СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ФИБРИЛЛЯЦИИ ПРЕДСЕРДИЙ У БОЛЬНЫХ ИШЕМИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНЬЮ СЕРДЦА Российский патент 2007 года по МПК G01N33/68 G01N33/53 G01N33/569 

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для прогнозирования нарушения сердечного ритма по типу пароксизмальной формы фибрилляции предсердий у больных ишемической болезнью сердца.

Способы прогнозирования фибрилляции предсердий у больных ишемической болезнью сердца в литературе не описаны.

Изобретение направлено на решение задачи по возможности прогнозирования развития нарушения ритма сердца по типу пароксизмальной формы фибрилляции предсердий у больных ишемической болезнью сердца (ИБС).

Технический результат: способность выявления группы риска по возникновению фибрилляции предсердий у данной когорты пациентов.

Сущность метода заключается в использовании иммуноферментного анализа для определения титра антител к Chlamydia pneumoniae и количественного метода определения воспалительных маркеров: С-реактивного протеина (СРП) и фактора некроза опухоли альфа (ФНОα).

Способ осуществляется следующим образом.

У пациентов с ишемической болезнью сердца из кубитальной вены проводят забор крови 5 мл для иммуноферментного анализа, 5 мл для определения уровня СРП и 5 мл для определения уровня ФНОα.

Для определения СРП используют иммунотурбидиметрический количественный метод многоточечной калибровки. Используют, например, реактивы фирмы «DiaSys» (АО «Юнимед», Россия, Москва). Принцип метода основан на определении концентрации СРП по конечной точке фотометрическим измерением реакции антиген-антитело между антителами к человеческому СРП и СРП, находящимся в образце. В исследуемые образцы (сыворотка или гепаринизированная плазма) добавляют реагент №1, перемешивают, инкубируют 5 минут и измеряют оптическую плотность. Затем добавляют реагент №2, перемешивают, инкубируют 10 минут и измеряют оптическую плотность. Концентрацию СРП определяют по калибровочной кривой с помощью математической модели. Уровень СРП в сыворотке здорового донора не превышает 5 мг/л.

Для количественного определения человеческого ФНОα в биологических жидкостях человека и культуральных средах используют, например, набор реагентов «альфа-ФНО-ИФА-БЕСТ» (тест-система фирмы ЗАО «Вектор-Бест», Россия, г.Новосибирск). Анализ проводят в три стадии. На первой стадии исследуемые и контрольные образцы инкубируют и связывают в лунках с иммобилизованными антителами. Далее связавшийся ФНОα взаимодействует с конъюгатом №1 (антитела к ФНОα человека с биотином), несвязавшийся конъюгат удаляют отмывкой. На третьей стадии конъюгат №1 связывают с конъюгатом №2 (стрептавидин с пероксидазой хрена). После отмывки количество связавшегося конъюгата №2 определяют цветной реакцией с субстратом пероксидазы хрена - перикиси водорода и хромогена-тетраметилбензидина. Реакцию останавливают добавлением раствора серной кислоты и измеряют оптическую плотность растворов в лунках при длине волны 450 нм. Интенсивность желтого окрашивания пропорциональна количеству содержащегося в образце ФНОα. Уровень ФНОα в сыворотках здоровых доноров не превышает 2,5 пг/мл.

У всех обследуемых были исследованы наличие и активность инфекции Chlamydophila pneumoniae, для чего использовался метод иммуноферментного анализа (ИФА) с определением уровня антител к данному микроорганизму: специфические иммуноглобулины (Ig) класса G и Ig класса М (например, реактивы фирмы ЗАО «Им Ди», Россия, г.Новосибирск).

Всего в исследовании принимало участие 108 человек, из которых 77 - больные с ИБС (51 - больные с нарушением ритма по типу пароксизмальной формы фибрилляции предсердий, 26 - больные без нарушения ритма). Группу сравнения составил 31 практически здоровый человек.

Риск возникновения фибрилляции предсердий у больных ИБС увеличивается в 3 раза при наличии факта серопозитивности к Chlamydophila pneumoniae, в 2,8 раза при уровне С-реактивного протеина выше 1,8 мг/л, в 6 раз при уровне фактора некроза опухоли-альфа выше 2,4 пг/мл. Сочетание всех трех критериев наблюдалось у девяти пациентов основной группы.

Преимущество способа заключается в возможности прогнозирования возникновения фибрилляции предсердий у больных ИБС и выявления среди больных ИБС группу пациентов повышенного риска развития данного нарушения ритма.

Примеры конкретного выполнения

Пример 1. Больной КИВ, 50 лет. Диагноз: Ишемическая болезнь сердца, стенокардия напряжения 2 ФК. Нарушение ритма сердца по типу пароксизмальной формы фибрилляции предсердий. 23.11.2004 взята кровь на ИФА и количественное определение СРП и ФНОα. Результат ИФА - серопозитивная реакция (титр IgG 1:40), уровень ФНОα - 2,2 пг/мл, уровень СРП - 4,2 мг/л. Таким образом у больного неблагоприятный прогноз развития фибрилляции предсердий на фоне ИБС. Из анамнеза известно, что ИБС дебютировала в 2000 г., а фибрилляция предсердий - с 2003 г.

Пример 2. Больной ЛАП, 55 года. Диагноз: Ишемическая болезнь сердца, стенокардия напряжения 1 ФК. Нарушение ритма сердца по типу пароксизмальной формы фибрилляции предсердий. 26.11.2004 взята кровь на ИФА и количественное определение СРП и ФНОα. Результат ИФА - серопозитивная реакция (титр IgG 1:40), уровень ФНОα - 1,9 пг/мл, уровень СРП - 3,1 мг/л. Таким образом, у больного неблагоприятный прогноз развития фибрилляции предсердий на фоне ИБС. Из анамнеза известно, что ИБС дебютировала в 2002 г., а фибрилляция предсердий - с 2004 г.

Пример 3. Больной ВВВ, 49 лет. Диагноз: Ишемическая болезнь сердца, стенокардия напряжения 2 ФК. 08.02.2005 взята кровь на ИФА и количественное определение СРП и ФНОα. Результат ИФА - серонегативная реакция (титр IgG 0), уровень ФНОα - 1,4 пг/мл, уровень СРП - 0,7 мг/л. Таким образом, у больного нет данных за развитие фибрилляции предсердий на фоне ИБС. Из анамнеза известно, что ИБС дебютировала в 2000 г.

Использование предлагаемого способа позволяет прогнозировать возникновение фибрилляции предсердий у больных ИБС, выявлять среди пациентов с ИБС группу повышенного риска развития данного нарушения ритма и проводить своевременную профилактику аритмий у больных ИБС.

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике. Для осуществления способа прогнозирования фибрилляции предсердий у больных ишемической болезнью сердца проводят иммуноферментный анализ крови на наличие Chlamydia pneumoniae. Определяют количественно уровни воспалительных маркеров: С-реактивного протеина и фактора некроза опухоли альфа и при серопозитивном результате, при уровне СРП выше 1,8 мг/л и уровне ФНОα выше 2,4 пг/дл прогнозируют возникновение фибрилляции предсердий. Использование способа позволяет выявлять среди пациентов с ИБС группу повышенного риска развития данного нарушения ритма и проводить своевременную профилактику аритмий у больных ИБС.

Способ прогнозирования фибрилляции предсердий у больных ишемической болезнью сердца, отличающийся тем, что у больных с ишемической болезнью сердца проводят иммуноферментный анализ крови на наличие Chlamydia pneumoniae, определяют количественно уровни воспалительных маркеров С-реактивного протеина (СРП) и фактора некроза опухоли альфа (ФНОα) и при серопозитивном результате, при уровне СРП выше 1,8 мг/л и уровне ФНОα выше 2,4 пг/дл прогнозируют возникновение фибрилляции предсердий.