СПОСОБ СТИМУЛЯЦИИ ОСТЕОГЕНЕЗА ПРИ ПЕРЕЛОМАХ ТРУБЧАТЫХ КОСТЕЙ Российский патент 2007 года по МПК A61K38/02 A61P19/08 

Изобретение относится к медицине, а именно к лечению костно-деструктивных заболеваний опорно-двигательного аппарата

Известен способ стимуляции остеогенеза, включающий внутримышечное введение взвеси аллогенного гидроксилаппатита в изотоническом растворе хлорида натрия в эксперименте на животных (Патент РФ №2219933, МПК А 61 К 33/00, опубл. 2003 г., прототип). При использовании данного метода наблюдалось ускорение формирования костной ткани на месте деминерализованного костного матрикса, а также активизация метаболизма коллагена.

Основным недостатком данного метода является то, что введение данного препарата - аллогенного гидроксилаппатита, при достаточно эффективном снабжении организма микроэлементами: цинка, кальция, меди и др., не оказывает прямого стимулирующего влияния на остеогенез.

Задачей предлагаемого изобретения является устранение указанного недостатка за счет повышения эффективности стимуляции остеогенеза с пролонгированным эффектом.

Для этого в способе стимуляции остеогенеза при переломах трубчатых костей, основанном на введении в организм вещества, активирующего регенерации костной ткани, предложено в качестве активатора регенерации вводить однократно в место перелома кости 0,1-0,2% раствор ангиогенина.

Введение ангиогенина в место костного дефекта в предлагаемой концентрации вызывает усиление ангиогенеза, который в свою очередь представляет типичный пример органогенеза, включающий в себя процесс агрегации клеток, их дифференциацию и образование дискретных тканей. На первой стадии ангиогенеза происходят расширение сосудов и повышение их проницаемости. Остеобласты сокращаются, и происходит ослабление межклеточных связей, таким образом, клетки становятся "реагирующими", между ними происходит активный рост капилляров. На последнем этапе происходит заполнение вновь образовавшихся капилляров "молодыми" остеобластами.

Ангиогенин - полипептид, содержащийся во всех тканях организма, наибольшее количество анагиогенина присутствует в быстрорастущих тканях и является одним из основных факторов роста и деления клеток. Для проведения настоящего исследования ангиогенин выделен методом ультрафильтрации из коровьего молока (Н.А.Тихомирова. Природный и рекомбинантный ангиогенин. М.: Медицина, 1999. С.4-15).

Методами объективной оценки степени репарации костной ткани под воздействием вещества ангиогенин были: цитологическое исследование костно-мозгового пунктата и изучение изменений морфологии сыворотки крови методом кристаллографии.

Пример.

Эксперимент проводился на 24-х молодых крысах породы Вистар. Исследуемые животные были разделены на три группы по времени экспозиции вещества ангиогенин, в каждой группе 8 крыс. В место перелома 4-м крысам из каждой группы вводился 0,2% ангиогенин в дозе 1 мл на физиологическом растворе NaCl₂ или на дистиллированной воде (основная группа), другим 4-м крысам в место перелома вводился 1 мл 0,9% раствора NaCl₂ (контрольная группа). На 3-е сутки с момента введения ангиогенина, после вывода 8 животных из эксперимента (4 - основная группа, 4 - контрольная группа), были проведены исследования. Аналогично были произведены исследования на 6-е и 12-е сутки после введения ангиогенина, соответственно на двух других группах.

Проводилось лабораторное исследование клеток периферической крови, костного мозга и костной ткани из места перелома. Для этого использовались цитологические и физико-оптические методы изучения спектра морфоструктур по кристаллооптическим признакам.

Клеточный состав периферической крови исследовали общепринятым методом с окраской мазков крови после фиксации по Романовскому. Анализировали процентный состав клеток крови контрольных и основных групп.

В костно-мозговом пунктате анализировали клеточный состав по процентным соотношениям. Кристаллооптическое исследование сыворотки крови проводили методикой краевой дегидратации в закрытой капле биожидкости. Определяли спектр морфоструктур и наличие структур с анизотропией.

В результате проведенных исследований выявлено заметное увеличение количества остеобластов в опытных группах уже на 3-и сутки экспозиции ангиогенина, а к 12-ым суткам экспозиции ангиогенина количество остеобластов в опытной группе в 3 раза превышало таковое в контрольной группе. В костном мозге крыс из основной группы выявлено увеличение количества нормоцитов в 2 раза в сравнении с контрольной, что свидетельствовало об усилении регенерации красного ростка. В жидкокристаллической фазе, в опыте, отмечено появление конфокально-пластовых структур различной конфигурации, что свидетельствовало об активации репаративных процессов в поврежденной костной ткани.

Проведенные исследования показывают несомненную эффективность и безопасность применения вещества ангиогенин, так как это вещество естественного происхождения. При его методе выделения из коровьего молока (ультрафильтрация) полностью исключается риск заражения пациента любыми известными видами инфекций, отсутствуют аллергические реакции на вещество.

Изобретение относится к медицине, а именно к лечению костно-деструктивных заболеваний опорно-двигательного аппарата. Для этого при переломах трубчатых костей в место перелома кости вводят однократно 0,1-0,2% раствор ангиогенина, выделенного путем ультрафильтрации из коровьего молока. Способ обеспечивает эффективность стимуляции при исключении рисков инфицирования, аллергических реакций, а также возможности транслокации опухолевых клеток, которые связаны с использованием ангиогенина другого происхождения.

Способ стимуляции остеогенеза при переломах трубчатых костей, основанный на введении в организм вещества, активирующего регенерацию костной ткани, отличающийся тем, что в качестве активатора регенерации вводят однократно в место перелома кости 0,1-0,2%-ный раствор ангиогенина, выделенного путем ультрафильтрации из коровьего молока.