ПРОИЗВОДНЫЕ ДИКАРБОНОВЫХ КИСЛОТ, ИНГИБИТОРЫ МЕТАСТАЗОВ И СРЕДСТВА, ПОВЫШАЮЩИЕ ХИМИОТЕРАПЕВТИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ПРЕПАРАТОВ, СПОСОБ УСИЛЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ ЦИТОСТАТИКОВ, СПОСОБ ИНГИБИРОВАНИЯ ПРОЦЕССА МЕТАСТАЗИРОВАНИЯ Российский патент 2007 года по МПК C07C259/06 A61K31/16 A61P35/04 

Изобретение относится к производным дикарбоновых кислот, которые являются физиологически активными веществами и могут быть использованы в медицинской практике в качестве малотоксичных средств для усиления противоопухолевой и антиметастатической активности известных цитостатиков в цитостатической химиотерапии опухолей. Конкретно настоящее изобретение относится к моно- и диоксиамидам дикарбоновых кислот общей формулы 2

где R=HONHCO; HONHCOCH(OH)CH(OH); НООССН₂CH₂, НООССН=СН.

Соединения формулы 2 являются физиологически активными веществами и могут быть использованы в качестве средств усиления противоопухолевого и антиметастатического эффектов цитостатиков. Кроме того, эти соединения не вызывают в отличие от ксенобиотиков развития комплекса сложных реакций для нейтрализации последних с использованием значительных энергоресурсов клетки [Саприн А.Н. Ферменты метаболизма и детоксикации ксенобиотиков. Успехи биол.химии, 1991, т.32, с. 146-175].

Известно, что цисплатин и циклофосфан используются самостоятельно или в комбинации с другими цитостатиками или в качестве лекарственных средств при лечении онкологических заболеваний [Противоопухолевая химиотерапия. Под редакцией Н.И.Перевозчиковой. Справочник. М.: Медицина, 1986 г.; Н.П.Коновалова, С.А.Гончарова, Л.М.Волкова, Т.А.Раевская, Л.Т.Еременко и А.М.Королев. Донор оксида азота повышает эффективность цитостатической терапии и задерживает развитие лекарственной резистентности, 2003, т.49, №1, с.71-75]. Однако, как правило, в химиотерапии лейкозов и некоторых других онкологических заболеваний для получения положительных эффектов используются максимально переносимые дозы цитостатиков, в связи с чем они проявляют очень высокую токсичность по отношению к теплокровным животным.

Задачей настоящего изобретения является разработка неизвестных ранее производных дикарбоновых кислот, обладающих малой токсичностью по отношению к теплокровным животным и позволяющих в минимальных дозах в сочетании с минимальными дозами известных цитостатиков достигать значительных терапевтических эффектов при комбинированной терапии лейкозов и ингибировании метастазов.

Новые соединения формулы 2 синтезировали по известному способу путем обработки алкиловых эфиров карбоновых кислот гидроксиламином (Ber. 1953, Bd 86, s.1186).

Изобретение характеризуется следующими примерами.

Пример 1. Дигидроксидиамид (+) винной кислоты. К 45 мл одномолярного раствора гидроксиламина в абс. метаноле прибавили по каплям при перемешивании и комн. температуре раствор 2,69 г (0,015 моля) диметилового эфира (+) винной кислоты в 10 мл абс. метанола, а затем оставляли при комнатной температуре на 2-3 суток. После чего отфильтровывали белый кристаллический осадок, высушивали его. Получено 1,33 г (73,8%) дигидроксидиамида (+) винной кислоты, т.пл. 170-171°С. Спектр ЯМР ¹Н ((ДМСО-d₆, δ, м.д., J, Гц) 4.22 (д. СН); 5.33 (д, ОН спирт); 8.75 (уш.с, NH); 10.38 (уш.с, ОН от СООН). Найдено (%): С 26.18; Н 4.16; N 15.25. C₄H₈N₂O₆. Вычислено (%): С 26.6; Н 4.44; N 15.6.

Пример 2. Монооксиамид малеиновой кислоты (ФБ-13). Реакцию проводили аналогично примеру 1. После обычной обработки получен монооксиамид малеиновой кислоты с выходом 74%, т.пл. 119-120°С. Найдено(%): С 36,50; Н 3,88; N 10,41. С₄Н₅NO₄. Вычислено: С 36,64; Н 3,82; N 10,69. ЯМР-спектр ¹Н ((ДМСО-d₆, 5, м.д.,); 10.0 (уш.c, 3H, COOH, NHOH); 6.25 (уш.д. 2Н, СН=СН).

Пример 3. Монооксиамид аспарагиновой кислоты (ФБ-14). Реакцию проводили аналогично примеру 1. Из 15 мл одномолярного раствора гидроксиламина и 0.0075 М метилового эфира аспарагиновой кислоты после обычной обработки получен монооксиамид аспарагиновой кислоты в виде белого кристаллического вещества, с выходом 69,5%, т.пл. 142-143°С, C₄H₈N₂O₄. Найдено(%): С 32,42; Н 5,6; N 19,00, Вычислено: С 32,43; Н 5,40; N 18,92. Спектр ЯМР ¹Н ((ДМСО-d₆, δ, м.д.), 8.35 (уш.с, 5Н, СООН, NH₂, NH, OH), 3.96 (м, 1Н, СН), 271 (м, 2Н, СН₂).

Пример 4. Монооксиамид янтарной кислоты. Реакцию проводили аналогично примеру 1. После обычной обработки получен монооксиамид янтарной кислоты в виде белого бесцветного вещества с выходом 70.2%.После обычной обработки и высушивания вещество имеет т.пл. 116-118°С. Выход 64%). Спектр ЯМР ¹Н ((ДМСО-d₆, δ, м.д.): 12.1 (с.уш, 1Н, ОН): 10.4 (с.уш, 1Н, СООН); 8.73 (с.уш. 1H, NH); 2.42 (T, 2Н, СН₂); 2.20 (т, 2Н, СН₂С=0). Найдено (%): С 35.94; Н 5.08; N 7.89. C₄H₇NO_4.. Вычислено (%): С 36.09; Н 5.26; N 10.5.

Экспериментальное исследование противоопухолевой активности препарата ФБ-13 в качестве хемосенсибилизатора проводили на опухолевых моделях лейкемии Р388 и метастазирующей карциноме легких Льюис, что видно на примерах 5 и 6.

Пример 5. Лейкемию Р388_прививали мышам-гибридам BDF₁ внутрибрюшинно. Инокулум составлял 10⁶ лейкемических клеток в 0,2 мл физиологического раствора.

Было исследовано совместное действие препарата ФБ-13 и цисплатина. Препарат вводили в дозе 10 мг/кг, цисплатин - 2 мг/кг на 1, 3, 5 и 7-е сутки после трансплантации. В качестве критерия оценки использовали число излеченных (проживших 60 суток) животных. При введении одного цисплатина этот показатель составлял 66,7%, при совместном введении цисплатина и ФБ-13 - 100% животных выживали.

Пример 6. Карциному легких Льюис перевивали мышам-гибридам BDF₁), подкожно. Инокулум составлял 5·10⁶ опухолевых клеток. Исследовали совместное действие ФБ-13 и цисплатина. Критерием оценки служил индекс ингибирования метастазов в легких (ИИМ%). При введении одного цисплатина ИИМ=80%, при совместном введении с ФБ-13 ИИМ=100%.

Пример 7. Экспериментальную меланому В-16 перевивали подкожно мышам-гибридам BDF₁. Инокулум составлял 5·10⁶ опухолевых клеток. Исследовали совместное действие ФБ-13 и цисплатина. Критерием оценки служил индекс ингибирования метастазов в легких (ИИМ%). При введении одного цисплатина ИИМ=52%, при совместном введении с ФБ-13 ИИМ=100%.

Испытания на острую токсичность проводились в группе экспериментальной онкологии ИПХФ РАН путем внутрибрюшинного введения препаратов в воде мышам линии BDF₁. Показано, что заявляемые объекты нетоксичны в дозе 1000 мг/кг. Эти данные позволяют отнести заявляемые соединения к разряду малотоксичных соединений. Использование этих соединений в минимальных дозах в сочетании с минимальными дозами цитостатиков, когда ни один, ни другой препараты не оказывают терапевтического эффекта по отдельности, позволяют полностью ингибировать процесс метастазирования при экспериментальной меланоме В-16 или карциноме легких Льюис (см. фиг.1-4).

Кроме того, использование оксиамидов дикарбоновых кислот в качестве средств усиления противоопухолевого эффекта позволяет в сочетании с минимальными количествами оксиамида и цитостатика (разовая доза цитостатиков в 4 раза ниже терапевтической) повысить эффективность при лечении лейкемии Р-388 (выживание животных составляет 100%).

Изобретение относится к применению дикарбоновых кислот общей формулы (2)

где R=HOHNCO; HONHCOCH(OH)CH(OH); НООССН₂CH₂; НООССН=СН в качестве ингибиторов метастазов и средств, повышающих химиотерапевтическую активность противоопухолевых препаратов. Изобретение относится к способу усиления эффективности цитостатиков в цитостатической химиотерапии опухолей. Способ осуществляют за счет использования цитостатика в комбинации с производными дикарбоновых кислот формулы 2. Изобретение также относится к способу ингибирования процесса метастазирования. Способ осуществляют за счет воздействия на опухоль комбинацией известного цитостатика и производных дикарбоновых кислот формулы 2. Технический результат - усиление противоопухолевой и антиметастатической активности известных цитостатиков за счет применения производных дикарбоновых кислот. 3 н.п. ф-лы, 4 ил.

1. Применение дикарбоновых кислот общей формулы (2)

где R=HOHNCO; HONHCOCH(OH)CH(OH); HOOCCH₂CH₂; HOOCCH=CH,

в качестве ингибиторов метастазов и средств, повышающих химиотерапевтическую активность противоопухолевых препаратов.

где R=HOHNCO; HONHCOCH(OH)CH(OH); HOOCCH₂CH₂; HOOCCH=CH.

где R=HOHNCO; HONHCOCH(OH)CH(OH); HOOCCH₂CH₂; HOOCCH=CH.