СПОСОБ УВЕЛИЧЕНИЯ ВЫЖИВАЕМОСТИ ИЗОЛИРОВАННОГО КОЖНОГО ЛОСКУТА "НА НОЖКЕ" У ЖИВОТНЫХ С ПОНИЖЕННЫМ АНТИОКСИДАНТНЫМ ФОНОМ Российский патент 2006 года по МПК A61K31/7048 A61K9/22 

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной фармакологии и кардиологии.

Прототипом данного изобретения является: «Методические рекомендации по количественной оценке влияния лекарственных препаратов на жизнеспособность тканей в условиях редуцированного кровообращения». Одобрено Фарм. комитетом Минздрава СССР 16.05.1986. Протокол №9 (Авторы: Любимов Б.И., Шолохов В.М. и др.).

Моделирование оценки зоны асептического некроза в условиях редуцированного кровообращения и выживаемости ишемизированных тканей в условиях пониженного антиоксидантного фона является отличительным дополнением к используемому прототипу.

В настоящее время для ограничения зоны асептического некроза в условиях редуцированного кровообращения, а следовательно, для увеличения выживаемости ишемизированных тканей используются следующие антиоксидантные вещества.

Классификация соединений с антиоксидантной активностью по механизму действия.

1. Средства, тормозящие развитие ПОЛ.

1.1. Стабилизаторы полиненасыщенных жирных кислот в отношении фосфолипазы А и ингибиторы фосфолипаз.

1.2. Ингибиторы ксантиноксидазы, миелопероксидазы, циклооксигеназ, липоксикиназ и других активаторов ПОЛ.

1.3. Стабилизаторы эндогенных ферментных антиоксидантных систем (СОД, каталаза, церулоплазмин).

2. Средства, взаимодействующие с активными формами кислорода, гидролипоперикисями и другими первичными продуктами ПОЛ: ловушки свободных радикалов (фенольные соединения, флаваноиды и серосодержащие соединения, α-токоферол и другие соединения).

3. Средства, тормозящие католиз ПОЛ Fe²⁺ и другими металлами (цирулоплазмин, гистидинсодержащие дипептиды - карнозин, ансерин, ЭДТА, цитрат, цианиды и др.).

4. Структурные антиоксиданты, влияющие на стационарность обмена фосфолипидов в мембранных структурах (стероиды и другие мембрано-стабилизаторы).

5. Активаторы протонов, потенциирующие эффект фенольных и некоторых других антиоксидантов (аскорбат, цитрат).

В то же время лечение этими веществами имеет определенные недостатки. Одним из недостатков является то, что все из перечисленных антиоксидантных веществ оказывают системное воздействие на антиоксидантный фон организма, что в настоящее время рассматривается как неблагоприятный фактор с точки зрения возникновения побочных эффектов. Поэтому представляет особый интерес препараты с преимущественно внесистемным локальным антиоксидантным действием, что наиболее выгодно при органной патологии, связанной с ишемией.

Для устранения этого недостатка используется макролидный антибиотик азитромицин в концентрациях 10 и 30 мг/кг, который специфически накапливается в активированных нейтрофилах и транспортируется в них к зоне асептического воспаления, где, выделяясь в неизменном виде, снижает «окислительный взрыв», индуцированный нейтрофилами, тем самым уменьшает повреждающее действие прооксидантов на ишемизированный участок изолированного кожного лоскута (Страчунский Л.С., Козлов С.И. Макролиды в современной клинической практике, 1998).

Задачей изобретения является расширение ассортимента антиоксидантных средств.

Поставленная задача достигается за счет того, что с целью увеличения выживаемости изолированного кожного лоскута «на ножке» у животных с низким антиоксидантным фоном (НАФ) используется макролидный препарат азитромицин. По данным литературы препарат наиболее эффективен в диапазоне от 10 до 30 мг/кг (Страчунский Л.С., Козлов С.И. Макролиды в современной клинической практике, 1998). Нами использовалась малая доза -10 мг/кг и большая доза - 30 мг/кг азитромицина.

Способ осуществлялся следующим образом.

Опыты были выполнены на белых крысах-самцах линии Wistar массой 230-300 г. Низкий антиоксидантный фон (НАФ) организма достигался моделированием эмоционально-болевого стресса путем подвешивания крыс за дорсальную складку кожи на 24 часа (Г.В.Ковалев, 1987). На вторые сутки производили изолирование кожного лоскута передней брюшной стенки размером 1×4 см на 7 суток (В.Н.Шолохов, 1984 ). Ежедневно перорально вводили азитромицин в дозах 10 и 30 мг/кг один раз в день.

Антиоксидантный эффект препарата оценивался по сравнению величины зоны некроза между экспериментальными группами животных без лечения и с лечением азитромицином в дозах 10 и 30 мг/кг. А также оценивалось влияние азитромицина на показатели общей активности перекисного окисления липидов (ПОЛ) в миокарде путем определения промежуточных продуктов ПОЛ: первичных - кетодиенов, диеновых коньюгатов (ДК), вторичных - МДА, конечных продуктов - антиокислительной активности (АОА) плазмы (Камилов Ф.X., Винькова Г.А., Орлова Н.С., 1999; Стальная Н.Д., 1977; Двинская Л.М., Никифорова Л.И., 1980; ; Bidlack W.R.., 1973; Владимиров Ю.А., Арчаков А.И., 1972).

Пример. Для определения задач изобретения были сформулированы следующие группы:

- Контрольная (n=10);

- Азитромицин 10 мг/кг (n=10);

- Азитромицин 30 мг/кг (n=10).

Во всех группах производили ЭБС, на 2-е сутки проводили изолирование кожного лоскута «на ножке». Каждый день животные 2-й и 3-й групп получали внутрижелудочно азитромицин 1 раз в день. Через 7 дней измеряли зону некроза кожного лоскута, а так же производили забор крови для определения продуктов ПОЛ.

Полученные результаты представлены в таблице №1.

Таблица №1.Экспериментальная группа% зоны некрозаСодержаниеКетодиеновДиеновых коньюгатовМалонового диальдегидаШиффовых основанийАнтиокислительной активности плазмыКонтроль76,07±2,830,54±0,010,70±0,010,62±0,010,21±0,0114,68±0,05Азитромицин 10 мг/кг68,89±1,26*0,23±0,01*0,47±0,01*0,67±0,030,18±0,0214,36±2,24Азитромицин 30 мг/кг61,25±1,42*0,24±0,01*0,50±0,01*0,62±0,010,19±0,0120,25±5,60* при р<0,05 в сравнении с контрольной группой

Как видно из таблицы, азитромицин снижал зону некротизированной ткани, при этом содержание первичных маркеров интенсивности ПОЛ достоверно снижалось (кетодиены, ДК).

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о способности азитромицина дозозависимо увеличивать выживаемость кожного лоскута в условиях редуцированного кровообращения при НАФ, реализуемой через антиоксидантный эффект препарата.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной фармакологии и кардиологии. С целью ограничения асептического очага воспаления ишемизированных тканей в условиях редуцированного кровообращения используют макролидный препарат азитромицин. Препарат используют в концентрациях 10 и 30 мг/кг один раз в сутки в течение 7 дней. Затем производят замеры зоны некроза кожного лоскута и определяют показатели интенсивности перекисного окисления липидов. Способ позволяет расширить ассортимент антиоксидантных средств. 1 табл.

Способ увеличения выживаемости изолированного кожного лоскута "на ножке" у животных с пониженным антиоксидантным фоном, отличающийся тем, что используют макролидный препарат азитромицин в концентрациях 10 и 30 мг/кг один раз в сутки в течение 7 дней.