтил)карбаминовой кислоты

В раствор трет-бутилового эфира (2-гидроксиэтил)карбаминовой кислоты (1,5 г, 6,2 ммоль) в тетрагидрофуране (75 мл) добавляли дифенилфосфорилазид (3,0 мл, 13,9 ммоль), трифенилфосфин (3,7 г, 14,1 ммоль) и 40% раствор диэтилазодикарбоксилата в толуоле (5,1 г, 13,9 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота, и затем смесь перемешивали в течение 4 часов при тех же условиях. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (3:1), с получением трет-бутилового эфира (2-азидоэтил)карбаминовой кислоты (1,24 г, выход 72%) в виде бесцветного, прозрачного сиропа.

 ¹H-ЯМР (500 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 4,85 (1H, ушир. с), 3,42 (2H, т, J=4,8 Гц), 3,31 (2H, т, J=4,8 Гц), 1,45 (9H, с).

ИК (жидкая пленка): 2103, 1697, 1521, 1368, 1272, 1253 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 187 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺):

Полученные значения: 187,1186 [M+H]⁺

Вычисленные значения: 187,1195 (C₇H₁₅O₂N₄)

(3) п-Нитробензиловый эфир (2-трет-бутоксикарбониламиноэтил)карбаминовой кислоты

Раствор трет-бутилового эфира (2-азидоэтил)карбаминовой кислоты (1,22 г, 6,55 ммоль) в метаноле (60 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 20% гидроксида палладия на угле (1,22 г) при комнатной температуре. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. В раствор полученного неочищенного продукта в метиленхлориде (60 мл) добавляли п-нитробензиловый эфир хлороформной кислоты (2,12 г, 9,8 ммоль) и триэтиламин (1,37 мл, 9,8 ммоль) на ледяной бане, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:ацетонитрил (3:1), с получением п-нитробензилового эфира (2-трет-бутоксикарбониламиноэтил)карбаминовой кислоты (1,46 г, выход 66%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (500 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=9,0 Гц), 7,51 (2H, д, J=9,0 Гц), 5,37 (1H, ушир. с), 5,20 (2H, с), 4,82 (1H, ушир. с), 3,35-3,25 (4H, м), 1,45 (9H, с).

ИК (KBr): 3355, 1708, 1692, 1534, 1350, 1263, 1170 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 340 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺):

Полученные значения: 340,1512 [M+H]⁺

Вычисленные значения: 340,1508 (C₁₅H₂₂O₆N₃)

(4) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор п-нитробензилового эфира (2-трет-бутоксикарбониламиноэтил)карбаминовой кислоты (1,46 г, 4,3 ммоль) в 1,4-диоксане (15 мл) добавляли 4н раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (15 мл) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5,5 часов. После контроля завершения реакции, добавляли диэтиловый эфир и реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут. Полученную реакционную смесь отфильтровали и промывали диэтиловым эфиром с получением гидрохлорида 1-(п-нитробензилоксикарбониламино)этиламина (1,18 г, выход 100%) в виде белого твердого вещества.

Затем в суспензию гидрохлорида 2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этиламина (490 мг, 1,77 ммоль), описанного выше, и 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (530 мг, 1,21 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(4)) в диметилформамиде (26,5 мл) добавляли диэтилфосфорилцианид (0,3 мл, 1,98 ммоль) и триэтиламин (0,5 мл, 3,59 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой последовательно промывали 0,5M водным раствором соляной кислоты, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:ацетонитрил (2:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (630 мг, выход 79%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (500 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,16 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,62 (4H, д, J=6,8 Гц), 7,50-7,38 (9H, м), 7,35 (1H, с), 5,62 (1H, ушир. т, J=5,9 Гц), 5,17 (2H, с), 4,79-4,72 (1H, м), 4,09 (2H, дд, J=8,8, 6,6 Гц), 4,00 (2H, дд, J=8,8, 4,9 Гц), 3,55 (2H, кв., J=5,9 Гц), 3,43 (2H, кв., J=5,9 Гц), 1,07 (9H, с).

ИК (KBr): 1724, 1660, 1547, 1523, 1346, 1318, 1255, 1113

см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 660 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺): Полученные значения: 660,2324 [M+H]⁺, Вычисленные значения: 660,2312 (C₃₃H₃₈O₆SSi)

(5) 3-Гидрокси-1-{4-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (1,21 г, 1,84 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 56(4)) в безводном тетрагидрофуране (60,6 мл) последовательно добавляли уксусную кислоту (0,13 мл, 2,27 ммоль) и раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (2,2 мл, 2,2 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали в течение 2,5 часов при тех же условиях. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. К остатку добавляли изопропиловый эфир, и смесь перемешивали, промывали и отфильтровали с получением 3-гидрокси-1-{4-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (667 мг, выход 86%) в виде желтого твердого продукта.

 ¹H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d₆): δ (м.д.) 8,21 (2H, д, J=8,8 Гц), 8,03 (1H, т, J=5,9 Гц), 7,59 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,50 (1H, т, J=5,9 Гц), 7,41 (1H, с), 5,83 (1H, д, J=5,9 Гц), 5,17 (2H, с), 4,66-4,58 (1H, м), 4,23 (2H, дд, J=8,8, 7,0 Гц), 3,79 (2H, дд, J=8,8, 4,9 Гц), 3,31 (2H, кв., J=5,9 Гц), 3,16 (2H, кв., J=5,9 Гц).

ИК (KBr): 1698, 1655, 1552, 1520, 1343, 1279 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 422 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺):

Полученные значения: 444,0952 [M+Na]⁺

Вычисленные значения: 444,0953 (C₁₇H₁₉O₆N₅SNa)

(6) 3-Метансульфонилокси-1-{4-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-гидрокси-1-{4-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (658,4 мг, 1,56 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 56(5)) в смеси метиленхлорида (33 мл) и пиридина (5 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,31 мл, 4,00 ммоль) и триэтиламин (0,57 мл, 4,09 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой последовательно промывали 0,5M водным раствором соляной кислоты, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия, и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:ацетонитрил (1:2), с получением 3-метансульфонилокси-1-{4-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (607,3 мг, выход 78%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆): δ (м.д.) 8,21 (2H, д, J=8,8 Гц), 8,10 (1H, т, J=5,9 Гц), 7,59 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,51 (1H, т, J=5,9 Гц), 7,50 (1H, с), 5,46-5,41 (1H, м), 5,17 (2H, с), 4,45 (2H, дд, J=9,9, 6,6 Гц), 4,17 (2H, дд, J=9,9, 4,0 Гц), 3,29 (3H, с).

ИК (KBr): 1720, 1658, 1547, 1523, 1348, 1255, 1184, 1169

см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 500 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺):

Полученные значения: 500,0910 [M+H]⁺

Вычисленные значения: 500,0910 (C₁₈H₂₂O₈N₅S₂)

(7) 3-Ацетилтио-1-{4-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-метансульфонилокси-1-{4-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (607,3 мг, 1,22 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 56(6)) в диметилформамиде (33 мл) добавляли тиоацетат калия (1,06 г, 7,35 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 7 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой последовательно промывали 0,5M водным раствором соляной кислоты, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия, и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:ацетонитрил (1:2), с получением 3-ацетилтио-1-{4-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (335,8 мг, выход 58%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (500 МГц, DMSO-d₆): δ (м.д.) 8,21 (2H, д, J=8,3 Гц), 8,05 (1H, т, J=5,9 Гц), 7,58 (2H, д, J=8,3 Гц), 7,50 (1H, т, J=5,9 Гц), 7,47 (1H, с), 5,17 (2H, с), 4,50 (2H, т, J=8,8 Гц), 4,42-4,36 (1H, м), 3,92 (2H, дд, J=8,8, 4,6 Гц), 3,305 (2H, кв., J=5,9 Гц), 3,16 (2H, кв., J=5,9 Гц), 2,36 (3H, с).

ИК (KBr): 3368, 1690, 1677, 1543, 1520, 1494, 1349, 1255, 1239, 1108 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺): 480 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺):

Полученные значения: 480,1002 [M+H]⁺

Вычисленные значения: 480,1011 (C₁₉H₂₂O₆N₅S₂)

Ссылочный пример 57

3-Ацетилтио-1-{4-[3-(п-нитробензилоксикарбониламино)азетидин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

(1) 1-трет-бутоксикарбонил-3-(метансульфонилокси)азетидин

В раствор 1-трет-бутоксикарбонил-3-гидроксиазетидина (3,24 г, 18,7 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 31(1)) в метиленхлориде (160 мл) добавляли метансульфонилхлорид (1,59 мл, 20,6 ммоль) и триэтиламин (2,89 мл, 20,6 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1 → 1:2), с получением 1-трет-бутоксикарбонил-3-(метансульфонилокси)азетидина (4,71 мг, выход 100%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 5,23-5,17 (1H, м), 4,28 (2H, дд, J=6,6,1,5 Гц), 4,10 (2H, м), 3,07 (3H, с), 1,46 (9H, с).

(2) 3-Азидо-1-(трет-бутоксикарбонил)азетидин

В раствор 1-трет-бутоксикарбонил-3-(метансульфонилокси)азетидина (4,71 г, 18,7 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 57(1)) в диметилформамиде (140 мл) добавляли азид натрия (3,65 г, 56,1 ммоль), и смесь перемешивали на масляной бане (90° C) в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (4:1), с получением 3-азидо-1-(трет-бутоксикарбонил)азетидина (3,44 г, выход 93%) в виде бесцветного масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 4,25-4,15 (3H, м), 3,92-3,87 (2H, м), 1,45 (9H, с).

(3) 1-трет-бутоксикарбонил-3-(п-нитробензилоксикарбониламино)азетидин

Раствор 3-азидо-1-(трет-бутоксикарбонил)азетидина (3,44 г, 17,4 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 57(2)) в метаноле (170 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (3,44 г) при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали для удаления катализатора. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 3-амино-1-трет-бутоксикарбонилазетидина в виде неочищенного продукта. Этот продукт растворяли в метиленхлориде (170 мл) и добавляли п-нитробензиловый эфир хлороформной кислоты (5,63 г, 26,1 ммоль) и триэтиламин (3,66 мл, 26,1 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1 → 1:2), с получением 1-трет-бутоксикарбонил-3-(п-нитробензилоксикарбониламино)азетидина (4,84 г, выход 79%) в виде бесцветного масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,1 Гц), 7,50 (2H, д, J=8,1 Гц), 5,26-5,18 (1H, ушир. с), 5,26 (2H, с), 5,84 (1H, д, J=5,1 Гц), 4,50-4,40 (1H, м), 4,24 (2H, т, J=9,5 Гц), 3,76 (2H, дд, J=9,5, 5,1 Гц), 1,43 (9H, с).

(4) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[3-(п-нитробензилоксикарбониламино)азетидин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 1-трет-бутоксикарбонил-3-(п-нитробензилоксикарбониламино)азетидина (4,84 г, 13,8 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 57(3)) в 1,4-диоксане (50 мл) добавляли 4н раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (50 мл) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2,5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. К остатку добавляли этилацетат, и полученную смесь фильтровали, и остаток промывали этилацетатом и затем сушили при пониженном давлении с получением гидрохлорида 3-(п-нитробензилоксикарбониламино)азетидина (2,31 г, выход 58%) в виде светло-желтых кристаллов.

Затем в суспензию гидрохлорида 3-(п-нитробензилоксикарбониламино)азетидина (944 мг, 3,28 ммоль) (полученного, как описано выше) и 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,2 г, 2,74 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(4)) в диметилформамиде (60 мл) добавляли диэтилфосфорилцианид (498 мкл, 3,28 ммоль) и триэтиламин (922 мкл, 6,58 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат, с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[3-(п-нитробензилоксикарбониламино)азетидин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (853 мг, выход 53%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,64-7,59 (4H, м), 7,52 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,48-7,37 (6H, м), 7,37 (1H, с), 5,58-5,51 (1H, ушир. д, J=8,1 Гц), 5,22 (2H, с), 4,93-4,84 (1H, м), 4,76-4,70 (1H, м), 4,60-4,50 (1H, м), 4,50-4,41 (1H, м), 4,39-4,30 (1H, м), 4,11-4,03 (2H, м), 3,97 (2H, дд, J=8,1, 5,1 Гц), 4,00-3,92 (1H, м), 1,06 (9H, с).

(5) 3-Гидрокси-1-{4-[3-(п-нитробензилоксикарбониламино)азетидин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[3-(п-нитробензилоксикарбониламино)азетидин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (850 мг, 1,27 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 57(4)) в безводном тетрагидрофуране (43 мл) последовательно добавляли уксусную кислоту (87 мкл, 1,52 ммоль) и раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (1,52 мл, 1,52 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали на ледяной бане в течение 30 минут. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. К остатку добавляли этилацетат и диизопропиловый эфир, и полученную смесь отфильтровали и промывали диизопропиловым эфиром с получением 3-гидрокси-1-{4-[3-(п-нитробензилокси-карбониламино)азетидин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (486 мг, выход 88%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,25 (2H, д, J=8,8 Гц), 8,14 (1H, д, J=7,3 Гц), 7,61 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,43 (1H, с), 5,83 (1H, д, J=5,9 Гц), 5,19 (2H, с), 4,74-4,67 (1H, м), 4,66-4,58 (1H, м), 4,40-4,34 (1H, м), 4,32-4,26 (1H, м), 4,24-4,17 (3H, м), 3,86-3,80 (1H, м), 3,79-3,71 (2H, м).

(6) 3-Метансульфонилокси-1-{4-[3-(п-нитробензилоксикарбониламино)азетидин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-гидрокси-1-{4-[3-(п-нитробензилоксикарбониламино)азетидин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (630 мг, 1,45 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 57(5)) в смеси метиленхлорида (32 мл) и пиридина (12 мл) добавляли метансульфонилхлорид (377 мкл, 4,36 ммоль) и триэтиламин (611 мкл, 4,36 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. К остатку добавляли этилацетат и диизопропиловый эфир, и смесь фильтровали и промывали диизопропиловым эфиром с получением 3-метансульфонилокси-1-{4-[3-(п-нитробензилоксикарбониламино)азетидин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (766 мг, выход 100%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,25 (2H, д, J=8,8 Гц), 8,15 (2H, д, J=7,3 Гц), 7,61 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,52 (1H, с), 5,50-5,43 (1H, м), 5,19 (2H, с), 4,72 (1H, т, J=8,8 Гц), 4,46-4,27 (4H, м), 4,25-4,11 (3H, м), 3,85 (1H, дд, J=9,9, 5,5 Гц), 3,29 (3H, с).

(7) 3-Ацетилтио-1-{4-[3-(п-нитробензилоксикарбониламино)азетидин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-метансульфонилокси-1-{4-[3-(п-нитробензилоксикарбониламино)азетидин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (760 мг, 1,45 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 57(6)) в диметилформамиде (38 мл) добавляли тиоацетат калия (993 мг, 8,70 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 9 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат, с получением 3ацетилтио-1-{4-[3-(п-нитробензилоксикарбониламино)азетидин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (397 мг, выход 56%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,52 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,44 (1H, с), 5,36-5,30 (1H, м), 5,21 (2H, с), 4,74-4,83 (1H, м), 4,60-4,34 (6H, м), 3,95 (3H, м), 2,37 (3H, с).

Ссылочный пример 58

3-Ацетилтио-1-(4-{N-метил-N-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этил]карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[N-метил-N-(2-гидроксиэтил)карбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В суспензию N-метиламиноэтанола (1,0 мл, 12,4 ммоль) и 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (3,64 г, 8,3 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(4)) в диметилформамиде (180 мл) добавляли диэтилфосфорилцианид (1,9 мл, 12,5 ммоль) и триэтиламин (1,73 мл, 12,4 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 7 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой последовательно промывали 0,5M водным раствором соляной кислоты, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия, и насыщенным водным раствором раствор хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:ацетонитрил (1:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[N-метил-N-(2-гидроксиэтил)карбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (3,41 г, выход 83%) в виде светло-желтого, прозрачного сиропа.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,61 (4H, д, J=7,0 Гц), 7,48-7,36 (6H, м), 7,17 (1H, с), 4,79-4,71 (1H, м), 4,17 (2H, т, J=6,8 Гц), 4,05 (2H, дд, J=6,8, 2,7 Гц), 3,84 (2H, т, J=5,4 Гц), 3,64 (2H, т, J=5,4 Гц), 3,28 (1H, ушир. с), 3,05 (3H, с), 1,06 (9H, с).

(2) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[N-(2-азидоэтил)-N-метилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[N-метил-N-(2-гидроксиэтил)карбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (997,5 мг, 2,0 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 58(1)) в тетрагидрофуране (50 мл) добавляли дифенилфосфорилазид (0,65 мл, 3,02 ммоль), трифенилфосфин (793 мг, 3,02 ммоль), и 40% раствор диэтилазодикарбоксилата в толуоле (1,12 г, 3,04 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение ночи при тех же условиях. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:этилацетат (1:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(N-(2-азидоэтил)-N-метилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (1,05 г, выход 100%) в виде бесцветного, прозрачного сиропа.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,80-7,00 (11H, м), 4,90-3,00 (11H, м), 1,06 (9H, с).

(3) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-{N-метил-N-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этил]карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

Раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(N-(2-азидоэтил)-N-метилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (1,05 г, 2,02 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 58(2)) в метаноле (60 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 20% гидроксида палладия на угле (1,05 г) при комнатной температуре. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали для удаления катализатора, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. В раствор полученного неочищенного продукта в метиленхлориде (52,3 мл) добавляли п-нитробензиловый эфир хлороформной кислоты (650,7 мг, 3,02 ммоль) и триэтиламин (0,42 мл, 3,01 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:ацетонитрил (2:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-{N-метил-N-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этил]карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (699,5 мг, выход 52%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (500 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,12 (2H, д, J=7,8 Гц), 7,78 (1H, ушир. с), 7,68-7,30 (13H, м), 5,18 (0,5H, с), 5,13 (1,5H, с), 4,80-4,64 (1H, м), 4,10 (2H, т, J=7,3 Гц), 4,01 (2H, дд, J=7,3, 5,4 Гц), 3,72 (2H, м), 3,50 (2H, м), 3,25 (0,75H, с), 3,02 (2,25H, с), 1,03 (9H, с).

Масс-спектр (FAB⁺): 674 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺): Полученные значения: 674,2490 [M+H]⁺, Вычисленные значения: 674,2468 (C₃₄H₄₀O₆N₅SSi)

(4) 3-Гидрокси-1-(4-{N-метил-N-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этил]карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-{N-метил-N-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этил]карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (806,9 мг, 1,20 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 58(3)) в безводном тетрагидрофуране (40 мл) последовательно добавляли уксусную кислоту (0,09 мл, 1,57 ммоль) и раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (1,44 мл, 1,44 ммоль) на ледяной бане, и затем смесь перемешивали на ледяной бане в течение 4 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (15:1), с получением 3-гидрокси-1-(4-{N-метил-N-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этил]карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (428,2 мг, выход 84%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,21 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,71 (1H, т, J=5,5 Гц), 7,49 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,17 (1H, с), 5,18 (2H, с), 4,88-4,70 (1H, м), 4,27 (2H, дд, J=9,1, 7,8 Гц), 3,93 (2H, дд, J=9,1, 4,8 Гц), 3,68 (2H, т, J=5,5 Гц), 3,47 (2H, кв., J=5,5 Гц), 3,25 (0,8H, с), 3,03 (2,2H, с), 2,40 (1H, д, J=5,9 Гц).

(5) 3-Метансульфонилокси-1-(4-{N-метил-N-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этил]карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-гидрокси-1-(4-{N-метил-N-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этил]карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (428,2 мг, 1,01 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 58(4)) в метиленхлориде (21,4 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,25 мл, 3,23 ммоль) и триэтиламин (0,45 мл, 3,23 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (15:1), с получением 3-метансульфонилокси-1-(4-{N-метил-N-[2-(п-нитробензилокси-карбониламино)этил]карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (480,1 мг, выход 93%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=8,1 Гц), 7,60-7,44 (3H, м, включая д, при 7,50 м.д., J=8,1 Гц), 7,26 (0,3H, с), 7,24 (0,7H, с), 5,41 (0,3H, м), 5,34 (0,7H, м), 5,18 (2H, с), 4,42 (2H, дд, J=9,0, 7,4 Гц), 4,25 (2H, дд, J=9,0, 3,2 Гц), 3,66 (2H, т, J=5,2 Гц), 3,60-3,42 (2H, м), 3,26 (0,9H, ушир. с), 3,10 (0,9H, ушир. с), 3,08 (2,1H, с), 3,03 (2,1H, с).

(6) 3-Ацетилтио-1-(4-{N-метил-N-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этил]карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-метансульфонилокси-1-(4-{N-метил-N-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этил]карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (480,1 мг, 0,93 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 58(5)) в диметилформамиде (24 мл) добавляли тиоацетат калия (820 мг, 5,69 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой последовательно промывали 0,5M водным раствором соляной кислоты, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (15:1), с получением 3-ацетилтио-1-(4-{N-метил-N-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)-этил]карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (348,9 мг, выход 76%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (500 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,73 (1H, ушир. с), 7,49 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,29 (0,4H, с), 7,20 (0,6H, с), 5,18 (2H, с), 4,47 (2H, т, J=8,8 Гц), 4,40-4,28 (1H, м), 3,92 (2H, дд, J=8,8, 5,7 Гц), 3,66 (2H, т, J=5,4 Гц), 3,52-3,44 (2H, м), 3,26 (1,2H, с), 3,03 (1,8H, с), 2,36 (1,2H, с), 2,34 (1,8H, с).

Ссылочный пример 59

3-Ацетилтио-1-(4-{N-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил]-N-изопропилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[N-(2-гидроксиэтил)-N-изопропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В суспензию N-изопропиламиноэтанол (0,61 мл, 1,38 ммоль) и 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (500 мг, 1,14 ммоль) в диметилформамиде (15 мл) добавляли диэтилфосфорилцианид (0,23 мл, 1,38 ммоль) и триэтиламин (0,19 мл, 0,23 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота. Смесь перемешивали в течение 2 часов при тех же условиях. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой последовательно промывали 0,5M водным раствором соляной кислоты, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия, и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат, с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[N-(2-гидроксиэтил)-N-изопропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (318 мг, выход 56%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,57 (4H, д, J=6,5 Гц), 7,50-7,30 (6H, м), 7,07 (0,6H, с), 6,92 (0,4H, с), 4,81-4,63 (1H, м), 4,49 (0,5 H, с), 4,33 (0,5H, с), 4,22-3,88 (4H, м, включая 4,06 (2H, дд, J=14,3, 7,7 Гц)), 3,88-3,62 (2H, м), 1,39-1,08 (6H, м), 1,02 (9H, с).

(2) 3-Гидрокси-1-{4-[N-(2-гидроксиэтил)-N-изопропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[N-(2-гидроксиэтил)-N-изопропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (2,49 г, 4,75 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 59(1)) в безводном тетрагидрофуране (100 мл) добавляли раствор 1,0M фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (5,70 мл, 5,70 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали на ледяной бане в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (10:1), с получением 3-гидрокси-1-{4-[N-(2-гидроксиэтил)-N-изопропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (1,33 г, выход 98%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,13 (0,7H, с), 7,03 (0,3H, с), 4,62-4,48 (1H, м), 4,48-4,36 (1H, м), 4,29 (2H, т, J=8,0 Гц), 3,94 (2H, дд, J=8,0, 4,1 Гц), 3,80 (2H, ушир. с), 3,57 (2H, ушир. с), 1,35 (3H, ушир. с), 1,20 (3H, ушир. с).

(3) 1-(4-{N-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил]-N-изопропилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидин

В раствор 3-гидрокси-1-{4-[N-(2-гидроксиэтил)-N-изопропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (1,33 г, 4,66 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 59(2)) в диметилформамиде (40 мл) добавляли трет-бутилдиметилсилилхлорид (738 мг, 4,89 ммоль) и имидазол (333 мг, 4,89 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали на ледяной бане в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, добавляли метанол, и смесь перемешивали в течение 30 минут. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:1) → этилацетат, с получением 1-(4-{N-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил]-N-изопропилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (1,26 г, выход 69%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 6,99 (0,2H, с), 6,91 (0,8H, с), 4,84-4,72 (1H, м), 4,72-4,35 (1H, м), 4,27 (2H, дд, J=9,4, 6,8 Гц), 3,91 (2H, дд, J=9,4, 4,8 Гц), 3,71-3,35 (1H, м), 3,71-3,50 (2H, м), 3,50-3,28 (1H, м), 1,17 (6H, ушир. с), 0,87 (9H, ушир. с), 0,06 (6H, д, J=2,8 Гц).

(4) 1-(4-{N-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил]-N-изопропилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-(4-{N-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил]-N-изопропилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (1,24 г, 3,23 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 59(3)) в метиленхлориде (62 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,30 мл, 3,88 ммоль) и триэтиламин (0,54 мл, 3,88 ммоль) на ледяной бане, и затем смесь перемешивали на ледяной бане в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:1) → этилацетат, с получением 1-(4-{N-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил]-N-изопропилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (649 мг, выход 42%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,16-6,95 (1H, м), 5,46-5,36 (1H, м), 4,49-3,68 (3H, м, включая 4,41 (2H, ддд, J=9,6, 6,6, 1,0 Гц)), 4,23 (2H, дд, J=9,6, 4,4 Гц), 3,91-3,72 (1H, м), 3,72-3,51 (2H, м), 3,51-3,30 (1H, м), 3,07 (3H, с), 1,24 (6H, ушир. с), 0,83 (9H, с), 0,06 (6H, д, J=3,4 Гц).

(5) 3-Ацетилтио-1-(4-{N-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил]-N-изопропилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 1-(4-{N-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил]-N-изопропилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (649 мг, 1,35 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 59(4)) в диметилформамиде (19 мл) добавляли тиоацетат калия (930 мг, 8,14 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (90° C) в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (3:1) → этилацетат, с получением 3-ацетилтио-1-(4-{N-[2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил]-N-изопропилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (618 мг, выход 100%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,20-6,89 (1H, м), 4,68-4,18 (4H, м, включая 4,48 (2H, т, J=8,5 Гц)), 3,94 (2H, дд, J=8,5, 5,3 Гц), 3,88-3,23 (4H, м), 2,39 (3H, с), 1,16 (6H, ушир. с), 0,86 (9H, с), 0,04 (6H, д, J=1,4 Гц).

Ссылочный пример 60

3-Ацетилтио-1-(4-{N-изопропил-N-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этил]-карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

(1) 1-{4-[N-(2-Азидоэтил)-N-изопропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-трет-бутилдифенилсилилоксиазетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[N-(2-гидроксиэтил)-N-изопропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (1,46 г, 2,79 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 59(1)) в тетрагидрофуране (73 мл) добавляли дифенилфосфорил азид (0,90 мл, 4,18 ммоль), трифенилфосфин (1,10 г, 4,18 ммоль), и 40% раствор диэтилазодикарбоксилата в толуоле (1,54 г, 4,18 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота, и затем смесь перемешивали в течение 3 часов при тех же условиях. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (2:1), с получением 1-{4-[N-(2-азидоэтил)-N-изопропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-трет-бутилдифенилсилилоксиазетидина (1,38 г, выход 87%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,62 (4H, дд, J=8,0, 1,4 Гц), 7,36-7,26 (6H, м), 7,26-6,90 (1H, м), 4,80-4,76 (1H, м), 4,75-4,61 (1H, м), 4,13 (1H, т, J=7,4 Гц), 4,10 (1H, т, J=7,4 Гц), 4,01 (2H, дд, J=8,7, 4,0 Гц), 3,80-3,33 (4H, м, включая 3,56 (2H, ушир. с)), 1,20 (6H, ушир. с), 1,06 (9H, с).

(2) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-{N-изопропил-N-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этил]карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

Раствор 1-{4-[N-(2-азидоэтил)-N-изопропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-трет-бутилдифенилсилилоксиазетидина (1,33 г, 2,42 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 60(1)) в метаноле (65 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 20% гидроксида палладия на угле (1,33 г) при комнатной температуре. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали для удаления катализатора и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. В раствор полученного неочищенного продукта в метиленхлориде (63 мл) добавляли п-нитробензиловый эфир хлороформной кислоты (627 мг, 2,90 ммоль) и триэтиламин (0,41 мл, 2,90 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 1 часа при тех же условиях. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → этилацетат:метанол (10:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-{N-изопропил-N-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этил]карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (945 мг, выход 56%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,60 (4H, д, J=1,0 Гц), 7,55-7,32 (10H, м), 7,12 (0,4H, ушир. с), 6,95 (0,6H, ушир. с), 5,28-5,18 (2H, м), 4,81-4,67 (1H, м), 4,24-4,06 (2H, м), 4,00 (2H, дд, J=8,7, 4,9 Гц), 3,70-3,18 (4H, м), 1,20 (6H, ушир. с), 1,06 (9H, д, J=1,6 Гц).

(3) 3-Гидрокси-1-(4-{N-изопропил-N-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этил]карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

Раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-{N-изопропил-N-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этил]карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (945 мг, 1,38 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 60(2)) в безводном тетрагидрофуране (50 мл) последовательно добавляли уксусную кислоту (0,10 мл, 1,66 ммоль) и 1,0M раствор фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (1,66 мл, 1,66 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали на ледяной бане в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → этилацетат:метанол (10:1), с получением 3-гидрокси-1-(4-{N-изопропил-N-[2-(п-нитробензилоксикарбонил-амино)этил]карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (433 мг, выход 66%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,21 (2H, д, J=8,5 Гц), 7,49 (2H, д, J=8,5 Гц), 7,11 (0,4H, с), 6,95 (0,6H, с), 5,18 (2H, с), 4,88-4,62 (1H, м), 4,62-4,18 (3H, м), 3,93 (2H, дд, J=8,8, 4,4 Гц), 3,72-3,36 (4H, м), 1,30 (3H, ушир. с), 1,20 (3H, ушир. с).

(4) 1-(4-{N-изопропил-N-[2-(п-нитробензилоксикарбонил-амино)этил]карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилокси-азетидин

Раствор 3-гидрокси-1-(4-{N-изопропил-N-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этил]карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,43 г, 3,09 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 60(3)) в метиленхлориде (72 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,29 мл, 3,70 ммоль) и триэтиламин (0,52 мл, 3,70 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали на ледяной бане в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → этилацетат:метанол (20:1), с получением 1-(4-{N-изопропил-N-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этил]карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (766 мг, выход 46%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,20 (2H, д, J=8,4 Гц), 7,50 (2H, д, J=8,4 Гц), 7,20 (0,4H, ушир. с), 7,07 (0,6H, ушир. с), 5,41 (1H, ушир. с), 5,19 (2H, с), 4,66-4,18 (5H, м, включая 4,44 (2H, т, J=8,8 Гц), 4,25 (2H, т, J=8,8 Гц)), 3,68-3,36 (4H, м), 3,10 (3H, с), 1,31 (3H, ушир. с), 1,22 (3H, ушир. с).

(5) 3-Ацетилтио-1-(4-{N-изопропил-N-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этил]карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

Раствор 1-(4-{N-изопропил-N-[2-(п-нитробензилоксикарбониламино)этил]карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (776 мг, 1,43 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 60(4)) в диметилформамиде (23 мл) добавляли тиоацетат калия (982 мг, 8,60 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (90° C) в течение 4 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:2), с получением 3-ацетилтио-1-(4-{N-изопропил-N-[2-(п-нитробензилоксикарбонил-амино)этил]карбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (746 мг, выход 46%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,21 (2H, д, J=8,4 Гц), 7,50 (2H, д, J=8,4 Гц), 7,15 (0,4H, ушир. с), 7,04 (0,6H, ушир. с), 5,19 (2H, с), 4,66-4,20 (4H, м), 4,08-3,88 (2H, м), 3,66-3,26 (4H, м), 2,96 (3H, с), 2,36 (3H, ушир. с), 1,63 (3H, ушир. с).

Ссылочный пример 61

3-Ацетилтио-1-(4-{(1S)-2-метил-[1-(2-(п-нитробензилоксикарбониламино)метил)пропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

(1) Трет-бутиловый эфир ((1S)-1-гидроксиметил-2-метилпропил)карбаминовой кислоты

В раствор L-валинола (2,00 г, 19,4 ммоль) в смеси метиленхлорида (50 мл) и метанола (50 мл) добавляли ди-трет-бутоксикарбоновый ангидрид (5,08 г, 23,3 ммоль) на ледяной бане, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1), с получением трет-бутилового эфира ((1S)-1-гидроксиметил-2-метилпропил)карбаминовой кислоты (4,19 мг, выход 100%) в виде бесцветного масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 4,70-4,59 (1H, ушир. с), 3,74-3,66 (1H, м), 3,65-3,57 (1H, м), 3,48-3,39 (1H, м), 2,38-2,30 (1H, ушир. с), 1,89-1,78 (1H, м), 1,45 (9H, с), 0,96 (3H, д, J=6,6 Гц), 0,94 (3H, д, J=6,6 Гц).

(2) трет-бутиловый эфир ((1S)-1-Азидометил-2-метилпропил)карбаминовой кислоты

В раствор трет-бутилового эфира ((1S)-1-гидроксиметил-2-метилпропил)карбаминовой кислоты (3,00 г, 14,8 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 61(1)) в тетрагидрофуране (150 мл) добавляли дифенилфосфорил азид (4,78 мл, 22,2 ммоль), трифенилфосфин (5,82 г, 22,2 ммоль) и 40% раствор диэтилазодикарбоксилата в толуоле (9,67 г, 22,2 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 2 часов при тех же условиях. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (9:1), с получением трет-бутилового эфира ((1S)-1-азидометил-2-метилпропил)карбаминовой кислоты (3,26 г, выход 90%) в виде бесцветного масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 4,59-4,45 (1H, м), 3,56-3,47 (1H, м), 3,42 (2H, д, J=4,4 Гц), 1,86-1,74 (1H, м), 1,45 (9H, с), 0,95 (3H, д, J=6,6 Гц), 0,93 (3H, д, J=7,3 Гц).

(3) п-Нитробензиловый эфир ((2S)-2-трет-бутоксикарбониламино-3-метилбутил)карбаминовой кислоты

Раствор трет-бутилового эфира ((1S)-1-азидометил-2-метилпропил)карбаминовой кислоты (3,26 г, 13,3 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 61(2)) в метаноле (160 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле (3,26 г) при комнатной температуре в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали для удаления катализатора и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. В раствор полученного неочищенного продукта в метиленхлориде (160 мл) добавляли п-нитробензиловый эфир хлороформной кислоты (4,31 г, 20,0 ммоль) и триэтиламин (2,80 мл, 20,0 ммоль) на ледяной бане, и затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (8:1 → 1:1), с получением п-нитробензилового эфира ((2S)-2-трет-бутоксикарбониламино-3-метилбутил)карбаминовой кислоты (3,13 мг, выход 62%) в виде светло-желтых кристаллов.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,21 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,50 (2H, д, J=8,8 Гц), 5,43-5,31 (1H, ушир. с), 5,19 (2H, с), 4,57-4,49 (1H, ушир. д, J=8,8 Гц), 3,60-3,49 (1H, м), 3,40-3,29 (1H, м), 3,26-3,13 (1H, м), 1,82-1,71 (1H, м), 1,43 (9H, с), 0,96 (3H, д, J=7,3 Гц), 0,93 (3H, д, J=6,6 Гц).

(4) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-{(1S)-2-метил-[1-(п-нитробензилоксикарбониламино)метил]пропилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор п-нитробензилового эфира ((2S)-2-трет-бутоксикарбониламино-3-метилбутил)карбаминовой кислоты (3,13 г, 8,21 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 61(3)) в 1,4-диоксане (31 мл) добавляли 4н раствор хлористого водорода в 1,4-диоксане (31 мл) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Этилацетат добавляли в остаток, и полученную смесь отфильтровали и промывали этилацетат с получением гидрохлорида п-нитробензилового эфира ((2S)-2-амино-3-метилбутил)карбаминовой кислоты (1,82 г, выход 70%) в виде светло-желтых кристаллов.

Затем в суспензию гидрохлорида п-нитробензилового эфира ((2S)-2-амино-3-метилбутил)карбаминовой кислоты (1,29 г, 4,05 ммоль) полученного, как описано выше и 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,48 г, 3,37 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(4)) в диметилформамиде (74 мл) добавляли диэтилфосфорилцианид (615 мкл, 4,05 ммоль) и триэтиламин (1,14 мл, 8,10 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-{(1S)-2-метил-[1-(п-нитробензилоксикарбониламино)метил]пропилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,55 г, выход 74%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,11 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,64-7,60 (4H, м), 7,49-7,39 (8H, м), 7,35 (1H, с), 7,20-7,18 (1H, ушир. д, J=9,8 Гц), 5,56-5,48 (1H, ушир. с), 5,20 (1H, д, J=13,7 Гц), 5,08 (1H, д, J=13,7 Гц), 4,78-4,72 (1H, м), 4,14-4,06 (2H, м), 4,04-3,94 (3H, м), 3,46 (1H, дт, J=13,7, 3,9 Гц), 3,31 (1H, ддд, J=13,7, 10,7, 5,9 Гц), 1,95-1,86 (1H, м), 1,07 (9H, с), 1,01 (3H, д, J=6,8 Гц), 0,99 (3H, д, J=6,8 Гц).

(5) 3-Гидрокси-1-(4-{(1S)-2-метил-[1-(п-нитробензилоксикарбониламино)метил]пропилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-{(1S)-2-метил-[1-(п-нитробензилоксикарбониламино)метил]пропилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,54 г, 2,20 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 61(4)) в безводном тетрагидрофуране (78 мл) последовательно добавляли уксусную кислоту (151 мкл) и 1,0M раствор фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (2,64 мл, 2,64 ммоль) на ледяной бане. Смесь перемешивали на ледяной бане в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Полученный органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат, с получением 3-гидрокси-1-(4-{(1S)-2-метил-[1-(п-нитробензилоксикарбониламино)метил]пропилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (927 мг, выход 91%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,09 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,41 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,39 (1H, с), 7,19-7,14 (1H, ушир. д, J=9,5 Гц), 5,54-5,46 (1H, м), 5,22 (1H, д, J=13,6 Гц), 5,06 (1H, д, J=13,6 Гц), 4,87-4,78 (1H, м), 4,37-4,26 (2H, м), 4,04-3,90 (3H, м), 3,47-3,40 (1H, м), 3,38-3,30 (1H, м), 2,38 (1H, д, J=7,3 Гц), 1,94-1,83 (1H, м), 1,00 (3H, д, J=7,3 Гц), 0,99 (3H, д, J=7,3 Гц).

(6) 3-Метансульфонилокси-1-(4-{(1S)-2-метил-[1-(п-нитробензилоксикарбониламино)метил]пропилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-гидрокси-1-(4-{(1S)-2-метил-[1-(нитробензилоксикарбониламино)метил]пропилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (920 мг, 1,98 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 61(5)) в метиленхлориде (46 мл) добавляли метансульфонилхлорид (461 мкл, 5,95 ммоль) и триэтиламин (834 мкл, 5,95 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси на ледяной бане в течение 10 минут, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:4), с получением 3-метансульфонилокси-1-(4-{(1S)-2-метил-[1-(п-нитробензилокси-карбониламино)метил]пропилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,06 г, выход 99%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,10 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,45 (1H, с), 7,41 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,18-7,12 (1H, ушир. д, J=8,8 Гц), 5,50-5,45 (1H, ушир. с), 5,42 (1H, тт, J=6,6, 4,4 Гц), 5,22 (1H, д, J=13,2 Гц), 5,08 (1H, д, J=13,2 Гц), 4,49-4,40 (2H, м), 4,29-4,20 (2H, м), 4,04-3,95 (1H, м), 3,44 (1H, дт, J=13,9, 4,4 Гц), 3,38-3,24 (1H, м), 3,12 (3H, с), 1,94 – 1,85 (1H, м), 1,01 (3H, д, J=6,6 Гц), 0,99 (3H, д, J=6,6 Гц).

(7) 3-Ацетилтио-1-(4-{(1S)-2-метил-[1-(п-нитробензилокси-карбониламино)метил]пропилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-метансульфонилокси-1-(4-{(1S)-2-метил-[1-(п-нитробензилоксикарбониламино)метил]пропилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,06 г, 1,96 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 61(6)) в диметилформамиде (53 мл) добавляли тиоацетат калия (1,34 мг, 11,7 ммоль) при комнатной температуре. Смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 8,5 часов. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (2:3), с получением 3-ацетилтио-1-(4-{(1S)-2-метил-[1-(п-нитробензилоксикарбонил-амино)метил]пропилкарбамоил}-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (785 мг, выход 77%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,12 (2H, д,J=8,8 Гц), 7,42 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,41 (1H, с), 7,20-7,16 (1H, ушир. д, J=9,5 Гц), 5,54-5,45 (1H, ушир. с), 5,21 (1H, д, J=13,2 Гц), 5,09 (1H, д, J=13,2 Гц), 4,51 (2H, дт, J=11,0, 8,4 Гц), 4,47-4,39 (1H, м), 4,03-3,93 (3H, м), 3,45 (1H, дт, J=13,2, 4,0 Гц), 3,37-3,68 (1H, м), 2,37 (3H, с), 1,95-1,84 (1H, м), 1,00 (3H, д, J=7,3 Гц), 0,99 (3H, д, J=7,3 Гц).

Ссылочный пример 62

3-Ацетилтио-1-{4-(п-нитробензилоксикарбониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

(1) 1-(4-Азидометил-1,3-тиазол-2-ил)-3-трет-бутилдифенилсилилоксиазетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-гидроксиметил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,02 г, 2,39 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(2)) в тетрагидрофуране (50 мл) добавляли дифенилфосфорилазид (0,8 мл, 3,71 ммоль), трифенилфосфин (950 мг, 3,62 ммоль) и 40 % раствор диэтилазодикарбоксилата в толуоле (1,32 г, 3,59 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота. Смесь перемешивали на ледяной бане в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (8:1), с получением 1-(4-азидометил-1,3-тиазол-2-ил)-3-трет-бутилдифенилсилилоксиазетидина (1,06 г, выход 99%) в виде бесцветного сиропа.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,66-7,36 (10H, м), 6,45 (1H, с), 4,78-4,71 (1H, м), 4,24 (2H, с), 4,12 (2H, дд, J=8,6, 6,2 Гц), 4,02 (2H, дд, J=8,6, 5,7 Гц), 1,06 (9H, с).

ИК (жидкая пленка): 2858, 2170, 2100, 1527, 1313, 1182, 1143, 1114 см^-1

Масс-спектр (FAB⁺) 450 [M+H]⁺

Масс-спектр с высоким разрешением (FAB⁺) для C₂₃H₂₈ON₅SSi:

Вычислено: 450,1784;

Найдено: 450,1793 [M+H]⁺

(2) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-[4-(п-нитробензилокси-карбониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

1-(4-Азидометил-1,3-тиазол-2-ил)-3-трет-бутилдифенилсилил-оксиазетидина (1,06 г, 2,37 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 62(1)) в метаноле (53 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 20% гидроксида палладия на угле (1,05 г) при комнатной температуре. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали для удаления катализатора и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в метиленхлориде (53,2 мл). В смесь добавляли п-нитробензилхлороформиат (0,76 г, 3,52 ммоль) и триэтиламин (0,5 мл, 3,59 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции, смесь дистиллировали при пониженном давлении. Остаток разделяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:этилацетат (3:2), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-1-[4-(п-нитробензилоксикарбониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (867,2 мг, выход 61%) в виде желтого твердого продукта.

 ¹H-ЯМР (500 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,21 (2H, д, J=8,3 Гц), 7,62 (4H, д, J=8,3 Гц), 7,50 (2H, д, J=8,3 Гц), 7,50-7,34 (6H, м), 6,37 (1H, с), 5,38 (1H, ушир. т, J=5,4 Гц), 5,20 (2H, с), 4,78-4,71 (1H, м), 4,26 (2H, д, J=5,4 Гц), 4,10 (2H, дд, J=8,3, 6,8 Гц), 4,00 (2H, дд, J=8,3, 4,7 Гц), 1,06 (9H, с).

(3) 3-Гидрокси-1-[4-(п-нитробензилоксикарбониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси1-1-[4-(п-нитробензилоксикарбониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (867,2 мг, 1,44 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 62(2)) в безводном тетрагидрофуране (45 мл) добавляли уксусную кислоту (0,1 мл, 1,75 ммоль) и 1,0М фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (1,72 мл, 1,72 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали на ледяной бане в течение 4,5 часов. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (15:1), с получением 3-гидрокси-1-[4-(п-нитробензилоксикарбониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (457 мг, выход 87%) в виде желтого твердого продукта.

 ¹H-ЯМР (500 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,21 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,51 (2H, д, J=8,6 Гц), 6,40 (1H, с), 5,38 (1H, ушир. с), 5,21 (2H, с), 4,88-4,80 (1H, м), 4,32 (2H, дд, J=9,1, 6,8 Гц), 4,27 (2H, д, J=5,7 Гц), 3,95 (2H, дд, J=9,1, 4,5 Гц), 2,23 (1H, д, J=7,9 Гц).

(4) 3-Метансульфонилокси-1-[4-(п-нитробензилоксикарбонил-аминометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

В раствор 3-гидрокси-1-[4-(п-нитробензилоксикарбонил-аминометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (457 мг, 1,25 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 62(3)) в метиленхлориде (25 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,29 мл, 3,75 ммоль) и триэтиламин (0,53 мл, 3,80 ммоль) на ледяной бане. После перемешивания смеси в течение 10 минут на ледяной бане, полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:ацетонитрил (1:1), с получением 3-метансульфонилокси-1-[4-(п-нитробензилоксикарбониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (499,4 мг, выход 90%) в виде желтого твердого продукта.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,21 (2H, д, J=7,8 Гц), 7,51 (2H, д, J=7,8 Гц), 6,46 (1H, с), 5,44-5,38 (2H, м), 5,26 (2H, с), 4,43 (2H, дд, J=9,8, 6,8 Гц), 4,28 (2H, д, J=5,9 Гц), 4,24 (2H, дд, J=9,8, 4,4 Гц), 3,10 (3H, с).

(5) 3-Ацетилтио-1-[4-(п-нитробензилоксикарбониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

В раствор 3-метансульфонилокси-1-[4-(п-нитробензилоксикарбониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (499,4 мг, 1,13 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 62(4)) в диметилформамиде (25 мл) добавляли тиоацетат калия (1,0 г, 6,93 ммоль) при комнатной температуре, и смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 6,5 часов. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали 0,5М соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:ацетонитрил (2:1), с получением 3-ацетилтио-1-[4-(п-нитробензилоксикарбонил-аминометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (265,2 мг, выход 56%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,21 (2H, д, J=8,42 Гц), 7,51 (2H, д, J=8,4 Гц), 6,42 (1H, с), 5,39 (1H, ушир. т, J=7,5 Гц), 5,21 (2H, с), 4,51 (2H, т, J=8,1 Гц), 4,50-4,38 (1H, м), 4,27 (2H, д, J=7,5 Гц), 3,96 (2H, дд, J=8,1, 5,1 Гц), 2,36 (3H, с).

Ссылочный пример 63

3-Ацетилтио-1-[4-(метоксикарбониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-[4-(метоксикарбониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

1-(4-Азидометил-1,3-тиазол-2-ил)-3-трет-бутилдифенилсилилоксиазетидина (2,12 г, 4,71 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 62(1)) в метаноле (106 мл) подвергали каталитическому восстановлению в присутствии 20% гидроксида палладия (2,12 г) при комнатной температуре. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали для удаления катализатора и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в метиленхлориде (100 мл). В смесь добавляли метилхлороформиат (0,43 мл, 5,65 ммоль) и триэтиламин (0,79 мл, 5,65 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, смесь дистиллировали при пониженном давлении. Остаток разделяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат, с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-[4-(метоксикарбонил-аминометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (1,88 г, выход 45%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,60 (4H, д, J=1,5 Гц), 7,48-7,31 (6H, м), 7,19 (1H, т, J=8,1 Гц), 7,00 (1H, с), 4,78-4,68 (1H, м), 4,24 (2H, д, J=5,8 Гц), 4,09 (2H, т, J=9,0, 6,6 Гц), 3,99 (2H, т, J=9,0, 5,0 Гц), 3,67 (3H, с), 1,06 (9H, с).

(2) 3-Гидрокси-1-[4-(метоксикарбониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-[4-(метоксикарбониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (1,88 г, 3,90 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 63(1)) в безводном тетрагидрофуране (94 мл) добавляли уксусную кислоту (0,27 мл, 4,68 ммоль) и 1,0М фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (4,68 мл, 4,68 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали на ледяной бане в течение 30 минут. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат, с получением 3-гидрокси-1-[4-(метоксикарбониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (426 мг, выход 45%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 6,39 (1H, с), 4,79-4,39 (1H, м), 4,31 (2H, дд, J=9,1, 6,7 Гц), 4,25 (2H, д, J=5,8 Гц), 3,94 (2H, дд, J=9,1, 4,3 Гц), 3,68 (3H, с).

(3) 3-Метансульфонилокси-1-[4-(метоксикарбониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

В раствор 3-гидрокси-1-[4-(метоксикарбониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (426 мг, 1,75 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 63(2)) в метиленхлориде (20 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,16 мл, 2,10 ммоль) и триэтиламин (0,29 мл, 2,10 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат, с получением 3-метансульфонилокси-1-[4-(метоксикарбониламино-метил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (448 мг, выход 80%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 6,45 (1H, с), 5,45-5,36 (1H, м), 4,43 (2H, дд, J=9,6, 6,7 Гц), 4,25 (2H, с), 4,25 (1H, т, J=5,8 Гц), 4,23 (1H, т, J=5,8 Гц), 3,69 (3H, с), 3,10 (3H, с).

(4) 3-Ацетилтио-1-[4-(метоксикарбониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

В раствор 3-метансульфонилокси-1-[4-(метоксикарбониламино-метил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (448 мг, 1,39 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 63(3)) в диметилформамиде (13 мл) добавляли тиоацетат калия (952 мг, 8,34 ммоль) при комнатной температуре, и смесь перемешивали на масляной бане (90° C) в течение 6 часов. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:2), с получением 3-ацетилтио-1-[4-(метоксикарбониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (441 мг, выход 100%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 6,41 (1H, с), 4,50 (2H, т, J=8,5 Гц), 4,49-4,45 (1H, м), 4,25 (2H, д, J=5,7 Гц), 3,56 (2H, дд, J=8,5, 5,3 Гц), 3,68 (3H, с), 2,05 (3H, с).

Ссылочный пример 64

3-Ацетилтио-1-[4-(бензоиламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

(1) 1-[4-(Бензоиламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]-3-трет-бутилдифенилсилилоксиазетидин

1-(4-Азидометил-1,3-тиазол-2-ил)-3-трет-бутилдифенилсилил-оксиазетидина (2,53 г, 5,60 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 62(1) в метаноле (120 мл) подвергали каталитическому восстановлению в присутствии 20% гидроксида палладия (2,53 г) при комнатной температуре. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали для удаления катализатора. К фильтрату добавляли бензойный ангидрид (1,90 мл, 8,40 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 2,5 часов. После контроля завершения реакции, смесь дистиллировали при пониженном давлении. Остаток разделяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (3:1) → этилацетат, с получением 1-[4-(бензоиламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]-3-трет-бутилдифенилсилил-оксиазетидина (1,49 г, выход 50%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,79 (2H, д, J=7,3 Гц), 7,63-7,55 (4H, м), 7,55-7,31 (9H, м), 6,79 (1H, ушир. с), 6,44 (1H, с), 4,79-4,68 (1H, м), 4,51 (2H, д, J=5,4 Гц), 4,11 (2H, дд, J=8,4, 7,3 Гц), 4,01 (2H, дд, J=8,4, 5,0 Гц), 1,06 (9H, с).

(2) 1-[4-(Бензоиламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]-3-гидроксиазетидин

В раствор 1-[4-(бензоиламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]-3-трет-бутилдифенилсилилоксиазетидина (1,49 г, 2,82 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 64(1)) в безводном тетрагидрофуране (75 мл) добавляли 1,0М раствор фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (3,39 мл, 3,39 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали на ледяной бане в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:2) → этилацетат:метанол (9:1), с получением 1-[4-(бензоиламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]-3-гидроксиазетидина (582 мг, выход 71%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,79 (2H, дд, J=7,4 Гц), 7,60-7,36 (3H, м), 6,82 (1H, ушир. с), 6,46 (1H, с), 4,85-4,77 (1H, м), 4,51 (2H, д, J=5,6 Гц), 4,31 (2H, дд, J=8,9, 6,6 Гц), 3,95 (2H, дд, J=8,5, 4,4 Гц).

(3) 1-[4-(Бензоиламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-[4-(бензоиламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]-3-гидроксиазетидина (582 мг, 2,01 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 64(2)) в метиленхлориде (30 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,19 мл, 2,41 ммоль), триэтиламин (0,34 мл, 2,41 ммоль) и пиридин (5,8 мл) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат, с получением 1-[4-(бензоиламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]-3-метансульфонилоксиазетидина (739 мг, выход 100%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,80 (2H, д, J=6,9 Гц), 7,57-7,41 (3H, м), 6,71 (1H, ушир.с), 6,53 (1H, с), 5,46-5,38 (1H, м), 4,54 (2H, д, J=5,2 Гц), 4,44 (2H, ддд, J=9,6, 6,6, 0,9 Гц), 4,25 (2H, ддд, J=9,6, 9,3, 0,9 Гц), 3,10 (3H, с).

(4) 3-Ацетилтио-1-[4-(бензоиламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

В раствор 1-[4-(бензоиламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]-3-метансульфонилоксиазетидина (739 мг, 2,01 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 64(3)) в диметилформамиде (20 мл) добавляли тиоацетат калия (1,38 г, 12,1 ммоль) при комнатной температуре, и смесь перемешивали на масляной бане (90° C) в течение 3,5 часов. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат = (1:1) → этилацетат, с получением 3-ацетилтио-1-[4-(бензоиламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (698 мг, выход 100%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,08 (2H, д, J=7,8 Гц), 7,55-7,46 (3H, м), 6,77 (1H, ушир. с), 6,49 (1H, с), 4,47-4,38 (4H, м), 4,47-4,38 (1H, м), 3,97 (2H, дд, J=8,6, 5,2 Гц), 2,37 (3H, с).

Ссылочный пример 65

3-Ацетилтио-1-[4-(бензолсульфониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-[4-(бензолсульфониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

1-(4-Азидометил-1,3-тиазол-2-ил)-3-трет-бутилдифенил-силилоксиазетидин (2,12 г, 4,71 ммоль) (полученный, как описано в ссылочном примере 62(1)) в метаноле (106 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 20% гидроксида палладия (2,12 г) при комнатной температуре. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали для удаления катализатора и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в метиленхлориде (100 мл). В смесь добавляли бензолсульфонилхлорид (0,90 г, 7,07 ммоль) и триэтиламин (0,98 мл, 7,07 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, смесь дистиллировали при пониженном давлении. Остаток разделяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат, с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-[4-(бензолсульфониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (755 мг, выход 28%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,80 (2H, д, J=7,5 Гц), 7,61 (4H, д, J=6,3 Гц), 7,54-7,30 (9H, м), 6,21 (1H, с), 5,07 (1H, т, J=6,0 Гц), 4,74-4,66 (1H, м), 4,05 (2H, д, J=6,3 Гц), 3,99 (2H, дд, J=7,6 Гц), 3,89 (2H, дд, J=8,8, 4,8 Гц), 1,07 (9H, с).

(2) 1-[4-(Бензолсульфониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]-3-гидроксиазетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-[4-(бензолсульфониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (2,79 г, 4,95 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 65(1)) в безводном тетрагидрофуране (140 мл) добавляли раствор 1,0М фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (5,94 мл, 5,94 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали на ледяной бане в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат, с получением 1-[4-(бензолсульфониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]-3-гидроксиазетидина (1,06 г, выход 66%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,79 (2H, д, J=7,5 Гц), 7,50-7,41 (3H, м), 6,25 (1H, с), 5,51 (1H, ушир. с), 4,80-4,70 (1H, м), 4,19 (2H, т, J=9,1 Гц), 4,03 (2H, т, J=3,5 Гц), 3,83 (2H, дд, J=9,1, 4,3 Гц).

(3) 1-[4-(Бензолсульфониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-[4-(бензолсульфониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]-3-гидроксиазетидина (1,06 г, 3,26 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 65(2)) в метиленхлориде (50 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,38 мл, 4,89 ммоль) и триэтиламин (0,68 мл, 4,89 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат, с получением 1-[4-(бензолсульфониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]-3-метансульфонилоксиазетидина (1,16 мг, выход 91%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,82 (2H, д, J=7,3 Гц), 7,61-7,46 (3H, м), 6,33 (1H, с), 5,42-5,33 (1H, м), 5,15 (1H, т, J=5,9 Гц), 4,34 (2H, дд, J=9,8, 6,7 Гц), 4,14 (2H, дд, J=9,8, 4,1 Гц), 4,08 (2H, д, J=6,3 Гц), 3,10 (3H, с).

(4) 3-Ацетилтио-1-[4-(бензолсульфониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

В раствор 1-[4-(бензолсульфониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]-3-метансульфонилоксиазетидина (1,16 г, 2,98 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 65(3)) в диметилформамиде (35 мл) добавляли тиоацетат калия (2,04 г, 17,9 ммоль) при комнатной температуре, и смесь перемешивали на масляной бане (90° C) в течение 4 часов. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента метиленхлорид:этилацетат (5:1), с получением

3-Ацетилтио-1-[4-(бензолсульфониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (1,00 г, выход 91%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,82 (2H, д, J=7,4 Гц), 7,58-7,42 (3H, м), 6,23 (1H, с), 5,40-5,50 (1H, м), 4,48-4,30 (3H, м), 4,09 (2H, д, J=5,8 Гц), 3,90 (2H, дд, J=8,3, 4,5 Гц), 2,37 (3H, с).

Ссылочный пример 66

3-Ацетилтио-1-[4-(тиофен-2-карбониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-[4-(тиофен-2-карбониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

1-(4-Азидометил-1,3-тиазол-2-ил)-3-трет-бутилдифенилсилил-оксиазетидин (2,47 г, 5,50 ммоль) (полученный, как описано в ссылочном примере 62(1)) в метаноле (120 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 20% гидроксида палладия (2,47 г) при комнатной температуре. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали для удаления катализатора и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в метиленхлориде (115 мл). В смесь добавляли теноилхлорид (0,71 мл, 6,60 ммоль) и триэтиламин (0,92 мл, 6,60 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, смесь дистиллировали при пониженном давлении. Остаток разделяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-[4-(тиофен-2-карбониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (1,88 г, выход 64%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,75-7,32 (13H, м), 7,11-7,03 (1H, м), 6,65 (1H, ушир. с), 4,80-4,70 (1H, м), 4,47 (2H, д, J=5,0 Гц), 4,11 (2H, т, J=8,5 Гц), 4,01 (2H, дд, J=8,5, 5,0 Гц), 1,06 (9H, с).

(2) 3-Гидрокси-1-[4-(тиофен-2-карбониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-[4-(тиофен-2-карбониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (2,18 г, 4,08 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 66(1)) в безводном тетрагидрофуране (110 мл) добавляли раствор 1,0М фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (4,90 мл, 4,90 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали на ледяной бане в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (10:1), с получением 3-гидрокси-1-[4-(тиофен-2-карбониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (571 мг, выход 47%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,53 (1H, д, J=3,5 Гц), 7,46 (1H, д, J=5,4 Гц), 7,60 (1H, дд, J=4,9, 3,8 Гц), 6,87 (1H, ушир. с), 6,46 (1H, с), 4,87-4,78 (1H, м), 4,48 (2H, д, J=5,6 Гц), 4,33 (2H, дд, J=8,7, 4,6 Гц), 3,98 (2H, дд, J=8,7, 4,6 Гц).

(3) 3-Метансульфонилокси-1-[4-(тиофен-2-карбониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

В раствор 3-гидрокси-1-[4-(тиофен-2-карбонил-амино)метил-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (571 мг, 1,93 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 66(2)) в метиленхлориде (28 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,18 мл, 2,32 ммоль) и триэтиламин (0,33 мл, 2,32 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (1:1), с получением 3-метансульфонилокси-1-[4-(тиофен-2-карбонил-амино)метил-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (490 мг, выход 91%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,56 (1H, д, J=5,4 Гц), 7,47 (1H, д, J=5,4 Гц), 7,07 (1H, дд, J=5,1, 3,7 Гц), 6,87 (1H, ушир. с), 6,50 (1H, с), 4,57 (2H, т, J=8,6 Гц), 4,50 (2H, т, J=5,4 Гц), 4,50 (2H, д, J=5,4 Гц), 4,48-4,37 (1H, м), 4,36 (2H, дд, J=8,6, 5,5 Гц), 2,36 (3H, с).

(4) 3-Ацетилтио-1-[4-(тиофен-2-карбониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

В раствор 3-метансульфонилокси-1-[4-(тиофен-2-карбониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (623 мг, 1,67 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 66(3)) в диметилформамиде (18 мл) добавляли тиоацетат калия (1,14 г, 10,0 ммоль) при комнатной температуре, и смесь перемешивали на масляной бане (90° C) в течение 4 часов. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:1) → этилацетат, с получением 3-ацетилтио-1-[4-(тиофен-2-карбониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (490 мг, выход 91%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,56 (1H, д, J=5,4 Гц), 7,47 (1H, д, J=5,4 Гц), 7,07 (1H, дд, J=5,1, 3,7 Гц), 6,87 (1H, ушир. с), 6,50 (1H, с), 4,57 (2H, т, J=8,6 Гц), 4,50 (2H, т, J=5,4 Гц), 4,50 (2H, д, J=5,4 Гц), 4,48-4,37 (1H, м), 4,36 (2H, дд, J=8,6, 5,5 Гц), 2,36 (3H, с).

Ссылочный пример 67

3-Ацетилтио-1-[4-(фуран-2-карбониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-[4-(фуран-2-карбониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

1-(4-Азидометил-1,3-тиазол-2-ил)-3-трет-бутилдифенилсилилоксиазетидин (2,47 г, 5,50 ммоль) (полученный, как описано в ссылочном примере 62(1)) в метаноле (120 мл) подвергали каталитическому восстановлению в присутствии 20% гидроксида палладия (2,47 г) при комнатной температуре. После контроля завершения реакции, реакционную смесь фильтровали для удаления катализатора и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в метиленхлориде (115 мл). В смесь добавляли 2-фуроилхлорид (0,65 мл, 6,60 ммоль) и триэтиламин (0,92 мл, 6,60 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, смесь дистиллировали при пониженном давлении. Остаток разделяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-[4-(фуран-2-карбониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (1,60 г, выход 60%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,75-7,58 (4H, м), 7,50-7,09 (9H, м), 6,68 (1H, ушир. с), 4,82-4,70 (1H, м), 4,47 (2H, д, J=5,5 Гц), 4,11 (2H, т, J=8,3 Гц), 4,02 (2H, дд, J=8,3, 5,0 Гц), 1,06 (9H, с).

(2) 1-[4-(Фуран-2-карбониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]-3-гидроксиазетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-[4-(фуран-2-карбонил-амино)метил-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (1,90 г, 3,68 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 67(1)) в безводном тетрагидрофуране (95 мл) добавляли раствор 1,0М фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (4,41 мл, 4,41 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали на ледяной бане в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (10:1), с получением 1-[4-(фуран-2-карбониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]-3-гидроксиазетидина (426 мг, выход 47%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,44 (1H, с), 7,12 (1H, д, J=3,5 Гц), 7,04 (1H, ушир. с), 6,49 (1H, дд, J=3,4, 1,7 Гц), 6,45 (1H, с), 4,86-4,78 (1H, м), 4,48 (2H, д, J=5,7 Гц), 4,33 (2H, т, J=8,8 Гц), 3,98 (2H, дд, J=8,8, 4,4 Гц).

(3) 1-[4-(Фуран-2-карбониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-[4-(фуран-2-карбониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]-3-гидроксиазетидина (426 мг, 1,72 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 67(2)) в метиленхлориде (20 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,16 мл, 2,07 ммоль) и триэтиламин (0,29 мл, 2,07 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (20:1), с получением 1-[4-(фуран-2-карбониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]-3-метансульфонилоксиазетидина (481 мг, выход 78%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,45 (1H, д, J=0,9 Гц), 7,13 (1H, д, J=3,5 H), 7,00 (1H, с), 6,53 (1H, с), 6,50 (1H, дд, J=3,5, 1,8 Гц), 5,49-5,38 (1H, м), 4,51 (2H, д, J=5,8 Гц), 4,48 (2H, дд, J=3,1, 1,0 Гц), 4,29 (2H, дд, J=5,8, 4,9 Гц), 3,10 (3H, с).

(4) 3-Ацетилтио-1-[4-(фуран-2-карбониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

В раствор 1-[4-(фуран-2-карбониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]-3-метансульфонилоксиазетидина (481 мг, 1,34 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 67(3)) в диметилформамиде (14 мл) добавляли тиоацетат калия (921 мг, 8,07 ммоль) при комнатной температуре, и смесь перемешивали на масляной бане (90° C) в течение 6 часов. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:1), с получением 3-ацетилтио-1-[4-(фуран-2-карбониламино)метил-1,3-тиазол-2-ил]азетидина (341 мг, выход 83%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,45 (1H, с), 7,12 (1H, д, J=3,5 Гц), 7,09-6,94 (2H, м), 6,49 (2H, т, J=2,5 Гц), 4,56 (2H, т, J=8,5 Гц), 4,50 (2H, д, J=5,7 Гц), 4,48-4,38 (1H, м), 4,02 (2H, дд, J=8,5, 6,1 Гц), 2,36 (3H, с).

Ссылочный пример 68

3-Ацетилтио-1-(4-фталимидометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-фталимидометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-гидроксиметил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,50 г, 3,53 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(2)) в тетрагидрофуране (75 мл) добавляли фталимид (519 мг, 5,30 ммоль), трифенилфосфин (1,39 г, 5,30 ммоль) и 40% раствор диэтилазодикарбоксилата в толуоле (2,03 мл, 5,30 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота. Смесь перемешивали на ледяной бане в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:5), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-фталимидометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,52 мг, выход 78%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,88 (2H, дд, J=5,5, 3,1 Гц), 7,33 (2H, дд, J=5,5, 3,1 Гц), 7,60 (4H, дд, J=7,9, 1,4 Гц), 7,47-7,34 (6H, м), 6,26 (1H, с), 4,83 (2H, с), 4,76-4,68 (1H, м), 4,26-4,08 (2H, м), 4,08-3,92 (2H, м), 1,05 (9H, с).

(2) 1-(4-Фталимидометил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-фталимидометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,52 г, 2,57 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 68(1)) в безводном тетрагидрофуране (76 мл) добавляли 1,0М раствор фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (3,29 мл, 3,29 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали на ледяной бане в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат, с получением 1-(4-фталимидометил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (864 мг, выход 100%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,87 (2H, дд, J=5,4, 3,1 Гц), 7,73 (2H, дд, J=5,4, 3,1 Гц), 6,32 (1H, с), 4,79 (2H, с), 4,78-4,70 (1H, м), 4,27 (2H, дд, J=9,2, 6,9 Гц), 3,91 (2H, дд, J=9,2, 4,6 Гц).

(3) 1-(4-Фталимидометил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-(4-фталимидометил-1,3-тиазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (864 мг, 2,74 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 68(2)) в метиленхлориде (35 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,25 мл, 3,29 ммоль) и триэтиламин (0,46 мл, 3,29 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, смесь добавляли в диэтиловый эфир и перемешивали в течение 30 минут. Смесь затем фильтровали и твердый продукт собирали фильтрацией и промывали диэтиловым эфиром с получением 1-(4-фталимидометил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (726 мг, выход 67%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,91 (2H, дд, J=5,5, 2,8 Гц), 7,86 (2H, дд, J=5,5, 3,5 Гц), 6,70 (1H, с), 5,46-5,39 (1H, м), 4,63 (2H, с), 4,36 (2H, дд, J=10,0, 6,6 Гц), 4,09 (2H, дд, J=10,0, 3,4 Гц), 3,27 (3H, с).

(4) 3-Ацетилтио-1-(4-фталимидометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 1-(4-фталимидометил-1,3-тиазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (726 мг, 1,85 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 68(3)) в диметилформамиде (22 мл) добавляли тиоацетат калия (1,26 г, 11,1 ммоль) при комнатной температуре, и смесь перемешивали на масляной бане (90° C) в течение 6,5 часов. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:1), с получением 3-ацетилтио-1-(4-фталимидометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (599 мг, выход 87%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,88 (2H, дд, J=5,4, 2,9 Гц), 7,73 (2H, дд, J=5,4, 3,1 Гц), 6,35 (1H, с), 4,82 (2H, с), 4,52 (2H, т, J=8,4 Гц), 4,45-4,35 (1H, м), 3,98 (2H, дд, J=8,4, 5,7 Гц), 2,34 (3H, с).

Ссылочный пример 69

3-Ацетилтио-1-(4-сукцинимидометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-сукцинимидометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-гидроксиметил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,50 г, 3,53 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 2(2)) в тетрагидрофуране (75 мл) добавляли сукцинимид (525 мг, 5,30 ммоль), трифенилфосфин (1,39 г, 5,30 ммоль) и 40% раствор диэтилазодикарбоксилата в толуоле (2,03 мл, 5,30 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота. Смесь перемешивали на ледяной бане в течение 4 часов. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента гексан:этилацетат (1:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-сукцинимидометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,79 г, выход 100%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,65-7,57 (4H, м), 7,49-7,36 (6H, м), 6,30 (1H, с), 4,75-4,66 (1H, м), 4,60 (2H, с), 4,21 (4H, дд, J=14,2, 7,1 Гц), 4,12 (4H, дд, J=14,2, 7,1 Гц), 4,09 (2H, т, J=8,5 Гц), 3,99 (2H, дд, J=8,5, 4,9 Гц), 1,05 (9H, с).

(2) 3-Гидрокси-1-(4-сукцинимидометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-сукцинимидометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,79 г, 3,53 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 69(1)) в безводном тетрагидрофуране (141 мл) добавляли раствор 1,0М фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (4,24 мл, 4,24 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали на ледяной бане в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → этилацетат:метанол (20:1), с получением 3-гидрокси-1-(4-сукцинимидометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (456 мг, выход 49%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 6,34 (1H, с), 4,84-4,74 (1H, м), 4,62 (2H, с), 4,31 (2H, дд, J=9,9, 6,6 Гц), 3,94 (2H, дд, J=9,9, 4,4 Гц), 2,76 (4H, м).

(3) 3-Метансульфонилокси-1-(4-сукцинимидометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-гидрокси-1-(4-сукцинимидометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (459 мг, 1,72 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 69(2)) в метиленхлориде (50 мл) добавляли метансульфонилхлорид (0,16 мл, 2,06 ммоль) и триэтиламин (0,29 мл, 2,06 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат, с получением 3-метансульфонилокси-1-(4-сукциимидoметил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (515 мг, выход 87%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 6,43 (1H, с), 5,44-5,34 (1H, м), 4,62 (2H, с), 4,44 (2H, дд, J=10,3, 6,6 Гц), 4,24 (2H, дд, J=10,3, 4,2 Гц), 3,09 (3H, с), 2,76 (4H, с).

(4) 3-Ацетилтио-1-(4-сукцинимидометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-метансульфонилокси-1-(4-сукцинимидометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (515 мг, 1,49 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 69(3)) в диметилформамиде (15 мл) добавляли тиоацетат калия (1,02 г, 8,95 ммоль) при комнатной температуре, и затем перемешивали на масляной бане (90° C) в течение 8 часов. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат, с получением 3-ацетилтио-1-(4-сукцинимидометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (238 мг, выход 49%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 6,37 (1H, с), 4,62 (2H, с), 4,51 (2H, т, J=8,5 Гц), 4,45-4,35 (1H, м), 3,97 (2H, дд, J=8,4, 5,4 Гц), 2,76 (4H, с), 2,35 (3H, м).

Ссылочный пример 70

3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин

(1) Метиловый эфир (2S)-3-(трет-бутилдифенилсилилокси)-2-изотиоцианатопропионовой кислоты

Метиловый эфир трет-бутилдифенилсилилокси-N-бензилоксикарбонил-L-серина (32,0 г, 65,1 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 39(1)) в метаноле (960 мл) подвергали каталитическому гидрированию в присутствии 10% палладия на угле при комнатной температуре в течение 2 часов. По прошествии этого времени, реакционную смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента метиленхлорид:метанол (95:5), с получением метилового эфира трет-бутилдифенилсилилокси-L-серина (19,7 г, выход 85%) в виде бесцветного масла. В раствор продукта (метилового эфира трет-бутилдифенилсилилокси-L-серина) (19,7 г, 55,0 ммоль) в метиленхлориде (590 мл) добавляли дисульфид углерода (6,62 мл, 110 ммоль) и триэтиламин (19,3 мл, 138 ммоль) при комнатной температуре, и смесь перемешивали в течение ночи. В полученную смесь добавляли этилхлороформиат (13,2 мл, 138 ммоль) и триэтиламин (19,3 мл, 138 ммоль), и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли метанол, и полученную смесь перемешивали в течение 30 минут. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол, с получением метилового эфира (2S)-3-(трет-бутилдифенилсилилокси)-2-изотиоцианатопропионовой кислоты (14,8 г, выход 67%) в виде желтых кристаллов.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,70-7,62 (4H, м), 7,48-7,38 (6H, м), 4,28 (1H, дд, J=3,7, 5,1 Гц), 4,05 (1H, дд, J=5,1, 10,3 Гц), 3,95 (1H, дд, J=3,7, 10,3 Гц), 3,80 (3H, с), 1,06 (9H, с).

(2) Метиловый эфир (2S)-3-(трет-бутилдифенилсилилокси)-2-[(3-гидроксиазетидин-1-карботиоил)амино]пропионовой кислоты

В раствор метилового эфира 3-(трет-бутилдифенилсилилокси)-2-изотиоцианатопропионовой кислоты (13,4 г, 33,5 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 70(1)) в тетрагидрофуране (245 мл) добавляли раствор 3-гидроксиазетидина (4,90 г, 67,1 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 31(1)) в воде (50 мл) при комнатной температуре, и смесь перемешивали в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол и толуол:ацетонитрил (3:1), с получением метилового эфира (2S)-3-(трет-бутилдифенилсилилокси)-2-[(3-гидроксиазетидин-1-карботиоил)амино]пропионовой кислоты (9,60 г, выход 61%) в виде желтого твердого продукта.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,61-7,55 (4H, м), 7,47-7,36 (6H, м), 5,94 (1H, ушир. д, J=8,1 Гц), 5,19 (1H, дт, J=2,9, 8,1 Гц), 4,71-4,64 (1H, м), 4,40-4,33 (1H, м), 4,31-4,23 (1H, м), 4,18 (1H, дд, J=2,2, 10,3 Гц), 4,04 (1H, дд, J=2,9, 10,3 Гц), 4,02-3,96 (1H, м), 3,94-3,88 (1H, м), 3,76 (3H, с), 2,24 (1H, ушир. д, J=5,9 Гц), 1,04 (9H, с).

(3) Метиловый эфир (2S)-2-{[3-(бензоилокси)азетидин-1-карботиоил]амино}-3-(трет-бутилдифенилсилилокси)пропионовой кислоты

В раствор метилового эфира (2S)-3-(трет-бутилдифенилсилилокси)-2-[(3-гидроксиазетидин-1-карботиоил)-амино]пропионовой кислоты (21,1 г, 44,6 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 70(2)) в пиридине (630 мл) добавляли раствор бензойного ангидрида (30,0 г, 133 ммоль) и 4-диметиламинопиридина (545 мг, 4,46 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали 0,5н соляной кислотой, насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (4:1), с получением метилового эфира (2S)-2-{[3-(бензоилокси)азетидин-1-карботиоил]амино}-3-(трет-бутилдифенилсилилокси)пропионовой кислоты (23,3 г, выход 91%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,10-8,05 (2H, м), 7,65-7,54 (4H, м), 7,52-7,45 (3H, м), 7,44-7,35 (6H, м), 5,96 (1H, ушир. д, J=8,1 Гц), 5,47-5,40 (1H, м), 5,20 (1H, дт, J=8,1, 2,9 Гц), 4,57-4,51 (1H, м), 4,49-4,40 (1H, м), 4,27-4,20 (1H, м), 4,20 (1H, дд, J=2,2, 10,3 Гц), 4,06 (1H, дд, J=2,9, 10,3 Гц), 3,77 (3H, с), 1,04 (9H, с).

(4) Метиловый эфир (2S)-2-{[3-(Бензоилокси)азетидин-1-карботиоил]амино}-3-гидроксипропионовой кислоты

В раствор метилового эфира (2S)-2-{[3-(бензоилокси)азетидин-1-карботиоил]амино}-3-(трет-бутилдифенилсилилокси)пропионовой кислоты (23,3 г, 40,0 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 70(3)) в тетрагидрофуране (700 мл) добавляли 1,0М раствор фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (48,4 г, 48,4 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение ночи. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:ацетонитрил (3:1), с получением метилового эфира (2S)-2-{[3-(бензоилокси)азетидин-1-карботиоил]амино}-3-гидроксипропионовой кислоты (12,6 г, выход 92%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,08-8,04 (2H, м), 7,64-7,59 (1H, м), 7,51-7,45 (2H, м), 6,00 (1H, д, J=7,3 Гц), 5,49-5,43 (1H, м), 5,25 (1H, дт, J=7,3, 3,7 Гц), 4,63-4,56 (2H, м), 4,32-4,24 (2H, м), 4,12-4,02 (2H, м), 3,82 (3H, с).

(5) 3-Бензоилокси-1-[(4S)-4-метоксикарбонил-1,3-оксазолин-2-ил]азетидин

В раствор тетрафторбората 2-хлор-3-этилбензоксазолия (15,1 г, 55,9 ммоль) в ацетонитриле (380 мл) по каплям добавляли раствор метилового эфира (2S)-2-{[3-(бензоилокси)азетидин-1-карботиоил]амино}-3-гидроксипропионовой кислоты (полученного, как описано в ссылочном примере 70(4)) (12,6 г, 37,2 ммоль) в ацетонитриле (500 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, и смесь перемешивали в течение 1 часа. В полученную смесь добавляли триэтиламин (10,4 мл, 74,4 ммоль), и смесь перемешивали в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат и этилацетат:метанол (95:5), с получением 3-бензоилокси-1-[(4S)-(4-метоксикарбонил-1,3-оксазолин-2-ил)азетидина (9,12 г, выход 81%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,08-8,04 (2H, м), 7,63-7,58 (1H, м), 7,49-7,44 (2H, м), 5,50-5,44 (1H, м), 4,69 (1H, дд, J=6,6, 9,5 Гц), 4,55 (1H, дд, J=6,6, 8,1 Гц), 4,51-4,44 (3H, м), 4,20-4,14 (2H, м), 3,78 (3H, с).

(6) 3-Бензоилокси-1-[4-метоксикарбонил-1,3-оксазол-2-ил]азетидин

В раствор 3-бензоилокси-1-(4-метоксикарбонил-1,3-оксазолин-2-ил)азетидина (9,12 г, 30,0 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 70(5)) в смеси толуола (450 мл) и метиленхлорида (180 мл) добавляли диоксид марганца (63,8 г) и смесь кипятили с обратным холодильником в течение 5 часов. После контроля завершения реакции, смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:ацетонитрил = 1:1, с получением 3-бензоилокси-1-(4-метоксикарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (5,24 г, выход 58%) в виде светло-желтых кристаллов.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,08-8,04 (2H, м), 7,84 (1H, с), 7,63-7,58 (1H, м), 7,50-7,44 (2H, м), 5,60-5,53 (1H, м), 4,61 (1H, дд, J=5,9, 9,5 Гц), 4,31 (1H, дд, J=3,4, 9,5 Гц), 3,89 (3H, с).

(7) 3-Гидрокси-1-[4-метоксикарбонил-1,3-оксазол-2-ил]азетидин

В раствор 3-бензоилокси-1-(4-метоксикарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (5,24 г, 17,3 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 70(6)) в смеси метанола (260 мл) и метиленхлорида (80 мл) добавляли каталитическое количество метоксида натрия при комнатной температуре, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, смесь нейтрализовали с помощью 4н хлористоводородного газа в диоксане и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента метиленхлорид:метанол (95:5), с получением 3-гидрокси-1-(4-метоксикарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (2,65 г, выход 77%) в виде светло-коричневых кристаллов.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,81 (1H, с), 4,83-4,76 (1H, ушир. с), 4,41 (2H, дд, J=6,6, 9,5 Гц), 4,06 (2H, дд, J=4,4, 9,5 Гц), 3,88 (3H, с), 2,39-2,30 (1H, ушир. с).

(8) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-метоксикарбонил-1,3-оксазол-2-ил]азетидин

В раствор 3-гидрокси-1-(4-метоксикарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (2,64 г, 13,4 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 70(7)) в диметилформамиде (80 мл) добавляли трет-бутилдифенилсилан (6,97 мл, 26,8 ммоль) и имидазол (1,82 г, 26,8 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали на ледяной бане в течение ночи. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли метанол, и смесь перемешивали в течение 30 минут. Полученную смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (4:3 → 3:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-метоксикарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (4,95 г, выход 85%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,78 (1H, с), 7,62-7,58 (4H, м), 7,48-7,36 (6H, м), 4,74-4,67 (1H, м), 4,15 (1H, дд, J=6,6, 9,5 Гц), 4,08 (1H, дд, J=5,1, 9,5 Гц), 3,87 (3H, с), 1,06 (9H, с).

(9) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-гидроксиметил-1,3-оксазол-2-ил]азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-метоксикарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (4,95 г, 11,3 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 70(8)) в безводном тетрагидрофуране (100 мл) по каплям добавляли суспензию литийалюминийгидрида (1,29 г, 33,9 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (250 мл) на ледяной бане в атмосфере азота, и смесь перемешивали на ледяной бане в течение 5 минут. После контроля завершения реакции в реакционную смесь медленно добавляли декагидрат сульфата магния на ледяной бане. После окончания пенообразования, полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. В реакционную смесь постепенно добавляли этилацетат. Полученную смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента толуол:ацетонитрил (3:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-гидроксиметил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (3,88 г, выход 84%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,63-7,59 (4H, м), 7,47-7,36 (6H, м), 7,13 (1H, с), 4,73-4,66 (1H, м), 4,45 (2H, с), 4,11 (2H, дд, J=6,6, 8,8 Гц), 4,04 (2H, дд, J=5,1, 8,8 Гц), 2,21-2,15 (1H, ушир. с), 1,06 (9H, с).

(10) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-формил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-гидроксиметил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (3,88 г, 9,50 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 70(9)) в метиленхлориде (190 мл) добавляли активированный диоксид марганца (19,4 г), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, смесь фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (3:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-формил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (3,09 г, выход 80%) в виде светло-желтых кристаллов.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 9,75 (1H, с), 7,80 (1H, с), 7,63-7,58 (4H, м), 7,48-7,37 (6H, м), 4,75-4,68 (1H, с), 4,16 (2H, дд, J=6,6, 9,5 Гц), 4,10 (2H, дд, J=5,1, 9,5 Гц), 1,06 (9H, с).

(11) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбоксил-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-формил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (3,09 г, 7,60 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 70(10)) в безводном метиленхлориде (18 мл) добавляли трет-бутанол (93 мл) и раствор 2M 2-метил-2-бутена в тетрагидрофуране (5,70 мл, 11,4 ммоль), затем по каплям добавляли раствор хлорита натрия (1,72 г, 15,2 ммоль) и дигидрофосфата натрия (1,82 г, 15,2 ммоль) в воде (18 мл) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 1 часа. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 1М хлористоводородную кислоту до pH равного 2-3, полученную смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой разделяли, промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента метиленхлорид и метиленхлорид (9:1), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-тиазол-2-ил)азетидина (1,90 г, выход 59%) в виде коричневого твердого продукта.

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 423 [M+H]⁺

Ссылочный пример 71

3-Ацетилтио-1-(4-азетидинокарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин

(1) 1-(4-Азетидинокарбонил-1,3-оксазол-2-ил)-3-трет-бутилдифенилсилилоксиазетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-метоксикарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (2,00 г, 4,58 ммоль) в толуоле (100 мл) добавляли раствор 0,67М азетидина-триметилалюминия в бензоле (13,7 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали на масляной бане (100° C) в течение 5,5 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (100 мл) и этилацетат (200 мл) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и водой. Органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:1) и этилацетат, с получением 1-(4-азетидинокарбонил-1,3-оксазол-2-ил)-3-трет-бутилдифенилсилилоксиазетидина (875 мг, выход 41%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,67 (1H, с), 7,65-7,57 (4H, м), 7,48-7,37 (6H, м), 4,72-4,66 (1H, м), 4,54-4,47 (2H, м), 4,18-4,11 (2H, м), 4,10 (2H, дд, J=6,6, 8,8 Гц), 4,04 (2H, дд, J=5,1, 8,8 Гц), 2,30 (2H, квинтет, J=7,7 Гц), 1,06 (9H, с).

(2) 1-(4-Азетидинокарбонил-1,3-оксазол-2-ил)-3-гидроксиазетидин

В раствор 1-(4-азетидинокарбонил-1,3-оксазол-2-ил)-3-трет-бутилдифенилсилилоксиазетидина (870 мг, 1,88 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 71(1)) в безводном тетрагидрофуране (44 мл) добавляли раствор 1,0М фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (2,26 мл, 2,26 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали на ледяной бане в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (9:1), с получением 1-(4-азетидинокарбонил-1,3-оксазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (396 мг, выход 94%) в виде белых кристаллов.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,70 (1H, с), 4,81-4,74 (1H, м), 4,53 (2H, дд, J=6,8, 7,8 Гц), 4,34 (2H, дд, J=6,8, 9,8 Гц), 4,16 (2H, дд, J=6,8, 7,8 Гц), 3,99 (2H, дд, J=4,9, 8,8 Гц), 2,34 (1H, д, J=7,8 Гц), 2,31 (2H, квинтет, J=7,8 Гц).

(3) 1-(4-Азетидинокарбонил-1,3-оксазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-(4-азетидинокарбонил-1,3-оксазол-2-ил)-3-гидроксиазетидина (390 мг, 1,75 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 71(2)) в метиленхлориде (20 мл) добавляли метансульфонилхлорид (406 мкл, 5,24 ммоль) и триэтиламин (734 мкл, 5,24 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 10 минут и затем при комнатной температуре в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным хлоридом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. К остатку добавляли этилацетат и диизопропиловый эфир с получением твердого продукта и твердый продукт собирали фильтрацией, промывали диизопропиловый эфир и сушили в вакууме с получением 1-(4-азетидинокарбонил-1,3-оксазол-2-ил)-3-метансульфонилокси-азетидина (449 мг, выход 85%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,74 (1H, м), 5,40-5,34 (1H, м), 4,55-4,49 (2H, ушир. т, J=7,3 Гц), 4,47 (2H, ддд, J=11,0, 6,6, 0,7 Гц), 4,29 (2H, дд, J=11,0, 4,4 Гц), 4,19-4,12 (2H, ушир. т, J=7,3 Гц), 3,09 (3H, с), 2,32 (2H, квинтет, J=7,3 Гц).

(4) 3-Ацетилтио-1-(4-азетидинокарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин

В раствор 1-(4-азетидинокарбонил-1,3-оксазол-2-ил)-3-метансульфонилоксиазетидина (470 мг, 1,56 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 71(3)) в диметилформамиде (25 мл) добавляли тиоацетат калия (1,07 г, 9,36 ммоль) при комнатной температуре, и смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 8,5 часов. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат и этилацетат:метанол (95:5), с получением 3-ацетилтио-1-(4-азетидинокарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (330 мг, выход 75%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,71 (1H, с), 4,54 (2H, т, J=8,8 Гц), 4,55-4,49 (2H, ушир. т, J=8,1 Гц), 4,43-4,35 (1H, м), 4,18-4,12 (2H, ушир. т, J=8,1 Гц), 4,00 (2H, дд, J=8,8, 5,9 Гц), 2,35 (3H, с), 2,36-2,26 (2H, м).

Ссылочный пример 72

3-Ацетилтио-1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-метоксикарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (1,00 г, 2,29 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 70(8)) в толуоле (50 мл) добавляли раствор 0,67М морфолина-триметилалюминия в толуоле (6,87 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 4 часов. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (50 мл) и этилацетат (100 мл) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа.

В реакционную смесь добавляли этилацетат. Смесь распределяли между этилацетатом и водой. Органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенный водный раствор хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:2), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (400 мг, выход 36%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,68 (1H, с), 7,62-7,59 (4H, м), 7,48-7,37 (6H, м), 4,73-4,67 (1H, м), 4,15-4,09 (2H, м), 4,05 (2H, дд, J=8,8, 5,1 Гц), 3,75-3,65 (8H, ушир. с), 1,06 (9H, с).

(2) 3-Гидрокси-1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (730 мг, 1,48 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 72(1)) в безводном тетрагидрофуране (37 мл) добавляли раствор 1,0М фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (1,78 мл, 1,78 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали на ледяной бане в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (95:5 → 9:1), с получением 3-гидрокси-1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (377 мг, выход 100%) в виде белых кристаллов.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,71 (1H, с), 4,82-4,74 (1H, м), 4,35 (2H, дд, J=9,5, 6,6 Гц), 4,00 (2H, дд, J=9,5, 4,4 Гц), 3,76-3,65 (8H, м), 2,42-2,30 (1H, ушир. с).

(3) 3-Метансульфонилокси-1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-гидрокси-1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (370 мг, 1,48 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 72(2)) в метиленхлориде (19 мл) добавляли метансульфонилхлорид (344 мл, 4,44 ммоль) и триэтиламин (622 мл, 4,44 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 10 минут и затем при комнатной температуре в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным хлоридом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (93:7), с получением 3-метансульфонилокси-1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (404 мг, выход 100%) в виде светло-желтых кристаллов.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,75 (1H, с), 5,41-5,34 (1H, м), 4,48 (2H, ддд, J=9,5, 6,6, 1,5 Гц), 4,30 (2H, ддд, J=9,5, 4,0, 1,5 Гц), 3,78-3,65 (8H, м), 3,10 (3H, с).

(4) 3-Ацетилтио-1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин

В раствор 3-метансульфонилокси-1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (400 мг, 1,21 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 72(3)) в диметилформамиде (20 мл) добавляли тиоацетат калия (827 мг, 7,24 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 6 часов. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → этилацетат:метанол (95:5), с получением 3-ацетилтио-1-(4-морфолинoкарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (266 мг, выход 71%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,72 (1H, с), 4,55 (2H, т, J=8,4 Гц), 4,43-4,36 (1H, м), 4,02 (2H, дд, J=9,5, 5,9 Гц), 3,76-3,66 (8H, ушир. с), 2,36 (3H, с).

Ссылочный пример 73

3-Ацетилтио-1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-метоксикарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (1,57 г, 3,60 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 70(8)) в толуоле (80 мл) добавляли раствор 0,67М 3-метоксиазетидина (полученного, как описано в ссылочном примере 31(2))-триметилалюминия в толуоле (10,8 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали на масляной бане (60° C) в течение 30 минут. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (100 мл) и этилацетат (200 мл) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. В реакционную смесь добавляли этилацетат. Смесь распределяли между этилацетатом и водой.

Органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат, с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидина (1,50 г, выход 90%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,69 (1H, с), 7,63-7,59 (4H, м), 7,48-7,37 (6H, м), 4,73-4,76 (2H, м), 4,37-4,19 (3H, м), 4,10 (2H, дд, J=8,8, 6,6 Гц), 4,03 (2H, дд, J=8,8, 5,1 Гц), 4,02-3,98 (1H, м), 3,32 (3H, с), 1,06 (9H, с).

(2) 3-Гидрокси-1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидина (1,49 г, 3,23 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 72(1)) в безводном тетрагидрофуране (75 мл) добавляли раствор 1,0М фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (3,88 мл, 3,88 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали на ледяной бане в течение 1 часа. После контроля завершения реакции, смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат:метанол (95:5 → 9:1), с получением 3-гидрокси-1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидина (486 мг, выход 60%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,71 (1H, с), 4,81-4,66 (2H, м), 4,34 (2H, дд, J=9,5, 6,6 Гц), 4,39-4,20 (3H, м), 4,04-3,98 (1H, м), 3,99 (2H, дд, J=9,6, 4,4 Гц), 3,32 (3H, с), 2,45 (1H, д, J=6,6 Гц).

(3) 3-Метансульфонилокси-1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин

В раствор 3-гидрокси-1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидина (480 мг, 1,89 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 73(2)) в метиленхлориде (24 мл) добавляли метансульфонилхлорид (439 мл, 5,67 ммоль) и триэтиламин (795 мл, 5,67 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 10 минут и затем при комнатной температуре в течение 30 минут. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным хлоридом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. К остатку добавляли этилацетат и диизопропиловый эфир с получением твердого продукта и твердый продукт собирали фильтрацией, промывали диизопропиловым эфиром с получением 3-метансульфонилокси-1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидина (586 мг, выход 94%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,76 (1H, с), 5,41-5,34 (1H, м), 4,72-4,63 (1H, м), 4,29 (2H, дд, J=11,0, 4,4 Гц), 4,38-4,20 (5H, м), 4,03-3,97 (1H, м), 3,32 (3H, с), 3,10 (3H, с).

(4) 3-Ацетилтио-1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин

В раствор 3-метансульфонилокси-1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидина (580 мг, 1,75 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 73(3)) в диметилформамиде (30 мл) добавляли тиоацетат калия (1,20 г, 10,5 ммоль) при комнатной температуре, и смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 6 часов. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → этилацетат:метанол (97:3), с получением 3-ацетилтио-1-[4-(3-метоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидина (336 мг, выход 62%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,73 (1H, с), 4,72-4,65 (1H, м), 4,54 (2H, т, J=8,8 Гц), 4,43-4,19 (4H, м), 4,03-3,97 (1H, м), 4,01 (2H, дд, J=8,8, 5,1 Гц), 3,31 (3H, с), 2,35 (3H, с).

Ссылочный пример 74

3-Ацетилтио-1-[4-(3-трет-бутилдифенилсилилоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин

(1) 1-[4-(3-трет-бутилдифенилсилилоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]-3-гидроксиазетидин

В раствор 3-гидрокси-1-(4-метоксикарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (500 мг, 2,52 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 70(7)) в толуоле (25 мл) добавляли раствор 0,67М 3-трет-бутилдифенилсилилоксиазетидина (полученного, как описано в ссылочном примере 42(2))-триметилалюминия в толуоле (11,3 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота, и смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 15 минут. После контроля завершения реакции в реакционную смесь добавляли 10% водный раствор уксусной кислоты (20 мл) и этилацетат (50 мл) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 часов. В реакционную смесь добавляли этилацетат. Смесь распределяли между этилацетатом и водой. Органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента метиленхлорид:метанол (95:5 → 9:1), с получением 1-[4-(3-трет-бутилдифенилсилилоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]-3-гидроксиазетидина (1,24 г, выход 100%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,68 (1H, с), 7,61 (4H, дд, J=8,1, 1,5 Гц), 7,47-7,36 (6H, м), 4,81-4,74 (1H, м), 4,65-4,52 (2H, м), 4,40-4,36 (1H, м), 4,33 (2H, дд, J=9,5, 6,6 Гц), 4,18-4,11 (1H, м), 4,06-3,97 (1H, м), 3,98 (2H, дд, J=9,5, 5,1 Гц), 1,06 (9H, с).

(2) 1-[4-(3-Трет-бутилдифенилсилилоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]-3-метансульфонилоксиазетидин

В раствор 1-[4-(3-трет-бутилдифенилсилилоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]-3-гидроксиазетидина (1,68 г, 3,53 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 74(1)) в метиленхлориде (84 мл) добавляли метансульфонилхлорид (820 мкл, 10,6 ммоль) и триэтиламин (1,49 мл, 10,6 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 10 минут и затем при комнатной температуре в течение 0,5 часа. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента метиленхлорид:этилацетат (1:1), с получением 1-[4-(3-трет-бутилдифенилсилилоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]-3-метансульфонилоксиазетидина (1,56 г, выход 80%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,72 (1H, с), 7,61 (4H, д, J=6,8 Гц), 7,45 (2H, т, J=6,8 Гц), 7,39 (4H, т, J=6,8 Гц), 5,40-5,34 (1H, м), 4,64-4,59 (1H, м), 4,59-4,52 (1H, м), 4,45 (2H, дд, J=10,7, 5,9 Гц), 4,39-4,32 (1H, м), 4,28 (2H, дд, J=10,7, 4,9 Гц), 4,18-4,12 (1H, м), 4,05-4,00 (1H, м), 3,10 (3H, с), 1,07 (9H, с).

(3) 3-Ацетилтио-1-[4-(3-трет-бутилдифенилсилилоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин

В раствор 1-[4-(3-трет-бутилдифенилсилилоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]-3-метансульфонилоксиазетидина (1,56 г, 2,81 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 74(2)) в диметилформамиде (80 мл) добавляли тиоацетат калия (1,92 г, 16,8 ммоль) при комнатной температуре, и смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 7,5 часов. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (2:1 → 1:1), с получением 3-ацетилтио-1-[4-(3-трет-бутилдифенилсилилоксиазетидин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидина (863 мг, выход 57%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 7,69 (1H, с), 7,63-7,60 (4H, м), 7,47-7,36 (6H, м), 4,64-4,54 (2H, м), 4,53 (2H, т, J=8,8 Гц), 4,43-4,32 (2H, м), 4,18-4,13 (1H, м), 4,06-4,00 (1H, м), 4,00 (2H, дд, J=8,8, 5,9 Гц), 2,36 (3H, с), 1,06 (9H, с).

Ссылочный пример 75

3-Ацетилтио-1-{4-[3-(п-нитробензилоксикарбониламино)азетидин-1-карбонил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[3-(п-нитробензилоксикарбониламино)азетидин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор гидрохлорида 3-(п-нитробензилоксикарбониламино)азетидина (1,39 г, 4,83 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 57(4)) и 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (1,70 г, 4,02 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 70(11)) в диметилформамиде (85 мл) добавляли диэтилфосфорилцианид (801 мкл, 4,83 ммоль) и триэтиламин (1,70 мл, 12,1 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:2) → этилацетат, с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[3-(п-нитробензилоксикарбонил-амино)азетидин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (596 мг, выход 23%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,71 (1H, с), 7,61 (4H, д, J=8,8 Гц), 7,53-7,49 (2H, м), 7,47-7,38 (6H, м), 5,30-5,26 (1H, м), 5,21 (2H, с), 4,89-4,80 (1H, м), 4,72-4,66 (1H, м), 4,59-4,51 (1H, м), 4,51-4,42 (1H, м), 4,37-4,30 (1H, м), 4,12-4,06 (2H, м), 4,02 (2H, дд, J=8,8, 4,9 Гц), 3,97-3,90 (1H, м), 1,06 (9H, с).

(2) 3-Гидрокси-1-{4-[3-(п-нитробензилоксикарбониламино)азетидин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил]азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[3-(п-нитробензилоксикарбониламино)азетидин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (640 мг, 0,976 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 75(1)) в безводном тетрагидрофуране (32 мл) добавляли раствор уксусной кислоты (67 мкл, 1,17 ммоль) и 1,0М фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (1,17 мл, 1,17 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали на ледяной бане в течение 1,5 часа. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента метиленхлорид:метанол (95:5 → 9:1), с получением 3-гидрокси-1-{4-[3-(п-нитробензилоксикарбониламино)азетидин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (360 мг, выход 88%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,73 (1H, с), 7,51 (2H, д, J=8,8 Гц), 5,46-5,40 (1H, м), 5,21 (2H, с), 4,89-4,74 (2H, м), 4,60-4,40 (2H, м), 4,39-4,31 (1H, м), 4,33 (2H, дд, J=9,5, 6,6 Гц), 3,98 (2H, дд, J=9,5, 5,1 Гц), 3,96-3,90 (1H, м).

(3) 3-Метансульфонилокси-1-{4-[3-(п-нитробензилокси-карбониламино)азетидин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-гидрокси-1-{4-[3-(п-нитробензилоксикарбонил-амино)азетидин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (360 мг, 0,863 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 75(2)) в метиленхлориде (18 мл) добавляли метансульфонилхлорид (200 мкл, 2,59 ммоль) и триэтиламин (363 мкл, 2,59 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 10 минут и затем при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента метиленхлорид → метиленхлорид:метанол (95:5), с получением 3-метансульфонилокси-1-{4-[3-(п-нитробензилокси-карбониламино)азетидин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (390 мг, выход 91%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,23 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,77 (1H, с), 7,51 (2H, д, J=8,8 Гц), 5,40-5,34 (1H, м), 5,11-5,27 (1H, м), 5,21 (2H, с), 4,90-4,81 (1H, м), 4,60-4,53 (1H, м), 4,45 (2H, дд, J=10,3, 6,6 Гц), 4,39-4,30 (1H, м), 4,27 (2H, дд, J=10,3, 4,4 Гц), 3,99-3,92 (1H, м), 3,10 (3H, с).

(4) 3-Ацетилтио-1-{4-[3-(п-нитробензилоксикарбониламино)азетидин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-метансульфонилокси-1-{4-[3-(п-нитробензил-оксикарбониламино)азетидин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (390 мг, 0,787 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 75(3)) в диметилформамиде (20 мл) добавляли тиоацетат калия (539 мг, 4,72 ммоль) при комнатной температуре и смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 10,5 часов. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:3) → этилацетат, с получением 3-ацетилтио-1-{4-[3-(п-нитробензилоксикарбониламино)азетидин-1-карбонил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидина (195 мг, выход 52%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,24 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,75 (1H, с), 7,51 (2H, д, J=8,8 Гц), 5,16-5,10 (1H, ушир. д, J=5,9 Гц), 5,21 (2H, с), 4,89-4,80 (1H, м), 4,60-4,10 (4H, м), 4,53 (2H, т, J=8,8 Гц), 3,99 (2H, дд, J=9,5, 5,9 Гц), 3,98-3,91 (1H, м), 2,36 (3H, с).

Ссылочный пример 76

3-Ацетилтио-1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидин

В раствор (3S)-3-амино-1-п-нитробензилоксикарбонил-пирролидина (905 мг, 3,41 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 52(4)) и 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (1,20 г, 2,84 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 70(11)) в диметилформамиде (36 мл) добавляли диэтилфосфорилцианид (556 мкл, 3,41 ммоль) и триэтиламин (478 мкл, 3,41 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:2 → 1:3), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилокси-карбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидина (936 мг, выход 49%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, м), 7,72 (1H, с), 7,63-7,58 (4H, м), 7,53 (2H, м), 7,48-7,37 (6H, м), 6,85-6,80 (1H, ушир. т, J=8,1 Гц), 5,24 (2H, д, J=8,1 Гц), 4,75-4,67 (1H, м), 4,65-4,58 (1H, м), 4,16-4,09 (2H, м), 4,06 (2H, дд, J=8,8, 5,1 Гц), 3,83-3,75 (1H, м), 3,64-3,46 (2H, м), 3,38 (1H, дд, J=11,0, 4,4 Гц), 2,30-2,20 (1H, м), 2,04-1,90 (1H, м), 1,06 (9H, с).

(2) 3-Гидрокси-1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)-пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидина (1,10 г, 1,64 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 76(1)) в безводном тетрагидрофуране (55 мл) добавляли раствор уксусной кислоты (113 мкл, 1,97 ммоль) и 1,0М фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (1,97 мл, 1,97 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали на ледяной бане в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → этилацетат:метанол (95:5), с получением 3-гидрокси-1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидина (687 мг, выход 97%) в виде белого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, м), 7,75 (1H, с), 7,52 (2H, м), 6,89-6,82 (1H, м), 5,27-5,20 (2H, м), 4,84-4,77 (1H, м), 4,66-4,59 (1H, м), 4,36 (2H, дд, J=8,8, 7,3 Гц), 4,01 (2H, дд, J=8,8, 5,2 Гц), 3,82-3,74 (1H, м), 3,67-3,52 (3H, м), 3,45-3,39 (1H, м), 2,30-2,20 (1H, м), 2,03-1,93 (1H, м).

(3) 3-Метансульфонилокси-1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилокси-карбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-гидрокси-1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилокси-карбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидина (680 мг, 1,58 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 76(2)) в метиленхлориде (34 мл) добавляли метансульфонилхлорид (366 мкл, 4,73 ммоль) и триэтиламин (663 мкл, 4,73 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 10 минут и при комнатной температуре в течение 2 часов. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → этилацетат:метанол (96:4), с получением 3-метансульфонилокси-1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилокси-карбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидина (760 мг, выход 95%) в виде светло-желтого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, м), 7,78 (1H, с), 7,52 (2H, м), 6,85-6,80 (1H, м), 5,42-5,37 (1H, м), 5,24 (2H, д, J=8,1 Гц), 4,66-4,58 (1H, м), 4,49 (2H, дд, J=10,3, 6,6 Гц), 4,31 (2H, дд, J=10,3, 4,4 Гц), 3,82-3,74 (1H, м), 3,64-3,75 (2H, м), 3,44-3,38 (1H, м), 3,11 (3H, с), 2,30-2,20 (1H, м), 2,04-1,96 (1H, м).

(4) 3-Ацетилтио-1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-метансульфонилокси-1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидина (760 мг, 1,49 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 76(3)) в диметилформамиде (38 мл) добавляли тиоацетат калия (1,02 г, 8,95 ммоль) при комнатной температуре и перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 10,5 часов. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:6) → этилацетат, с получением 3-ацетилтио-1-{4-[(3S)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидина (533 мг, выход 73%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, м), 7,76 (1H, с), 7,52 (2H, м), 6,87-6,80 (1H, ушир. с), 5,24 (2H, д, J=7,3 Гц), 4,66-4,58 (1H, м), 4,56 (2H, т, J=8,8 Гц), 4,44-4,36 (1H, м), 4,03 (2H, дд, J=8,8, 5,9 Гц), 3,79 (1H, дт, J=11,0, 6,6 Гц), 3,65-3,51 (2H, м), 3,40 (1H, дд, J=11,0, 4,4 Гц), 2,36 (3H, с), 2,32-2,20 (1H, м), 2,23-1,91 (1H, м).

Ссылочный пример 77

3-Ацетилтио-1-{4-[(3R)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)-пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидин

(1) 3-Трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(3R)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидин

В раствор (3R)-3-амино-1-п-нитробензилоксикарбонил-пирролидина (798 мг, 3,01 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 53(5)) и 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-(4-карбоксил-1,3-оксазол-2-ил)азетидина (1,06 г, 2,51 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 70(11)) в диметилформамиде (50 мл) добавляли диэтилфосфорилцианид (464 мкл, 3,01 ммоль) и триэтиламин (422 мкл, 3,01 ммоль) на ледяной бане в атмосфере азота, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:2 → 1:3), с получением 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(3R)-1-(п-нитробензилокси-карбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидина (813 мг, выход 48%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, м), 7,72 (1H, с) 7,63-7,59 (4H, м), 7,53(2H, м), 7,48-7,38 (6H, м), 6,86-6,60 (1H, м), 5,24 (2H, д, J=8,1 Гц), 4,77-4,68 (1H, м), 4,64-4,58 (1H, м), 4,15-4,09 (2H, м), 4,05 (2H, дд, J=8,8, 5,1 Гц), 3,82-3,75 (1H, м), 3,64-3,49 (2H, м), 3,38 (1H, дд, J=11,0, 5,1 Гц), 2,30-2,20 (1H, м), 2,06-1,90 (1H, м), 1,06 (9H, с).

(2) 3-Гидрокси-1-{4-[(3R)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-трет-бутилдифенилсилилокси-1-{4-[(3R)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидина (810 мг, 1,21 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 77(1)) в безводном тетрагидрофуране (40 мл) добавляли раствор уксусной кислоты (83 мкл, 1,45 ммоль) и 1,0М фторида тетра-н-бутиламмония в тетрагидрофуране (1,45 мл, 1,45 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали на ледяной бане в течение ночи. После контроля завершения реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → этилацетат:метанол (95:5), с получением 3-гидрокси-1-{4-[(3R)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидина (507 мг, выход 97%) в виде светло-желтого масла.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, м), 7,75 (1H, с), 7,52 (2H, м), 6,89-6,83 (1H, ушир. с), 5,28-5,20 (2H, м), 4,84-4,76 (1H, м), 4,66-4,58 (1H, м), 4,36 (2H, дд, J=8,8, 6,6 Гц), 4,01 (2H, дд, J=8,8, 4,4 Гц), 3,82-3,74 (1H, м), 3,64-3,51 (2H, м), 3,44-3,37 (1H, м), 2,32-2,20 (1H, м), 2,08-1,92 (1H, м).

(3) 3-Метансульфонилокси-1-{4-[(3R)-1-(п-нитробензилокси-карбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-гидрокси-1-{4-[(3R)-1-(п-нитробензилокси-карбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидина (500 мг, 1,16 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 77(2)) в метиленхлориде (25 мл) добавляли метансульфонилхлорид (269 мкл, 3,48 ммоль) и триэтиламин (488 мкл, 3,48 ммоль) на ледяной бане, и смесь перемешивали в течение 10 минут и затем при комнатной температуре в течение 3 часов. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат → этилацетат:метанол (96:4), с получением 3-метансульфонилокси-1-{4-[(3R)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидина (546 мг, выход 92%) в виде светло-желтого твердого вещества.

Масс-спектр (FAB⁺): m/z: 510 [M+H]⁺

(4) 3-Ацетилтио-1-{4-[(3R)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидин

В раствор 3-метансульфонилокси-1-{4-[(3R)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидина (540 мг, 1,06 ммоль) (полученного, как описано в ссылочном примере 77(3)) в диметилформамиде (27 мл) добавляли тиоацетат калия (726 мг, 6,36 ммоль) при комнатной температуре, и смесь перемешивали на масляной бане (80° C) в течение 9 часов. После контроля завершения реакции, смесь распределяли между этилацетатом и 10% водным раствором хлорида натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента н-гексан:этилацетат (1:6) → этилацетат, с получением 3-ацетилтио-1-{4-[(3R)-1-(п-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-3-илкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидина (281 мг, выход 54%) в виде светло-коричневого твердого вещества.

 ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ (м.д.) 8,22 (2H, м), 7,76 (1H, с), 7,52 (2H, м), 6,86-6,80 (1H, м), 5,23 (2H, д, J=7,3 Гц), 4,64-4,58 (1H, м), 4,56 (2H, т, J=8,8 Гц), 4,44-3,86 (1H, м), 4,03 (2H, дд, J=8,8, 5,9 Гц), 3,79 (1H, дд, J=11,0, 6,6 Гц), 3,65-3,52 (2H, м), 3,40 (1H, дд, J=11,0, 4,4 Гц), 2,12 (3H, с), 2,32-2,20 (1H, м), 2,23-1,92 (1H, м).

Экспериментальный пример 1

Антибактериальная активность in vitro

Для оценки антибактериальной активности данных соединений, с помощью метода разведений на агарных чашках опредяляли минимальные концентрации (мкг/мл) соединений при которых происходит ингибирование роста различных патогенных бактерий. Результаты представлены на таблице 6. В этой таблице используемыми бактериями A, B и C были:

A: Staphylococcus aureus

B: Streptococcus pneumoniae

C:Haemophilis influenzae strain 9787 (штамм, продуцирующий β -лактамазу)

[Таблица 6]СоединенияМинимальная концентрация для ингибирования роста (мкг/мл) применявшейся бактерии ABCПример30,050,200,10Пример40,050,200,20Пример50,050,200,20Пример60,050,200,20Пример190,050,200,10Пример220,050,200,10Пример24≤ 0,0120,0250,05Пример250,0250,100,39Пример560,050,200,20Пример570,0250,200,20Пример58≤ 0,0120,200,20Пример59≤ 0,0120,200,20Пример600,0250,390,39Пример610,0250,200,39Пример67≤ 0,0120,390,20Пример69≤ 0,012≤ 0,0120,78Пример70≤ 0,012≤ 0,0120,78Пример71≤ 0,012≤ 0,0120,39Пример72≤ 0,0120,0250,20Пример760,050,200,39Пример800,0250,200,39Пример81≤ 0,0120,200,39

Эти результаты показывают, что соединения по настоящему изобретению обладают сильной антибактериальной активностью.

Экспериментальный пример 2

Фармакокинетические свойства

Соединения по настоящему изобретению (20 мг/кг) подкожно вводили мышам (n=3, ddY, самцы, приобретены от SLC Japan). Концентрацию соединения в плазме определяли биоанализом через 5, 15 и 30 минут, и 1, 1,5 и 2 часа после введения. Полученные фармакокинетические параметры представлены в таблице 7. В таблице C_max, T_1/2 и AUC_all обозначают максимальную концетрацию в плазме, время полувыведения и площадь под кривой концентрация в плазме соединения-время, соответственно.

[Таблица 7]СоединениеC_max
(мкг/мл)T_1/2
(час)AUC_all
(мкг·час/мл)Пример3127,170,2583,90Пример4157,381,02165,19Пример1156,560,3340,38Пример5748,150,3845,31Пример5863,880,4147,38Пример6046,140,3027,88Пример6740,200,4534,13Пример7652,800,1927,88

Экспериментальный пример 3

Антибактериальная активность in vivo

Самцам мышей ddY в возрасте 4 недели (приобретенные от SLC Japan) внутрибрюшинно прививали S. pneumoniae 9605 (PRSP) в объеме 0,2 мл (с содержанием 5% муцина, 1-5 × 10³ колониеобразующих единиц (кое)/мышь). Сразу после введения инъекции мышам, им однократно подкожно вводили исследуемое соединение в объеме 0,1 мл. Использовалось семь мышей в каждой группе. Для эксперимента использовался раствор исследуемого соединения в 2-кратном разведении. Значения ED₅₀ соединения подсчитывали с помощью способа Probit от возрастных норм через 7 дней после введения. Результаты суммированы в таблице 8.

[Таблица 8]СоединенияED₅₀
(мг/кг)Пример570,855Пример580,899Пример591,08Пример601,41Пример611,79Пример671,60Пример760,534

Пример получения композиции 1 (средство, вводимое инъекцией)

500 мг соединения примера 3 растворяли в 5 мл дистиллированной воды для инъекации и после фильтрации раствора через стерилизационный фильтр сушили лиофилизацией с получением лиофилизованного препарата для инъекции.

Препаративный пример 2 (капсулы)Соединение примера 2450 мгЛактоза128 мгКукурузный крахмал70 мгСтеарат магния2 мг 250 мг

Порошки в вышеуказанной рецептуре смешивали и после того как смесь пропускали через сито 60 меш, 3 желатиновые капсулы весом 250 мг заполняли порошками с получением капсул.

Препаративный пример 3 (таблетки)Соединение примера 2450 мгЛактоза126 мгКукурузный крахмал23 мгСтеарат магния1 мг 200 мг

Порошки в вышеуказанной рецептуре смешивали и после того как смесь подвергали влажной грануляции, используя кукурузный крахмал, и сушили с получением таблетки весом 200 мг. Эту таблетку можно при необходимости покрыть сахарной пленкой.

(Эффективность изобретения)

Соединения 1-метилкарбапенема формулы (I) по настоящему изобретению и их фармакологически приемлемые соли обладают прекрасной антибактериальной активностью, стабильно действуют в отношении дегидропептидазы I и β -лактамазы, и имеют высокий коэффициент выведения с мочой. Кроме того, так как они оказывают низкую токсичность на почки, данные соединения эффективны в качестве фармацевтических средств, особенно в качестве антибактериальных агентов.

С целью сравнения активности соединения по примеру 29 настоящей заявки и соответствующего соединения по ЕР 632039 был проведен сравнительный эксперимент. Соединение по примеру 29 представляет собой сложноэфирное производное изопропоксикарбонилоксиэтилкарбоксилата соединения формулы (I) по п.1, где n=l, X=S, R¹=CONR⁴R⁵, R⁴=R⁵=H. Соответствующее соединение по ЕР 632039 отличается только природой гетероциклического кольца (насыщенное тиазолиновое кольцо вместо ненасыщенного тиазольного кольца):

Метод исследования (пероральная абсорбция у мышей)

В течение 0-6 часов и 6-24 часов после подкожного (водный раствор) или перорального (50%-ный раствор полиэтиленгликоля) введения исследуемого соединения в дозе 50 мг/кг самцам мышей ddY (4-недельные, Japan SLC, Inc) собирали образцы мочи. После измерения объема собранной мочи определяли концентрацию исследуемого соединения методом микробиологического анализа, используя Bacillus subtilis

АТСС6633 в качестве тестового организма. Выделение мочи рассчитывали путем умножения концентрации по объему. Биодоступность после перорального введения исследуемого соединения получали в виде соотношения выделения мочи к выделению мочи после подкожного введения.

Результаты

Таблица 9 Соотношение биодоступности (%)Соединение по примеру 2949,3Соединение по ЕР 63203937,6

Соединения, представленные ниже в таблице, были исследованы на проявление антибактериальной активности in vivo. Метод исследования был тот же, что и по примеру исследования 1 заявки.

Результаты:

Таблица 10СоединенияМинимальная концентрация (мкг/мл) для ингибирования роста используемых бактерийАВС≤ 0,0120,0250,390,200,200,20≤ <0,012≤ 0,0120,200,0250,200,390,100,390,39

Соединения по примерам 5, 6, 44, 45, 61 и 66, были исследованы на проявление антибактериальной активности in vivo. Метод исследования был тот же, что и по примеру исследования 3 заявки, за исключением того, что мышам подкожно были введены исследуемые соединения сразу и спустя 4 часа после того, как мыши были трансфицированы.

Результаты:

Таблица IIСоединенияED(мкг/мл)Пример 66 (R⁴=H, R⁵=CH(CH(CH₃)₂)CH₂NH₂)0,434Пример 61 (R⁴=H, R⁵=CH₂CH₂NH₂)0,463Пример 44 (R⁴=H, R⁵=NHCH (CH²OH)₂)0,968Пример 45 (R⁴=СН₃, R⁵=CH₂CH₂OH)0,884Пример 5 (R⁴=H, R⁵=СН₃)1,48Пример 6 (R⁴=R⁵=СН₃)2,43

Изобретение относится к соединениям 1-метилкарбапенема, которые обладают прекрасной антибактериальной активностью, к их фармакологически приемлемым сложноэфирным производным и солям, к фармацевтическим композициям, обладающим антибактериальными свойствами, которые содержат их в качестве активного ингредиента и к способу профилактики или лечения бактериальных инфекций. Указанные соединения представлены общей формулой (I):

(I)

где R¹ представляет собой группу формулы COOR³; группу формулы CONR⁴R⁵; цианогруппу; группу формулы CH₂OH или группу формулы CH₂NR⁷R⁸, где значения R³, R⁴, R⁵, R⁷ и R⁸ определены в формуле изобретения; n равно 1, 2 или 3; и X представляет собой атом серы или атом кислорода. 4 н. и 26 з. п. ф-лы, 11 табл.

1. Соединение 1-метилкарбапенема, представленное формулой (I)

где R¹ представляет собой

(1) группу, представленную формулой COOR³ [где R³ представляет собой атом водорода или C₁-C₆ алкильную группу],

(2) группу, представленную формулой CONR⁴R⁵ [где R⁴ и R⁵ могут быть одинаковыми или различными и каждый представляет собой атом водорода, C₁-C₆ алкильную группу (которая может быть замещена одной или двумя группами, которые могут быть одинаковыми или различными и выбраны из группы заместителей А, описанной ниже), С₃-С₆ циклоалкильную группу, 3-6-членную азотсодержащую гетероциклическую группу или С₆-С₁₀ арильную группу (которая может быть замещена одной или двумя группами, которые могут быть одинаковыми или различными и выбраны из группы заместителей В, описанной ниже), или R⁴ и R⁵ вместе с атомом азота, к которому они присоединены, представляют собой 3-6-членный гетероцикл, содержащий азот (который может быть замещен одной или двумя группами, которые могут быть одинаковыми или различными и выбраны из группы заместителей В, описанной ниже)],

(3) цианогруппу,

(4) группу, представленную формулой СН₂ОН,

(5) группу, представленную формулой CH²NR⁷R⁸ [где R⁷ представляет собой атом водорода, R⁸ представляет собой атом водорода, (С₆-С₁₀ арил)карбонильную группу, 5- или 6-членную ароматическую гетероциклилкарбонильную группу, содержащую кислород или серу, C₁-С₆ алкилсульфонильную группу или C₆-С₁₀ арилсульфонильную группу, или R⁷ и R⁸, вместе с атомом азота, к которому они присоединены, представляют собой сукцинимидную группу (которая может быть конденсирована с фенильной группой)],

n равно 1, 2 или 3,

X представляет собой атом серы или атом кислорода,

группа заместителей А включает в себя гидроксильную группу, аминогруппу (которая может быть замещена одной или двумя C₁-С₆ алкильными группами), карбамоильную группу (аминогруппа которой может быть замещена одной или двумя C₁-С₆ алкильными группами), карбоксильную группу и цианогруппу и

группа заместителей В включает в себя амино-С₁-С₄-алкильную группу (аминогруппа которой может быть замещена одной или двумя C₁-С₆ алкильными группами), карбамоильную группу (аминогруппа которой может быть замещена одной или двумя C₁-С₆ алкильными группами), гидроксильную группу, аминогруппу (которая может быть замещена одной или двумя C₁-С₆ алкильными группами), C₁-С₆ алкоксигруппу и C₁-С₆ алкильную группу],

или его фармацевтически приемлемую соль или сложноэфирное производное.

(1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-[1-(4-карбамоил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-[1-(4-гидроксиметил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-[1-(4-гидроксиметил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-[1-(4-циано-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-[1-(4-циано-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-[1-(4-морфолинокарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-[1-(4-морфолинокарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-[1-(4-азетидинокарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-[1-(4-азетидинокарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(4-аминоазетидино)карбонил-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(4-аминоазетидино)карбонил-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(4-гидроксиазетидино)карбонил-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(4-гидроксиазетидино)карбонил-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-[1-(4-тиоморфолинокарбонил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-[1-(4-тиоморфолинокарбонил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(пиперидин-4-илкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(пиперидин-4-илкарбамоил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(азетидин-3-илкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(азетидин-3-илкарбамоил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3S)-пирролидин-3-илкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3S)-пирролидин-3-илкарбамоил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3R)-пирролидин-3-илкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3R)-пирролидин-3-илкарбамоил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(пиперазин-1-карбонил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(пиперазин-1-карбонил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-аминоэтилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-аминоэтилкарбамоил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-аминометил-2-метил-пропилкарбамоил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-аминометил-2-метил-пропилкарбамоил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-аминоэтил)-N-изопропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-l-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-(1-{[4-[N-(2-аминоэтил)-N-изопропилкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-гидроксиэтил)-N-изопропилкарбамоил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-гидроксиэтил)-N-изопропилкарбамоил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-[1-(4-аминометил-1,3-тиазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-[1-(4-аминометил-1,3-оксазол-2-ил)азетидин-3-ил]тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(бензоиламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(бензоиламинометил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(бензолсульфониламинометил)-1,3-тиазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(бензолсульфониламинометил)-1,3-оксазол-2-ил]азетидин-3-ил}тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(тиофен-2-карбониламино)метил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(тиофен-2-карбониламино)метил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота,

(1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(фуран-2-карбониламино)метил]-1,3-тиазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота и

(1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(фуран-2-карбониламино)метил]-1,3-оксазол-2-ил}азетидин-3-ил)тио-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-1-метилкарбапен-2-ем-3-карбоновая кислота;

или его фармацевтически приемлемая соль или сложноэфирное производное.