ОСНОВА ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ И КУЛЬТИВИРОВАНИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ Российский патент 2006 года по МПК C12N1/10 C12N1/14 C12N1/20 

Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано при получении питательных сред для выделения или культивирования микроорганизмов.

Известно использование в качестве стимулятора роста фекальных бактерий экстракта содержимого слепой кишки или фекалий свиней, полученного в результате последовательных действий: разведения 1:1 содержимого слепой кишки или 1:4 фекалий свиней дистиллированной водой; гомогенизации полученной суспензии в смесителе; предварительного автоклавирования; центрифугирования 12000×g 15 мин; отбора надосадочной жидкости; доведения рН надосадочной жидкости до 6,8 и окончательного автоклавирования. Экстракт содержимого слепой кишки или фекалий свиней вносили в питательную среду в количестве 10 об.% или 40 об.% (Salanitro J.P., Blake I.G., Muirhead P.A. Isolation and identification of fecal bacteria from adult swine // Applied and Environmental Microbiology. - 1977. - Vol.33, № 1. - P.79-84).

Недостатками известного прототипа являются:

- отсутствие возможности использования экстракта в качестве добавки к питательным средам, селективно дозозависимо ингибирующей рост микроорганизмов;

- использование экстракта содержимого слепой кишки или фекалий свиней только для культивирования фекальных бактерий;

- высокая концентрация ингредиентов фекалий в питательной среде, обуславливающая недостаточное устранение неприятного запаха, затрудняющего использование экстракта и содержащих его питательных сред;

- сложность процесса получения экстракта содержимого слепой кишки или фекалий свиней по известному прототипу.

В основу изобретения положена задача - создание новой основы, повышающей эффективность выделения и культивирования микроорганизмов за счет возможности стимуляции или селективного дозозависимого ингибирования роста микроорганизмов при снижении концентрации ингредиентов фекалий в заявляемой основе и упрощении процесса получения заявляемой основы.

Задача решена тем, что заявляемая основа для выделения и культивирования микроорганизмов представляет собой автоклавированную суспензию фекалий млекопитающих с размером взвешенных частиц не более 2 мм, содержит 10^-7-10 г фекалий на 1 л суспензии и имеет рН 6,0-7,6. Основа может дополнительно содержать целевые добавки (используется широкий перечень любых известных добавок, обеспечивающих осмотическую плотность среды, ее рН, ионный состав, консистенцию, состав пластического материала, источников энергии, витаминов, стимуляторов и ингибиторов роста микроорганизмов, ферментативных субстратов и индикаторов в любом известном их сочетании) для получения жидкой или полужидкой, или плотной питательной среды в количестве 5-300 г/л.

В результате проведенных нами исследований была впервые установлена необходимость обогащения состава заявляемой основы из исходного сырья - фекалий млекопитающих - трудно растворимыми и термически нестабильными компонентами, в соответствующих пределах их размеров, концентрации и значениях рН основы стимулирующими или селективно дозозависимо ингибирующими рост микроорганизмов при снижении концентрации ингредиентов фекалий в заявляемой основе и упрощении процесса получения заявляемой основы.

Согласно изобретению повышение эффективности выделения и культивирования микроорганизмов за счет возможности стимуляции или селективного дозозависимого ингибирования роста микроорганизмов при снижении концентрации ингредиентов фекалий в заявляемой основе и упрощении процесса получения заявляемой основы обеспечивается тем, что заявляемая основа для выделения и культивирования микроорганизмов представляет собой автоклавированную суспензию фекалий млекопитающих с размером взвешенных частиц не более 2 мм, содержит 10^-7-10 г фекалий на 1 л суспензии и имеет рН 6,0-7,6. Основа может дополнительно содержать целевые добавки для получения жидкой или полужидкой, или плотной питательной среды в количестве 5-300 г/л.

Заявляемая основа для выделения или культивирования микроорганизмов является новой и в литературе не описана.

Техническим результатом заявляемого изобретения является повышение эффективности выделения или культивирования микроорганизмов за счет возможности стимуляции или селективного дозозависимого ингибирования роста микроорганизмов при снижении концентрации ингредиентов фекалий в заявляемой основе и упрощении процесса получения заявляемой основы.

Сущность изобретения поясняется на следующих примерах, показывающих повышение эффективности выделения или культивирования микроорганизмов за счет возможности стимуляции или селективного дозозависимого ингибирования роста микроорганизмов при снижении концентрации ингредиентов фекалий в заявляемой основе и упрощении процесса получения заявляемой основы.

Пример 1. Для получения основы свежесобранные фекалии коровы суспендируют в стерильном 0,9% водном растворе натрия хлорида. Затем полученную суспензию освобождают от нерастворенных частиц размером более 2 мм, доводят до рН 7,4 и стерилизуют автоклавированием при температуре 120°С в течение 15 минут.

Основа для выделения или культивирования микроорганизмов представляет собой автоклавированную суспензию фекалий коровы с размером взвешенных частиц не более 2 мм, содержит 0,1 г фекалий на 1 л суспензии и имеет рН 7,4.

При сравнении с солевыми растворами и мясопептонным бульоном, не содержащими данной основы, данная основа без целевых добавок в 3 раза увеличивала скорость выделения (индикации микроорганизмов в исследуемом образце) и культивирования (наращивания биомассы) Escherichia coli (M 17), Staphylococcus epidermitidis, Bacillus cereus, Psedomonas aeruginosa, Entamoeba histolytica. Данная основа без целевых добавок обеспечивала выделение и культивирование Enteroccocus faecalis, Enteroccocus faecium, Lactobacterium lactis, Lactobacterium acidophilus, Bifidobacterium breve, Candida albicans, Trichomonas vaginalis.

Основа не обладает неприятным запахом.

Пример 2. Для получения основы свежесобранные фекалии коровы суспендируют в стерильном 0,9% водном растворе натрия хлорида. Затем полученную суспензию освобождают от нерастворенных частиц размером более 2 мм, доводят до рН 7,4 и стерилизуют автоклавированием при температуре 120°С в течение 15 минут.

Основа для выделения или культивирования микроорганизмов представляет собой автоклавированную суспензию фекалий коровы с размером взвешенных частиц не более 2 мм, содержит 2 г фекалий на 1 л суспензии и имеет рН 7,4.

При сравнении с солевыми растворами и мясопептонным бульоном, не содержащими данной основы, данная основа без целевых добавок в 3 раза увеличивала скорость выделения (индикации микроорганизмов в исследуемом образце) и культивирования (наращивания биомассы) Escherichia coli (M 17), Staphylococcus epidermitidis, Bacillus cereus, Psedomonas aeruginosa, Entamoeba histolytica. Данная основа без целевых добавок обеспечивала выделение и культивирование Enteroccocus faecalis, Enteroccocus faecium, Lactobacterium lactis, Lactobacterium acidophilus, Bifidobacterium breve, Candida albicans, Trichomonas vaginalis.

Основа не обладает неприятным запахом.

Пример 3. Для получения основы свежесобранные фекалии человека суспендируют в стерильном 0,9% водном растворе натрия хлорида. Затем полученную суспензию освобождают от нерастворенных частиц размером более 2 мм, доводят до рН 6,0 и стерилизуют автоклавированием при температуре 120°С в течение 15 минут.

Основа для выделения или культивирования микроорганизмов представляет собой автоклавированную суспензию фекалий человека с размером взвешенных частиц не более 2 мм, содержит 10 г фекалий на 1 л суспензии и имеет рН 6,0.

При сравнении с солевыми растворами и мясопептонным бульоном, не содержащими данной основы, данная основа без целевых добавок в 3 раза увеличивала скорость выделения (индикации микроорганизмов в исследуемом образце) и культивирования (наращивания биомассы) Escherichia coli (M 17), Staphylococcus epidermitidis, Bacillus cereus, Psedomonas aeruginosa, Entamoeba histolytica. Данная основа без целевых добавок обеспечивала выделение и культивирование Lactobacterium lactis, Lactobacterium acidophilus, Bifidobacterium breve. Роста Enteroccocus faecalis, Enteroccocus faecium, Candida albicans не отмечалось.

Основа не обладает выраженным неприятным запахом.

Пример 4. Для получения основы свежесобранные фекалии человека суспендируют в стерильном 0,9% водном растворе натрия хлорида. Затем полученную суспензию освобождают от нерастворенных частиц размером более 2 мм, доводят до рН 7,6 и стерилизуют автоклавированием при температуре 120°С в течение 15 минут.

Основа для выделения или культивирования микроорганизмов представляет собой автоклавированную суспензию фекалий человека с размером взвешенных частиц не более 2 мм, содержит 5 г фекалий на 1 л суспензии и имеет рН 7,6.

При сравнении с солевыми растворами и мясопептонным бульоном, не содержащими данной основы, данная основа без целевых добавок в 3 раза увеличивала скорость выделения (индикации микроорганизмов в исследуемом образце) и культивирования (наращивания биомассы) Escherichia coli (M 17), Staphylococcus epidermitidis, Bacillus cereus, Psedomonas aeruginosa, Entamoeba histolytica. Данная основа без целевых добавок обеспечивала выделение и культивирование Lactobacterium lactis, Lactobacterium acidophilus, Bifldobacterium breve.

Основа не обладает неприятным запахом.

Пример 5. Для получения основы свежесобранные фекалии собаки суспендируют в стерильном 0,9% водном растворе натрия хлорида. Затем полученную суспензию освобождают от нерастворенных частиц размером более 2 мм, добавляют целевые добавки (питательный бульон сухой, калия гидрофосфат, калия дигидрофосфат) для получения жидкой питательной среды, доводят до рН 7,4 и стерилизуют автоклавированием при температуре 120°С в течение 15 минут.

Основа для выделения или культивирования микроорганизмов представляет собой автоклавированную суспензию фекалий собаки с размером взвешенных частиц не более 2 мм, содержит 0,1 г фекалий, 2 г целевых добавок (питательный бульон сухой, калия гидрофосфат и калия дигидрофосфат) на 1 л суспензии и имеет рН 7,4.

При сравнении с мясопептонным бульоном, не содержащим данной основы, данная основа в 3 раза увеличивала скорость выделения (индикации микроорганизмов в исследуемом образце) и культивирования (наращивания биомассы) Escherichia coli (M 17), Staphylococcus epidermitidis, Bacillus cereus, Psedomonas aeruginosa, Entamoeba histolytica. Данная основа обеспечивала выделение и культивирование Enteroccocus faecalis, Enteroccocus faecium, Lactobacterium lactis, Lactobacterium acidophilus, Bifidobacterium breve, Candida albicans, Trichomonas vaginalis.

Основа не обладает неприятным запахом.

Пример 6. Для получения основы свежесобранные фекалии собаки суспендируют в стерильном 0,9% водном растворе натрия хлорида. Затем полученную суспензию освобождают от нерастворенных частиц размером более 2 мм, добавляют целевые добавки (питательный бульон сухой, калия гидрофосфат, калия дигидрофосфат) для получения жидкой питательной среды, доводят до рН 7,4 и стерилизуют автоклавированием при температуре 120°С в течение 15 минут.

Основа для выделения или культивирования микроорганизмов представляет собой автоклавированную суспензию фекалий собаки с размером взвешенных частиц не более 2 мм, содержит 0,1 г фекалий, 10 г целевых добавок (питательный бульон сухой, калия гидрофосфат и калия дигидрофосфат) на 1 л суспензии и имеет рН 7,4.

При сравнении с мясо-пептонным бульоном, не содержащим данной основы, данная основа в 3 раза увеличивала скорость выделения (индикации микроорганизмов в исследуемом образце) и культивирования (наращивания биомассы) Escherichia coli (M 17), Staphylococcus epidermitidis, Bacillus cereus, Psedomonas aeruginosa, Entamoeba histolytica. Данная основа обеспечивала выделение и культивирование Lactobacterium lactis, Lactobacterium acidophilus, Bifidobacterium breve, Trichomonas vaginalis. Роста Enteroccocus faecalis, Enteroccocus faecium, Candida albicans не отмечалось.

Основа не обладает выраженным неприятным запахом.

Пример 7. Для получения основы свежесобранные фекалии человека суспендируют в стерильном 0,9% водном растворе натрия хлорида. Затем полученную суспензию освобождают от нерастворенных частиц размером более 2 мм, добавляют целевые добавки (микологический пептон, мальтозу) для получения жидкой питательной среды, доводят до рН 6,0 и стерилизуют автоклавированием при температуре 120°С в течение 15 минут.

Основа для выделения или культивирования микроорганизмов представляет собой автоклавированную суспензию фекалий человека с размером взвешенных частиц не более 2 мм, содержит 2 г фекалий, 50 г целевых добавок (микологический пептон, мальтозу) для получения жидкой питательной среды на 1 л суспензии и имеет рН 6,0.

При сравнении с бульоном Сабуро с мальтозой, не содержащим данной основы, данная основа без целевых добавок в 3 раза увеличивала скорость выделения (индикации микроорганизмов в исследуемом образце) и культивирования (наращивания биомассы) Escherichia coli (M 17), в 2 раза увеличивала скорость выделения (индикации микроорганизмов в исследуемом образце) и культивирования (наращивания биомассы) Candida albicans.

Основа не обладает неприятным запахом.

Пример 8. Для получения основы свежесобранные фекалии человека суспендируют в стерильном 0,9% водном растворе натрия хлорида. Затем полученную суспензию освобождают от нерастворенных частиц размером более 2 мм, добавляют целевые добавки (микологический пептон, мальтозу) для получения жидкой питательной среды, доводят до рН 6,0 и стерилизуют автоклавированием при температуре 120°С в течение 15 минут.

Основа для выделения или культивирования микроорганизмов представляет собой автоклавированную суспензию фекалий человека с размером взвешенных частиц не более 2 мм, содержит 10 г фекалий, 50 г целевых добавок (микологический пептон, мальтозу) для получения жидкой питательной среды на 1 л суспензии и имеет рН 6,0.

При сравнении с бульоном Сабуро с мальтозой, не содержащим данной основы, данная основа без целевых добавок в 3 раза увеличивала скорость выделения (индикации микроорганизмов в исследуемом образце) и культивирования (наращивания биомассы) Escherichia coli (M 17), подавляла в 4 раза скорость роста Candida albicans.

Основа не обладает выраженным неприятным запахом.

Пример 9. Для получения основы свежесобранные фекалии коровы суспендируют в стерильном 0,9% водном растворе натрия хлорида. Затем полученную суспензию освобождают от нерастворенных частиц размером более 2 мм, добавляют целевые добавки (гидролизат казеина, лактозу, натрия гидрофосфат, натрия селенит, L-цистин) для получения жидкой питательной среды, доводят до рН 7,6 и стерилизуют автоклавированием при температуре 120°С в течение 15 минут.

Основа для выделения или культивирования микроорганизмов представляет собой автоклавированную суспензию фекалий коровы с размером взвешенных частиц не более 2 мм, содержит 5 г фекалий, 23 г целевых добавок (гидролизат казеина, лактозу, натрия гидрофосфат, натрия селенит, L-цистин) для получения жидкой питательной среды на 1 л суспензии и имеет рН 7,6.

При сравнении с цистин-селенитовым бульоном, не содержащим данной основы, данная основа в 3 раза увеличивала скорость выделения (индикации микроорганизмов в исследуемом образце) и культивирования (наращивания биомассы) Escherichia coli (M 17), Salmonella typhimurium, Salmonella typhi.

Основа не обладает неприятным запахом.

Пример 10. Для получения основы свежесобранные фекалии человека суспендируют в стерильном 0,9% водном растворе натрия хлорида. Затем полученную суспензию освобождают от нерастворенных частиц размером более 2 мм, добавляют целевые добавки (пептический перевар соевой муки, глюкозу) для получения жидкой питательной среды, доводят до рН 6,0 и стерилизуют автоклавированием при температуре 120°С в течение 15 минут.

Основа для выделения или культивирования микроорганизмов представляет собой автоклавированную суспензию фекалий человека с размером взвешенных частиц не более 2 мм, содержит 2 г фекалий, 50 г целевых добавок (пептический перевар соевой муки, глюкозу) для получения жидкой питательной среды на 1 л суспензии и имеет рН 6,0.

При сравнении с кислым микологическим бульоном, не содержащим данной основы, данная основа в 3 раза увеличивала скорость выделения (индикации микроорганизмов в исследуемом образце) и культивирования (наращивания биомассы) Lactobacillus acidophilus, в 2 раза увеличивала скорость выделения (индикации микроорганизмов в исследуемом образце) и культивирования (наращивания биомассы) Candida albicans.

Основа не обладает неприятным запахом.

Пример 11. Для получения основы свежесобранные фекалии человека суспендируют в стерильном 0,9% водном растворе натрия хлорида. Затем полученную суспензию освобождают от нерастворенных частиц размером более 2 мм, добавляют целевые добавки (пептический перевар соевой муки, глюкозу) для получения жидкой питательной среды, доводят до рН 6,0 и стерилизуют автоклавированием при температуре 120°С в течение 15 минут.

Основа для выделения или культивирования микроорганизмов представляет собой автоклавированную суспензию фекалий человека с размером взвешенных частиц не более 2 мм, содержит 10 г фекалий, 50 г целевых добавок (пептический перевар соевой муки, глюкозу) для получения жидкой питательной среды на 1 л суспензии и имеет рН 6,0.

При сравнении с кислым микологическим бульоном, не содержащим данной основы, данная основа в 3 раза увеличивала скорость выделения (индикации микроорганизмов в исследуемом образце) и культивирования (наращивания биомассы) Lactobacillus acidophilus, подавляла в 4 раза скорость роста Candida albicans.

Основа не обладает выраженным неприятным запахом.

Пример 12. Для получения основы свежесобранные фекалии человека суспендируют в стерильном 0,9% водном растворе натрия хлорида. Затем полученную суспензию освобождают от нерастворенных частиц размером более 2 мм, добавляют целевые добавки (гидролизат казеина, пептический перевар животной ткани, папаиновый перевар соевой муки, дрожжевой экстракт, говяжий экстракт, кислоту аскорбиновую, магния сульфат, лактозу, динатрий-b-глицерофосфат) для получения жидкой питательной среды, доводят до рН 7,1 и стерилизуют автоклавированием при температуре 120°С в течение 15 минут.

Основа для выделения или культивирования микроорганизмов представляет собой автоклавированную суспензию фекалий человека с размером взвешенных частиц не более 2 мм, содержит 1 г фекалий, 42 г целевых добавок (гидролизат казеина, пептический перевар животной ткани, папаиновый перевар соевой муки, дрожжевой экстракт, говяжий экстракт, кислоту аскорбиновую, магния сульфат, лактозу, динатрий-b-глицерофосфат) для получения жидкой питательной среды на 1 л суспензии и имеет рН 7,1.

При сравнении с бульоном M 17, не содержащим данной основы, данная основа в 3 раза увеличивала скорость выделения (индикации микроорганизмов в исследуемом образце) и культивирования (наращивания биомассы) Lactobacillus plantarum, в 2 раза увеличивала скорость выделения (индикации микроорганизмов в исследуемом образце) и культивирования (наращивания биомассы) Enterococcus faecalis.

Основа не обладает неприятным запахом.

Пример 13. Для получения основы свежесобранные фекалии человека суспендируют в стерильном 0,9% водном растворе натрия хлорида. Затем полученную суспензию освобождают от нерастворенных частиц размером более 2 мм, добавляют целевые добавки (гидролизат казеина, пептический перевар животной ткани, папаиновый перевар соевой муки, дрожжевой экстракт, говяжий экстракт, кислоту аскорбиновую, магния сульфат, лактозу, динатрий-b-глицерофосфат) для получения жидкой питательной среды, доводят до рН 7,1 и стерилизуют автоклавированием при температуре 120°С в течение 15 минут.

Основа для выделения или культивирования микроорганизмов представляет собой автоклавированную суспензию фекалий человека с размером взвешенных частиц не более 2 мм, содержит 8 г фекалий, 42 г целевых добавок (гидролизат казеина, пептический перевар животной ткани, папаиновый перевар соевой муки, дрожжевой экстракт, говяжий экстракт, кислоту аскорбиновую, магния сульфат, лактозу, динатрий-b-глицерофосфат) для получения жидкой питательной среды на 1 л суспензии и имеет рН 7,1.

При сравнении с бульоном M 17, не содержащим данной основы, данная основа в 3 раза увеличивала скорость выделения (индикации микроорганизмов в исследуемом образце) и культивирования (наращивания биомассы) Lactobacillus plantarum, подавляла в 3 раза скорость роста Enterococcus faecalis.

Основа не обладает выраженным неприятным запахом.

Пример 14. Для получения основы свежесобранные фекалии человека суспендируют в стерильном 0,9% водном растворе натрия хлорида. Затем полученную суспензию освобождают от нерастворенных частиц размером более 2 мм, добавляют целевые добавки (кислоту лимонную, аммония сульфат, магния сульфат, калия дигидрофосфат, натрия хлорид, бромтимоловый синий, кислота молочная, натрия гидроксид) для получения жидкой питательной среды, доводят до рН 7,0 и стерилизуют автоклавированием при температуре 120°С в течение 15 минут.

Основа для выделения или культивирования микроорганизмов представляет собой автоклавированную суспензию фекалий человека с размером взвешенных частиц не более 2 мм, содержит 2 г фекалий, 8 г целевых добавок (кислоту лимонную, аммония сульфат, магния сульфат, калия дигидрофосфат, натрия хлорид, бромтимоловый синий, кислота молочная, натрия гидроксид) для получения жидкой питательной среды на 1 л суспензии и имеет рН 7,0.

При сравнении со средой Робинзона для амеб, не содержащей данной основы, данная основа в 2 раза увеличивала скорость выделения (индикации микроорганизмов в исследуемом образце) и культивирования (наращивания биомассы) Entamoeba histolytica.

Основа не обладает неприятным запахом.

Пример 15. Для получения основы свежесобранные фекалии коровы суспендируют в стерильном 0,9% водном растворе натрия хлорида. Затем полученную суспензию освобождают от нерастворенных частиц размером более 2 мм, добавляют целевые добавки (мясопептонный бульон, калия гидрофосфат, калия дигидрофосфат) для получения жидкой питательной среды, доводят до рН 7,4 и стерилизуют автоклавированием при температуре 120°С в течение 15 минут.

Основа для выделения или культивирования микроорганизмов представляет собой автоклавированную суспензию фекалий коровы с размером взвешенных частиц не более 2 мм, содержит 10^-7 г фекалий, 300 г целевых добавок (мясопептонный бульон, калия гидрофосфат и калия дигидрофосфат) на 1 л суспензии и имеет рН 7,4.

При сравнении с мясопептонным бульоном, не содержащим данной основы, данная основа в 2 раза увеличивала скорость выделения (индикации микроорганизмов в исследуемом образце) и культивирования (наращивания биомассы) Escherichia coli (M 17), Staphylococcus epidermitidis, Bacillus cereus, Psedomonas aeruginosa, Entamoeba histolytica.

Основа не обладает неприятным запахом.

Пример 16. Для получения основы свежесобранные фекалии собаки суспендируют в стерильном 0,9% водном растворе натрия хлорида. Затем полученную суспензию освобождают от нерастворенных частиц размером более 2 мм, добавляют целевые добавки (питательный бульон сухой, калия гидрофосфат, калия дигидрофосфат, агар-агар) для получения полужидкой питательной среды, доводят до рН 7,4 и стерилизуют автоклавированием при температуре 120°С в течение 15 минут.

Основа для выделения или культивирования микроорганизмов представляет собой автоклавированную полужидкую питательную среду с фекалиями собаки с размером взвешенных частиц не более 2 мм, содержит 0,1 г фекалий, 5 г целевых добавок (питательный бульон сухой, калия гидрофосфат, калия дигидрофосфат, агар-агар) на 1 л суспензии и имеет рН 7,4.

При сравнении с полужидким мясопептонным агаром, не содержащим данной основы, данная основа в 3 раза увеличивала скорость выделения (индикации микроорганизмов в исследуемом образце) и культивирования (наращивания биомассы) Escherichia coli (M 17), Staphylococcus epidermitidis, Bacillus cereus, Psedomonas aeruginosa, Entamoeba histolytica. Данная основа обеспечивала выделение и культивирование Enteroccocus faecalis, Enteroccocus faecium, Lactobacterium lactis, Lactobacterium acidophilus, Bifidobacterium breve, Candida albicans.

Основа не обладает неприятным запахом.

Пример 17. Для получения основы свежесобранные фекалии коровы суспендируют в стерильном 0,9% водном растворе натрия хлорида. Затем полученную суспензию освобождают от нерастворенных частиц размером более 2 мм, добавляют целевые добавки (мясопептонный бульон, калия гидрофосфат, калия дигидрофосфат, агар-агар) для получения полужидкой питательной среды, доводят до рН 6,0 и стерилизуют автоклавированием при температуре 120°С в течение 15 минут.

Основа для выделения или культивирования микроорганизмов представляет собой автоклавированную полужидкую питательную среду с фекалиями коровы с размером взвешенных частиц не более 2 мм, содержит 0,1 г фекалий, 300 г целевых добавок (мясопептонный бульон, калия гидрофосфат, калия дигидрофосфат, агар-агар) на 1 л суспензии и имеет рН 6,0.

При сравнении с полужидким мясопептонным агаром, не содержащим данной основы, данная основа в 3 раза увеличивала скорость выделения (индикации микроорганизмов в исследуемом образце) и культивирования (наращивания биомассы) Escherichia coli (M 17), Staphylococcus epidermitidis, Bacillus cereus, Psedomonas aeruginosa, Entamoeba histolytica. Данная основа обеспечивала выделение и культивирование Enteroccocus faecalis, Enteroccocus faecium, Lactobacterium lactis, Lactobacterium acidophilus, Bifidobacterium breve, Candida albicans.

Основа не обладает неприятным запахом.

Пример 18. Для получения основы свежесобранные фекалии человека суспендируют в стерильном 0,9% водном растворе натрия хлорида. Затем полученную суспензию освобождают от нерастворенных частиц размером более 2 мм, добавляют целевые добавки (пептический перевар животной ткани, мясной экстракт, натрия хлорид, агар-агар) для получения полужидкой питательной среды, доводят до рН 7,4 и стерилизуют автоклавированием при температуре 120°С в течение 15 минут.

Основа для выделения или культивирования микроорганизмов представляет собой автоклавированную полужидкую питательную среду с фекалиями человека с размером взвешенных частиц не более 2 мм, содержит 10^-7 г фекалий, 22 г целевых добавок (пептический перевар животной ткани, мясной экстракт, натрия хлорид, агар-агар) на 1 л суспензии и имеет рН 7,4.

При сравнении с полужидким агаром по Эдвардсу и Юингу, не содержащим данной основы, данная основа в 2 раза увеличивала скорость выделения (индикации микроорганизмов в исследуемом образце) и культивирования (наращивания биомассы) Escherichia coli (M 17), Enterobacter aerogenes, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae.

Основа не обладает неприятным запахом.

Пример 19. Для получения основы свежесобранные фекалии человека суспендируют в стерильном 0,9% водном растворе натрия хлорида. Затем полученную суспензию освобождают от нерастворенных частиц размером более 2 мм, добавляют целевые добавки (пептический перевар животной ткани, гидролизат казеина, дрожжевой экстракт, L-лизина гидрохлорид, глюкозу, железа аммонийного цитрат, бромкрезоловый пурпурный, агар-агар) для получения полужидкой питательной среды, доводят до рН 6,6 и стерилизуют автоклавированием при температуре 120°С в течение 15 минут.

Основа для выделения или культивирования микроорганизмов представляет собой автоклавированную полужидкую питательную среду с фекалиями человека с размером взвешенных частиц не более 2 мм, содержит 1 г фекалий, 36 г целевых добавок (пептический перевар животной ткани, гидролизат казеина, дрожжевой экстракт, L-лизина гидрохлорид, глюкозу, железа аммонийного цитрат, бромкрезоловый пурпурный, агар-агар) на 1 л суспензии и имеет рН 6,6.

При сравнении с полужидкой комбинированной средой с лизином, не содержащим данной основы, данная основа в 2 раза увеличивала скорость выделения (индикации микроорганизмов в исследуемом образце) и культивирования (наращивания биомассы) Escherichia coli (M 17), Enterobacter aerogenes, Proteus vulgaris, Klebsiella pneumoniae.

Основа не обладает неприятным запахом.

Пример 20. Для получения основы свежесобранные фекалии человека суспендируют в стерильном 0,9% водном растворе натрия хлорида. Затем полученную суспензию освобождают от нерастворенных частиц размером более 2 мм, добавляют целевые добавки (бульон Мартена, глюкоза, кусочки печени, агар-агар) для получения полужидкой питательной среды, доводят до рН 7,4 и стерилизуют автоклавированием при температуре 120°С в течение 30 минут.

Основа для выделения или культивирования микроорганизмов представляет собой автоклавированную полужидкую питательную среду с фекалиями человека с размером взвешенных частиц не более 2 мм, содержит 3 г фекалий, 300 г целевых добавок (бульон Мартена, глюкоза, кусочки печени, агар-агар) на 1 л суспензии и имеет рН 7,4.

При сравнении с полужидким агаром Тароцци, не содержащим данной основы, данная основа в 2 раза увеличивала скорость выделения (индикации микроорганизмов в исследуемом образце) и культивирования (наращивания биомассы) Bacteroides fragilis.

Основа не обладает неприятным запахом.

Пример 21. Для получения основы свежесобранные фекалии собаки суспендируют в стерильном 0,9% водном растворе натрия хлорида. Затем полученную суспензию освобождают от нерастворенных частиц размером более 2 мм, добавляют целевые добавки (агар питательный сухой) для получения плотной питательной среды, доводят до рН 7,4 и стерилизуют автоклавированием при температуре 120°С в течение 15 минут.

Основа для выделения или культивирования микроорганизмов представляет собой автоклавированную плотную питательную среду с фекалиями собаки с размером взвешенных частиц не более 2 мм, содержит 0,1 г фекалий, 5 г целевых добавок (агар питательный сухой) на 1 л суспензии и имеет рН 7,4.

При сравнении с мясопептонным агаром, не содержащим данной основы, данная основа в 3 раза увеличивала скорость выделения (индикации микроорганизмов в исследуемом образце) и культивирования (наращивания биомассы) Escherichia coli (M 17), Staphylococcus epidermitidis. Данная основа обеспечивала выделение и культивирование Enteroccocus faecalis, Enteroccocus faecium, Candida albicans.

Основа не обладает неприятным запахом.

Пример 22. Для получения основы свежесобранные фекалии коровы суспендируют в стерильном 0,9% водном растворе натрия хлорида. Затем полученную суспензию освобождают от нерастворенных частиц размером более 2 мм, добавляют целевые добавки (мясопептонный бульон, калия гидрофосфат, калия дигидрофосфат, агар-агар) для получения плотной питательной среды, доводят до рН 6,0 и стерилизуют автоклавированием при температуре 120°С в течение 15 минут.

Основа для выделения или культивирования микроорганизмов представляет собой автоклавированную плотную питательную среду с фекалиями коровы с размером взвешенных частиц не более 2 мм, содержит 0,1 г фекалий, 300 г целевых добавок (мясопептонный бульон, калия гидрофосфат, калия дигидрофосфат, агар-агар) на 1 л суспензии и имеет рН 6,0.

При сравнении с полужидким мясопептонным агаром, не содержащим данной основы, данная основа в 3 раза увеличивала скорость выделения (индикации микроорганизмов в исследуемом образце) и культивирования (наращивания биомассы) Escherichia coli (M 17), Staphylococcus epidermitidis. Данная основа обеспечивала выделение и культивирование Enteroccocus faecalis, Enteroccocus faecium, Candida albicans.

Основа не обладает неприятным запахом.

Пример 23. Для получения основы свежесобранные фекалии человека суспендируют в стерильном 0,9% водном растворе натрия хлорида. Затем полученную суспензию освобождают от нерастворенных частиц размером более 2 мм, добавляют целевые добавки (настой печени, протеозопептон, натрия b-глицерофосфат, натрия хлорид, агар-агар) для получения плотной питательной среды, доводят до рН 7,0 и стерилизуют автоклавированием при температуре 120°С в течение 15 минут.

Основа для выделения или культивирования микроорганизмов представляет собой автоклавированную плотную питательную среду с фекалиями человека с размером взвешенных частиц не более 2 мм, содержит 2 г фекалий, 33 г целевых добавок (настой печени, протеозопептон, натрия b-глицерофосфат, натрия хлорид, агар-агар) на 1 л суспензии и имеет рН 7,0.

При сравнении со средой для культивирования амеб, не содержащей данной основы, данная основа в 3 раза увеличивала скорость выделения (индикации микроорганизмов в исследуемом образце) и культивирования (наращивания биомассы) Entamoeba histolytica.

Основа не обладает неприятным запахом.

Пример 24. Для получения основы свежесобранные фекалии человека суспендируют в стерильном 0,9% водном растворе натрия хлорида. Затем полученную суспензию освобождают от нерастворенных частиц размером более 2 мм, добавляют целевые добавки (папаиновый перевар соевой муки, биопептон, дрожжевой экстракт, говяжий экстракт, кислота аскорбиновая, магния сульфат, лактозу, динатрий b-глицерофосфат, агар-агар) для получения плотной питательной среды, доводят до рН 7,1 и стерилизуют автоклавированием при температуре 120°С в течение 15 минут.

Основа для выделения или культивирования микроорганизмов представляет собой автоклавированную плотную питательную среду с фекалиями человека с размером взвешенных частиц не более 2 мм, содержит 2 г фекалий, 42 г целевых добавок (папаиновый перевар соевой муки, биопептон, дрожжевой экстракт, говяжий экстракт, кислота аскорбиновая, магния сульфат, лактозу, динатрий b-глицерофосфат, агар-агар) на 1 л суспензии и имеет рН 7,1.

При сравнении с агаром M 17, не содержащим данной основы, данная основа в 3 раза увеличивала скорость выделения (индикации микроорганизмов в исследуемом образце) и культивирования (наращивания биомассы) Lactobacillus plantarum, в 2 раза увеличивала скорость выделения (индикации микроорганизмов в исследуемом образце) и культивирования (наращивания биомассы) Enterococcus faecalis.

Основа не обладает неприятным запахом.

Пример 25. Для получения основы свежесобранные фекалии человека суспендируют в стерильном 0,9% водном растворе натрия хлорида. Затем полученную суспензию освобождают от нерастворенных частиц размером более 2 мм, добавляют целевые добавки (папаиновый перевар соевой муки, биопептон, дрожжевой экстракт, говяжий экстракт, кислота аскорбиновая, магния сульфат, лактозу, динатрий b-глицерофосфат, агар-агар) для получения плотной питательной среды, доводят до рН 7,1 и стерилизуют автоклавированием при температуре 120°С в течение 15 минут.

Основа для выделения или культивирования микроорганизмов представляет собой автоклавированную плотную питательную среду с фекалиями человека с размером взвешенных частиц не более 2 мм, содержит 10 г фекалий, 42 г целевых добавок (папаиновый перевар соевой муки, биопептон, дрожжевой экстракт, говяжий экстракт, кислота аскорбиновая, магния сульфат, лактозу, динатрий b-глицерофосфат, агар-агар) на 1 л суспензии и имеет рН 7,1.

При сравнении с агаром M 17, не содержащим данной основы, данная основа в 3 раза увеличивала скорость выделения (индикации микроорганизмов в исследуемом образце) и культивирования (наращивания биомассы) Lactobacillus plantarum, подавляла в 2 раза скорость роста Enterococcus faecalis.

Основа не обладает выраженным неприятным запахом.

Изобретение относится к микробиологии. Основа для выделения или культивирования микроорганизмов представляет собой автоклавированную суспензию фекалий млекопитающих с размером взвешенных частиц не более 2 мм, содержит 10^-7-10 г фекалий на 1 л суспензии и имеет рН 6,0-7,6. Основа может дополнительно содержать целевые добавки для получения жидкой или полужидкой, или плотной питательной среды в количестве 5-300 г/л. Изобретение позволяет повысить эффективность выделения и культивирования микроорганизмов за счет стимуляции или селективного дозозависимого ингибирования роста микроорганизмов при снижении концентрации фекалий, упростить процесс получения заявляемой основы. 1 з.п. ф-лы.

1. Основа для выделения и культивирования микроорганизмов, содержащая ингредиенты из фекалий млекопитающих, отличающаяся тем, что она представляет собой автоклавированную суспензию фекалий млекопитающих с размером взвешенных частиц не более 2 мм, содержит 10^-7-10 г фекалий на 1 л суспензии и имеет рН 6,0-7,6.2. Основа по п.1, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит целевые добавки для получения жидкой или полужидкой, или плотной питательной среды в количестве 5-300 г/л.