ПРОТИВОЯЗВЕННОЕ СРЕДСТВО И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ Российский патент 2009 года по МПК A61K36/185 A61P1/04 

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для получения лекарственного средства из растительного сырья, обладающего противоязвенным действием.

Известны способы получения средств, обладающих противоязвенным действием на основе биологически активных веществ растительного происхождения, не имеющих противопоказаний и побочных эффектов. В качестве противоязвенного средства разработаны желатиновые капсулы, содержащие концентрат облепихового масла и водорастворимые противоязвенные компоненты в виде циклодекстринов, витамина U, оксида магния (Патент 2003105141). Эффективное противоязвенное средство содержит в виде водорастворимых экстрактов корневище аира, кору крушины, корень солодки и листья березы (Патент № 2264822).

Наиболее близким в области применения является препарат растительного происхождения на основе этанольных экстрактов измельченной до 5-10 мм коры осины (Патент №2086251). Однако использование в качестве растворителя этилового спирта ограничивает область применения этого средства: больные, не переносящие действие алкоголя, дети. Кроме того, противоязвенная активность данного средства недостаточна.

Для подготовки растительного сырья известны способы получения высокодисперсных порошков для производства напитков, вкусовых приправ, сухих концентратов, детского и диетического питания, а также в виде добавок в мороженое и кондитерские изделия (Патент 93036480, РФ, 1997 г.). Они включают стадии сушки, охлаждения и измельчения частиц до размера 20-30 мкм. Массу сушат инфракрасными лучами и нагретым воздухом при температуре 60-80°С в слое массы 8-18 мм, что позволяет сохранить биологически активные вещества (Патент 2154957, РФ, 2000 г.). Наиболее близким по техническому решению является способ получения порошков из растительного сырья, заключающийся в сушке, измельчении в вакууме и одновременном воздействие на сырье мелющими телами в вибрационном поле; вакуумирование осуществляют до остаточного давления не более 131,6 Па (Патент 2064477, 1996 г.). Однако измельчение сырья до микрометровых размеров частиц не позволяет в полной мере извлечь биологически активные вещества.

Задача изобретения - создание средства из растительного сырья, обладающего противоязвенным действием, расширение ассортимента, упрощение технологии, повышение коэффициента противоязвенной активности.

Технический результат получают благодаря тому, что противоязвенное средство представляет собой порошок из листьев и стеблей крапивы, измельченных до размеров 50-90 нм. Способ получения средства, обладающего противовоязвенным действием, включает сушку и измельчение растительного сырья, воздействуя на сырье мелющими телами, при этом листья и стебли крапивы сушат до остаточной влажности 4-6 мас.%, измельчают до размеров 50-90 нм в шаровых мельницах планетарного, вибрационного, виброцентробежного, роликового типов, обеспечивающих ускорение мелющих тел, например шаров, до 400 м/с² в среде аргона или азота. Механическую обработку проводят в среде аргона или азота для обеспечения сохранности каротиноидов. В качестве исходного сырья используют сухие листья и стебли крапивы, влажность которых не более 4-6 мас.%. Избыточная влага способствует окислению целевых продуктов.

Содержание экстрактивных жирорастворимых веществ и каротиноидов в диспергированной крапиве определяется следующим образом. Измельченное сырье заливают хлороформом в соотношении порошок крапивы: растворитель 1:10, перемешивают в течение 30 минут. По окончании экстракции раствор фильтруют через плотные бумажные фильтры в мерные колбы. Фильтры промывают хлороформом. На спектрофотометре в диапазоне длин волн 400-700 нм в кюветах с толщиной слоя 10 мм проводят измерение оптической плотности экстрактов. Для определения содержания суммы хлорофиллов измеряют оптическую плотность экстрактов при длине волны 450 нм. Раствор сравнения - хлороформ.

Содержание суммы каротиноидов (С) в % в пересчете на β-каротин в абсолютно сухом сырье рассчитывают по формуле:

С=D*V*100*/E*m*(100-W), где

D - оптическая плотность испытуемого экстракта;

V - объем раствора в мл;

Е - удельный показатель поглощения 1% раствора β-каротина в хлороформе при длине волны 450 нм = 2335;

m - навеска сырья, г;

W - влажность образца, % отн., полученная при высушивании исследуемого образца в сушильном шкафу при температуре 105°С до постоянной массы.

В изобретении использованы листья и стебли крапивы двудомной (Urtica dioica L).

В таблице 1 приведены экспериментальные данные по нанодиспергированию крапивы с целью повышения в целевом продукте содержания биологически активных веществ - каротиноидов.

Пример 1. Листья и стебли крапивы предварительно сушат до влажности 4 мас.%, измельчают в мельнице до размера частиц 20 мкм. Для определения экстрактивных веществ и содержания каротиноидов взвешивают 100 г порошка крапивы.

Для определения содержания экстрактивных веществ измельченное сырье заливают хлороформом в соотношении порошок крапивы: растворитель 1:10, перемешивают в течение 30 минут. По окончании экстракции раствор фильтруют через плотные бумажные фильтры в мерные колбы. Фильтры промывают хлороформом. Фильтрат упаривают на роторном испарителе при остаточном давлении 0,1-0,5 Па и температуре 30°С, высушивают до постоянного веса и взвешивают. Данные приведены в таблице 1. Содержание экстрактивных веществ увеличилось в 100 раз по сравнению с необработанным сырьем (пример 11). Количество каротиноидов повышается незначительно.

Пример 3. Листья и стебли крапивы предварительно сушат до влажности 6 мас.%. Сырье в количестве 1 кг помещают в мельницу планетарного типа АГО. Измельчение проводят в воздушной среде до размера частиц 50 нм при ускорении мелющих тел - шаров 400 м/с². Выход экстрактивных веществ и содержание каротиноидов определяют по методике, приведенной в примере 1. В табл.1 показано увеличение выхода экстрактивных веществ более чем в 100 раз и при этом, соответственно, повышается количество каротиноидов.

Пример 5. Листья и стебли крапивы предварительно сушат до влажности 10 мас.%. Сырье в количестве 1 кг помещают в мельницу планетарного типа АГО. Диспергирование проводят в воздушной среде до размера частиц 90 мкм при ускорении мелющих тел - шаров 400 м/с². Выход экстрактивных веществ и содержание каротиноидов определяют по методике, приведенной в примере 1. В табл.1 показано, что увеличение влажности сырья приводит к снижению выхода каротиноидов.

Пример 6. Листья и стебли крапивы предварительно сушат до влажности 4 мас.%. Сырье в количестве 1 кг помещают в мельницу планетарного типа АГО. Измельчение проводят в среде аргона до размера частиц 90 нм при ускорении мелющих тел - шаров 400 м/с². Выход экстрактивных веществ и содержание каротиноидов определяют по методике, приведенной в примере. В табл.1 отмечен максимальный выход экстрактивных веществ и каротиноидов.

Пример 7. Листья и стебли крапивы предварительно сушат до влажности 4 мас.%. Сырье в количестве 1 кг помещают в мельницу виброцентробежного типа. Измельчение проводят в среде аргона до размера частиц 90 нм при ускорении мелющих тел - шаров 400 м/с². Выход экстрактивных веществ и содержание каротиноидов определяют по методике, приведенной в примере 1. В табл.1 приведен выход экстрактивных веществ и каротиноидов.

Пример 8. Листья и стебли крапивы предварительно сушат до влажности 4 мас.%. Сырье в количестве 1 кг помещают в мельницу роликового типа. Измельчение проводят в среде аргона до размера частиц 90 нм при помощи металлических роликов, укрепленных на вращающемся роторе. Выход экстрактивных веществ и содержание каротиноидов определяют по методике, приведенной в примере 1. В табл.1 приведен выход экстрактивных веществ и каротиноидов.

Как видно из примеров, механическая обработка в виброактиваторе с измельчением сырья до размера частиц 50-90 нм позволяет в полной мере разрушить межмолекулярные и межагрегативные связи в комплексах органоминеральных компонентов и перевести в свободное состояние биологически активные вещества, обеспечивающие противоязвенный эффект. Выход каротиноидов возрастает в 15-20 раз по сравнению с измельченной до 1 мм крапивой. Снижение содержания влаги в сырье и создание инертной среды в зоне механообработки обеспечивает сохранность биологически активных веществ.

Исследование противоязвенного действия порошка нанодиспергированной крапивы двудомной (Urtica dioica L.) проводили на 50 белых беспородных крысах-самцах массой 200-220 г. Эксперименты проводили на модели аспириновой язвы. В качестве образцов сравнения использовали плантаглюцид (П №014877/01-03), настойку листьев крапивы (аптечная). Из сухих образцов измельченной до 1 мм и нанодиспергированной до 50 нм крапивы готовили водные суспензии на очищенной воде.

Кислоту ацетилсалициловую вводили внутрижелудочно в дозе 128 мг/кг в течение суток дважды с интервалом в четыре часа. За один час до второго введения аспирина животные получали исследуемые препараты. Препараты вводили внутрижелудочно в дозе 250 мг/кг курсом в течение десяти дней, последнее введение за час до второго введения аспирина. Расчет дозы для настоя листьев крапивы проводили исходя из содержания экстрактивных веществ. Контрольные животные получали внутрижелудочно растворитель - воду очищенную в эквиобъемных количествах. В конце эксперимента макроскопически определяли число и площадь деструкций, степень изъязвления желудка; процент животных с язвами; индекс Паульса как интегральный показатель количества деструкции.

При повреждении желудка крыс аспирином гибели животных ни в одной из групп не наблюдалось, однако оно приводило к гиперемии и отечности слизистой желудка. Деструкции представляли собой множество геморрагических мелких, реже крупных и полосовидных образований, заполненных свернувшейся кровью (табл.2). На фоне аспиринового повреждения желудка настой листьев крапивы, суспензия листьев крапивы, полученная с помощью нанотехнологии (50 нм), и плантаглюцид способствовали снижению степени изъявления слизистой оболочки. Под действием суспензии нанодиспергированной крапивы достоверно снижалось общее число деструкций в 5,5 раза, настоя листьев крапивы в 3,5 раза и плантаглюцида - в 3 раза. Это соответствовало снижению индекса Паульса и увеличению коэффициента противоязвенной активности. Наибольшей противоязвенной активностью обладала суспензия листьев крапивы, полученная с помощью нанотехнологии, коэффициент противоязвенной активности достигал 9,2 (табл. 2). Суспензия листьев крапивы, измельченная до 1 мм, не оказала лечебного действия.

Таблица 1 Влияние условий нанодиспергирования на выход экстрактивных веществ из листьев крапивы № Влажность сырья, мас.% Среда Размеры частиц сырья Содержание экстрактивных веществ, % Содержание каротиноидов, мг % 1 4 воздух 20 мкм 13,5 89 2 4 воздух 50 нм 22,7 155 3 6 воздух 50 нм 20,0 141 4 6 воздух 90 нм 21,1 142 5 10 воздух 90 нм 18,1 103 6 4 аргон 20 мкм 16,4 96 7 4 аргон 50 нм 30,8 181 8 6 аргон 50 нм 29,3 167 9 6 аргон 90 нм 29,0 170 10 10 аргон 90 мн 10,5 108 11 (пр) 4 воздух 1 мм 0,13 78

Таблица 2 Влияние суспензии листьев крапивы, полученной с помощью нанотехнологии, на язвообразование, вызванное кислотой ацетилсалициловой, у крыс (Х±m) группы животных Доза мг/кг Число животных Количество язв Процент животных с язвами Индекс Паульса Противоязвенная активность мелкие крупные полосовидные общее Контроль - 10 6,0±0,5 1,5±0,2 1,0±0,2 8,3±0,3 100 8,3 - Плантаглюцид 250 10 2,3±0,4¹ 0,4±0,2¹ 0,1±0,1¹ 2,8±0,5¹ 80 2,2 3,8 Крапива 1 мм 250 10 5,6±0,4² 1,5±0,2² 0,9±0,1² 7,9±0,3² 100 7,9 1,05 Настой крапивы 250 10 2,0±0,4^1,3 0,4±0,2^1,3 0^1,3 2,4±0,5^1,3 80 1,9 4,4 Крапива 50 нм 250 10 1,5±0,5^1,3 0^1,3 0^1,3 1,5±0,5^1,3 60 0,9 9,2 Примечание: Р≤0,05 ¹ - по отношению к контролю; ² - по отношению к плантаглюциду; ³ - по отношению к крапиве миллиразмер;

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к противоязвенному средству. Противоязвенное средство представляет собой порошок из листьев и стеблей крапивы, измельченных до определенных размеров. Способ получения средства, обладающего противоязвенным действием, путем сушки листьев и стеблей крапивы, измельчения до определенных размеров в среде аргона или азота. Вышеописанное средство обладает повышенной противоязвенной активностью. 2 н.п. ф-лы, 2 табл.

1. Противоязвенное средство на основе растительного сырья, отличающееся тем, что оно представляет собой порошок из листьев и стеблей крапивы, измельченных до размеров 50-90 нм.

2. Способ получения средства, обладающего противоязвенным действием путем сушки и измельчения растительного сырья, воздействуя на сырье мелющими телами, отличающийся тем, что листья и стебли крапивы сушат до остаточной влажности 4-6 мас.%, измельчают до размеров 50-90 нм в шаровых мельницах планетарного, вибрационного, виброцентробежного, роликового типов, обеспечивающих ускорение мелющих тел, например шаров, до 400 м/с² в среде аргона или азота.