АЦИЛИРОВАННЫЕ ГЕТЕРОАРИЛКОНДЕНСИРОВАННЫЕ ЦИКЛОАЛКЕНИЛАМИНЫ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ В КАЧЕСТВЕ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ СРЕДСТВ Российский патент 2008 года по МПК C07D401/12 C07D403/12 C07D409/12 A61K31/435 

Данное изобретение относится к ацилированным гетероарилконденсированным циклоалкениламинам формулы I

в которой A, R¹, R², R³, R⁴, R⁵ и n имеют значения, указанные ниже. Соединения формулы I представляют собой ценные фармацевтически активные соединения, которые применимы для лечения различных болезненных состояний, в том числе сердечно-сосудистых заболеваний, таких как атеросклероз, тромбоз, заболевание коронарной артерии, гипертензия и сердечная недостаточность. Они активируют экспрессию фермента эндотелиальной синтазы оксида азота (NO-синтазы), и их можно применять при состояниях, когда требуется повышенная экспрессия указанного фермента, или повышенный уровень NO, или нормализация пониженного уровня NO. Кроме того, изобретение относится к способам получения соединений формулы I, их применению, конкретно в качестве активных ингредиентов в фармацевтических средствах, и к фармацевтическим препаратам, содержащим данные соединения.

Эндотелиальная NO-синтаза (eNOS, NOS-III) принадлежит к группе трех изоферментов, которые продуцируют монооксид азота (NO) окислением аргинина. Высвобождаемый эндотелиально NO играет центральную роль в ряде основных сердечно-сосудистых механизмов. NO обладает сосудорасширяющим действием и ингибирует агрегацию тромбоцитов, адгезию лейкоцитов к эндотелию и пролиферацию интимальных клеток гладких мышц.

Эндотелиальная NO-синтаза является объектом физиологической и патофизиологической регуляции как на транскрипционном, так и на пост-транскрипционном уровне. Фермент, уже присутствующий в эндотелии, может подвергаться кальций-зависимой и кальций-независимой активации фосфорилированием специфических аминокислот, а также непосредственными взаимодействиями со специфичными белками. Стимуляторами указанного высвобождения NO, обычно кратковременного, являются внеклеточный аргинин, 17β-этроген и механический стимул, возникающий из-за действия кровотока (напряжение сдвига) на эндотелий поверхности просвета. Последний приводит к дополнительной регуляции eNOS на транскрипционном уровне. Так, например, Sessa et al. (Circ. Research 74 (1994) 349) смогли с помощью тренировочных упражнений и увеличения напряжения сдвига, связанного с ними, получить заметное увеличение eNOS.

Однозначно не доказано, является ли регуляция на пост-транскрипционном уровне существенной in vivo. Так, например, после введения большой дозы аргинина имеет место только кратковременное улучшение эндотельально зависимой вазорелаксации у больных с коронарной болезнью.

С другой стороны, важность повышающей регуляции eNOS белка признается наукой. Так, имеются данные, показывающие, что протекторные свойства ингибитора HMG-CoA-редуктазы - симвастатина - могут быть частично обусловлены, наряду с гиполипидемическим действием, увеличением eNOS-экспрессии in vivo (Endres et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95 (1998) 8880). Кроме того, известно, что мутации в одной точке в 5'-фанкирующей области гена eNOS ("промотор eNOS") и уменьшение скорости транскрипции гена eNOS, обусловленного ими, связаны с увеличением риска спазмов коронарных сосудов у населения Японии (Nakayama et al., Circulation 99 (1999) 2864).

Общепринятое предположение, следовательно, состоит в том, что транскрипционный и пост-транскрипционный механизмы регуляции eNOS серьезно нарушены при многих заболеваниях, особенно при сердечно-сосудистых заболеваниях. Дисфункция данного типа в эндотелии, выстилающем кровеносные сосуды, возможна даже на очень ранних стадиях многих сердечно-сосудистых заболеваний, что приводит к дефициту биоактивного NO, который проявляется в прогрессировании заболевания в виде патофизиологических и морфологических изменений, которые можно измерить. Таким образом, решающие стадии на ранних этапах развития атеросклероза ускоряются уменьшением высвобождения эндотелиального NO, таком, например, как окисление липопротеинов низкой плотности, рекрутинг и отложение моноцитов в интиме сосудов и пролиферация интимальных клеток. Следствием развития атеросклероза является образование бляшек внутри кровеносных сосудов, которые могут, в свою очередь, вызывать дополнительное уменьшение высвобождения эндотелиального NO (за счет снижения напряжения сдвига) и дальнейшее ухудшение патологии. Так как эндотелиальный NO также является сосудорасширяющим фактором, часто его уменьшение также приводит к гипертензии, которая может, как независимый фактор риска, вызывать дополнительное поражение органов.

Цель терапевтического подхода к лечению указанных заболеваний должна, следовательно, состоять в том, чтобы прервать указанную цепь событий путем увеличения экспрессии эндотелиального NO. Эксперименты по переносу генов, которые in vitro приводят к сверхэкспрессии NO синтазы в ранее поврежденных сосудах, действительно способны противодействовать описанным процессам и, таким образом, доказывают правильность указанного подхода (Varenne et al., Hum. Gene Ther. 11 (2000) 1329).

В литературе описаны некоторые низкомолекулярные соединения, которые могут непосредственно воздействовать на транскрипцию и экспрессию eNOS в культурах клеток. Статины, которые уже упоминались, однако представляют собой единственные вещества, для которых такое увеличение в eNOS in vivo можно считать побочным эффектом. Но в свете ряда известных побочных эффектов данного класса веществ неясно, насколько сильно проявляется данный эффект в случае дозы, безопасной с точки зрения токсикологии.

Liao et al. заявляют в WO 99/47153 и WO 00/03746 применение ингибиторов rhoGTPазы и агентов, влияющих на структуру актинового цитоскелета для увеличения eNOS в эндотелиальных клетках и для лечения различных заболеваний, таких например, как удар или легочная гипертензия; не указывая, однако, конкретного пути достижения указанных результатов.

В WO 02/064146, WO 02/064545, WO 02/064565 и WO 02/064546 описаны ацилированные бензоконденсированные циклоалкениламины, которые повышающе регулируют экспрессию eNOS в эндотелиальных клетках и являются полезными фармацевтически активными ингредиентами для лечения различных заболеваний, но существует постоянная потребность в дополнительных энхансерах экспрессии eNOS, обладающих полезными свойствами. Данное изобретение удовлетворяет указанную потребность, предоставляя соединения формулы I и способы их применения.

Некоторые ацилированные циклоалкениламины, конденсированные с имидазольным циклом, которые связывают гистамин Н3 рецепторы и применимы, например, для лечения избыточного веса и ожирения, описаны в WO 01/68652. В JP 08/325234 описаны циклоалкениламины, конденсированные с имидазольным циклом, аминогруппа которых содержит 2-алкокси-4-амино-5-галогенбензоильный заместитель, которые являются агонистами рецепторов 5-НТ-4 и применимы, например, для лечения шизофрении. В EP 1072263 описаны антагонисты ноцицептина, применимые в качествеанальгетиков, которые включают некоторые ациламинозамещенные производные 5,6,7,8-тетрагидрохинолина. N-(2-Амино-5,6,7,8-тетрагидро-4-гидроксихиназолин-6-ил)-3,4-дихлорбензамид описан Koehler et al. в J. Am. Chem. Soc. 80, 5779 (1958).

Данное изобретение относится к ацилированным гетероарилконденсированным циклоалкениламинам формулы I

в любой из их стереоизомерных форм или в виде смеси данных форм в любом соотношении, или его фармацевтически приемлемым солям, где в формуле I:

кольцо A, которое содержит два атома углерода, общие для кольца А и циклоалкенильного кольца в формуле I, представляет собой ароматическое 5-членное или 6-членное кольцо, содержащее 1 или 2 атома азота в качестве гетероатомов в кольце, или ароматическое 5-членное кольцо, содержащее 1 гетероатом в кольце, который является атомом кислорода или атомом серы, или 2 гетероатома в кольце, один из который является атомом азота, а другой представляет собой атом кислорода или серы;

R¹ и R⁴ независимо выбраны из группы, состоящей из Н; незамещенных или по меньшей мере монозамещенных C₁-C₁₀-алкила, C₂-C₁₀-алкенила и C₂-C₁₀-алкинила, заместители которых выбраны из группы, состоящей из F, OH, C₁-C₈-алкокси, C₁-C₈-алкилмеркапто, -CN, COOR⁶, CONR⁷R⁸, и незамещенных или по меньшей мере монозамещенных фенила и гетероарила, где заместители фенильной и гетероарильной групп выбраны из группы, состоящей из галогена, -CN, C₁-C₃-алкил, C₁-C₃-алкокси и CF₃; незамещенных или по меньшей мере монозамещенных фенила и гетероарила, заместители которых выбраны из группы, состоящей из галогена, -CN, C₁-C₃-алкила, C₁-C₃-алкокси и CF₃; COR⁹; CONR¹⁰R¹¹; COOR¹²; CF₃ ; галогена; -CN; NR¹³R¹⁴; OR¹⁵; S(O)_mR¹⁶; SO₂NR¹⁷R¹⁸ и NO₂; но не могут представлять собой галоген, -CN или NO₂, если R¹ или R⁴ связан с атомом азота в кольце;

R² и R³ независимо выбраны из группы, состоящей из Н; галогена; -CN; незамещенного или по меньшей мере монозамещенного C₁-C₁₀-алкила, заместители которого выбраны из группы, состоящей из OH, фенила и гетероарила; OH; C₁-C₁₀-алкокси; фенокси; S(O)_mR¹⁹; CF₃; -CN; NO₂; C₁-C₁₀-алкиламино; ди(C₁-C₁₀-алкил)амино; (C₁-C₆-алкил)-CONH-; незамещенных или по меньшей мере монозамещенных фенил-CONH и фенил-SO₂O- групп, заместители которых выбраны из группы, состоящей из галогена, CN-, метила и метокси; (C₁-C₆-алкил)-SO₂O-; незамещенных или по меньшей мере монозамещенных (C₁-C₆-алкил)-CO-, заместители которых выбирают из группы, состоящей из F, ди(C₁-C₆-алкил)амино, пирролидинила и пиперидинила и фенил-CO группы, фенильная часть которой является незамещенной или по меньшей мере монозамещенной заместителями, выбранными из группы, состоящей из C₁-C₃-алкила, галогена и метокси; но не может быть галогеном, -CN или NO₂, если R² или R³ связаны с атомом азота в кольце;

где, если А представляет собой 6-членное ароматическое кольцо, имеются 2 или 3 из групп R¹, R², R³ и R⁴, связанные с атомами углерода в кольце A, которые не являются общими с циклоалкенильным кольцом, и, если A представляет собой 5-членное ароматическое кольцо, имеются 1, 2 или 3 из групп R¹, R², R³ и R⁴, связанные с атомами углерода в кольце A, которые не являются общими с циклоалкенильным кольцом, а в случае пиррольного, пиразольного или имидазольного кольца связаны с 1 атомом азота в кольце;

R⁵ представляет собой группу Ar или группу Hetar, которые являются незамещенными или содержат один или несколько одинаковых или разных заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена; -CN; NH₂; незамещенного или по меньшей мере монозамещенного C₁-C₁₀-алкила, C₂-C₁₀-алкенила и C₂-C₁₀-алкинила, C₁-C₁₀-алкокси, C₁-C₁₀-алкиламино и ди(C₁-C₁₀-алкил)амино, заместители которых выбраны из группы, состоящей из F, OH, C₁-C₈-алкокси, арилокси, C₁-C₈-алкилмеркапто, NH₂, C₁-C₈-алкиламино и ди(C₁-C₈-алкил)амино; C₃-C₅-алкандиила; фенила; гетероарила; арилзамещенного или гетероарилзамещенного C₁-C₄-алкила; CF₃; NO₂; OH; фенокси; бензилокси; (C₁-C₁₀-алкил)-COO-; S(O)_mR²⁰; SH; фениламино; бензиламино; (C₁-C₁₀-алкил)-CONH-; (C₁-C₁₀-алкил)-CO-N(C₁-C₄-алкил)-; фенил-CONH-; фенил-CO-N(C₁-C₄-алкил)-; гетероарил-CONH-; гетероарил-CO-N(C₁-C₄-алкил)-; (C₁-C₁₀-алкил)-CO-; фенил-CO-; гетероарил-CO-; CF₃CO-; -OCH₂O-; -OCF₂O-; -OCH₂CH₂O-; -CH₂CH₂O-; COOR²¹; CONR²²R²³; C(NH)-NH₂; SO₂NR²⁴R²⁵; R²⁶SO₂NH; R²⁷SO₂N(C₁-C₆-алкил)-; и остатка насыщенного или по меньшей мере мононенасыщенного алифатического моноциклического 5-7-членного гетероцикла, содержащего 1, 2 или 3 гетероатома, выбранных из группы, состоящей из N, O и S, причем данный гетероцикл может быть замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, C₁-C₃-алкила, C₁-C₃-алкокси, OH, оксо и CF₃, где указанный гетероцикл необязательно может быть конденсирован с указанной группой Ar или указанной группой Hetar; где все арильные, гетероарильные, фенильные, гетероарилсодержащие и фенилсодержащие группы, которые необязательно содержатся в указанных заместителях указанных группы Ar или группы Hetar, могут быть замещены одним или более заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогенов, -CN, C₁-C₃-алкила, OH, C₁-C₃-алкокси и CF₃;

R⁶ выбран из группы, состоящей из:

Н; C₁-C₁₀-алкила, который может быть замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из F, C₁-C₈-алкокси и ди(C₁-C₈-алкил)амино; арил(C₁-C₄-алкил)- и гетероарил(C₁-C₄-алкил)-, которые оба могут быть замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, C₁-C₄-алкил, C₁-C₄-алкокси и ди(C₁-C₆-алкил)амино;

R⁷ выбран из группы, состоящей из:

Н; C₁-C₁₀-алкила, который может быть замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из F, C₁-C₈-алкокси и ди(C₁-C₈-алкил)амино и фенила; фенила, инданила и гетероарила; где каждая из ароматических групп может быть незамещенной или может содержать один или несколько заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена, -CN, C₁-C₃-алкила, C₁-C₃-алкокси и CF₃;

R⁸ представляет собой Н или C₁-C₁₀-алкил;

R⁹ выбран из группы, состоящей из:

C₁-C₁₀-алкила, который может быть замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из F, C₁-C₄-алкокси и ди(C₁-C₃-алкил)амино; и незамещенных или по меньшей мере монозамещенных фенила и гетероарила, заместители которых выбраны из группы, состоящей из C₁-C₃-алкила, C₁-C₃-алкокси, галогена, -CN и CF₃;

R¹⁰, независимо от R⁷, определен как R⁷;

R¹¹, независимо от R⁸, определен как R⁸;

R¹², независимо от R⁶, определен как R⁶;

R¹³, выбран из группы, состоящей из:

Н; C₁-C₆-алкила, незамещенных и замещенных фенила, бензила и гетероарила, заместители которых выбраны из группы, состоящей из галогена, -CN, C₁-C₃-алкила, C₁-C₃-алкокси и CF₃, в которых могут быть представлены один или несколько указанных заместителей;

R¹⁴, независимо от R¹³, определен как R¹³;

R¹⁵ выбран из группы, состоящей из:

Н; C₁-C₁₀-алкила; C₁-C₃-алкокси-C₁-C₃-алкила и замещенных и незамещенных бензила, фенила и гетероарила, заместители которых выбраны из группы, состоящей из галогена, -CN, C₁-C₃-алкила, C₁-C₃-алкокси и CF₃, в которых могут быть представлены один или несколько указанных заместителей;

R¹⁶ выбран из группы, состоящей из:

C₁-C₁₀-алкила, который может быть замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из F, OH, C₁-C₈-алкокси, арилокси, C₁-C₈-алкилмеркапто, C₁-C₈-алкиламино и ди(C₁-C₈-алкил)амино; CF₃ и замещенных и незамещенных фенила и гетероарила, заместители которых выбраны из группы, состоящей из галогена, -CN, C₁-C₃-алкила, C₁-C₃-алкокси и CF₃, в которых могут быть представлены один или несколько указанных заместителей;

R¹⁷, независимо от R⁷, определен как R⁷;

R¹⁸, независимо от R⁸, определен как R⁸;

R¹⁹, независимо от R¹⁶, определен как R¹⁶;

R²⁰, независимо от R¹⁶, определен как R¹⁶;

R²¹, независимо от R⁶, определен как R⁶;

R²², независимо от R⁷, определен как R⁷;

R²³, независимо от R⁸, определен как R⁸;

R²⁴, независимо от R⁷, определен как R⁷;

R²⁵, независимо от R⁸, определен как R⁸;

R²⁶, независимо от R¹⁶, определен как R¹⁶;

R²⁷, независимо от R¹⁶, определен как R¹⁶;

гетероарил представляет собой остаток 5-10-членного ароматического, моноциклического или бициклического гетероцикла, содержащего один или несколько гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из N,O и S;

группа Hetar представляет собой остаток 5-10-членного ароматического, моноциклического или бициклического гетероцикла, содержащего один или несколько гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из N,O и S;

арил представляет собой фенил, нафт-1-ил или нафт-2-ил;

группа Ar представляет собой фенил, нафт-1-ил или нафт-2-ил;

m представляет собой 0, 1 или 2;

n представляет собой 1, 2 или 3;

в которых R⁵⁰ выбран из водорода, незамещенного C₁-C₆-алкила, C₁-C₆-алкокси, незамещенного C₁-C₆-алкилтио, галогена, -CN, CF₃, OH, амино, C₁-C₆-алкиламино и ди(C₁-C₆-алкил)амино;

и исключены соединения формул

в которых R⁵¹, R⁵², R⁵³ и R⁵⁴ выбраны из водорода, незамещенного или гидроксизамещенного C₁-C₆-алкила, галогена, амино, C₁-C₆-алкиламино и ди(C₁-C₆-алкил)амино; и R⁵⁵ представляет собой незамещенный или замещенный фенил, тиенил, фурил, пирролил или оксазолил;

и исключено соединение N-(2-амино-5,6,7,8-тетрагидро-4-гидроксихиназолин-6-ил)-3,4-дихлорбензамид.

Если группы или заместители в соединении формулы I, такие, например, как арил, гетероарил, алкил и т.п., могут быть представлены несколько раз, они все независимо друг от друга имеют указанные значения и могут, следовательно, в каждом отдельном случае быть или одинаковыми, или разными. В качестве примера можно упомянуть ди(C₁-C₁₀-алкил)аминогруппу, в которой могут содержаться одинаковые или разные алкильные заместители. Когда группа в соединениях формулы I может быть по меньшей мере монозамещенной или когда она содержит один или несколько заместителей, она может быть замещена, например, одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью заместителями. Когда группа замещена двумя или более заместителями, заместители могут быть одинаковыми или могут отличаться друг от друга.

Алкильные, алкенильные и алкинильные остатки могут быть линейными или разветвленными, ациклическими или циклическими, это также относится и к тем случаям, когда они являются частью других групп, например алкоксигрупп, алкоксикарбонильных групп или замещенных аминогрупп, или когда они являются замещенными.

Примерами алкильных групп являются метил, этил, пропил, бутил, пентил, гексил, гептил, октил, нонил, децил, н-изомеры указанных остатков, изопропил, изобутил, изопентил, втор-бутил, трет-бутил, неопентил, 3,3-диметилбутил. Термин алкилв данной заявке специально включает также циклоалкильные группы, циклоалкилалкильные группы (т.е. алкильные группы, замещенные циклоалкильными), которые содержат по меньшей мере три атома углерода. Примерами таких циклоалкильных остатков являются циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил и циклооктил. Все циклоалкильные группы могут быть замещены одним или несколькими одинаковыми или разными C₁-C₄-алкильными остатками, конкретно метилом. Примерами замещенных циклоалкильных остатков являются 4-метилциклогексил, 4-трет-бутилциклогексил или 2,3-диметилциклопентил. Кроме того, если не указано иное, термин алкил в данной заявке также включает незамещенные алкильные остатки, а также алкильные остатки, которые замещены одним или более, например 1, 2, 3 или 4, одинаковыми или разными остатками, например арильными группами. В замещенных алкильных остатках, например арилалкильных, гидроксиалкильных, таких как гидрокси-(C₁-C₃)-алкил-, или алкоксиалкильных, например C₁-C₄-алкил-О-(C₁-C₃)-алкил-, заместители могут находиться в любом нужном положении.

Примерами алкенильных и алкинильных групп являются винил, 1-пропенил, 2-пропенил (т.е. аллил), 2-бутенил, 2-метил-2-пропенил, 3-метил-2-бутенил, этинил, 2-пропинил (т.e. пропаргил), 2-бутинил или 3-бутинил. Термин алкенил в данной заявке специально включает циклоалкенильные группы и циклоалкенилалкильные группы (т.е. алкильные группы, замещенные циклоалкенильными), которые содержат по меньшей мере три атома углерода. Примерами циклоалкенильных остатков являются циклопентенил, циклогексенил, циклогептенил и циклооктенил. Все циклоалкенильные группы могут быть замещены одним или несколькими одинаковыми или разными C₁-C₄-алкильными остатками, конкретно метилом. Кроме того, если не указано иное, термины алкенили алкинил в данной заявке также включают незамещенные алкенильные и алкинильные остатки, а также алкенильные и алкинильные остатки, которые замещены одним или несколькими, например 1, 2, 3 или 4, одинаковыми или разными остатками, например арильными группами. В замещенных алкенильных и алкинильных остатках, например арилалкенильных, гидроксиалкенильных, таких как гидрокси-(C₂-C₃)-алкенил-, или алкоксиалкенильных, таких как C₁-C₃-алкил-O-(C₂-C₄-алкенил)-, заместители могут находиться в любом нужном положении.

Примерами C₃-C₅-алкандиильных групп являются группы -CH₂CH₂CH₂-, -CH₂-CH(CH₃)-, -CH₂CH₂CH₂CH₂- и -CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂-.

Если не указано иное, вышеупомянутые фенильные остатки, нафтильные и инданильные остатки и гетероциклические остатки (включая гетероарильные остатки) могут быть незамещенными или содержат один или несколько, например 1, 2, 3 или 4, заместителя, указанных в приведенном выше определении, которые могут находиться в любом нужном положении. Если в соединениях формулы I имеются нитрогруппы в качестве заместителей, в предпочтительном варианте осуществления данного изобретения в молекуле соединения I содержится всего не более двух нитрогрупп. В монозамещенных фенильных остатках заместитель может находиться в 2-положении, 3-положении и 4-положении, в дизамещенных фенильных остатках заместители могут находиться в 2,3-положении, 2,4-положении, 2,5-положении, 2,6-положении, 3,4-положении или 3,5-положении. В тризамещенных фенильных остатках заместители могут находиться в 2,3,4-положении, 2,3,5-положении, 2,3,6-пложении, 2,4,5-положении, 2,4,6-положении или 3,4,5-пложении. В тетразамещенных фенильных остатках заместители могут находиться в 2,3,4,5-положении, 2,3,4,6-пложении или 2,3,5,6-положении. Толил (т.е. метилфенил) может быть 2-толилом, 3-толилом или 4-толилом. Нафтил может быть 1-нафтилом или 2-нафтилом. В монозамещенных 1-нафтильных остатках заместитель может находиться в положении 2, положении 3, положении 4, положении 5, положении 6, положении 7 или положении 8, в монозамещенных 2-нафтильных остатках заместитель может находиться в положении 1, положении 3, положении 4, положении 5, положении 6, положении 7 или положении 8. В более высокозамещенных нафтильных остатках, например в 1-нафтильных остатках или 2-нафтильных остатках, которые содержат два или три заместителя, заместители могут находиться в любом нужном положении. Инданильные остатки включают индан-1-ильные остатки и индан-2-ильные остатки, которые могут быть незамещенными или содержат один или несколько указанных заместителей. В случае замещенных инданильных остатков заместитель или заместители могут находиться в любом из возможных положений.

Если не указано иное, гетероарильные остатки и гетероциклические остатки представляют собой предпочтительно производные гетероциклов, содержащие 1, 2, 3 или 4 гетероатома, которые могут быть одинаковыми или разными; более предпочтительно, если они представляют собой производные гетероциклов, содержащие 1, 2 или 3, особенно 1 или 2 гетероатома, которые могут быть одинаковыми или разными. Если не указано иное, гетероциклы могут быть моноциклическими или полициклическими, например моноциклическими, бициклическим и трициклическими. Предпочтительно, если они являются моноциклическими или бициклическими. Число атомов в цикле составляет предпочтительно 5, 6, 8, 9 или 10. Отдельные циклы предпочтительно представляют собой 5-членные, 6-членные или 7-ченные циклы. Примерами моноциклических и бициклических систем, из которых можно получать остатки, встречающиеся в соединениях формулы I, являются пиррол, фуран, тиофен, имидазол, пиразол, 1,2,3-триазол, 1,2,4-триазол, 1,3-диоксол, 1,3-оксазол (т.е. оксазол), 1,2-оксазол (т.е. изоксазол), 1,3-тиазол (т.е. тиазол), 1,2-тиазол (т.е. изотиазол), тетразол, пиридин, пиридазин, пиримидин, пиразин, пиран, тиопиран, 1,4-диоксин, 1,2-оксазин, 1,3-оксазин, 1,4-оксазин, 1,2-тиазин, 1,3-тиазин, 1,4-тиазин, 1,2,3-триазин, 1,2,4-триазин, 1,3,5-триазин, 1,2,4,5-тетразин, азепин, 1,2-диазепин, 1,3-диазепин, 1,4-дазепин, 1,3-оксазепин, 1,3-тиазепин, индол, бензотиофен, бензофуран, бензотиазол, бензоксазол, бензимидазол, бензодиоксол, хинолин, изохинолин, циннолин, хиназолин, хиноксалин, фталазин, тиенотиофены, 1,8-нафтиридин и другие нафтиридины, птеридин или фенотиазин, каждый из них в насыщенной форме (пергидроформе), или в частично ненасыщенной форме (например, в дигидроформе или тетрагидроформе), или в максимально ненасыщенной форме, или ароматической форме при условии, что соответствующие формы известны и стабильны. Термин «арил» и термин «гетероарил», как используются в данной заявке, включают бициклические остатки, в которых оба цикла являются ароматическими, а также бициклические остатки, в которых только один цикл является ароматическим. То же самое относится к термину «группа Ar» и термину «группа Hetar». Подходящие гетероциклы включают, например, насыщенные гетероциклы пирролидин, пиперидин, пиперазин, морфолин и тиоморфолин. Степень насыщенности гетероциклических групп указана в их отдельных определениях. Ненасыщенные гетероциклы могут содержать, например, 1, 2 или 3 двойных связи в циклической системе. Пятичленные кольца и 6-членные кольца могут, в частности, также быть ароматическими.

Остатки, производные указанных гетероциклов, могут быть соединены через любой подходящий атом углерода. Остатки, производные азотсодержащих гетероциклов, включающие атом водорода или заместитель на атоме азота кольце, такие как остатки пиррола, имидазола, пирролидина, морфолина или пиперазина, могут также быть присоединены через атом азота в кольце, особенно если соответствующий гетероциклический остаток присоединен к атому углерода. Например, тиенильный остаток может быть представлен в виде 2-тиенила или 3-тиенила, остаток фурила - в виде 2-фурила или 3-фурила, остаток пиридинила - в виде 2-пиридинила или 4-пиридинила, остаток пиперидинила - в виде 1-пперидинильного остатка (т.е. пиперидино группы), 2-пперидинильного остатка, 3-пиперидинильного остатка или 4-пперидинильного остатка, остаток (тио)морфолинила - в виде 2-(тио)морфолинильного остатка, 3-(тио)морфолинильного остатка или 4-(тио)морфолинильного остатка (т.е. тиоморфолино остатка). Остаток, производный 1,3-тиазола или имидазола, который присоединен через атом углерода, может присоединяться через 2-пложение, 4-положение или 5-положение.

В случае, когда гетероциклическая группа замещена, она может содержать один или несколько, например 1, 2, 3 или 4, заместителя, одинаковых или различных. Заместители в гетероциклах могут находиться в любых нужных положениях, например в 2-тиенильном остатке или 2-фурильном остатке - в 3-пложении, и/или в 4-положении, и/или в 5-положении, в 3-тенильном остатке или 3-фурильном остатке - во 2-положении, и/или в 4-положении, и/или в 5-положении, в 2-пиридинильном остатке - в 3-положении, и/или в 4-положении, и/или в 5-положении, и/или в 6-положении, в 3-пиридинильном остатке - во 2-положении, и/или в 4-положении, и/или в 5-положении, и/или в 6-положении, в 4-пиридинильном остатке - во 2-положении, и/или в 3-положении, и/или в 5-положении, и/или в 6-положении. Подходящие азотсодержащие гетероциклы могут также находиться в виде N-осидов или в виде четвертичных солей, содержащих противоион, который получают из фармацевтически приемлемой кислоты. Пиридиновые группы, например, могут поэтому находиться в виде пиридин-N-оксидов.

Галоген представляет собой фтор, хлор, бром или иод, предпочтительно фтор или хлор.

Данное изобретение включает все стереоизомерные формы соединений формулы I. Асимметрические центры, которые имеются в соединениях формулы I, все независимо друг от друга могут иметь S-конфигурацию или R-конфигурацию. Данное изобретение включает все возможные энантиомеры и диастереомеры и смеси двух или более стереоизомеров, например смеси энантиомеров и/или диастереомеров, во всех соотношениях. Таким образом, соединения по данному изобретению, которые могут существовать в виде энантиомеров, могут находиться в энантиомерно чистом виде (в виде как левовращающего, так и правовращающего антиподов), в виде рацематов и ввиде смесей двух энантиомеров во всех соотношениях.В случае цис/транс-изомерии данное изобретение включает как цис-форму, так и транс-форму, а также смеси данных форм во всех соотношениях. Все эти формы являются объектом данного изобретения. Если требуется, можно осуществить получение индивидуальных изомеров разделением смеси обычными методами, например, хроматографией или кристаллизацией, применением стереохимически чистых исходных веществ для синтеза или стереоселективным синтезом. Производные, необязательно, можно получать до разделения стереоизомеров. Разделение смеси стереоизомеров можно проводить на стадии соединений формулы I, или на стадии промежуточного соединения во время синтеза, или на стадии исходного соединения. Данное изобретение также включает все таутомерные формы соединений формулы I.

В случае соединений формулы I, содержащих одну или несколько кислотных или основных групп, изобретение также включает их соответствующие фармацевтически или токсикологически приемлемые соли, конкретно их фармацевтически применимые соли. Таким образом, соединения формулы I, которые содержат кислотные группы, можно представлять по данным группам и применять по данному изобретению, например, в виде солей щелочных металлов, солей щелочноземельных металлов, или в виде аммониевых солей. Примерами таких солей являются натриевые соли, калиевые соли, кальциевые соли, магниевые соли, или аммониевые соли, или соли органических аминов, таких как, например, этиламин, этаноламин, триэтаноламин или аминокислоты. Соединения формулы I, которые содержат одну или несколько основных групп, т.е. групп, которые могут быть протонированы, можно применять по данному изобретению в виде их аддитивных солей с неорганическими или органическими кислотами. Примеры подходящих кислот включают хлористый водород, бромистый водород, фосфорную кислоту, серную кислоту, азотную кислоту, метансульфоновую кислоту, п-толуолсульфоновую кислоту, нафталиндисульфоновые кислоты, щавелевую кислоту, уксусную кислоту, винную кислоту, молочную кислоту, салициловую кислоту, бензойную кислоту, муравьиную кислоту, пропионовую кислоту, пивалиновую кислоту, диэтилуксусную кислоту, малоновую кислоту, янтарную кислоту, пимелиновую кислоту, фумаровую кислоту, малеиновую кислоту, яблочную кислоту, сульфаминовую кислоту, фенилпропионовую кислоту, глюконовую кислоту, аскорбиновую кислоту, изоникотиновую кислоту, лимонную кислоту, адипиновую кислоту и другие кислоты, известные специалистам в данной области. Если в молекуле соединений формулы I содержатся одновременно кислотные и основные группы, изобретение включает также, кроме вышеуказанных солевых форм, внутренние соли или бетаины (цвиттерионы). Соли соединений формулы I могут быть получены обычными методами, которые известны специалистам в данной области техники, например путем контакта соединения формулы I с органической или неорганической кислотой или основанием в растворителе или разбавителе или обменом аниона или катиона с другими солями. Данное изобретение также включает все соли соединений формулы I, которые из-за низкой физиологической совместимости не подходят для применения непосредственно в фармацевтических средствах, но которые могут быть использованы, например, в качестве промежуточных соединений для химических реакций или для получения фармацевтически приемлемых солей.

Кроме того, данное изобретение также включает все сольваты соединений формулы I, например гидраты и аддукты со спиртами, активные метаболиты соединений формулы I, а также производные и пролекарства соединений формулы I, которые содержат физиологически толерантные и способные расщепляться группы, например сложные эфиры, амиды и соединения, в которых N-H группа, изображенная в формуле I, замещена N-алкильной группой, такой, например, как N-метильная, или N-ацильной группой, такой как N-ацетильная или N-аргининильная группы, включая фармацевтически приемлемые соли, образованные функциональными группами, имеющимися в N-ацильной группе.

В предпочтительных вариантах осуществления данного изобретения один или несколько структурных фрагментов в соединениях формулы I, включая число n, кольцо А, заместители R¹-R⁵ и другие группы, содержащиеся в соединениях формулы I, независимо друг от друга имеют указанные ниже предпочтительные значения, более предпочтительные значения, еще более предпочтительные значения или наиболее предпочтительные значения.

В одном предпочтительном варианте осуществления данного изобретения 5-членное или 6-членное моноциклическое кольцо А, которое содержит два атома углерода, общие с циклоалкенильным кольцом в формуле I, предпочтительно выбрано из указанных ниже колец:

В формулах конкретных колец А, представленных выше и ниже, верхняя связь из двух свободных связей направлена к СН₂ группе в конденсированном циклоалкенильном кольце в формуле I, и нижняя связь из двух свободных связей направлена к (СН₂)_n группе в формуле I.

В еще одном предпочтительном варианте осуществления данного изобретения кольцо А представляет собой ароматическое 6-членное кольцо, содержащее 1 или 2 атома азота, конкретно 1 атом азота, в качестве гетероатомов в кольце. В еще одном предпочтительном варианте осуществления данного изобретения кольцо А представляет собой ароматическое 5-членное кольцо, содержащий атом серы в качестве гетероатома в кольце или атом серы и атом азота в качестве гетероатомов в кольце, конкретно кольцо, содержащее атом серы в качестве гетероатома кольца.

Более предпочтительно, если кольцо А выбрано из колец, представленных ниже:

Еще более предпочтительно, если кольцо А выбрано из колец, представленных ниже:

Наиболее предпочтительно, если кольцо А выбрано из следующих колец:

Таким образом, если в соединениях формулы I содержится одно из двух наиболее предпочтительных колец А, соединения формулы I представляют собой соединения формул Ia или Ib, более конкретно 6,7-дигидро-5H-циклопента[b]пиридины формулы Ic (также именуемые пириндинами), 5,6,7,8-тетрагидрохинолины формулы Id (которые могут также быть определены как 5,6,7,8-тетрагидробензо[b]пиридины), 6,7,8,9-тетрагидро-5H-циклогепта[b]пиридины формулы Ie, 5,6-дигидро-4H-циклопента[b]тиофены формулы If, 4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофены формулы Ig, или 5,6,7,8-тетрагидро-4H-циклогепта[b]тиофены формулы Ih соответственно. В соединениях формул Ia-Ih число n и остатки R²-R⁵ могут иметь любые из общих или предпочтительных, или конкретных значений, указанных выше или далее.

R¹ предпочтительно выбран из группы, состоящей из Н; C₁-C₄-алкила; C₁-C₄-алкокси; CF₃; галогена; -CN; C₁-C₄-алкил-S(O)_m-; и незамещенных и по меньшей мере монозамещенных фенила и гетероарила, заместители которых выбраны из группы, состоящей из галогена, -CN, C₁-C₄-алкила, C₁-C₃-алкокси и CF₃, где гетероарил выбран из группы, состоящей из 5-членных и 6-членных гетероциклов, содержащих один или несколько гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из N, O, и S. Более предпочтительно, если R¹ представляет собой Н, галоген или C₁-C₄-алкил.

R² предпочтительно выбран из группы, состоящей из Н, галогена, -CN и C₁-C₄-алкила, более предпочтительно из группы, состоящей из H, галогена и C₁-C₄-алкила. Еще более предпочтительно, если R² представляет собой Н.

R³ предпочтительно выбран из группы, состоящей из Н, галогена, -CN и C₁-C₄-алкила, более предпочтительно из группы, состоящей из H, галогена и C₁-C₄-алкила. Еще более предпочтительно, если R³ представляет собой Н.

R⁴ предпочтительно выбран из группы, состоящей из Н; C₁-C₄-алкила; C₁-C₄-алкокси; CF₃; галогена; -CN; C₁-C₄-алкил-S(O)_m-; и незамещенных или по меньшей мере монозамещенных фенила и гетероарила, заместители которых выбраны из группы, состоящей из галогена, -CN, C₁-C₃-алкила, C₁-C₃-алкокси и CF₃, где гетероарил выбран из группы, состоящей из 5-членных и 6-членных гетероциклов, содержащих один или несколько гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из N, O, и S. Более предпочтительно, если R⁴ представляет собой Н, галоген или C₁-C₄-алкил.

Конкретно каждый из R¹, R², R³ и R⁴ представляет собой Н. В качестве примера соединений, в которых R¹, R², R³ и R⁴ представляют собой Н, можно упомянуть соединения формул Ii,Ik, Im, In, Io и Ip, в которых R⁵ может иметь любое из общих или предпочтительных, или конкретных значений, указанных выше или далее.

R⁵ предпочтительно представляет собой группу Ar или группу Hetar, каждая из которых является незамещенной или содержит один или несколько одинаковых или разных заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена; -CN; NH₂; незамещенных или по меньшей мере монозамещенных C₁-C₈-алкила, C₂-C₈-алкенила и C₂-C₈-алкинила, C₁-C₈-алкокси, C₁-C₈-алкиламино и ди(C₁-C₈-алкил)амино, заместители которых выбраны из группы, состоящей из F, OH, C₁-C₆-алкокси, фенокси, C₁-C₆-алкилмеркапто, NH₂, C₁-C₆-алкиламино и ди(C₁-C₆-алкил)амино; C₃-C₅-алкандиила; фенила; гетероарила; фенилзамещенного или гетероарилзамещенного C_l-C₂-алкила; CF₃; OH; фенокси; бензилокси; (C₁-C₆-алкил)-COO; S(O)_m-(C₁-C₆)-алкила, которые могут необязательно быть замещены ОН или C₁-C₆-алкокси; S(O)_m-фенила; S(O)_m-гетероарила; SH; фениламино; бензиламино; (C₁-C₆-алкил)-CONH-; (C₁-C₆-алкил)-CON(C₁-C₄-алкил)-; фенил-CONH-; фенил-CON(C₁-C₄-алкил)-; гетероарил-CONH-; гетероарил-CON(C₁-C₄-алкил)-; (C₁-C₆-алкил)-CO-; фенил-CO-; гетероарил-CO-; CF₃-CO-; -OCH₂O-; -OCF₂O-; -OCH₂CH₂О- ;-CH₂CH₂О-; COO(C₁-C₆-алкил); -CONH₂; -CONH(C₁-C₆-алкил); -CON(ди(C₁-C₆-алкил)); C(NH)-NH₂; -SO₂NH₂; -SO₂NH(C₁-C₆-алкил); -SO₂NH(фенил); -SO₂N(ди(C₁-C₆-алкил)); C₁-C₆-алкил-SO₂NH-; (C₁-C₆-алкил)-SO₂N(C₁-C₆-алкил)-; фенил-SO₂NH-; фенил-SO₂N(C₁-C₆-алкил)-; гетероарил-SO₂NH-; гетероарил-SO₂N(C₁-C₆-алкил)-; и остатка насыщенного или по меньшей мере мононенасыщенного алифатического моноциклического 5-7-членного гетероцикла, содержащего 1, 2 или 3 гетероатома, выбранных из группы, состоящей из N, O и S, причем данный гетероцикл может быть замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, C₁-C₃-алкила, C₁-C₃-алкокси, OH, оксо и CF₃, где указанный гетероцикл может необязательно быть конденсирован с указанной группой Ar или указанной группой Hetar; где все гетероарильные, фенильные, гетероарилсодержащие и фенилсодержащие группы, которые необязательно содержатся в указанных заместителях указанных группы Ar или группы Hetar, могут быть замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, -CN, C₁-C₃-алкила, OH, C₁-C₃-алкокси и CF₃.

Более предпочтительно, если R⁵ представляет собой фенил или группу Hetar, каждая из которых является незамещенной или содержит один или несколько одинаковых или разных заместителей, выбранных из группы, состоящей из галогена; -CN; NH₂; незамещенных или по меньшей мере монозамещенных C₁-C₆-алкила, C₂-C₆-алкенила и C₂-C₆-алкинила, C₁-C₆-алкокси, C₁-C₄-алкиламино и ди(C₁-C₄-алкил)амино, заместители которых выбраны из группы, состоящей из F, C₁-C₃-алкокси, фенокси, C₁-C₃-алкилмеркапто и NH₂; C₃-C₅-алкандиила; фенила; гетероарила; фенилзамещенного или гетероарилзамещенного C₁-C₂-алкила; CF₃; OH; (C₁-C₄-алкил)-COO; S(O)_m-(C₁-C₄)-алкила; (C₁-C₄-алкил)-CONH-; (C₁-C₄-алкил)-CON(C₁-C₄-алкил)-; (C₁-C₄-алкил)-CO-; фенил-CO-; гетероарил-CO-; CF₃-CO-; -OCH₂O-;-OCF₂O-; -OCH₂CH₂О-; -CH₂CH₂О-; COO(C₁-C₆-алкил); -CONH₂; -CONH(C₁-C₄-алкил); -CON(ди(C₁-C₄-алкил)); C(NH)-NH₂; -SO₂NH₂; -SO₂NH(C₁-C₄-алкил); -SO₂NH(фенил); -SO₂N(ди(C₁-C₄-алкил)); (C₁-C₄-алкил)-SO₂NH-; (C₁-C₄-алкил)-SO₂N(C₁-C₄-алкил)-; и остатка насыщенного или по меньшей мере мононенасыщенного алифатического моноциклического 5-7-членного гетероцикла, содержащего 1, 2 или 3 гетероатома, выбранных из группы, состоящей из N, O и S, данный гетероцикл может быть замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, C₁-C₃-алкила, C_l-C₃-алкокси, OH, оксо и CF₃, где указанный гетероцикл может необязательно быть конденсирован с указанной группой Ar или указанной группой Hetar; где все гетероарильные, фенильные, гетероарилсодержащие и фенилсодержащие группы, которые необязательно содержатся в указанных заместителях указанной группы Ar или указанной группы Hetar, могут быть замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, -CN, C₁-C₃-алкила, OH, C₁-C₃-алкокси и CF₃;

Еще более предпочтительно, если R⁵ представляет собой фенил или группу Hetar, каждая из которых является незамещенной или содержит один или несколько одинаковых или разных заместителей, выбранных из группы состоящей из F; Cl; Br; C₁-C₃-алкила; C₁-C₃-алкоксиметила; 2-амино-3,3,3-трифторпропила; CF₃; C₃-C₅-алкандиила; фенила; гетероарила; бензила; гетероарилметила-; ОН; C₁-C₃-алкокси, фенокси; трифторметокси; 2,2,2-трифторэтокси; (C₁-C₄-алкил)-СОО; C₁-C₃-алкилмеркапто, фенилмеркапто; C₁-C₃-алкилсульфонил; фенилсульфонил; NH₂; C₁-C₄-алкиламино; ди(C₁-C₄)-алкиламино; (C₁-C₃-алкил)-CONH-; (C₁-C₃-алкил)-SO₂NH-; (C₁-C₃-алкил)-CO-; фенил-CO-; -OCH₂O-; -OCF₂O-; -CH₂CH₂О-; COO(C₁-C₄-алкил); -CONH₂; -CONH(C₁-C₄-алкил); -CON(ди(C₁-C₄-алкил)); -CN; -SO₂NH₂; -SO₂NH(C₁-C₄-алкил); -SO₂N(ди(C₁-C₄-алкил)); пирролидинила; пиперидинила; морфолинила и тиоморфолинила; где все гетероарильные, фенильные, гетероарилсодержащие и фенилсодержащие группы, которые необязательно имеются в указанных заместителях указанных фенильной группы или группы Hetar, могут быть замещены одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, -CN, C₁-C₃-алкила, OH, C₁-C₃-алкокси и CF₃;

Предпочтительнее всего, когда R⁵ выбран из группы, состоящей из 4-фторфенила, 4-хлорфенила, 4-бромфенила, 4-(C₁-C₃-алкокси)фенила, 4-трифторметоксифенила, 2-бром-4-фторфенила, 2-хор-4-фторфенила, 3,4-диметилфенила, 2,4-диметилфенила, 4-хор-2-метилфенил, 2-гидрокси-4-метилфенила, 2-гидрокси-4-этоксифенила, 2-метокси-4-метилфенила, 4-феноксифенила, 3-фтор-4-метилфенила, бензо[1,3]диоксол-5-ила, 2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-ила, 2,3-дигидробензофуран-5-ила, 1-(4-хлорфенил)-5-трифторметил-1Н-пиразол-4-ила, 1-(4-фторфенил)-3,5-диметил-1Н-пиразол-4-ила, 1H-бензотриазол-5-ила, 1H-индол-4-ила, 1H-индол-6-ила, 1-изопропил-2-трифторметил-1H-бензимидазол-5-ила, 1-метил-3-оксо-1,2,3,4-тетрагидрохиноксалин-6-ила, 1-фенил-5-трифторметил-1H-пиразол-4-ила, 2-(2-гидроксипиридин-4-ил)-1Н-бензимидазол-5-ила, 2-(4-цианофенил)-1H-бензимидазол-5-ила, 2,4-диметилоксазол-5-ила, 2,4-диметилпиримидин-5-ила, 2,4-диметилтиазол-5-ила, 2,5-диметил-1H-пиррол-3-ила, 2,5-диметил-1-фенил-1Н-пиррол-3-ила, 2,5-диметил-1-(пиридин-4-илметил)-1Н-пиррол-3-ила, 2,5-диметил-2H-пиразол-3-ила, 2,6-дихлорпиридин-3-ила, 2,6-диметилоксипиридин-3-ила, 2,6-диметилпиридин-3-ила, 2-амино-4,6-диметилпиридин-3-ила, 2-амино-6-хлорпиридин-3-ила, 2-аминопиридин-3-ила, 2-хлор-6-метилпиридин-3-ила, 2-хорпиридин-4-ила, 2-циклопропил-4-метилтиазол-5-ила, 2-диметиламино-4-метилтиазол-5-ила, 2-диметиламинопиридин-4-ила, 2-этил-5-метил-2Н-пиразол-3-ила, 2-гидрокси-6-метилпиридин-3-ила, 2-метил-1Н-бензимидазол-5-ила, 2-метил-3Н-бензимидазол-5-ила, 2-метил-6-трифторметил, 2-метилтиазол-5-ила, 2-(морфолин-4-ил)-пиридин-4-ила, 2-(морфолин-4-ил)-пиридин-5-ила, 2-(пирролидин-1-ил)-пиридин-4-ила, 3,5-диметил-1Н-пиразол-4-ила, 3-амино-5,6-диметилпиразин-2-ила, 3-амино-5-метилпиразин-2-ила, 3-аминопиразин-2-ила, 3-диметиламино-4-метилфенила, 3-диметиламинофенила, 3Н-бензимидазол-5-ила, 1Н-бензимидазол-5-ила, 3-метилсульфониламино-2-метилфенила, 3-метилсульфониламинофенила, 3-метилизоксазол-4-ила, 3-(морфолин-4-ил)фенила, 3-(пиперидин-1-ил)фенила, 3-(пирролидин-1-ил)фенила, 4-(2,2,2-трифторэтокси)фенила, 4,6-диметилпиридин-3-ила, 4-амино-2-этилсульфанилпиримидин-5-ила, 4-амино-2-метилпиримидин-5-ила, 4-хлор-3-метилсульфониламинофенила, 4-хлор-3-сульфамоилфенила, 4-метил-3-метиламинофенила, 4-метилтиазол-5-ила, пиридин-2-ила, 5,6,7,8-тетрагидрохинолин-3-ила, 5-амино-1-фенил-1H-пиразол-4-ила, 5-метилсульфонил-2-метилфенила, 5-метил-1-фенила-1H-пиразол-4-ила, 5-метилизоксазол-3-ила, 5-метилпиридин-3-ила, 5-метилпиразин-2-ила, 6-хлорпиридин-3-ила, 6-цианопиридин-3-ила, 6-диметиламинопиридин-3-ила, 6-этинилпиридин-3-ила, 6-метоксиметилпиридин-3-ила, 6-метоксипиридин-3-ила, 6-метил-2-метиламинопиридин-3-ила, 6-метиламинопиразин-2-ила, 6-метилпиридин-3-ила, 6-(морфолин-4-ил)-пиридин-3-ила, 6-(пирролидин-1-ил)-пиридин-3-ила, имидазо[1,2-a]пиридин-2-ила, 6-тифторметилпиридин-3-ила, пиримидин-4-ила, 4-метилсульфанилфенила, 4-этилсульфанилфенила, 3-метоксикарбонилфенила, 4-метоксикарбонилфенила, 3-эоксикарбонилфенила, 4-этоксикарбонилфенила, 2-бром-4-хлорфенила, 2,3-дихлорфенила, 3-хлор-4-(изопропилсульфонил)тиофен-2-ила, 4-бром-2-хлорфенил, 4-метоксифенил, 4-этоксифенил, 3-метоксифенил, 3-этоксифенил, 2-метилтиофен-3-ила, 3-хлор-4-метилтиофен-2-ила, 5-бромтиофен-2-ила, 5-хлортиофен-2-ила, 5-метилтиофен-2-ила, 4-метилтиофен-2-ила, 3-метилтиофен-2-ила, 5-ацетилтиофен-2-ила, пиридин-3-ила, пиридин-4-ила, 4-трифторметилфенила, 4-этиламинофенила, 4-метиламинофенила, 2-аминофенила, 4-бром-2-фторфенил, 2-хорфенил, 3-хлор-4-метилфенила, 4-хлор-3-метилфенила, 2-хлор-3-метилфенила, 2-метилфенила, 2-ацетокси-4-метилфенила, 2-аетокси-4-этоксифенила, 2-ацетокси-4-метоксифенила, 4-тифторметилсульфанилфенила, нафталин-2-ила, 1,1-диметилиндан-4-ила, 3-изобутириламинофенила, 3-(2,2-диметилпропиониламино)фенила, 2-бромфенила, 2-фторфенила, 3-бом-5-метилтиофен-2-ила, 3-хлор-6-фторбензо[b]тиофен-2-ила и 3,4-дихлорбензо[b]тиофен-2-ила.

Гетероарил предпочтительно представляет собой остаток 5-10-членного ароматического моноциклического или бициклического гетероцикла, содержащего 1, 2 или 3 гетероатома, выбранных из группы, состоящей из N, О и S. Более предпочтительно, если гетероарил выбран из группы, состоящей из фурила, пирролила, тиенила, тиазолила, изотиазолила, оксазолила, изоксазолила, пиразолила, имидазолила, пиридазинила, пиразинила, пиридинила, пиримидинила, бензимидазолила, бензотиазолила, бензокзазолила, хинолинила, изохинолинила, хиноксалинила, хиназолинила, индолила, бензофуранила, бензодиоксолила, бензотиофенила и индазолила.

Группа Hetar предпочтительно представляет собой остаток 5-10-членного ароматического моно- или бициклического гетероцикла, содержащего 1, 2 или 3 гетероатома, выбранных из группы, состоящей из N, О и S. Более предпочтительно, если группа Hetar выбрана из группы, состоящей из фурила, пирролила, тиенила, тиазолила, изотиазолила, оксазолила, изоксазолила, пиразолила, имидазолила, пиридазинила, пиразинила, пиридинила, пиримидинила, бензимидазолила, бензотиазолила, бензокзазолила, хинолинила, изохинолинила, хиноксалинила, хиназолинила, индолила, бензофуранила, бензодиоксолила, бензотиофенила и индазолила.

Арил предпочтительно представляет собой фенил.

m предпочтительно представляет собой 0 или 2.

n предпочтительно представляет собой 0 или 3.

Т.е. в предпочтительном варианте осуществления изобретения соединения формулы I представляют собой ацилированные гетероарилконденсированные циклопентениламины формулы Iq (определяемые также как циклопентаконденсированные производные гетероаренов) или ацилированные гетероарилконденсированные циклогептениламины формулы Ir (определяемые также как циклогептаконденсированные гетероарены). В соединениях формул Iq и Ir кольцо А и остатки R¹-R⁵ могут иметь любые значения из обычных, предпочтительных и конкретных значений, указанных выше или далее.

Предпочтительными соединениями формулы I являются те соединения, в которых одна, несколько или все структурные фрагменты и группы, содержащиеся в нем, имеют предпочтительные значения, более предпочтительные значения, еще более предпочтительные значения и наиболее предпочтительные значения, определенные выше, все комбинации таких предпочтительных значений и т.п. и/или конкретные значения группы, являющиеся объектом данного изобретения. Что касается всех предпочтительных соединений формулы I, данное изобретение также включает все их стереоизомерные формы и смеси стереоизомеров во всех соотношениях и их фармацевтически приемлемые соли.

В качестве примеров конкретных соединений, которые являются объектом данного изобретения во всех своих стереоизомерных формах и в виде их смесей во всех соотношениях и в виде их фармацевтически приемлемых солей, можно указать соединения, перечисленные ниже:

4-фтор-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5H-циклогепта[b]пиридин-8-ил)бензамид,

4-хлор-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5H-циклогепта[b]пиридин-8-ил)бензамид,

2,4-диметил-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5H-циклогепта[b]пиридин-8-ил)бензамид,

2,4-дихлор-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5H-циклогепта[b]пиридин-8-ил)бензамид,

(6,7,8,9-тетрагидро-5H-циклогепта[b]пиридин-8-ил)амид 2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-карбоновой кислоты,

2,6-диметил-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5H-циклогепта[b]пиридин-8-ил)никотинамид,

6-метоксиметил-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5H-циклогепта[b]пиридин-8-ил)никотинамид,

6-метокси-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5H-циклогепта[b]пиридин-8-ил)никотинамид,

(6,7,8,9-тетрагидро-5H-циклогепта[b]пиридин-8-ил)амид 2,5-диметил-1-фенил-1Н-пиррол-3-карбоновой кислоты,

(6,7,8,9-тетрагидро-5H-циклогепта[b]пиридин-8-ил)амид 2-метил-1Н-бензимидазол-5-карбоновой кислоты,

(6,7,8,9-тетрагидро-5H-циклогепта[b]пиридин-8-ил)амид 2,5-диметил-1-(пиридин-4-илметил)-1Н-пиррол-3-карбоновой кислоты,

2,4-дихлор-(6,7-дигидро-5Н-[1]пириндин-6-ил)бензамид,

(6,7-дигидро-5Н-[1]пириндин-6-ил)амид 2,5-диметил-1-фенил-1Н-пиррол-3-карбоновой кислоты

(6,7-дигидро-5Н-[1]пириндин-6-ил)амид 2,5-диметил-1-(пиридин-4-илметил)-1Н-пиррол-3-карбоновой кислоты,

N-(5,6-дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-ил)-4-фторбензамид,

4-хлор-N-(5,6-дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-ил)бензамид,

N-(5,6-дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-ил)-2,4-диметилбензамид,

2,4-дихлор-N-(5,6-дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-ил)бензамид,

(5,6-дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-ил)амид 2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-карбоновой кислоты,

N-(5,6-дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-ил)-2,6-диметилникотинамид,

N-(5,6-дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-ил)-6-метоксиметилникотинамид,

(5,6-дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-ил)амид 2,5-диметил-1-фенил-1Н-пиррол-3-карбоновой кислоты,

(5,6-дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-ил)амид 2-метил-1Н-бензимидазол-5-карбоновой кислоты,

(5,6-дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-ил)амид 2,5-диметил-1-(пиридин-4-илметил)-1Н-пиррол-3-карбоновой кислоты.

Соединение формулы I или его соль могут быть получены, например, способом, который включает ацилирование гетероарилконденсированного циклоалкениламина формулы II с карбоновой кислотой формулы R⁵-COOH или ее производным, указанный способ также является объектом данного изобретения.

Подходящими производными карбоновых кислот формулы R⁵-COOH являются, например, хлорангидриды карбоновых кислот, сложные эфиры, включая С₁-С₄-алкиловые эфиры, такие как сложные метиловые эфиры или этиловые эфиры, необязательно замещенные сложные ариловые эфиры, такие как фениловые эфиры или нитрофениловые эфиры, или активированные сложные эфиры, или ангидриды кислот, или смешанные ангидриды. В соединениях формулы II и карбоновых кислотах формулы R⁵-COOH и их производных кольцо А, число n и группы R¹, R², R³, R⁴ и R⁵ имеют значения, указанные выше для соединений формулы I, или другие функциональные группы могут быть представлены в защищенной форме или в виде группы-предшественника. Например, когда требуется получить соединение формулы I, которое содержит группу карбоновой кислоты или аминогруппу, возможно, что в реакции ацилирования эти группы должны быть в защищенной форме, например в виде сложного эфира, такого как трет-бутиловый эфир или бензиловый эфир (вместо свободной группы карбоновой кислоты), или в виде ацилированной аминогруппы, такой, например, как трет-бутоксикарбониламиногруппа или бензилоксикарбониламиногруппа (вместо свободной аминогруппы); и только после ацилирования и снятия защиты получают нужные конечные группы. Приемлемые способы введения защитных групп, которые можно применять в синтезе соединений формулы I, известны специалистам в данной области. Примером группы-предшественника функциональной группы является нитрогруппа, которую можно превратить в аминогруппу восстановлением, например каталитическим гидрированием после реакции ацилирования.

Реакции ацилирования можно проводить в обычных для них условиях, известных специалистам в данной области. Во многих случаях реакцию хорошо проводить в инертном растворителе или разбавителе, например в углеводороде или хлорированном углеводороде, таком как толуол, 1,2-дихлорэтан или метиленхлорид, простом эфире, таком как тетрагидрофуран, диоксан или 1,2-диметоксиэтан, в спирте, таком как метанол, этанол или изопропанол, амиде, таком как N,N-диметилформамид или N-метилпирролидон, ацетонитриле, воде или в смеси двух или нескольких растворителей или разбавителей. В зависимости от конкретного случая может быть выгодно проводить реакцию в присутствии основания, например неорганического основания, такого как гидроксид натрия, карбонат натрия или гидрокарбонат натрия, или органического основания, такого как триэтиламин, этилдиизопропиламин, N-этилморфолин или пиридин, и/или в присутствии катализатора ацилирования, такого как 4-диметиламинопиридин.

Если карбоновую кислоту формулы R²-COOH используют для ацилирования соединения формулы II, часто полезно активировать кислоту или ее соль конденсирующим агентом или агентом, способствующим реакции сочетания, например, таким, который подобен агентам, обычно используемым в химии пептидов для образования амидных связей. Примерами таких агентов являются карбодиимиды, такие как дициклогексилкарбодиимид или диизопропилкарбодиимид, TOTU, т.е. тетрафторборат O-((циано(этоксикарбонил)метилен)амино)-N,N,N',N'-тетраметилурония, HATU, т.е. гексафторфосфат О-(7-азабензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония, эфиры хлормуравьиной кислоты, подобные этилхлорформиату или изобутилхлорформиату, тозилхлорид, ангидрид пропилфосфоновой кислоты или карбонилдиимидазол. В зависимости от конкретного случая температура реакции может варьироваться в широком интервале. Например, когда в реакции ацилирования используют карбоновую кислоту в присутствии агента сочетания или хлорангидрид карбоновой кислоты, реакцию часто проводят при комнатной температуре.

После ацилирования, кроме вышеуказанных реакций снятия защиты с защищенных групп или превращения группы-предшественника в нужную конечную группу, можно провести необязательные реакции функционализации или модификации полученных соединений, и подходящие функциональные группы можно, например, этерифицировать, амидировать, переэтерифицировать, гидролизовать, алкилировать, сульфонилировать, восстановить, окислить, превратить в соль или ввести в другие реакции.

Исходные соединения для получения соединений формулы I коммерчески доступны или могут быть получены по методикам, описанным в литературе или аналогичным им. Пути получения соединений формулы II включают, например, превращение кетона формулы III в оксим формулы IV и превращение последнего в соединение формулы II и превращение карбоновой кислоты формулы V в азид карбоновой кислоты формулы VI и превращение последнего в соединение формулы II. Указанные превращения можно проводить в стандартных условиях, известных специалисту в данной области. Например, кетон формулы III можно превратить в оксим формулы IV обработкой органическим нитритом, таким как изоамилнитрит, в присутствии соляной кислоты, а восстановление группы оксима, приводящее к аминогруппе, и восстановление C=O группы в бензильном положении, которое дает CH₂ группу, можно проводить одновременно каталитическим гидрированием в присутствии, например, палладия. Карбоновую кислоту формулы V можно превратить в азид карбоновой кислоты формулы VI реакцией с дифенилфосфорилазидом, например, и последний претерпевает перегруппировку Курциуса.

Исходные соединения формул III и IV можно получить, как описано, например, в JP 2-255664, EP 853083; US 6258829; US 6278027; CA 2151443; GB 2280438; Schenone et al., J. Heterocycl. Chem. 19 (1982) 1355; Bianchi et al., J. Chem. Res., Synop., (1981) 6; Muraro et al., Bull. Soc. Chim. Fr., Pt. 2, (1973) 335; Muraro et al., C. R. Acad. Sci., Ser. C, 273 (1971) 1362; MacDowell et al., J. Org. Chem.Chem. 32 (1967) 1226; Ravina et al., J. Med. Chem. 42 (1999) 2774; Nayyar et al., J. Org. Chem. 62 (1997) 982; Binder et al., Monatsh. Chem. 129 (1998) 887; Westerwelle et al., Chem. Ber. 124 (1991) 571; Huang et al., Synth. Commun. 28 (1998) 1197; Reimann et al., Pharmazie 50 (1995) 589; Caprathe et al., J. Med. Chem. 34 (1991) 2736; Hoffman et al., J. Org. Chem. 49 (1984) 193; Schroeder et al., Eur. J. Med. Chem.-Chim. Ther. 14 (1979) 309; Ruangsiyanand et al., Chem. Ber. 103 (1970) 2403; Dammertz et al., Arch. Pharm. 310 (1977) 172; Hicks et al., J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1, (1984) 2297; Jones et al., J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1, (1973) 968; US 5753662 or WO 94/04531, или способами, аналогичными способам, описанным в указанных ссылках.

Все реакции для синтеза соединений формулы I, как таковые, хорошо известны специалистам, и их можно проводить в стандартных условиях по методикам, описанным в литературе (или по аналогичным им), например, в Houben-Weyl, Methoden der Organischen Chemie(Methods of Organic Chemistry), Thieme-Verlag, Stuttgart, or Organic Reactions, JohnWiley & Sons, New York. Как указано выше, для того, чтобы не допустить протекания побочных реакций во время синтеза соединений формулы I на любой стадии, в зависимости от конкретного случая, может быть необходимо или выгодно временно блокировать функциональные группы введением защитных групп, а на более поздней стадии синтеза снять защиту; или вводить функциональные группы в виде групп-предшественников, которые дают целевые функциональные группы на более поздней стадии реакции. Такие подходы к синтезу, защитные группы и группы-предшественники, которые подходят для конкретных отдельных случаев, известны специалистам в данной области. Если требуется, соединения формулы I можно очищать обычными методами очистки, например перекристаллизацией или хроматографией.

Соединения формулы I представляют собой полезные фармацевтически активные соединения, которые повышающе регулируют экспрессию эндотелиальной NO-синтазы, и могут применяться в качестве лекарственных средств для лечения различных заболеваний. В контексте данного изобретения лечение понимают как собственно лечение симптомов заболеваний, включающее облегчение и излечение, так и предотвращение и профилактику симптомов заболеваний, например предотвращение появления симптомов астмы или профилактику инфаркта миокарда или предотвращение повторного инфаркта миокарда у соответствующих больных. Заболевания или симптомы заболеваний могут быть острыми или хроническими.

Заболевания, которые можно лечить соединениями формулы I, включают, например, сердечно-сосудистые заболевания, такие как стабильная и нестабильная стенокардия, коронарная болезнь, стенокардия Принцметала (спазм), острый коронарный синдром, сердечная недостаточность, инфаркт миокарда, удар, тромбоз, окклюзия периферической артерии (PAOD), эндотелиальная дисфункция, атеросклероз, рестеноз, поражение эндотелия после PTCA, гипертензия, в том числе артериальная первичная гипертензия, легочная гипертензия и артериальная вторичная гипертензия (реноваскулярная гипертензия, хронический гломерулонефрит), эректильная дисфункция и желудочковая аритмия. Кроме того, соединения формулы I снижают риск сердечно-сосудистых заболеваний у женщин в постклимактерическом периоде или у женщин, принимающих контрацептивы. Соединения формулы I можно, кроме того, использовать для лечения (т.е. терапии и профилактики) диабета и осложнений диабета (нефропатии, ретинопатии), ангиогенеза, бронхиальной астмы, хронической почечной недостаточности, цирроза печени, остеопороза, ограниченной способности запоминать или ограниченной способности к обучению. Предпочтительными показаниями являются стабильная стенокардия, коронарная болезнь, гипертензия, эндотелиальная дисфункция, атеросклероз и осложнения диабета.

Соединения формулы I можно применять в комбинации с другими фармацевтически активными соединениями, предпочтительно с соединениями, которые способны усиливать действие соединений формулы I. Примеры таких других соединений включают статины, ингибиторы ACE, антагонисты AT1, ингибиторы аргининазы, ингибиторы PDE V, кальциевые антагонисты, альфа-блокаторы, бета-блокаторы, тиамазол (метимазол) и аналогичные соединения, аргинин, тетрагидробиоптерин, витамины, в особенности витамин С и витамин B6, ниацин.

Соединения формулы I и их фармацевтически приемлемые соли, необязательно, в сочетании с другими фармацевтически активными соединениями можно вводить животным, предпочтительно млекопитающим, и конкретно человеку, в качестве фармацевтических средств, как таковых, в смесях друг с другом или в виде фармацевтических препаратов. Дополнительными объектами данного изобретения поэтому являются также соединения формулы I и их фармацевтически приемлемые соли для применения в качестве фармацевтических средств, их применение в качестве стимуляторов транскрипции или повышающих регуляторов эндотелиальной NO-синтазы, например, при состояниях, когда требуется увеличенная экспрессия указанного фермента, или повышенный уровень NO, или нормализация пониженного уровня NO у больного, и конкретно их применение при лечении, т.е. терапии и профилактике, вышеуказанных синдромов, а также их применение для получения лекарственных средств для этих целей, где данный последний объект изобретения специально также включает применение тех соединений формулы I и/или их фармацевтически приемлемых солей, которые исключены оговоркой из соединений, определенных выше, являющихся объектом данного изобретения, в качестве соединений, как таковых.

Кроме того, объектом данного изобретения также являются фармацевтические препараты (или фармацевтические композиции), которые содержат эффективную дозу по меньшей мере одного соединения формулы I и/или его фармацевтически приемлемой соли и фармацевтически приемлемый носитель, т.е. одно или несколько фармацевтически приемлемых веществ-носителей или наполнителей и/или добавки или эксципиенты.

Фармацевтические средства по данному изобретению можно вводить перорально, например в виде пилюль, таблеток, глазированных таблеток, таблеток с сахарным покрытием, гранул, твердых и мягких желатиновых капсул, водных, спиртовых или масляных растворов, сиропов, эмульсий или суспензий, или ректально, например, в виде суппозиториев. Введение можно также осуществлять парентерально, например подкожно, внутримышечно или внутривенно, в виде растворов для инъекции или вливания. Другими подходящими формами введения являются, например, введение через кожу или наружно, например, в виде мазей, настоев, аэрозольных трансдермальных терапевтических систем или введение ингаляцией в виде назальных аэрозолей или аэрозольных смесей или, например, в виде микрокапсул, имплантатов или палочек. Предпочтительная форма введения зависит, наряду с другими факторами, от заболевания, которое подвергается лечению, и от тяжести заболевания.

Количество соединения формулы I и/или его фармацевтически приемлемых солей в фармацевтических препаратах обычно составляет от около 0,2 до около 800 мг, предпочтительно от около 0,5 до около 500 мг, конкретно от около 1 до около 200 мг на дозу, но в зависимости от типа фармацевтического препарата количество также может быть больше. Фармацевтические препараты обычно содержат от около 0,5 до около 90% (мас.) соединений формулы I и/или их фармацевтически приемлемых солей. Изготовление фармацевтических препаратов можно осуществлять способом, по сути известным. Для этой цели из одного или нескольких соединений формулы I и/или их фармацевтически приемлемых солей вместе с одним или несколькими твердыми или жидкими фармацевтическими носителями и/или добавками (или вспомогательными веществами) и, если требуется, в сочетании с другими фармацевтически активными соединениями, обладающими лечебным или профилактическим действием, изготавливают приемлемую форму для введения, которую затем можно применять в качестве фармацевтического препарата для человека или в ветеринарии.

Для производства пилюль, таблеток, таблеток с сахарным покрытием и твердых желатиновых капсул можно использовать, например, лактозу, крахмал, например маисовый крахмал или производные крахмала, тальк, стеариновую кислоту или ее соли и т.п. Мягкие желатиновые капсулы и суппозитории могут содержать, например, жиры, воски, полужидкие и жидкие полиолы, натуральные или отвержденные масла и т.п. Подходящими веществами-носителями или растворителями для получения растворов, например растворов для инъекций, или эмульсий, или сиропов, являются, например, вода, физиологический раствор хлорида натрия, спирты, такие как этанол, глицерин, полиолы, сахароза, инвертный сахар, глюкоза, маннит, растительные масла и т.п. Возможно также лиофилизовать соединения формулы I и их фармацевтически приемлемые соли и использовать полученные лиофилизаты, например, для получения препаратов для инъекций или вливания. Подходящими носителями для микрокапсул, имплантатов или палочек являются, например, сополимеры гликолевой кислоты и молочной кислоты.

Кроме соединения или соединений по данному изобретению и веществ-носителей, фармацевтические препараты могут также содержать добавки, такие как, например, наполнители, дезинтегранты, связующие, лубриканты, увлажнители, стабилизаторы, эмульгаторы, диспергирующие агенты, консерванты, подсластители, вещества, придающие цвет и вкус, ароматизаторы, загустители, разбавители, буферные вещества, растворители, солюбилизаторы, агенты для достижения эффекта «депо», соли для изменения осмотического давления, вещества для покрытия или антиоксиданты.

Дозировка для введения соединения формулы I и/или его фармацевтически приемлемой соли зависит от конкретного случая, и для получения оптимального эффекта дозу следует, как обычно, адаптировать к конкретным условиям. Следовательно, доза зависит от природы и тяжести заболевания, которое подлежит лечению, а также от пола, возраста, массы и индивидуальной реакции человека или животного, получающего лечение, от эффективности и продолжительности действия используемых соединений, от того, применяют ли соединение для лечения острого или хронического заболевания или для профилактики, вводят ли другие активные соединения, кроме соединений формулы I. Вообще дневная доза, составляющая от около 0,01 до около 100 мг/кг, предпочтительно от около 0,1 до около 10 мг/кг, конкретно от около 0,3 до около 5 мг/кг (в каждом случае мг на кг массы тела), подходит для введения взрослому человеку массой приблизительно 75 кг для получения ожидаемых результатов. Дневную дозу можно вводить однократно или, особенно при введении увеличенных количеств, ее можно разделить на несколько частей, например на две, три или четыре отдельные дозы. В некоторых случаях в зависимости от индивидуальной реакции указанную дневную дозу может быть необходимо увеличить или уменьшить.

Соединения формулы I можно также использовать для других целей, чем цели, указанные выше. Неограничивающие примеры включают цели диагностики, такие как применение для исследования образцов клеток и тканей, применение в качестве биохимических инструментов и применение в качестве промежуточных соединений для получения дополнительных соединений, например фармацевтически активных соединений.

Примеры

Условия ВЭЖХ

ВЭЖХ - способ a

Колонка: Daicel Chiralpak AD, 250 x 4, 6 мм, 10 мк; элюент: ацетонитрил/изопропанол (120/5) + 0,1% диэтиламин; скорость потока: 1,0 мл/мин.

ВЭЖХ - способ b

Колонка: Merck Purospher, 55 x 2 мм, 5 мк; элюент A: вода + 0,05% трифторуксусная кислота, элюент B: ацетонитрил; градиент: от 95% элюент A/5% элюент B до 5% элюент A /95% элюент B через 4 мин, 5% элюент A/95% элюент B в течение 1,5 мин; скорость потока: 0,5 мл/мин.

ВЭЖХ - способ c

Колонка: YMC J'Sphere ODS Н80, 33 x 2 мм, 3 мк; элюент A: вода + 0,05% трифторуксусная кислота, элюент B: ацетонитрил; градиент: от 90% элюент A/10% элюент B до 5% элюент A/95% элюент B через 2,5 мин, 5% элюент A/95% элюент B в течение 0,8 мин; скорость потока: 1,0 мл/мин.

ВЭЖХ - способ d

Колонка: Daicel Chiralpak AD, 250 x 4, 6 мм, 10 мк; элюент: н-гептан/изопропанол (10/1); скорость потока: 1,0 мл/мин.

ВЭЖХ - способ e

Колонка: Merck Purospher, 55 x 2 мм, 3 мк; элюент A: вода + 0,1% муравьиная кислота, элюент B: ацетонитрил + 0,08% муравьиная кислота; градиент: от 95% элюент A/5% элюент B до 5% элюент A/95% элюент B через 5 мин, 5% элюент A/95% элюент B в течение 2 мин; скорость потока: 0,45 мл/мин.

Времена удерживания (RT) для ВЭЖХ даны в минутах.

Общие способы ацилирования гетероарилконденсированных циклоалкениламинов

Общий способ ацилирования A: Соответствующий амин (2,5 ммоль) смешивают с 550 мг триэтиламина и 5 мл диоксана или тетрагидрофурана и прибавляют 2,5 ммоль хлорангидрида соответствующей карбоновой кислоты. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч и затем выливают в насыщенный раствор гидрокарбоната натрия. Смесь экстрагируют этилацетатом и органический раствор сушат и концентрируют. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (RP 18; ацетонитрил/вода + трифторуксусная кислота) или флэш-хроматографией на силикагеле (метиленхлорид или метиленхлорид/метанол).

Общий способ ацилирования В: К 0,4 ммоль соответствующей карбоновой кислоты, растворенной в 5 мл тетрагидрофурана, прибавляют 144 мг (0,44 ммоль) тетрафторбората O-((циано(этоксикарбонил)метилен)амино)-N,N,N',N'-тетраметилурония (TOTU) в 1 мл диметилформамида и 114 мг (0,88 ммоль) этилдиизопропиламина. После перемешивания при комнатной температуре в течение 30 мин прибавляют 0,37 ммоль соответствующего амина и смесь перемешивают в течение 12 ч. Реакционную смесь выливают в насыщенный раствор гидрокарбоната натрия, экстрагируют этилацетатом и органический раствор сушат и концентрируют. Остаток очищают препаративной ВЭЖХ (RP 18; ацетонитрил/вода + трифторуксусная кислота) или флэш-хроматографией на силикагеле (метиленхлорид или метиленхлорид/метанол).

Общий способ ацилирования С: Соответствующий амин (0,4 ммоль) и 75 мкл (0,44 ммоль) этилдиизопропиламина растворяют в 1 мл диметилформамида и раствор охлаждают до 0°C. Затем прибавляют раствор 54 мг (0,44 ммоль) 4-диметиламинопиридина в 0,5 мл диметилформамида, 0,44 ммоль соответствующей карбоновой кислоты и раствор 59 мг (0,44 ммоль) 1-гидроксибензотриазола в 0,5 мл диметилформамида и смесь перемешивают при 0°C в течение 20 мин. Затем прибавляют раствор 68 мг (0,44 ммоль) N-(3-диметиламинопропил)-N'-этилкарбодиимида в 0,5 мл диметилформамида и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 12 ч. Реакционную смесь фильтруют и фильтр два раза промывают 10 мл этилацетата. Раствор промывают 20 мл 5% раствора гидрокарбоната натрия и 20 мл 5 % раствора хлорида натрия и отделяют органическую фазу, сушат над Chromabond XTR и упаривают досуха. Если необходимо, продукт очищают препаративной ВЭЖХ (RP 18, ацетонитрил/вода + 0,01% трифторуксусная кислота).

Пример 1

N-(6,7-Дигидро-5H-[1]пириндин-6-ил)-2,4-диметилбензамид

(энантиомер 1)

a) 7-Бензилиден-6,7-дигидро-5H-[1]пириндин

6,7-Дигидро-5H-[1]пириндин (15 г, 0,125 моль), 20,1 г (0,19 моль) свежеперегнанного бензальдегида и 24,5 г (0,24 моль) уксусного ангидрида нагревают и кипятят с обратным холодильником в течение 24 ч. Реакционную смесь упаривают, оставшееся масло растворяют в метиленхлориде, раствор экстрагируют 1 н. раствором NaOH и органическую фазу сушат и упаривают. Остаток перегоняют при пониженном давлении и получают 19,3 г (75%) указанного в заголовке соединения.

Температура кипения 150°C (0,013 мбар). Температура плавления 72°С.

b) 5,6-Дигидро-[1]пириндин-7-он

Соединение, полученное на стадии а) (19,3 г, 0,09 моль), растворяют в 250 мл сухого метанола, охлаждают до 35°C и озонируют в течение 3 ч. Прибавляют 10,56 г (0,17 моль) диметилсульфида и реакционную смесь оставляют на ночь при комнатной температуре. Упаривание и последующая перегонка оставшегося масла при пониженном давлении дают 6,6 г указанного в заголовке соединения.

Температура кипения 150°C (0,003 мбар).

c) 6-Оксим 5H-[1]пириндин-6,7-диона

Соединение, полученное на стадии b) (6,6 г, 49,6 ммоль), и 6,97 г (59,5 ммоль) изоамилнитрита растворяют в 150 мл метанола, нагревают до 45°C и обрабатывают по каплям концентрированной соляной кислотой (8 мл). После перемешивания при 45°C в течение 3 ч смесь охлаждают до 0°С и выпавший в осадок продукт собирают при отсасывании. Выход 7,3 г (91%).

DC: Rf = 0,2 (силикагель, метиленхлорид/метанол (95/5)).

d) N-(6,7-Дигидро-5H-[1] пириндин-6-ил)ацетамид

Соединение, полученное на стадии с) (18 г (0,11 моль)), растворяют в 50 мл уксусной кислоты и 500 мл уксусного ангидрида и гидрируют в течение 20 ч при давлении 2 бар над 5 г палладия на сульфате бария. Реакционную смесь фильтруют и упаривают. Остаток растворяют в 1000 мл этанола, обрабатывают 10,8 мл перхлорной кислоты и гидрируют над 5 г палладия на угле (10%) при 50°С и давлении 3,5 бар в течение 20 ч. Полученную смесь упаривают, остаток помещают в разбавленный раствор NaOH и экстрагируют этилацетатом. Упаривание объединенных органических фаз и последующая хроматография остатка дает рацемический N-(6,7-дигидро-5H-[1]пириндин-6-ил)ацетамид.

DC: Rf = 0,28 (силикагель, метиленхлорид/метанол (9/1)).

Рацемический ацетамид разделяют на энантиомеры хроматографией на хиральной фазе (Chiralpak AD; элюент: ацетонитрил/изопропанол (120/5) + 0,1 % диэтиламина). Выход энантиомера 1, N-(6,7-дигидро-5H-[1]пириндин-6-ил)ацетамида, составляет 1,89 г, выход энантиомера 2, N-(6,7-дигидро-5H-[1]пириндин-6-ил)ацетамида, составляет 1,53 г.

Энантиомер 1

ВЭЖХ: RT = 6,40 мин (способ a).

Энантиомер 2

ВЭЖХ: RT = 8,16 мин (способ a).

e) 6,7-Дигидро-5H-[1]пириндин-6-иламин (энантиомер 1 и энантиомер 2)

Разделенные изомеры N-(6,7-дигидро-5H-[1]пириндин-6-ил)ацетамида гидролизуют нагреванием до 150°С с 20 мл 6 н. HCl в запаянном сосуде в течение 4 ч.

После упаривания, обработки избытком 1 н. NaOH раствора, экстракции этилацетатом, сушки и упаривания экстрактов получают два энантиомерных 6,7-дигидро-5H-[1]пириндин-6-иламина с выходом 0,7 г и 0,8 г соответственно.

Энантиомер 1

MC: m/e = 135 (M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 0,13 (способ c).

Энантиомер 2

MC: m/e = 135 (M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 0,13 (способ c).

f) N-(6,7-Дигидро-5H-[1]пириндин-6-ил)-2,4-диметилбензамид (энантиомер 1)

Указанное в заголовке соединение получают из хирального дигидро-5H-[1]пириндин-6-иламина, полученного на стадии е), по общему способу ацилирования А.

MC: m/e = 267 (M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 1,12 мин (способ c).

Пример 2

N-(6,7-Дигидро-5H-[1]пириндин-6-ил)-2,4-диметилбензамид (энантиомер 2)

Указанное в заголовке соединение получают из хирального 6,7-дигидро-5H-[1]пириндин-6-иламина (Пример 1, стадия e) по общему способу ацилирования А.

MC: m/e = 267 (M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 1,12 мин (способ c).

Пример 3

N-(6,7-Дигидро-5H-[1]пириндин-6-ил)-4-фторбензамид (энантиомер 1)

Указанное в заголовке соединение получают по общему способу ацилирования А из рацемического 6,7-дигидро-5H-[1]пириндин-6-иламина, который получен из рацемического N-(6,7-дигидро-5H-[1]пириндин-6-ил)ацетамида (пример 1, стадия d) гидролизом, аналогично описанному в примере 1 (стадия е), и разделением рацемического N-(6,7-дигидро-5H-[1]пириндин-6-ил)-4-фторбензамида препаративной хроматографией на хиральной фазе (Chiralpak AD; элюент: гептан/изопропанол (10/1)).

MC: m/e = 257(M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 15,66 мин (способ d).

Пример 4

N-(6,7-Дигидро-5H-[1]пириндин-6-ил)-4-фторбензамид (энантиомер 2)

Указанное в заголовке соединение получают, как описано в примере 3, разделением N-(6,7дигидро-5H-[1]пириндин-6-ил)-4-фторбензамида.

MC: m/e = 257 (M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 14,96 мин (способ d)

Пример 5

N-(6,7-Дигидро-5H-[1]пириндин-6-ил)-2,6-диметилникотинамид (энантиомер 1)

Указанное в заголовке соединение получают из хирального 6,7-дигидро-5H-[1]пириндин-6-иламина (пример 1, стадия e) по общему способу ацилирования А.

MC: m/e = 268(M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 0,15 мин (способ c).

Пример 6

N-(6,7-Дигидро-5H-[1]пириндин-6-ил)-6-метоксиникотинамид (энантиомер 1)

Указанное в заголовке соединение получают из хирального 6,7-дигидро-5H-[1]пириндин-6-иламина (пример 1, стадия e) по общему способу ацилирования А.

MC: m/e = 270(M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 0,43 мин (способ c).

Пример 7

(6,7-дигидро-5H-[1]пириндин-6-ил)амид 2-метил-3H-бензимидазол-5-карбоновой кислоты (энантиомер 1)

Указанное в заголовке соединение получают из хирального 6,7-дигидро-5H-(1]пириндин-6-иламина (пример 1, стадия e) по общему способу ацилирования А.

MC: m/e = 293 (M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 0,17 мин (способ c).

Пример 8

N-(6,7-Дигидро-5H-[1]пириндин-6-ил)-6-метоксиметилникотинамид (энантиомер 1)

Указанное в заголовке соединение получают из хирального 6,7-дигидро-5H-[1]пириндин-6-иламина (пример 1, стадия e) по общему способу ацилирования В.

MC: m/e = 284 (M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 1,77 мин (способ b).

Пример 9

Соль трифторуксусной кислоты (6,7-дигидро-5H-[1]пириндин-6-ил)амида 2,2-дифторбензо[1,3]диоксол-5-карбоновой кислоты (энантиомер 1)

Указанное в заголовке соединение получают из хирального 6,7-дигидро-5H-[1]пириндин-6-иламина (пример 1, стадия e) по общему способу ацилирования В.

MC: m/e= 319 (M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 1,60 мин (способ c).

Пример 10

Соль трифторуксусной кислоты 4-хлор-N-(6,7-дигидро-5H-[1]пириндин-6-ил)бензамида (энантиомер 1)

Указанное в заголовке соединение получают из хирального 6,7-дигидро-5H-[1]пириндин-6-иламина (пример 1, стадия e) по общему способу ацилирования А.

MC: m/e = 273 (M+H)⁺. DC: Rf = 0,29 (силикагель, метиленхлорид/метанол(95/5)).

Пример 11

2,4-Диметил-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5H-циклогепта[b]пиридин-8-ил)бензамид

a) 9-Бензилиден-6,7,8,9-тетрагидро-5H-циклогепта[b]пиридин

Указанное в заголовке соединение получают из 6,7,8,9-тетрагидро-5H-циклогепта[b]пиридина по методике, аналогичной описанной в примере 1 (стадия a). Сырое вещество очищают хроматографией на силикагеле, используя метиленхлорид в качестве элюента.

MC: m/e = 236 (M+H)⁺. DC: Rf = 0,47 (силикагель, н-гптан/этилацетат (3/2)).

b) 5,6,7,8-Тетрагидро-5H-циклогепта[b]пиридин-9-он

Указанное в заголовке соединение получают из соединения, синтезированного на стадии а), по методике, аналогичной описанной в примере 1 (стадия b). Сырое вещество очищают хроматографией на силикагеле, используя метиленхлорид/метанол (98/2) в качестве элюента.

MC: m/e = 162 (M+H)⁺. DC: Rf = 0,72 (силикагель, метиленхлорид/метанол (98/2)).

c) 8-Оксим 6,7-дигидро-5H-циклогепта[b]пиридин-8,9-диона

Соединение, полученное на стадии b) (6,7 г, 41,6 ммоль), растворяют в 300 мл диэтилового эфира и обрабатывают 10 мл насыщенного раствора хлористого водорода в диэтиловом эфире. К образовавшейся взвеси прибавляют 5,38 г (45,8 ммоль) изоамилнитрита в 500 мл тетрагидрофурана и еще раз 10 мл насыщенного раствора хлористого водорода в диэтиловом эфире. Смесь кипятят с обратным холодильником в течение 3 ч, охлаждают на ледяной бане и выпавший в осадок продукт выделяют отсасыванием. Выход 7,9 г (100%).

MC: m/e = 191 (M+H)⁺. Rf = 0,20 (силикагель, метиленхлорид/метанол(98/2)).

d) 6,7,8,9-Тетрагидро-5H-циклогепта[b]пиридин-8-иламин

Указанное в заголовке соединение получают из соединения, полученного на стадии с), по методике, аналогичной описанной в примере 1 (стадии d и е). Сырое вещество очищают хроматографией на силикагеле, используя метиленхлорид/метанол (98/2) в качестве элюента.

MC: m/e = 163 (M+H)⁺. Rf = 0,09 (силикагель, метиленхлорид/метанол(7/3)).

e) 2,4-Диметил-N-(6,7,8,9-тетрагидро-5H-циклогепта[b]пиридин-8-ил)бензамид

Указанное в заголовке соединение получают из соединения, полученного на стадии d), общим способом ацилирования A.

MC: m/e = 295(M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 3,68 мин (способ b).

Пример 12

(5,6-Дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-ил)амид 3-амино-5-метилпиразин-2-карбоновой кислоты

a) Гидрохлорид 5,6-дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-иламина

5,6-Дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-карбоновую кислоту (US-A-5753662) (2,289 г, 13,61 ммоль) растворяют в 25 мл ацетонитрила, прибавляют 4,120 г (14,97 ммоль) дифенилфосфорилазида и 1,515 г (14,97 ммоль) триэтиламина и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2,5 ч. Затем прибавляют 11,51 мл (168,4 ммоль) аллилового спирта и реакционную смесь нагревают при 50°С в течение ночи. Растворитель удаляют упариванием, остаток помещают в этилацетат и экстрагируют 10% раствором гидрокарбоната натрия. Органическую фазу отделяют, сушат и упаривают досуха. Остаток помещают в 200 мл метиленхлорида и прибавляют к смеси 2,60 мл (16,32 ммоль) триэтилсилана, 320 мкл (2,312 ммоль) триэтиламина и 153 мг ацетата палладия. После перемешивания при комнатной температуре в течение 3 ч растворитель удаляют упариванием, остаток помещают в этилацетат и экстрагируют 10% раствором гидрокарбоната натрия. Органическую фазу отделяют и экстрагируют разбавленной соляной кислотой. Объединенные экстракты сушат вымораживанием и получают 1,44 г указанного в заголовке соединения, которое без дополнительной очистки используют на стадии ацилирования.

b) (5,6-Дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-ил)амид 3-амино-5-метилпиразин-2-карбоновой кислоты

Указанное в заголовке соединение получают из гидрохлорида 5,6-дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-иламина, полученного на стадии a), общим способом ацилирования C.

MC: m/e = 275 (M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 3,62 мин (способ e).

Соединения в излагаемых ниже примерах 13-31 получают из гидрохлорида 5,6-дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-иламина (пример 12, стадия а), общим способом ацилирования C.

Пример 13

Соль трифторуксусной кислоты N-(5,6-дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-ил)-2,6-диметилникотинамида

MC: m/e = 273 (M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 1,80 мин (способ e).

Пример 14

N-(5,6-Дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-ил)-6-метоксиникотинамид

MC: m/e = 275 (M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 3,30 мин (способ e).

Пример 15

Соль трифторуксусной кислоты N-(5,6-дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-ил)амида 2-метил-3H-бензимидазол-5-карбоновой кислоты

MC: m/e = 298(M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 1,93 мин (способ e).

Пример 16

(5,6-дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-ил)амид 5-метил-1-фенил-1Н-пиразол-4-карбоновой кислоты

MC: m/e = 324 (M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 3,67 мин (способ e).

Пример 17

(5,6-дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-ил)амид 1-фенил-5-трифторметил-1Н-пиразол-4-карбоновой кислоты

MC: m/e = 378(M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 4,02 мин (способ e).

Пример 18

Соль трифторуксусной кислоты N-(5,6-дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-ил)амида 2,5-диметил-1-пиридин-4-илметил-1Н-пиррол-3-карбоновой кислоты

MC: m/e = 352 (M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 2,37 мин (способ e).

Пример 19

(5,6-дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-ил)амид 2,4-диметилтиазол-5-карбоновой кислоты

MC: m/e = 279 (M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 3,12 мин (способ e).

Пример 20

(5,6-дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-ил)амид 1,3-диметил-1Н-пиразол-4-карбоновой кислоты

MC: m/e = 262 (M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 2,79 мин (способ e).

Пример 21

Соль трифторуксусной кислоты 2-амино-N-(5,6-дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-ил)никотинамида

MC: m/e = 260 (M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 1,85 мин (способ e).

Пример 22

Соль трифторуксусной кислоты N-(5,6-дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-ил)-6-метилникотинамида

MC:m/e = 259 (M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 2,17 мин (способ e).

Пример 23

2-Хлор-N-(5,6-дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-ил)-6-метилникотинамид

MC: m/e = 293 (M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 3,20 мин (способ e).

Пример 24

Соль трифторуксусной кислоты N-(5,6-дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-ил)-6-метоксиметилникотинамида

MC: m/e = 289 (M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 2,84 мин (способ e).

Пример 25

(5,6-Дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-ил)амид 3-аминопиразин-2-карбоновой кислоты

MC: m/e = 261 (M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 3,42 мин (способ e).

Пример 26

2,3-Дихлор-N-(5,6-дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-ил)бензамид

MC: m/e= 312 (M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 3,90 мин (способ e).

Пример 27

N-(5,6-Дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-ил)-2,4-диметилбензамид

MC: m/e = 272 (M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 3,87 мин (способ e).

Пример 28

N-(5,6-Дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-ил)-2,4-дифторбензамид

MC: m/e = 280 (M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 3,79 мин (способ e).

Пример 29

N-(5,6-Дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-ил)-3-метилсульфониламинобензамид

MC: m/e = 337 (M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 3,12 мин (способ e).

Пример 30

Соль трифторуксусной кислоты N-(5,6-дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-ил)-6-(морфолин-4-ил)никотинамида

MC: m/e = 330 (M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 2,73 мин (способ e).

Пример 31

N-(5,6-дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-5-ил)-3-(морфолин-4-ил)бензамид

MC: m/e = 329 (M+H)⁺. ВЭЖХ: RT = 3,43 мин (способ e).

Определение активации транскрипции eNOS

Активацию транскрипции eNOS определяют, как подробно описано у Li et al., "Activation of protein kinase C alpha and/or epsilon enhances transcription of the human endothelial nitric oxide synthase gene", Mol. Pharmacol. 53 (1998) 630.

В нескольких словах, фрагмент 5' (длиной 3,5 т.п.о.) стартового кодона гена eNOS клонируют, секвенируют и клонируют в экспрессионные плазмиды люциферазы светлячков, чтобы контролировать активацию промотора eNOS активностью репортерного гена. Для испытания соединений используют линию эндотелиальных клеток человека, стабильно трансфицируемую и экспрессирующую данную конструкцию промотор-репортер. Клетки инкубируют с соединениями в течение 18 ч.

Все соединения растворяют в стерильном диметилсульфоксиде (ДМСО). В полной среде допускается конечная концентрация 0,5% DMSO. В указанных клетках измеряют индукцию экспрессии репортерного гена с помощью стандартной системы анализа лициферазы (Promega, Cat. No E150) в соответствии с инструкциями производителя. Индукцию люциферазы в клетках, инкубированных с исследуемыми соединениями, сравнивают с клетками, инкубированными только с растворителем. Отношение обеих активностей (отношение транскрипция/индукция, TIR) изображают как функцию от концентрации соединения. Обычно значения TIR при низких концентрациях начинаются с 1, указывая на отсутствие действия соединений, и увеличивается до максимального значения TIR, TIR(max), которое указывает на увеличение транскрипции eNOS. Значения EC₅₀ отношений индукция-транскрипция как функцию концентрации соединения определяют графически.

Воздействие соединений на транскрипцию eNOS подтверждают вторым анализом, основанным на детектировании eNOS белка. Первичные эндотелиальные клетки пупочной вены человека (HUVEC) выделяют и культивируют по стандартным методикам. Сливающиеся клетки инкубируют с соединениями в течение 18 ч и действие соединений на экспрессию eNOS белка определяют количественно по методике «вестерн-блоттинг». После инкубации с соединениями HUVEC лизируют в ледяном лизисном буфере, содержащем 10 ммоль трис-HCl (pH 8,0), 1% SDS и ингибиторы протеазы. Лизат подвергают стандартной денатурации электрофорезом в полиакриламидном геле и осуществляют блоттинг на нитроцеллюлозных мембранах. Используя специфические первичные моноклональные антитела (Transduction Laboratories, UK) и щелочную фосфатазу, меченную вторичными антителами (Jackson Labs), визуализируют характерную полосу eNOS белка и определяют количественно методом, базирующимся на детектировании хемифлуоресценции.

Результаты показаны в таблице, представленной ниже

Соединение примера №EC₅₀ (мкМ)10,07921,131443,453,361272383090,93100,80110,0641211130,62142,4153,1160,20170,35183,31920209,8214,8221,6230,80241252518261,527<0,1280,76292,33011313,3

Действие соединений данного изобретения также можно исследовать на нижеуказанных моделях животных (эксперименты на животных проводят в соответствии с законом Германии о защите животных и нормами по использованию подопытных животных, как указано в инструкции по уходу и использованию лабораторных животных Национальных институтов здравоохранения США).

Животные и обработка (Опыты A-C)

Используют ApoE-дефицитных и eNOS-дефицитных мышей (C57BL/6J фенотип, Jackson Laboratory, Bar Harbor, Me). Возраст всех животных составляет 10-12 недель, а масса - 22-28 г. За три дня до хирургической операции мышей разделяют на 4 группы (контроль ApoE, n = 10-12; ApoE с тестируемыми соединениями, n = 10-12; контроль eNOS, n = 10-12; eNOS с тестируемыми соединениями, n = 10-12), животные получают или стандартный рацион грызунов (содержащий 4% жиров и 0,001% холестерина, далее таких животных называют группой плацебо), или стандартный рацион грызунов плюс испытываемое соединение (10 или 30 мг/кг/в день перорально (p.o.)).

A. Антигипертензивное действие на мышей с «нокаут по АроЕ»

Кровяное давление у мышей, находящихся в сознании, определяют с помощью компьютеризованной системы «tail-cuff» (Visitech Systems, Apex, Nc). После обработки испытываемыми соединениями ApoE-дефицитных и eNOS-дефицитных мышей кровяное давление сравнивают с результатами, полученными при лечении плацебо.

B. Ингибирование образования неоинтимы и атерогенеза (манжета бедренной артерии)

После 3 дней обработки ApoE-дефицитных мышей соответствующим соединением (10 мг/кг/в день, введенным в пищу) животных анестизируют внутрибрюшинной инъекцией фенобарбитала (60 мг/кг), затем внутримышечно вводят ксилазин (2 мг/кг) и налагают манжету вокруг бедренной артерии, как описано в работе Moroi et al. (J. Clin.Invest. 101 (1998) 1225). Коротко: вскрывают левую бедренную артерию, вокруг артерии помещают негерметичную полиэтиленовую манжету (2 мм), сделанную из трубки PE-50 (внутренний диаметр 0,56 мм, внешний диаметр 0,965 мм, Becton Dickinson, Mountain View, Ca), и прикрепляют к месту двумя 7-0 шовными нитями. Правую бедренную артерию изолируют от окружающих тканей, но манжету не налагают. Обработку соответствующим соединением продолжают в течение 14 дней после данной операции. Затем животных умерщвляют. Аорту используют для определения экспрессий eNOS сосудов количественным методом «вестерн-блоттинг». Обе бедренные артерии удаляют, фиксируют в формалине и помещают в парафин. Нарезают 20 поперечных срезов (10 мкМ) из части левой бедренной артерии с манжетой и из соответствующего сегмента правой бедренной артерии. Срезы затем окрашивают обычным методом гематоксилином и эозином. Морфометрические анализы проводят с помощью компьютерной программы анализа изображения (LeicaQWin, Leica Imaging Systems, Cambridge, GB). Для каждого среза определяют площадь просвета, неоинтиму и медиа (средний слой). С этой целью неоинтиму определяют как область между просветом и внутренней эластичной оболочкой, медиа определяют как область между внутренней и внешней эластичной оболочкой. Отношение площади неоинтимы и площади медиа обозначается как неоинтима/медиа отношение. Результаты, полученные в группе мышей, которых обрабатывали тестируемым соединением, сравнивают с результатами, полученными в группе плацебо.

C. Профилактика образования атеросклеротических бляшек при длительной обработке

ApoE-дефицитных мышей обрабатывают в течение 16 недель соответствующим соединением, вводимым с пищей, и в конечном счете мышей умерщвляют. Из каждой мыши удаляют аорты, фиксируют их в формалине и заключают в парафин. Образование бляшек оценивают по образованию повреждений липидов в аортах (от дуги аорты до диафрагмы) и проводят анализ с помощью окрашивания масляным красным O. Для количественного определения действия соответствующего соединения на экспрессию eNOS в сосудах в данном эксперименте используют бедренные артерии. Результаты, полученные в группе мышей, которым вводили соединения, сравнивают с результатами в группе плацебо.

D. Улучшение коронарных функций у больных ApoE-дефицитных мышей

В экспериментах используют старых мышей-самцов дикого типа C57BL/6J (Charles River Wiga GmbH, Sulzfeld) и ApoE-дефицитных мышей (C57BL/6J фенотип, Jackson Laboratory, Bar Harbor, Me) 6-месячного возраста и массой 28-36. Мышей разделяют на 3 группы (C57BL/6, n = 8; контрольная группа ApoE-дефицитных мышей, n=8; группа ApoE-дефицитных мышей, которым вводят соответствующее соединение, n = 8), в течение 8 недель животные получают или обычный рацион грызунов (содержащий 4% жиров и 0,001% холестерина), или стандартный рацион грызунов плюс испытываемое соединение (30 мг/кг/в день перорально). Мышей анестезируют пентабарбитоном натрия (100 мг/кг внутрибрюшинно), сердца быстро иссекают и помещают в ледяной буфер для перфузии. Аорту канюлируют и соединяют с аппаратурой для перфузии (Hugo Sachs Electronics, Freiburg, Germany), которую немедленно запускают при постоянном давлении перфузии 60 мм рт.ст. Сердца перфузируют ретроградным способом, модифицированным бикарбонатным буфером Кребса, уравновешенным 95% О₂ и 5% CO₂ и поддерживаемым при температуре 37,5°C.

Небольшую трубку со скошенным краем (ПЭ 50) пропускают через пульмональную вену в левый желудочек и проталкивают через стенку желудочка, закрепляют в верхушке желобковым концом и присоединяют к кончику микроманометра (Millar 1.4 French). Левое предсердие канюлируют через ту же пульмональную вену и сердце переключают в рабочий режим с постоянным давлением преднагрузки 10 мм рт.ст. и давлением постнагрузки 60 мм рт.ст. Отток из аорты и приток в предсердие непрерывно измеряют с помощью ультразвукового зонда (HSE/Transonic Systems Inc.). Коронарный поток рассчитывают как разницу между потоком в предсердие и оттоком из аорты. Все гемодинамические данные получают в цифровой форме со скоростью отбора 1000 Гц и регистрируют на ПК с помощью специальной программы (HEM, Notocord).

Сердцам дают возможность стабилизироваться в течение 30 мин. Все функциональные гемодинамические данные измеряют во время стационарного состояния и во время нагрузки давлением и объемной нагрузки. Кривые для функции левого желудочка строят, варьируя давление преднагрузки. Для получения кривых преднагрузки постнагрузку устанавливают 60 мм рт.ст. и регулируют преднагрузку шагами по 5 мм рт.ст. в интервале от 5 до 25 мм рт.ст. Сердцам дают возможность стабилизироваться до исходного состояния между нагрузкой давлением и объемной нагрузкой.

Настоящее изобретение относится к ацилированным гетероарилконденсированным циклоалкениламинам формулы I

в любой из их стереоизомерных форм или в виде их смеси в любом соотношении, или их фармацевтически приемлемым солям, где в формуле I: кольцо А представляет собой ароматическое 6-членное кольцо, содержащее 1 атом азота, или ароматическое 5-членное кольцо, содержащее 1 атом серы; один или два из R¹, R², R³ и R⁴ независимо выбирают из группы, включающей водород, галоген и С₁-С₄алкил, а другие R¹, R², R³ и R⁴ представляют собой водород; R⁵ представляет собой группу Ar или группу Hetar. Эти соединения повышающе регулируют экспрессию фермента эндотелиальной NO-синтезы и могут применяться при состояниях, требующих повышенной экспрессии указанного фермента, или повышенного уровня NO, или нормализации пониженного уровня NO. Описаны также фармацевтическая композиция на основе соединений I и применение последних. 5 н. и 5 з.п. ф-лы.

1. Соединение формулы I

в любой из его стереоизомерных форм или в виде их смеси в любом соотношении, или его фармацевтически приемлемая соль, где в формуле I:

кольцо А представляет собой ароматическое 6-членное кольцо, содержащее 1 атом азота, или ароматическое 5-членное кольцо, содержащее 1 атом серы;

один или два из R¹, R², R³ и R⁴ независимо выбирают из группы, включающей водород, галоген и С₁-С₄алкил, а другие R¹, R², R³ и R⁴ представляют собой водород;

R⁵ представляет собой группу Ar или группу Hetar, каждая из которых является незамещенной или содержит один или несколько одинаковых или разных заместителей, выбранных из группы состоящей из галогена; NH₂; С₁-С₁₀-алкила, который является незамещенным или замещен С₁-С₁₀-алкокси или пиридинилом; C₁-С₁₀-алкокси; фенила; CF₃; R²⁶SO₂NH-, где R²⁶ представляет собой С₁-С₁₀-алкил; остатка насыщенного алифатического моноциклического 5-6-членного гетероцикла, содержащего 1 или 2 гетероатома, выбранных из группы, состоящей из N и О, причем данный гетероцикл может быть замещен галогеном, группа Ar представляет собой фенил, группа Hetar представляет собой 5-6-членный ароматический моноциклический гетероцикл, содержащий один или два гетероатома, выбранных из азота и серы, или 9-членный ароматический бициклический гетероцикл, содержащий один или два гетероатома, выбранные из азота и кислорода;

n представляет собой 1, 2 или 3;

при условии, что исключены соединения формул:

в которых R⁵¹, R⁵², R⁵³ и R⁵⁴ выбраны из водорода, незамещенного С₁-С₄-алкила, галогена, и R⁵⁵ представляет собой незамещенный или замещенный фенил, тиенил, пирролил.

в любой из его стереоизомерных форм или в виде их смеси в любом соотношении, и/или его фармацевтически приемлемой соли, где в формуле I:

кольцо А представляет собой ароматическое 6-членное кольцо, содержащее 1 атом азота, или ароматическое 5-членное кольцо, содержащее 1 атом серы;

один или два из R¹, R², R³ и R⁴ независимо выбирают из группы, включающей водород, галоген и С₁-С₄-алкил, а другие R¹, R², R³ и R⁴ представляют собой водород;

R⁵ представляет собой группу Ar или группу Hetar, каждая из которых является незамещенной или содержит один или несколько одинаковых или разных заместителей, выбранных из группы состоящей из галогена; NH₂; С₁-С₁₀-алкила, который является незамещенным или замещен С₁-С₁₀-алкокси пиридинилом; С₁-С₁₀-алкокси; фенила; CF₃ R²⁶SO₂NH-, где R²⁶ представляет собой С₁-С₁₀-алкил; остатка насыщенного алифатического моноциклического 5-6-членного гетероцикла, содержащего 1 или 2 гетероатома, выбранных из группы, состоящей из N и О, причем данный гетероцикл может быть замещен галогеном, группа Ar представляет собой фенил, группа Hetar представляет собой 5-6-членный ароматический моноциклический гетероцикл, содержащий один или два гетероатома, выбранных из азота и серы, или 9-членный ароматический бициклический гетероцикл, содержащий один или два гетероатома, выбранные из азота и кислорода;

n представляет собой 1, 2 или 3;

для изготовления лекарственного средства для стимуляции экспрессии эндотелиальной NO-синтазы.