ПРЕПАРАТИВНЫЕ ФОРМЫ, СОДЕРЖАЩИЕ НЕПОЛЯРНЫЕ ФОТОСЕНСИБИЛИЗАТОРЫ, ДЛЯ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ Российский патент 2009 года по МПК A61K9/127 A61P35/00 

Предыдущий уровень техники в данной области

1. Область изобретения

Изобретение относится к приготовлению липосомальных препаративных форм, содержащих темопорфин или другие неполярные фотосенсибилизаторы, и к их использованию в терапии, в частности, к использованию для внутривенной инъекции.

2. Раскрытие информации, имеющейся в данной области

Липосомы, являющиеся искусственными пузырьками, состоящими из концентрических липидных бислоев, отделенных водными компартментами, были всесторонне исследованы в качестве носителей для доставки лекарственных средств. Благодаря их структуре, химическому составу и размеру коллоидных частиц, причем все данные параметры можно регулировать способами приготовления, липосомы обладают некоторыми свойствами, которые могут быть по-разному использованы. Наиболее важными свойствами являются размер коллоидных частиц, т.е. довольно однородный гранулометрический состав в области от 20 нм до 10 мкм, и отдельные характеристики мембран и поверхности.

Липосомы используют в качестве носителей для лекарственных средств и антигенов, поскольку они могут выполнить некоторые разные задачи (Storm & Crommelin, Pharmaceutical Science & Technology Today, 1, 19-31, 1998). Лекарственные средства, заключенные в липосому, являются недоступными метаболизирующим ферментам. Наоборот, компоненты организма (такие как эритроциты или ткани в участке инъекции) прямо не подвергаются действию полной дозы лекарственного средства. Продолжительность действия лекарственного средства может быть увеличена благодаря липосомам, поскольку лекарственное средство медленнее высвобождается в организм. Липосомы, обладающие направленным потенциалом, который означает возможность выбора цели, изменяют распределение лекарственного средства в организме. Клетки используют механизм эндоцитоза или фагоцитоза для перемещения липосом в цитозоль. Кроме того, липосомы могут защищать лекарственное средство от деградации (например, метаболической деградации). Несмотря на достигнутые в этом направлении успехи, липосомы имеют ограничения. Липосомы не только доставляют лекарственные средства к патологической ткани, но также быстро проникают в печень, селезенку, почки и ретикулоэндотелиальные системы и «пропускают» лекарственные средства в систему кровообращения (Harris & Chess, Nature, March 2003, 2, 214-221).

Пегилирование является альтернативным способом, позволяющим преодолеть указанные трудности. Во-первых, пегилирование позволяет сохранить уровни лекарственного средства на протяжении терапевтического эффекта в течение более продолжительных периодов времени и делает возможным приготовление лекарственного средства как длительно циркулирующего фрагмента, который постепенно деградирует на более мелкие, более активные и/или легко выводимые фрагменты. Во-вторых, оно способствует медленному накоплению микрочастиц и больших макромолекул, содержащих длительно циркулирующее лекарственное средство, в патологических зонах с измененной сосудистой сетью или экспрессией рецептора и улучшению или усилению доставки лекарственного средства в указанные зоны. В-третьих, оно может способствовать достижению лучшего эффекта таргетирования для таких направленных лекарственных средств и носителей лекарственных средств, которые, как полагают, достигают патологических зон с уменьшенным кровотоком или с низкой концентрацией антигена-мишени. Благоприятное действие пегилирования обычно выражается в повышенной стабильности (температура, рН, растворитель и т.д.), в значительной степени уменьшенной иммуногенности и антигенности, устойчивости к протеазам, сохранении каталитической активности и улучшении растворимости, наряду с другими характеристиками, и повышенной стабильности продукта в жидкости и сниженной агрегации, вызванной перемешиванием.

Мембраны липосом, содержащие совместимые с бислоями виды, такие как поли(этиленгликоль)-связанные липиды (ПЕГ-липид) или ганглиозиды, используют для приготовления стелс-липосом (Papahadjopoulos et al., PNAS, 88, 11460-4, 1991). Стелс-липосомы имеют относительно продолжительный полупериод существования в системе кровообращения и изменяют биораспределение in vivo. Исследователь Vaage с соавторами (Int. J. of Cancer 51, 942-8, 1992) приготовили стелс-липосомы, содержащие доксорубицин, и использовали их для лечения свежее имплантированных и хорошо установившихся, растущих первичных карцином мыши и торможения развития спонтанных метастазов из расположенных в молочной железе опухолевых имплантатов. Они сделали заключение о том, что продолжительная циркуляция стелс-липосом, содержащих композицию доксорубицина, объясняет их превосходную терапевтическую эффективность.

Присутствие МПЕГ-производных (пегилированных) липидов в бислоях мембраны стерически стабилизированных липосом способствует созданию эффективного стерического барьера для взаимодействий с белками плазмы и рецепторами клеточной поверхности, которые ответственны за быструю внутрисосудистую дестабилизацию/разрыв и очищение посредством РЭС, наблюдаемые после внутривенного введения обычных липосом. В результате, пегилированные липосомы имеют продолжительный период полувыведения из системы циркуляции, и фармакокинетика любого заключенного в капсулу реагента изменяется таким образом, что она соответствует фармакокинетике липосомального носителя скорее, чем фармакокинетике включенного лекарственного средства (Stewart et al., J. Clin. Oncol. 16, 683-691, 1998). Поскольку пегилированные липосомы локализуются в опухоли посредством механизма экстравазации в опухоль через кровеносные сосуды (Northfelt et al., J. Clin. Oncol. 16, 2445-2451, 1998; Muggia et al., J. Clin. Oncol. 15, 987-993, 1997), продолжительная циркуляция, вероятно, способствует аккумуляции липосом в опухоли путем увеличения общего числа прохождений, осуществляемых пегилированными липосомами через сосудистую сеть опухоли.

Фотодинамическая терапия (PDT) является одним из наиболее многообещающих новых способов для использования в медицинских целях и известна как общепризнанное лечение, направленное на деструкцию опухолей ("Pharmaceutical and medical applications of porphyrin-type macrocycles", T.D. Mody, J. Porphyrins Phthalocyanines, 4, 362-367, 2000). Другим важным применением PDT является лечение инфекционных заболеваний, вызванных патогенными микроорганизмами, включающими кожные, зубные, гнойные, респираторные, желудочно-кишечные, половые и другие инфекции.

Постоянная проблема, возникающая при лечении инфекционных заболеваний, заключается в отсутствии специфичности у реагентов, используемых для лечения такого заболевания, что приводит к приобретению больным новых заболеваний в ходе терапии.

Использование PDT для лечения различных типов заболевания ограничивается из-за собственных характеристик фотосенсибилизаторов. Указанные характеристики включают высокую стоимость, длительное удерживание в организме хозяина, существенную кожную фототоксичность, фоновую токсичность, низкую растворимость в физиологических растворах (которые снижают их пригодность для внутрисосудистого введения, поскольку они могут вызывать тромбоэмболии) и низкий таргетирующий эффект. Указанные неблагоприятные свойства вынуждают вводить очень высокие дозы фотосенсибилизатора, которые значительно повышают вероятность накопления фотосенсибилизатора в неповрежденных тканях и связанный с этим риск воздействия на неповрежденные участки.

Одним из предполагаемых подходов к повышению специфичности фотосенсибилизаторов и эффективности PDT является конъюгирование фотосенсибилизатора с вектором-лигандом, который специфическим образом связывается с рецепторами на поверхности клетки-мишени. Ряд природных и синтетических молекул, узнаваемых клетками-мишенями, может быть использован в качестве таких векторов. В настоящее время такой подход используют в конструировании нового поколения фотосенсибилизаторов для лечения опухолей ("Porphyrin-based photosensitizers for use in photodynamic therapy" E.D.Sternberg, D.Dolphin, C.Brueckner, Tetrahedron, 54, 4151-4202, 1998).

Другим подходом повышения избирательности таргетирующих фотосенсибилизаторов по отношению к опухолевам клеткам является использование липосом, например, трансферрин-конъюгированных липосом (Derycke & De Witte, Int. J. Oncology 20, 181-187, 2002). Ввиду того, что неконъюгированные липосомы часто легко распознаются и удаляются посредством ретикулоэндотелиальной системы, используются пегилированные липосомы (Woodle & Lasic, Sterically stabilized liposomes, Biochim. Biophys. Acta 1113, 171-199, 1992; Dass et al., Enhanced anticancer therapy mediated by specialized liposomes. J. Pharm. Pharmacol. 49, 972-975, 1997).

Ввиду того, что применение фотодинамической терапии в лечении рака и других заболеваний быстро увеличивается, существует большая потребность в новых композициях фотосенсибилизаторов. Такие новые препаративные формы фотосенсибилизаторов должны быть более стабильными, легко получаемыми и с которыми легко обращаться. Кроме того, более гидрофобные неполярные фотосенсибилизаторы должны обладать способностью таргетировать ткань эффективным и избирательным путем.

Цели и краткое изложение изобретения

Целью настоящего изобретения является получение улучшенной препаративной формы фотосенсибилизатора для использования в фотодинамической терапии (PDT).

Другой целью настоящего изобретения является включение неполярных фотосенсибилизаторов в липосомальную мембрану, тем самым, позволяя неполярным и полярным веществам перемещаться с помощью одного и того же носителя.

Другой целью настоящего изобретения является сохранение структуры и размера липосомальных конструкций с включенным неполярным фотосенсибилизатором в течение лиофилизирования путем добавления моносахаридов или многоатомных спиртов в качестве криозащитных средств.

Другой целью настоящего изобретения является получение композиции фотосенсибилизатора с улучшенными фармакокинетическими свойствами.

Еще другой целью настоящего изобретения является улучшение транспортировки неполярных фотосенсибилизаторов через клеточную мембрану и, таким образом, повышение эффективности PDT.

Настоящее изобретение включает в себя фармацевтическую липосомальную препаративную форму для фотодинамической терапии, содержащую неполярный порфириновый фотосенсибилизатор и один или более фосфолипидов, которые проявляют устойчивость при хранении без необходимости лиофилизирования. Липосомальная препаративная форма обеспечивает терапевтически эффективные количества фотосенсибилизатора для внутривенного введения. Фосфолипиды могут быть модифицированы пегилированием, т.е. они содержат полиэтиленгликоль в качестве составной части фосфолипидов. Полученные липосомы содержат неполярный фотосенсибилизатор в мембране и используются для совместного направленного действия неполярного фотосенсибилизатора и второго полярного вещества. В случае, когда препаративная форма включает моносахариды или многоатомные спирты, она может быть эффективно подвергнута лиофилизированию, способствующему сохранению размера липосомальных носителей и содержания терапевтически эффективного количества фотосенсибилизирующего средства. Изобретение также относится к липосомальной препаративной форме, образованной при воссоздании с водным носителем. Лиофилизированная препаративная форма при воссоздании с подходящим водным носителем образует липосомы, которые также используют для внутривенного введения.

Вышеуказанные и другие цели, признаки и преимущества настоящего изобретения станут очевидными из следующего описания в сочетании с сопровождающими фигурами.

Краткое описание фигур

На фиг.1 представлена кривая гель-фильтрации липосомального mTHPC. Как липидные компоненты, так и mTHPC проявляют одинаковое распределение по всем собранным фракциям.

На фиг.2 представлены данные измерения индуцированной светом флуоресценции (LIF) Colo 26 опухолей с интактной кожей у мышей Swiss nu/nu, 0,5 мг/кг, при внутривенном введении mTHPC, продукта А и В, демонстрирующие накопление в опухоли как функция времени после инъекции.

На фиг.3 представлены данные эффекта PDT через 6 час после внутривенной инъекции продукта А, В и mTHPC. Мышей инъецировали внутрибрюшинно (i.p.) (0,25 мл) красителем голубым Эванса (1%) немедленно после обработки PDT и умерщвляли через 24 час.

Подробное описание предпочтительных аспектов

Фармацевтическая липосомальная препаративная форма для фотодинамической терапии, включающая в себя неполярный порфириновый фотосенсибилизатор и один или более фосфолипидов, которые проявляют устойчивость при хранении без необходимости лиофилизирования, описана ниже. Липосомальная препаративная форма содержит терапевтически эффективные количества фотосенсибилизатора для внутривенного введения. Фосфолипиды могут быть модифицированы посредством пегилирования, т.е. они содержат полиэтиленгликоль в качестве составной части фосфолипидов. Образованные липосомы содержат неполярный фотосенсибилизатор в мембране и используются для комбинированного направленного действия неполярного фотосенсибилизатора и второго полярного вещества.

Препаративная форма может быть сохранена посредством лиофилизирования с использованием моносахарида или многоатомного спирта, но не обязательно, чтобы препаративная форма имела достаточную устойчивость при хранении. Производственный цикл позволяет сохранить размер липосомального носителя, а также содержание в мембране фотосенсибилизирующего соединения.

Неполярные фотосенсибилизаторы согласно данному изобретению включают в себя известные соединения на основе порфирина. Отдельные фотосенсибилизаторы, которые преимущественно используют в практике данного изобретения, основаны на порфириновых макроциклических фотосенсибилизаторах, которые включают дейтеропорфирин, этиопорфирин, протопорфирин, гематопорфирин, феофорбид и их производные, особенно ди- и тетрагидропорфирины, которые имеют максимум поглощения света в области 640-780 нм.

Фосфолипиды могут быть модифицированы или не модифицированы посредством пегилирования (содержащие полиэтиленгликоль в качестве составной части). Образованные липосомы содержат неполярный сенсибилизатор в мембране и используются для комбинированного направленного действия неполярного фотосенсибилизатора и второго полярного вещества.

Фотосенсибилизирующие препаративные формы используют для того, чтобы направить молекулу неполярного фотосенсибилизатора к нежелательным для организма клеткам и тканям или другим нежелательным материалам и, после облучения соответствующим источником света, повредить мишень. Фотосенсибилизирующие препаративные формы также используют для того, чтобы контролировать нежелательные для организма клетки или ткани или другие нежелательные материалы путем использования флуоресцентного метода визуализации с ограниченной фотохимической активацией фотосенсибилизатора или без этой активации.

Липосомальную препаративную форму согласно изобретению, в особенности, используют для транспортировки неполярных фотосенсибилизаторов. Неполярные вещества интегрируются в мембрану носителей, тем самым, создавая структуру, которая делает возможным более легкое освобождение фотосенсибилизатора для его действия прямо на клеточную мембрану. Посредством данного механизма фотосенсибилизатор доставляется прямо к клеточной мембране, представляющей собой предпочтительное место действия фотосенсибилизатора. Таким образом, фотосенсибилизатор, будучи эффективно активирован путем освещения соответствующим внешним источником света, может необратимо повреждать нежелательные клетки, ткани или другие структуры.

Обычным образом конструированные липосомальные препаративные формы используют для транспортировки некоторых соединений, заключенных в просвете носителя. Изобретение обращает внимание на комбинацию двух различных транспортных компартментов в одной липосоме, способствующую совместному транспорту неполярных и полярных веществ. Таким образом, благодаря присутствию фотосенсибилизатора в мембране, фотосенсибилизирующие реагенты эффективно направлены к их месту действия, но просвет внутри липосомальной частицы остается свободным для доступа других веществ, включающих лекарственные средства, которые могут оказывать благоприятное действие при терапии.

Кроме того, комбинация моносахаридов, таких как глюкоза, и фотосенсибилизатора, присоединенного к фосфолипидам, является превосходным средством для сохранения размера липосом в течение лиофилизирования и регидратации, используя физиологический общепринятый углевод вместо дисахаридов.

Данная универсальная концепция делает возможным добавление веществ, которые будут иметь благоприятное действие при терапии. Комбинация двух или более веществ вместе с мембранно-связанным фотосенсибилизатором в одном носителе позволит фотосенсибилизатору прямо или непрямо влиять на содержание кислорода таргетированных клеток, тем самым, оказывать влияние на эффективность фотодинамической терапии. Например, такие эффекты могут быть достигнуты при добавлении ингибиторов ферментативной активности, подобных ингибиторам тиоредоксинредуктазы (TrxR) млекопитающих. Таким образом, ингибитор будет эффективным только после достижения цитоплазмы таргетированных клеток, блокируя путь Trx/TrxR, который обычно действует как антиоксидант.

Пример 1

Приготовление липосом, содержащих mTHPC

mTHPC (темопорфин) был синтезирован, как описано в патентах No. 4992257 и 5162519, включенных в текст посредством ссылки.

Липосомы были приготовлены согласно следующей общей процедуре:

Неполярный фотосенсибилизатор, пальмитат аскорбиновой кислоты и фосфолипиды растворяли в смеси хлороформ/метанол. Затем раствор сушили в вакууме, используя роторный испаритель, до тех пор, пока смесь хлороформ/метанол больше не определялась с помощью газовой хроматографии. Воду для инъекции добавляли, чтобы регидратировать липидный слой при температуре 50°С в течение, по крайней мере, 2 часов. Затем смесь пропускали через систему гомогенизатор-фильтр, используя конечный размер пор 100 нм. Возможно, восстановление влагосодержания осуществляется в присутствии моносахаридов или многоатомных спиртов. Фильтрат собирали, разливали в пузырьки и, необязательно, лиофилизировали. Лиофилизированную композицию перерастворяли в воде для инъекции до введения.

Используя вышеупомянутую процедуру, было приготовлено несколько различных липосомальных препаративных форм, как следует ниже:

Пример 1а

ИнгредиентКоличество % мас./об.mTHPCот 0,05 до 0,15Дипальмитоилфосфатидилхолинот 0,5 до 2,0Дипальмитоилфосфатидилглицеринот 0,05 до 0,2Пегилированный дистеароил-
Фосфатидилэтаноламинот 0,05 до 0,2Пальмитат аскорбиновой кислотыот 0,002 до 0,004Вода для инъекциисколько требуется для достижения желаемой концентрации

Пример 1b

ИнгредиентКоличество % мас./об.mTHPCот 0,05 до 0,15Дипальмитоилфосфатидилхолинот 0,5 до 2,0Дипальмитоилфосфатидилглицеринот 0,05 до 0,2Пальмитат аскорбиновой кислотыот 0,002 до 0,004Вода для инъекциисколько требуется для достижения желаемой концентрации

Пример 1 с

ИнгредиентКоличество % мас./об.mTHPCот 0,05 до 0,15Дипальмитоилфосфатидилхолинот 0,5 до 2,0Дипальмитоилфосфатидилглицеринот 0,05 до 0,2Глюкозаот 2,0 до 12,0Пальмитат аскорбиновой кислотыот 0,002 до 0,004Вода для инъекциисколько требуется для достижения желаемой концентрации

Было показано, что все указанные липосомальные препаративные формы хорошо функционируют при их использовании согласно настоящему изобретению.

Пример 2

Физическая и химическая устойчивость липосомального mTHPC

Физическую устойчивость липосомальных препаративных форм определяли путем проверки гранулометрического состава с помощью фотонно-корреляционной спектроскопии.

Устойчивость липосомального mTHPC

Условия храненияСредний гранулометрический состав (нм)Начальное16623°С - 1 месяц17723°С - 4 месяца167

Пример 3

Локализация mTHPC в липосомальном бислое композиции

Гель-фильтрацию липосомальной препаративной формы проводили на колонках с сефадексом G-50. Как показано на фиг.1, липиды и mTHPC одинаково распределялись во всех фракциях, что указывает на физическое взаимодействие обоих компонентов, т.е. на интеграцию mTHPC в бислой мембраны. Распределение в значительной степени не изменялось после разрушения липосомальной структуры посредством ультразвука, как показано в таблицах 1 и 2.

Пример 4

Фармакокинетические свойства у мыши

Использовали Colo 26, неметастазирующую клеточную линию опухоли ободочной и прямой кишки мыши, сингенную мышам Balb/c.

Клетки сохраняли в виде монослойной культуры в среде Института Roswell Park Memorial (RPMI), снабженной 10% термоинактивированной фетальной телячьей сывороткой, 1% стрептомицином-пенициллином и 200 мМ L-глутамином, при 37°С в 95% воздуха и 5% СО₂.

Шестинедельным бестимусным самкам мышей (Swiss, nu/nu) подкожно вводили в правую заднюю лапку 2 х 10⁶ клеток Colo 26. Через две недели, когда опухоль достигала диаметра 5-7 мм, внутривенно вводили композиции mTHPC (0,5 мг/кг).

Бесконтактные измерения LIF осуществляли на трех разных участках: опухоли с покрывающей ее кожей, на симметрично расположенных на левой задней лапке нормальных тканях с покрывающих их кожей и приподнятой коже, в разное время после введения лекарственного средства. При выбранных временных точках мышей умерщвляли, и сигналы флуоресценции, идущие от опухоли и нормальных тканей, измеряли при прямом контакте.

На фиг.2 представлены данные накопления mTHPC, продукта А и В в опухоли как функция от времени после инъекции, полученные для четырех мышей. Бесконтактные измерения продемонстрировали тенденцию к большему накоплению mTHPC в опухоли по сравнению с нормальными тканями с наилучшим отношением (1,3) при 24 час. При контактных измерениях, выполненных в прямом контакте с опухолью и мышцей при 24 час и 48 час после инъекции, отношения составили 2,7 и 3,0, соответственно.

Измерения для продукта А были сделаны у одной мыши при 0,5 час, 4 час, 6 час, 8 час, 12 час, 24 час, 36 час, 48 час и 72 час после дозы. Было показано, что фармакокинетическое поведение продукта А было подобно поведению mTHPC. По сравнению с mTHPC, наивысшая интенсивность флуоресценции в опухолевой ткани была достигнута через 4 часа после инъекции.

Измерения для продукта В были сделаны у одной мыши при 0,5 час, 4 час, 6 час, 8 час, 12 час, 24 час, 36 час, 48 час и 72 час. Самая высокая интенсивность флуоресценции в опухоли была измерена через 8 часов после внутривенной инъекции. В сравнении с mTHPC, продукт В продемонстрировал полностью отличные фармакокинетические свойства. Концентрация продукта В повышалась в опухоли намного быстрее (16 час), чем mTHPC.

Пример 5

Противоопухолевая активность липосомального mTHPC

Использовали Colo 26, неметастазирующую клеточную линию опухоли ободочной и прямой кишки мыши, сингенную мышам Balb/c.

Клетки сохраняли в виде монослойной культуры в среде Института Roswell Park Memorial (RPMI), снабженной 10% термоинактивированной фетальной телячьей сывороткой, 1% стрептомицином-пенициллином и 200 мМ L-глутамином, при 37°С в 95% воздуха и 5% СО₂.

Шестинедельным бестимусным самкам мышей (Swiss, nu/nu) подкожно вводили в правую заднюю лапку 2×10⁶ клеток Colo 26. Через две - три недели, когда опухоль достигала диаметра 10-13 мм, внутривенно вводили композиции mTHPC (0,5 мг/кг). Если не указано особо, 3 мыши на группу на продукт использовали для каждой пост-PDT.

а. Фотодинамическое лечение

Интервалы лекарственное средство-освещение (DLI), составляющие 0,5 час, 4 час, 6 час, 72 час, использовали для продуктов, таких как mTHPC, продукт А (липосомы и mTHPC) и продукт В (ПЕГ-илированные липосомы и mTHPC). Каждое животное подвергали анестезии внутримышечно инъекцией кетамина (12,5 мг/мл), затем подвергали фотооблучению при 652 нм с 10 Дж/см² при 100 Вт/см², используя лазерный светодиод.

b. Оценка эффекта PDT

Морфологический метод

Для того чтобы оценить некроз опухолевой ткани после PDT, использовали метод окрашивания красителем голубым Эванса.

Мышам вводили внутрибрюшинно (0,25 мл) краситель голубой Эванса (1%) немедленно после PDT.

Через двадцать четыре часа мышей умерщвляли посредством введения повышенной дозы галотана, опухоли иссекали и разрезали в продольном направлении. На фиг.3 представлены фотографии целых опухолей и частей опухолей.

Неокрашенные некротические области были рассмотрены как поврежденные участки опухолей:

i. Интервал лекарственное средство-освещение (DLI)=0,5 час, некроз не наблюдали независимо от использованного продукта.

ii. Интервал лекарственное средство-освещение (DLI)=4 час. У трех мышей, обработанных посредством mTHPC-PDT, наблюдали частичный некроз опухоли. У двух мышей, обработанных продуктом А, наблюдали частичный некроз, в то время как опухоль у третьей мыши оставалась интактной. У трех мышей, обработанных продуктом В-PDT, наблюдали некроз опухоли: у двух мышей наблюдали явный некроз опухоли, в то время как у одной мыши некроз опухоли был частичный.

iii. Интервал лекарственное средство-освещение (DLI)=6 час. Шесть мышей использовали для обработки продуктом А. Явный некроз был отмечен в опухолях двух мышей, обработанных продуктом А, а у четырех других мышей опухоли оставались интактными. Что касается продукта В, явный некроз опухоли наблюдали у всех мышей. В двух опухолях, обработанных посредством mTHPC-PDT, наблюдали явный некроз, в одной опухоли некроз не был отмечен. Некроз опухолей, обработанных mTHPC-PDT, был подтвержден при визуальном наблюдении.

Опираясь на предпочтительные аспекты изобретения со ссылкой на сопровождающие чертежи, очевидно, что изобретение не ограничивается отдельно взятыми аспектами, и что специалисты в данной области могут произвести различные изменения и модификации без отступления от области или объема изобретения, как указано в прилагаемой формуле изобретения.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к липосомальной препаративной форме для фотодинамической терапии. Описана фармацевтическая липосомальная препаративная форма для фотодинамической терапии, включающая неполярный порфириновый фотосенсибилизатор и один или более фосфолипидов, которые являются устойчивыми при хранении, без лиофилизирования. Липосомальная препаративная форма содержит терапевтически эффективные количества фотосенсибилизатора для внутривенного введения. Фосфолипиды могут быть модифицированы посредством пегилирования, т.е. они содержат полиэтиленгликоль в качестве составной части фосфолипидов. Образованные липосомы содержат неполярный фотосенсибилизатор в мембране и используются для совместного направленного действия неполярного фотосенсибилизатора и второго полярного вещества. В случае, когда препаративная форма содержит моносахариды или многоатомные спирты, она может быть эффективно лиофилизирована, тем самым, сохраняя размер липосомальных носителей и содержание терапевтически эффективного количества фотосенсибилизирующего реагента. Изобретение также относится к липосомальной препаративной форме, образованной при воссоздании водным носителем. При воссоздании лиофилизированной препаративной формы с подходящим водным носителем образуются липосомы, которые также используют для внутривенного введения. Вышеописанные липосомальные препаративные формы эффективны при фотодинамической терапии. 3 н. и 16 з.п. ф-лы, 3 ил., 2 табл.

1. Фармацевтическая липосомальная препаративная форма для фотодинамической терапии, которая является стабильной при лиофилизации и воссоздании, включающая

липосомальный бислой, состоящий из синтетических фосфолипидов выбранных из группы, состоящей из дипальмитоилфосфатидилхолина и дипальмитоилфосфатидилглицерина и комбинаций указанных материалов;

моносахарида, выбранного из группы, состоящей из фруктозы, глюкозы и комбинаций указанных материалов; и

терапевтически эффективного количества гидрофобного, неполярного фотосенсибилизатора, выбранного из группы, состоящей из дигидропорфиринов и тетрагидропорфиринов.

липосомальный бислой, состоящий из синтетических фосфолипидов выбранных из группы, состоящей из дипальмитоилфосфатидилхолина и дипальмитоилфосфатидилглицерина и комбинаций указанных материалов;

моносахарида, выбранного из группы, состоящей из фруктозы, глюкозы и комбинаций указанных материалов; и

терапевтически эффективного количества гидрофобного фотосенсибилизатора, выбранного из группы, состоящей из дигидропорфиринов и тетрагидропорфиринов.

липосомальный бислой, состоящий из синтетических фосфолипидов, где, по крайней мере, один синтетический фосфолипид представляет собой фосфолипид связанный с полиэтиленгликолем; и терапевтически эффективное количество гидрофобного фотосенсибилизатора, содержащегося в указанном липосомальном бислое.