Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение в целом касается соединений и фармацевтических композиций, которые могут применяться в качестве ингибиторов ASK-1. В частности, настоящее изобретение касается соединений, которые могут применяться в качестве ингибиторов ASK-1, способов их получения и их применения.
Предшествующий уровень техники
Регулирующая апоптотические сигналы киназа 1 (ASK-1) является членом семейства киназ кинза митоген-активируемой протеинкиназы (MAPKKK, MAP3K), которая при активации фосфорилирует киназы MAP киназы (MAPKK, MAP2K), которые в свою очередь активируют MAP киназы (MAPK). MAP киназы вызывают ответ путем фосфорилирования клеточных субстратов, тем самым управляя активностью факторов транскрипции, которые в конечном итоге контролируют экспрессирование генов. В частности, ASK-1, также известная как MAPKKK5, фосфорилирует MAPKK4/MAPKK7 или MAPKK3/MAPKK6, которая затем фосфорилирует и активирует c-Jun N-терминальную протеинкиназу (JNK) и p38 MAPK, соответственно (H. Ichijo, et al., Cell Comm. Signal 2009, 7, 1-10; K. Takeda, et al., Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. 2008, 48, 199-225; H. Nagai, et al., J. Biochem. Mol. Biol. 2007, 40, 1-6). Активация механизмов JNK и p38 запускает дальнейшую стрессовую реакцию, такую как апоптоз, воспаление или дифференциация (H. Ichijo, et al., Science 1997, 275, 90-94; K. Takeda, et al., J. Biol. Chem. 2000, 275, 9805-9813; K. Tobiume, et al., EMBO Rep. 2001, 2, 222-228; K. Sayama et al., J. Biol. Chem. 2001, 276, 999-1004).
Активность ASK-1 управляется тиоредоксином (Trx), который связывается с N-терминальным концом ASK-1 (M. Saitoh, et al., EMBO J. 1998, 17, 2596-2606). ASK-1 активируется вследствие автофосфорилирования по Thr838 в ответ на внешние стимулы, включая оксилительный стресс, липополисахариды (LPS), активные формы кислорода (ROS), стресс эндоплазматического ретикулума (ER), повышение внутриклеточной концентрации ионов кальция, Fas лиганд и различные цитокины, такие как фактор некроза опухолей (ФНО) (H. Nishitoh, et al., Genes Dev. 2002, 16, 1345-1355; K. Takeda, et al., EMBO Rep. 2004, 5, 161-166; A. Matsuzawa, et al., Nat. Immunol. 2005, 6, 587-592).
ASK-1 связывают с аутоиммунными заболеваниями, нейродегенеративными заболеваниями, воспалительными заболеваниями, хроническим заболеванием почек, сердечнососудистыми заболеваниями, метаболическими заболеваниями, а также с острыми и хроническими болезнями печени (R. Hayakawa, et al., Proc. Jpn. Acad., Ser. B 2012, 88, 434-453).
Более конкретно, ASK-1 связывают со стеатозом печени, включая неалкогольную жировую болезнь печени (NAFLD) и неалкогольный стеатогепатит (NASH). В мышиной модели диета с высоким содержанием жира вызывала появление стеатоза печени, вызывая накопление жира и окисление жирных кислот. Это приводило к появлению активных форм кислорода (ROS), которые вызывали нарушение работы гепатоцитов и гибель (S. K. Mantena, et al., Free Radic. Biol. Med. 2008, 44, 1259-1272; S. K. Mantena, et al., Biochem. J. 2009, 417, 183-193). Более того, было показано, что ФНО играет критически важную роль для апоптоза гепатоцитов в механизме ASK-1-JNK, и у ФНО-дефицитных мышей наблюдалось снижение степени выраженности стеатоза печени и фиброза (W. Zhang, et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 2010, 391, 1731-1736).
Низкомолекулярные соединения, которые работают как ингибиторы ASK-1, были раскрыты в следующих публикациях: WO 2008/016131, WO 2009/027283, WO 2009/0318425, WO 2009/123986, US 2009/0318425, WO 2011/041293, WO 2011/097079, US 2011/0009410, G.P. Volynets, et al., J. Med. Chem. 2011, 54, 2680-2686, WO 2012/003387, WO 2012/011548, WO 2012/080735, Y. Terao, et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 2012, 22, 7326-7329, WO 2013/112741, G.P. Volynets, et al., Eur. J. Med. Chem. 2013, 16, 104-115, US 2014/0018370, WO 2014/100541, WO 2015/095059, WO 2016/049069, WO 2016/049070, WO 2018/090869, WO 2018/133865, WO 2018/133866, WO 2018/148204, WO 2018/149284, WO 2018/151830, WO/2018/157856, WO 2018/157857, WO 2018/160406, WO 2018/169742, WO 2018/183122, WO 2018/187506, WO 2018/209354, WO 2018/218042, WO 2018/218044, WO 2018/218051, WO 2018/233553, US 2019/0062310, WO 2019/070742, WO 2019/050794, WO 2019/051265 и WO 2019/034096.
Существует потребность в разработке ингибиторов ASK-1 для лечения и предотвращения заболеваний.
Краткое описание изобретения
Настоящее изобретение касается соединений и фармацевтических композиций, которые могут применяться в качестве ингибиторов ASK-1. В частности, настоящее изобретение касается соединений, которые могут применяться в качестве ингибиторов ASK-1, их способов получения и их применения. Кроме того, настоящее изобретение включает способ получения указанных соединений.
В главном аспекте настоящего изобретения описано соединение, имеющее формулу (I), или его фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир:
,
где
представляет собой необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил, содержащий 1, 2 или 3 гетероатома, выбранных из N, O и S, при условии, что не является 
;
В некоторых вариантах осуществления, выбран из следующих:
,
представляет собой 
или 
;
представляет собой 
или 
;
R1 и R2 каждый независимо выбраны из группы, состоящей из следующих:
1) Атом водорода;
2) Необязательно замещенный -C1-C8 алкил;
3) Необязательно замещенный -C2-C8 алкенил;
4) Необязательно замещенный -C2-C8 алкинил;
5) Необязательно замещенный -C3-C8 циклоалкил;
6) Необязательно замещенный арил;
7) Необязательно замещенный арилалкил;
8) Необязательно замещенный 3-8-членный гетероциклоалкил;
9) Необязательно замещенный гетероарил; и
10) Необязательно замещенный гетероарилалкил;
X представляет собой N или C-R3;
R3 выбран из группы, состоящей из следующих:
1) Атом водорода;
2) Галоген;
3) Необязательно замещенный -C1-C8 алкил; и
4) Необязательно замещенный -C1-C8 алкоксил;
R4 выбран из группы, состоящей из следующих:
1) Атом водорода;
2) Галоген;
3) Необязательно замещенный -C1-C8 алкил;
4) Необязательно замещенный -C2-C8 алкенил;
5) Необязательно замещенный -C2-C8 алкинил;
6) Необязательно замещенный -C3-C8 циклоалкил;
7) Необязательно замещенный арил;
8) Необязательно замещенный арилалкил;
9) Необязательно замещенный 3-8-членный гетероциклоалкил;
10) Необязательно замещенный гетероарил;
11) Необязательно замещенный гетероарилалкил; и
12) −N(R5)(R6);
где R5 и R6 независимо выбраны из группы, состоящей из атома водорода, -C1-C8 алкила, циклоалкила, гетероциклоалкила, арила и гетероарила, каждый из которых необязательно замещен 1-3 заместителями, выбранными из галогена, алкила, моно- или диалкиламино-группы, алкил или арил или гетероарил амида, −CN, алкокси-группы, −CF3, арила и гетероарила. Альтернативно, R5 и R6 объединены с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием необязательно замещенного гетероциклического фрагмента.
В другом варианте осуществления, в настоящем изобретении описана фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество соединения или комбинации соединений по настоящему изобретению, или его фармацевтически приемлемой соли, сложного эфира или их комбинации, в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем или вспомогательным веществом.
В другом варианте осуществления, в настоящем изобретении описан способ предотвращения или лечения заболевания или патологического состояния, протекающего с участием ASK-1. Этот способ включает введение терапевтически эффективного количества соединения, имеющего формулу (I). В настоящему изобретении описано также применение соединения, имеющего формулу (I), для приготовления лекарственного средства для предотвращения или лечения заболевания или патологического состояния, протекающего с участием ASK-1. Такие заболевания включают аутоиммунные заболевания, нейродегенеративные заболевания, воспалительные заболевания, хроническое заболевание почек, сердечнососудистые заболевания, метаболические нарушения, а также острые и хронические болезни печени.
Подробное описание изобретения
В первом варианте осуществления настоящего изобретения описано соединение, имеющее приведенную выше формулу (I), или его фармацевтически приемлемая соль или сложный эфир.
В некоторых вариантах соединений, имеющих формулу (I), X представляет собой CH.
В некоторых вариантах соединений, имеющих формулу (I), X представляет собой CF.
В некоторых вариантах соединений, имеющих формулу (I), X представляет собой N.
В некоторых вариантах соединений, имеющих формулу (I), R1 выбран из изображенных ниже групп
,
где каждая из перечисленных групп необязательно имеет дополнительные заместители.
В некоторых вариантах соединений, имеющих формулу (I), R4 выбран из изображенных ниже групп:
,
где каждая из перечисленных групп необязательно имеет дополнительные заместители.
В некоторых вариантах соединений, имеющих формулу (I), R2 выбран из изображенных ниже групп:
.
В некоторых вариантах осуществления, в настоящем изобретении описаны соединения, имеющие формулу (II-a ~ II-h), и их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры:
где 
, R2 и R4 имеют указанные выше значения.
В некоторых вариантах осуществления, в настоящем изобретении описаны соединения, имеющие формулу (III-a ~ III-n), и их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры,
где R1, R2 и R4 имеют указанные выше значения.
В некоторых вариантах осуществления, в настоящем изобретении описаны соединения, имеющие формулу (IV-a – IV-n), и их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры,
где R1, R2 и R4 имеют указанные выше значения.
В некоторых вариантах осуществления, в настоящем изобретении описан способ предотвращения или лечения заболевания или патологического состояния, протекающего с участием ASK-1. Этот способ включает введение терапевтически эффективного количества соединения, имеющего формулу (I), или его фармацевтически приемлемой соли, субъекту, нуждающемуся в этом. В настоящему изобретении описано также применение соединения, имеющего формулу (I), или его фармацевтически приемлемой соли, в производстве лекарственного средства для лечения заболевания или патологического состояния, протекающего с участием ASK-1.
В некоторых вариантах осуществления, заболевание или патологическое состояние, протекающее с участием ASK-1, представляет собой аутоиммунное заболевание, нейродегенеративное заболевание, воспалительное заболевание, хроническое заболевание почек, заболевание почек, сердечнососудистое заболевание, метаболическое заболевание или острое или хроническое заболевание печени.
В некоторых вариантах осуществления, хроническое заболевание печени представляет собой первичный билиарный цирроз (PBC), церебросухожильный ксантоматоз (CTX), первичный склерозирующий холангит (PSC), вызванный лекарствами холестаз, внутрипеченочный холестаз беременных, холестаз, вызванный парентеральным питанием (PNAC), холестаз, вызванный чрезмерным развитием микрофлоры или сепсисом, аутоиммунный гепатит, хронический вирусный гепатит, алкогольную болезнь печени, неалкогольную жировую болезнь печени (NAFLD), неалкогольный стеатогепатит (NASH), болезнь «транплантат-против-хозяина», вызванную пересадкой печени, регенерацию печени у живого донора печени, врожденный фиброз печени, холедохолитиаз, гранулематозную болезнь печени, внутри- или внепеченочную злокачественную опухоль, синдром Шегрена, саркоидоз, болезнь Вильсона, болезнь Гоше, гемохроматоз или дефицит альфа 1-антитрипсина. В некоторых вариантах осуществления, желудочно-кишечное заболевание представляет собой воспалительное заболевание кишечника (IBD) (включая язвенный колит и болезнь Крона), синдром разраженного кишечника, чрезмерное развитие микрофлоры, нарушение всасывания, колит после лучевой терапии или микроскопический колит.
В некоторых вариантах осуществления, заболевание почек представляет собой диабетическую нефропатию, фокально-сегментарный гломерулосклероз (FSGS), гипертонический нефросклероз, хронический гломерулонефрит, хроническую посттрансплантационную гломерулопатию, хронический интерстициальный нефрит или поликистозную болезнь почек.
В некоторых вариантах осуществления, сердечнососудистое заболевание представляет собой атеросклероз, артериосклероз, ишемически-реперфузионное повреждение при инсульте, гипертрофию сердца, респираторные заболевания, сердечный приступ, ишемию миокарда.
В некоторых вариантах осуществления, метаболическое заболевание представляет собой инсулинорезистентность, диабет I типа и II типа, или ожирение.
В некоторых вариантах осуществления, хроническое заболевание почек представляет собой поликистозную болезнь почек, пиелонефрит, фиброз почек и гломерулонефрит.
Другим аспектом настоящего изобретения является способ получения соединений, описанных в настоящем изобретении, с применением описанных в настоящем тексте способов синтеза.
Определения
Ниже приведены определения терминов, применяющихся для описания настоящего изобретения. Эти определения применяются к терминам, используемым в описании и Формуле изобретения, если иное не указано особо, индивидуально или в составе большей группы.
Термин “алкил” при использовании в настоящем тексте означает насыщенные линейные или разветвленные углеводородные радикалы. Подходящие алкильные группы включают «C1-C3 алкил”, “C1-C6 алкил”, “C1-C10 алкил”, “C2-C4 алкил” или “C3-C6 алкил”, которые означают алкильные группы, содержащие 1 - 3, 1 - 6, 1 - 10 атомов углерода, 2 - 4 и 3 - 6 атомов углерода соответственно. Примеры C1-C8 алкильных радикалов включают (но не ограничиваются только ими) метильный, этильный, пропильный, изопропильный, н-бутильный, трет-бутильный, неопентильный, н-гексильный, гептильный и октильный радикалы.
Термин “алкенил” при использовании в настоящем тексте означает линейные или разветвленные углеводородные радикалы, содержащие по меньшей мере одну углерод-углеродную двойную связь, образующиеся при удалении одного атома углерода. Подходящие алкенильные группы включают “C2-C10 алкенил”, “C2-C8 алкенил”, “C2-C4 алкенил” или “C3-C6 алкенил”, которые означают алкенильные группы, содержащие 2 – 10, 2 – 8, 2 – 4 или 3 – 6 атомов углерода, соответственно. Алкенильные группы включают (но не ограничиваются только ими), например, этенил, пропенил, бутенил, 1-метил-2-бутен-1-ил, гептенил, октенил и т.п.
Термин “алкинил” при использовании в настоящем тексте означает линейные или разветвленные углеводородные радикалы, содержащие по меньшей мере одну углерод-углеродную тройную связь, образующиеся при удалении одного атома углерода. Подходящие алкинильные группы включают “C2-C10 алкинил”, “C2-C8 алкинил”, “C2-C4 алкинил” или “C3-C6 алкинил,” которые означают алкинильные группы, содержащие 2 – 10, 2 – 8, 2 – 4 или 3 – 6 атомов углерода, соответственно. Репрезентативные алкинильные группы включают (но не ограничиваются только ими), например, этинил, 1-пропинил, 1-бутинил, гептинил, октинил и т.п.
Термин “циклоалкил” при использовании в настоящем тексте означает моноциклическое или полициклическое насыщенное карбоциклическое кольцо или би- или трициклическую группу конденсированного, мостикового или спиро-строения, и атомы углерода необязательно могут быть оксо-замещенными или необязательно замещены экзоциклической олефиновой, иминной или оксимной двойной связью. Предпочтительные циклоалкильные группы включают C3-C12 циклоалкил, C3-C6 циклоалкил, C3-C8 циклоалкил и C4-C7 циклоалкил. Примеры C3-C12 циклоалкила включают (но не ограничиваются только ими) циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклопентил, циклооктил, 4-метилен-циклогексил, бицикло[2.2.1]гептил, бицикло[3.1.0]гексил, спиро[2.5]октил, 3-метиленбицикло[3.2.1]октил, спиро[4.4]нонанил и т.п.
Термин “циклоалкенил” при использовании в настоящем тексте означает моноциклическое или полициклическое насыщенное карбоциклическое кольцо или би- или трициклическую группу конденсированного, мостикового или спиро-строения, содержащие по меньшей мере одну углерод-углеродную двойную связь, и атомы углерода необязательно могут быть оксо-замещенными или необязательно замещены экзоциклической олефиновой, иминной или оксимной двойной связью. Предпочтительные циклоалкенильные группы включают C3-C12 циклоалкенильные, C3-C8 циклоалкенильные или C5-C7 циклоалкенильные группы. Примеры C3-C12 циклоалкенила включают (но не ограничиваются только ими) циклопропенил, циклобутенил, циклопентенил, циклогексенил, циклогептенил, циклооктенил, бицикло[2.2.1]гепт-2-енил, бицикло[3.1.0]гекс-2-енил, спиро[2.5]окт-4-енил, спиро[4.4]нон-1-енил, бицикло[4.2.1]нон-3-ен-9-ил и т.п.
Термин «арил» при использовании в настоящем тексте означает моно- или полициклическую карбоциклическую кольцевую систему, содержащую по меньшей мере одно ароматическое кольцо, включая (но не ограничиваясь только ими) фенил, нафтил, тетрагидронафтил, инданил и инденил. Полициклический арил представляет собой полициклическую кольцевую систему, которая содержит по меньшей мере одно ароматическое кольцо. Полициклические арилы могут содержать конденсированные кольца, ковалентно соединенные кольца или их комбинацию.
Термин «гетероарил» при использовании в настоящем тексте означает моно- или полициклический ароматический радикал, содержащий в кольце один или больше атомов, выбранных из S, O и N; и остальные атомы кольца представляют собой атомы углерода, где любой атом N или S, входящий в состав кольца, необязательно может быть окисленным. Гетероарил включает (но не ограничивается только ими) пиридинил, пиразинил, пиримидинил, пиразолил, имидазолил, тиазолил, оксазолил. изоксазолил, тиадиазолил, оксадиазолил, тиофенил, фуранил, хинолинил, изохинолинил, бензимидазолил, бензоксазолил, хиноксалинил. Полициклический гетероарил может содержать конденсированные кольца, ковалентно соединенные кольца или их комбинацию.
Согласно настоящему изобретению, ароматические группы могут быть замещенными или незамещенными.
Термин “бициклический арил” или “бициклический гетероарил” означает кольцевую систему, состоящую из двух колец, где по меньшей мере одно кольцо является ароматическим; и эти два кольца могут быть конденсированными или ковалентно присоединенными друг к другу.
При использовании в настоящем тексте, термин “арилалкил” означает функциональную группу, в которой алкиленовая цепь присоединена к арильной группе, например, -CH2CH2-фенил. Термин “замещенный арилалкил” означает арилалкильную функциональную группу, в которой арильная группа является замещенной. Аналогично, термин “гетероарилалкил” означает функциональную группу, в которой алкиленовая цепь присоединена к гетероарильной группе. Термин “замещенный гетероарилалкил” означает гетероарилалкильную функциональную группу, в которой гетероарильная группа является замещенной.
Термин “алкилен” при использовании в настоящем тексте означает дирадикал, образованный из разветвленной или неразветвленной углеводородной цепочки, обычно содержащей от 1 до 20 атомов углерода (например, 1-10 атомов углерода, или 1, 2, 3, 4, 5, или 6 атомов углерода). Этот термин можно проиллюстрировать такими группами как метилен (−CH2−), этилен (−CH2CH2−), изомеры пропилена (например, −CH2CH2CH2− и -CH(CH3)CH2−) и т.п.
Термин “замещенный” при использовании в настоящем тексте означает независимое замещение одного, двух, трех или больше атомов водорода заместителями, включая (но не ограничиваясь только ими) дейтерий, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, защищенная гидрокси-группа, -NO2, -CN, -NH2, N3, защищенная амино-группа, алкокси-группа, тиоалкокси-группа, оксо-группа, C1-C12-алкил, C2-C12-алкенил, C2-C12-алкинил, -галоген-C1-C12-алкил, -галоген-C2-C12-алкенил, -галоген-C2-C12-алкинил, -галоген-C3-C12-циклоалкил, -NH-C1-C12-алкил, -NH-C2-C12-алкенил, -NH-C2-C12-алкинил, -NH-C3-C12-циклоалкил, -NH-арил, -NH-гетероарил, -NH-гетероциклоалкил, -диалкиламино, -диариламино-группа, -дигетероариламино-группа, -O-C1-C12-алкил, -O-C2-C12-алкенил, -O-C2-C12-алкинил, -O-C3-C12-циклоалкил, -O-арил, -O-гетероарил, -O-гетероциклоалкил, -C(O)- C1-C12-алкил, -C(O)- C2-C12-алкенил, -C(O)- C2-C12-алкинил, -C(O)-C3-C12-циклоалкил, -C(O)-арил, -C(O)-гетероарил, -C(O)-гетероциклоалкил, -CONH2, -CONH-C1-C12-алкил, -CONH-C2-C12-алкенил, -CONH-C2-C12-алкинил, -CONH-C3-C12-циклоалкил, -CONH-арил, -CONH-гетероарил, -CONH-гетероциклоалкил, -СO2- C1-C12-алкил, -СO2-C2-C12-алкенил, -СO2-C2-C12-алкинил, -СO2-C3-C12-циклоалкил, -СO2-арил, -СO2-гетероарил, -СO2-гетероциклоалкил, -СONH2, -СONH-C1-C12-алкил, -СONH-C2-C12-алкенил, -СONH-C2-C12-алкинил, -СONH-C3-C12-циклоалкил, -СONH-арил, -СONH-гетероарил, -СONH-гетероциклоалкил, -NHC(O)-C1-C12-алкил, -NHC(O)-C2-C12-алкенил, -NHC(O)-C2-C12-алкинил, -NHC(O)-C3-C12-циклоалкил, -NHC(O)-арил, -NHC(O)-гетероарил, -NHC(O)-гетероциклоалкил, -NHCO2-C1-C12-алкил, -NHCO2-C2-C12-алкенил, -NHCO2-C2-C12-алкинил, -NHCO2-C3-C12-циклоалкил, -NHCO2- арил, -NHCO2-гетероарил, -NHCO2-гетероциклоалкил, -NHC(O)NH2, -NHC(O)NH-C1-C12-алкил, -NHC(O)NH-C2-C12-алкенил, -NHC(O)NH-C2-C12-алкинил, -NHC(O)NH-C3-C12-циклоалкил, -NHC(O)NH-арил, -NHC(O)NH-гетероарил, -NHC(O)NH-гетероциклоалкил, NHC(S)NH2, -NHC(S)NH-C1-C12-алкил, -NHC(S)NH-C2-C12-алкенил, -NHC(S)NH-C2-C12-алкинил, -NHC(S)NH-C3-C12-циклоалкил, -NHC(S)NH-арил, -NHC(S)NH-гетероарил, -NHC(S)NH-гетероциклоалкил, -NHC(NH)NH2, -NHC(NH)NH-C1-C12-алкил, -NHC(NH)NH-C2-C12-алкенил, -NHC(NH)NH-C2-C12-алкинил, -NHC(NH)NH-C3-C12-циклоалкил, -NHC(NH)NH-арил, -NHC(NH)NH-гетероарил, -NHC(NH)NH-гетероциклоалкил, -NHC(NH)-C1-C12-алкил, -NHC(NH)-C2-C12-алкенил, -NHC(NH)-C2-C12-алкинил, -NHC(NH)-C3-C12-циклоалкил, -NHC(NH)-арил, -NHC(NH)-гетероарил, -NHC(NH)-гетероциклоалкил, -C(NH)NH-C1-C12-алкил, -C(NH)NH-C2-C12-алкенил, -C(NH)NH-C2-C12-алкинил, -C(NH)NH-C3-C12-циклоалкил, -C(NH)NH-арил, -C(NH)NH-гетероарил, -C(NH)NH-гетероциклоалкил, -S(O)-C1-C12-алкил, -S(O)-C2-C12-алкенил, -S(O)-C2-C12-алкинил, -S(O)-C3-C12-циклоалкил, -S(O)-арил, -S(O)-гетероарил, -S(O)-гетероциклоалкил-SO2NH2, -SO2NH- C1-C12-алкил, -SO2NH- C2-C12-алкенил, -SO2NH-C2-C12-алкинил, -SO2NH-C3-C12-циклоалкил, -SO2NH- арил, -SO2NH-гетероарил, -SO2NH-гетероциклоалкил, -NHSO2-C1-C12-алкил, -NHSO2-C2-C12-алкенил, -NHSO2-C2-C12-алкинил, -NHSO2-C3-C12-циклоалкил, -NHSO2-арил, -NHSO2-гетероарил, -NHSO2-гетероциклоалкил, -CH2NH2, -CH2SO2CH3, -арил, -арилалкил, -гетероарил, -гетероарилалкил, -гетероциклоалкил, -C3-C12-циклоалкил, полиалкоксиалкил, полиалкокси-группа, -метоксиметокси-группа, -метоксиэтокси-группа, -SH, -S-C1-C12-алкил, -S-C2-C12-алкенил, -S-C2-C12-алкинил, -S-C3-C12-циклоалкил, -S-арил, -S-гетероарил, -S-гетероциклоалкил, метилтиометил или –L’–R’, где L’ представляет собой C1-C6алкилен, C2-C6алкенилен или C2-C6алкинилен, и R’ представляет собой арил, гетероарил, гетероцикл, C3-C12циклоалкил или C3-C12циклоалкенил. В некоторых вариантах осуществления, заместители независимо выбраны из галогена, предпочтительно Cl и F; C1-C4-алкила, предпочтительно метила и этила; галоген-C1-C4-алкила, такие как фторметил, дифторметил и трифторметил; C2-C4-алкенила; галоген-C2-C4-алкенила; C3-C6-циклоалкила, такие как циклопропил; C1-C4-алкокси-группы, такие как метокси-группа и этокси-группа; галоген-C1-C4-алкокси-группы, такие как фторметокси-группа, дифторметокси-группа и трифторметокси-группа, -CN; -OH; NH2; C1-C4-алкиламино-группы; ди(C1-C4-алкил)амино-группы; и NO2. Следует понимать, что арилы, гетероарилы, алкилы и т.п. могут быть дополнительно замещенными. В некоторых случаях, каждый заместитель в замещенном фрагменте дополнительно необязательно замещен одной или больше группами, где каждая группа независимо выбрана из C1-C6-алкила, -F, -Cl, -Br, -I, -OH, -NO2, -CN или -NH2. Предпочтительно, замещенная алкильная группа, такая как замещенная метильная группа, замещена одним или больше атомами галогенов, более предпочтительно одним или больше атомами фтора или хлора.
Согласно настоящему изобретению, любой из описанных в настоящем тексте арилов, замещенных арилов, гетероарилов и замещенных гетероарилов может представлять собой любую ароматическую группу. Ароматические группы могут быть замещенными или незамещенными.
Следует понимать, что любой описанный в настоящем тексте алкильный, алкенильный, алкинильный, циклоалкильный и циклоалкенильный фрагмент может также представлять собой алифатическую группу, алициклическую группу или гетероциклическую группу. “Алифатическая группа” представляет собой неароматический фрагмент, который может содержать любую комбинацию атомов углерода, атомов водорода, атомов галогенов, кислорода, азота или других атомов, и необязательно содержит один или больше элементов ненасыщенности, например, двойные и/или тройные связи. Алифатическая группа может быть линейной, разветвленной или циклической, и предпочтительно содержит от примерно 1 до примерно 24 атомов углерода, чаще от примерно 1 до примерно 12 атомов углерода. В дополнение к алифатическим углеводородным группам, алифатические группы включают, например, полиалкоксиалкилы, такие как полиалкиленгликоли, полиамины и полиимины. Такие алифатические группы могут быть дополнительно замещенными. Следует понимать, что алифатические группы могут использоваться вместо алкильных, алкенильных, алкинильных, алкиленовых, алкениленовых и алкиниленовых групп, описанных в настоящем тексте.
Термин “алициклический” при использовании в настоящем тексте означает одновалентную группу, образованную из моноциклического или полициклического насыщенного карбоциклического соединения путем удаления одного атома водорода. Их примеры включают (но не ограничиваются только ими) циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, бицикло[2.2.1]гептил и бицикло[2.2.2]октил. Такие алициклические группы могут быть дополнительно замещенными.
При использовании в настоящем тексте, термин “алкокси”, применяемый отдельно или в комбинации с другими терминами, означает, если не указано иное, алкильную группу, содержащую указанное число атомов углерода, присоединенную к остальной части молекулы через атом кислорода, например, метокси-, этокси-, 1-пропокси-, 2-пропокси- (изопропокси-) группу, и высшие гомологи и изомеры. Предпочтительными алкокси-группами являются (C1-C3) алкокси-группы.
Термин “арилокси” означает группу арил-O-, где арильная группа имеет данное выше определение, и включает необязательно замещенные арильные группы, определение которым также дано выше. Термин “арилтио” означает группу R−S−, где R соответствует определению арила, данному выше.
Термины “гетероциклический” или “гетероциклоалкил” могут применяться взаимозаменяемо и означают неароматическое кольцо или би- или трициклическую группу конденсированного, мостикового или спиро-строения, где (i) каждая кольцевая система содержит по меньшей мере один гетероатом, независимо выбранный из кислорода, серы и азота, (ii) каждая кольцевая система может быть насыщенной или ненасыщенной, (iii) гетероатомы азота и серы могут быть необязательно окисленными, (iv) гетероатом азота необязательно может быть кватернизован, (v) любые из описанных выше колец могут быть приконденсированы к ароматическому кольцу, и (vi) остальные атомы в кольце представляют собой атомы углерода, которые необязательно могут быть оксо-замещенными или необязательно замещенными экзоциклической олефиновой, иминной или оксимной двойной связью. Репрезентативные гетероциклоалкильные группы включают (но не ограничиваются только ими) 1,3-диоксолан, пирролидинил, пиразолинил, пиразолидинил, имидазолинил, имидазолидинил, пиперидинил, пиперазинил, оксазолидинил, изоксазолидинил, морфолинил, тиазолидинил, изотиазолидинил, хиноксалинил, пиридазинонил, 2-азабицикло[2.2.1]-гептил, 8-азабицикло[3.2.1]октил, 5-азаспиро[2.5]октил, 1-окса-7-азаспиро[4.4]нонанил, 7-оксооксепан-4-ил и тетрагидрофурил. Такие гетероциклические группы могут быть дополнительно замещенными. Гетероарильные или гетероциклические группы могут быть C-присоединенными или N-присоединенными (где это допустимо).
Следует понимать, что любой описанный в настоящем тексте алкильный, алкенильный, алкинильный, циклоалкильный, гетероциклический и циклоалкенильный фрагмент может также представлять собой алифатическую группу или алициклическую группу.
В различных вариантах осуществления настоящего изобретения, замещенный или незамещенный алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, циклоалкенил, циклоалкинил, арилалкил, гетероарилалкил и гетероциклоалкил может быть одновалентным или двухвалентным. Таким образом, алкиленовые, алкиленовые и алкиниленовые, циклоалкиленовые, циклоалкениленовые, циклоалкиниленовые, арилалкиленовые, гетероарилалкиленовые и гетероциклоалкиленовые группы входят в данные выше определения и могут использоваться в приведенных в настоящем тексте формулах при соблюдении правил валентности.
Термин «галоген» при использовании в настоящем тексте означает атом, выбранный из фтора, хлора, брома и иода.
Термин “необязательно замещенный” при использовании в настоящем тексте означает, что соответствующая группа может быть замещенной или незамещенной. В одном варианте, соответствующая группа необязательно замещена нулевым заместителем, т.е. соответствующая группа является незамещенной. В другом варианте осуществления, соответствующая группа необязательно замещена одной или больше дополнительными группами, индивидуально и независимо выбранными из описанных в настоящем тексте групп.
Термин “водород” включает водород и дейтерий. Кроме того, указание атома включает другие изотопы этого атома, при условии, что получаемое соединение является фармацевтически приемлемым.
В некоторых вариантах осуществления, соединения, отвечающие приведенным формулам, включают изотопно меченые соединения. “Изотопно меченое соединение” представляет собой соединение, в котором по меньшей мере одно положение атома обогащено специфическим изотопом указанного элемента до степени, существенно превышающей природное содержание данного изотопа. Например, одно или больше положений атома водорода в соединении может быть обогащено дейтерием до степени, существенно превышающей природное содержание дейтерия, например, обогащение до содержания по меньшей мере 1%, предпочтительно по меньшей мере 20% или по меньшей мере 50%. Такое дейтерированное соединение может, например, метаболизироваться медленнее, чем его недейтерированный аналог, и поэтому демонстрирует большее время полужизни при введении субъекту. Такие соединения можно синтезировать, используя известные в данной области методы, например, с использованием дейтерированных исходных соединений. Если не указано иное, изотопно меченые соединения являются фармацевтически приемлемыми.
Описанные в настоящем тексте соединения могут содержать один или больше асимметрических центров, таким образом давая возможность формирования энантиомеров, диастереомеров и других стереоизомерные форм, которым можно дать определение в терминах абсолютной стереохимии, например (R)- или (S)-, или (D)- или (L)- для аминокислот. Настоящее изобретение включает все возможные изомеры, а также их рацемические и оптически чистые формы. Оптические изомеры можно получить из их соответствующих оптически активных прекурсоров согласно описанным выше методам или посредством расщепления рацемических смесей. Расщепление можно проводить в присутствии расщепляющего агента, хроматографически или повторными кристаллизациями или с применением комбинации этих методов, известных квалифицированным специалистам в данной области. Дополнительные подробности касательно расщепления можно найти в работе Jacques, et al., Enantiomers, Racemates, and Resolutions (John Wiley & Sons, 1981). Когда описанные в настоящем тексте соединения содержат олефиновую двойную связь, другие элементы ненасыщенности или другие центры геометрической асимметрии, и если не указано иное, это означает, что соединения включают оба типа геометрических изомеров, т.е. E и Z геометрические изомеры или цис- и транс-изомеры. Аналогично, все таутомерные формы также входят в объем настоящего изобретения. Таутомеры могут быть циклическими или ациклическими. Конфигурация всех углерод-углеродных двойных связей, изображенных в настоящем тексте, дана исключительно для удобства и не обозначает определенную конфигурацию, если иное не указано в тексте; так, двойная связь углерод-углерод или двойная связь углерод-гетероатом, изображенные в настоящем тексте как trans, могут являться цис, транс или смесью обоих в любой пропорции.
Термин “субъект” при использовании в настоящем тексте означает млекопитающее. Таким образом, субъектом могут являться, например, собаки, кошки, лошади, коровы, свиньи, морские свинки и т.п. Предпочтительно, субъектом является человек. Когда субъектом является человек, субъект можно называть пациентом.
При использовании в настоящем тексте, термин «фармацевтически приемлемая соль» означает соли соединений, полученных способом по настоящему изобретению, которые в понятиях современных медицинских представлений подходят для применения в контакте с тканями человека и низших животных без нежелательной токсичности, раздражения, аллергических реакций и т.п., и которые соответствуют разумному соотношению польза/риск. Фармацевтически приемлемые соли хорошо известны в данной области.
Berge, et al. подробно описали фармацевтически приемлемые соли в работе J. Pharmaceutical Sciences, 66: 1-19 (1977). Такие соли можно получить in situ при финальном выделении и очистке соединений по настоящему изобретению, или отдельно реакцией свободного основания с подходящей органической кислотой. Примеры фармацевтически приемлемых солей включают (но не ограничиваются только ими) нетоксичные кислотно-аддитивные соли, например, соли, образованные аминогруппой с неорганическими кислотами, такими как соляная кислота, бромистоводородная кислота, фосфорная кислота, серная кислота и перхлорная кислота, или с органическими кислотами, такими как уксусная кислота, малеиновая кислота, винная кислота, лимонная кислота, янтарная кислота или малоновая кислота, или с применением других методов, используемых в данной области, таких как обмен ионов. Другие фармацевтически приемлемые соли включают (но не ограничиваются только ими) адипат, альгинат, аскорбат, аспартат, бензолсульфонат, бензоат, бисульфат, борат, бутират, камфорат, камфорасульфонат, цитрат, циклопентанпропионат, диглюконат, додецилсульфат, этансульфонат, формиат, фумарат, глюкогептонат, глицерофосфат, глюконат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, гидроиодид, 2-гидрокси-этансульфонат, лактобионат, лактат, лаурат, лаурилсульфат, малат, малеат, малонат, метансульфонат, 2-нафталинсульфонат, никотинат, нитрат, олеат, оксалат, пальмитат, памоат, пектинат, персульфат, 3-фенилпропионат, фосфат, пикрат, пивалат, пропионат, стеарат, сукцинат, сульфат, тартрат, тиоцианат, п-толуолсульфонат, ундеканоат, валерат и т.п. Репрезентативные соли щелочных и щелочно-земельных металлов включают соли натрия, лития, калия, кальция, магния и т.п. Другие фармацевтически приемлемые соли включают, где это возможно, нетоксичные соли аммония, четвертичные аммониевые соли и соли с аминными катионами, образованные с такими противоионами как галогенид, гидроксид, карбоксилат, сульфат, фосфат, нитрат, алкил с 1 – 6 атомами углерода, сульфонат и арилсульфонат.
При использовании в настоящем тексте, термин «фармацевтически приемлемый сложный эфир» означает сложные эфиры, которые гидролизуются in vivo, и включает эфиры, которые легко разлагаются в организме человека, высвобождая материнское соединение или его соль. Подходящие сложноэфирные группы включают, например, такие, которые образованы из фармацевтически приемлемых карбоновых кислот, в частности алкановых, алкеновых, циклоалкановых и алкандиовых кислот, в которых каждый алкильный или алкенильный фрагмент предпочтительно содержит более 6 атомов углерода. Примеры подходящих сложных эфиров включают (но не ограничиваются только ими) эфиры C1-C6-алкановых кислот, такие как ацетатные, пропионатные, бутиратные и пивалатные эфиры.
Термин “гидроксил-активирующая группа” при использовании в настоящем тексте означает лабильный химический фрагмент, который известен в данной области как активирующий гидроксильную группу таким образом, что она удаляется при синтетических операциях, таких как реакция замещения или элиминирования. Примеры гидроксил-активирующих групп включают (но не ограничиваются только ими) мезилат, тозилат, трифлат, п-нитробензоат, фосфонат и т.п.
Термин “активированный гидроксил” при использовании в настоящем тексте означает гидрокси-группу, активированную описанной выше гидроксил-активирующей группой, включая, например, мезилатную, тозилатную, трифлатную, п-нитробензоатную, фосфонатную группы.
Термин “гидрокси-защитная группа” при использовании в настоящем тексте означает лабильный химический фрагмент, который известен в данной области как защищающий гидроксильную группу от нежелательных реакций при синтетических превращениях. После таких синтетических превращений гидрокси-защитную группу можно селективно удалить. Известные в данной области гидрокси-защитные группы в общем описаны в работе T.H. Greene and P.G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd edition, John Wiley & Sons, New York (1999). Примеры гидроксил-защитных групп включают бензилоксикарбонил, 4-метоксибензилоксикарбонил, трет-бутокси-карбонил, изопропоксикарбонил, дифенилметоксикарбонил, 2,2,2-трихлорэтоксикарбонил, аллилоксикарбонил, ацетил, формил, хлорацетил, трифторацетил, метоксиацетил, феноксиацетил, бензоил, метил, т-бутил, 2,2,2-трихлорэтил, 2-триметилсилилэтил, аллил, бензил, трифенил-метил (тритил), метоксиметил, метилтиометил, бензилоксиметил, 2-(триметилсилил)-этоксиметил, метанeсульфонил, триметилсилил, триизопропилсилил и т.п.
Термин «замещенный гидрокси» при использовании в настоящем тексте означает гидрокси-группу, защищенную описанной выше гидроксил-защитной группой, включая, например, бензоильную, ацетильную, триметилсилильную, триэтилсилильную, метоксиметильную группу.
Термин “гидрокси-пролекарственная группа” при использовании в настоящем тексте означает про-группу, которая известна в данной области как временно изменяющая физикохимические и, как следствие, биологические свойства материнской лекарственной молекулы путем закрытия или маскировки гидрокси-группы. После проведения синтетических манипуляций, описанная выше гидрокси-пролекарственная группа должна быть способна превращаться обратно в гидрокси-группу in vivo. Известные в данной области гидрокси-пролекарственные группы в целом описаны в работе Kenneth B. Sloan, Prodrugs, Topical an Ocular Drug Delivery, (Drugs and the Pharmaceutical Sciences; Volume 53), Marcel Dekker, Inc., New York (1992) и в работе “Prodrugs of Alcohols and Phenols” by S. S. Dhareshwar and V. J. Stella, in Prodrugs Challenges and Rewards Part-2, (Biotechnology: Pharmaceutical Aspects), edited by V. J. Stella, et al, Springer and AAPSPress, 2007, pp 31-99.
Термин “амино” при использовании в настоящем тексте означает группу –NH2.
Термин “замещенная аминогруппа” при использовании в настоящем тексте означает группу –NRR, где каждый R независимо выбран из группы, состоящей из атома водорода, алкила, циклоалкила, арила, гетероарила и гетероциклоалкила, при условии, что обе группы R не могут представлять собой атом водорода, или группу −Y−Z, в которой Y представляет собой необязательно замещенный алкилен, и Z представляет собой алкенил, циклоалкенил или алкинил.
Термин “амино-защитная группа” при использовании в настоящем тексте означает лабильный химический фрагмент, который в данной области известен как защищающий аминогруппу от нежелательных реакций во время синтетических манипуляций. После окончания синтетических манипуляций, описанную в настоящем тексте амино-защитную группу можно селективно удалить. Известные в данной области амино-защитные группы в общем описаны в работе T.H. Greene and P.G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd edition, John Wiley & Sons, New York (1999). Примеры амино-защитных групп включают (но не ограничиваются только ими) т-бутоксикарбонил, 9-флуоренилметоксикарбонил, бензилоксикарбонил и т.п.
Термин «уходящая группа» означает функциональную группу или атом, которые можно заменить на другую функциональную группу или атом по реакции замещения, такой как как реакция нуклеофильного замещения. Например, репрезентативные уходящие группы включают хлор, бром и иод; сульфоэфирные группы, такие как мезилат, тозилат, брозилат, нозилат и т.п.; и aцилокси-группы, такие как ацетокси, трифторацетокси и т.п.
При использовании в настоящем тексте, термин ацтеки «фармацевтически приемлемый сложный эфир» означает сложные эфиры соединений, полученных способом по настоящему изобретению, которые гидролизуются in vivo, и включает эфиры, которые легко разлагаются в организме человека, высвобождая материнское соединение или его соль. Подходящие сложноэфирные группы включают, например, такие, которые образованы из фармацевтически приемлемых алифатических карбоновых кислот, в частности алкановых, алкеновых, циклоалкановых и алкандиовых кислот, в которых каждый алкильный или алкенильный фрагмент предпочтительно содержит не более 6 атомов углерода. Примеры подходящих сложных эфиров включают (но не ограничиваются только ими) формиаты, ацетаты, пропионаты, бутираты, акрилаты и этилсукцинаты.
Термин “фармацевтически приемлемые пролекарства” при использовании в настоящем тексте означает пролекарства соединений, полученных способом по настоящему изобретению, которые, согласно принятым медицинским представлениям, подходят для применения в контакте с тканями человека и низших животных без ненужной токсичности, раздражения, аллергических реакций и т.п., которые соответствуют разумному соотношению польза/риск и эффективны в областях их предполагаемого применения, а также, если это возможно, цвиттерионные формы соединений по настоящему изобретению. Термин «пролекарство” при использовании в настоящем тексте означает соединение, которое может претерпевать превращения in vivo по метаболическим механизмам (например, вследствие гидролиза), с получением соединения, соответствующего формулам по настоящему изобретению. В данной области техники известны различные формы пролекарств, например, они описаны в работе Bundgaard, (ed.), Design of Prodrugs, Elsevier (1985); Widder, et al. (ed.), Methods in Enzymology, Vol. 4, Academic Press (1985); Krogsgaard-Larsen, et al., (ed). «Design and Application of Prodrugs, Textbook of Drug Design and Development, Chapter 5, 113-191 (1991); Bundgaard, et al., Journal of Drug Deliver Reviews, 8:1-38(1992); Bundgaard, J. of Pharmaceutical Sciences, 77:285 et seq. (1988); Higuchi and Stella (eds.) Prodrugs as Novel Drug Delivery Systems, American Chemical S°Сiety (1975); и Bernard Testa & Joachim Mayer, “Hydrolysis In Drug and Prodrug Metabolism: Chemistry, Biochemistry and Enzymology,” John Wiley and Sons, Ltd. (2002).
Термин «лечение» при использовании в настоящем тексте означает облегчение, уменьшение степени тяжести, снижение, снятие или модулирование, т.е. вызывание регресса болезни или болезненного состояния. Лечение может также включать ингибирование, т.е. остановку развития существующего заболевания или патологического состояния, и уменьшение или облегчение, т.е. вызывание регресса существующего заболевания или патологического состояния, например, в тех случаях, когда заболевание или патологическое состояние уже имеет место.
Термин «предотвращение» при использовании в настоящем тексте означает полную или почти полную остановку наступления заболевания или патологического состояния у пациента или субъекта, особенно когда пациент или субъект предрасположен к таковому, или у него есть риск приобретения заболевания или патологического состояния.
Кроме того, соединения по настоящему изобретению, например, соли этих соединений, могут существовать в гидратированной или негидратированной (безводной) форме или в виде сольватов с молекулами других растворителей. Неограничивающие примеры гидратов включают моногидраты, дигидраты и т.д. Неограничивающие примеры сольватов включают сольваты с этанолом, сольваты с ацетоном и т.д.
Термин «сольваты» означает формы с добавлением растворителя, которые содержат стехиометрические или нестехиометрические количества растворителя. Некоторые соединения склонны к захвату фиксированной мольной пропорции молекул растворителя в кристаллическом состоянии, с формированием сольвата. Если растворителем является вода, то образующийся сольват представляет собой гидрат. Когда растворитель представляет собой спирт, то сольват представляет собой алкоголят. Гидраты образуются при комбинации одной или больше молекул воды с одним из веществ, где вода сохраняет свое молекулярное состояние как молекула H2O, и такая комбинация способна формировать один или больше гидратов.
При использовании в настоящем тексте, термин «аналог» означает химическое соединение, которое структурно сходно с другим, но немного отличается по составу (например, замена атома на атом другого элемента, или присутствие определенной функциональной группы, или замена одной функциональной группы на другую функциональную группу). Таким образом, аналог представляет собой соединение, которое сходно или сопоставимо по функциям и внешнему виду с референсным соединением.
Термин «апротонный растворитель» при использовании в настоящем тексте означает растворитель, который относительно инертен в плане активности протона, т.е. не выступает в роли донора протона. Примеры включают (но не ограничиваются только ими) углеводороды, такие как, например, гексан и толуол, галогенированные углеводороды, такие как, например, метиленхлорид, этиленхлорид, хлороформ и т.п., гетероциклические соединения, такие как, например, тетрагидрофуран и N-метилпирролидинон, и простые эфиры, такие как диэтиловый эфир, бис-метоксиметиловый эфир. Такие растворители хорошо известны квалифицированным специалистам, и индивидуальные растворители или их смеси могут быть предпочтительны для определенных соединений и условий реакций, в зависимости от таких факторов как, например, растворимость реагентов, реакционная способность реагентов и предпочтительные диапазоны температур. Дополнительное обсуждение апротонных растворителей можно найти в учебниках органической химии или в специализированных монографиях, например: Organic Solvents Physical Properties and Methods of Purification, 4th ed., edited by John A. Riddick et al., Vol. II, in the Techniques of Chemistry Series, John Wiley & Sons, NY, 1986.
Термины «протогенный органический растворитель” или “протонный растворитель” при использовании в настоящем тексте означают растворители, которые склонны к отщеплению протона, такие как спирты, например, метанол, этанол, пропанол, изопропанол, бутанол, т-бутанол и т.д. Такие растворители хорошо известны квалифицированным специалистам в данной области, и индивидуальные растворители или их смеси могут быть предпочтительны для определенных соединений и условий реакций, в зависимости от таких факторов как, например, растворимость реагентов, реакционная способность реагентов и предпочтительные диапазоны температур. Дополнительное обсуждение протонных растворителей можно найти в учебниках органической химии или в специализированных монографиях, например: Organic Solvents Physical Properties and Methods of Purification, 4th ed., edited by John A. Riddick et al., Vol. II, in the Techniques of Chemistry Series, John Wiley & Sons, NY, 1986.
Комбинации заместителей и переменных, охватываемые настоящим изобретением, могут быть только такими, которые дают в результате устойчивые соединения. Термин «устойчивый» при использовании в настоящем тексте означает соединения, которые обладают стабильностью, достаточной для их производства, и которые сохраняют свою целостность в течение достаточного периода времени, чтобы их можно было применять для указанных в настоящем тексте целей (например, терапевтическое или профилактическое введение субъекту).
Синтезированные соединения можно выделять из реакционной смеси и дополнительно очищать такими методами как колоночная хроматография, высокоэффективная жидкостная хроматография или перекристаллизация. Кроме того, различные химические стадии можно проводить в другом порядке или последовательности, чтобы получить целевые соединения. Кроме того, растворители, температуры, продолжительность реакций и т.д. указаны в настоящем тексте исключительно в иллюстративных целях, и варьирование условий реакций позволяет получить целевые изоксазольные продукты по настоящему изобретению. Химические превращения в ходе синтезов и методология применения защитных групп (постановка и снятие защиты), которые применяются при синтезе описанных в настоящем тексте соединений, включают, например, описанные в работах R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989); T.W. Greene and P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 2d. Ed., John Wiley and Sons (1991); L. Fieser and M. Fieser, Fieser и Fieser's Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1994); и L. Paquette, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995).
Соединения по настоящему изобретению можно модифицировать путем изменения различных функциональных групп описанными в настоящем тексте методами синтеза, в целях усиления отдельных биологических свойств. Такие модификации включают модификации, улучшающие биологическую пенетрацию в нужную биологическую систему (например, в кровь, лимфатическую систему, центральную нервную систему), повышают пероральную биодоступность, повышают растворимость, делая возможным введение посредством инъекции, изменяют метаболизм и скорость выведения.
Фармацевтические композиции
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению содержат терапевтически эффективное количество соединения по настоящему изобретению вместе с одним или больше фармацевтически приемлемыми носителями. При использовании в настоящем тексте, термин «фармацевтически приемлемый носитель» означает нетоксичный инертный твердый или полутвердый или жидкий наполнитель, разбавитель, инкапсулирующий материал или вспомогательное вещество любого типа. Некоторые примеры веществ, которые могут выступать в роли фармацевтически приемлемых носителей, представляют собой сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал; целлюлоза и ее производные, такие как натрий карбоксиметилцеллюлоза, этилцеллюлоза и ацетат целлюлозы; порошкообразная трагакантовая камедь; солод; желатин; тальк; вспомогательные вещества, такие как масло какао и воска для суппозиториев; масла, такие как арахисовое масло, хлопковое масло; саффлоровое масло; кунжутное масло; оливковое масло; кукурузное масло и соевое масло; гликоли, такие как пропиленгликоль; сложные эфиры, такие как этилолеат и этиллаурат; агар; буферные добавки, такие как гидроксид магния и гидроксид алюминия; альгиновая кислота; апирогенная вода; изотонический раствор хлорида натрия; раствор Рингера; этиловый спирт и фосфатно-солевой буферный раствор, а также в состав можно вводить нетоксичные совместимые лубриканты, такие как лаурилсульфат натрия и стеарат магния, а также красители, разрыхлители, материалы для образования оболочки, подсластители, ароматизаторы и отдушки, консерванты и антиоксиданты. Фармацевтические композиции по настоящему изобретению можно вводить людям и другим животным перорально, ректально, парентерально, интрацистернально, интравагинально, интраперитонеально, наружно (например, в виде порошков, мазей или капель), буккально, или в виде перорального или назального спрея.
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению можно вводить перорально, парентерально, в виде ингаляционных спреев, наружно, ректально, назально, буккально, интравагинально или в виде имплантируемого резервуара, предпочтительно перорально или посредством инъекции. Фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут содержать любые общепринятые нетоксичные фармацевтически приемлемые носители или адъюванты. В некоторых случаях pH состава можно регулировать с помощью фармацевтически приемлемых кислот, оснований или буферных добавок для повышения устойчивости препарата соединения или его готовой формы. Термин “парентеральное” при использовании в настоящем тексте включает подкожное, внутрикожное, внутривенное, внутримышечное, внутрисуставное, внутриартериальное, внутригрудинное, интратекальное, внутриочаговое или внутричерепное введение с помощью методик инъекций или инфузий.
Жидкие дозированные формы для перорального введения включают фармацевтически приемлемые эмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры. Помимо действующих веществ, жидкие дозированные формы могут содержать инертные разбавители, обычно применяемые в данной области, например, воду или другие растворители, солюбилизаторы и эмульгаторы, такие как этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензил бензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, диметилформамид, масла (в частности, хлопковое, арахисовое, кукурузное, оливковое, касторовое или кунжутное масло), глицерин, тетрагидрофурфуриловый спирт, полиэтиленгликоли и сложные эфиры сорбитана с жирными кислотами, а также их смеси. Помимо инертных разбавителей, композиции для перорального введения могут также включать адъюванты, такие как смачивающие добавки, эмульгаторы и суспендирующие агенты, подсластители, ароматизаторы и отдушки.
Инъецируемые препараты, например, стерильные инъецируемые водные или масляные суспензии, можно готовить по методикам, известным квалифицированным специалистам в данной области, используя подходящие диспергирующие или смачивающие добавки и суспендирующие агенты. Стерильный инъецируемый препарат может также быть представлять собой стерильный инъецируемый раствор, суспензию или эмульсию в нетоксичном разбавителе или растворителе, подходящем для парентерального введения, например, раствор в 1,3-бутандиоле. Среди подходящих для применения носителей и растворителей находятся также вода, раствор Рингера, раствор по Фармакопее США и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, стерильные жирные масла также широко применяются в качестве растворителя или суспендирующей среды. Для этой цели можно применять любую марку жирного масла, включая синтетические моно- и диглицериды. Кроме того, при приготовлении инъецируемых препаратов применяют жирные кислоты, такие как олеиновая кислота.
Инъецируемые препараты можно стерилизовать, например, фильтрованием через удерживающий бактерии фильтр, или посредством включения стерилизующих агентов в стерильные твердые композиции, которые необходимо растворить или диспергировать в стерильной воде или другой стерильной среде непосредственно перед применением.
Для увеличения продолжительности действия лекарственного средства часто является желательным замедлить всасывание лекарственного средства при подкожной или внутримышечной инъекции. Этого можно достичь с помощью применения жидких суспензий кристаллических или аморфных веществ с низкой растворимостью в воде. Скорость всасывания лекарственного средства тогда зависит от скорости его растворения, которая, в свою очередь, может зависеть от размера кристаллов и кристаллической формы. Альтернативным образом, замедления всасывания парентерально введенного лекарственного средства можно достичь путем растворения или суспендирования лекарственного средства в масляном носителе. Инъецируемые депонированные готовые формы готовят путем формирования микроинкапсулированных матриц лекарственного средства в биоразлагаемых полимерах, таких как полилактид-полигликолид. Скорость высвобождения лекарственного средства можно контролировать соотношением лекарственного средства и полимера, а также природой используемого полимера. Примеры других биоразлагаемых полимеров включают поли(ортоэфиры) и поли(ангидриды). Депонированные инъецируемые препараты готовят также путем внедрения лекарственного средства в липосомы или микроэмульсии, которые совместимы с тканями организма.
Композиции для ректального или интравагинального применения предпочтительно представляют собой суппозитории, которые можно приготовить путем смешивания соединений по настоящему изобретению с подходящими нераздражающими вспомогательными веществами или носителями, такими как масло какао, полиэтиленгликоль или воск для суппозиториев, которые являются твердыми при комнатной температуре, но жидкими при температуре тела, и поэтому плавятся в заднем проходе или вагинальной полости, высвобождая действующее вещество.
Твердые дозированные формы для перорального введения включают капсулы, таблетки, пилюли, порошки и гранулы. В таких твердых дозированных формах действующее вещество смешано с по меньшей мере одним инертным фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом или носителем, таким как цитрат натрия или дикальция фосфат, и/или: a) наполнителями, такими как крахмалы, лактоза, сахароза, глюкоза, маннит и кремниевая кислота, b) связующими веществами, такими как, например, карбоксиметилцеллюлоза, альгинаты, желатин, поливинилпирролидинон, сахароза и смола акации, с) увлажнителями, такими как глицерин, d) разрыхлителями, такими как агар-агар, карбонат кальция, картофельный или тапиоковый крахмал, альгиновая кислота, некоторые силикаты и карбонат натрия, e) замедлителями схватывания раствора, такими как парафин, f) ускорителями всасывания, такими как четвертичные аммониевые соединения, g) увлажняющими агентами, такими как, например, цетиловый спирт и глицерин моностеарат, h) адсорбентами, такими как каолин и бентонит, и i) лубрикантами, такими как тальк, стеарат кальция, стеарат магния, твердые полиэтиленгликоли, лаурилсульфат натрия, и их смеси. В случае капсул, таблеток и пилюль, дозированная форма может также содержать буферные добавки.
Твердые композиции такого же типа могут также применяться в качестве наполнителей в мягких и твердых желатиновых капсулах, с применением таких вспомогательных веществ как лактоза или молочный сахар, а также полиэтиленгликолей с высоким молекулярным весом и т.п.
Действующие вещества могут быть также в микроинкапсулированной форме с одним или больше из перечисленных выше вспомогательных веществ. Такие твердые дозированные формы как таблетки, драже, капсулы, пилюли и гранулы могут быть также приготовлены с покрытиями и оболочками, такими как кишечнорастворимые покрытия, покрытия с замедленным высвобождением и другие покрытия, хорошо известные в области приготовления фармацевтических препаратов. В таких твердых дозированных формах действующее вещество может быть смешано с по меньшей мере одним инертным разбавителем, таким как сахароза, лактоза или крахмал. Такие твердые дозированные формы могут также содержать, как это принято в фармацевтической практике, дополнительные вещества, отличные от инертных разбавителей, например, лубриканты для таблетирования и другие вспомогательные вещества для таблетирования, такие как стеарат магния и микрокристаллическая целлюлоза. В случае капсул, таблеток и пилюль, дозированные формы могут также содержать буферные добавки. Они могут опционально содержать замутнители, а также могут иметь состав, который позволяет высвобождать действующее вещество (вещества) исключительно или предпочтительно в определенном отделе желудочно-кишечного тракта, опционально – замедленным образом. Примеры основы для таких композиций включают полимерные вещества и воска.
Дозированные формы для наружного или чрезкожного введения соединений по настоящему изобретению включают мази, пасты, кремы, лосьоны, гели, порошки, растворы, спреи, ингаляционные препараты или пластыри. Действующее вещество смешано в стерильных условиях с фармацевтически приемлемым носителем и, при необходимости, с подходящими консервантами или буферными добавками. Препараты для глазного применения, глазные капли, глазные мази, порошки и растворы также входят в объем настоящего изобретения.
Мази, пасты, кремы и гели могут содержать, помимо соединения по настоящему изобретению, вспомогательные вещества, такие как животные и растительные масла и жиры, воска, парафины, крахмал, трагакантовую камедь, производные целлюлозы, полиэтиленгликоли, силиконы, бентониты, кремниевую кислоту, тальк и оксид цинка, или их смеси.
Порошки и спреи могут содержать, помимо соединения по настоящему изобретению, вспомогательные вещества, такие как лактоза, тальк, кремниевая кислота, гидроксид алюминия, силикаты кальция и полиамидный порошок, или смеси перечисленных веществ. Спреи могут дополнительно содержать общеизвестные пропелленты, такие как хлорфторуглеводороды.
Чрезкожные пластыри обладают дополнительным преимуществом, т.к. они позволяют осуществлять контролируемое введение соединений в организм. Такие дозированные формы можно готовить растворением или диспергированием соединения в подходящей среде. Ускорители всасывания также могут применяться для усиления поступления соединения через кожу. Скорость поступления в организм можно контролировать с помощью подбора мембраны, определяющей скорость, или путем диспергирования соединения в полимерной матрице или в геле.
Если не указано иное, все технические и научные термины, использующиеся в настоящем тексте, имеют значения, общеизвестные квалифицированным специалистам в данной области. Все публикации, патенты, опубликованные патентные заявки и другие упомянутые в настоящем тексте литературные ссылки включены в настоящий текст в полном объеме посредством ссылки.
Аббревиатуры
В настоящем тексте в описании, на схемах и в Примерах используются перечисленные ниже аббревиатуры и сокращения:
BOP-Cl = бис(2-оксо-3-оксазолидинил)фосфинхлорид;
CDI = карбонилдиимидазол;
DBU = 1,8-диазабициклоундец-7-ен;
DCC = N,N'-дициклогексилкарбодиимид;
ДХМ = дихлорметан;
DIPEA = N,N-диизопропилэтиламин;
DMAP = N,N-диметиламинопиридин;
ДМЭ = 1,2-диметоксиэтан;
ДМФА = N,N-диметилформамид;
DMPU = 1,3-Диметил-3,4,5,6-тетрагидро-2(1H)-пиримидинон;
EDC = 1-(3-диэтиламинопропил)-3-этилкарбодиимид гидрохлорид;
Et3N = триэтиламин;
EtOAc = этилацетат;
HATU = 1-[бис(диметиламино)метилен]-1H-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний 3-оксид гексафторфосфат;
HCl = хлористоводородная кислота;
mCPBA = мета-хлорпероксибензойная кислота;
NMO = N-метилморфолин-N-оксид;
ПЭ = петролейный эфир
PhMe = толуол;
PyAOP = 7-азабензотриазол-1-илокси)трипирролидинофосфония гексафторфосфат;
PyBOP = бензотриазол-1-ил-окситрипирролидинофосфония гексафторфосфат;
ТГФ = тетрагидрофуран;
TEA = триэтиламин;
RT = комнатная температура.
Методы синтеза
Соединения и способы по настоящему изобретению будут более понятны в связке с приведенными далее схемами синтеза, которые иллюстрируют способы, которыми могут быть получены соединения по настоящему изобретению. Они приведены исключительно в иллюстративных целях и не ограничивают объем настоящего изобретения. Различные изменения и модификации раскрытых вариантов осуществления будут очевидны квалифицированным специалистам в данной области, и такие изменения и модификации, включая (но не ограничиваясь только ими) относящиеся к химическим структурам, заместителям, производным и/или способам по настоящему изобретению, могут быть сделаны без выхода за рамки сути настоящего изобретения и объема Формулы изобретения.
Как показано на Схеме 1, сложноэфирное соединение, имеющее формулу (S-4), где R4, X и 
имеют указанные выше значения, можно получить по реакции сочетания Сузуки-Мияура либо из соединения, имеющего формулу (S-1), и соответствующих бороновых кислот и их эфиров; либо из соединения, имеющего формулу (S-2), и соответствующего галогенида. Альтернативно, соединение, имеющее формулу (S-3), которое можно получить по реакции сочетания Сузуки-Мияура, можно превратить в сложноэфирное соединение, имеющее формулу (S-4), Pd-катализируемой реакцией CO-внедрения в спирты. Гидролиз соединения, имеющего формулу (S-4), в основных условиях дает карбоновую кислоту, представляющую собой соединение, имеющее формулу (S-5).
Схема 1
Как показано на Схеме 2, реакция карбоновой кислоты, представляющей собой соединение, имеющее формулу (S-5), и аминного соединения, имеющего формулу (S-6), в апротонном растворителе с подходящим каплинг-агентом в присутствии органического основания дает амидное соединение, имеющее формулу (I), где 
, R4, X, 
и 
имеют указанные выше значения. Подходящий каплинг-агент может представлять собой (не ограничиваясь только ими) BOP-Cl, CDI, DCC, EDC, HATU, PyAOP или PyBOP. Органическое основание может представлять собой (не ограничиваясь только ими) Et3N, DIPEA, пиридин или N-метилморфолин. Апротонный растворитель может представлять собой (не ограничиваясь только ими) ТГФ, ДХМ и ДМФА. Температура реакции составляет от -20°С до 80°С.
Схема 2
Как показано на Схеме 3, карбоновую кислоту, представляющую собой соединение, имеющее формулу (S-5), можно сначала превратить в ацилхлорид, имеющий формулу (S-7), используя такие реагенты (но не ограничиваясь только ими) как оксалилхлорид или реагент Госеза. Реакция ацилхлорида (S-7) с аминным соединением, имеющим формулу (S-6), в присутствии органического основания, такого как пиридин, дает соединение, имеющее формулу (I), где , R4, X, и имеют указанные выше значения.
Схема 3.
Как показано на Схеме 4, амидное соединение, имеющее формулу (I), где , R4, X, и имеют указанные выше значения, можно также получить из сложноэфирного соединения, имеющего формулу (S-4), и аминного соединения, имеющего формулу (S-6), в условиях сложноэфирно-амидного обмена. Эти условия включают (но не ограничиваются только ими) Cs2CO3 или K2CO3 в ДМФА при повышенной температуре; или AlMe3 в ДХМ при комнатной или повышенной температуре.
Схема 4
Примеры
Пример 1
Стадия 1-1
К раствору этил 4-гидроксипиридин-2-карбоксилата (200 мг, 1.20 ммоль) в ДХМ (5 мл) при 0°C по каплям добавляли триэтиламин (242.1 мг, 2.39 ммоль) и Tf2O (506.3 мг, 1.79 ммоль). Смесь нагревали до комнатной температуры, перемешивали 1 час и упаривали в вакууме. Очистка остатка методом колоночной хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента смесь 0 - 20% EtOAc в петролейном эфире дала соединение 1-a (170 мг, 47.49%) в виде желтого масла.
Стадия 1-2
Смесь соединения 1-a (150 мг, 0.50 ммоль), 1-циклопропил-4-(тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1H-пиразола (234.7 мг, 1.00 ммоль), Pd(PPh3)4 (57.9 мг, 0.05 ммоль) и K2CO3 (138.6 мг, 1.00 ммоль) в диоксане (5 мл) перемешивали при 100°C в атмосфере азота 1 час. Растворитель удаляли в вакууме. Очистка остатка методом хроматографии на силикагеле с использованием в качестве элюента EtOAc в петролейном эфире (0-50%) дала соединение 1-b (60 мг, 46.52%) в виде желтого масла.
Стадия 1-3
Смесь соединения 1-b (60 мг, 0.23 ммоль), соединения 1-c (71.4 мг, 0.35 ммоль) и Cs2CO3 (152.0 мг, 0.47 ммоль) в ДМФА перемешивали при 120°C в течение 2 часов. Растворитель удаляли в вакууме. Очистка остатка на колонке C-18 с использованием в качестве элюента ацетонитрила в H2O (60-70%), дала Пример 1 (7.8 мг) в виде белого твердого вещества. [M+H]+, 416. 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.61 (с, 1H), 8.65 - 8.61 (м, 2H), 8.40 (с, 1H), 8.12 (д, J = 7.6 Гц, 1H), 8.04 - 8.01 (м, 3H), 7.62 (дд, J = 5.3, 1.6 Гц, 1H), 5.89 (м, 1H), 3.72 (м, 1H), 1.76 (д, J = 6.6 Гц, 6H), 1.23 (м, 2H), 1.14 (м, 2H).
Пример 2
Стадия 2-1
При 0°C добавляли по каплям Tf2O (1.86 г, 6.60 ммоль) к раствору этил 4-гидрокси-5-метилпиридин-2- карбоксилата (800 мг, 4.42 ммоль) и Et3N (1.33 г, 13.20 ммоль) в ДХМ (5 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа и упаривали в вакууме. Очистка остатка методом колоночной хроматографии на силикагеле с использованием в качестве элюента EtOAc в петролейном эфире (0 - 24%) дала соединение 2-a (550 мг, 39.8%) в виде желтого масла.
Стадия 2-2
Смесь соединения 2-a (550 мг, 1.76 ммоль), 1-циклопропил-4-(тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1H-пиразола (822.1 мг, 3.51 ммоль), Pd(PPh3)4 (202.9 мг, 0.18 ммоль) и K2CO3 (485.3 мг, 3.51 ммоль) в диоксане (10 мл) перемешивали при 100°C в течение 2 часов в атмосфере азота. Растворитель удаляли в вакууме. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле с использованием в качестве элюента EtOAc в петролейном эфире (0 - 35%), получая соединение 2-b (400 мг, 83.97%) в виде желтого масла.
Стадия 2-3
Смесь соединения 2-b (80 мг, 0.29 ммоль), соединения 1-c (90.3 мг, 0.44 ммоль) и Cs2CO3 (192.1 мг, 0.59 ммоль) в ДМФА (2 мл) перемешивали при 100°C в течение 1 часа. Растворитель удаляли в вакууме. Полученный сырой продукт очищали на колонке C18, используя в качестве элюента ацетонитрил в H2O (50-70%), получая Пример 2 (15.3 мг) в виде белого твердого вещества. [M+H]+, 430; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.54 (с, 1H), 8.61 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.52 (с, 1H), 8.31 (с, 1H), 8.09 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.00 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.87 (с, 2H), 5.88 (м, 1H), 3.72 (м, 1H), 2.57 (с, 3H), 1.75 (д, J = 6.7 Гц, 6H), 1.24 (м, 2H), 1.16 (м, 2H).
Пример 3
Стадия 3-1
В смесь 1-циклопропил-4-(4,4,5,5-тетраметил- 1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1H-пиразола (2.0 г, 8.55 ммоль), 2-хлор-5-фтор-4-иодпиридина (2 г, 7.77 ммоль), и K2CO3 (3.2 г, 23.31 ммоль) в диоксане (10 мл) и H2O (2 мл) добавляли Pd(dppf)Cl2 (568.5 мг, 0.78 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота. Полученную смесь перемешивали при 80°C в течение 3 часов в атмосфере азота. После охлаждения до комнатной температуры, смесь разбавляли этилацетатом (20 мл) и промывали водой (10 мл *2) и насыщенным раствором хлорида натрия (10 мл). Органический слой сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента смесь петролейный эфир/EtOAc (5:1), получая соединение 3-a (1.3 г, 70.41%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 3-2
В 50-милиллитровом автоклаве раствор соединения 3-a (1.2 г, 5.0 ммоль), Pd(dppf)Cl2 (385 мг, 0.5 ммоль) и Et3N (1.52 г, 15 ммоль) в BuOH (20 мл) насыщали CO и перемешивали под давлением 10 атм CO при 70°С в течение 16 часов. Полученную смесь упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента смесь петролейный эфир/EtOAc (3:1), получая соединение 3-b (1.2 г, 78.35%) в виде желтого масла.
Стадия 3-3
В раствор соединения 3-b (600 мг, 1.98 ммоль) в ацетонитриле (5 мл) добавляли 1н. раствор HCl (5 мл), и полученную смесь перемешивали при 100°C в течение 14 часов в атмосфере азота. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток очищали методом обращенно-фазной флэш-хроматографии с 0 – 30% MeCN в воде, получая соединение 3-c (420 мг, 85.79%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 3-4
К раствору соединения 3-c (250 мг, 1.01 ммоль), HATU (499.8 мг, 1.31 ммоль) и DIPEA (392.1 мг, 3.03 ммоль) в ДМФА (5 мл) добавляли соединение 1-c (227.2 мг, 1.11 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов в атмосфере азота. Остаток очищали методом обращенно-фазной флэш-хроматографии с 40 – 70% MeCN в воде, получая Пример 3 (150 мг, 34.22%) в виде не совсем белого твердого вещества. [M+H]+, 434; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.39 (с, 1H), 8.60 (дд, J = 8.4, 1.0 Гц, 1H), 8.53 – 8.51 (м, 2H), 8.12 – 8.09 (м, 3H), 8.02 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 5.85 (м, 1H), 3.73 (м, 1H), 1.76 (д, J = 6.7 Гц, 6H), 1.26 (м, 2H), 1.12 (м, 2H).
Пример 4
Стадия 4-1
DBU (0.2 мл) добавляли к раствору Примера 3 (30 мг, 0.07 ммоль) в пирролидине (1 мл). Полученную смесь перемешивали при 80°С в течение 4 часов в атмосфере азота. Реакционную смесь очищали методом обращенно-фазной флэш-хроматографии с 40 -70% MeCN в воде, получая Пример 4 (17.9 мг, 53.37%) в виде белого твердого вещества. [M+H]+, 434; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.39 (с, 1H), 8.60 (дд, J = 8.3, 1.0 Гц, 1H), 8.20 (с, 1H), 8.04 – 8.06 (м, 2H), 7.97 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.68 (м, 2H), 5.90 (м, 1H), 3.69 (м, 1H), 3.20 (м, 4H), 1.95 (м, 4H), 1.75 (д, J = 6.7 Гц, 6H), 1.26 (м, 2H), 1.12 (м, 2H).
Пример 5
Пример 5 получали по методике, аналогичной описанной в Примере 4. [M+H]+, 499; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.47 (с, 1H), 8.61 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.38 (с, 1H), 8.25 (с, 1H), 8.20 (с, 1H), 8.16 (с, 1H), 8.08 (д, J = 7.4 Гц, 1H), 7.99 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 5.88 (м, 1H), 3.71 (м, 1H), 3.03 (м, 4H), 1.76 – 1.70 (м, 10H), 1.70 (м, 2H), 1.26 (м, 2H), 1.14 (м, 2H).
Пример 6
Пример 6 получали по методике, аналогичной описанной в Примере 4. [M+H]+, 501; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.45 (с, 1H), 8.60 (дд, J = 8.3, 1.0 Гц, 1H), 8.39 (с, 1H), 8.25 (с, 1H), 8.18 – 8.15 (м, 2H), 8.09 (дд, J = 7.7, 1.0 Гц, 1H), 8.00 (т, J = 8.3 Гц, 1H), 5.87 (м, 1H), 3.88 (т, J = 4.4 Гц, 4H), 3.70 (м, 1H), 3.11 (т, J = 4.4 Гц, 4H), 1.75 (д, J = 6.7 Гц, 6H), 1.70 (м, 2H), 1.26 (м, 2H), 1.14 (м, 2H).
Пример 7
Пример 7 получали по методике, аналогичной описанной в Примере 4. [M+H]+, 501; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.45 (с, 1H), 8.59 (дд, J = 8.3, 1.0 Гц, 1H), 8.40 (с, 1H), 8.24 (с, 1H), 8.12 (с, 1H), 8.09 (дд, J =7.6, 0.8 Гц, 1H), 7.99 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 5.88 (м, 1H), 3.71 (м, 1H), 3.19 (т, J = 4.4 Гц, 4H), 2.71 (т, J = 4.4 Гц, 4H), 2.47 (с, 3H), 1.75 (д, J = 6.7 Гц, 6H), 1.26 (м, 2H), 1.14 (м, 2H).
Пример 8
Стадия 8-1
К раствору соединения 3-c (150 мг, 0.61 ммоль), HATU (348 мг, 0.91 ммоль) и DIPEA (239 мг, 1.87 ммоль) в ДМФА (5 мл) добавляли соединение 8-a (141 мг, 0.67 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и очищали методом обращенно-фазной флэш-хроматографии с 50–80% MeCN в воде, получая Пример 8 (130 мг, 48.8%) в виде белого твердого вещества. [M+H]+ 440; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.58 (с, 1H), 8.51 – 8.50 (м, 2H), 8.17 (с, 1H), 8.11 – 8.08 (м, 2H), 5.88 (м, 1H), 3.73 (м, 1H), 1.74 (д, J = 6.7 Гц, 6H), 1.25 (м, 2H), 1.16 (м, 2H).
Пример 9
Пример 9 получали по методике, аналогичной описанной для Стадии 4-1. [M+H]+ 491; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.58 (с, 1H), 8.18 (с, 1H), 8.13 (с, 1H), 8.05 (с, 1H), 7.69 – 7.67 (м, 2H), 5.91 (м, 1H), 3.69 (м, 1H), 3.20 (т, J = 6.4 Гц, 4H), 1.95 (т, J = 6.4 Гц, 4H), 1.74 (д, J = 6.7 Гц, 6H), 1.25(м, 2H), 1.12 (м, 2H).
Пример 10
Пример 10 получали по методике, аналогичной описанной для Стадии 4-1. [M+H]+ 507; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.62 (с, 1H), 8.37 (с, 1H), 8.24 (с, 1H), 8.18 (с, 1H), 8.17 – 8.15 (м, 2H), 5.88 (м, 1H), 3.88 (т, J = 4.4 Гц, 4H), 3.70 (м, 1H), 3.11 (т, J = 4.4 Гц, 4H), 1.74 (д, J = 6.6 Гц, 6H), 1.22 (м, 2H), 1.15 (м, 2H).
Пример 11
Пример 11 получали по методике, аналогичной описанной для Стадии 4-1. [M+H]+ 505; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.63 (с, 1H), 8.36 (с, 1H), 8.24 (с, 1H), 8.22 – 8.12 (м, 3H), 5.89 (м, 1H), 3.71 (м, 1H), 3.02 (т, J = 5.2 Гц, 4H), 1.74 – 1.63 (м, 12H), 1.25 (м, 2H), 1.16 (м, 2H).
Пример 12
Пример 12 получали по методике, аналогичной описанной для Стадии 4-1. [M+H]+ 520; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.62 (с, 1H), 8.39 (с, 1H), 8.22 (с, 1H), 8.18 (с, 1H),8.15 (с, 1H), 8.10 (с, 1H), 5.88 (м, 1H), 3.71 (м, 1H), 3.22 (т, J = 4.9 Гц, 4H), 2.79 (с, 4H), 2.51 (с, 3H), 1.74 (д, J = 6.7 Гц, 6H), 1.25 (м, 2H), 1.16 (м, 2H).
Пример 13
Стадия 13-1
Смесь метил 4-хлор-5-метилпиридин-2-карбоксилата (200 мг, 1.08 ммоль), 1-циклопропил-4- (4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1H-пиразола (302.7 мг, 1.29 ммоль), Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2 (88.0 мг, 0.11 ммоль) и K2CO3 (446.8 мг, 3.23 ммоль) в диоксане (4 мл) и воде (1 мл) перемешивали при 80°C в течение 2 часов в атмосфере азота. После охлаждения до комнатной температуры, остаток очищали методом обращенно-фазной флэш-хроматографии с 40-70% MeCN в H2O, получая соединение 13-a (60 мг, 21.64%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 13-2
В перемешиваемую смесь соединения 13-a (60 мг, 0.23 ммоль) в MeOH (2 мл) и H2O (1 мл) добавляли NaOH (18.7 мг, 0.47 ммоль) при 0°C. Полученную смесь перемешивали 1 час при 50°C, охлаждали до комнатной температуры, подкисляли до pH 3 водным раствором HCl и упаривали в вакууме. Остаток очищали методом обращенно-фазной флэш-хроматографии с 10-50% MeCN/H2O, получая соединение 13-b (40 мг, 70.51%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 13-3
К раствору соединения 13-b (40 мг, 0.16 ммоль), HATU (91 мг, 0.24 ммоль) и DIPEA (62 мг, 0.48 ммоль) в ДМФА (2 мл) добавляли соединение 13-c (52 мг, 0.20 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов, и затем очищали методом обращенно-фазной флэш-хроматографии с 10-80% MeCN/H2O, получая соединение 13-d (30 мг, 37.4%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 13-4
К раствору соединения 13-d (30 мг, 0.06 ммоль) в MeOH (2 мл) добавляли K2CO3 (42 мг, 0.3 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Твердый осадок отделяли фильтрованием. Фильтрат очищали методом обращенно-фазной флэш-хроматографии с 10-60% MeCN/H2O, получая Пример 13 (30 мг) в виде белого твердого вещества. [M+H]+ 446; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.56 (с, 1H), 8.51 (с, 1H), 8.40 (дд, J = 8.3, 1.0 Гц, 1H), 8.30 (с, 1H), 8.12 (дд, J = 8.3, 1.0 Гц, 1H), 8.00 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.87 (с, 2H), 5.91 (м, 1H), 4.19 (д, J = 5.6 Гц, 2H), 3.72 (м, 1H), 3.27 (с, 1H), 2.57 (с, 3H), 1.74 (д, J = 6.8 Гц, 3H), 1.25 (м, 2H), 1.16 (м, 2H).
Пример 14
Стадия 14-1
Смесь 2-хлор-4-иод-5-(трифторметил)пиридина (1 г, 3.25 ммоль), 1-циклопропил-4-(4,4,5,5- тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1H-пиразола (990 мг, 4.23 ммоль), Pd(dppf)Cl2 (375 мг, 0.3 ммоль) и карбоната калия (1.35 г, 9.75 ммоль) в диметиловом эфире этиленгликоля (5 мл) и H2O (5 мл) перемешивали при 100°С в течение 3 часов. Реакционную смесь упаривали и очищали методом препаративной ВЭЖХ, используя в качестве элюента 0–100% MeCN/H2O, получая соединение 14-a (750 мг, 80%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 14-2
В 50-миллилитровом автоклаве раствор соединения 14-a (750 мг, 2.61 ммоль), Pd(dppf)Cl2 (425 мг, 0.52 ммоль) и TEA (957 мг, 7.83ммоль) в BuOH (10 мл) перемешивали под давлением 10 атм CO при 70°С в течение ночи. Реакционную смесь упаривали в вакууме. Очистка остатка методом препаративной ВЭЖХ, используя в качестве элюента 0-100% MeCN/H2O дала соединение 14-b (660 мг, 72%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 14-3
В 50-миллилитровом автоклаве добавляли 1н. водный раствор HCl (5 мл) к раствору соединения 14-b (660 мг, 1.87 ммоль) в MeCN (10 мл). Результирующий раствор перемешивали при 100°С в течение ночи. Реакционную смесь упаривали, и остаток очищали методом препаративной ВЭЖХ, используя в качестве элюента 0-40% MeCN/H2O, получая соединение 14-c (420 мг, 76%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 14-4
К раствору соединения 14-c (30 мг, 0.10 ммоль), HATU (58 мг, 0.15 ммоль) и 4-метилморфолина (33 мг, 0.30 ммоль) в ДМФА (2 мл) добавляли соединение 1-c (24.8 мг, 0.12 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, и очищали методом препаративной ВЭЖХ, используя в качестве элюента 0-80% MeCN/H2O, получая Пример 14 (16.5 мг) в виде белого твердого вещества. [M+H]+ 484; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.48 (с, 1H), 9.01 (с, 1H), 8.60 (д, J = 8.4, 1.0 Гц, 1H), 8.43 (с, 1H), 8.15 (дд, J = 8.4, 1.0 Гц, 1H), 8.04 (т, J = 8.4 Гц, 1H), 7.89 (д, J = 13.1 Гц, 2H), 5.86 (м, 1H), 3.73 (м, 1H), 1.76 (д, J = 6.7 Гц, 6H), 1.25 (м, 2H), 1.16 (м, 2H).
Пример 15
Стадия 15-1
Пример 15 получали по методике, аналогичной описанной для Стадии 14-4. [M+H]+ 490; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.69 (с, 1H), 8.98 (с, 1H), 8.42 (с, 1H), 8.20 (с, 1H), 7.89 (д, J = 14.2 Гц, 2H), 5.87 (м, 1H), 3.73 (м, 1H), 1.75 (д, J = 6.7 Гц, 6H), 1.25 (м, 2H), 1.16 (м, 2H).
Пример 16
Пример 16 получали из соединения 14-c по методике, аналогичной описанной для Стадии 13-3 и Стадии 13-4. [M+H]+ 500; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.51 (с, 1H), 9.00 (с, 1H), 8.44 (м, 2H), 8.17 (дд, J = 8.0, 1.0 Гц, 1H), 8.05 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.90 (д, J = 14.3 Гц, 2H), 5.88 (м, 1H), 4.20 (м, 2H), 3.73 (м, 1H), 1.74 (д, J = 6.8 Гц, 3H), 1.23 (м, 2H), 1.14 (м, 2H).
Пример 17
Пример 17 получали из соединения 13-b и соединения 17-a по методике, аналогичной описанной для Стадии 14-4. [M+H]+ 430; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.55 (с, 1H), 8.60 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.52 (с, 1H), 8.30 (с, 1H), 8.06 (т, J = 8.1 Гц, 1H), 7.87 (с, 2H), 7.68 (д, J = 7.8 Гц, 1H), 3.98 (м, 1H), 3.72 (м, 1H), 2.56 (с, 3H), 1.53 (д, J = 6.9 Гц, 6H), 1.25 (м, 2H), 1.15 (м, 2H).
Пример 18
Стадия 18-1
Смесь соединения 18-a (US 2017/0121308) (100 мг, 0.45 ммоль), 1-цикло пропил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1H-пиразола (211 мг, 0.90 ммоль), Pd(PPh3)4 (104 мг, 0.09 ммоль) и K2CO3 (187 мг, 1.35 ммоль) в диоксане (5 мл) перемешивали при 100°C в течение в течение ночи в атмосфере азота. Растворитель упаривали в вакууме, и остаток очищали на обращенно-фазной хроматографической колонке с 0-65% MeCN/H2O, получая соединение 18-b (95 мг, 71.8%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 18-2
В 8-милилитровую герметично закрывающуюся пробирку помещали соединение 18-b (30 мг, 0.10 ммоль), соединение 1-c (43.0 мг, 0.20 ммоль), Cs2CO3 (100 мг, 0.31 ммоль) и ДМФА (5 мл). Полученную смесь перемешивали при 100°C в течение 3 часов в атмосфере азота, и очищали методом обращенно-фазной флэш-хроматографии с 0-65% MeCN/H2O, получая Пример 18 (8 мг) в виде не совсем белого твердого вещества. [M+H]+ 466; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.54 (с, 1H), 9.03 (с, 1H), 8.61 (дд, J = 8.4, 0.9 Гц, 1H), 8.39 (с, 1H), 8.14 (дд, J = 8.4, 0.9 Гц, 1H), 8.03 (т, J = 8.4 Гц, 1H), 7.91 – 7.82 (м, 2H), 6.84 (т, J = 54.0 Гц, 1H), 5.87 (м, 1H), 3.74 (м, 1H), 1.77 (д, J = 6.7 Гц, 6H), 1.26 (м, 2H), 1.19 (м, 2H).
Пример 19
Пример 19 получали из соединения 18-b и соединения 8-a по методике, аналогичной описанной для Стадии 18-2. [M+H]+ 472; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.73 (с, 1H), 9.00 (с, 1H), 8.38 (с, 1H), 8.20 (с, 1H), 7.86 (д, J = 17.1 Гц, 2H), 6.84 (т, J = 54.0 Гц, 1H), 5.88 (м, 1H), 3.74 (м, 1H), 1.75 (д, J = 6.7 Гц, 6H), 1.26 (м, 2H), 1.17 (м, 2H).
Пример 20
Стадия 20-1
Смесь метил 4-хлор-5-метилпиридин-2-карбоксилата (300 мг, 1.62 ммоль), 1-трет-бутил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1H-пиразола (606.5 мг, 2.42 ммоль), Pd(PPh3)4 (373.5 мг, 0.32 ммоль), K2CO3 (670.1 мг, 4.85 ммоль) в диоксане (5 мл) перемешивали при 100°C в атмосфере азота в течение ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры и очищали методом обращенно-фазной флэш-хроматографии с 0-40% MeCN/H2O, получая соединение 20-a (140 мг, 31.69%) в виде желтого масла.
Стадия 20-2
Пример 20 получали из соединения 20-a и соединения 1-c по методике, аналогичной описанной для Стадии-18-2. [M+H]+ 446; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.57 (с, 1H), 8.62 (д, J = 8.2 Гц, 1H), 8.53 (с, 1H), 8.34 (с, 1H), 8.10 (д, J = 7.5 Гц, 1H), 8.01 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.94 (с, 2H), 5.89 (м, 1H), 2.59 (с, 3H), 1.76 (д, J = 6.6 Гц, 6H), 1.70 (с, 9H).
Пример 21
Пример 21 получали из соединения 20-a и 17-a по методике, аналогичной описанной для Стадии 18-2. [M+H]+ 446; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.58 (с, 1H), 8.61 (д, J = 8.2 Гц, 1H), 8.53 (с, 1H), 8.33 (с, 1H), 8.07 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.97 (с, 1H), 7.94 (с, 1H),7.69 (д, J = 7.7 Гц, 1H), 4.00 (м, 1H), 2.59 (с, 3H), 1.71 (с, 9 H), 1.54 (д, J = 6.9 Гц, 6H).
Пример 22
Пример 22 получали из соединения 20-a и соединения 22-a по методике, аналогичной описанной для Стадии 18-2. [M+H]+ 462; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.60 (с, 1H), 8.51 (с, 1H), 8.41 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.33 (с, 1H), 8.13 (д, J = 7.6 Гц, 1H), 8.02 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.93 (с, 1H), 7.92 (с, 1H), 5.90 (м, 1H), 4.19 (д, J = 6.0 Гц, 2H), 2.59 (с, 3H), 1.74 (д, J = 7.6 Гц, 3H), 1.69 (с, 9H).
Пример 23
Стадия 23-1
Смесь метил 5-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-карбоксилата (300 мг, 1.08 ммоль), 4-бром-1-(пропан-2-ил)-1H-имидазола (307.0 мг, 1.62 ммоль), Pd(PPh3)4 (250.2 мг, 0.22 ммоль), K2CO3 (448.8 мг, 3.25 ммоль) в диоксане (5 мл) перемешивали при 100°C в атмосфере азота в течение ночи. Полученную смесь упаривали в вакууме и очищали методом обращенно-фазной флэш-хроматографии с 0-37% MeCN/H2O, получая соединение 23-a (180 мг, 64.12%) в виде желтого масла.
Стадия 23-2
Пример 23 получали из соединения 23-a по методике, аналогичной описанной для Стадии 18-2. [M+H]+ 432; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.57 (с, 1H), 8.68 (с, 1H), 8.63 (д, J = 8.4 Гц, 1H), 8.51 (с, 1H), 8.08 (д, J = 7.5 Гц, 1H), 7.99 (т, J = 7.9 Гц, 1H), 7.71 (с, 1H), 7.44 (с, 1H), 5.90 (м, 1H), 4.46 (м, 1H), 2.68 (с, 3H), 1.75 (д, J = 6.6 Гц, 6H), 1.60 (д, J = 6.7 Гц, 6H).
Пример 24
Пример 24 получали из соединения 23-a и соединения 17-a по методике, аналогичной описанной для Стадии 18-2. [M+H]+ 432; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.58 (с, 1H), 8.69 (с, 1H), 8.62 (д, J = 8.2 Гц, 1H), 8.51 (с, 1H), 8.05 (т, J = 8.1 Гц, 1H), 7.74 (с, 1H), 7.67 (д, J = 7.6 Гц, 1H), 7.44 (д, J = 1.3 Гц, 1H), 4.47 (м, 1H), 4.00 (м, 1H), 2.68 (с, 3H), 1.61 (д, J = 6.7 Гц, 6H), 1.53 (д, J = 6.9 Гц, 6H).
Пример 25
Пример 25 получали из соединения 23-a и соединения 22-a по методике, аналогичной описанной для Стадии 18-2. [M+H]+ 448; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.61 (с, 1H), 8.68 (с, 1H), 8.51 (с, 1H), 8.38 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.12 (д, J = 7.6 Гц, 1H), 8.00 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.76 (с, 1H), 7.45 (с, 1H), 5.94 (м, 1H), 4.48 (м, 1H), 4.17 (м, 2H), 2.68 (с, 3H), 1.74 (д, J = 6.8 Гц, 3H), 1.62 (д, J = 6.7 Гц, 6H).
Пример 26
Пример 26 был получен по методике, аналогичной описанной в Примере 20. [M+H]+ 432; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.55 (с, 1H), 8.62 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.53 (с, 1H), 8.33 (с, 1H), 8.10 (д, J = 7.6 Гц, 1H), 8.01 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.91 (с, 1H), 7.85 (с, 1H), 5.88 (м, 1H), 4.62 (м, 1H), 2.58 (с, 3H), 1.76 (д, J = 6.6 Гц, 6H), 1.62 (д, J = 6.7 Гц, 6H).
Пример 27
Пример 27 был получен по методике, аналогичной описанной в Примере 21. [M+H]+ 432; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.63 (с, 1H), 8.60 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.52 (с, 1H), 8.34 (с, 1H), 8.07 (т, J = 8.1 Гц, 1H), 7.92 (с, 1H), 7.86 (с, 1H), 7.70 (д, J = 7.8 Гц, 1H), 4.64 (м, 1H), 4.02 (м, 1H), 2.59 (с, 3H), 1.63 (д, J = 6.7 Гц, 6H), 1.54 (д, J = 6.9 Гц, 6H).
Пример 28
Пример 28 был получен по методике, аналогичной описанной в Примере 22. [M+H]+ 448; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.69 (с, 1H), 8.52 (с, 1H), 8.41 (д, J = 8.0 Гц, 1H), 8.33 (с, 1H), 8.15 (д, J = 7.1 Гц, 1H), 8.02 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.93 (с, 1H), 7.87 (с, 1H), 5.94 (м, 1H), 4.63 (м, 1H), 4.19 (м, 2H), 2.60 (с, 3H), 1.74 (д, J = 6.8 Гц, 3H), 1.63 (д, J = 6.7 Гц, 6H).
Пример 29
Стадия 29-1
К раствору соединения 22-a (60.1 мг, 0.27 ммоль) в ДХМ (5 мл) при 0°C добавляли Me3Al в толуоле (0.4 мл, 0.568 ммоль) в атмосфере азота. Смесь перемешивали 1 час и добавляли раствор соединения 18-b (80 мг, 0.27 ммоль) в ДХМ (1 мл). Полученную смесь перемешивали при 35°C в течение 16 часов, разбавляли ДХМ, и промывали водным раствором Сегнетовой соли и насыщенным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным Na2SO4 и упаривали при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищали методом препаративной ВЭЖХ, используя в качестве элюента 35-60% MeCN/H2O, получая Пример 29 (11.8 мг) в виде белого твердого вещества. [M+H]+ 482; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.57 (с, 1H), 9.02 (с, 1H), 8.46 – 8.37 (м, 2H), 8.17 (д, J = 7.6 Гц, 1H), 8.05 (т, J = 8.1 Гц, 1H), 7.90 (с, 1 H), 7.85 (с, 1H), 6.84 (т, J = 53.2 Гц, 1H), 5.90 (м, 1H), 4.27 – 4.17 (м, 2H), 3.75 (м, 1H), 1.75 (д, J = 6.8 Гц, 3H), 1.27 (м, 2H), 1.17 (м, 2H).
Пример 30
Стадия 30-1
Смесь метил 5-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиколината (300 мг, 1.08 ммоль), 4-бром-1-(трифторметил)-1H-пиразола (256 мг, 1.19 ммоль), Pd(PPh3)4 (104 мг, 0.1 ммоль) и K2CO3 (447 мг, 3.24 ммоль) в диоксане (10 мл) перемешивали при 100°C в атмосфере азота 1 час. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток очищали методом обращенно-фазной флэш-хроматографии с 0-60% CH3CN в воде, получая соединение 30-a (175 мг, 56.7%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 30-2
Пример 30 получали из соединения 30-a и соединения 1-c по методике, аналогичной описанной для Стадии 29-1. [M+1]+ 458; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.50 (с, 1H), 8.62 – 8.60 (м, 2H), 8.33 (с, 1H), 8.18 (с, 1H), 8.15 – 8.06 (м, 2H), 8.01 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 5.87 (м, 1H), 2.58 (с, 3H), 1.76 (д, J = 6.7 Гц, 6H).
Пример 31
Пример 31 получали из соединения 30-a и соединения 17-a по методике, аналогичной описанной для Стадии 29-1. [M+1]+ 458; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.51 (с, 1H), 8.61 – 8.59 (м, 2H), 8.32 (с, 1H), 8.17 (с, 1H), 8.13 (с, 1H), 8.08 (т, J = 8.1 Гц, 1H), 7.70 (д, J = 7.8 Гц, 1H), 3.97 (м, 1H), 2.58 (с, 3H), 1.53 (д, J = 6.9 Гц, 7H).
Пример 32
Пример 32 получали из соединения 30-a и соединения 22-a по методике, аналогичной описанной для Стадии 29-1. [M+1]+ 474; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.53 (с, 1H), 8.61 (с, 1H), 8.42 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.33 (с, 1H), 8.18 (с, 1H), 8.16 – 8.13 (м, 2H), 8.02 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 5.90 (м, 1H), 4.21 (м, 2H), 2.59 (с, 3H), 1.74 (д, J = 6.8 Гц, 3H).
Пример 33
Стадия 33-1
Смесь метил 5-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-карбоксилата (250 мг, 0.90 ммоль), 3-бром-1-(пропан-2-ил)-1H-пиразола (341.1 мг, 1.80 ммоль), Pd(PPh3)4 (208.5 мг, 0.18 ммоль) и K2CO3 (374.0 мг, 2.71 ммоль) в диоксане (5 мл) перемешивали при 100°C в атмосфере азота в течение ночи. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали методом обращенно-фазной флэш-хроматографии с 0-40% MeCN/H2O, получая соединение 33-a (200 мг, 85.50%) в виде желтого масла.
Стадия 33-2
Пример 33 получали из соединения 33-a и соединения 1-c по методике, аналогичной описанной для Стадии 29-1. [M+H]+ 432. 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.60 (с, 1H), 8.67 – 8.59 (м, 2H), 8.56 (с, 1H), 8.10 (д, J = 7.6 Гц, 1H), 8.00 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.56 (д, J = 2.3 Гц, 1H), 6.70 (д, J = 2.4 Гц, 1H), 5.92 (м, J = 6.7 Гц, 1H), 4.61 (м, J = 6.7 Гц, 1H), 2.70 (с, 3H), 1.76 (д, J = 6.6 Гц, 6H), 1.61 (д, J = 6.6 Гц, 6H).
Пример 34
Пример 34 получали из соединения 33-a и соединения 17-a по методике, аналогичной описанной для Стадии 29-1. [M+H]+ 432. 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.58 (с, 1H), 8.65 – 8.57 (м, 2H), 8.54 (с, 1H), 8.05 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.68 (д, J = 7.8 Гц, 1H), 7.56 (д, J = 2.3 Гц, 1H), 6.69 (д, J = 2.3 Гц, 1H), 4.60 (м, J = 6.8 Гц, 1H), 4.00 (м, J = 6.9 Гц, 1H), 2.69 (с, 3H), 1.61 (д, J = 6.7 Гц, 6H), 1.54 (д, J = 6.9 Гц, 6H).
Пример 35
Пример 35 получали из соединения 33-a и соединения 22-a по методике, аналогичной описанной для Стадии 29-1. [M+H]+ 448. 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.63 (с, 1H), 8.59 (с, 1H), 8.53 (с, 1H), 8.42 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.11 (д, J = 7.6 Гц, 1H), 8.00 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.56 (д, J = 2.3 Гц, 1H), 6.70 (д, J = 2.3 Гц, 1H), 5.94 (м, J = 6.5 Гц, 1H), 4.60 (м, J = 6.7 Гц, 1H), 4.19 (д, J = 6.0 Гц, 2H), 3.30 (с, 1H), 2.70 (с, 3H), 1.74 (д, J = 6.8 Гц, 3H), 1.61 (д, J = 6.7 Гц, 6H)
Пример 36
Стадия 36-1
В пробирке для проведения реакций в микроволновой печи нагревали смесь метил 4-хлор-5-метилпиридин-2-карбоксилата (100 мг, 0.54 ммоль), 2-(трибутилстаннил)пиридина (190 мг, 0.52 ммоль) и Pd(PPh3)4 (49 мг, 0.04 ммоль) в ДМФА (2 мл) в условиях микроволнового излучения при 160°C в течение 1 часа. Растворитель удаляли в вакууме, и остаток очищали методом препаративной ВЭЖХ, используя в качестве элюента 0-90% MeCN/H2O, получая 60 мг (49%) соединения 36-a.
Стадия 36-2
Пример 36 получали из соединения 36-a и соединения 1-c по методике, аналогичной описанной для Стадии 18-2. [M+H]+401; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.55 (с, 1H), 8.79 (д, J = 4.4 Гц, 1H), 8.67 – 8.59 (м, 2H), 8.39 (с, 1H), 8.10 (д, J = 7.2 Гц, 1H), 8.00 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.90 (тд, J = 7.8, 1.8 Гц, 1H), 7.57 (д, J = 7.8 Гц, 1H), 7.41 (дд, J = 7.6, 4.9 Гц, 1H), 5.90 (м, 1H), 2.55 (с, 3H), 1.77 (д, J = 6.7 Гц, 6H).
Пример 37
Стадия 37-1
Смесь метил 4-хлор-5-метилпиридин-2-карбоксилата (100 мг, 0.54 ммоль), (пиридин-3-ил)бороновой кислоты (100 мг, 0.80 ммоль), Pd(PPh3)4 (62 мг, 0.05 ммоль) и K2CO3 (224 мг, 1.62 ммоль) в диоксане (5 мл) перемешивали при 100°C в течение ночи. Растворитель удаляли в вакууме, и остаток очищали методом препаративной ВЭЖХ, используя в качестве элюента 0–80% MeCN/H2O, получая 60 мг (48.8%) соединения 37-a в виде желтого твердого вещества.
Стадия 37-2
Пример 37 получали из соединения 37-a по методике, аналогичной описанной для Стадии 18-2. [M+H]+ 401; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.52 (с, 1H), 8.75 (д, J = 4.8 Гц, 1H), 8.71 (с, 1H), 8.66 (с, 1H),8.61 (д, J = 8.0 Гц, 1H), 8.24 (с, 1H), 8.10 (д, J = 7.6 Гц, 1H), 8.01 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.77 (д, J = 8.0 Гц, 1H), 7.49 (дд, J = 7.8, 4.8 Гц, 1H), 5.88 (м, 1H), 2.45 (с, 3H), 1.77 (д, J = 6.7 Гц, 6H).
Пример 38
Стадия 38-1
Смесь метил 4-хлор-5-метилпиридин-2-карбоксилата (100 мг, 0.54 ммоль), (пиридин-4-ил)бороновой кислоты (100 мг, 0.80 ммоль), Pd(PPh3)4 (62 мг, 0.05 ммоль) и K2CO3 (223 мг, 1.62 ммоль) в диметиловом эфире этиленгликоля (5 мл) и H2O (1 мл) перемешивали при 100°C в течение ночи. Растворитель удаляли в вакууме, и остаток очищали методом препаративной ВЭЖХ, используя в качестве элюента 0-60% MeCN/H2O, получая 70 мг (61%) соединения 38-a в виде желтого твердого вещества.
Стадия 38-2
Соединение 1-c (57 мг, 0.28 ммоль) добавляли в смесь соединения 38-a (50 мг, 0.23 ммоль), HATU (266 мг, 0.46 ммоль) и 4-метилморфолина (118 мг, 1.17 ммоль) в ДМФА (2 мл). Результирующий раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Полученный раствор подвергали очистке методом препаративной ВЭЖХ, используя в качестве элюента 0-80% MeCN/H2O, получая 8.3 мг Примера 38 в виде белого твердого вещества. [M+H]+ 401; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.51 (с, 1H), 8.80 (д, J = 5.0 Гц, 2H), 8.66 (с, 1H), 8.59 (д, J = 8.4 Гц, 1H), 8.22 (с, 1H), 8.11 (д, J = 7.6 Гц, 1H), 8.01 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.35 (д, J = 5.2 Гц, 2H), 5.88 (м, 1H), 2.44 (с, 3H), 1.77 (д, J = 6.7 Гц, 6H).
Пример 39
Стадия 39-1
Смесь метил 4-хлор-5-метилпиридин-2-карбоксилата (100 мг, 0.54 ммоль), 2-метил-5-(4,4,5,5- тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1,3-тиазола (242.6 мг, 1.08 ммоль), Pd(PPh3)4 (124.5 мг, 0.11 ммоль) и K2CO3 (223.4 мг, 1.62 ммоль) в диоксане (5 мл) перемешивали при 100°C в атмосфере азота в течение ночи. Реакционную смесь упаривали в вакууме и очищали методом обращенно-фазной флэш-хроматографии с 0-33% MeCN/H2O, получая соединение 39-a (40 мг, 29.90%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 39-2
Пример 39 получали из соединения 39-a и соединения 1-c по методике, аналогичной описанной для Стадии 18-2. [M+H]+ 421; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.49 (с, 1H), 8.61 (т, J = 4.2 Гц, 2H), 8.34 (с, 1H), 8.10 (д, J = 7.5 Гц, 1H), 8.01 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.91 (с, 1H), 5.87 (м, 1H), 2.84 (с, 3H), 2.60 (с, 3H), 1.76 (д, J = 6.7 Гц, 6H).
Пример 40
Стадия 40-1
Смесь метил 5-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-карбоксилата (100 мг, 0.36 ммоль), 4-бром-2-метил-1,3-тиазола (128.5 мг, 0.72 ммоль), Pd(PPh3)4 (83.4 мг, 0.07 ммоль) и K2CO3 (149.6 мг, 1.08 ммоль) в диоксане (5 мл) перемешивали при 100°C в атмосфере азота в течение ночи. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении, и остаток очищали методом обращенно-фазной флэш-хроматографии с 0-36% MeCN/H2O, получая соединение 40-a (80 мг, 89.29%) в виде коричневого масла.
Стадия 40-2
Пример 40 получали из соединения 40-a и соединения 1-c по методике, аналогичной описанной для Стадии 18-2. [M+H]+ 421; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.54 (с, 1H), 8.66 – 8.57 (м, 3H), 8.09 (д, J = 7.5 Гц, 1H), 8.00 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.48 (с, 1H), 5.89 (м, 1H), 2.83 (с, 3H), 2.64 (с, 3H), 1.76 (д, J = 6.6 Гц, 6H).
Пример 41
Соединение 41-a получали по методике, аналогичной описанной для Стадии 37-1. Пример 41 получали из соединения 41-a и соединения 22-a по методике, аналогичной описанной для Стадии 29-1. [M+H]+ 417. 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.55 (с, 1H), 8.76 (с, 1H), 8.72 (с, 1H), 8.64 (с, 1H), 8.42 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.23 (с, 1H), 8.13 (д, J = 7.2 Гц, 1H), 8.02 (т, J = 8.1 Гц, 1H), 7.78 (д, J = 7.7 Гц, 1H), 7.51 (с, 1H), 5.92 (м, 1H), 4.20 (д, J = 5.3 Гц, 2H), 2.46 (с, 3H), 1.75 (д, J = 6.9 Гц, 3H).
Пример 42
Соединение 42-a получали по методике, аналогичной описанной для Стадии 40-1. Пример 42 получали из соединения 42-a и 1-c по методике, аналогичной описанной для Стадии 29-1. [M+H]+ 447. 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.49 (с, 1H), 8.69 – 8.60 (м, 2H), 8.33 (с, 1H), 8.11 (д, J = 7.6 Гц, 1H), 8.02 (т, J = 7.9 Гц, 1H), 7.88 (с, 1H), 5.87 (м, 1H), 2.60 (с, 3H), 2.43 (с, 1H), 1.76 (д, J = 6.7 Гц, 6H), 1.28 (д, J = 8.1 Гц, 2H), 1.21 (д, J = 8.1 Гц, 2H).
Пример 43
Пример 43 получали из соединений 42-a и 22-a по методике, аналогичной описанной для Стадии 29-1. [M+H]+ 463. 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.53 (с, 1H), 8.58 (с, 1H), 8.42 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.32 (с, 1H), 8.14 (д, J = 7.6 Гц, 1H), 8.02 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.85 (с, 1H), 5.90 (м, 1H), 4.19 (д, J = 6.0 Гц, 2H), 3.15 (с, 1H), 2.60 (с, 3H), 2.41 (м, 1H), 1.74 (д, J = 6.8 Гц, 3H), 1.30 – 1.16 (м, 4H).
Пример 44
Соединение 44-a получали по методике, аналогичной описанной для Стадии 40-1. Пример 44 получали из соединений 44-a и 1-c по методике, аналогичной описанной для Стадии 29-1. [M+H]+ 446. 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.52 (с, 1H), 8.62 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.53 (с, 1H), 8.37 (с, 1H), 8.10 (м, 1H), 8.00 (т, J = 7.9 Гц, 1H), 7.26 (д, J = 3.7 Гц, 1H), 6.87 (д, J = 3.7 Гц, 1H), 5.89 (м, 1H), 2.63 (с, 3H), 2.17 (м, 1H), 1.76 (д, J = 6.6 Гц, 6H), 1.16 – 1.07 (м, 2H), 0.87 – 0.85 (м, 2H).
Пример 45
Пример 45 получали из соединений 44-a и 22-a по методике, аналогичной описанной для Стадии 29-1. [M+H]+ 462. 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.55 (с, 1H), 8.52 (с, 1H), 8.41 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.36 (с, 1H), 8.12 (д, J = 7.6 Гц, 1H), 8.01 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.26 (д, J = 3.8 Гц, 1H), 6.87 (д, J = 3.7 Гц, 1H), 5.92 (м, 1H), 4.19 (т, J = 6.3 Гц, 2H), 3.51 (с, 1H), 3.22 (т, J = 6.4 Гц, 1H), 2.62 (с, 3H), 2.17 (м, 1H), 1.74 (д, J = 6.8 Гц, 3H), 1.16 – 1.07 (м, 2H), 0.87 – 0.85 (м, 2H).
Пример 46
Стадия 46-1
Смесь 5-бром-2-фтор-4-метилбензойной кислоты (150 мг, 0.64 ммоль), 1-циклопропил-4-(4,4,5,5-тетра-метил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1H-пиразола (226.0 мг, 0.97 ммоль), Pd(PPh3)4 (74.4 мг, 0.06 ммоль) и K2CO3 (266.9 мг, 1.93 ммоль) в ДМЭ (5 мл) и H2O (1 мл) перемешивали при 100°C в атмосфере азота 1 час. Смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры и подкисляли до pH 3~4 концентрированной HCl. Растворитель удаляли в вакууме, и остаток очищали методом обращенно-фазной флэш-хроматографии с 0-40% MeCN/H2O, получая соединение 46-a (150 мг, 89.54%) в виде светло-коричневого твердого вещества.
Стадия 46-2
Смесь соединения 46-a (50 мг, 0.19 ммоль) и 1-Хлор-N,N,2-триметил-1-пропениламина (30.8 мг, 0.23 ммоль) в ДХМ (2 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. В полученный раствор добавляли пиридин (45.6 мг, 0.58 ммоль) и соединение 1-c (58.9 мг, 0.29 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Растворитель удаляли в вакууме, и остаток очищали методом обращенно-фазной флэш-хроматографии с 0-60% CH3CN/H2O, получая Пример 46 (12.5 мг) в виде белого твердого вещества. [M+H]+ 447; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9.18 (д, J = 16.6 Гц, 1H), 8.55 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.14 – 8.08 (м, 2H), 7.99 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.65 – 7.63 (м, 2H), 7.13 (д, J = 13.1 Гц, 1H), 5.75 (м, 1H), 3.68 (м, 1H), 2.49 (с, 3H), 1.74 (д, J = 6.7 Гц, 6H), 1.19 (м, 2H), 1.12 (м, 2H).
Пример 47
Стадия 47-1
Смесь соединения 46-a (50 мг, 190 ммоль) и 1-Хлор-N,N,2-триметил-1-пропениламина (30.8 мг, 230 ммоль) в ДХМ (2 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Добавляли пиридин (45.6 мг, 0.58 ммоль) и соединение 47-a (75.6 мг, 0.29 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакцию гасили добавлением MeOH (2 мл), и добавляли K2CO3 (53.1 мг, 0.38 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 часов. Растворитель удаляли в вакууме, и остаток очищали методом обращенно-фазной флэш-хроматографии с 0-60% MeCN/H2O, получая Пример 47 (9.5 мг) в виде белого твердого вещества. [M+H]+ 463; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9.18 (д, J = 16.6 Гц, 1H), 8.49 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.14 – 8.11 (м, 2H), 8.02 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.65 – 7.60 (м, 2H), 7.13 (д, J = 13.1 Гц, 1H), 5.76 (м, 1H), 4.23 – 4.12 (м, 2H), 3.69 (м, 1H), 2.50 (с, 3H), 1.73 (д, J = 6.8 Гц, 3H), 1.22 (м, 2H), 1.09 (м, 2H).
Пример 48
Пример 48 получали из соединения 46-a и соединения 17-a по методике, аналогичной описанной для Стадии 46-2. [M+H]+ 463; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9.15 (д, J = 16.7 Гц, 1H), 8.54 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.13 (д, J = 8.2 Гц, 1H), 8.05 (т, J = 8.1 Гц, 1H), 7.72 (д, J = 7.9 Гц, 1H), 7.68 – 7.65 (м, 1H), 7.14 (д, J = 13.1 Гц, 1H), 3.90 (м, 1H), 3.68 (м, 1H), 2.50 (с, 3H), 1.53 (д, J = 6.9 Гц, 6H), 1.22 (м, 2H), 1.14 (м, 2H).
Пример 49
Пример 49 получали по методике, аналогичной описанной для Примера 46. [M+H]+ 449; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9.20 (д, J = 16.6 Гц, 1H), 8.55 (д, J = 8.4 Гц, 1H), 8.15 (д, J = 8.4 Гц, 1H), 8.10 (д, J = 7.6 Гц, 1H), 8.00 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.68 (с, 1H), 7.60 (с, 1H), 7.13 (д, J = 13.2 Гц, 1H), 5.76 (м, 1H), 4.58 (м, 1H), 2.51 (с, 3H), 1.74 (д, J = 6.7 Гц, 6H), 1.59 (д, J = 6.7 Гц, 6H).
Пример 50
Пример 50 получали по методике, аналогичной описанной для Примера 47. [M+H]+ 465; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9.22 (д, J = 16.5 Гц, 1H), 8.49 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.19 – 8.09 (м, 2H), 8.02 (т, J = 7.9 Гц, 1H), 7.68 (с, 1H), 7.61 (с, 1H), 7.14 (д, J = 13.2 Гц, 1H), 5.71 (м, 1H), 4.59 (м, 1H), 4.18 (м, 2H), 2.51 (с, 3H), 1.73 (д, J = 6.8 Гц, 3H), 1.60 (д, J = 6.7 Гц, 6H).
Пример 51
Пример 51 получали по методике, аналогичной описанной для Примера 48. [M+H]+ 449; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9.17 (д, J = 16.8 Гц, 1H), 8.54 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.15 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.06 (т, J = 8.1 Гц, 1H), 7.72 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 7.69 (с, 1H), 7.61 (с, 1H), 7.14 (д, J = 13.1 Гц, 1H), 4.58 (м, 1H), 3.90 (м, 1H), 2.51 (с, 3H), 1.60 (д, J = 6.7 Гц, 6H), 1.53 (д, J = 6.9 Гц, 6H).
Пример 52
Пример 52 получали по методике, аналогичной описанной для Примера 46. [M+H]+ 463; 1HNMR (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9.20 (д, J = 16.7 Гц, 1H), 8.56 (дд, J = 8.3, 0.9 Гц, 1H), 8.16 (д, J = 8.4 Гц, 1H), 8.10 (д, J = 8.0 Гц, 1H), 8.00 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.73 – 7.67 (м, 2H), 7.14 (д, J = 13.2 Гц, 1H), 5.77 (м, 1H), 2.52 (с, 3H), 1.75 (д, J = 6.7 Гц, 6H), 1.68 (с, 9H).
Пример 53
Пример 53 получали по методике, аналогичной описанной для Примера 48. [M+H]+ 463; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9.17 (д, J = 16.8 Гц, 1H), 8.55 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.15 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.06 (т, J = 8.1 Гц, 1H), 7.74 – 7.69 (м, 3H), 7.14 (д, J = 13.1 Гц, 1H), 3.91 (м, 1H), 2.51 (с, 3H), 1.68 (с, 9H), 1.53 (д, J = 6.9 Гц, 6H).
Пример 54
Пример 54 получали по методике, аналогичной описанной для Примера 47. [M+H]+ 479; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9.20 (д, J = 16.8 Гц, 1H), 8.50 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.16 – 8.11 (м, 2H), 8.02 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.71 – 7.69 (м, 2H), 7.14 (д, J = 13.2 Гц, 1H), 5.76 (м, 1H), 4.24 – 4.13 (м, 2H), 2.52 (с, 3H), 1.73(д, J = 6.9 Гц, 3H ), 1.66 (с, 9H).
Пример 55
Стадия 55-1
Смесь метил 5-бром-2-фтор-4-метилбензоата (1.7 г), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-би (1,3,2-диоксаборолана) (2.3 г, 7.7 ммоль), Pd(dppf)Cl2 CH2Cl2 (24 мг, 0.03 ммоль) и KOAc (1.6 г, 19.2 ммоль) в диоксане (20 мл) перемешивали при 85°C в течение ночи. Растворитель удаляли в вакууме. Остаток растворяли в EtOAc, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над Na2SO4 и упаривали в вакууме. Очистка остатка на колонке с силикалегелем, используя в качестве элюента смесь петролейный эфир/EtOAc (от 10:1 до 5:1) дала 1.5 г соединения 55-a (79.3%, за 2 стадии) в виде не совсем белого твердого вещества.
Стадия 55-2
Смесь соединения 55-a (300 мг, 1.0 ммоль), 4-бром-1-(трифторметил)-1H-пиразола (258 мг, 1.2 ммоль), Pd(PPh3)4 (115 мг, 0.10 ммоль) и K2CO3 (414 мг, 3.0 ммоль) в ДМЭ (8 мл) и H2O (2 мл) перемешивали при 100°C в атмосфере азота 1 час. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и подкисляли до pH 3~4 концентрированной HCl. Растворитель удаляли в вакууме, и остаток очищали методом обращенно-фазной флэш-хроматографии с 0-60% CH3CN в воде, получая соединение 55-b (170 мг, 57.8%) в виде светло-коричневого твердого вещества.
Стадия 55-3
Пример 55 получали из соединения 55-b по методике, аналогичной описанной для Стадии 46-2. [M+H]+ 475; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9.18 (д, J = 16.5 Гц, 1H), 8.55 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.18 (д, J = 8.1 Гц, 1H), 8.12 (д, J = 7.6 Гц, 1H), 8.02 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.80 – 7.97 (м, 2H), 5.75 (м, 1H), 2.50 (с, 3H), 1.75 (д, J = 6.6 Гц, 6H).
Пример 56
Пример 56 получали из соединения 55-b и соединения 17-a по методике, аналогичной описанной для Стадии 46-2. [M+H]+ 475; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9.15 (д, J = 16.6 Гц, 1H), 8.54 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.17 (д, J = 8.1 Гц, 1H), 8.07 (т, J = 8.1 Гц, 1H), 7.97 – 7.94 (м, 2H), 7.74 (д, J = 7.9 Гц, 1H), 7.21 (д, J = 13.0 Гц, 1H), 3.89 (м, 1H), 2.50 (с, 3H), 1.54 (д, J = 6.9 Гц, 6H).
Пример 57
Пример 57 получали из соединения 55-b по методике, аналогичной описанной для Стадии 47-1. [M+1]+ 491; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9.18 (д, J = 16.3 Гц, 1H), 8.48 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.17 – 8.11 (м, 2H), 8.03 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.97 – 7.94 (м, 2H), 7.20 (д, J = 12.9 Гц, 1H), 5.74 (м, 1H), 4.18 (м, 2H), 2.50 (с, 3H), 1.73 (д, J = 6.8 Гц, 3H).
Пример 58
Стадия 58-1
Смесь соединения 55-a (300 мг, 1.02 ммоль), 3-бром-1-(пропан-2-ил)-1H-пиразола (267.6 мг, 1.42 ммоль), Pd(PPh3)4 (118 мг, 0.10 ммоль), K2CO3 (422 мг, 3.00 ммоль) в 1,4-диоксане (10 мл) перемешивали при 100°C в течение ночи. Растворитель удаляли в вакууме, и остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента 0-50% EtOAc/петролейный эфир, получая 210 мг (74.6%) соединения 58-a в виде белого твердого вещества.
Стадия 58-2
Пример 58 получали из соединения 58-a по методике, аналогичной описанной для Стадии 18-2. [M+H]+ 449. 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9.17 (д, J = 16.2 Гц, 1H), 8.57 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.39 (д, J = 8.4 Гц, 1H), 8.10 (д, J = 7.5 Гц, 1H), 7.99 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.51 (д, J = 2.3 Гц, 1H), 7.13 (д, J = 13.2 Гц, 1H), 6.46 (д, J = 2.3 Гц, 1H), 5.78 (м, 1H), 4.57 (м, 1H), 2.60 (с, 3H), 1.75 (д, J = 6.7 Гц, 6H), 1.59 (д, J = 6.7 Гц, 6H).
Пример 59
Пример 59 получали из соединения 58-a и соединения 17-a по методике, аналогичной описанной для Стадии 18-2. [M+H]+ 449. 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9.14 (д, J = 16.5 Гц, 1H), 8.56 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.38 (д, J = 8.4 Гц, 1H), 8.05 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.72 (д, J = 7.8 Гц, 1H), 7.51 (д, J = 2.3 Гц, 1H), 7.14 (д, J = 13.2 Гц, 1H), 6.46 (д, J = 2.3 Гц, 1H), 4.58 (м, 1H), 3.92 (м, 1H), 2.60 (с, 3H), 1.59 (д, J = 6.8 Гц, 6H), 1.54 (д, J = 6.8 Гц, 6H).
Пример 60
Стадия 60-1
К раствору соединения 58-a (60 мг, 0.217ммоль) в MeOH (6 мл) и H2O (2 мл) добавляли LiOH (52 мг, 2.17 ммоль). Результирующий раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Растворитель удаляли в вакууме, и остаток очищали методом препаративной флэш-ВЭЖХ, используя в качестве элюента 0-100% MeCN/H2O, получая 40 мг (70%) соединения 60-a в виде белого твердого вещества.
Стадия 60-2
Пример 60 получали из соединения 60-a по методике, аналогичной описанной для Стадии 47-1. [M+H]+ 465. 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9.19 (д, J = 16.1 Гц, 1H), 8.50 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.37 (д, J = 8.4 Гц, 1H), 8.12 (д, J = 7.6 Гц, 1H), 8.01 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.51 (д, J = 2.2 Гц, 1H), 7.13 (д, J = 13.2 Гц, 1H), 6.46 (д, J = 2.3 Гц, 1H), 5.77 (м, 1H), 4.58 (м, 1H), 4.25 – 4.10 (м, 2H), 2.99 (с, 1H), 2.60 (с, 3H), 1.73 (д, J = 7.0 Гц, 3H), 1.59 (д, J = 6.7 Гц, 6H).
Пример 61
Стадия 61-1
Смесь соединения 55-a (300 мг, 1.02 ммоль), 4-бром-1-(пропан-2-ил)-1H-имидазола (230 мг, 1.22 ммоль), Pd(PPh3)4 (117.7 мг, 0.10 ммоль) и K2CO3 (422 мг, 3.06 ммоль) в 1,4-диоксане (2 мл) перемешивали при 100°C в течение ночи. Растворитель удаляли в вакууме, и остаток очищали на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента 30% EtOAc в петролейном эфире, получая 130 мг (46%) соединения 61-a в виде желтого твердого вещества.
Стадия 61-2
Соединение 61-a (130 мг, 0.47 ммоль) добавляли в смесь гидроксида натрия (94 мг, 2.35 ммоль) в метаноле (6 мл) и H2O (2 мл). Результирующий раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Растворитель удаляли в вакууме, и полученный сырой продукт очищали методом препаративной флэш-ВЭЖХ, используя в качестве элюента 0-100% MeCN/H2O, получая 100 мг (81%) соединения 61-b в виде белого твердого вещества.
Стадия 61-3
Пример 61 получали из соединения 61-b по методике, аналогичной описанной для Стадии 46-2. [M+H]+ 449; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9.19 (д, J = 15.6 Гц, 1H), 8.57 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.42 (д, J = 8.4 Гц, 1H), 8.10 (д, J = 7.6 Гц, 1H), 7.99 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.67 (с, 1H), 7.18 (с, 1H), 7.15 (д, J = 4.8 Гц, 1H), 5.80 (м, 1H), 4.43 (м, 1H), 2.63 (с, 3H), 1.75 (д, J = 6.6 Гц, 6H), 1.59 (д, J = 6.7 Гц, 6H).
Пример 62
Пример 62 получали из соединения 61-b и соединения 17-a по методике, аналогичной описанной для Стадии 46-2. [M+H]+ 449; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9.15 (д, J = 15.9 Гц, 1H), 8.55 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.42 (д, J = 8.4 Гц, 1H), 8.04 (т, J = 8.1 Гц, 1H), 7.71 (д, J = 7.6 Гц, 1H), 7.67 (с, 1H), 7.28 (с, 1H), 7.12 (д, J = 13.2 Гц, 1H), 4.43 (м, 1H), 3.92 (м, 1H), 2.62 (с, 3H), 1.59 (д, J = 6.8 Гц, 2H), 1.53 (д, J = 6.8 Гц, 2H).
Пример 63
Пример 63 получали из соединения 61-b по методике, аналогичной описанной для Стадии 47-1. [M+H]+ 465; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9.36 (д, J = 13.4 Гц, 1H), 8.47 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.38 (д, J = 8.2 Гц, 1H), 8.10 (д, J = 7.6 Гц, 1H), 7.99 (т, J = 7.9 Гц, 1H), 7.69 (с, 1H), 7.17 (с, 1H), 7.10 (д, J = 12.8 Гц, 1H), 5.83 (м, 1H), 4.44 (м, 1H), 4.16 (м, 2H), 2.59 (с, 3H), 1.72 (д, J = 6.8 Гц, 3H), 1.60 (д, J = 6.7 Гц, 6H).
Пример 64
Стадия 64-1
В герметично закрывающейся виале нагревали смесь 5-бром-2-фтор-4-метилбензойной кислоты (100 мг, 0.43 ммоль), 2-(трибутилстаннил)пиридина (190 мг, 0.52 ммоль), Pd(PPh3)4 (49 мг, 0.04 ммоль) в ДМФА (2 мл) в микроволновой печи при 160°C в течение 1 часа. Растворитель удаляли в вакууме, и остаток очищали методом препаративной флэш-ВЭЖХ, используя в качестве элюента 0-100% MeCN/H2O, получая 40 мг (37%) соединения 64-a в виде желтого твердого вещества.
Стадия 64-2
Пример 64 получали из соединения 64-a по методике, аналогичной описанной для Стадии 46-2. [M+H]+ 418; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9.19 (д, J = 16.1 Гц, 1H), 8.74 (д, J = 4.4 Гц, 1H), 8.55 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.25 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.11 (д, J = 7.5 Гц, 1H), 8.00 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.84 (тд, J = 7.7, 1.8 Гц, 1H), 7.48 (д, J = 7.8 Гц, 1H), 7.34 (дд, J = 7.5, 5.0 Гц, 1H), 7.19 (д, J = 13.1 Гц, 1H), 5.78 (м, 1H), 2.49 (с, 3H), 1.75 (д, J = 6.7 Гц, 6H).
Пример 65
Стадия 65-1
Смесь 5-бром-2-фтор-4-метилбензойной кислоты (100 мг, 0.40 ммоль), (пиридин-3-ил)бороновой кислоты (64 мг, 0.52 ммоль), Pd(PPh3)4 (99 мг, 0.08 ммоль) и K2CO3 (179 мг, 1.3 ммоль) в диметиловом эфире этиленгликоля (4 мл) и H2O (2 мл) перемешивали при 100°C в течение ночи. Растворитель удаляли в вакууме, и остаток очищали методом препаративной флэш-ВЭЖХ, используя в качестве элюента 0-70% MeCN/H2O, получая 40 мг (37%) соединения 65-a в виде желтого твердого вещества.
Стадия 65-2
Пример 65 получали из соединения 65-a по методике, аналогичной описанной для Стадии 46-2. [M+H]+ 418; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9.19 (д, J = 16.2 Гц, 1H), 8.69 – 8.64 (м, 2H), 8.55 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.12 – 8.09 (м, 2H), 8.01 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.71 (м, 1H), 7.45 (дд, J = 7.5, 5.1 Гц, 1H), 7.22 (д, J = 13.0 Гц, 1H), 5.75 (м, 1H), 3.51 (с, 1H), 2.39 (с, 3H), 1.75 (д, J = 6.7 Гц, 6H).
Пример 66
Стадия 66-1
Смесь 5-бром-2-фтор-4-метилбензойной кислоты (100 мг, 0.43 ммоль), (пиридин-4-ил)бороновой кислоты (64 мг, 0.52 ммоль), Pd(PPh3)4 (99 мг, 0.08 ммоль) и K2CO3 (179 мг, 1.3 ммоль) в диметиловом эфире этиленгликоля (4 мл) и H2O (2 мл) перемешивали при 100°C в течение ночи. Растворитель удаляли в вакууме, и полученный сырой продукт очищали методом препаративной флэш-ВЭЖХ, используя в качестве элюента 0-100% MeCN/H2O, получая 70 мг (75%) соединения 66-a в виде белого твердого вещества.
Стадия 66-2
Пример 66 получали из соединения 66-a по методике, аналогичной описанной для Стадии 46-2. [M+H]+ 418; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9.18 (д, J = 16.2 Гц, 1H), 8.75 (с, 2H), 8.55 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.14 – 8.09 (м, 2H), 8.01 (т, J = 7.9 Гц, 1H), 7.35 (д, J = 5.0 Гц, 2H), 7.23 (д, J = 13.0 Гц, 1H), 5.75 (м, 1H), 2.40 (с, 3H), 1.75 (д, J = 6.7 Гц, 6H).
Пример 67
Стадия 67-1
Смесь 5-бром-2-фтор-4-метилбензойной кислоты (100 мг, 0.43 ммоль), 2-метил-5-(4,4,5,5-тетра метил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1,3-тиазола (193.2 мг, 0.86 ммоль), Pd(PPh3)4 (99.2 мг, 0.09 ммоль) и K2CO3 (177.9 мг, 1.29 ммоль) в диметиловом эфире этиленгликоля (5 мл) и H2O (1 мл) перемешивали при 100°C в атмосфере азота в течение ночи. Смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры и подкисляли до pH 3~4 добавлением 1н. раствора HCl. Растворитель удаляли в вакууме, и остаток очищали методом обращенно-фазной хроматографии, используя в качестве элюента 0-38% MeCN/H2O=38:62), получая соединение 67-a (40 мг, 37.10%) в виде желтого твердого вещества.
Стадия 67-2
Пример 67 получали из соединения 67-a по методике, аналогичной описанной для Стадии 46-2. [M+H]+ 438; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9.15 (д, J = 16.1 Гц, 1H), 8.55 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.20 (д, J = 8.1 Гц, 1H), 8.11 (д, J = 7.6 Гц, 1H), 8.00 (т, J = 7.9 Гц, 1H), 7.63 (с, 1H), 7.18 (д, J = 12.9 Гц, 1H), 5.75 (м, 1H), 2.79 (с, 3H), 2.49 (с, 3H), 1.74 (д, J = 6.7 Гц, 6H).
Пример 68
Стадия 68-1
Смесь метил 2-фтор-4-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоата (100 мг, 0.34 ммоль), 4-бром-2-метил-1,3-тиазола (72 мг, 0.40 ммоль), Pd(PPh3)4 (30 мг, 0.03 ммоль), K2CO3 (141 мг, 1.02 ммоль) в диметиловом эфире этиленгликоля (5 мл) и H2O (1 мл) перемешивали при 100°C в течение ночи. Растворитель удаляли в вакууме, и остаток очищали методом препаративной флэш-ВЭЖХ, используя в качестве элюента 0-80% MeCN/H2O, получая 55 мг (65%) соединения 68-a в виде желтого твердого вещества.
Стадия 68-2
Пример 68 получали из соединения 68-a по методике, аналогичной описанной для Стадии 46-2. [M+H]+ 438; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9.17 (д, J = 16.1 Гц, 1H), 8.56 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.37 (д, J = 8.4 Гц, 1H), 8.10 (д, J = 7.6 Гц, 1H), 8.00 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.20 (с, 1H), 7.15 (д, J = 13.2 Гц, 1H), 5.77 (м, 1H), 2.81 (с, 3H), 2.54 (с, 3H), 1.75 (д, J = 6.8 Гц, 6H).
Пример 69
Пример 69 получали по методике, аналогичной описанной для Примера 61. [M+H]+ 463. 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9.15 (д, J = 16.1 Гц, 1H), 8.55 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.20 (д, J = 8.2 Гц, 1H), 8.10 (д, J = 7.6 Гц, 1H), 7.99 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.13 (д, J = 13.1 Гц, 1H), 6.90 (д, J = 3.5 Гц, 1H), 6.79 (д, J = 3.6 Гц, 1H), 5.77 (м, 1H), 2.52 (с, 3H), 2.13 (м, J = 8.7, 5.0 Гц, 1H), 1.74 (д, J = 6.7 Гц, 6H), 1.15 (м, 2H), 0.80 (м, 2H).
Пример 70
Пример 70 получали по методике, аналогичной описанной для Примера 63. [M+H]+ 479. 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9.13 (д, J = 16.3 Гц, 1H), 8.48 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.19 (д, J = 8.2 Гц, 1H), 8.12 (д, J = 7.6 Гц, 1H), 8.01 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.13 (д, J = 13.1 Гц, 1H), 6.90 (д, J = 3.6 Гц, 1H), 6.79 (д, J = 3.6 Гц, 1H), 5.75 (м, 1H), 4.17 (м, J = 11.9, 5.9 Гц, 2H), 2.52 (с, 3H), 2.15 (м, 1H), 1.73 (д, J = 6.8 Гц, 3H), 1.05 (м, 2H), 0.80 (м, 2H).
Пример 71
Стадия 71-1
Раствор 5-бром-4-фтор-2-метилбензойной кислоты (900 мг, 3.9 ммоль), метокси(метил)амина гидрохлорида (573 мг, 5.9 ммоль), HATU (2.3 г, 6.0 ммоль) и DIPEA (2 г, 15.5 ммоль) в ДХМ (20 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Затем результирующий раствор разбавляли насыщенным раствором NaCl и экстрагировали этилацетатом (30 мл x 3). Объединенные органические слои сушили над безводным Na2SO4. Полученный фильтрат упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента смесь петролейный эфир/EtOAc (2:1), получая 5-бром-4-фтор-N- метокси-N,2-диметилбензамид (900 мг, 84.4%) в виде светло-желтого масла.
Стадия 71-2
В круглодонной 3-горлой колбе раствор 5-бром-4-фтор-N-метокси-N,2-диметилбензамида (900 мг, 3.3 ммоль) в ТГФ охлаждали до -30°С в атмосфере азота. Добавляли по каплям CH3MgCl в ТГФ (3M) (14.6 мл, 43.8 ммоль) в течение 10 минут, поддерживая температуру ниже 0°С. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 0,5 часа, гасили насыщенным раствором NH4Cl при 0°С и экстрагировали этилацетатом (30 мл x 3). Объединенные органические слои сушили над безводным Na2SO4. Полученный фильтрат упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента смесь петролейный эфир/EtOAc (2:1), получая 1-(5-бром-4-фтор-2-метилфенил)этан-1-он (600 мг, 79.6%) в виде светло-желтого твердого вещества.
Стадия 71-3
Смесь 1-(5-бром-4-фтор-2-метилфенил)этан-1-она (600 мг, 2.6 ммоль), 1-циклопропан-карбонил-1H-1,2,3-бензотриазола (885 мг, 4.8 ммоль), комплекса бромида магния с диэтиловым эфиром (4.9 г, 19.2 ммоль) и DIPEA (1.2 г, 9.3 ммоль) в ДХМ перемешивали при комнатной температуре в течение 3 дней. Полученную смесь разбавляли насыщенным раствором NaCl (10 мл) и затем экстрагировали этилацетатом (10 мл x 3). Объединенные органические слои сушили над безводным Na2SO4. Полученный фильтрат упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали методом обращенно-фазной флэш-хроматографии в следующих условиях (колонка: силикагель С18; подвижная фаза: ацетонитрил в смеси муравьиной кислоты (0.1%) и воды, градиент от 0% до 100% за 25 минут; детектор: УФ 254 нм), получая 1-(5-бром-4-фтор-2-метилфенил)-3-циклопропил пропан-1,3-дион (400 мг, 51.4%) в виде желтого масла.
Стадия 71-4
Раствор 1-(5-бром-4-фтор-2-метилфенил)-3-циклопропилпропанe-1,3-дион (400 мг, 1.3 ммоль) и гидроксиламин гидрохлорид (318 мг, 4.6 ммоль) in MeOH (10 мл) перемешивали при 45°С в течение ночи. Результирующий раствор разбавляли насыщенным раствором NaCl (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (20 мл x 3). Объединенные органические слои сушили над безводным Na2SO4. Полученный фильтрат упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали методом обращенно-фазной флэш-хроматографии в следующих условиях (колонка: силикагель С18; подвижная фаза: ацетонитрил в воде, градиент от 0 до 100% за 25 минут; детектор: УФ 254 нм), получая 3-(5-бром-4-фтор-2-метилфенил)-5-циклопропил-1,2-оксазол (170 мг, 42.9%) в виде желтого масла.
Стадия 71-5
Смесь 3-(5-бром-4-фтор-2-метилфенил)-5-циклопропил-1,2-оксазола (170 мг, 0.5 ммоль), Pd(dppf)Cl2 CH2Cl2 (258 мг, 0.3 ммоль) и TEA (478 мг, 4.8 ммоль) в ДМФА/MeOH (4/1 мл) перемешивали при 75°С в атмосфере CO в течение ночи. Полученную смесь разбавляли насыщенным раствором NaCl и затем экстрагировали этилацетатом (10 мл x 3). Объединенные органические слои сушили над безводным Na2SO4. Полученный фильтрат упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали методом обращенно-фазной флэш-хроматографии в следующих условиях (колонка: силикагель С18; подвижная фаза: ацетонитрил в воде, градиент от 0 до 80% за 20 минут; детектор: УФ 254 нм), получая метил 5-(5-циклопропил-1,2-оксазол-3-ил)-2-фтор-4-метилбензоат (80 мг, 50.6%) в виде желтого масла.
Стадия 71-6
Смесь метил 5-(5-циклопропил-1,2-оксазол-3-ил)-2-фтор-4-метилбензоата (80 мг, 0.3 ммоль) и LiOH (24 мг, 0.9 ммоль) в ТГФ/H2O (1/0.3 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем смесь подкисляли до pH 4~5 1М водным раствором HCl и экстрагировали этилацетатом (10 мл x 3). Объединенные органические слои сушили над безводным Na2SO4 и упаривали при пониженном давлении, получая 5-(5-циклопропил-1,2-оксазол-3-ил)-2-фтор-4-метилбензойную кислоту (50 мг, 65.8%) в виде желтого масла.
Стадия 71-7
В перемешиваемый раствор 5-(5-циклопропил-1,2-оксазол-3-ил)-2-фтор-4-метилбензойной кислоты (50 мг, 0.2 ммоль) в ДХМ (1 мл) по каплям добавляли (1-хлор-2-метилпроп-1-ен-1-ил)диметиламин (33 мг, 0.2 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота. После перемешивания в течение 1 часа, добавляли раствор пиридина (48 мг, 0.6 ммоль) и 6-(1-изопропил-1H-тетразол-5-ил)пиридин-2-амина (86 мг, 0.4 ммоль) в ДХМ (1 мл). После перемешивания в течение еще 1 часа, реакцию гасили водой (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (10 мл x 3). Объединенные органические слои сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали методом обращенно-фазной флэш-хроматографии в следующих условиях (колонка: силикагель С18; подвижная фаза: ацетонитрил в воде, градиент от 0% до 90% за 20 минут; детектор: УФ 254 нм), получая 14 мг Примера 71 в виде не совсем белого твердого вещества. МС (m/z): [M + H] + = 448.20, t = 1.928 мин. 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9.13 (д, J = 15.8 Гц, 1H), 8.55 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.47 (д, J = 8.0 Гц, 1H), 8.12 (д, J = 7.6 Гц, 1H), 8.02 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 7.20 (д, J = 12.9 Гц, 1H), 6.20 (с, 1H), 5.75 (м, 1H), 2.62 (с, 3H), 2.10 (м, 1H), 1.74 (д, J = 6.7 Гц, 6H), 1.18 – 1.08 (м, 2H), 0.97 – 0.89 (м, 2H).
Пример 72-A и 72-B
Стадия 72-1
Смесь этил 2-хлор-5-фторпиридин-4-карбоксилата (1.0 г, 4.91 ммоль) и LiOH (1.5 г, 6.26 ммоль) в ТГФ/H2O (20/5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Смесь подкисляли водным раствором HCl и экстрагировали этилацетатом (30 мл x 3). Объединенные органические слои сушили над безводным Na2SO4. Полученный фильтрат упаривали при пониженном давлении, получая 760 мг (88.4%) 2-хлор-5-метилизоникотиновой кислоты в виде не совсем белого твердого вещества.
Стадия 72-2
2-Хлор-N-метокси-N,5-диметилизоникотинамид получали по методике, описанной для Стадии 71-1. Было получено 700 мг (73.6%) в виде не совсем белого твердого вещества.
Стадия 72-3
1-(2-Хлор-5-метилпиридин-4-ил)этан-1-он получали по методике, описанной для Стадии 71-2. Было получено 400 мг (84.4%) в виде светло-желтого масла.
Стадия 72-4
1-(2-Хлор-5-метилпиридин-4-ил)-3-циклопропилпропан-1,3-дион получали по методике, описанной для Стадии 71-3. Было получено 220 мг (41.3%) в виде белого твердого вещества.
Стадия 72-5
Смесь 3-(2-Хлор-5-метилпиридин-4-ил)-5-циклопропилизоксазола и 5-(2-хлор-5-метилпиридин-4-ил)-3-циклопропилизоксазола (190 мг, 96.2%) получали по методике, описанной для Стадии 71-4 в виде светло-желтого твердого вещества.
Стадия 72-6
Метил 4-(5-циклопропилизоксазол-3-ил)-5-метилпиколинат (20 мг) и метил 4-(3-циклопропилизоксазол-5-ил)-5-метилпиколинат (18 мг) получали по методике, описанной для Стадии 71-5, в виде светло-желтого твердого вещества.
Стадия 72-7
Пример 72-A получали по методике, описанной для Стадии 29-1. Было получено 10 мг в виде светло-желтого твердого вещества. МС (m/z): [M + H]+ = 431.20; 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.50 (с, 1H), 8.66 (с, 1H), 8.61 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.42 (с, 1H), 8.11 (д, J = 7.5 Гц, 1H), 8.01 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 6.33 (с, 1H), 5.88 (м, 1H), 2.68 (с, 3H), 2.18 (м, 1H), 1.76 (д, J = 6.7 Гц, 6H), 1.20 – 1.17 (м, 2H), 1.13 – 1.10 (м, 2H).
Пример 72-B получали по методике, описанной для Стадии 29-1. Было получено 4.8 мг в виде не совсем белого твердого вещества. МС (m/z): [M + H] + = 431.20. 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.46 (с, 1H), 8.68 – 8.59 (м, 2H), 8.57 (с, 1H), 8.11 (д, J = 7.5 Гц, 1H), 8.02 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 6.46 (с, 1H), 5.86 (м, 1H), 2.69 (с, 3H), 2.12 (м, 1H), 1.76 (д, J = 6.7 Гц, 6H), 1.21 – 1.13 (м, 2H), 1.01 – 0.92 (м, 2H).
Пример 73
Стадия 73-1
Смесь 1-метилпиразол-4-илбороновой кислоты (113 мг, 0.89 ммоль), 5-бром-2-метокси-4-метилбензойной кислоты (200 мг, 0.82 ммоль), Pd(PPh3)4 (94 мг, 0.08 ммоль) и K2CO3 (451 мг, 3.26 ммоль) в ДМЭ/H2O (5/1 мл) перемешивали при 100°C в атмосфере азота в течение ночи. Смесь разбавляли водой (10 мл), подкисляли до pH 4~5 добавлением 1M водного раствор HCl и экстрагировали этилацетатом (10 мл x 3). Объединенные органические слои сушили над безводным Na2SO4 и упаривали. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента смесь ДХМ/MeOH (30:1), получая 2-метокси-4-метил-5-(1-метил-1H-пиразол-4-ил)бензойную кислоту (140 мг, Y = 69.9%) в виде желтого масла.
Стадия 73-2.
Пример 73 получали по методике, описанной для Стадии 71-7. Было получено 12 мг в виде не совсем белого твердого вещества. МС (m/z): [M+H]+ = 433.20. 1H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 10.73 (с, 1H), 8.45 (м, 1H), 8.14 (т, J = 8.0 Гц, 1H), 8.01 – 7.94 (м, 2H), 7.87 (с, 1H), 7.67 (с, 1H), 7.22 (с, 1H), 5.85 (м, 1H), 4.01 (с, 3H), 3.90 (с, 3H), 2.46 (с, 3H), 1.63 (д, J = 6.6 Гц, 6H).
Пример 74
Пример 74 получали по методике, описанной для Стадии 71-7. Было получено 12 мг в виде не совсем белого твердого вещества. МС (m/z) 432.20, 433.20 [M+H]+; 1H-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6) δ 10.69 (с, 1H), 8.43 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.21 (т, J = 8.1 Гц, 1H), 7.97 (с, 1H), 7.86 (с, 1H), 7.70 (д, J = 7.8 Гц, 1H), 7.66 (с, 1H), 7.20 (с, 1H), 3.99 (с, 3H), 3.89 – 3.80 (м, 4H), 2.45 (с, 3H), 1.40 (д, J = 6.9 Гц, 6H).
Пример 75
Стадия 75-1
Раствор 5-(1-циклопропил-1H-пиразол-4-ил)-2-фтор-4-метилбензойной кислоты (300 мг, 1.2 ммоль) и метилата натрия (15 мл, 30%) перемешивали при 80°С в течение ночи. Реакцию гасили водой, подкисляли до pH 4~5 1М водным раствором HCl и экстрагировали этилацетатом (10 мл x 3). Объединенные органические слои сушили над безводным Na2SO4 и упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента смесь ДХМ/MeOH (30:1), получая 5-(1-циклопропил-1H-пиразол-4-ил)-2-метокси-4-метилбензойную кислоту (310 мг, 98.77%) в виде светло-розового твердого вещества.
Стадия 75-2
Пример 75 получали по методике, описанной для Стадии 71-7. Было получено 15.3 мг в виде не совсем белого твердого вещества. МС (m/z): [M + H] + = 459.40. 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.55 (с, 1H), 8.61 (дд, J = 8.3, 1.1 Гц, 1H), 8.25 (с, 1H), 8.04 (дд, J = 7.6, 1.1 Гц, 1H), 7.97 (т, J = 7.9 Гц, 1H), 7.65 (д, J = 12.6 Гц, 2H), 6.96 (с, 1H), 5.81 (м, 1H), 4.11 (с, 3H), 3.68 (м, 1H), 2.51 (с, 3H), 1.77 (д, J = 6.7 Гц, 6H), 1.24 - 1.21 (м, 2H), 1.18 – 1.05 (м, 2H).
Пример 76
Пример 76 получали по методике, описанной для Стадии 71-7. Было получено 12.6 мг в виде не совсем белого твердого вещества. МС (m/z): [M + H] + = 459.25. 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.55 (с, 1H), 8.58 (дд, J = 8.3, 0.7 Гц, 1H), 8.24 (с, 1H), 8.02 (т, J = 8.1 Гц, 1H), 7.69 – 7.60 (м, 3H), 6.96 (с, 1H), 4.10 (с, 3H), 3.92 (м, 1H), 3.68 (м, 1H), 2.51 (с, 3H), 1.57 (д, J = 6.9 Гц, 6H), 1.25 – 1.13 (м, 2H), 1.17 – 1.04 (м, 2H).
Пример 77
В перемешиваемый раствор 5-(1-циклопропил-1H-пиразол-4-ил)-2-метокси-4-метилбензойной кислоты (50 мг, 0.2 ммоль) в ДХМ (1 мл) по каплям добавляли (1-хлор-2-метилпроп-1-ен-1-ил)диметиламин (30 мг, 0.2 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере азота. Через 2 часа добавляли раствор 6-[1-[(2R)-1-[(трет-бутилдиметилсилил) окси]пропан-2-ил]-1H-1,2,3,4-тетразол-5-ил]пиридин-2-амина (93 мг, 0.3 ммоль) и пиридина (44 мг, 0.6 ммоль) в ДХМ (1 мл). Реакционную смесь перемешивали 2 часа и добавляли по каплям конц. HCl (0.4 мл) при комнатной температуре. Через 1 час полученную смесь упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали методом обращенно-фазной флэш-хроматографии в следующих условиях (колонка: силикагель С18; подвижная фаза: ацетонитрил в воде, градиент от 0 до 100% за 25 минут; детектор: УФ 254нм), получая 5-(1-циклопропил-1H- пиразол-4-ил)-N-(6-[1-[(2R)-1-гидроксипропан-2-ил]-1H-1,2,3,4-тетразол-5-ил]пиридин-2-ил)-2-метокси-4-метилбензамид (13 мг, 14.8%) в виде не совсем белого твердого вещества. МС (m/z): [M + H] + = 475.25. 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.65 (с, 1H), 8.57 (дд, J = 7.1, 2.2 Гц, 1H), 8.23 (с, 1H), 8.04 – 7.94 (м, 2H), 7.66 – 7.59 (м, 2H), 6.95 (с, 1H), 5.68 (м, 1H), 4.16 (д, J = 6.4 Гц, 2H), 4.14 (с, 3H), 3.93 (с, 1H), 3.67 (м, 1H), 2.50 (с, 3H), 1.74 (д, J = 6.9 Гц, 3H), 1.22 – 1.19 (м, 2H), 1.17 – 1.02 (м, 2H).
Пример 78
Стадия 78-1
Смесь метил 2-фтор-4-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоата (400 мг, 1.4 ммоль), 3-бром-1-(пропан-2-ил)-1H-пиразола (312 мг, 1.8 ммоль), K2CO3 (560 мг, 4.1 ммоль) и Pd(PPh3)4 (80 мг, 0.1 ммоль) в ДМЭ/H2O (/5/1 мл) перемешивали при 100°С в атмосфере азота 1 час. Полученную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (20 мл x 3). Объединенные органические слои сушили над безводным Na2SO4 и упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента смесь петролейный эфир/EtOAc (20:1), получая метил 2-фтор-4-метил-5-[1- (пропан-2-ил)-1H-пиразол-3-ил] бензоат (173 мг, 46%) в виде желтого масла.
Стадия 78-2
В перемешиваемый раствор метил 2-фтор-4-метил-5-[1-(пропан-2-ил)-1H-пиразол-3-ил]бензоата (173 мг, 0.6 ммоль) в ТГФ/H2O (3/1 мл) добавляли LiOH (200 мг, 8.4 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Затем смесь подкисляли до pH 4~5 добавлением 1M раствора HCl и экстрагировали этилацетатом (10 мл x 3). Объединенные органические слои сушили над безводным Na2SO4 и упаривали при пониженном давлении, получая 2-фтор-5-(1-изопропилпиразол-3-ил)-4-метилбензойную кислоту (160 мг) в виде серого твердого вещества.
Стадия 78-3
Смесь 2-фтор-5-(1-изопропилпиразол-3-ил)-4-метилбензойной кислоты (160 мг, 0.6 ммоль) и 30%-ного раствора метоксида натрия в метаноле (12 мл) перемешивали при 80°С в течение ночи. Смесь подкисляли до pH 4~5 добавлением 1M раствора HCl и экстрагировали этилацетатом (10 мл x 3). Объединенные органические слои сушили над безводным Na2SO4 и упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента смесь ДХМ/MeOH (20:1), получая 5-(1-изопропилпиразол-3-ил)-2-метокси-4-метилбензойную кислоту (162 мг, 96.8%) в виде серого твердого вещества.
Стадия 78-4
Пример 78 получали по методике, описанной для Стадии 71-7. МС (m/z): [M + H]+ = 461.35. 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.54 (с, 1H), 8.62 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.49 (с, 1H), 8.03 (д, J = 7.4 Гц, 1H), 7.96 (т, J = 7.9 Гц, 1H), 7.49 (д, J = 2.3 Гц, 1H), 6.96 (с, 1H), 6.45 (д, J = 2.2 Гц, 1H), 5.83 (м, 1H), 4.57 (м, 1H), 4.11 (с, 3H), 2.62 (с, 3H), 1.78 (д, J = 6.7 Гц, 6H), 1.59 (д, J = 6.7 Гц, 6H).
Пример 79
Пример 79 получали по методике, описанной для Стадии 71-7. МС (m/z): [M + H]+ = 461.25. 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.53 (с, 1H), 8.60 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.48 (с, 1H), 8.01 (т, J = 8.1 Гц, 1H), 7.65 (д, J = 7.7 Гц, 1H), 7.49 (д, J = 2.2 Гц, 1H), 6.95 (с, 1H), 6.44 (д, J = 2.2 Гц, 1H), 4.57 (м, 1H), 4.10 (с, 3H), 3.93 (м, 1H), 2.62 (с, 3H), 1.59 – 1.56 (м, 12H).
Пример 80
Пример 80 получали в виде белого твердого вещества по методике, аналогичной описанной в Примере 77. МС (m/z): [M + H]+ = 477.25. 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 10.64 (с, 1H), 8.59 (д, J = 7.8 Гц, 1H), 8.47 (с, 1H), 8.02 – 7.93 (м, 2H), 7.49 (д, J = 2.2 Гц, 1H), 6.94 (с, 1H), 6.44 (д, J = 2.2 Гц, 1H), 5.70 (м, 1H), 4.58 (м, 1H), 4.17 – 4.14 (м, 5H), 2.61 (с, 3H), 1.75 (д, J = 6.8 Гц, 3H), 1.59 (д, J = 6.6 Гц, 6H).
Пример 81
Пример 81 получали согласно изображенной выше схеме синтеза. [M+H]+ 475.2. 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9.19 (д, J = 16.9 Гц, 1H), 8.56 (д, J = 8.1 Гц, 1H), 8.15 (д, J = 3.7 Гц, 1H), 8.13 (д, J = 5.0 Гц, 1H), 8.02 (дд, J = 8.0, 8.0 Гц, 1H), 7.65 (с, 1H), 7.64 (с, 1H), 7.14 (д, J = 13.3 Гц, 1H), 6.09 (ддт, J = 9.6, 6.6, 3.3 Гц, 1H), 4.40-4.34 (м, 2H), 4.22 (дд, J = 9.9, 3.6 Гц, 1H), 4.20-4.13 (м, 1H), 3.72-3.66 (м, 1H), 2.83-2.76 (м, 1H), 2.68 – 2.54 (м, 1H), 2.50 (с, 3H), 1.25 – 1.18 (м, 2H), 1.16 – 1.05 (м, 2H).
Пример 82
Пример 82 получали согласно изображенной выше схеме синтеза. [M+H]+ 475.2. 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9.18 (д, J = 16.9 Гц, 1H), 8.55 (д, J = 8.1 Гц, 1H), 8.14 (д, J = 3.7 Гц, 1H), 8.12 (д, J = 5.0 Гц, 1H), 8.01 (дд, J = 8.0, 8.0 Гц, 1H), 7.65 (с, 1H), 7.64 (с, 1H), 7.14 (д, J = 13.3 Гц, 1H), 6.09 (ддт, J = 9.6, 6.6, 3.3 Гц, 1H), 4.40-4.34 (м, 2H), 4.22 (дд, J = 9.9, 3.6 Гц, 1H), 4.20-4.13 (м, 1H), 3.72-3.66 (м, 1H), 2.83-2.76 (м, 1H), 2.68 – 2.54 (м, 1H), 2.50 (с, 3H), 1.25 – 1.18 (м, 2H), 1.16 – 1.05 (м, 2H).
Пример 83
Пример 83 получали согласно изображенной выше схеме синтеза. [M+H]+ 489.2. 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9.26 (д, J = 16.4 Гц, 1H), 8.51 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.17 – 8.08 (м, 2H), 8.03 (дд, J = 8.0, 8.0 Гц, 1H), 7.65 (с, 1H), 7.63 (с, 1H), 7.14 (д, J = 13.1 Гц, 1H), 5.59 (тд, J = 7.8, 5.4 Гц, 1H), 4.71 (кв, J = 6.2 Гц, 1H), 3.77-3.69 (м, 1H), 2.50 (с, 3H), 2.48 – 2.40 (м, 2H), 2.38-2.30 (м, 1H), 2.19 – 1.97 (м, 2H), 1.96 – 1.80 (м, 1H), 1.27 – 1.17 (м, 2H), 1.15 – 1.06 (м, 2H).
Пример 84
Пример 84 получали согласно изображенной выше схеме синтеза. [M+H]+ 489.2. 1H-ЯМР (400 МГц, Хлороформ-d) δ 9.17 (д, J = 17.4 Гц, 1H), 8.52 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.14 (д, J = 8.3 Гц, 1H), 8.12 – 8.08 (м, 1H), 8.03 (дд, J = 8.0, 8.0 Гц, 1H), 7.65 (д, J = 0.8 Гц, 1H), 7.63 (с, 1H), 7.14 (д, J = 13.2 Гц, 1H), 5.64 – 5.49 (м, 1H), 4.64 (кв, J = 5.9 Гц, 1H), 3.73-3.69 (м, 1H), 2.67-2.57 (м, 1H), 2.50 (с, 2H), 2.40-2.34 (м, 1H), 2.32-2.26 (м, 1H), 2.22 – 2.11 (м, 1H), 2.10-1.96 (м, 1H), 1.90 – 1.78 (м, 1H), 1.26 – 1.18 (м, 2H), 1.14 – 1.06 (м, 2H).
Тесты
Способность (IC50) соединений ингибировать активность ASK1 киназы определяли с помощью системы HTRF® KinEASE™ Assay System.
ASK1 покупали у Thermofisher (Catalogue # PV4011), АТФ покупали у Sigma (Catalogue # A7699), HTRF® KinEASE™ Assay System получали от Cisbio (Bedford, Mass). Планшеты с ½ площадью покупали у Perkin Elmer (Catalogue # #6005560). HTRF® KinEASE™-STK представляет собой общий метод измерения активности серин/треонин киназ с применением иммунологического анализа методом времяразрешенного флуоресцентного индуктивно-резонансного переноса энергии (TR-FRET). Значение IC50 для каждого соединения определяли в присутствии соединения (различные концентрации в диапазоне от 0 до 10 мкМ) и фиксированного количества АТФ и пептидных субстратов. Испытуемое соединение, 1 мкМ STK3 пептидного субстрата и 5 нМ ASK1 киназы инкубировали с киназным реакционным буфером, содержащим 50 мM HEPES pH 7.5, 0.01% BRIJ-35, 10 мM MgCl2 и 1 мM EGTA, в течение 30 минут. Добавляли 100 мкМ АТФ для запуска киназной реакции и инкубировали смесь 3 часа. Добавляли меченые Eu3+-Криптатом STK3-антитела и 125 нM стрептавидин-XL665 в один прием вместе со стоп-реагентом из набора Cisbio, чтобы остановить киназную реакцию. Замеряли флуоресценцию на приборе Envision Multilabeled 2014 от PerkinElmer. Уровень флуоресценции замеряли при длине волны 615 нм (Криптат) и 665 нм (XL665) и вычисляли соотношение 665 нм/615 нм для каждой лунки. Результат TR-FRET пропорционален уровню фосфорилирования. В качестве положительного контроля использовали стауроспорин. Значение IC50 определяли с помощью программы XLfit 5.3.
Описанным выше методом определяли ингибирование ASK1 для соединений, имеющих формулу (I). Интервалы значений IC50 обозначены следующим образом: A < 1 нM; 1 нM < B < 10 нM; 10 нM < C < 100 нM; 100 нM < D < 1 мкM; E > 1 мкM.
Таблица 1
Несмотря на то, что настоящее изобретение было описано и проиллюстрировано на его частных предпочтительных вариантах осуществления, квалифицированным специалистам в данной области будет понятно, что могут быть внесены различные изменения в форме и деталях без выхода за рамки сути и объема настоящего изобретения, описанного в Формуле изобретения.
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| 2-ОКСИНДОЛЬНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ | 2017 |
|
RU2743747C2 |
| Четвертичные аммониевые соединения на основе 3-гидроксипиридина, обладающие антибактериальной активностью | 2021 |
|
RU2778507C1 |
| БИЦИКЛИЧЕСКОЕ СОЕДИНЕНИЕ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРА RIP-1 КИНАЗЫ И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ | 2020 |
|
RU2800652C2 |
| ДИСПИРО 1,2,4-ТРИОКСОЛАНЫ КАК ПРОТИВОМАЛЯРИЙНЫЕ СРЕДСТВА | 2008 |
|
RU2493159C2 |
| ПРОИЗВОДНОЕ НА ОСНОВЕ ДИГИДРОПИРИМИДО-КОЛЬЦА В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРА HBV | 2015 |
|
RU2693897C2 |
| БИЦИКЛИЧЕСКИЕ ТЕТРАГИДРОТИАЗЕПИНОВЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ, ПОЛЕЗНЫЕ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ НЕОПЛАСТИЧЕСКИХ И/ИЛИ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ | 2016 |
|
RU2730524C2 |
| ПРОИЗВОДНЫЕ ПИРРОЛИДИНА В КАЧЕСТВЕ АГОНИСТОВ PPAR | 2017 |
|
RU2711991C1 |
| ПРОИЗВОДНЫЕ ФЕНОТИАЗИНСОДЕРЖАЩИХ 1,2,3,4-ТЕТРАГИДРОПИРИДО[4,3-b]ИНДОЛОВ В КАЧЕСТВЕ СРЕДСТВА ДЛЯ СНИЖЕНИЯ НЕКОНТРОЛИРУЕМОЙ АГРЕГАЦИИ БЕЛКОВ В НЕРВНОЙ СИСТЕМЕ, СПОСОБЫ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ, ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЕ СРЕДСТВО НА ИХ ОСНОВЕ И СПОСОБ СНИЖЕНИЯ НЕКОНТРОЛИРУЕМОЙ АГРЕГАЦИИ БЕЛКОВ В НЕРВНОЙ СИСТЕМЕ | 2013 |
|
RU2529899C1 |
| СОЕДИНЕНИЯ НА ОСНОВЕ 7-ЗАМЕЩЕННОГО ПИРРОЛОТРИАЗИНА ИЛИ ИХ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИ ПРИЕМЛЕМЫЕ СОЛИ И СПОСОБЫ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ | 2018 |
|
RU2745548C1 |
| СПОСОБ СИНТЕЗА ЦИКЛИЧЕСКИХ ДЕПСИПЕПТИДОВ | 2018 |
|
RU2817013C1 |
Группа изобретений относится к области органической химии и фармацевтики, а именно к новым соединениям, которые ингибируют регулирующую апоптотические сигналы киназу 1 (ASK-1). Раскрываются соединения, формулы I или его фармацевтически приемлемая соль, где 
выбран из группы, состоящей из 
представляет собой 
или 
; 
представляет собой 
; R1 выбран из группы, состоящей из следующих: 1) водорода; 2) -C1-C6 алкил; 3) галоген -C1-С6 алкил; и 4) -С3-С6 циклоалкил; R2 представляет собой 
X представляет собой N или C-R3; R3 выбран из группы, состоящей из следующих: 1) водород; 2) галоген; 3) -C1-С6 алкил; и 4) -C1-C6 алкокси; R4 выбран из группы, состоящей из следующих: 1) водород; 2) галоген; 3) -C1-С6 алкил; 4) галоген-С1-С6 алкил; и 5) -N(R5)(R6); где R5 и R6 объединены с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 3-8-членного гетероциклоалкила, содержащего 1 атом азота, 2 атома азота или атом азота и атом кислорода, необязательно замещенный С1-С4-алкилом. Кроме того, раскрывается фармацевтическая композиция для лечения заболевания или патологического состояния, опосредованных ASK-1 на основе указанных выше соединений, а также применение указанных соединений для лечения заболевания или патологического состояния, опосредованных ASK-1. Группа изобретений обеспечивает эффективное ингибирование регулирующей апоптотические сигналы киназы 1 (ASK-1). 4 н. и 7 з.п. ф-лы, 1 табл., 84 пр.
1. Соединение формулы I:
или его фармацевтически приемлемая соль, где
выбран из группы, состоящей из
представляет собой 
или 
;
представляет собой 
;
R1 выбран из группы, состоящей из следующих:
1) водород;
2) -C1-C6 алкил;
3) галоген -C1-С6 алкил; и
4) -С3-С6 циклоалкил;
R2 представляет собой 
X представляет собой N или C-R3;
R3 выбран из группы, состоящей из следующих:
1) водород;
2) галоген;
3) -C1-С6 алкил; и
4) -C1-C6 алкокси;
R4 выбран из группы, состоящей из следующих:
1) водород;
2) галоген;
3) -C1-С6 алкил;
4) галоген-С1-С6 алкил; и
5) -N(R5)(R6);
где R5 и R6 объединены с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 3-8-членного гетероциклоалкила, содержащего 1 атом азота, 2 атома азота или атом азота и атом кислорода, необязательно замещенный С1-С4-алкилом.
2. Соединение по п. 1, имеющее одну из формул (II-а), (II-с), (II-е) и (IIg), или его фармацевтически приемлемая соль:
где , R2 и R4 соответствуют определениям, данным в п. 1.
3. Соединение по п. 1, имеющее одну из формул (III-а), (III-b), (III-f), (III-g), (III-h), (III-i), (III-j), (III-m) и (III-n), или его фармацевтически приемлемая соль:
где R1, R2 и R4 соответствуют определениям, данным в п. 1.
4. Соединение по п. 1, имеющее одну из формул (IV-a), (IV-b), (IV-c), (IV-f), (IV-g), (IV-h), (IV-i), (IV-j), (IV-m) и (IV-n), или его фармацевтически приемлемая соль:
где R1, R2 и R4 соответствуют определениям, данным в п. 1.
5. Соединение по п. 1, выбранное из приведенных ниже соединений, или его фармацевтически приемлемая соль:
6. Фармацевтическая композиция для лечения заболевания или патологического состояния, опосредованных ASK-1, выбранных из группы, состоящей из аутоиммунного заболевания, нейродегенеративного заболевания, воспалительного заболевания, хронического заболевания почек, заболевания почек, сердечно-сосудистого заболевания, нарушения обмена веществ или острого, или хронического заболевания печени, содержащая эффективное количество соединения по любому из пп. 1-5 и фармацевтически приемлемый носитель или вспомогательное вещество.
7. Применение соединения по любому из пп. 1-5 для лечения заболевания или патологического состояния, опосредованных ASK-1, у субъекта, нуждающегося в этом, выбранных из группы, состоящей из аутоиммунного заболевания, нейродегенеративного заболевания, воспалительного заболевания, хронического заболевания почек, заболевания почек, сердечно-сосудистого заболевания, нарушения обмена веществ или острого, или хронического заболевания печени.
8. Применение по п. 7, где заболевание или патологическое состояние, опосредованное ASK-1, представляет собой хроническое заболевание печени, выбранное из группы, состоящей из первичного билиарного цирроза (РВС), церебросухожильного ксантоматоза (СТХ), первичного склерозирующего холангита (PSC), вызванного лекарствами холестаза, внутрипеченочного холестаза беременных, холестаза, вызванного парентеральным питанием (PNAC), холестаза, вызванного чрезмерным развитием микрофлоры или сепсисом, аутоиммунного гепатита, хронического вирусного гепатита, алкогольной болезни печени, неалкогольной жировой болезни печени (NAFLD), неалкогольного стеатогепатита (NASH), болезни «транплантат-против-хозяина», вызванной пересадкой печени, регенерации печени у живого донора печени, врожденного фиброза печени, холедохолитиаза, гранулематозной болезни печени, внутри- или внепеченочной злокачественной опухоли, синдрома Шегрена, саркоидоза, болезни Вильсона, болезни Гоше, гемохроматоза или дефицита альфа 1-антитрипсина.
9. Применение по п. 7, где опосредованное ASK-1 заболевание или патологическое состояние представляет собой заболевание почек, выбранное из группы, состоящей из диабетической нефропатии, фокально-сегментарного гломерулосклероза (FSGS), гипертонического нефросклероза, хронического гломерулонефрита, хронической посттрансплантационной гломерулопатии, хронического интерстициального нефрита, фиброза почек и поликистозной болезни почек.
10. Применение по п. 7, где заболевание или патологическое состояние, опосредованное ASK-1, представляет собой сердечно-сосудистое заболевание, выбранное из группы, состоящей из атеросклероза, артериосклероза, ишемически-реперфузионного повреждения при инсульте, гипертрофии сердца, респираторных заболеваний, сердечных приступов, ишемии миокарда.
11. Применение соединения по любому из пп. 1-5 для лечения заболевания, опосредованного ASK-1, выбранного из диабетической нефропатии, диабета II типа, ревматоидного артрита, остеоартрита, рассеянного склероза, ишемии миокарда, церебральной ишемии, болезни Альцгеймера и болезни Паркинсона, у субъекта, нуждающегося в этом.
| WO 2011008709 A1, 20.01.2011 | |||
| WO 2015095059 A1, 25.06.2015 | |||
| WO 2012003387 A1, 05.01.2012 | |||
| US 20130203731 A1, 08.08.2013 | |||
| Способ закрепления подвижных частей внутри расширяющихся внутрь полостей фарфоровых изоляторов | 1926 |
|
SU27645A1 |
