2-ЦИКЛОАЛКИЛИМИНО-5-(4-НИТРОФЕНИЛ)-1,3,4-ТИАДИАЗИНЫ, ОБЛАДАЮЩИЕ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ ПРОТИВ ВИРУСОВ ОСПЫ Российский патент 2006 года по МПК C07D417/04 C07D285/16 A61K31/549 A61P31/12 

Описание патента на изобретение RU2281946C1

Изобретение относится к области биологически активных соединений, касается разработки новых производных 1,3,4-тиадиазинов, и предназначено для лечения и профилактики заболеваний, вызываемых патогенными для человека и животных вирусами, а также вирусом оспавакцины (лечение поствакцинальных осложнений).

Проблема разработки противовирусных препаратов актуальна на протяжении всего периода существования человечества. Среди вирусных инфекций выделяются такие возбудители особо опасных вирусных инфекций, как вирус натуральной оспы, вызывающий тяжелое заболевание у человека с летальностью до 60%. Наиболее эффективным способом профилактики натуральной оспы является вакцинация с использованием вируса осповакцины, однако при проведении массовой вакцинации возможно появление значительного количества поствакцинальных осложнений. Кроме того, в природе вирус оспы существует у коров, который способен вызывать заболевание и у человека. В экваториальной Африке в последние годы отмечаются вспышки оспы обезьян с летальность до 10-20%. Таким образом, необходимо наличие высокоэффективных противовирусных препаратов, которые бы обладали высокой активностью, умеренной токсичностью и продолжительным действием против вирусов оспы, патогенных для человека и животных.

Вирусы - это внутриклеточные паразиты, которые не имеют независимого метаболизма и могут размножаться только в живых клетках организма. Так как процессы репликации вирусов тесно связаны с метаболизмом клеток организма, то можно понять, как сложно создать лекарственные средства, оказывающие избирательное противовирусное действие.

Направленность действия противовирусных препаратов может быть различной и касаться разных стадий взаимодействия вируса с клеткой.

Такие препараты, в основном, действуют следующим образом:

- угнетают адсорбцию вируса на клетке или проникновение его в клетку, а также процесс высвобождения вирусного генома;

- угнетают синтез «ранних» вирусных белков-ферментов (гуанидин);

- угнетают синтез нуклеиновых кислот (индоксуридин - ингибитор синтеза ДНК, актиномицин D-ингибитор синтеза РНК);

- угнетают «сборку» вирионов, угнетая синтез вирусного структурного белка;

- повышают резистентность клетки к вирусу (интерфероны).

Одним из механизмов действия ранее известных 2-циклоалкилимино-5-арил-1,3,4-тиадиазинов является связывание их с активными группировками макромолекул субстратов - рецепторами [2]. Для этих соединений найдено редкое сочетание серотонино-, адрено- и холиноблокирующих свойств. Такая «обширная блокада» рецепторов клетки позволяет предположить как наиболее вероятную направленность действия для заявляемых препаратов - угнетение проникновения вируса в клетку.

Предшествующий уровень техники

На фармацевтическом рынке в настоящее время практически нет препаратов, активных в отношении вирусов группы оспы; в этой связи разработка таких веществ может стать важным шагом в фармакологической безопасности жизни людей.

Существующий препарат метисазон (Марборан®) обладает только профилактической, но не лечебной активностью в отношении вируса натуральной оспы. Препарат цидофовир (Vistide®) проходит в настоящее время исследования как профилактический или лечебный препарат, но пока его исследования не закончены.

В ряду 2-циклоалкилимино-5-арил-1,3,4-тиадиазинов, к которым принадлежат заявляемые новые соединения, связь «структура - свойство» очень чувствительна: известен целый ряд их производных, имеющих небольшие отличия в структуре - другие заместители в фенильном кольце и различные циклоалкилимины в положении-2 1,3,4-тиадиазинового кольца, которые обладают сердечно-сосудистым и снижающим метаболизм животных действием [1]. Известны также данные о биологической активности близких по структуре к заявляемым для патентования соединений: 2-морфолино-5-фенил-1,3,4-тиадиазин, гидрохлорида и еще более близкого - 2-пирролидино-5-(4-хлорфенил)-1,3,4-тиадиазин, гидробромида, которые обладают нейропсихотропной активностью [2]:

Данное соединение отличается по структуре от заявляемых тем, что в качестве заместителя в фенильном кольце содержит хлор-, а не нитрогруппу. Все вышеупомянутые соединения не обладают противовирусной активностью и противовирусным действием в отношении вирусов оспы, патогенных для человека и животных.

Раскрытие изобретения

Техническим результатом предлагаемого изобретения является нахождение новых химических соединений - производных 1,3,4-тиадиазина, обладающих противовирусным действием, в частности в отношении вирусов оспы, патогенных для человека.

Указанный технический результат достигается тем, что согласно изобретению предложены новые 2-циклоалкилимино-5-(4-нитрофенил)-1,3,4-тиадиазины, обладающие биологической активностью против вирусов оспы и имеющие общую формулу 1.

где пиперидино; пирролидино; метилпиперазино; гексаметиленимино.

Примеры синтеза и физико-химические характеристики заявляемых соединений

Все соединения получены с выходом 60-80% путем конденсации α-бром-4-нитроацетофенона с соответствующими 4,4-циклоалкилиминоосемикарбазидами [3], протекающей гладко при нагревании в этаноле. Строение соединений доказано спектральными данными 1Н ЯМР. Чистота соединений подтверждается элементным анализом.

Пример 1.

2-Пиперидино-5-(4-нитрофенил)-1,3,4-тиадиазин, гидробромид (1).

Соединение 1 получено нагреванием на водяной бане в течение 20 минут в 50 мл абсолютного этанола 2.5 г (0.01 моль) α-бром-4-нитроацетофенона с 1.6 г (0.01 моль) 4,4-пентаметилентиосемикарбазида и 1,4 мл концентрированной HBr.

Смесь охлаждают льдом до получения желтого осадка. Продукт кристаллизуют из этанола с добавлением нескольких капель HBr (конц.). Выход 68%.

Т.пл. 214-215°С. Найдено, %: С 44.1; Н 4.7; N 14.3. С14H17BrN4O2S. Вычислено, %: С 43.8; Н 4.4; N 14.5. 1H ЯМР в DMSO-d6, δ, ppm: 1.5-1.8 [6Н, m, (СН2)3, пиперидино]; 3.6-3.8 [4Н, m, N(CH2)2, пиперидино]; 3.27 (2Н, s, CH2S); 8.1, 8.3 (4Н, dd, С6Н4).

Пример 2

2-Пирролидино-5-(4-нитрофенил)-1,3,4-тиадиазин, гидробромид (2).

Соединение 2 получено аналогично 1 нагреванием 2.5 г (0.01 моль) α-бром-4-нитроацетофенона с 1.45 г (0.01 моль) 4,4-тетраметилентиосемикарбазида.

Выход 54%. Т.пл. 211-212°С Найдено, %: С 41.7; Н 4.0; N 5.3. C13H15BrN4O2S. Вычислено, %: С 42.05; Н 4.07; N 15.1. 1Н ЯМР в DMSO-d6, δ, ppm: 2,1 [4H, m, (CH2)2, пирролидино]; 3.7 [4Н, m, N(CH2)2, пирролидино]; 4,45 (2Н, s, CH2S); 7.7, 7.8 (4Н, dd, С6Н4).

Пример 3

2-(N-метилпиперазино)-5-(4-нитрофенил)-1,3,4-тиадиазин, дигидробромид (3).

Соединение 3 получено аналогично 1 нагреванием 2.5 г (0.01 моль) α-бром-4-нитроацетофенона с 1.74 г (0.01 моль) N-метилпиперазинида тиокарбазиновой кислоты. Выход 82%. Т.пл. 223-224°С. Найдено, %: С 34.5; Н 4.2; N 14.3. C14H19Br2N5O2S. Вычислено, %: С 34.7; Н 4.0; N 14.5. 1H ЯМР в DMSO-d6, δ, ppm: 3,6 [8 Н, m, метилпиперазино]; 4,4 (2Н, s, CH2S); 7.4, 7.8 (4Н, dd, С6H4).

Пример 4

2-Гексаметиленимино-5-(4-нитрофенил)-1,3,4-тиадиазин, гидробромид (4).

Соединение 4 получено аналогично 1 нагреванием 2.5 г (0.01 моль) α-бром-4-нитроацетофенона с 1.73 г (0.01 моль) 4,4-гексаметилентиосемикарбазида. Выход 75%. Т.пл. 220-221°С. Найдено, %: С 45,3; Н 4,9; N 13,8. C15H19BrN4O2S. Вычислено, %: С 45,1; Н 4,8; N 14,0. 1H ЯМР в DMSO-d6, δ, ppm: 1.7-1.9 [8Н, m, (CH2)4, гексаметиленимино]; 3.95 [4Н, m, N(CH2)2, гексаметиленимино]; 4,5 (2Н, s, CH2S); 8.2, 8.4 (4Н, dd, С6Н4).

Исследование противовирусной активности заявляемых соединений

Оценка противовирусного действия заявляемых соединений 1-4 проведена в Государственном научном центре вирусологии и биотехнологии «Вектор». Для оценки использовали следующую методику.

Культуру клеток Vero или МК-2 выращивали в лунках плоскодонных 96-луночных планшетов. В культуральную среду добавляли серийные разведения исследуемых соединений и соответствующий вирус. После инкубирования в течение 3-5 суток монослой клеток прокрашивали витальным красителем нейтральным красным, после удаления красителя и отмывки его избытка вносили лизирующий раствор и количество красителя, включенного в монослой клеток, учитывали на спектрофотометре при длине волны 490 нм. В качестве контролей использовали лунки планшета, в которые вирус не вносили (контроль культуры клеток). Данная методика основана на способности тестируемых соединений предотвращать репродукцию вируса и его распространение от клетки к клетке, в связи с чем клетки не погибают и сохраняют способность фагоцитировать нейтральный красный.

В качестве исследуемых вирусов использовали вирус VV - осповакцины (штамм ЛИПВ), используемый для вакцинации населения, CPV - вирус оспы коров (штамм Гришак), MPV - вирус оспы обезьян (штамм Zair 599). Помимо ортопоксвирусов, патогенных для человека, для оценки противовирусной активности использовали вирус эктромелии оспы мышей (штамм МК-2).

Результаты изучения противовирусного действия соединений приведены в таблице.

Высокий индекс эффективности (IS=1527,8) был выявлен для соединения 1: 2-пиперидино-5-(4-нитрофенил)-1,3,4-тиадиазина, гидробромида как на вирусах оспавакцины, так и на вирусах оспы коров.

Для соединения 2: 2-пирролидино-5-(4-нитрофенил)-1,3,4-тиадиазина, гидробромида высокий индекс эффективности (IS=814,3) был выявлен только на вирусах осповакцины, а для соединения 3-2-метилпиперазино-5-(4-нитрофенил)-1,3,4-тиадиазина, гидробромида противовирусная эффективность (IS=413.5) была выявлена только на вирусах оспы мышей. Соединение 4: 2-циклогексиметиленимино-5-(4-нитрофенил)-1,3,4-тиадиазин, гидробромид оказалось токсичным, но проявило высокую активность на вирусах осповакцины (IC50=0,182 мг/мл).

Промышленная применимость.

Данные соединения могут быть использованы в качестве потенциальных фармакологически активных веществ для производства лекарств, позволяющих лечить оспу или поствакцинальные осложнения после вакцинации с использованием вируса осповакцины у человека и животных. Изобретение может быть использовано в медицине и ветеринарии, лечебных учреждениях, научно-исследовательских лабораториях.

Источники научно-технической информации

1. O.Н. Чупахин, Л.П. Сидорова и др. Патент РСТ Российской Федерации №2157210 (2000 г.).

2. Э.Ф. Лаврецкая, О.Н. Чупахин, Л.П. Сидорова и др., авт. свид. №1475126 (1988 г.).

3. В.Я. Казаков, И.Я. Постовский, ДАН СССР, т.4, с.824-827 (1960 г.).

Похожие патенты RU2281946C1

название год авторы номер документа
ЗАМЕЩЕННЫЕ 6H-1,3,4-ТИАДИАЗИН-2-АМИНЫ, ИХ ПРИМЕНЕНИЕ В КАЧЕСТВЕ АНЕСТЕЗИРУЮЩИХ, СЕРДЕЧНО-СОСУДИСТЫХ И ГИПОМЕТАБОЛИЧЕСКИХ СРЕДСТВ И СОДЕРЖАЩИЕ ИХ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ 1995
  • Чупахин О.Н.(Ru)
  • Сидорова Л.П.(Ru)
  • Тарахтий Э.А.(Ru)
  • Новикова А.П.(Ru)
  • Перова Н.М.(Ru)
  • Виноградов В.А.(Ru)
  • Мишель Францискус Ван Гинкель
RU2157210C2
ЗАМЕЩЕННЫЕ 5R,6R 1,3,4-ТИАДИАЗИН-2 АМИНЫ И СОДЕРЖАЩИЕ ИХ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ В КАЧЕСТВЕ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ СРЕДСТВ, ОБЛАДАЮЩИХ АНТИКОАГУЛЯНТНЫМ И АНТИАГРЕГАНТНЫМ ДЕЙСТВИЕМ 2003
  • Чупахин О.Н.
  • Сидорова Л.П.
  • Перова Н.М.
  • Чарушин В.Н.
  • Русинов В.Л.
  • Муляр А.Г.
RU2259371C2
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИ ПРИЕМЛЕМЫЕ СОЛИ ЗАМЕЩЕННЫХ 6H-1,3,4-ТИАДИАЗИН-2-АМИНОВ И ИХ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ 1995
  • Чупахин О.Н.(Ru)
  • Сидорова Л.П.(Ru)
  • Тарахтий Э.А.(Ru)
  • Новикова А.П.(Ru)
  • Перова Н.М.(Ru)
  • Виноградов В.А.(Ru)
  • Мишель Францискус Ван Гинкель
RU2152943C1
5-(4'-ГИДРОКСИФЕНИЛ)- И 5-(2',5'-ДИГИДРОКСИФЕНИЛ)-6Н-1,3,4-ТИАДИАЗИН-2-АМИНЫ, ГИДРОГАЛАГЕНИДЫ, ИНГИБИРУЮЩИЕ АГРЕГАЦИЮ ТРОМБОЦИТОВ ПРИ ВНУТРИВЕННОМ ВВЕДЕНИИ 2009
  • Чупахин Олег Николаевич
  • Сидорова Лариса Петровна
  • Петрова Наталья Михайловна
  • Новикова Антонина Петровна
  • Русинов Владимир Леонидович
  • Макаров Владимир Александрович
  • Васильева Татьяна Михайловна
RU2458060C2
2-ЦИКЛОАЛКИЛАМИНО-5-ТИЕНИЛ-1,3,4-ТИАДИАЗИНЫ ГИДРОБРОМИДЫ, ОБЛАДАЮЩИЕ АНТИАГРЕГАНТНЫМ ДЕЙСТВИЕМ 2008
  • Чупахин Олег Николаевич
  • Сидорова Лариса Петровна
  • Перова Наталья Михайловна
  • Русинов Владимир Леонидович
  • Макаров Владимир Александрович
  • Васильева Татьяна Михайловна
  • Воробьев Андрей Иванович
RU2379306C1
Производные 1-гидрокси- и 1-метокси-2-(4-нитрофенил)имидазола, обладающие противовирусной активностью в отношении ортопоксвирусов 2022
  • Басанова Елизавета Ивановна
  • Никитина Полина Андреевна
  • Перевалов Валерий Павлович
  • Шишкина Лариса Николаевна
  • Бормотов Николай Иванович
  • Серова Ольга Алексеевна
  • Мазурков Олег Юрьевич
RU2794763C1
2-ПИПЕРИДИНО-5-(ТИЕНИЛ-2)- И 2-ПИПЕРИДИНО-5-(ТИЕНИЛ-3)-6Н-1,3,4-ТИАДИАЗИНЫ ГИДРОБРОМИДЫ, ОБЛАДАЮЩИЕ АНТИАГРЕГАНТНЫМ ДЕЙСТВИЕМ 2010
  • Чупахин Олег Николаевич
  • Сидорова Лариса Петровна
  • Перова Наталья Михайловна
  • Русинов Владимир Леонидович
  • Макаров Владимир Александрович
  • Васильева Татьяна Михайловна
RU2445310C2
2-АМИНОПРОПИЛМОРФОЛИНО-5-АРИЛ-6Н-1,3,4-ТИАДИАЗИНЫ, ДИГИДРОБРОМИДЫ И 2-АМИНОПРОПИЛМОРФОЛИНО-4-АРИЛТИАЗОЛЫ, ГИДРОБРОМИДЫ, ОБЛАДАЮЩИЕ АНТИАГРЕГАНТНЫМ ДЕЙСТВИЕМ 2011
  • Чупахин Олег Николаевич
  • Сидорова Лариса Петровна
  • Перова Наталья Михайловна
  • Русинов Владимир Леонидович
  • Макаров Владимир Александрович
  • Логвинова Юлия Сергеевна
  • Васильева Татьяна Михайловна
RU2456284C1
ПРОТИВОВИРУСНОЕ СРЕДСТВО 2009
  • Селиванов Борис Алексеевич
  • Тихонов Алексей Яковлевич
  • Беланов Евгений Федорович
  • Бормотов Николай Иванович
  • Балахнин Сергей Маркович
  • Серова Ольга Алексеевна
  • Святченко Виктор Александрович
  • Киселев Николай Николаевич
  • Казачинская Елена Ивановна
  • Локтев Валерий Борисович
  • Дроздов Илья Геннадиевич
  • Ставский Евгений Александрович
RU2423359C1
Ингибитор вируса гепатита В (ВГВ), представляющий собой производные N-{ 3-[6-(диалкиламино)пиридазин-3-ил]фенил} арилсульфонамида и производные N-{ 4-[6-(диалкиламино)пиридазин-3-ил]фенил} арилсульфонамида 2019
  • Иващенко Андрей Александрович
  • Иващенко Александр Васильевич
  • Савчук Николай Филиппович
  • Митькин Олег Дмитриевич
  • Кравченко Дмитрий Владимирович
  • Коваленко Сергей Николаевич
  • Бунятян Наталья Дмитриевна
RU2738848C1

Реферат патента 2006 года 2-ЦИКЛОАЛКИЛИМИНО-5-(4-НИТРОФЕНИЛ)-1,3,4-ТИАДИАЗИНЫ, ОБЛАДАЮЩИЕ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ ПРОТИВ ВИРУСОВ ОСПЫ

Изобретение относится к новым 2-циклоалкилимино-5-(4-нитрофенил)-1,3,4-тиадиазинам общей формулы I:

где пиперидино; пирролидино; метилпиперазино; гексаметиленимино, которые обладают биологической активностью против вирусов оспы. Технический результат - получены новые биологически активные соединения, обладающие противовирусным действием, в частности в отношении вирусов оспы. 1 н.п. ф-лы, 1 табл.

Формула изобретения RU 2 281 946 C1

2-Циклоалкилимино-5-(4-нитрофенил)-1,3,4-тиадиазины, обладающие биологической активностью против вирусов оспы и имеющие общую формулу

где пиперидино; пирролидино; метилпиперазино; гексаметиленимино.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2006 года RU2281946C1

ЗАМЕЩЕННЫЕ 6H-1,3,4-ТИАДИАЗИН-2-АМИНЫ, ИХ ПРИМЕНЕНИЕ В КАЧЕСТВЕ АНЕСТЕЗИРУЮЩИХ, СЕРДЕЧНО-СОСУДИСТЫХ И ГИПОМЕТАБОЛИЧЕСКИХ СРЕДСТВ И СОДЕРЖАЩИЕ ИХ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ 1995
  • Чупахин О.Н.(Ru)
  • Сидорова Л.П.(Ru)
  • Тарахтий Э.А.(Ru)
  • Новикова А.П.(Ru)
  • Перова Н.М.(Ru)
  • Виноградов В.А.(Ru)
  • Мишель Францискус Ван Гинкель
RU2157210C2
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИ ПРИЕМЛЕМЫЕ СОЛИ ЗАМЕЩЕННЫХ 6H-1,3,4-ТИАДИАЗИН-2-АМИНОВ И ИХ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ 1995
  • Чупахин О.Н.(Ru)
  • Сидорова Л.П.(Ru)
  • Тарахтий Э.А.(Ru)
  • Новикова А.П.(Ru)
  • Перова Н.М.(Ru)
  • Виноградов В.А.(Ru)
  • Мишель Францискус Ван Гинкель
RU2152943C1
ЗАМЕЩЕННЫЕ 5R,6R 1,3,4-ТИАДИАЗИН-2 АМИНЫ И СОДЕРЖАЩИЕ ИХ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ В КАЧЕСТВЕ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ СРЕДСТВ, ОБЛАДАЮЩИХ АНТИКОАГУЛЯНТНЫМ И АНТИАГРЕГАНТНЫМ ДЕЙСТВИЕМ 2003
  • Чупахин О.Н.
  • Сидорова Л.П.
  • Перова Н.М.
  • Чарушин В.Н.
  • Русинов В.Л.
  • Муляр А.Г.
RU2259371C2
Г. Н. АНИСИМОВ,--ir-тт.-/^-»-"'';БкШЛйО liiixA 0
  • О. А. Кремнев, В. Р. Боровский, А. Свердличенко, Л. Ъао В. Г. Новиикий, Н. Т. Кошелев, Р. А. Кукров Ю. Г. Ншх Кля
SU276804A1

RU 2 281 946 C1

Авторы

Чупахин Олег Николаевич

Сидорова Лариса Петровна

Русинов Владимир Леонидович

Беланов Евгений Федорович

Балахнин Сергей Маркович

Бормотов Николай Иванович

Сандахчиев Лев Степанович

Даты

2006-08-20Публикация

2005-09-21Подача