СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ АНТИОКСИДАНТНОГО ДЕЙСТВИЯ ПОЛИВИТАМИННОГО КОМПЛЕКСА ПРИ ГНОЙНО-ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ ЧЕЛЮСТНО-ЛИЦЕВОЙ ОБЛАСТИ Российский патент 2006 года по МПК G01N33/82 

Изобретение относится к области медицины, а именно челюстно-лицевой хирургии и биохимии.

Результаты исследований витаминной обеспеченности населения России свидетельствуют о массовом распространении полигиповитаминозов среди значительной части взрослого населения. Гиповитаминозный фон значительно усугубляется при любых заболеваниях. Поэтому лечение практически любого больного должно включать коррекцию витаминного дефицита включением в комплексную терапию поливитаминных препаратов [16]. Однако в большинстве стран рынок заполнен неэффективными и нерациональными комбинированными поливитаминными препаратами, а также витаминами в высоких дозах, что представляет угрозу для здоровья и оборачивается дополнительными расходами. Из 4 регионов мира в обзоре руководств по назначению было указано в 1990-1991 годах, что более 80% из 636 витаминов нельзя было рекомендовать. В США в сообщении 1991 года указывалось на обнаруженные огромные различия в количестве витаминов в более чем 3400 различных препаратов, находившихся на рынке в 1986 году. В состав препаратов могли входить любые количества витаминов от 7% рекомендуемой суточной потребности витамина Е до 50000% суточной потребности витамина В₆ в препаратах с одним ингредиентом; и от менее 0,5% суточной потребности витамина А, Е, B₁, В₃, В₆ до 53333% суточной потребности витамина B₁ в препаратах поливитаминов [21, 22]. Известно, что витамины могут взаимно усиливать оказываемые ими физиологические эффекты, взаимно уменьшая токсичность [10]. При этом количественная характеристика этого явления синергизма остается абсолютно неизученной.

При воспалении активируется свободнорадикальное окисление. Установлено также, что противомикробная защита осуществляется при непременном участии свободных радикалов и инициируемых ими реакций [19].

Точный механизм бактерицидного действия О^2- неизвестен; однако in vitro мощный окислитель О^2- вызывает (неизвестным путем) нарушение структуры нуклеиновых кислот и полисахаридов и окисляет тиоловые группы в белках [13].

Таким образом, организмы, использующие кислород, должны, сталкиваться с угрозой внутриклеточного образования О₂ ^-• и Н₂О₂. Для защиты от этих реакционоспособных соединений кислорода служат ферментативные защитные механизмы. Организмы, которые не выработали такие защитные механизмы, могут обитать только в анаэробных условиях [12].

Результаты исследований, полученные С.Г.Сулеймановой с соавт., 1992, показывают, что течение всех 3 форм гнойно-воспалительных заболеваний ЧЛО, а именно: абсцесс, флегмона, хронический остеомиелит нижней челюсти, сопровождается развитием синдрома липидной гипероксидации, выражающейся в увеличении содержания гидроперекисей липидов в плазме и эритроцитах крови на фоне низкого уровня α-токоферола [17].

Активация процесса ПОЛ вызывает существенные изменения в составе биологических мембран клеток. Образующиеся при окислении ненасыщенных жирных кислот токсичные продукты (перекиси, эпоксиды и др.) разрушают структуру и нарушают функцию различных биологических мембран, вызывают инактивацию ферментов, повреждают белки и нуклеиновые кислоты, влияя тем самым на функциональную активность организма в целом [17].

Уровень свободнорадикальных (СР) процессов и активность параметров антиоксидантной системы (АОС) в перефирической крови в известной мере отражают общее состояние этой системы, функционирование которой обеспечивает устойчивость организма к внешним воздействиям [6].

При этом известно, что в отличие от других незаменимых пищевых веществ (незаменимых аминокислот, полиненасыщенных жирных кислот) витамины не служат пластическим материалом или источником энергии [18]. Следовательно, такие продукты, как Н⁺, ОН^-, О^2-, образующиеся при преобразовании витамина в активный метаболит, кофермент или простетическую группу, должны утилизовываться организмом чтобы избежать мутагенных последствий этих веществ.

Таким образом, все витамины можно разделить на две группы:

1-я группа - это витамины, нейтрализующие свободные радикалы О^2- и ионы Н⁺, ОН^-.

2-я группа - это витамины, являющиеся источником свободных радикалов О^2- и ионов Н⁺, ОН^-.

1-я группа.

Витамин А.

При всасывании в кишечнике эфиров витамина А, растворенных в жирах пищи, их молекула подвергается ряду превращений: гидролизу с образованием витамина А-спирта, эмульгированию его желчными кислотами с образованием мицелл, всасыванию и реэтерификации в кишечных ворсинках с последующим поступлением эфиров витамина А в составе хиломикронов по лимфатическим путям в печень. В печени хиломикроны, содержащие эфиры витамина А, подвергаются расщеплению с высвобождением ретинилпальмитата, который гидролизуется с образованием свободного ретинола. Последний снова эстерифицируется и превращается вторично в пальмитат витамина А, который соединяясь с белками печени, образует запасную форму этого витамина [4].

Предварительным этапом включения витамина А в метаболические процессы является расщепление его эфиров, в основном ретинилпальмитата, с образованием активной формы витамина А-ретинола [4].

Первым этапом окислительного превращения витамина А и промежуточным этапом в процессе превращения каротина является альдегид витамина А-ретиналь. Окисление витамина А-спирта в витамин А-альдегид носит обратимый характер и катализируется алкогольдегидрогеназой и альдегидредуктазой в присутствии НАД и НАДФ [4].

Витамин А-кислота (ретиноевая кислота) является продуктом необратимого окисления ретиналя. В процессе обмена ретиноевая кислота, как и ретинол, подвергается окислительному декарбоксилированию. Соединение, образующееся при 14-С-декарбоксилировании ретиноевой кислоты, окончательно идентифицировано. Этот процесс прослежен in vivo. Возможно, начальный этап процесса связан с механизмом реакции образования свободных радикалов. Однако независимо от пускового механизма сам факт декарбоксилирования in vivo небольших количеств ретинола и ретиноевой кислоты показывает, что этот процесс является, по-видимому, одним из нормальных путей обмена витамина А, а не реакцией, связанной с детоксикацией вводимых извне больших доз ретиноевой кислоты [4].

Следовательно, в основе обмена витамина А лежат процессы его этерификации (с образованием сложного эфира и воды, где катализатором являются ионы Н⁺), гидролитического расщепления эфиров (взаимодействие с ионами воды Н⁺ и ОН^-, т.е. ионом водорода и гидроксила воды) и ферментативного окисления витамина А-спирта (взаимодействие витамина А-спирта и О^2- с последующим образованием витамина А-альдегида и воды).

Таким образом, в организме витамин А препятствует образованию свободных радикалов О^2- и ионов H⁺, ОН^-.

Витамин D.

Биологически активными продуктами превращения витамина D в тканях, обладающие более полярным характером, чем холекальциферол (витамин D₃) и эргокальциферол (витамин D₂) является 25-оксихолекальциферол и 25-оксиэргокальциферол, а также 1,25-диоксихолекальциферол соответственно [4].

Образование из холекальциферола 25-оксихолекальциферола происходит за счет присоединения О^2- в положении 25 атома, а 1,25-диоксихолекальциферол образуется за счет присоединения к 25-оксихолекальциферолу О^2- в положении 1 атома [4].

Таким образом, в организме витамин D препятствует образованию свободных радикалов О^2-.

Витамин Е.

В понятие "витамин Е" объединена сравнительно большая группа природных и синтетических веществ, являющихся производными токола и обладающих в разной степени биологической активностью α-токоферола.

Токоферолы легко вступают во взаимодействие со свободными радикалами и активными формами кислорода. Это обуславливает их способность тормозить свободнорадикальные процессы перекисного окисления органических соединений (в частности, ненасыщенных жирных кислот) молекулярным кислородом.

Токоферолы чувствительны к кислороду воздуха (ультрафиолетовому свету и другим окислителям), которые превращают их в соответствующие хиноны [18].

Данное превращение происходит при окислении витамина Е (взаимодействие α-токоферола и О^2- с последующим образованием α-токохинона и воды) [7,18].

Токофероновая кислота и токоферонолактон являются активными формами α-токоферола. Лишь небольшая часть α-токоферола, превращающегося в токоферонолактон, проходит через стадию α-токохинона [4].

Данное превращение происходит при взаимодействии α-токоферола и О^2- с последующим образованием токофероновой кислоты и токоферонолактона [7].

Таким образом, в организме витамин Е препятствует образованию свободных радикалов О^2-.

Витамин К.

Витамины группы К представлены в живых организмах различными производными 2-метил-1,4-нафтохинона, различающимися характером боковых цепей. К данной группе относятся два типа хинонов с изопреноидными боковыми цепями: витамин K₁ (филлохинон) и витамин К₂ (менахинон), природные аналоги которых способны превращаться друг в друга.

При восстановлении хинонов образуются соответствующие гидрохиноны за счет присоединения 2Н⁺ в положении 1 и 4 атомов [4].

Таким образом, в организме витамин К способен связывать ионы Н⁺.

Витамин В_с (фолиевая кислота).

Фолиевая кислота (В_с) метаболически неактивна, но является предшественником коферментов, включающихся в обменные процессы.

Важной химической особенностью фолиевой кислоты является способность ее птеридинового кольца к восстановлению путем присоединения 4 водородных атомов в 5, 6, 7 и 8 положениях с образованием тетрагидрофолиевой кислоты (ТГФК) [4].

Таким образом, в организме витамин В_с при преобразовании в кофермент ТГФК связывает 4 атома Н⁺.

2-я группа.

Витамин B₁ (тиамин).

Биологически активной формой, с которой связаны основные функции витамина B₁ в живых организмах, является пирофосфорный эфир тиамина, в образовании которого принимает участие АТФ, ионы магния и специфический фермент - тиаминкиназа. Опытами с меченным ³²P АТФ доказан перенос на тиамин целиком пирофосфатной группы тиаминкиназы [2].

Реакция идет по общему уравнению [4]:

Таким образом, при фосфорилировании тиамина происходит замещение атома водорода Н⁺ пирофосфатной группой.

Витамин В₂ (рибофлавин).

Рибофлавин, всосавшийся в кишечнике, подвергается фосфорилированию. При этом образуются две коферментные формы: флавинмононуклеотид (ФМН) и флавинадениндинуклеотид (ФАД) [4].

Простетическая группа флавопротеидов представлена не свободной молекулой рибофлавина, а в виде комплексов с фосфатом, называемый рибофлавин-5'-фосфатом или флавинмононуклеотидом (ФМН), или с адениловой кислотой, называемый флавинадениндинуклеотидом (ФАД) [2].

ФМН синтезируется в организме животных из свободного рибофлавина и АТФ при участии специфического фермента - флавинокиназы. Реакцию синтеза этого кофермента можно представить следующим уравнением [2]:

Образование ФАД в тканях также протекает при участии специфического фермента - флавиннуклеотифосфорилазы (или ФАД-синтетазы). Исходным веществом для синтеза является ФМН:

Таким образом, при фосфорилировании рибофлавина происходит замещение атома водорода Н⁺ остатком фосфорной кислоты при образовании ФМН. В ФМН также замещается атом водорода H⁺ остатком мононуклеотида адениловой кислоты при преобразовании в ФАД.

Витамин РР (никотиновая кислота, никотинамид, ниацин).

НАД⁺ и НАДФ⁺ образуются в организме человека из витамина ниацина. Ниацин включает никотиновую кислоту и ее амид (никотинамид) - каждое из этих соединений может выполнять функции витамина в пищевом рационе. Для синтеза НАД⁺ или НАДФ⁺ ферменты, находящиеся в цитозоле большинства клеток, используют только никотиновую кислоту, но не никотинамид.

Никотиамидный фрагмент НАД⁺ образуется из никотинатного фрагмента, когда последний находится в составе нуклеотида; амидная группа поступает из глутамата и замещает атом Н⁺ никотиновой кислоты [8].

При фосфорилировании 2'-гидроксильной группы аденозинового фрагмента НАД⁺ происходит замещение атома водорода Н⁺ остатком фосфорной кислоты при образовании НАДФ⁺ [8].

Витамин В₃ (пантотеновая кислота)

Пантотеновая кислота является амидом, образованным пантоевой кислотой и β-аланином. Пантотеновая кислота легко всасывается в кишечнике и затем фосфорилируется АТФ с образованием 4'-фосфопантотената (данной реакции предшествует процесс диссоциации пантотеновой кислоты на ионы с выделением иона H⁺, который не участвует в дальнейших превращениях). На пути превращения в активный кофермент А к фосфопантотенату присоединяется цистеин, затем отщепляется карбоксильная группа последнего (что равносильно присоединению тиоэтиламина), в результате образуется 4'-фосфопантетеин. Подобно многим коферментам, в состав которых входят водорастворимые витамины, активная форма пантотената содержит адениловый нуклеотид; 4'-фосфопантетеин аденилируется с образованием дефосфокофермента А. На конечной стадии АТФ фосфорилирует дефосфокофермент А по 3'-гидроксильной группе рибозы с образованием кофермента А [8].

Таким образом, при образовании из пантотеновой кислоты кофермента А происходит отщепление атома водорода H⁺.

Витамин В₆ (пиридоксин).

Формами витамина В₆ являются пиридоксин, пиридоксаль и пиридоксамин.

Основной метаболически активной формой витамина В₆ является фосфорный эфир пиридоксаля - пиридоксаль-5-фосфат.

Биосинтез пиридоксальфосфата в организме может осуществляться либо путем фосфорилирования пиридоксаля при участии пиридоксалькиназы, либо путем фосфорилирования пиридоксина и пиридоксамина и последующего окисления их пиридоксинофосфатоксидазой [4].

Таким образом, при фосфорилировании витамина В₆ происходит замещение атома водорода H⁺ остатком фосфорной кислоты при образовании пиридоксаль-5-фосфата.

Витамин B₁₂.

Последовательность превращения витамина B₁₂ в кофермент: кобаламин (оксикобаламин (Со¹⁺)→5'-дезоксиаденозилкобаламин (Со¹⁺) или метилкобаламин (Со¹⁺).

Образование Со¹⁺-производных кофермента может происходить путем β-элиминирования (отщепления атома водорода из β-положения рибозильного остатка кофермента) в результате взаимодействия кофермента с оксигруппой апофермента [4].

Таким образом, при превращении витамина B₁₂ происходит отщепление атома водорода Н⁺.

Витамин С (аскорбиновая кислота).

Приматы (человек и высшие обезьяны), морская свинка и некоторые другие животные не способны к биосинтезу аскорбиновой кислоты. Они нуждаются в экзогенном витамине С.

При окислении аскорбиновой кислоты в организме животных и человека образуется дегидроаскорбиновая кислота (ДАК) (эта реакция сопровождается выделением двух атомов водорода Н⁺), которая затем превращается в 2,3-дикето-L-гулоновую кислоту (эта реакция сопровождается выделением H₂O). При распаде последней образуется щавелевая кислота. Кроме того, в результате декарбоксилирования дикетогулоновой кислоты из нее образуется ксилоза, которая далее по обычной схеме превращается в глюкозу.

Для поступления витамина С в клетки важен переход аскорбиновой кислоты в ДАК. Такие данные имеются для эритроцитов, в которые ДАК диффундирует без энергетических затрат. ДАК в клетке за счет НАДФ•Н быстро восстанавливается в аскорбиновую кислоту, Скорость выхода аскорбиновой кислоты из эритроцита приблизительно в 40 раз меньше по сравнению с вхождением ДАК в эритроцит. Это объясняется тем, что ДАК, являясь неионизированной и жирорастворимой формой витамина С, более способна к диффузии, чем отрицательный ион аскорбиновой кислоты, поскольку мембрана эритроцита имеет заряд отрицательного знака. Таким образом, есть основание считать, что ДАК является транспортной формой витамина С, во всяком случае в отношении ее включения в эритроциты [4].

Таким образом, для поступления витамина С в клетки важен переход аскорбиновой кислоты в ДАК, то есть ее транспортную форму, что сопровождается выделением двух атомов водорода H⁺.

Биотин (витамин Н).

В биотиновых ферментах карбоксильная группа биотина соединена с ε-NH₂-группой лизина ферментного белка ковалентной связью. Таким образом, биотиновый фермент представляет собой молекулу ацетилкоэнзим-А-карбоксилазы, в которой кофактор биотин ковалентно связан с апоферментом. Образование данного фермента происходит с отщеплением гидроксила воды ОН^- от биотина в положении 10 атома.

Биотин является коферментом ацетилкоэнзим-А-карбоксилазы. Существует также еще другая форма битинфермента - это β-метил-кротонилкоэнзим-А-карбоксилаза, данная форма способна карбоксилировать свободный биотин, переводя его в 1'-N-карбоксибиотин в реакции карбоксилирования или фиксации СО₂ (с участием CO₂ ил НСО₃ ^-) сопряженные с распадом АТФ в соответствии с уравнением:

RH+НСО₃ ^-+АТФ↔R-COOH+АДФ+Н₃PO₄

В то же время известно, что органические кислоты, аналогично неорганическим кислотам, обладают ярко выраженными кислотными свойствами и в воде происходит их диссоциация на ионы:

R-COOH↔R-COO^-+H⁺

При этом R-COO^- - это СО₂˜биотинфермент, структура которого считается общепринятой [4].

Таким образом, при образовании из биотина (витамина Н) CO₂˜биотинфермента происходит выделение иона водорода Н⁺ и гидроксила воды ОН^-.

Таким образом, все рассмотренные витамины можно разделить на две группы:

1-я группа - это витамины, нейтрализующие свободные радикалы О^2- и ионы Н⁺, ОН^-. К ним можно отнести витамины А, В_с, Е, D, К.

2-я группа - это витамины, являющиеся источником ионов Н⁺ и ОН^-. К ним можно отнести витамины B₁, В₃, В₆, С, РР, В₅, Н, В₁₂.

Следовательно, количество витаминов, нейтрализующих свободные радикалы О^2- и ионов Н⁺, ОН^-, должно быть равно количеству витаминов, выделяющих данные ионы при преобразовании в активные метаболиты, коферменты и простетические группы, а их соотношение должно приближаться в плазме крови к цифре "1". Такое соотношение двух групп было рассмотрено нами как коэффициент синергизма витаминов (К_с):

К_с=1-я группа/2-я группа

К_с=(А+В_с+Е+В+К)/(В₁+В₂+В₆+С+РР+В₃+В₁₂+Н)

Исходя из имеющихся литературных данных [4, 9, 18], приведенных в таблице 1, было проведено исследование К_с для содержания витаминов в плазме крови, пище и моче. Причем было обнаружено, что данный коэффициент существенно отличается по содержанию в пище и плазме крови. Так если при максимальном содержании витаминов в плазме крови он составил 1,1449 (≈1,2), то есть приближается к "1", то при минимальном содержании витаминов в крови он повышается до 2,1 (что можно рассматривать как адаптацию антиоксидантной системы организма). При этом К_с для суточной нормы содержания витаминов в пище составил 0,3-0,4.

Следовательно, если в поливитаминном препарате К_с будет выше 1,2, дополнительно к лечебному действию, оказываемому витаминами, он будет обладать выраженным антиоксидантными свойствами.

При исследовании К_с в комплексном поливитаминном препарате "Винибис" было обнаружено, что значение К_с составляет 15 (таблица 1). При этом содержание в минимальной суточной лечебной дозе данного препарата (4 г) большинства витаминов от 2 и более 1000 раз меньше минимальной лечебной дозы (таблица 1). Ранее было обнаружено, что антиоксиданты оказывают выраженное действие и в сверхмалых дозах [20]. Поэтому было предположено, что комплексный поливитаминный препарат "Винибис" сохранит лечебное действие в дозе меньшей 4 г. С целью подтвердить сделанное нами предположение, было проведено исследование лечебного действия препарата "Винибис" на очаг воспаления при острых гнойно-воспалительных заболеваниях челюстно-лицевой области в дозе от 1,3 до 3,25 г, что соответствует 2-5 таблеткам данного препарата.

Известно, что при остром одонтогенном остеомиелите, осложненном флегмоной, в ротовой жидкости увеличивается содержание элементов, которые преимущественно содержатся в костной ткани [11], что позволяет судить о динамике патологического процесса. Известно, что кальций является основным структурным элементом костей скелета и зубов человека: 99% кальция содержится в костной и хрящевой ткани. Кроме того, известно также, что стронций в организме человека конкурирует с кальцием за включение в кристаллическую решетку оксиапатита кости. При увеличении концентрации кальция в рационе в 5 раз накопление стронция в организме снижается вдвое [1]. Кроме того, известно также, что около 80-87% всего фосфора находится в скелете человека.

Обмен кальция и кремния тесно связан между собой. Кремний способствует биосинтезу коллагена и образованию костной ткани. Установлено, что при переломах костей количество кремния в области перелома возрастает почти в 50 раз [3].

Поэтому было выбрано изучение содержания фосфора (Р), кальция (Са), кремния (Si) и стронция (Sr) в ротовой жидкости в процессе комплексного лечения препаратом "Винибис" при острых гнойно-воспалительных заболеваниях челюстно-лицевой области, а также определение соотношения концентраций этих элементов как критерия диагностики и лечения.

Известно, что атомно-абсорбционные методы дают возможность определения практически всех элементов периодической системы и отличаются высокой избирательностью и чувствительностью (до 10^-14 г). Поэтому был выбран прямой электротермический атомно-абсорбционный анализ ротовой жидкости на содержание данных элементов.

Материалы и методы исследования.

Обследовано 39 больных в возрасте от 19 до 68 лет (таблица 2, таблица 3, таблица 4), из них:

- с острым одонтогенным гнойным периоститом (ОП) - 6 человек;

- с острым одонтогенным остеомиелитом (OO) - 6 человек;

- с травматическим переломом нижней челюсти, осложненным нагноением костной раны (НКР) - 6 человек;

- с острым одонтогенным остеомиелитом, осложненным флегмоной (ОФ) - 8 человек;

- с хроническим травматическим остеомиелитом, осложненным гнойно-воспалительным процессом в околочелюстных мягких тканях (ТОФ) - 6 человек;

- с одонтогенной аденофлегмоной (АФ) - 6 человек.

Исследовали смешанную нестимулированную слюну (ротовую жидкость) у 6 практически здоровых людей без стоматологических заболеваний в возрасте от 20 до 27 лет (контрольная группа) (таблица 5, таблица 6).

Курс лечения комплексным поливитаминным препаратом "Винибис" при остром одонтогенном гнойном периостите и при остром одонтогенном остеомиелите составлял 5 дней по 1 таблетке 2 раза в день (1,3 г в сутки); при нагноении костной раны составлял 7 дней по 1 таблетке 2 раза в день (1,3 г в сутки); при остром одонтогенном остеомиелите, осложненном флегмоной, составлял 5 дней по 1 таблетке 3 раза в день (1,95 г в сутки); при хроническом травматическом остеомиелите, осложненном гнойно-воспалительным процессом в околочелюстных мягких тканях, составлял 5 дней по 1 таблетке 4 раза в день (2,6 г в сутки); при одонтогенной аденофлегмоне составлял 5 дней по 1 таблетке 5 раз в день (3,25 г в сутки).

Методика исследования смешанной нестимулированной слюны (ротовой жидкости). Пациент предварительно поласкает рот бидистилированной водой в количестве 50 мл в течение 5 мин. Ротовую жидкость набирают в сухую чистую полиэтиленовую пробирку в количестве 2,0 мл. Ротовая жидкость отбирается микропипеткой объемом 10-20 мкл и вводится в кювету атомно-абсорбционного спектрометра. Регистрируется сигнал атомной абсорбции соответствующего элемента. Условия регистрации: спектрометр AAS-30 с атомизатором ЕА-3 фирмы "Carl-Zeiss-Yena" (Германия) предварительно градуируется по растворам фосфора (Р), кальция (Са), кремния (Si) и стронция (Sr) с известной концентрацией. По этому результату выдается сразу в единицах концентрации. Полное время анализа (от момента взятия пробы у пациента до получения результата анализа) составляет 2 минуты.

Забор биологической пробы проводился через 2-3 часа после завтрака (10-11 часов утра). Перед сбором слюны обследуемые тщательно прополаскивали рот бидистилированной водой (50 мл), 2-3 раза сплевывали в раковину, после чего в течение 10-15 мин способом сплевывания собирали слюну в чистые полиэтиленовые пробирки. Слюну собирали в хорошо освещенном помещении, при этом обследуемые сидели, дышали через нос, не разговаривали и не курили.

Полученные данные обработаны методом вариационной статистики. Расчеты производили с помощью персонального компьютера типа IBM PC/XT. При обработке цифровых данных проводилось вычисление средней арифметической, средней ошибки средней арифметической, определение достоверности разности средних величин (по критерию t Стьюдента).

Были получены результаты, которые представлены в таблице 2, таблице 3, таблице 4, таблице 5, таблице 6.

Результаты исследования.

В процессе лечения острого одонтогенного гнойного периостита препаратом "Винибис" (группа из 3 человек) из-за увеличения Sr соотношение Ca/Sr уменьшилось с 1881±378 до 513±170 (р<0,05). Без использования препарата "Винибис" (группа из 3 человек) соотношение Ca/Sr уменьшалось незначительно (р>0,05).

В процессе комплексного лечения острого одонтогенного остеомиелита препаратом "Винибис" (группа из 3 человек) концентрация Р не изменялась по сравнению с контрольной группой (6 человек) 192,77±29,67 мкг/мл (р>0,05). Без "Винибиса" (группа из 3 человек) его концентрация наоборот увеличивалась с 196,47±33,12 до 302,73±14,27 мкг/мл (р<0,05).

В процессе лечения нагноения костной раны соотношение Ca/Si увеличивалось до значений контрольной группы (6 человек). Без использования препарата "Винибис" (группа из 3 человек) соотношение Ca/Si увеличивалось незначительно (р>0,05). С использованием препарата (группа из 3 человек), соотношение Ca/Si увеличивалось значительно при выздоровлении (р<0,05).

У пациентов с острым одонтогенным остеомиелитом, осложненным флегмоной, при лечении без использования препарата "Винибис" (группа из 5 человек) концентрация Са в ротовой жидкости увеличивалась с 75,71±14,63 до 95,56±7,37 мкг/мл (р>0,05). С использованием препарата (группа из 3 человек) концентрация Са уменьшалась с 112,09±8,05 до 60,49±2,75 мкг/мл (р<0,05). В контрольной группе здоровых людей (6 человек) концентрация Са составила 54,78±4,47 мкг/мл.

В процессе лечения хронического травматического остеомиелита, осложненного гнойно-воспалительным процессом в околочелюстных мягких тканях, с препаратом "Винибис" (группа из 3 человек) соотношение Ca/Si уменьшалось с 258±60 до 98±35 (р>0,05). Без "Винибис" (группа из 3 человек) это соотношение наоборот увеличивалось с 330±151 до 427±35 (р<0,01). В контрольной группе здоровых людей (6 человек) оно составило 133±29.

У пациентов с одонтогенной аденофлегмоной при лечении без использования препарата "Винибис" (группа из 3 человек) соотношение концентраций Ca/Sr не изменялось и составило 511±108. С использованием препарата (группа из 3 человек) соотношение Ca/Sr увеличивалось с 208±59 до 975±98 (р<0,05). В контрольной группе здоровых людей (6 человек) оно составило 3656±925.

Вывод: Использование препарата "Винибис" в комплексном лечении при остром одонтогенном гнойном периостите способствует уменьшению срока пребывания в стационаре с 8 до 5 койко-дней и способствует выведению Sr из костной ткани.

Использование данного препарата при остром одонтогенном остеомиелите предупреждает увеличение концентрации Р и развитие остеопороза, и уменьшает срок лечения с 13 до 11 койко-дней.

При травматическом переломе нижней челюсти, осложненного нагноением костной раны, препарат "Винибис" прекращает патологический процесс в костной ране и увеличивает соотношение Ca/Si из-за уменьшения концентрации Si, поступающего из линии перелома. Без использования данного препарата соотношение Ca/Si в среднем на 17 день после травмы достоверно не изменяется (р>0,05) вследствие процесса резорбции соединительной ткани в области линии перелома. Следовательно, данный комплексный поливитаминный комплекс способствует более ранней консолидации отломков и уменьшает срок пребывания в стационаре с 17 до 15 койко-дней при нагноении костной раны (Патент РФ №2232008).

Использование препарата "Винибис" в комплексном лечении острого одонтогенного остеомиелита, осложненного флегмоной, прекращает остеопороз, снижает концентрацию Са и уменьшает срок лечения с 13 до 11 койко-дней (Патент РФ №2232029).

При хроническом травматическом остеомиелите, осложненном гнойно-воспалительным процессом в околочелюстных мягких тканях, "Винибис" способствует прекращению резорбции костной ткани, уменьшает соотношение Ca/Si из-за снижения концентрации Са и уменьшает срок лечения с 28 до 17 койко-дней (Патент РФ №2232025).

Использование препарата "Винибис" в комплексном лечении одонтогенной аденофлегмоны увеличивает отношение Ca/Sr из-за снижения концентрации Sr в ротовой жидкости и уменьшает срок лечения с 18 до 9 койко-дней (Патент РФ №2210378).

Заключение.

Таким образом, предположение, что препарат "Винибис" как антиоксидант сохранит лечебное действие на очаг воспаления при острых гнойно-воспалительных заболеваниях челюстно-лицевой области в дозе, меньшей 4 г, а именно от 1,3 до 3,25 г, что соответствует 2-5 таблеткам данного препарата, подтверждается полученными результатами исследований.

Следовательно, соотношение количества витаминов, нейтрализующих свободные радикалы О^2- и ионы Н⁺, ОН^-, к количеству витаминов, выделяющих данные ионы при преобразовании в активные метаболиты, коферменты и простетические группы, возможно использовать как коэффициент синергизма для прогнозирования антиоксидантного действия поливитаминного комплекса.

Таблица 1ВитаминСодержание в 4 г (6 таблеток) "Винибис"Максимальная суточная потребностьМинимальная суточная потребностьСодержание в суточной мочеСодержание в плазме кровиA667 мкг1500 мкг1500 мкг-150-600 мкг/лD64 мкг15000 мкг12000 мкг-15-40 мкг/лE3,6 мг30 мг20 мг-9-19 мг/лК+ (следы)15 мг10 мг-0,2-3,2 мкг/лB_c24 мкг200 мкг100 мкг5-10 мкг6-20 мкг/лB₁33 мкг2000 мкг1500 мкг150-500 мкг10-90 мкг/лB₂71 мкг4000 мкг2000 мкг30-1000 мкг26-37 мкг/лPP15 мкг20 мг15 мг7-12 мг0,2-1,5 мг/лВ₃76 мкг10000 мкг5000 мкг1400-7000 мкг60-350 мкг/лВ₆22 мкг3000 мкг2000 мкг1500-2500 мкг10-180 мкг/лB₁₂5 мкг5 мкг2 мкг0,02-0,27 мкг0,15-1,0 мкг/лС70 мкг120 мг100 мг20-30 мг4-15 мг/лН2,4 мкг200 мкг150 мкг29-52 мкг9-16 мкг/л

Таблица 2Ds¹№_гр ²№_пц ³При поступленииПри выпискеСаSrSiРСаSrSiРОП11101,730,0311,3968236,360,250,02720,3823177,5277,50,01520,3333216,3103,570,06860,2336325,8346,620,01180,3552152,944,30,02580,5328201,524123,90,0491,25390,889,20,1090,49341,6552,40,0280,63176,961,70,2550,68153,7647,20,0381,06144,658,10,1212,32160,0ОО1761,470,14880,2922159,854,920,03660,7853312,68165,110,31220,9762261,3137,890,13060,4412275,1971,80,07240,592168,395,160,08460,2037320,5210156,70,2041,02200,4149,90,2121,14332,91187,70,21,58139,259,80,0990,6387,71251,30,141,35102,863,10,151,32150,6ОФ113104,970,03780,4939151,3108,950,02980,5013266,114115,690,05620,2529306,2115,640,05080,1657174,61560,60,01886,808153,679,730,01863,8895281,31648,60,0380,62152,292,40,091,74148,11748,70,0361,1482,281,10,0610,79254,9218126,790,06560,7034346,362,640,0130,4289223,11999,70,04760,296129,955,090,00540,1184233,420109,790,09244,9581354,363,730,02441,6212464,1АФ12176,270,24187,0664139,999,80,14640,5328301,62250,420,09380,7634248,736,090,07172,6463373,32372,540,10646,3659204,045,650,79920,4854110,322499,20,7252,53128,263,60,0621,0106,12573,00,2260,51152,656,80,0721,49124,12683,50,510,58180,248,90,0440,8797,1НКР12736,090,07172,646362,990,530,04660,8305412,32858,650,19182,8208215,573,820,0440,2867210,42970,50,0353,9331227,172,110,40620,888440,123042,690,11980,509185,134,610,01740,2249159,53176,070,07964,529154,352,130,02040,3562194,03250,730,02022,1519185,355,050,03920,275153,1ТОФ13452,430,02220,1905110,367,580,020,1489118,43595,840,19580,1559135,089,440,04680,1862192,53666,640,110,6571311,771,820,03580,2009158,223747,760,00620,2368131,843,980,06440,651270,93867,480,03920,3434307,350,470,01720,5506264,83973,580,06680,1952120,653,040,02060,396676,2Примечание:
Ds¹ - диагноз пациента;

№_гр ¹ - номер группы: 1-я группа - пациенты, которым проводилось комплексное лечение без препарата "Винибис", 2-я группа - пациенты, которым в комплексное лечение был включен данный препарат;
№_пц ² - порядковый номер пациента.Таблица 3ДиагнозЭл¹Содержание Р, Са, Si, Sr в биологической пробе ротовой жидкости (мкг/мл)1-я группа²2-я группа³При поступленииПри выпискеПри поступленииПри выпискеОПР201,8±25,61234,9±46,82237,4±78,7218,43±62,77Са75,28±16,2469,37±18,0374,5±25,2169,67±10,0Si0,6951±0,35750,3829±0,08810,98±0,18681,1633±0,5882Sr0,0193±0,00410,0405±0,01370,0383±0,00580,1616±0,1442ООР196,47±33,12302,73±14,27147,47±29,0190,4±75,13Са99,46±33,5795,99±24,498,57±31,4990,93±30,05Si0,6201±0,20160,4767±0,1721,3167±0,16551,03±0,2105Sr0,1778±0,0720,0839±0,02790,1813±0,02120,1537±0,0444НКРР168,5±53,9354,27±73,74108,23±40,29168,87±12,93Са55,08±10,2778,82±5,9556,49±10,2347,26±6,49Si3,1334±0,41060,6684±0,19512,3967±1,18890,2854±0,039Sr0,0995±0,04810,1656±0,12240,0732±0,02910,0257±0,0072ОФР169,1±37,47225,0±27,08276,8±74,88306,87±80,15Са75,71±14,6395,56±7,37112,09±8,0560,49±2,75Si1,863±1,26551,4173±0,68231,9858±1,510,7228±0,4666Sr0,0374±0,00550,05±0,01260,0685±0,01310,0143±0,0061ТОФР185,67±64,61156,37±21,8186,57±61,59137,3±64,97Са71,64±13,0276,28±6,6562,94±7,9349,16±2,72Si0,3345±0,16460,1786±0,01610,2585±0,04490,5328±0,0755Sr0,1093±0,05090,0342±0,00830,0374±0,01780,0341±0,0149АФР197,53±32,17261,73±79,97153,67±15,29109,1±8,08Са66,41±8,2160,51±20,285,23±7,7556,43±4,32Si4,7319±2,03131,2215±0,72591,2067±0,67441,12±0,1923Sr0,1473±0,04830,3389±0,18850,487±,14720,0593±0,0072Примечание: Эл¹ - элементы;

² - 1-я группа - пациенты, которым проводилось комплексное лечение без препарата "Винибис";
³ - 2-я группа - пациенты, которым в комплексное лечение был включен данный препарат.Таблица 4ДиагнозК.Э.¹Соотношение Р/Са, Ca/Si, Ca/Sr в биологической пробе ротовой жидкости (мкг/мл)1-я группа2-я группаПри поступленииПри выпискеПри поступленииПри выпискеОПР/Са2,8±0,293,5±0,513,23±0,093,03±0,4Ca/Si145,5±47,53227,96±111,8575,57±16,5199,23±46,37Ca/Sr4109±5401814±2131881±378513±170ООР/Са2,17±0,33,7±1,131,63±0,22,03±0,27Ca/Si166,86±26,23283,16±117,782,37±36,6591,36±24,65Ca/Sr644±1791226±140524±125577±85НКРР/Са2,83±0,584,46±0,972,06±0,853,66±0,55Ca/Si17,45±2,12149,2±55,741,4±21,7166,7±17,1Ca/Sr941±5491265±5591274±6541983±338ОФР/Са2,26±0,312,42±0,42,4±0,575,03±1,16Ca/Si159,98±83,33218,24±126,49179,74±92,55216,83±130,35Ca/Sr2138±3902515±6471736±2865877±2296ТОФР/Са2,7±0,982,0±0,192,93±0,862,73±1,25Ca/Si330,45±153430,5±37,5258,3±60,497,6±19,7Ca/Sr1152±6172432±4833508±21442063±711АФР/Са3,17±0,935,23±2,611,87±0,291,96±0,14Ca/Si29,41±18,6698,3±58,13108,72±35,4152,63±7,71Ca/Sr511±108414±189208±59975±98Примечание: С.Э.¹ - соотношение элементов.

Таблица 5Содержание Р, Са, Si, Sr в биологической пробе ротовой жидкости (мкг/мл) в контрольной группе№_пц ¹СаSrSiР161,310,04080,27313,1270,320,0171,4104178,2344,080,00720,3344125,8441,540,01580,6834240,7555,30,00880,2835141,3656,150,04470,445157,5Примечание:
№_пц ¹ - порядковый номер практически здорового человека без стоматологических заболеваний.Таблица 6Содержание Р, Са, Si, Sr и соотношение Р/Са, Ca/Si, Ca/Sr в биологической пробе ротовой жидкости в контрольной группеЭл¹Содержание Р, Са, Si, Sr (мкг/мл)С.Э.²Соотношение элементов Р/Са, Ca/Si, Са/Sr (мкг/мл)Р192,77±29,67Р/Са3,61±0,19Са54,78±4,47Ca/Si131,7±29,38Si0,5711±0,1819Ca/Sr3656±925Sr0,0224±0,0061 Примечание: Эл¹ - элементы;
С.Э.² - соотношение элементов.

Библиографический список.

1. Бабков А.В., Москалев Ю.И. Стронций // БМЭ. - 3-е изд. - М., 1985. - Т.24. - С.322-324.

2. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия: Учебник. / Под ред. С.С.Дебова. - М.: Медицина, 1983, 752 с., ил.

3. Борисенкова Р.В. Кремний // БМЭ. - 3-е изд. - М.,1979. - T.11. - С.520-523.

4. Витамины. Под редакцией М.И.Смирнова. - М.: Медицина, 1974. - 495 с., ил.

5. Воспалительные заболевания челюстно-лицевой области и шеи: (Руководство для врачей) / Под ред. проф. А.Г.Шаргородского. - М.: Медицина, 1985. - 352 с.; ил.

6. Диагностическое значение соотношения показателей про- и антиоксидантных систем периферической крови в профилактике осложнений у больных после операций на мягких тканях лица и шеи / Ч.Р.Рагимов, Н.Ю.Касаганова, Г.П.Тер-Асатуров, Ю.Н.Сергеев, В.В.Захаров // Стоматология. -1991. - №1. - С.45-47.

7. Жиряков В.Г. Органическая химия. - М.: Химия, 1971. - 496 с.

8. (301-1). Марри Р., Греннер Д., Мейес П., Родуэлл В. Биохимия человека: В 2-х томах. T.1. Пер. с англ.: - М.: Мир, 1993. - 384 с., ил.

9. Кровь // БМЭ. - 3-е изд. - М.: Советская энциклопедия, 1980. - Т.12. - С.93-132.

10. Машковский М.Д. Лекарственные средства: В 2 т. Т2. - 14-е изд., перераб., испр. и доп.- М.: ООО "Издательство Новая волна": Издатель С.Б.Дивов, 2002. - 608 с., 8 с. ил.

11. Мубаракова Л.Н. Морфофункциональная оценка состояния очага острых одонтогенных гнойно-воспалительных заболеваний методом лучевой диагностики: Автореф. дис. канд. мед. наук. - Казань, 1999. - 20 с.

12. Основы биохимии / А.Уайт, Ф.Хендлер, Э.Смит, Р.Хилл, И.Леман; пер. с англ. В.П.Сукачева, Л.М.Гинодмана, Т.В.Марченко; под ред. и с предисл. Ю.А.Овчинникова. - М.: Мир, 1981. - T.1. - 534 с.; ил.

13. Основы биохимии / А.Уайт, Ф.Хендлер, Э.Смит, Р.Хилл, И.Леман; пер. с англ. Л.М.Гинодмана; под ред. и Ю.А.Овчинникова. - М.: Мир, 1981. - Т.3. - 726 с.; ил.

14. Рагимов Ч.Р. Эффективность препаратов антиоксидантного действия в комплексном лечении флегмон челюстно-лицевой области // Стоматология. - 1992. - №3-6. - С.35-37.

15. Рагимов Ч.Р., Захаров В.В., Сергеев Ю.Н. Оценка течения раневого процесса после оперативных вмешательств на мягких тканях лица и шеи по показателям свободнорадикального окисления периферической крови // Стоматология. - 1990. - №4. - С.40-42.

16. Резолюция Всесоюзной конференции по клинической витаминологии 18-20 июня 1991 г., Москва // Вопросы медицинской химии, 1992. - Т.38, Выпуск 4. - С.61-62.

17. Сулейманова С.Г., Сеидбеков О.С., Алекперова Н.В. Состояние перекисного окисления липидов при гнойно-воспалительных заболеваниях челюстно-лицевой области // Стоматология. - 1992. - №1. - С.36-37.

18. Тутельян В.А., Спиричев В.Б., Суханов Б.П., Кудашева В.А. Микронутриенты в питании здорового и больного человека (справочное руководство по витаминам и минеральным веществам). - М.: Колос, 2002. - 424 с.: ил. (Учебники и учебные пособия для студентов высших учебных заведений).

19. Черкашин С.И. Состояние перекисного окисления липидов у лиц с хроническим одонтогеннымм очагами инфекции // Стоматология. - 1989. - Т.68. - №3. - С.15-17.

20. Шамсиев Ф.Х. Антиоксиданты в комплексном лечении пародонтитов // "Стоматология на пороге третьего тысячелетия". Сборник тезисов. М.: Авиаиздат, 2001 - С.283-284.

21. Chetley A., Gilbert D., Problem Drugs, The Hague, HAL 1986, 6 of Vitamins section.

22. Park Y.K., Kirn I., Yetley E.A. Characteristics of vitamin and mineral supplement products in the United States // American Journal of Clinical Nutrition, Vol.54, 750-759, Copyright © 1991 by The American Society for Clinical Nutrition, Inc.

Изобретение относится к области медицины, а именно челюстно-лицевой хирургии и биохимии, и касается способа прогнозирования антиоксидантного действия поливитаминного комплекса на очаг воспаления при гнойно-воспалительных заболеваниях челюстно-лицевой области путем исследования витаминов в плазме крови, где определяют количество витаминов A, B_c, D, К, Е нейтрализующих свободные радикалы О^2- и ионы H⁺, ОН^-, количество витаминов B₁, B₂, В₆, С, РР, В₃, В₁₂, H, выделяющих данные ионы при преобразовании в активные метаболиты, коферменты и простетические группы, затем вычисляют коэффициент синергизма Кс по формуле: К_с=(A+B_c+E+D+K)/(В₁+В₂+В₆+С+РР+В₃+В₁₂+Н) и при его значении, большем 1,1449, прогнозируют антиоксидантное действие, а при значении, меньшем 1,1449, прогнозируют отсутствие антиоксидантного действия поливитаминного комплекса на очаг воспаления. Технический результат: разработка нового метода прогнозирования антиоксидантного действия поливитаминного комплекса на очаг воспаления при гнойно-воспалительных заболеваниях челюстно-лицевой области. 6 табл.

Способ прогнозирования антиоксидантного действия поливитаминного комплекса на очаг воспаления при гнойно-воспалительных заболеваниях челюстно-лицевой области путем исследования витаминов в плазме крови, отличающийся тем, что определяют количество витаминов А, Bc, D, К, Е, нейтрализующих свободные радикалы О^2- и ионы Н⁺, ОН^-, количество витаминов B₁, В₂, В₆, С, РР, В₃, В₁₂, H, выделяющих данные ионы при преобразовании витаминов в активные витамины, коферменты, простетические группы, затем вычисляют коэффициент синергизма Кс по формуле

Кс=(A+Bc+E+D+K)/(B₁+B₂+B₆+C+PP+B₃+B₁₂+H)

и при его значении большем 1,1449 прогнозируют антиоксидантное действие, а при значении меньшем 1,1449 - отсутствие антиоксидантного действия поливитаминного комплекса на очаг воспаления.