АЛЬФА-ФОРМА ИЛИ БЕТА-ФОРМА КРИСТАЛЛА ПРОИЗВОДНОГО АЦЕТАНИЛИДА Российский патент 2007 года по МПК C07D277/20 C07D277/40 C07D277/44 A61K31/426 A61P3/10 

Область техники

Настоящее изобретение относится к α-форме кристалла или β-фрме кристалла (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида, который является полезным в качестве диабетического лекарственного средства, и к лекарственному препарату, содержащему таковой, особенно диабетическому лекарственному средству.

Предшествующая область техники

Авторы настоящего изобретения сообщили, что дигидрохлорид (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида, представленный следующей химической структурной формулой, обладает действием, усиливающим чувствительность к инсулину, кроме того, обладает действием против ожирения и антигиперлипидемическим действием из-за его селективного стимулирующего действия на β₃-рецепторы, и является полезным соединением для лекарственного средства против диабета (WO99/20607, пример 41).

Однако так как данный дигидрохлорид имеет высокую гигроскопичность и является нестабильным, его применение в качестве лекарственного средства до настоящего времени является проблематичным.

Необходимо, чтобы лекарственные препараты были устойчивыми к влаге, температуре, свету и чему-либо подобному в течение длительного периода времени, а также были стабильными на стадии составления. Если лекарственные препараты обладают сильной гигроскопичностью, они физически и химически изменяются или являются причиной таких неудобств, что содержание воды различается в зависимости от множества причин. Соответственно, является необходимым всегда хранить их в сухом помещении или обеспечивать стадию высушивания, что неблагоприятно с точки зрения промышленного применения.

Описание изобретения

При таких технических условиях, авторы настоящего изобретения провели обширные и интенсивные исследования вышеупомянутого соединения, описанного в примере 41 WO 99/20607, и обнаружили новые α-форму кристалла (в дальнейшем называемую «α-формой кристалла») и β-форму кристалла (в дальнейшем называемую «β-формой кристалла») (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида. Оба этих новых кристалла образованы свободным основанием и отличаются друг от друга спектрами порошковой дифракции рентгеновских лучей и ДСК-анализа. Ранее полученный кристалл дигидрохлорида был очень гигроскопичным и нестабильным кристаллом, так что имело место быстрое повышение гигроскопичности при относительной влажности воздуха 80% и удерживал влагу около 14% при относительной влажности воздуха 90%.

Наоборот, «α-форма кристалла» по данному изобретению обладает количеством удерживаемой влаги не более чем 0,2% в сплошном диапазоне относительной влажности воздуха от 5% до 95%, является стабильным кристаллом, не проявляющим гигроскопичности, и является подходящей для применения в качестве лекарственного препарата. Кроме того, в «β-форме кристалла» наблюдается увеличение массы при относительной влажности воздуха около 20%, и она удерживает влагу около 3% и обладает слабой гигроскопичностью. Однако данный кристалл представляет собой метастабильную форму кристалла и может применяться в качестве лекарственного препарата. Также «β-форма кристалла» является полезной в качестве промежуточного соединения при получении «α-фрмы кристалла».

Как α-форма кристалла, так и β-форма кристалла отличаются следующим шагом кристаллической решетки [2θ°)] спектра порошковой дифракции рентгеновских лучей и пика теплопоглощения при ДСК анализе. В этой связи, что касается порошковой дифракции рентгеновских лучей, при определении природы кристалла, шаги кристаллической решетки и полная структура являются важными в характере данных. С другой стороны, так как относительная интенсивность может немного варьироваться в зависимости от направления роста кристалла, размера частиц и условий измерений, ее не следует рассматривать как ограничение.

Также при ДСК анализе, α-форма кристалла имеет пик теплопоглощения при 142-146°С, а β-форма кристалла имеет пики теплопоглощения при 90-110°С и при 142-146°С, соответственно.

Измерение порошковой дифракции рентгеновских лучей проводили с применением MAC Science MXP18TAHF22 при следующих условиях. Трубка: Cu, ток трубки: 40 мА, напряжение трубки: 40 кВ, ширина образца: 0,020°, скорость сканирования: 3°/мин, длина волны 1,54056 ангстрем, диапазон угла измерения дифракции (2θ): 5-40°.

Термический анализ (ДСК и ТГА) соответственно проводили при следующих условиях.

ДСК: Perkin-Elmer Pyris 1, от 25°С до 250°С (10°С/мин), N₂ (20 мл/мин), алюминиевый резервуар для образца. ТГА: Perkin-Elmer TGA 7, от 25°С до 250°С (10°С/мин), N₂ (20 мл/мин), платиновый резервуар для образца.

Спектры ядерного магнитного резонанса (ЯМР) получали с применением JEOL JNM-LA400 и JEOL JNM-A500 и в качестве внутреннего стандарта применяли тетраметилсилан (ТМС).

Масс-спектры получали с применением JEOL DX-300 и JEOL LX-2000.

Кроме того, изобретение относится к лекарственному средству, содержащему α-форму кристалла и β-форму кристалла (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида, особенно антидиабетическому лекарственному препарату, обладающему эффектом против ожирения и антигиперлипидемическим действием.

Введение лекарственного средства, содержащего кристалл по данному изобретению, в качестве исходного сырья для получения медикаментов может быть пероральным введением при помощи, например, таблетки, пилюли, капсулы, гранулы или порошка, или парентеральным введением при помощи, например, ингаляционного агента. Примеры твердых композиций для перорального введения включают таблетки, порошки и гранулы. В таких твердых композициях одно или более активных веществ смешивают с, по меньшей мере, одним инертным вспомогательным веществом, таким как лактоза, маннит, глюкоза, гидроксипропилцеллюлоза, микрокристаллическая целлюлоза, крахмал, поливинилпирролидон и алюминат метасиликата магния. Композиция также может содержать инертные добавки, такие как смазывающие агенты, такие как стеарат магния; разрыхлители, такие как карбоксиметиловый крахмал натрия; и вспомогательные солюбилизаторы в соответствии с обычными методами. При необходимости таблетки или пилюли могут быть покрыты оболочкой из сахара или желудочных или кишечных агентов. Доза может быть подходящим образом определена в зависимости от каждого случая, принимая во внимание симптом, возраст, пол и другое каждого субъекта, которому необходимо введение, но обычно колеблется от 0,01 мг/кг до 100 мг/кг в день для взрослого в случае перорального введения, и ее вводят за один раз или разделив на 2-4 приема.

(Способ получения)

α-Форма кристалла может быть получена добавлением растворителя для перекристаллизации (37%-50% водного раствора этанола) к β-форме кристалла (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида, растворяя β-форму кристалла при нагревании до около 70-80°С, а затем постепенном охлаждении раствора со скоростью около 10°С в час. Хотя, похоже, что α-форма кристалла кристаллизуется в объеме при промышленном производстве, она может предпочтительно быть кристаллизована с использованием затравки α-формы кристалла.

β-Форма кристалла может быть получена путем добавления моногидрохлорида 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида к смешанному раствору моногидрохлорида (R)-2-[[2-(4-аминофенил)этил]амино]-1-фенилэтанола, 2-аминотиазол-4-ил-уксусной кислоты, концентрированной хлористо-водородной кислоты и воды при комнатной температуре и нейтрализации полученного кислого раствора для образования влажного осадка β-формы кристалла (влажный осадок, в данном описании обозначает состояние, когда кристалл смочен растворителем).

Также, β-форма кристалла может быть получена добавлением растворителя для перекристаллизации (37%-50% водного раствора этанола) к настоящей β-форме кристалла, растворяя β-форму кристалла при нагревании до около 70-80°С и, после установления внешней температуры 20°С, быстрого охлаждения раствора. Также β-форма кристалла может предпочтительно быть кристаллизована с использованием затравки β-формы кристалла.

Как описано ранее, так как выделенная β-форма кристалла может быть преобразована обратно в α-форму кристалла после растворения при нагревании, β-форма кристалла является полезной в качестве промежуточного соединения при получении α-формы кристалла.

Наилучший вариант осуществления изобретения

Изобретение будет более точно описано ниже со ссылками на примеры 1-4, они не должны быть истолкованы как ограничивающие объем изобретения. Так как исходное соединение получали способами, отличающимся от описанного в WO99/20607, он будет описан как примеры-ссылки 1-3. Пути синтеза в примерах-ссылках 1-3 и примерах 1-4 показаны ниже. Кроме того, способ получения кристалла дигидрохлорида (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида будет описан в виде сравнительного примера-ссылки.

Путь синтеза:

Пример-ссылка 1:

К смеси 5,90 кг моногидрохлорида 4-нитрофенилэтиламина, 4,43 кг (R)-миндальной кислоты, 2,94 кг триэтиламина и 22 л N,N-дметилформамида добавляли 3,93 кг гидроксибензтриазола и 5,58 кг моногидрохлорида 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (EDC), и смесь перемешивали приблизительно при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем добавляли 0,28 кг EDC, и смесь перемешивали при окружающей комнатной температуре в течение ночи. Реакционный раствор разбавляли 110 л воды и экстрагировали этилацетатом (60 л и 30 л). Органический слой последовательно промывали 60 л 1 М водного раствора хлористо-водородной кислоты, 60 л 20% водного раствора карбоната калия и водой (60 л и 60 л), а затем концентрировали в вакууме при 10-19°С. Остаток растворяли в 35 л толуола при нагревании (до 87°С), охлаждали, а затем перемешивали при 20°С в течение ночи. Образовавшуюся кристаллическую фазу отфильтровывали и промывали 10 л толуола, с последующей сушкой в вакууме. Таким образом, получали 7,66 кг (R)-2-гидрокси-N-[2-(4-нитрофенил)этил]-2-фенилацетамида в виде бледно-желтых кристаллов.

¹Н ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ (м.д.): 2,87 (2Н, т, J=7,2 Гц), 3,30-3,46 (2Н, м), 4,85 (1Н, д, J=4,8 Гц), 6,12 (1Н, д, J=4,8 Гц), 7,20-7,33 (5Н, м), 7,40 (2Н, д, J=8,0 Гц), 8,04-8,12 (3Н, м). FAB-МС m/z: 301 (М+H)⁺.

(Другой способ) Способ получения с использованием 4-нтрофенилэтиламина 1/2 сульфата:

К смеси 9,77 г 4-нитрофенилэтиламина 1/2 сульфата, 6,00 г (R)-миндальной кислоты, 4,70 г карбоната калия и 60 мл N,N-дметилформамида добавляли 6,14 г гидроксибензтриазола и 8,70 г моногидрохлорида 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (EDC), и смесь перемешивали при окружающей комнатной температуре в течение 2 часов. Затем добавляли 0,87 г EDC, и смесь перемешивали при окружающей комнатной температуре в течение ночи. Реакционный раствор разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом. Органический слой последовательно промывали 1 М водным раствором хлористо-водородной кислоты, 20% водным раствором карбоната калия и водой, а затем концентрировали в вакууме. Остаток перекристаллизировали из толуола для получения 10,4 г (R)-2-гидрокси-N-[2-(4-нитрофенил)этил]-2-фенилацетамида в виде бледно-желтых кристаллов.

Пример-ссылка 2:

Смесь 7,51 кг (R)-2-гидрокси-N-[2-(4-нитрофенил)этил]-2-фенилацетамида, 23 л 1,3-диметил-2-имидазолидинона и 23 л тетрагидрофурана охлаждали до -18°С, и затем к ней добавляли по каплям 49,4 кг 1 М раствора боран-тетрагидрофурана при температуре не выше чем -7°С. После этого температуру повышали до 70°С и смесь перемешивали в течение 5 часов. Реакционную смесь охлаждали до -12°С, затем добавляли 2,9 кг метанола и 5,9 кг концентрированной хлористо-водородной кислоты при температуре не выше 5°С. Смесь перемешивали при 68°С в течение одного часа и концентрировали в вакууме таким образом, чтобы довести объем реакционной массы до 50 л. Добавляли 60 кг 30% водного раствора K₂CO₃ и 6 л воды, и смесь экстрагировали 75 л этилацетата. Органический слой промывали 75 л и концентрировали в вакууме. К остатку добавляли 75 л изопропанола и растворяли его при 40°С, и раствор кристаллизировали, добавляя 2,46 кг концентрированной хлористо-водородной кислоты с последующим перемешиванием при 23°С в течение ночи. Кристаллическую фазу выделяли фильтрацией и промывали 38 л изопропанола с последующей сушкой в вакууме. Таким образом получали 7,29 кг моногидрохлорида (R)-2-[[2-(4-нитрофенил)этил]амино]-1-фенилэтанола.

¹Н ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ (м.д.): 3,00-3,08 (1H, м), 3,15-3,30 (5H, м), 5,00-5,05 (1H, м), 6,23 (1H, д, J=4,0 Гц), 7,29-7,35 (1H, м), 7,36-7,43 (4H, м), 7,57 (2H, д, J=8,4 Гц), 8,21 (2H, д, J=8,4 Гц), 9,12 (2H, шир.). FAB-МС m/z: 287 (М+H)⁺.

Пример-ссылка 3:

Смесь 11,0 кг моногидрохлорида (R)-2-[[2-(4-нитрофенил)-этил]амино]-1-фенилэтанола, 110 л метанола и 1,20 кг влажного 10% палладия на углероде (влагосодержание: 54,2%) перемешивали в атмосфере водорода до тех пор, пока не прекращалось поглощение водорода. Реакционный раствор фильтровали, и фильтрат концентрировали в вакууме. К осадку добавляли 40 л метанола и его растворяли при 40°С, и раствор кристаллизировали, добавляя 220 л диизопропилового эфира с последующим перемешиванием при 20°С в течение ночи. Кристаллическую фазу выделяли фильтрацией и промывали 30 л диизопропилового эфира с последующей сушкой в вакууме. Таким образом получали 9,43 кг моногидрохлорида (R)-2-[[2-(4-аминофенил)этил]амино]-1-фенилэтанола.

(Другой способ) Способ с применением этилацетата в качестве растворителя для кристаллизации:

Смесь 15,0 г моногидрохлорида (R)-2-[[2-(4-нитрофенил)-этил]амино]-1-фенилэтанола, 90 мл метанола и 655 мг влажного 10% палладия-на-углероде (влагосодержание: 54,2%) перемешивали в атмосфере водорода до тех пор, пока не прекращалось поглощение водорода. Реакционный раствор фильтровали. Фильтрат нагревали, затем к нему с перерывами добавляли этилацетат, в то же время концентрируя раствор в метаноле нагреванием, для образования взвеси. Образовавшуюся кристаллическую фазу выделяли фильтрацией и промывали этилацетатом с последующей сушкой в вакууме. Таким образом получали 12,9 г моногидрохлорида (R)-2-[[2-(4-аминофенил)этил]амино]-1-фенилэтанола.

¹Н ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ (м.д.): 2,76-2,90 (2H, м), 2,95-3,16 (4H, м), 4,95-5,11 (3Н, м), 6,20 (1H, д, J=4,0 Гц), 6,53 (2H, д, J=8,4 Гц), 6,89 (2H, д, J=8,4 Гц), 7,28-7,43 (5H, м), 8,97 (1H, шир.), 9,29 (1H, шир.). FAB-МС m/z: 257 (М+H)⁺.

Пример 1

Получение β-формы кристалла

К смешанному раствору 8,00 г моногидрохлорида (R)-2-[[2-(4-аминофенил)этил]амино]-1-фенилэтанола, 4,32 г 2-аминотиазол-4-ил-уксусной кислоты, 2,64 г концентрированной хлористоводородной кислоты и 120 мл воды, добавляли 5,76 г моногидрохлорида 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (EDC) при комнатной температуре, и смесь перемешивали в течение одного часа. Смешанный раствор 2,40 г гидрохлорида натрия и 40 мл воды по каплям добавляли в реакционный раствор, таким образом вызывая кристаллизацию. Образовавшуюся кристаллическую фазу выделяли фильтрацией и промывали водой, с последующей сушкой в вакууме. Таким образом получали 9,93 г β-формы кристалла (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида.

Пример 2

Получение β-формы кристалла через влажный осадок β-формы кристалла)

К смешанному раствору 13,50 кг моногидрохлорида (R)-2-[[2-(4-аминофенил)этил]амино]-1-фенилэтанола, 7,29 кг 2-аминотиазол-4-ил-уксусной кислоты, 4,46 кг концентрированной хлористо-водородной кислоты и 270 л воды добавляли 9,73 кг моногидрохлорида 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (EDC) при 15°С, и смесь перемешивали в течение одного часа. Смешанный раствор 4,10 кг гидрохлорида натрия и 110 л воды добавляли по каплям в реакционный раствор, таким образом вызывая кристаллизацию. Образовавшуюся кристаллическую фазу выделяли фильтрацией и промывали водой для получения 26,2 кг влажного осадка β-формы кристалла (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида. Полученный кристалл во влажном состоянии применяли для перекристаллизации.

К 26,2 кг влажного осадка β-формы кристалла добавляли 180 л воды и 140 л этанола и его растворяли при нагревании до около 80°С, и внешнюю температуру устанавливали на 20°С, таким образом быстро охлаждая раствор. Образовавшуюся кристаллическую фазу отфильтровывали и высушивали с получением 15,40 кг β-формы кристалла (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида.

Диаграмма порошковой дифракции рентгеновских лучей и диаграмма термического анализа β-формы кристалла показаны на фиг.1 и фиг.2, соответственно.

(Другой способ) (Перекристаллизация при внесении затравки β-формы кристалла):

Смесь 7,54 г β-формы кристалла, 60 мл этанола и 90 мл воды растворяли при нагревании и охлаждали, затем к ней добавляли 380 мг β-формы кристалла при 45°С. Впоследствии смесь перемешивали на ледяной бане в течение 15 минут. Кристаллическую фазу отфильтровывали и высушивали для получения 6,93 г β-формы кристалла.

Пример 3

Получение α-формы кристалла из β-формы кристалла

Смесь 15,30 кг β-формы кристалла (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида, 180 л воды и 120 л этанола растворяли при нагревании до около 80°С и охлаждали, затем к ней добавляли 15,0 г α-формы кристалла при 50°С. Впоследствии смесь охлаждали до 20°С. Кристалл фильтровали и высушивали для получения 14,24 кг α-формы кристалла (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида.

Диаграмма порошковой дифракции рентгеновских лучей α-формы кристалла показана на фиг.3.

Пример 4

Получение α-формы кристалла из влажного осадка β-формы кристалла

После тех же операций, что и в примере 2, получали 23,42 кг влажного осадка β-формы кристалла (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида из 6,66 кг моногидрохлорида (R)-2-[[2-(4-аминофенил)этил]амино]-1-фенилэтанола. К полученному осадку добавляли и растворяли в 92 л воды и 76 л этанола при нагревании до около 80°, и раствор охлаждали со скоростью около 10°С в час, затем к нему добавляли 8,4 г α-формы кристалла при 55°С. После этого смесь охлаждали до 20°С. Кристаллическую фазу отфильтровывали и высушивали для получения 6,56 кг α-формы кристалла (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида.

Диаграмма порошковой дифракции рентгеновских лучей и диаграмма термического анализа α-формы кристалла показаны на фиг.4 и фиг.5 соответственно.

¹Н ЯМР (ДМСО-d₆, 500 МГц) δ (м.д.): 1,60 (1H, с), 2,59-2,66 (4H, м), 2,68-2,80 (2H, м), 3,45 (2H, с), 4,59 (1H, шир.), 5,21 (1H, шир.), 6,30 (1H, с), 6,89 (2H, с), 7,11 (2H, д, J=8,5 Гц), 7,19-7,23 (1H, м), 7,27-7,33 (4H, м), 7,49 (2H, д, J=8,5 Гц), 9,99 (1H, с). FAB-МС m/z: 397 (М+H)⁺.

Сравнительный пример-ссылка

Получение дигидрохлорида

20,0 г (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида растворяли в 1,4-диоксане, к которому затем добавляли 8,41 мл концентрированной хлористо-водородной кислоты. Образовавшуюся кристаллическую фазу выделяли фильтрованием для получения 25,0 г дигидрохлорида (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида.

Диаграмма порошковой дифракции рентгеновских лучей кристалла дигидрохлорида показана на фиг.6.

¹Н ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ (м.д.): 2,90-3,08 (3H, м), 3,10-3,21 (3H, м), 3,75 (2H, с), 4,99-5,03 (1H, м), 6,69 (1H, с), 7,20 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,28-7,43 (5H, м), 7,59 (2H, д, J=8,8 Гц), 8,94 (1H, шир.с), 9,17 (2H, шир.), 9,40 (1H, шир.с), FAB-МС m/z: 397 (М+H)⁺.

Промышленная применимость

α-Форма кристалла данного изобретения не проявляет гигроскопичности и является стабильной, и, следовательно, может применяться в качестве лекарственного препарата и является полезной в качестве лекарственного препарата. Хотя β-форма кристалла изобретения проявляет слабую гигроскопичность, она является стабильной и полезной в качестве промежуточного соединения при получении α-формы кристалла. Также данные кристаллы обладают как действием, усиливающим секрецию инсулина, так и действием, потенцирующим чувствительность к инсулину, и являются полезными в качестве лекарственного препарата против диабета. Полезность данных кристаллов в качестве лекарственных препаратов установлена следующим исследованием гигроскопичности и гипогликемическим тестом.

1. Исследование гигроскопичности

Гигроскопичность измеряли с использованием VTI SGA-100 в следующих условиях. Температура: 25°С, диапазон измерений: от 5 до 95% относительной влажности воздуха, интервал измерений: 5% относительной влажности воздуха.

В результате кристалл дигидрохлорида (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида проявлял быстрое увеличение массы при относительной влажности воздуха около 80°С, удерживал около 14% влаги при относительной влажности воздуха 90%, и проявлял значительную гигроскопичность (смотри фиг.7). С другой стороны, α-форма кристалла изобретения имела количество удерживаемой влаги не более чем 0,2% в сплошном диапазоне относительной влажности воздуха от 5% до 95%, и не проявляла гигроскопичности (смотри фиг.9). Также для β-формы кристалла наблюдали увеличение массы при относительной влажности воздуха около 20%, и он удерживал около 3% влаги и проявлял слабую гигроскопичность (смотри фиг.8).

Вышеупомянутый кристалл дигидрохлорида (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида проявлял значительную гигроскопичность, и физическая и химическая природа и физические свойства кристалла меняются и являются нестабильными. С другой стороны, α-форма кристалла по данному изобретению не проявляла гигроскопичности и обладала прекрасной стабильностью, и, следовательно, она является подходящей в качестве исходного материала для получения лекарственных препаратов. Хотя «β-форма кристалла» обладает слабой гигроскопичностью, она является метастабильной формой кристалла и может применяться в качестве лекарственного средства.

2. Гипогликемический тест на мышах линии kk (модель инсулинорезистентности: ожирение и гипергликемия)

У мышей-самцов линии kk (уровень глюкозы крови: 200 мг/дл или более) измеряли уровень глюкозы крови после кормления и затем случайным образом формировали группы. Тестируемый лекарственный препарат насильственно вводили перорально один раз в день в течение 7 дней, и уровень глюкозы крови через 15-18 часов после последнего введения сравнивали с таковым перед введением (n=6). Кровь брали из хвостовой вены мыши с применением стеклянного капилляра (предварительно обработанного гепарином), оттуда удаляли белок, и количество глюкозы в надосадочной жидкости (мг/дл) определяли колориметрически глюкозо-оксидазным методом. Кроме того, дозу, снижающую уровень глюкозы крови на 30% по сравнению с таковым перед введением тестируемого лекарственного препарата, выражали значением ED₃₀.

В результате α-форма кристалла проявляла значительную активность, так, что значение ED₃₀ при пероральном введении было не более 3,5 мг/кг/день.

3. Применимость β-формы кристалла в качестве промежуточного продукта производства:

β-форма кристалла также является полезной в качестве промежуточного соединения при получении α-формы кристалла. β-форма кристалла может быть надежно и просто получена путем охлаждения в промышленном получении. Так как β-форма кристалла обладает высокой растворимостью в растворителе для перекристаллизации (37%-50% водный раствор этанола), по сравнению с α-формой кристалла, α-форма кристалла может быть легко получена перекристаллизацией β-формы кристалла.

Краткое описание фигур

Фиг.1 представляет собой диаграмму порошковой дифракции рентгеновских лучей β-формы кристалла (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида (кристалл изобретения).

Фиг.2 представляет собой диаграмму термического анализа β-формы кристалла (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида (кристалл изобретения).

Фиг.3 представляет собой диаграмму порошковой дифракции рентгеновских лучей α-формы кристалла (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида (кристалл изобретения).

Фиг.4 представляет собой диаграмму порошковой дифракции рентгеновских лучей α-формы кристалла (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида (кристалл изобретения).

Фиг.5 представляет собой диаграмму термического анализа α-формы кристалла (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида (кристалл изобретения).

Фиг.6 представляет собой диаграмму порошковой дифракции рентгеновских лучей кристалла дигидрохлорида (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида.

Фиг.7 представляет собой диаграмму кривой гигроскопичности кристалла дигидрохлорида (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида.

Фиг.8 представляет собой диаграмму кривой гигроскопичности β-формы кристалла (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида (кристалл изобретения).

Фиг.9 представляет собой диаграмму кривой гигроскопичности α-формы кристалла (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида (кристалл изобретения).

В чертежах «интенсивность» обозначает интенсивность; «Температура» обозначает температуру; «Тепловой поток, эндотермический восходящий» обозначает теплопоглощение; «Масса» обозначает массу; «Адсорбция» обозначает адсорбцию;, «Десорбция» обозначает десорбцию; «Изотерма» обозначает кривую; и «ОВ» обозначает относительную влажность воздуха, соответственно.

Изобретение относится к новым кристаллическим формам, которые могут использоваться в качестве ингредиентов для получения твердой фармацевтической противодиабетической композиции и противодиабетического лекарственного средства: к α-форме кристалла и β-форме кристалла (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида. α-Форма кристалла имеет пик теплопоглощения при 142-146°С при ДСК анализе и основные пики порошковой дифракции рентгеновских лучей 5,32, 8,08, 15,28, 17,88, 19,04, 20,20, 23,16 и 24,34 в единицах 2θ(°), не проявляет гигроскопичности и обладает стабильностью, так что она может применяться в качестве лекарственного средства. β-Форма кристалла имеет пики теплопоглощения при 90-110°С и при 142-146° при ДСК анализе и основные пики порошковой дифракции рентгеновских лучей 9,68, 19,76, 20,72, 22,10 и 23,52, относительно не проявляет гигроскопичности и также является полезной в качестве промежуточного продукта производства α-формы кристалла. 8 н.п. ф-лы, 2 табл., 9 ил.

1. α-Форма кристалла (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида, имеющая основные пики порошковой дифракции рентгеновских лучей 5,32, 8,08, 15,28, 17,88, 19,04, 20,20, 23,16 и 24,34 в единицах 2θ(°).2. α-Форма кристалла (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида, имеющая пик теплопоглощения при 142-146°С при ДСК анализе и имеющая основные пики порошковой дифракции рентгеновских лучей 5,32, 8,08, 15,28, 17,88, 19,04, 20,20, 23,16 и 24,34 в единицах 2θ(°).3. Твердая фармацевтическая противодиабетическая композиция, включающая α-форму кристалла (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида по п.1 и фармацевтически приемлемый носитель.4. Твердое противодиабетическое лекарственное средство, включающее α-форму кристалла (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида по п.1 и фармацевтически приемлемый носитель.5. β-Форма кристалла (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида, имеющая основные пики порошковой дифракции рентгеновских лучей 9,68, 19,76, 20,72, 22,10 и 23,52 в единицах 2θ(°).6. β-Форма кристалла (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида, имеющая пики теплопоглощения при 90-110°С и при 142-146° при ДСК анализе и имеющая основные пики порошковой дифракции рентгеновских лучей 9,68, 19,76, 20,72, 22,10 и 23,52 в единицах 2θ(°).7. Твердая фармацевтическая противодиабетическая композиция, включающая β-форму кристалла (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида по п.5 и фармацевтически приемлемый носитель.8. Твердое противодиабетическое лекарственное средство, включающее β-форму кристалла (R)-2-(2-аминотиазол-4-ил)-4'-[2-[(2-гидрокси-2-фенилэтил)амино]этил]ацетанилида по п.5 и фармацевтически приемлемый носитель.