СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ СТЕПЕНИ ЭНДОТОКСИКОЗА У КОРОВ С ОСТРЫМ ГНОЙНО-КАТАРАЛЬНЫМ ЭНДОМЕТРИТОМ Российский патент 2005 года по МПК G01N33/68 

Предлагаемое изобретение относится к области ветеринарии и может быть использовано для диагностики степени тяжести эндотоксикоза организма.

Известен способ диагностики степени эндотоксикоза, включающий измерение степени воздействия исследуемой сыворотки крови на время фильтрации эритроцитов здоровых доноров. Токсичность определяют по увеличению времени фильтрации эритроцитов донора после инкубации с сывороткой больного организма [А.С. СССР №1475333, кл. G 01 N 33/48].

Одним из общепринятых способов диагностики эндотоксикоза является определение связывающей функции сывороточных альбуминов [А.С. СССР №1409931, кл., G 01 N 33/48].

Barnhill Stephen Datall at al для диагностики интоксикации организма предлагают диагностический индекс, полученный при обработке лабораторных данных [WO 9612187 кл. G 01 N 33/53].

Для повышения чувствительности оценки степени эндотоксикоза известно использование данных о содержании в плазме крови молекул средней массы и эффективной концентрации альбуминов [В.Б.Гаврилов. Оценка интоксикации организма по нарушению баланса между накоплением и связыванием токсинов в плазме крови / В.Б.Гаврилов, М.М.Бидула, Д.А.Фурманчук, С.В.Конев, О.В.Алейникова // Клин. лаб. диагн. - 1999. - №2 - С.13-17]. При невозможности определения эффективной концентрации альбуминов авторы предлагают определять общую концентрацию альбуминов и рассчитывать критерии интоксикации (КИ) по формулам:

КИ₁=100· Д₂₅₄/ОКА)

КИ₂=1000· Д₂₈₀/ОКА), где

Д₂₅₄, Д₂₈₀ - содержание молекул средней массы, определяемое по показателям оптической плотности плазмы при длинах волн 254 и 280 нм (усл. ед.);

ОКА - общая концентрация альбуминов плазмы крови (г/л).

Недостатком способа диагностики является его ограниченность в связи с использованием лишь дисбаланса между накоплением и связыванием токсинов альбуминами плазмы крови без учета сорбционной функции эритроцитов.

Задачей изобретения является повышение эффективности оценки степени эндотоксикоза организма.

Поставленная задача решается тем, что в способе диагностики степени эндотоксикоза путем исследования плазмы крови на содержание веществ низкой и средней молекулярной массы (ВНСММ) и общей концентрации альбуминов дополнительно определяют в эритроцитах содержание ВНСММ, рассчитывают интегральный индекс (ИИ) на основе полученных показателей по формуле:

ИИ=100· S_{238-298 (плазма)}/S_{238-298 (эритроциты)}·_{ОКА, где}

S_{238-298(плазмы)}, S_{238-298(эритроциты)} - содержание (ВНСММ) плазмы и эритроцитов, определяемое по площади фигур, ограниченных спектральными кривыми в диапазоне длин волн 238-298 нм и осью абсцисс (усл. ед.²);

ОКА - общая концентрация альбуминов плазмы крови (г/л),

и при его значении от 2,1-3,0 диагностируют первую степень эндотоксикоза, от 3,1-4,5 - вторую, от 4,6 до 6,0 - третью степень, свыше 6,0 - четвертую степень эндотоксикоза, при норме - от 0,5 до 2,0.

В связи с этим разработан интегральный индекс для определения степени интоксикации у коров с острым гнойно-катаральным эндометритом на основе анализа динамики следующих показателей: альбумины, ВНСММ плазмы и ВНСММ эритроцитов крови. Общая концентрация альбуминов определялась с помощью красителя бромкрезолового зеленого (“Lachema” Чехия), содержание ВНСММ - по методу М.Я.Малаховой [Малахова М.Я. Метод регистрации эндогенной интоксикации. - Пособие для врачей. - СбП: Издательство Санкт-Петербургской медицинской академии последипломного образования. - 1995. – 34 с.]. По степени развития интоксикации животные были разделены на 3 группы по тяжести состояния. В 1-ю и 2-ю группы вошли коровы в компенсированном состоянии без угрозы и с угрозой развития сепсиса соответственно. Третью группу составили животные с развившимся сепсисом и недостаточностью какой-либо одной или нескольких функциональных систем (сердечная недостаточность, дыхательная недостаточность, острая почечная недостаточность). В контрольную группу вошли коровы 2-3-х лет красной степной породы с аналогичными показателями массы и молочной продуктивности, у которых значения рутинных биохимических показателей находились в пределах физиологической нормы. Математическая обработка результатов производилась с помощью критерия Стьюдента, сравнительный анализ выборок - с помощью критерия Фишера.

Профили спектрограмм плазмы и эритроцитов крови животных всех изучаемых групп имеют приблизительно один вид. При длинах волн 238-246 нм наблюдаются нулевые значения оптической плотности. Начиная с 250 нм, спектрограммы имеют равномерно восходящие значения оптической плотности с максимумами поглощения при длинах волн 274±8 нм и 286±4 нм для плазмы и эритроцитов крови соответственно (см. чертеж).

Значения средних высот пиков спектрограмм плазмы и эритроцитов крови здоровых коров соответственно равны 0,144 и 0,383 усл. ед.

О содержании ВНСММ в биологических жидкостях позволяет судить площадь фигуры, ограниченной спектральной кривой и осью абсцисс. Этот показатель для вышеуказанной группы животных имеет следующие средние значения: для плазмы крови - 5,5±0,7, а для эритроцитов - 15,1±1,6 усл. ед.²

В начальной стадии эндотоксикоза на спектрограмме коров с гнойно-катаральным эндометритом наблюдается увеличение сорбционной емкости эритроцитов, т.к. эритроцит за счет белка гликофорина адсорбирует на своей поверхности вещества разных классов, в том числе и средней молекулярной массы. В то же время концентрация ВНСММ в плазме крови также незначительно повышается. Значения площадей спектрограмм плазмы и эритроцитов крови соответственно равны 11,5±1,2 и 20,3±2,4 усл. ед.² На спектрограммах, соответствующих второй стадии эндотоксикоза, наблюдается умеренное увеличение содержания ВНСММ как в плазме, так и на эритроцитах крови. Значения площадей спектрограмм плазмы и эритроцитов крови находятся в пределах 18,0±1,8 и 26,7±2,7 усл. ед.² соответственно. На третьей стадии происходит значительное повышение концентрации ВНСММ в плазме крови, в то время как на эритроцитах она практически остается неизменной. Значения площадей колеблются в пределах 25,3±2,6 и 27,8±2,6 усл. ед.² для плазмы и эритроцитов крови соответственно.

Содержание альбуминов плазмы крови здоровых коров в период производства молока равно 31,4±2,8 г/л. По мере развития интоксикации значения этого показателя снижаются.

Интегральный индекс эндотоксикоза у коров с гнойно-катаральными эндометритами имеет следующий вид:

ИИ=100· S_{238-298 (плазма)}/S_{238-298 (эритроциты)}·_{ОКА, где}

S_{238-298(плазмы)}, S_{238-298(эритроциты)} - содержание ВНСММ плазмы и эритроцитов, определяемое по площади фигур, ограниченных спектральными кривыми в диапазоне длин волн 238-298 нм и осью абсцисс (усл. ед²);

ОКА - общая концентрация альбуминов плазмы крови (г/л).

Способ осуществляют следующим образом: производят расчет интегрального индекса по вышеприведенной формуле. При его значении от 2,1 до 3,0 диагностируют первую степень эндотоксикоза, от 3,1 до 4,5 - вторую, от 4,6 до 6,0 - третью степень, свыше 6,0 - четвертую степень эндотоксикоза. Значение индекса в норме - от 0,5 до 2,0.

Предлагаемый индекс проанализирован в течение 7 суток для двух групп животных с первой и второй степенью эндотоксикоза. Данные приведены в таблице.

Таблица
Значения интегрального индекса крови коров с первой и второй степенью эндотоксикозаПериод наблюдения, суткиЗначения интегрального индексаПервая степень эндотоксикозаВторая степень эндотоксикоза12,7±0,33,8±0,422,6±0,33,6±0,432,5±0,33,5±0,342,4±0,23,2±0,352,1±0,22,8±0,361,9±0,22,5±0,371,8±0,22,3±0,3

В этих группах животных значения индекса снижаются, причем в группе коров с первой степенью эндотоксикоза возвращаются к норме.

Пример 1. Больная корова, возраст 5 лет, красная степная порода. Диагноз: острый послеродовой катарально-гнойный эндометрит. Животное было угнетено. Отмечалось ухудшение общего состояния, снижение аппетита, уменьшение молочной продуктивности. Наблюдалась субфебрильная лихорадка постоянного типа, незначительное увеличение пульса и дыхания, повышенная температура тела. Во время лежания, акта дефекации, мочеиспускания, а также при ректальном массаже матки из канала шейки матки выделялся густой мутный экссудат сероватого цвета с примесью гноя. При ректальном исследовании отмечалось увеличение матки, асимметрия - правый рог намного больше левого. По данным клинико-лабораторного исследования - эндогенная интоксикация: количество гемоглобина - 85 г/л; эритроцитов - 5,1· 10¹² /л; лейкоцитов - 6,93· 10⁹ /л; содержание альбуминов - 22,3 г/л, содержание ВНСММ плазмы - 11,9 усл. ед²; содержание ВНСММ эритроцитов - 20,1 усл. ед². Значение ИИ - 2,6.

По совокупности клинических данных - состояние средней тяжести, по значению ИИ - первая степень эндотоксикоза. Комплексное лечение было направлено на поднятие общего тонуса организма, повышение сократительной способности матки, удаление экссудата из ее полости, создание в матке антисептических условий. Проводимая терапия привела к полному выздоровлению на 7-е сутки, значение ИИ стало равно 1,9.

Пример 2. Больная корова, возраст 4 года, красная степная порода. Диагноз: острый послеродовой катарально-гнойный эндометрит. Животное было угнетено, стонало, изгибало спину. Отмечалось учащенное дыхание, повышенная температура, лихорадка, уменьшение секреции молока, из наружных половых органов обильно выделялся слизисто-гнойный экссудат тягучей консистенции зловонного запаха мутно-желтоватого и коричневого цвета. Ректальным исследованием было выявлено увеличение обоих рогов матки. По данным клинико-лабораторного исследования - эндогенная интоксикация: количество гемоглобина - 63 г/л, эритроцитов - 3,7· 10¹² /л; лейкоцитов - 4,1· 10⁹/л; увеличение отдельных видов лейкоцитов; СОЭ по методу Панченкова - через 1 час; содержание альбуминов - 20,1 г/л; содержание ВНСММ плазмы - 19,7 усл. ед²; содержание ВНСММ эритроцитов - 26,3 усл. ед². Значение ИИ - 3,7.

По совокупности клинических данных специальных гинекологических исследований общее состояние признано тяжелым. По значению ИИ - 2-я степень эндотоксикоза, угроза развития сепсиса. Проведено комплексное лечение. Для подавления развития патогенной микрофлоры в матке назначена местная и общая противосептическая терапия с учетом чувствительности выделенных микробов к применяемому препарату. Проводимая терапия привела к выздоровлению на десятые сутки. Значение ИИ стало равным 2,1.

Предлагаемое изобретение относится к области ветеринарии и может быть использовано для диагностики степени тяжести эндотоксикоза у коров с острым гнойно-катаральным эндометритом. Определяют содержание веществ низкой и средней молекулярной массы в плазме крови и в эритроцитах крови, общую концентрацию альбуминов плазмы крови. Рассчитывают интегральный индекс (ИИ) на основе полученных показателей по формуле:

ИИ=100· S_{238-298(плазмы)}/S_{238-298(эритроциты)}·_{ОКА, где S238-298(плазмы), S238-298(эритроциты) - содержание веществ низкой и средней молекулярной массы плазмы и эритроцитов крови соответственно, определяемое по площади фигур, ограниченных спектральными кривыми в диапазоне длин волн 238-298 нм и осью абсцисс (усл. ед.²); ОКА - общая концентрация альбуминов плазмы крови (г/л). При его значении от 2,1 до 3,0 диагностируют первую степень эндотоксикоза, от 3,1 до 4,5 – вторую степень, от 4,6 до 6,0 - третью степень, свыше 6,0 - четвертую степень эндотоксикоза, при норме от 0,5 до 2,0. Способ позволяет повысить точность диагностики. 1 ил., 1 табл.}

Способ диагностики степени эндотоксикоза у коров с острым гнойно-катаральным эндометритом, характеризующийся тем, что определяют содержание веществ низкой и средней молекулярной массы в плазме и в эритроцитах крови, общую концентрацию альбуминов плазмы крови, рассчитывают интегральный индекс (ИИ) на основе полученных показателей по формуле

ИИ = 100 · S_{238-298(плазмы)} / S_{238-298(эритроциты)} ·_ОКА,

где S_{238-298(плазмы)}, S_{238-298(эритроциты)} – содержание веществ низкой и средней молекулярной массы плазмы и эритроцитов крови соответственно, определяемое по площади фигур, ограниченных спектральными кривыми в диапазоне длин волн 238-298 нм и осью абсцисс (усл.ед.²);

ОКА - общая концентрация альбуминов плазмы крови (г/л),

и при его значении от 2,1 до 3,0 диагностируют первую степень эндотоксикоза, от 3,1 до 4,5 – вторую, от 4,6 до 6,0 – третью степень, свыше 6,0 – четвертую степень эндотоксикоза, при норме от 0,5 до 2,0.