ПРИМЕНЕНИЕ СОЕДИНЕНИЙ, СПОСОБНЫХ ПОВЫШАТЬ УРОВЕНЬ IGF-1 В СЫВОРОТКЕ КРОВИ, ПРИ ПРИГОТОВЛЕНИИ ТЕРАПЕВТИЧЕСКОЙ КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ СТАДИЙ РАЗЛИЧНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ, АССОЦИИРОВАННЫХ СО СНИЖЕНИЕМ УРОВНЯ IGF-1 В СЫВОРОТКЕ ЛЮДЕЙ И ЖИВОТНЫХ Российский патент 2009 года по МПК A61K31/405 

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение имеет отношение к применению одного или нескольких соединений, способных повышать уровень инсулин-подобного фактора роста 1 (IGF-1) в сыворотке крови, для приготовления терапевтической композиции, в частности в форме пищевой добавки, для лечения субъектов, страдающих симптомами повышенной утомляемости и истощения, синдрома «перегорания» и синдрома хронической усталости. Эту же композицию можно применять пациентам, страдающим депрессией, болезнью Альцгеймера, синдромом раздраженной прямой кишки, остеопорозом, диабетом 2-го типа или для терапии, направленной на замедление старения, иммунной терапии или восстановления после тренировок. Композицию также применяют в ветеринарии для увеличения роста и повышения иммунитета у животных.

Уровень техники

Симптомы повышенной утомляемости и истощения появляются как результат тяжелого дисбаланса между продукцией энергии, с одной стороны, и увеличенной физической и/или психологической потребностью в энергии, с другой стороны.

«Перегорание» определяют как постепенное истощение эмоциональной, умственной и психической энергии, возникающее из-за стрессов, связанных с работой, приводящее к эмоциональному истощению, чувству обезличивания и снижению самооценки. Симптомами являются плохое выполнение работы, проблемы взаимоотношений, проблемы со здоровьем, негативные ощущения и чувства бессмысленности.

Синдром хронической усталости (CFS) определяют как тяжелую форму усталости, сопровождающуюся потерей трудоспособности, которая длится, по меньшей мере, 6 месяцев, которая усиливается при минимальной физической или умственной нагрузке и для которой не существует адекватного медицинского объяснения. Синдром хронической усталости сопровождается чувством утомления (значительная слабость) как основным симптомом. Усталость должна быть постоянно возникающей (то есть не постоянной), тяжелой, приводящей к потере трудоспособности, и она влияет на физическую и умственную функцию. Она сохраняется в течение 6 месяцев и более и должна присутствовать в течение 50% времени. Кроме этого, могут присутствовать и другие симптомы, в особенности миалгия (мышечные боли), фарингит, увеличенные лимфатические узлы в области шеи и подмышек, боль без покраснения или опухания целого ряда суставов, интенсивные или меняющиеся головные боли, невосстанавливающий сон и усталость, которая длится больше одного дня после тренировки. Не существует никакой другой медицинской причины для усталости (нет проблем с сердцем, грудной клеткой или других медицинских проблем, которые вызывают усталость).

Для этих физических состояний до сих пор не существует признанных способов лечения. Поэтому, предметом настоящего изобретения является предоставление способов облегчения, по меньшей мере, некоторых симптомов, связанных с этими физическими состояниями.

Ранее было обнаружено, что подгруппа пациентов, страдающих CFS, демонстрирует сниженный уровень инсулин-подобного фактора роста 1 (IGF-1) в сыворотке крови. Чтобы повысить сниженный уровень IGF-1 в сыворотке крови отдельным субъектам, нуждавшимся в лечении, непосредственно вводили IGF-1. Однако недостатком такого способа является то, что концентрация IGF-1 в организме может становиться очень высокой в течение очень короткого промежутка времени, что может привести к передозировке. Это в свою очередь может вызвать гиперактивацию (митоз), которая в продолжительный период времени может привести к возникновению рака.

С пониженным уровнем IGF-1 также ассоциированы и другие состояния. Желательно иметь способы лечения или облегчения и для этих состояний.

Раскрытие изобретения

Таким образом, объектом настоящего изобретения является предоставление альтернативных способов повышения уровня IGF-1 в сыворотке крови у субъектов, страдающих состояниями, в которых обнаружен сниженный уровень IGF-1 в сыворотке крови.

В соответствии с изобретением этого достигают с помощью применения одного или нескольких соединений, которые способны активировать гипоталамус субъекта для повышения в сыворотке крови уровня гормона, высвобождающего гормон роста (GHRH, соматокринин), который, в свою очередь, приводит к увеличению уровня секреции гормона роста (GH) и последующему повышению уровня инсулин-подобного фактора роста 1 (IGF-1) в сыворотке крови, для получения терапевтической композиции, предназначенной для лечения повышенной утомляемости и истощения, синдрома «перегорания», синдрома хронической усталости, синдрома раздраженной прямой кишки, остеопороза, депрессии, болезни Альцгеймера, диабета 2-го типа или для терапии, направленной на замедление старения, иммунной терапии или восстановления после физических упражнений.

Было обнаружено, что соединение или соединения настоящего изобретения активируют/стимулируют гипоталамус для повышенной секреции гормона, высвобождающего гормон роста. Это приводит к повышенному высвобождению гормона роста гипофизом. Проинициированная инсулином печень превращает гормон роста в инсулин-подобный фактор (IGF-1). IGF-1 активирует рецепторы тирозинкиназы и рецепторы интегрина, в результате чего, между прочим, будет стимулироваться и активироваться внутриклеточный синтез липидов и гликогена, что приведет к запасанию энергии. Соединение, которое применяют в соответствии с настоящим изобретением, также немедленно стимулирует и активирует рецепторы интегрина, что приводит к активации и стимуляции сопротивляемости/иммунитета.

Предпочтительно соединение представляет собой вещество, которое при введении внутрь человеку или животному в лечебных целях может привести к повышению уровня индолилуксусной кислоты (ИУК) в организме человека или животного по сравнению с уровнем индолилуксусной кислоты в организме того же человека или животного до введения соединения.

Основным соединением настоящего изобретения, таким образом, является индолилуксусная кислота (ИУК). Однако того же результата можно достигнуть, применяя производные и аналоги ИУК или соединений, которые приводят к повышению уровня ИУК. Поэтому эти производные соединения можно разделить на различные группы.

У растений ИУК является основным гормоном роста. В биосинтезе и дальнейшем метаболизме известен целый ряд соединений, которые превращаются в ИУК как в желудке, кишечнике, печени, так и в других частях организма. Это превращение может быть ферментативным или химическим. У растений также обнаружены различные гидроксилированные, фосфорилированные, метоксилированные, N-оксидные и N-метилированные производные индола. Таким образом, настоящее изобретение имеет отношение к применению соединений, которые предоставляют ИУК или производные ИУК, обладающие сходной активностью, как прямо, так и опосредованно через метаболическое превращение. Эти так называемые предшественники представляют собой, например, 4-гидрокси-ИУК, 4-метокси-ИУК, 5-гидрокси-ИУК, 5-метокси-ИУК, 6-гидрокси-ИУК, 6-метокси-ИУК, 7-гидрокси-ИУК, 7-метокси-ИУК.

Кроме этого, настоящее изобретение имеет отношение к применению ИУК с другими заместителями, соединений, которые могут быть как природными, так и синтетическими соединениями. В природе можно найти галогенированные индольные алкалоиды, в особенности у морских организмов (например, 6-броминдиготонин). С помощью синтеза в ароматическое кольцо можно вводить все типы заместителей, например, метил-, амино-, нитро-, фтор-, хлор-, бром- и йод- в положения 4, 5, 6 и 7. Это применимо ко всем указанным выше природным производным индола. Из этих соединений можно сделать все указанные выше производные, конъюгаты и продукты окисления. Или в виде синтетических продуктов, или в виде результата метаболических превращений живыми клетками (растения, микроорганизмы, клетки млекопитающих, организм человека).

Настоящее изобретение также имеет отношение к применению предшественников, из которых могут образоваться ИУК и аналоги, перечисленные выше, такие как триптофан, 4-гидрокситриптофан, 4-метокситриптофан, 5-гидрокситриптофан, 5-метокситриптофан, 6-гидрокситриптофан, 6-метокситриптофан, 7-гидрокситриптофан, 7-метокситриптофан, гипафорин, триптамин, 4-гидрокситриптамин, 4-метокситриптамин, псилоцин (4-гидроксидиметилтриптамин), псилоцибин (4-фосфодиметилтриптамин), баеоцистин, серотонин (5-гидрокситриптамин), 5-метокситриптамин, буфотенин (диметилсеротонин), O-метилбуфотенин, мелатонин (5-метоксиацетамидный заместитель на аминогруппе триптамина), 6-гидрокситриптамин, 6-метокситриптамин, 7-гидрокситриптамин, 7-метокситриптамин.

Другими природными предшественниками для образования ИУК являются индолилмасляная кислота и индол-3-пируват.

Кроме того, настоящее изобретение имеет отношение к применению соединений, которые являются аналогами или метаболитами ИУК, которые могут превращаться обратно в ИУК (или родственные производные, как было указано выше) или которые обладают сходной активностью. Для всех этих соединений также заявлены указанные выше 4-, 5-, 6- и 7-гидрокси- и метокси-производные. Этими производными, например, являются индол, индолил-3-ацетальдегид, индолил-3-этанол, индолил-3-альдегид, индолил-3-метанол, индолил-3-карбоновая кислота, 3-метилиндол (скатол), индолил-3-ацетальдоксим, 3-аминометилиндол, N-метиламинометилиндол, грамин (N-диметиламинометилиндол). Похожими соединениями являются вещества с измененным индольным хромофором, такие как индоксилы (индиканы), индолениноны, 3-метилен-2-оксиндол, абрин, изатан В, изатин, индикан, индиго, индирубин, индиготины, 3-индолилметил (скатолил), ниацин, 2-оксиндолил-3-уксусная кислота.

Другой группой являются метаболиты ИУК, которые обычно обнаруживают в растениях, например, 3-метилен-2-оксиндол, оксиндолил-3-метанол, оксиндолил-3-альдегид, оксиндолил-3-карбоновая кислота, 3-метилоксиндол.

Для всех природных индольных соединений (см. выше) в природе обнаружена серия простых производных и конъюгатов. Эти соединения также подходят для применения в настоящем изобретении. Такими производными являются N-оксиды как N1, так и (если имеются) алифатической аминогруппы, N1-ацетил-, N1-формил-, N1-O-метил-, N1-метил или N1-сульфатные производные всех указанных выше индольных производных и продукты окисления, имеющие 3-гидроксииндолениновую группировку.

Кроме этого, настоящее изобретение имеет отношение к применению конъюгатов ИУК или аналогов ИУК с другими многочисленными молекулами растений, таких как конъюгаты, образованные через эфирную связь, в особенности конъюгаты с различными сахарами, например ИУК-глюкоза, lN-глюкозид ИУК-альфа-аспарагиновой кислоты, ИУК-инозитол, ИУК-миоинозитолы, конъюгаты ИУК с различными углеводами или конъюгаты в виде амидов, например с аминокислотами или пептидами. Их примерами являются ацетамид, альфа-лейцин, альфа-аланин, альфа-аспартат (наиболее важный конъюгат ИУК), альфа-глутамат, альфа-лизин, альфа-глицин, альфа-валин и альфа-фенилаланин. Обычной является конъюгация с пептидами, хотя у различных растений также встречаются конъюгаты с другими аминокислотами. Кроме этого, эта группа включает 3-ацетонитрильные производные, которые легко превращаются в соответствующую кислоту, аналогичные индолил-3-ацетонитрилу, который разрушается в ИУК как химически (в щелочных условиях), так и ферментатино (с помощью нитрилаз).

Другая группа соединений, которые могут привести к повышению уровня ИУК, представляют собой ферменты, которые приводят к высвобождению ИУК из других соединений или превращению соединений-предшественников в ИУК. ИУК высвобождается из амидов с помощью амидаз (амидогидролазы). ИУК и родственные соединения высвобождаются из глюкозидов с помощью глюкозидаз. В растениях могут присутствовать значительные количества конъюгированной ИУК, которая может высвобождаться как ферментативным (например, глюкозидазами или амидазами) или химическим гидролизом. Из общего количества ИУК на долю ИУК, связанной с амидами, приходится 90%, тогда как на долю ИУК, связанной с эфирами, или свободной ИУК приходится 10% и 1% соответственно. В растениях уровень свободной ИУК + связанной ИУК составляет около 1,2 мкг/г сухого веса (для 9-дневного Arabidopsis, далее происходит снижение). Из этого количества только 1% составляет свободная ИУК.

Кроме этого, настоящее изобретение имеет отношение к применению конъюгатов (эфиров и амидов) других природных производных ИУК, таких как 2-оксиндолильные производные и 4-, 5-, 6- или 7-гидроксипроизводные: диоксиндолил-3-уксусная кислота (и конъюгаты, такие как для ИУК), 3-O-бета-глюкозил-диоксиндолил-3-уксусная кислота, 7'-О-бета-D-глюкопиранозид 7-гидрокси-2-оксиндолил-3-уксусной кислоты, глюкопиранозил-бета-1,4-глюкопиранозил-бета-1-N-оксиндолил-3-ацетил-N-аспарагиновая кислота, глюкопиранозил-бета-1 -М-оксиндолил-3-ацетил-N-аспарагиновая кислота, 2-индолон-3-ацетиласпарагиновая кислота, 3-(O-бета-глюкозил)-2-индолон-3-ацетиласпарагиновая кислота, 3-гидрокси-2-индолон-3-ацетиласпарагиновая кислота, индолил-3-глицерофосфат (разрушается с образованием ИУК в щелочных условиях), индолил-3-глицерин (разрушается с образованием ИУК в щелочных условиях), глюкозинолаты, такие как индолил-3-илметил-глюкозинолат (глюкобрассицин), 4-гидроксииндолил-3-илметил-глюкозинолат (4-гидроксиглюкобрассицин), 1-ацетил-индолил-3-илметил-глюкозинолат (1-ацетил-глюкобрассицин), 1-метоксииндолил-3-илметил-глюкозинолат (неоглюкобрассицин), 4-метоксииндолил-3-илметил-глюкозинолат (4-метоксиглюкобрассицин), 1-сульфоиндолил-3-илметил (глюкобрассицин-1-сульфат), которые превращаются в производные индола с помощью мирозиназ (тиоглюкозидазы).

Настоящее изобретение полезно при лечении пациентов, имеющих различные симптомы, которые ассоциируются с пониженным уровнем IGF-1 в сыворотке крови. IGF-1 в значительной степени опосредует анаболическое действие гормона роста. Он стимулирует поглощение глюкозы и аминокислот, синтез белка и пролиферацию клеток и приводит к повышенному балансу азота. Кроме этого, IGF-1 подавляет апоптоз.

Было обнаружено, что при различных симптомах существуют оптимальные количества ИУК для приема внутрь. Кроме этого, при некоторых симптомах важное значение может иметь тип питания.

При синдроме хронической усталости (CFS) количество соединения, которое применяют для лечения, таково, что оно приводит к активности, эквивалентной ежедневному приему 40 мг ИУК. В предпочтительном воплощении каждый день принимают 40 мг ИУК. В зависимости от концентрации IGF-1 и IGF-BP3 в сыворотке крови количество можно снизить в течение периода от 2 до 4 недель. Например, если соотношение IGF-1/IGF-BP3 уменьшается, количество вводимой ИУК можно снизить. При этом симптоме субъект, подвергающийся лечению, должен употреблять достаточное количество углеводов и липидов. Однако этого же можно достигнуть с помощью типа питания, например, диеты со сниженным количеством жира, углеводов и бессахарной диеты.

Похожий тип питания применяют для лечения синдрома «перегорания», но исходное количество соединения, которое применяют при лечении, таково, что оно приводит к активности, эквивалентной ежедневному приему 20 мг ИУК. В предпочтительном воплощении каждый день принимают 20 мг ИУК.

При замедлении старения тип питания не имеет значения. Количество соединения, которое применяют для лечения, таково, что оно приводит к активности, эквивалентной ежедневному приему 4 мг ИУК. В предпочтительном воплощении каждый день принимают 4 мг ИУК в течение нескольких месяцев в зависимости от индивидуальных особенностей.

Для каждого из этих симптомов предпочтительно делать легкие физические упражнения для дополнительной стимуляции гипоталамуса.

Если композицию настоящего изобретения применяют в качестве пищевой добавки у субъектов, которые выполняют тяжелые физические упражнения, например у велосипедных гонщиков или марафонских бегунов, необходимо употребление дополнительных количеств жира и/или углеводов. Эти субъекты обычно начинают с нормального уровня IGF-1 в сыворотке крови, и этот уровень снижается во время упражнения. Метаболизм усиливается, и необходимо дополнительное питание. Количество соединения, которое применяют в качестве добавки, таково, что оно приводит к активности, эквивалентной ежедневному приему 40 мг ИУК. В предпочтительном воплощении каждый день принимают 40 мг ИУК в течение 2 недель и после этого в зависимости от уровня тренировок от 90 до 30, 20, 10,4 мг.

Применение изобретения может также приводить к улучшению иммунитета человека и животных. Регулирование иммунитета с помощью IGF-1 в основном происходит на аутокринном и паракринном уровне между иммунокомпетентными клетками в костном мозге, вторичных лимфоидных органах и периферических тканях. IGF-1 регулирует гематопоэз и прямую эффекторную функцию клеток как врожденной, так и приобретенной иммунной системы. IGF-1 работает через интегриновый рецептор, который обнаружен на клетках клеточных иммунных систем, таких как лимфоциты. Усиливается продукция интерлейкинов и фактора некроза опухолей (TNF). Через этот механизм IGF-1 может оказывать благоприятный эффект на инфекции, воспаление, аллергию, ревматизм и т.д.

Кроме этого, было обнаружено, что уровень IGF-1 в сыворотке крови у пациентов с диабетом 2-го типа понижен. Изобретение, следовательно, также может применяться при лечении этих пациентов.

Композиция настоящего изобретения предпочтительно существует в форме капсулы, но также возможны и другие дозированные формы, предпочтительно оральные дозированные формы, такие как таблетки, оральные суспензии, оральные эмульсии, жидкости, порошки, леденцы, пастилки, пилюли и т.д. Композиция может, например, быть в форме пищевой добавки или фармацевтической композиции.

Применение настоящего изобретения при лечении указанных симптомов основано на экспериментальных данных, которые изложены в примерах. В кратком изложении результаты показывают следующее.

Осуществление изобретения

В течение 5-7 месяцев изучали восемь пациентов, страдающих тяжелой формой синдрома хронической усталости (CFS). За этот период их лечили терапевтической композицией настоящего изобретения в форме пищевой добавки, которая включала в качестве активного ингредиента ИУК. Все субъекты были не в состоянии выполнять свою работу или делать очень легкие физические упражнения.

Перед началом изучения субъекты прошли тщательное медицинское обследование, чтобы исключить любое другое заболевание. Кровь исследовали на присутствие инсулин-подобного фактора роста 1 (IGF-1) и определяли его основной связывающий белок IGF-ВР3 через 0, 1, 3 и 5-7 месяцев лечения, так как общее количество IGF-1 в сыворотке крови минус количество IGF-BP3 представляет собой количество свободного IGF-1. Свободный IGF-1 является активной фракцией сыворотки крови. Также через 0, 1, 3 и 5-7 месяцев регистрировали участие в работе и физической активности и рассчитывали их как процент от нормы, до болезни.

До лечения участие в работе составляло 6,2%, и физическая активность составляла только 16,3% от нормы. Лечение с помощью композиции изобретения увеличило степень участия в работе уже после 1 месяца до 16,2%, которое далее увеличилось до 69,4% после 5 месяцев. Также после 1 месяца лечения значительно повысилась способность к мышечным упражнениям и составила почти 100% после 5 месяцев лечения.

Уровень IGF-1 в плазме крови значительно увеличился с 18±5 нмоль/л (среднее значение ±SD) до 29,5±8,2 нмоль/л через 1 месяц. Через 5 месяцев лечения IGF-1 повысился дополнительно до 35±10 нмоль/л. IGF-BP3 понизился с 25±11,5 нмоль/л до 18,1±3,5 нмоль/л и 13,4±10,6 нмоль/л после 1 и 5 месяцев лечения соответственно. Это означает, что содержание биологически активной фракции IGF-1 увеличилось. Таким образом, это показывает, что ИУК может применяться для модулирования статуса гормона роста у пациентов CFS.

Эксперимент с 4 пациентами, страдающими диабетом 2-го типа, показал, что пациенты чувствовали себя лучше после лечения композицией настоящего изобретения. То же самое применяли к субъектам с общими проблемами старения, у которых композиция изобретения дала облегчение всех симптомов.

Восстановление велосипедистов-гонщиков и триалистов после тяжелой тренировки улучшается после лечения с помощью пищевой добавки настоящего изобретения.

В экспериментах на животных было показано, что вес плохо растущих животных, подвергнутых лечению с помощью ИУК, увеличился до нормального уровня. Эти эксперименты иллюстрируют тот факт, что соединения, применяемые в соответствии с настоящим изобретением, приводят к повышению аппетита и улучшению стимуляции интегриновых рецепторов, которые в свою очередь приводят к улучшению иммунитета и, таким образом, снижению риска инфекций и последующему уменьшению применения антибиотиков.

Применение настоящего изобретения также может быть основано на данных литературы, которые показывают, что инсулин-подобный фактор роста 1 (IGF-1) вовлечен в различные симптомы. Композиция настоящего изобретения приводит к повышению уровня IGF-1 в сыворотке крови и, таким образом, она полезна при лечении состояний, в которых уровень IGF-1 снижается. В значимых публикациях, указанных ниже, перечислены те, которые служат доказательством применения изобретения при лечении различных симптомов.

Применение для лечения остеопороза основано на следующих литературных отсылках: "Endocrine causes of age-related bone loss and osteoporosis", Riggs B.L., Novartis Found. Symp 242 (2002): 247-259; "Serum insulin like growth factor I, bone mineral density and biochemical markers of bone metabolism in children with idiopathic osteoporosis", Chlebna-Sokol D., Rusinka A., Endocr. Regul. 35 (2001): 201-208; "Effects of growth hormone and insuline like growth factor I on body growth and adult bone metabolism", Ohisson C., Jansson Jo, Isaksson O., Curr. Opin. Rheumatol. 12 (2000): 346-348; "Comparison of serum insulin-like growth factor-I and growth hormone levels in osteoporotic and non osteoporotic post menopausal women", Celiker R., Arslan S., Rheumatol. Int. 19 (2000): 205-208; "Does macular hole formation have a hormonal cause?", Klin. Oczna. 102 (2000): 191-193; "Low serum IgF-I and I of osteo porotic fractures in post menopausal women", Gamero P., Somay-Rendu E., Delmas P.D., The Lancet 355 (2000): 9207; "Effects on growth hormone on phosphocalcium homeostasis and bone metabolism", Saggese G., Baroncelli G.I., Federico G., Bertelloni S., Harm. Res. 94 suppl. 3 (1995): 55-63; "Growth hormone (GH) and adult bone remodeling: the potential use of GH in treatment of osteoporosis", Brixen K., Kassem M., Eriksen E.F., Nielsen H.K., Flyvbjerg A., Mosekilo L., J. Pedriatr. Endocrinol. 6 (1993): 65-71.

Применение изобретения для лечения раздраженной прямой кишки основано на следующих литературных отсылках: "Chronic inflammation and the effect of IgF-1 on muscle strength and power in older persons", Barbieri M., Ferrucci L., Rogno E., Corsi A., Bandinelli A., Bonafe M., Olivieri F., Giovagnetti S., Franceschi C., Guralnik J.M., Paolisso G., Am. J. Physiol. Endocinol. Metab. 284 (2003): E 481.1.; "Reduces serum insulin-like growth factor I (IgF-1) and IgF binding protein-3 levels in adults with inflammatory bowel disease", Katsanos K.H., Tsatsoulis A., Christdoulon D., Challa A., Katsaraki A., Tsianos E.V., Growth Horm. IgF Res. 11 (2001): 364-367; "Insulin-like growth factor-1 (IgF-1) and growth hormone (GH) in immunity and inflammation", Heemskerk V.H., Daemen M.A., Buurman W.A., Cytokine Growth Factor Rev. 10 (1999): 5-14.

Стимуляция иммунитета с помощью настоящего изобретения основана на следующей литературе: "Cytokine profile of rheumatoid module suggests that it is: Th I granuloma", Hersian P.A., Highton J., Kean A., Sun C.K., Chin M., Arthritis Rheum. 48 (2003): 334-338; "Newly available treatments for psoriatic arthritis and their impact on skin psoriasis", Galadari H., Fuchs В., Lebwohl M., Int. J. Dermatol. 42 (2003): 231-237; "Anti TNF-alpha therapy for rheumatoid arthritis; an update", Taylor P.C., Intern Med. 42 (2003): 15-20; "IgF-1 inhibits spontaneous apoptosis in human granulocytes", Kooijman R., Coppens A., Hooghe-Peters E., Endocrinology 143 (2002): 1206-1212; "Tissue-specific regulation of IgF-1 and IgF-binding proteins in respons to TNF-X", Charles H. Lang, Gerald J. Nystrom, and Robert A. Frost. Growth Hormone & IgF Research 11 (2001): 250-260; "The roles of Prolactin, Growth Hormone, Insuline-like Growth Factor-1 and Thyroid Hormones in lymphocyte development and function: insights from genetic models of hormone and hormone receptor deficiency", Kenneth Dorshkid and Nelson D. Horseman, Endocrine Reviews 21 (2000): 292-312; "The Thymus and the acute phase response", Haeryfar S.M., Bercri, Cell. Mol. Biol. 47 (2001): 145-146; "Prolactin, growth hormone and the immune system in humans", Velkeniers В., Doguson Z., Naessens F., Hooghe R., Hooghe-Peters E.L., Cell Mod. Life Sci. 54 (1998): 1102-1108; "Effects of growth hormone and insuline-like growth factor I binding to natural killer cells", Bidlingmaier M., Auemhammer C.J., Feldmeier H., Strasburger C.J., Acta Paediatr. Suppl. 423 (1997): 80-81; "The somatogenic hormones and Insulin-like growth Factor I: stimulators of lymphopoiesis and immune function", Ross dark, Endocrine Reviews 18 (1997): 157-179; "The immune effects of neuro peptides", Berezi I., Chalmers I.M., Nagy E., Warrington R.J., Baillieres Chin. Rheumatol. 10 (1996): 227-257; "Effects of growth hormone and Insuline-like growth factor I on the immune system", Auernhammer C.J., Strasburger C.J., Eur. J. Endocrinol. 133 (1995): 635-645.

Применение настоящего изобретения для лечения депрессии и болезни Альцгеймера основано на следующих литературных отсылках: "Initiation factor 2B activity is regulated by protein phosphatase 1, which is activated by the mitogen-activated kinase (MAPK)-dependent pathway in insulin like growth factor 1-stimulated neuronal cells", Quevedo C., Salinas M., Alcazar A., J. Biol. Chem. 6 (2002): 638-639; "Adenoviral gene transfer of GDNF, BDNF and TGF beta 2, but not CNTF cardiotrophin-I or IgF-I, protects injured adult motoneurons after facial nerve avulsion", Sakamoto I., Kawazoey, Shen J.S., Takeday, Arakawa Y., Ogawa I., Oyanagi К., Ohashi I., Watanabek, Inoueh, Eto Y., Watabe K., J. Neurosci. Res. 72 (2003): 54-64; "Serum insulin-like growth factor I regulates brain amyloid beta levels", Caro E., Trejo J.L., Gomer-Isla Т., Le Roith D., Torres-Aleman I., Nat. Med. 8 (2002): 1390-1397; "Circulating Insuline-like Growth factor I mediates the protective effects of physical exercise against brain insults of different etiology and anatomy", Cairo E., Trejo J.L., Busiguina S., Torres-Aleman I., J. Neurosci. 21 (2001): 5678-5684; "Estrogen augments glucose transporter and IgF-1 expression in primate cerebral cortex", Cheng C.M., Cohen M., Wang J., Bondy C.A., Faseb. J. 15 (2001): 907-915; "Insulin like growth factor I induced survival of axotomized olfactory neurons in the chick", Mathonnet M., Comti I., Lallone F., Ayer-le Lievvre C., Neuosci. left. 308 (2001): 3: 67-70; "Insulin-like growth factor I regulates developing brain glucose metabolism", Cheng C.M., Reinhardt R.R., Lee W.H., Joncas G.. Patel S.C., Bondy C.A., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 29, 97 (2000): 10236-10246.

Эффект композиции настоящего изобретения, направленный на замедление старения, основан на следующей литературе: "Models of growth hormone and IgF-1 deficiency: application to studies of aging processes and life-span determination", Carter C.S., Ramsey M.M., Ingram R.L., Coshion A.B., Cefaki W.T., Wang Z.Q., Sonntag W.E., J. Gerontol. A. Bid. Sci. Med. Sci. 57 (2002): В 177-188; "Effects of growth hormone and insuline-like growth factor I deficiency on ageing and longevity", Laron Z., Novartis Found. Symp.242 (2002): 125-137; "Growth hormone, somatomedins and men's health", Beckers A.J., Uckert S., StiefC.G., Jonas U., Aging Male 5 (2002): 258-262; "Growth hormone in the elderly man", Riedl M., Kotzmann H., Luger A., Wien. Med. Wochenschr. 151 (2001): 426-429; "Growth hormone, insuline-like growth factor I and cognitive function in adults". Van Dam P.S., Aleman A., de Vries W.R., Deijen J.B., van der Veen E.V., de Haan E.H., Koppeschaar H.P., Growth Horm. IgF Res. 10 suppl. В (2000): S69-73; "Growth hormone and insulin like growth factor I as anabolic agents", Weel S., Curr. Opin. Chin. Nutr. Metab. Care 1 (1998): 257-262; "Growth hormone secretion in the elderly; ageing and the somatopause", Martin F.C., YEO AL., Sonksen P.H., Baillieres Chin. Endocrinol. Metab. 11 (1997): 223-250; "Fuel metabolism in growth hormone deficient adults", Jorgensen J.O., Moller N., Wolthers Т., Moller J., Grofte Т., Vahl N., Fisker S., Orskov H., Christiansen J.S., Metabolism 44 (1995): 103-107; "Human growth hormone and human aging", Corpas E., Harman S.M., Blackman M.R., Endocr. Rev. 14 (1993): 20-39; "Aging and anti-aging effects of hormones", Everitt A., Meites J., J. Gerontol. 44 (1989): B139-147.

Применение изобретения для лечения диабета 2-го типа может быть основано на следующих отсылках: "Association between the insulin resistance of puberty and the insuline-like growth factor I/growth hormone axis", Moran A., Jacobs D.R., Steinberger J., Cohen P., Hong C.P., Prineas I., Sinaiko A.R., J. Chin. Endocrinol. Metab. 87 (2002): 4817-4820; "IgF-I/IgF binding protein-3 combination improves insulin resistance by GH dependent and independent mechanisms", O'Connell Т., Celmmons D.R., J. Chin. Endocrinol. Metab. 87 (2002): 4356-4360; "Defective insuline secretion in pancreatic beta cells lacking type I IgF receptor", Xuan S., Kitamura Т., Nakae J., Politi K., Kido Y., Fisher P.E., Morroni M., Cinti S., White M.F., Herrera P.L., Accili D., Efstratiadis A., J. Clin. Invest. 110 (2002): 1011-1019; "Structure and autoregulation of the insuline-like growth factor I receptor kinase", Favelyukis S., Till J.H., Hubbard S.R., Millar W.T., Nat. Struct, Biol. 8 (2001): 1058-1063; "Distinct and overlapping functions of insulin and IgF-1 receptors", Nakae J., Kido Y., Accili D., Endocr. Rev. 22 (2001): 818-835; "Glucose effects on skin keratinocytes: implications for diabetes skin complications", Sprachikov N., Sizyakov G., Gartsbein M., Accili D., Tennenbaum Т., Wertheimer E., Diabetes 50 (2001): 1627-1635; "Lack of insulin like growth factor I (IgF-I) in the basal keratinocyte layer of diabetic skin and diabetic foot ulcers", Blakytny R., Jude E.B., Martin Gibson J., Boulton A.J., Ferguson M.W., J. Pathol. 90 АО (2000): 589-594; "Current status and future prospects of parenteral insulin regimens, strategies and delivery systems for diabetes treatment", Jeandidier N., Boivin S., Aav. DrugDeliv. Rev. 35 (1999): 179-198.

Композиция настоящего изобретения, кроме того, полезна для стимулирования мышц, таких как сердечная мышца, что следует из приведенной ниже литературы: "Regulation of insulin-like growth factor I in skeletal muscle and muscle cells". Frost R.A., Lang C.H., Minerva Endocrinol. 28 (2003): 53-73; "Cardiac specific IgF-1 expression attenuates dilated cardiomyopathy in tropomodulin-overexpressing transgenic mice", Wiech S., Plank D., Witt S., Glascock В., Schaefer E., Chimentis, Andreoli A.M., Limana F., Ceri A., Kajstura J., Anversa P., Sussman M., Circ. Res. 95 (2002): 90: 641-648; "IgF-I activates PKC alpha-dependant protein synthesis in adult rat cardiomyocytes", Pecherskaya A., Solem M., Moll. Cell. Biol. Res. Commun. 4 (2000): 166-171; "Insulin like growth factor-I receptor and its lig and regulate the reentry of adult ventricular myocytes into the cell cycle", Reiss K., Cheng W., Pierchalski P., Kodali S., Li В., Wang S., Liu Y., Anversa P., Exp. Cell Res. 235 (1997): 198-209; "Overexpression of insulin-like growth factor I in mice protect from myocyte death after infarction, attennocting ventricular dilation, wall stress, and cardiac hypertrophy", Li Q., Li В., Wang X., Leri A., Jana K.P., Liu Y., Kajstura J., Baserga R., Anversa P., J. din. Invest. 100 (1997): 1991-1999; "Myo cardial infarction and the myocyte IgF-I autocrine system", Anversa P., Reiss K., Kajstura J., Cheng W., Li P., Sonneblick E.H., Olivetti G., Eur. Heart J. 16 suppl.(1995): 37-45; "Upregulation of IgF I, IgFI-receptor, and late growth related genes in ventricular myocytes acutely after infaction in rats", Reiss K., Meggs L.G., Li P., Olivetti G., Capasso J.M., Anversa P, J. Cell Physiol. 158 (1994):160-168.

Далее настоящее изобретение будет проиллюстрировано с помощью приведенных ниже примеров, которые не ограничивают объем изобретения. Сделана отсылка на следующие фигуры:

Описание фигур

Фигура 1: Изменение во времени уровня IGF-I и IGF-BP3 в плазме крови 8 пациентов, страдающих CFS. Пациентов лечили с помощью пищевой добавки настоящего изобретения,

Фигура 2: Уровень IGF-1 в нмоль/л у пациентов с диабетом 2-го типа во время лечения с помощью ИУК.

Фигура 3: Соотношение IGF-BP3/IGF-1 у пациентов с диабетом 2-го типа во время лечения с помощью ИУК.

Фигура 4: Уровень HbAlc (гемоглобин Alc) у пациентов с диабетом 2-го типа во время лечения с помощью ИУК.

Фигура 5А-В: Уровень IGF-1 у субъектов с основными проблемами замедления старения во время лечения с помощью композиции настоящего изобретения.

Фигура 6А-В: Уровень жалоб пациентов с основными проблемами замедления старения во время лечения с помощью композиции настоящего изобретения.

Фигура 7А-В: Уровень активности пациентов с основными проблемами замедления старения во время лечения с помощью композиции настоящего изобретения.

Фигура 8: Уровень IGF-1 у атлетов, принимающих ИУК или плацебо.

Примеры

Пример 1

Применение композиции настоящего изобретения для лечения синдрома хронической усталости

1. Введение

Синдром хронической усталости (CFS) клинически характеризуется ощущениями усталости, которые существуют более 6 месяцев, в отсутствие точного медицинского диагноза. Симптоматика у пациентов с CFS очень широка и включает нейрокогнитивные проблемы, мышечные боли, множественные боли в суставах, головную боль, невосстанавливающий сон, недомогание после усилий, аденопатию и фарингит. Из-за относительно высокой распространенности (117/100000 взрослых в Нидерландах) и недоступности успешного лечения эти состояния обременяют общество как по отношению к медицинскому обслуживанию, так и по отношению к экономике. Этот пример показывает влияние соединений настоящего изобретения на течение CFS. Добавка в качестве активного ингредиента содержит ауксин и повышает уровень IGF-1 в плазме крови.

2. Материалы и методы

Восемь женщин различного возраста от 25 до 53 лет, имевших тяжелые симптомы усталости, которые делали их неспособными к нормальному функционированию, как во время работы, так и в свободное время. У всех отмечалась избыточная необходимость во сне, который никогда не был восстанавливающим, даже если он был продолжительным (более чем 12 часов). После исключения всех других диагнозов и инфекций женщины были диагностированы как больные CFS. Физическое обследование сердца и легких не выявило никаких отклонений от нормы. На анализ были отобраны образцы крови объемом 20 мл и были определены функции печени и почек, гемограмма эритроцитов и лейкоцитов, уровень IGF-1 и IGF-BP3. Пациенты принимали композиции настоящего изобретения в количестве 1000 мг/день (что соответствовало 40 мг ИУК и 960 мг соли и WPC 70) в течение 4 недель. После этого каждые 2 недели дозировку уменьшали на 250 мг (что соответствовало 10 мг ИУК) до 750 мг/день, 500 мг/день, 250 мг/день, соответственно. Через 1, 3 и 5-7 месяцев терапии проводили проверку и отбирали образцы крови (для определения IGF-1 и IGF-BP3).

В начале исследования и на каждой стадии проверки оценивали степень участия в работе и физическую активность по шкале от 1 до 10 и наносили на график в виде % от нормальной активности пациентов. Анализы гормонов на присутствие IGF-1 проводили с помощью иммуноанализа (DSL-5600 ACTIVE™, DSL Deutschland GmbH, Germany), обладающего расхождением внутри одного эксперимента в 3,0% и расхождением между различными экспериментами в 4,9%. Уровень IGF-BP3 определяли с помощью иммуноанализа (DSL-5600 ACTIVE™, DSL Deutschland GmbH, Germany), обладающего расхождением внутри одного эксперимента в 4,4% и расхождением между различными экспериментами в 6,6%.

3. Статистика

Все значения представлены как среднее ±SD. Для выявления различий между значениями уровня гормона в каждой точке времени применяли двухвыборочный критерий Вилкоксона. В случаях, если было обнаружено значение p<0,05, различия считали значимыми.

4. Результаты

У всех пациентов наблюдали серьезные ограничения, приводящие к высокому уровню непосещаемости работы. Участие в работе и уровень физической активности всех восьми женщин перед началом лечения были очень низкими. Только две пациентки работали от 1 до 1,5 дня в неделю. Считалось, что обычная активность, например поднимание по лестнице или прогулка, были невозможны или непосильны для них. Однако уже через 1 месяц лечения от 5 до 8 женщин работали 1 или несколько дней, тогда как все ощущали, что их возможность выполнять обычную физическую работу значительно выросла.

Через 5 месяцев терапии участие в работе выросло до 69,4% (50-100%), в то время как в группе плацебо оно оставалось таким же, как перед началом терапии.

Только у трех пациенток уровень IGF-1 в плазме крови (Фиг.1) при первом визите был выше, чем стандартное значение 20 мкг/л. Значения IGF-1 в плазме крови значительно повышались после 1 месяца лечения композицией настоящего изобретения (p<0,001), эта тенденция сохранялась после 3 месяцев лечения (p<0,01), после чего значения существенным образом не увеличивались.

Значение IGF-BP3 в плазме (Фиг.1) все время снижалось. Это означает, что увеличивался уровень свободного IGF-1.

5. Обсуждение результатов

Оказалось, что композиция настоящего изобретения положительно влияет на течение CFS. Это сопровождается значительным увеличением уровня IGF-1 в плазме крови и снижением концентрации основного связывающего белка IGF-BP3. Это означает, что концентрация свободного IGF-1 (биологически активной фракции) в крови повышается.

Пример 2

Изучение группы 20 пациентов дважды слепым методом

В схеме следующего исследования для контроля применяли дважды слепой метод с применением плацебо. В исследование были включены 20 субъектов с диагностированным CFS и их лечили или с помощью композиции настоящего изобретения (10 мг ИУК, 100 мг NaCl, 140 мг WPC 70) в течение 3 месяцев, или с помощью плацебо. После этого периода времени у 54% субъектов, получавших композицию изобретения, улучшилось настроение, на что указывала анкета адаптированного профиля настроения (POMS), по сравнению с 15% пациентов из группы плацебо. Значения IGF-1 увеличились у 40% пациентов из группы, подвергавшейся лечению, и остались практически неизменными в группе плацебо.

Пример 3

Дважды слепое, контролируемое с помощью группы плацебо исследование композиции изобретения с применением аминокислот у пациентов с синдромом хронической усталости

В исследование включили девяносто субъектов, страдающих CFS (в соответствии с определением Холмса и/или Фукуда). Им не разрешали принимать никакие другие виды лечения, кроме слабых обезболивающих и гомеопатических средств. В начале лечения, на 4-й неделе и на 8-й неделе определяли IGF-1, IGF-BP3 и параметры безопасности, такие как анализы печени и гематология. Протокол лечения включал прием 250 мг композиции изобретения 4 раза в день в течение 4 недель (10 мг ИУК, 100 мг NaCl и 140 мг WPC 70) в комбинации с препаратом аминокислот All-Amino S (Optipharm) (Таблица 3-1) и затем прием 250 мг композиции изобретения 2 раза в день в течение 4 недель в комбинации с препаратом аминокислот. Первичный параметр эффективности представлял собой изменение базовой линии при CFS, измеренной по шкале общего клинического впечатления (CGI) через 4 и 8 недель лечения.

Таблица 3-1
Композиция All-Amino S Аминокислота мг в капсуле мг/г порошка L-лизин гидрохлорид 50 43,2 L-гистидин основной 30 25,9 L-аргинин основной 125 108 L-аспарагин моно 74 63,9 L-треонин 41 35,4 L-серин 53 45,8 L-пролин 110 95 L-аланин 34 29,4 L-цистин 9,4 8,1 L-валин 71,5 61,7 L-метионин 32 27,6 L-изолейцин 59 50,9 L-тирозин 16 13,8 L-лейцин 102 88,2 L-фенилаланин 22 19 L-триптофан 13 11,2 L-цистеин моно 10 8,6 L-глутамин 15,3 13,2 L-таурин 10,7 9,2 L-глутаминовая кислота 230 199 L-карнитин 50 43,2

В испытуемой группе уровень IGF-1 на 4-й и 8-й значительно повышался по сравнению с группой плацебо (р<0,0002). В испытуемой группе 54% отмечали улучшение симптомов по сравнению с 16% в группе плацебо. Изменение симптомов по шкале CGI давало улучшение в группе, получавшей композицию настоящего изобретения на 4-й неделе (р<0,004) и на 8-й неделе (р<0,0003). В группе плацебо существенных изменений отмечено не было.

Пример 4

Применение композиции изобретения пациентами с диабетом 2-го типа

1. Введение

Система IGF-1 и его связывающие белки представляют собой сложную систему со многими физиологическими функциями, включающими метаболическую регуляцию. Этот пример приведен для того, чтобы описать изменения специфических компонентов этой системы у пациентов с диабетом 2-го типа. Проводили клиническое обследование и определение концентрации IGF-1 и IGF-BP3 в сыворотке крови, которые изменялись под воздействием пищевой добавки с ИУК. Подтверждена взаимосвязь между гликемическим контролем и уровнем IGF-1 в сыворотке крови с худшим контролем, ассоциированным с пониженным уровнем IGF-1.

2. Материалы и методы

Пациенты

В исследовании принимали участие 5 мужчин, больных диабетом 2-го типа. Все они представляли собой случаи, трудные для стабилизации их состояния. В начале исследования среднее значение HbAlc составляло около 9,0%. У пациентов отсутствовали другие клинические проблемы. Также соотношение IGF-BP3/IGF-1 должно было превышать 10. Возраст субъектов составлял от 45 до 75 лет со средним значением в 58 лет. Период исследования составил 6 месяцев. В начале исследования, после 2 месяцев, 4 месяцев и в конце исследования после 6 месяцев брали кровь. Проверяли следующие параметры: IGF-1 и IGF-BP3. В начале исследования также определяли параметры безопасности (исследования печени, гематология). Каждые 8 недель определяли HbAlc. Тест на HbAlc представляет собой лабораторное исследование, в котором выявляют среднее значение уровня глюкозы в крови за период от двух до трех месяцев.

Все образцы от одного субъекта анализировали в одном и том же опыте, чтобы избежать расхождения результатов внутри анализа. Количественную оценку уровня IGF-1 проводили с помощью иммунорадиометрического анализа (IRMA) (DSL-5600 ACTIVE™, DSL, Germany GmbH, Germany). Расхождения в одном анализе и в различных анализах составили: 4,0% и 9,2% и 1,5% для IGF-1. HbAlc анализировали на HPLC Menarine НА 81-60.

Расчеты и статистика

Суммарные рабочие выходные данные каждого субъекта рассчитывали с помощью двухстороннего анализа ANOVA для повторных измерений, а величины уровня гормонов анализировали с помощью критерия Вилкоксона. Во всех случаях величину p<0,05 считали значимой.

Лечение с помощью ИУК

Одна капсула ИУК содержала 10 мг ИУК, 100 мг NaCl и 140 мг WPC 70.

Месяц 1-й и 2-й

ИУК утром 1 мг (1 капсула)   днем 1 мг (1 капсула)   вечером 1 мг (1 капсула)

Месяц 3-й и 4-й

ИУК утром 1 мг (1 капсула)   вечером 1 мг (1 капсула)

Месяц 5-й и 6-й

ИУК утром 1 мг (1 капсула)

3. Результаты

У всех субъектов средний уровень IGF-1 после 6 месяцев повысился от 10,8 нмоль/л до 14,1 (Таблица 4-1). Все субъекты начинали с соотношения 10,6. После 6 месяцев соотношение составляло 6,8 (Таблица 4-2). HbAlc снизился от 9,0 до 6,7% (Таблица 4-3).

Таблица 4-1
Уровень IGF-1 в нмоль/л   Месяц 0 Месяц 1 Месяц 2 Месяц 3 Месяц 4 Месяц 5 Месяц 6 Субъект 1 11,1 12,5 13,1 13,8 14,3 14,9 15,2 Субъект 2 9,6 10,1 10,6 11,1 11,8 12,1 12,9 Субъект 3 10,4 10,8 11,6 12,1 12,6 13,3 13,9 Субъект 4 11,2 11,6 11,9 12,3 12,8 13,3 14,4 Субъект 5 11,3 12,0 12,6 13,0 13,5 13,9 14,3 Среднее 10,7 11,4 12,0 12,5 13,0 13,5 14,1

Таблица 4-2
Соотношение IGF-BP3/IGF-1   Месяц 0 Месяц 1 Месяц 2 Месяц 3 Месяц 4 Месяц 5 Месяц 6 Субъект 1 10,2 9,7 9,0 8,6 8,0 7,2 6,6 Субъект 2 10,6 10,1 8,6 8,3 7,6 6,8 6,3 Субъект 3 10,8 9,9 9.4 8,9 8,3 7,6 7,2 Субъект 4 11,3 10,8 9,2 8,8 7,8 7,3 6,9 Субъект 5 10,0 8,9 8,5 8,1 7,6 7,2 6,9 Среднее 10,6 9,9 8,9 8,5 7,9 7,2 6,8

Таблица 4-3
HbAlc   Неделя 0 Неделя 8 Неделя 16 Неделя 24 Субъект 1 9,6 8,9 8,0 7,4 Субъект 2 9,0 8,2 7,1 6,4 Субъект 3 9,1 8,3 7,4 6,6 Субъект 4 8,6 7,6 6,9 6,3 Субъект 5 8,8 8,3 7,6 6,8 Среднее 9,0 8,3 7,4 6,7

4. Обсуждение результатов

После лечения пациенты чувствовали себя лучше.

Пример 5

Применение изобретения для лечения субъектов с общими проблемами старения

1. Методы

В исследовании участвовали 180 субъектов, страдающих утомляемостью, депрессией, проблемами концентрации, стрессом («перегорание») и плохим состоянием. При исследовании исключали другие виды лечения. Период лечения составил 6 месяцев. Не разрешалось принимать любое другое лечение. На базисном уровне, в начале лечения, после 1 месяца, 2 месяцев и 3 месяцев лечения определяли IGF-1, IGF-BP3 и параметры безопасности (исследование печени, гематология). Каждый месяц контролировали уровень IGF-1 и IGF-BP3. Протокол лечения включал прием 1 пакетика-саше, включающего препарат настоящего изобретения, в течение 3 месяцев (75 мг акклидина, что соответствует 3,75 мг ИУК) или утром, или вечером.

Состав пакетика-саше, замедляющего старение, в соответствии с настоящим изобретением

Витамины   Минералы   витамин А 1,833 М.Е. окись магния 33,3 мг β-каротин 2,333 М.Е. калий 16,6 мг витамин В 1 (тиамин) 16,6 мг Следовые элементы   витамин В2 (рибофлавин) 12,5 мг хром 33,3 мкг витамин В6 12,5 мг цинк 8,3 мг витамин В12 15 мкг йод 25 мкг витамин С 600 мг марганец 1,6 мг витамин Е (D-α-токоферол) 58,3 мг селен 33,3 мкг витамин D3 31 М.Е. молибден 16,6 мкг фолиевая кислота 125 мкг бор 330 мкг ниацин 25 мг Аминокислоты   ниацинамид 25 мг L-цистеин 33.3 мг витамин В5 (пантотеновая 75 мг DL-метионин 11,6 мг кислота)       биотин 50 мкг глутамин 500 мг биофлавоновый комплекс 16,6 мг бетаин 30 мг РАВА 8,3 мг Остальные элементы инозитол 12,5 мг экстракт сосновых шишек 20 мг холин 25 мг экстракт виноградных орехов 80 мг     акклидин (3,75 мг ИУК, 30 мг NaCl, 41,25 мг WPC 70) 75 мг    

Первичный параметр эффективности представлял собой изменение базовой линии при CFS, оцениваемое с помощью анкеты (активности и жалобы, см. Приложение 1 и 2) и по значениям IGF-1 и IGF-BP3.

Субъектов поделили на следующие группы:

А 30-45 лет 30 пакетиков-саше настоящего изобретения 30 плацебо Испытуемая группа А Мужчины Женщины   14 16 Группа плацебо А Мужчины Женщины   12 18

В 46-60 лет 30 пакетиков-саше настоящего изобретения 30 плацебо Испытуемая группа В Мужчины Женщины   17 13 Группа плацебо В Мужчины Женщины   15 15

C >61 года 30 пакетиков-саше настоящего изобретения 30 плацебо Испытуемая группа С Мужчины Женщины   14 16 Группа плацебо С Мужчины Женщины   16 14

Перед началом исследования все субъекты заполнили анкету (Приложение 1 и 2). Эту процедуру повторяли каждый месяц, в то время как брали кровь. Анкета поделена на две части (названные здесь как «часть 1» и «часть 2»).

Часть 1 дает представление о том, какие возникают жалобы и насколько они были серьезными в трехмесячный период. Эта часть имела шкалу оценки от 0 до 4.

Часть 2 дает представление о видах деятельности, которые выполнялись за трехмесячный период. Эта часть имела шкалу оценки от 0 до 4.

Истолкование шкалы части 1.

4. У субъекта были очень серьезные/значительные жалобы.

3. У субъекта были существенные жалобы.

2. У субъекта были умеренные жалобы.

1. У субъекта были небольшие жалобы.

0. У субъекта совсем не было жалоб.

Истолкование шкалы части 2.

4. Субъект почти не принимал участия ни в какой работе.

3. Субъект выполнял немного работы.

2. Субъект выполнял умеренное количество работы.

1. Субъект выполнял значительное количество работы.

0. Субъект мог выполнять любую работу, которую он (она) хотели выполнить.

2. Материалы

Все образцы от одного субъекта анализировали в одном и том же опыте, чтобы избежать расхождения результатов внутри одного анализа. GH анализировали с помощью хемилюминесцентного набора (Nichols Institute Diagnostics, San Juan Capistrano, CA, USA). Количественную оценку уровня IGF-1 и IGF-ВР3 проводили с помощью иммунорадиометрического анализа (IRMA) (DSL-5600 ACTIVE™, DSL, Germany GmbH, Germany). Расхождения в одном анализе и в различных анализах составили: 4,0% и 9,2% для GH; 3,0% и 1,5% для IGF-1 и 4,4% и 6,6% для IFG-BP3.

Расчеты и статистика

Суммарные выходные данные для каждого субъекта рассчитывали с помощью двухстороннего анализа ANOVA для повторных измерений, а величины уровня гормонов анализировали с помощью критерия Вилкоксона. Во всех случаях величину р<0,05 считали значимой.

3. Результаты

Концентрации IGF-1

Группа А

В группе, которой давали композицию настоящего изобретения, уровень IGF-1 повышался статистически значимо за период 3 месяца с са. 19% (Таблица 5-1). В момент времени 0 (начало исследования) средний уровень составил 25,1 нмоль/л. В момент времени 3 (конец исследования) средний уровень IGF-1 составил 29,9 нмоль/л.

Уровень IGF-1 в группе плацебо не демонстрировал существенных различий. В момент времени 0 (начало исследования) средний уровень составил 26,0 нмоль/л. В момент времени 3 (конец исследования) средний уровень IGF-1 составил 25,9 нмоль/л.

Группа В

В группе, которой давали композицию настоящего изобретения, уровень IGF-1 повышался статистически значимо за период 3 месяца с са. 24% (Таблица 5-1). В момент времени 0 средний уровень составил 20,6 нмоль/л. В момент времени 3 средний уровень IGF-1 составил 25,6 нмоль/л.

Уровень IGF-1 в группе плацебо не демонстрировал существенных различий. В момент времени 0 средний уровень составил 19,9 нмоль/л. В момент времени 3 средний уровень IGF-1 составил 20,4 нмоль/л.

Группа С

В группе, которой давали композицию настоящего изобретения, уровень IGF-1 повышался статистически значимо за период 3 месяца с са. 35% (Таблица 5-1). В момент времени 0 средний уровень составил 14,9 нмоль/л. В момент времени 3 средний уровень IGF-1 составил 20,3 нмоль/л.

Уровень IGF-1 в группе плацебо не демонстрировал существенных различий. В момент времени 0 средний уровень составил 14,5 нмоль/л. В момент времени 3 средний уровень IGF-1 составил 14,4 нмоль/л.

Таблица 5-1
Уровень IGF-1 в нмоль/л   Время в месяцах Группа А 0 1 2 3 Среднее значение в испытуемой группе 25,1 28 29,4 29,9 SD в испытуемой группе 3,44 3,12 3,22 3,08 Среднее значение в группе плацебо 26 27,1 25,4 25,9 SD в группе плацебо 3,6 3,42 3,32 3,51 Группа В 0 1 2 3 Среднее значение в испытуемой группе 20,6 24,1 25 25,6 SD в испытуемой группе 3,03 3,29 3,1 3,21 Среднее значение в группе плацебо 19,9 20,7 19,2 20,4 SD в группе плацебо 2,99 3,4 3,22 3,25 Группа С 0 1 2 3 Среднее значение в испытуемой группе 14,9 17,9 19,4 20,3 SD в испытуемой группе 1,94 2,14 1,88 2,38 Среднее значение в группе плацебо 14,5 14 15,1 14,4 SD в группе плацебо 1,96 1,67 2,02 1,97

Жалобы

Группа А

В группе, которой давали композицию настоящего изобретения, количество жалоб снижалось статистически значимо за период 3 месяца (Таблица 5-2). В момент времени 0 средний уровень составил 2,88. В момент времени 3 средний уровень составил 0,62.

Уровень в группе плацебо не демонстрировал существенных различий. В момент времени 0 средний уровень составил 2,9. В момент времени 3 средний уровень составил 2,79.

Группа В

В группе, которая получала композицию настоящего изобретения, количество жалоб снижалось статистически значимо за период 3 месяца (Таблица 5-2). В момент времени 0 средний уровень составил 3,18. В момент времени 3 он составил 0,75.

Уровень в группе плацебо не демонстрировал существенных различий. В момент времени 0 средний уровень составил 3,15. В момент времени 3 он составил 3,10.

Группа С

В группе, которой давали композицию настоящего изобретения, количество жалоб снижалось статистически значимо за период 3 месяца (Таблица 5-2). В момент времени 0 средний уровень составил 3,56. В момент времени 3 он составил 0,72.

Уровень в группе плацебо не демонстрировал существенных различий. В момент времени 0 средний уровень составил 3,60. В момент времени 3 он составил 3,65.

Таблица 5-2
Группа А   Месяц 0 Месяц 1 Месяц 2 Месяц 3 Среднее значение в испытуемой группе 2,88 2,02 1,11 0,62 SD в испытуемой группе 0,31 0,26 0,21 0,15 Среднее значение в группе плацебо 2,9 2,69 2,88 2,79 SD в группе плацебо 0,31 0,24 0,29 0,32 Группа В   Месяц 0 Месяц 1 Месяц 2 Месяц 3 Среднее значение в испытуемой группе 3,18 2,28 1,34 0,75 SD в испытуемой группе 0,32 0,25 0,23 0,12 Среднее значение в группе плацебо 3,15 2,99 2,97 3,1 SD в группе плацебо 0,3 0,28 0,34 0,31 Группа С   Месяц 0 Месяц 1 Месяц 2 Месяц 3 Среднее значение в испытуемой группе 3,56 2,41 1,27 0,72 SD в испытуемой группе 0,27 0,22 0,25 0,2 Среднее значение в группе плацебо 3,6 3,44 3,48 3,56 SD в группе плацебо 0,3 0,24 0,29 0,31

Активность

Группа А

В группе, которая получала композицию настоящего изобретения, показатели активности снижались статистически значимо за период 3 месяца (Таблица 5-3). В момент времени 0 средний уровень составил 2,11. В момент времени 3 средний уровень составил 0,77.

Уровень активностей в группе плацебо не демонстрировал существенных различий. В момент времени 0 средний уровень составил 2,04. В момент времени 3 средний уровень составил 2,02.

Группа В

В группе, которая получала композицию настоящего изобретения, показатели активности снижались статистически значимо за период 3 месяца (Таблица 5-3). В момент времени 0 средний уровень составил 2,60. В момент времени 3 средний уровень составил 1,11.

Уровень активностей в группе плацебо не демонстрировал существенных различий. В момент времени 0 средний уровень составил 2,66. В момент времени 3 средний уровень составил 2,70.

Группа С

В группе, которой давали композицию настоящего изобретения, показатели активности снижались статистически значимо за период 3 месяца (Таблица 5-3). В момент времени 0 средний уровень составил 3,28. В момент времени 3 средний уровень составил 1,17.

Уровень активностей в группе плацебо не демонстрировал существенных различий. В момент времени 0 средний уровень составил 3,30. В момент времени 3 средний уровень составил 3,32.

Таблица 5-2
Группа А   Месяц 0 Месяц 1 Месяц 2 Месяц 3 Среднее значение в испытуемой группе 2,11 1,44 0,9 0,77 SD в испытуемой группе 0,28 0,33 0,29 0,3 Среднее значение в группе плацебо 2,04 1,76 1,88 2,02 SD в группе плацебо 0,29 0,3 0,27 0,29 Группа В   Месяц 0 Месяц 1 Месяц 2 Месяц 3 Среднее значение в испытуемой группе 2,6 1,88 1,4 1,11 SD в испытуемой группе 0,44 0,4 0,45 0,44 Среднее значение в группе плацебо 2,66 2,59 2,61 2,7 SD в группе плацебо 0,4 0,44 0,41 0,45 Группа С   Месяц 0 Месяц 1 Месяц 2 Месяц 3 Среднее значение в испытуемой группе 3,28 2,4 1,6 1,17 SD в испытуемой группе 0,6 0,69 0,63 0,65 Среднее значение в группе плацебо 3,3 3,2 3,25 3,32 SD в группе плацебо 0,67 0,54 0,6 0,65

4. Обсуждение результатов

Целью этого примера было исследование того, может ли композиция настоящего изобретения увеличить продуктивность работы. Результаты показывают, что композиция обладает эргогенным эффектом. Она не сильно увеличивает физическое действие, но усиливает способность выполнять повторяющиеся циклы энергичных упражнений. В группе плацебо не было обнаружено значительных изменений при выполнении действий, а также изменений психического состояния. Композиция настоящего изобретения дает улучшение всех симптомов. Субъекты из группы, которые применяли композицию, обладали повышенной энергичностью и чувствовали себя лучше. Также из анкеты можно заключить, что испытуемая группа чувствовала себя моложе, более оптимистично, неугнетено и более счастливо.

Пример 6

Пищевая добавка для спортсменов

1. Введение

Этот пример был представлен для исследования совместного влияния ИУК и интенсивных тренировок на уровень IGF-1. Эксперимент выполняли в течение 12 недель.

2. Методы

В исследование были включены 20 спортсменов. Из исследования исключили другие способы лечения. Время лечения составляло 12 недель. Спортсменам не было разрешено применять никакие другие способы лечения или пищевые добавки. Они продолжали свой уровень тренировок. Через 2 недели тренировки стали интенсивнее на 25%. На базисном уровне, в начале лечения, после 2 недель, 4 недель, 6 недель, 8 недель, 10 недель и после 12 недель определяли IGF-1 и параметры безопасности (исследование печени, гематология). Группу поделили на 2 группы по 10 спортсменов. Группа А получала ИУК, группа В получала плацебо.

Группа А 6 мужчин 4 женщины Группа В 5 мужчин 5 женщин

Все образцы от одного субъекта анализировали в одном и том же опыте, чтобы избежать расхождения результатов внутри одного анализа. GH анализировали с помощью хемилюминесцентного набора (Nichols Institute Diagnostics, San Juan Capistrano, CA, USA). Количественную оценку уровня IGF-1 проводили с помощью иммунорадиометрического анализа (IRMA) (DSL-5600 ACTIVE™, DSL, Germany GmbH, Germany). Расхождения в одном анализе и в различных анализах составили: 4,0% и 9,2% для GH; 3,0% и 1,5% для IGF-1.

Расчеты и статистика

Суммарные выходные данные для каждого субъекта рассчитывали с помощью двухстороннего анализа ANOVA для повторных измерений, а величины уровня гормонов анализировали с помощью критерия Вилкоксона. Во всех случаях величину p<0,05 считали значимой.

ИУК

Для приема пищевых добавок применяли следующую схему. Одна капсула ИУК содержала 10 мг ИУК, 100 мг NaCl, 140 мг WPC 70. Одна капсула глутамина содержала 500 мг глутамина. Принимаемые аминокислоты описаны в Таблице 3-1.

Неделя 1-я и 2-я ИУК утром 8 мг (2 капсулы)   вечером 8 мг (2 капсулы) Аминокислоты утром 5200 мг (6 капсул)   вечером 5200 мг (6 капсул) Глутамин утром 500 мг (1 капсула)   вечером 500 мг (1 капсула) Недели с 3-й по 12-ю ИУК утром 4 мг (1 капсула)   вечером 4 мг (1 капсула) Аминокислоты утром 2700 мг (3 капсул)   вечером 2700 мг (3 капсул) Глутамин утром 500 мг (1 капсула)   вечером 500 мг (1 капсула)

3. Результаты

В группе А, которая получала ИУК, уровень IGF-1 повышался статистически значимо за период 8 недель с са. 47,7% (Таблица 6-1). В момент времени 0 (начало исследования) средний уровень составил 27,9 нмоль/л. В конце исследования средний уровень IGF-1 составил 41,2 нмоль/л.

В группе В, которая получала плацебо, уровень IGF-1 снижался. В момент времени 0 (начало исследования) средний уровень составил 27,3 нмоль/л. В конце исследования средний уровень IGF-1 составил 17,8 нмоль/л.

Таблица 6-1
Уровень IGF-1 в нмоль/л Группа А 0 1 2 3 4 5 6 Среднее значение для испытуемой группы 27,9 35,8 38,9 42,5 41,7 41,4 41,2 SD для испытуемой группы 3,41 3,45 3,34 3,51 3,44 3,48 3,44 Группа В 0 1 2 3 4 5 6 Среднее значение для группы плацебо 27,3 27,1 24,1 22,6 20,5 19,2 17,8 SD для группы плацебо 3,42 3,51 3,47 3,43 3,45 3,39 3,24

4. Выводы

Группа, которая получала ИУК, в конце исследования выполняла работу лучше, спортсмены были более внимательными и сконцентрированными. Для группы плацебо рабочие параметры через 12 недель снижались. Интенсивная тренировка вызывала утомление в этой группе, тогда как активная группа все еще была в хорошей физической форме. Оказалось, что ИУК является эффективным продуктом для усиления рабочих параметров спортсменов.

Пример 7

Лечение плохо растущих поросят с помощью ИУК

1. Введение

Этот пример представлен для проверки теории об ухудшении функционирования оси гипоталамус-гипофиз-надпочечники (НРА) под действием инфекции и влияния лечения на здоровье и рост.

Испытания проводили на хорошо организованной ферме, в которой содержалась тысяча свиней датской породы Landrace. Хотя ферма была хорошо организована, техническое обеспечение не было оптимальным. Были скрытые проблемы, связанные со смертностью и скоростью роста поросят. Было достаточно много плохо растущих поросят без полного понимания технических или ветеринарных причин. На ферме не было обнаружено явной патологии.

2. Методы

Фермер выбрал плохо растущих поросят для периода отлучения их от матери. В начале испытания поросят отлучали от матери в течение двух дней. Было 3 группы: нормальные хорошо растущие поросята, которые служили контрольной группой, группа В с 78 плохо растущими поросятами, которых лечили с помощью ИУК (12,5 мг/кг живого веса), и группы Х с 53 плохо растущими животными, которые не подвергались лечению.

В каждой группе в начале и конце испытания отбирали образцы крови для измерения IGF-1. Два загона (на 13 поросят) для группы В и Х взвешивали в начале и конце испытания. Активный ингредиент ИУК смешивали с декстрозой. Эту смесь добавляли в пищу в количестве 5 г на поросенка в день, что составляло дозировку 12,5 мг/кг живого веса. Группа В подвергалась лечению в течение 5 дней после первого измерения IGF-1.

3. Результаты

Через два дня после отлучения от матери различий в уровне IGF-1 между 3 группами не было. Уровень IGF-1 был низким из-за стресса в результате отлучения. Но спустя уже одну неделю фермер отметил отчетливую разницу между группой В и группой X. Поросята в группе В выглядели лучше, животы были лучше заполнены и общий вид поросят стал улучшаться по сравнению с группой X.

Этот феномен стал более очевидным при продолжении лечения. В группе В стало меньше плохо растущих животных, кожа и щетина выглядели лучше, в группе В снизилась необходимость в медицинском обслуживании.

Таблица 7-1
Уровень IGF-1 в нмоль/л   Измерение IGF-1   1-е 2-е Контрольная группа     1 0,8 14 2 4,3 16,6 3 7,9 25,4 4 6,1 30,3 5 3,9 31,7 Всего 23 118 Среднее значение 4,6 23,6       Испытуемая группа В     1 3 25,2 2 2,7 28,9 3 6,1 25,5 4 5,3 29,9 5 5,7 16,9 Всего 22,8 126,4 Среднее значение 4,56 25,28       Группа, не подвергавшаяся лечению     1 2,9 11,3 2 4,3 21,6 3 1,6 умер 4 13,1 20,8 5 1,3 15,1 Всего 23,2 68,8 Среднее значение 4,64 17,2

Через 21 день лечения уровень IGF-1 был измерен снова. Группа В была на уровне здоровой контрольной группы (25,3 против 23,6 нмоль/л), но отчетливо превышала уровень в нелеченной группе Х (17,2 нмоль/л).

Таблица 7-2
Прирост веса Номер загона Взвешивание №1 Взвешивание №2 Средний прирост веса   Общий вес Средний вес Общий вес Средний вес     (кг) (кг)   В (3L) 86 (n=13) 6,62 150 (n=11) 13,64 7,02 В (3R) 88 (n=13) 6,77 167 (n=13) 12,85 6,08 Х (4L) 80 (n=12) 6,67 141 (n=11) 12,82 6,15 Х (4R) 92 (n=13) 7,08 171 (n=13) 13,15 6,08

Поросята из левого загона В (3L) выросли в среднем на 850 г больше, чем их соседи из левого загона Х (4L). Поросята из правого загона В (3R) в среднем увеличили свой вес также, как их соседи из правого загона Х (4R), но весили вначале испытания на 310 г меньше. В среднем испытуемая группа увеличила свой вес (для загонов, которые взвешивали) почти на 0,5 кг больше за период в 21 день.

После того как лечение прекратили, поросята из группы В продолжали расти лучше, чем в группе X.

Плохо растущие поросята стали выглядеть, и расти лучше, чем поросята из группы, не подвергавшейся лечению. Эти параметры были отчетливо сцеплены с более высоким уровнем IGF-1 в испытуемых группах. Результаты этого испытания подтверждают, что лечение в течение 14-21 дней с помощью ИУК в дозировке 12,5 мг/кг живого веса эффективно восстанавливает уровень IGF-1 у плохо растущих поросят. Достаточно доказательств, чтобы быть уверенными в том, что после того, как уровень восстановлен до нормального значения, эти поросята наверстают свою потерю роста и будут хорошо жить в период откормки без продолжения лечения.

Пример 8

Лечение роста кур-несушек с помощью ИУК

1. Введение

Следуя удачному лечению плохо растущих поросят в примере 6, это же лечение было опробовано на плохо растущих курах-несушках, так как это является большой проблемой при их выращивании. Стадо растет не однородно и около 10-15% птиц характеризуются слишком низкими параметрами роста. Похожую логику, как и в случае с плохо растущими поросятами (инфекции повышают уровень цитокинов и снижают уровень IGF-1, см. также пример 8), можно применить и для выращивания кур-несушек.

2. Методы

Из стада выбирали десятидневных растущих кур-несушек, чтобы создать 4 группы по 10 кур в каждой:

- Группа GB: 10 нормально растущих кур, не принимавших лечение - Группа GNA: 10 нормально растущих кур, принимавших лечение с помощью ИУК в дозировке 10 мг/кг живого веса - Группа SB: 10 плохо растущих кур без лечения - Группа SNA: 10 плохо растущих кур, принимавших лечение с помощью ИУК в дозировке 10 мг/кг живого веса

В этом примере лечение принимали не только плохо растущие птицы, но также и нормально растущие животные. Птицы ежедневно принудительно принимали перорально капсулу, содержавшую ИУК. Разные группы взвешивали каждую неделю. Лечение продолжалось, по меньшей мере, до того, как куры начинали нестись, чтобы увидеть, зависит ли время начала кладки яиц от лечения.

3. Результаты

В обеих группах, подвергавшихся лечению, с первой недели наблюдали улучшение прироста веса. Разница в приросте веса становится устойчивой после первых четырех недель испытания. Группа GNA имела примерно 2-недельное опережение по сравнению с графиком прироста нормально растущих животных, и группа SNA догнала этот график. Последние две недели эксперимента были очень стрессовыми для птиц, так как было очень жарко и птиц вакцинировали против инфекционного ларинготрахеита (ILT).

Таблица 8-1 № группы GB GNA   вес прирост веса вес прирост веса 1 690,5   740   2 802 111,5 883 143 3 878 76 996 113 4 995 117 1095 99 5 1098 103 1222 127 Общий прирост веса 407,5   482               SB SNA 1 498,5   489,5   2 585 86,5 598 108,5 3 685 100 718 120 4 790 105 885 167 5 907 117 995 110 Общий прирост веса 408,5   505,5  

Прирост веса уже через одну неделю отчетливо показал, что ИУК имела такое же влияние, как и в случае поросят и телят. Поэтому предполагают, что принцип действия ИУК в случае цыплят тот же, что и в случае млекопитающих. Группа SNA показала наибольший прирост веса за период испытания. Таким образом, по-видимому, это феномен наверстывания «пониженного» роста после того, как ИУК нормализует функцию оси гипоталамус-гипофиз-надпочечники (НРА)

Также можно сделать вывод о том, что ИУК оказывает действие и на нормальных птиц, и маловероятно, что ИУК индуцирует устойчивость к своему действию в дозировке 10 мг/кг живого веса.

Итак, результаты этого примера указывают на то, что применение ИУК может вернуть плохо растущих кур к нормальному графику роста и предупредить потери животных, предназначенных для нормального производства, может ускорить процесс роста и рождения более сильных птиц в конце периода выращивания.

Пример 9

Лечение выживших после вирусного репродуктивно-респираторного синдрома свиней (PRRSV) с помощью ИУК

1. Введение

Из опыта лечения людей с синдромом хронической усталости (CFS) следует, что эффективность лечения тесным образом связана с восстановлением нормального уровня IGF-1 в сыворотке крови. Скорость роста нормальных животных, включая свиней, также коррелирует со статусом IGF-1. Известно, что на концентрацию IGF-1 влияют болезни и иммунологическая провокация. Некоторые из поросят, выживших после инфекции PRRSV демонстрировали симптомы, сходные с симптомами пациентов с CFS (отсутствие стимулов к движению или еде, несчастный вид и т.д.).

Поэтому у поросят с PRRSV анализировали концентрацию IGF-1 и затем их лечили с помощью ИУК.

2. Методы

Эксперимент проводили с бельгийскими поросятами породы Land Race, которые в прошлом перенесли PRRSV. Поросят отлучали от матери на четвертой неделе и помещали в загон по двенадцать поросят. Анализировали уровень IGF-1 в трех различных группах в возрасте около 5 недель.

Группа Р

Существуют свиньи с большими проблемами. Они выглядят невзрачно, имеют небольшой вес, плохую окраску и некоторые из них инфицированы Staphylococcus. У фермера и ветеринара существует твердая уверенность в том, что эти поросята вряд ли доживут до конца цикла откорма. У пяти из двенадцати поросят, выбранных случайным образом, отбирали образцы крови.

Ссылка IGF-1 нмоль/л Поросенок №1 2,3 Поросенок №2 <0,5 Поросенок №3 <0,5 Поросенок №4 2,0 Поросенок №5 1,8

Результаты показывают тяжелое нарушение уровня IGF-1 и четкую корреляцию между плохим ростом и здоровьем и концентрацией IGF-1.

Группа R

Эти поросята выглядели наилучшим образом. Перед отлучением от материнского молока они получали специальный «предстартовый» корм. У пяти поросят, выбранных случайным образом, проверяли концентрацию IGF-1.

Ссылка IGF-1 нмоль/л Поросенок №1 4,3 Поросенок №2 1,0 Поросенок №3 7,3 Поросенок №4 22,2 Поросенок №5 14,7

Оказалось, что в этой группе специальный «предстартовый» корм повышает уровень IGF-1.

Группа Т

Здесь были поросята, которые выглядели обычным образом. Перед отлучением от материнского молока они получали обычное стартовое питание.

Ссылка IGF-1 нмоль/л Поросенок №1 2,7 Поросенок №2 <0,5 Поросенок №3 0,8 Поросенок №4 0,5 Поросенок №5 3,5

Эти поросята нормально росли, но не так хорошо, как поросята из группы R. Это также отражал сниженный уровень IGF-1.

3. Лечение

После того как у поросят в группе Р был обнаружен низкий уровень IGF-1, было решено предоставить им такое же лечение, как людям с CFS. Средний вес поросят в возрасте пяти недель должен был быть около семи килограммов. Их лечили с помощью 125 мг композиции, включающей 5 мг ИУК, 120 мг NaCl и WPC 70, в течение 10 дней. Продукт подавали через отверстие, смешивая его с жидким кормом. Все поросята ели из одного и того же отверстия.

4. Результаты

Через десять дней лечения отбирали образцы крови у поросят из различных групп, выбранных случайным образом. Каждому размеру животных приписывали код (К = маленькие; Н = нормальные; Z = тяжелые).

Группа Р

Все двенадцать поросят оставались живыми, и их состояние значительно улучшилось. У них у всех была хорошая розовая окраска, больше не было жесткой щетины, все уши были в нормальном положении, не было больше поросят, страдающих инфекцией Staphylococcus. Они имели хороший прирост в весе и мышечной массе, и они хорошо догнали до среднего веса оставшихся «нормальных» поросят помета. Все внешние признаки здоровья теперь были на лицо.

У пяти поросят из этой группы, выбранных случайным образом, измеряли концентрацию IGF-1.

Ссылка IGF-1 нмоль/л Поросенок PN 0,8 Поросенок РК <0,5 Поросенок PZ 4,2 Поросенок РК <0,5 Поросенок PN <0,5

Уровень IGF-1 не отражает поразительное улучшение здоровья, веса и состояния поросят. Уровень IGF-1 не повысился. Тоже видно у пациентов с CFS. Пациент чувствует себя значительно лучше после пары недель лечения, но пока еще нет увеличения концентрации IGF-1. Это увеличение концентрации IGF-1 наблюдается только спустя пару недель. Мы предполагаем, что вся избыточная продукция IGF-1 используется в процессе дополнительного роста. По-прежнему существует отчетливая связь между индивидуальным весом и уровнем IGF-1.

Группа R

Эти поросята теперь находятся на обычном начальном доступном в продаже питании для поросят в течение периода, не превышающего питание предстартовой композицией. Эта группа растет нормально. Не обнаружено никаких особенных симптомов. У шести поросят, выбранных случайным образом, брали образцы крови.

Ссылка IGF-1, нмоль/л Поросенок RK 11,4 Поросенок RN 11,4 Поросенок RN 32,6 Поросенок RZ 18,7 Поросенок RK 9,8 Поросенок RZ 10,4

Среднее значение концентрации IGF-1 за две недели возросло с 9,9 нмоль/л до 15,72.

Группа Т

Эти поросята продолжают находиться на своем исходном начальном питании для поросят. Эта группа также растет нормально без каких-либо особенных симптомов. У пяти поросят, выбранных случайным образом, брали образцы крови.

Ссылка IGF-1, нмоль/л Поросенок TZ 10,5 Поросенок TN 6,0 Поросенок TN 3,1 Поросенок TN 10,9 Поросенок TZ 16,3

Среднее значение концентрации IGF-1 за две недели возросло с 1,6 нмоль/л до 9,36.

Спустя еще три недели снова были взяты образцы крови, но только у проблемной группы.

Ссылка IGF-1, нмоль/л Поросенок 1 30,0 Поросенок 2 23,4 Поросенок 3 65,1 Поросенок 4 13,7 Поросенок 5 60,1 Поросенок 6 36,9 Поросенок 7 55,6

Эти результаты отчетливо показывают, что продукция IGF-1 у поросят увеличилась, даже несмотря на то, что лечение было остановлено.

5. Обсуждение результатов

Лечение с помощью ИУК поразительным образом улучшает состояние проблемных поросят. Их иммунная система справилась с инфекцией Staphylococcus. Это улучшение не сразу ответило изменением концентрации IGF-1, но спустя три недели после прекращения лечения уровень IGF-1 повысился до отметки, которая считается уже нормальным уровнем.

Известно, что множественные инфекции повышают TNF-α, IL-1 и IL-6 до значительно более высокого уровня, чем единичные инфекции. Также известно, что при тяжелых инфекциях TNF-α, IL-1 и IL-6 модулируют реакции, которые препятствуют превращению GH в IGF-1. Это приводит к повышению концентрации GH в сыворотке крови и снижению концентрации IGF-1 в сыворотке крови. Этот высокий уровень GH приведет к реакции снижения уровня GH-RH по принципу обратной связи в оси НРА (гипоталамус-гипофиз-надпочечники). Для некоторых животных, так же как для пациентов CFS человека, после того как источник инфекции исчезает, ось НРА остается в «спящем» состоянии, вызванном повышением уровня GH по принципу обратной связи. ИУК обеспечивает необходимый стимул для возвращения оси НРА в «активное состояние» и восстановления нормального уровня IGF-1, который в свою очередь приводит к нормально функционирующей иммунной системе и нормальному росту, или для пациентов с CFS к нормальному уровню энергии.

Приложение 1

Часть 1. Жалобы.

Пожалуйста, укажите, насколько сильно упомянутые ниже виды активности вызывали у вас неприятные ощущения в последние семь дней вашего заболевания или если вы совсем не могли выполнять эти виды активности. Пожалуйста, ответьте на все пункты, даже если вы не были вовлечены в них. Если у вас нет газона, вы можете представить, что это означает для вас, если вы должны его подстригать.

Пример:

Боль в теле 0 1 2 3 4

Жалоба 0 1 2 3 4 головная боль 0 1 2 3 4 нервозность из-за внутренней дрожи 0 1 2 3 4 повторяющиеся неприятные мысли, которые вы не можете забыть 0 1 2 3 4 слабость или головокружение 0 1 2 3 4 сниженный сексуальный интерес или сниженная удовлетворенность 0 1 2 3 4 критическая настроенность по отношению к другим 0 1 2 3 4 мысль, что кто-то еще может контролировать ваши мысли 0 1 2 3 4 ощущение, что других должны заботить большинство ваших мыслей 0 1 2 3 4 попытка запомнить предметы 0 1 2 3 4 0. беспокойство о неорганизованности/небрежности 0 1 2 3 4 1. быстрое ощущение подделки и раздражения 0 1 2 3 4 2. боль в сердце или груди 0 1 2 3 4 3. чувство страха в незапертой комнате или на улице 0 1 2 3 4 4. меньше энергии или запаздывание 0 1 2 3 4 5. мысли о самоубийстве 0 1 2 3 4 6. слышать голоса, которые никто другой не слышит 0 1 2 3 4 7. волноваться 0 1 2 3 4 8. чувство, что не можешь доверять большинству людей 0 1 2 3 4 9. снижение аппетита 0 1 2 3 4 10. слезливость без особой причины 0 1 2 3 4 11. подозрительность и дискомфорт от другого секса 0 1 2 3 4 12. чувство преследования или нахождения в тюрьме 0 1 2 3 4 13. внезапный страх без причины 0 1 2 3 4 14. вспышка дурного характера, который вы не можете контролировать 0 1 2 3 4 15. страх покинуть дом 0 1 2 3 4 16. ненавидеть себя 0 1 2 3 4 17. боль в спине 0 1 2 3 4 18. чувство препятствия при совершении некоторых дел 0 1 2 3 4 19. чувство одиночества 0 1 2 3 4 20. чувство печали 0 1 2 3 4 21. слишком беспокоиться о делах 0 1 2 3 4 22. отсутствие интереса в делах 0 1 2 3 4 23. чувство страха 0 1 2 3 4 24. легко ранить ваши чувства 0 1 2 3 4 25. другие люди могут читать ваши собственные мысли 0 1 2 3 4 26. чувство, что другие не понимают вас или не хотят понять 0 1 2 3 4 27. чувство, что люди недружелюбны или не любят вас 0 1 2 3 4 28. делать дела очень медленно, чтобы сделать их правильным образом 0 1 2 3 4 29. сердце бьется очень быстро или резко 0 1 2 3 4 30. непереваривание или больной желудок 0 1 2 3 4 31. низменное чувство, направленное против других людей 0 1 2 3 4 32. мышечная боль 0 1 2 3 4 33. чувство, что другие люди разглядывают вас или говорят о вас 0 1 2 3 4 34. трудности с засыпанием 0 1 2 3 4 35. постоянный контроль и контроль за тем, что вы делаете 0 1 2 3 4 36. трудность принятия решений 0 1 2 3 4 37. страх ездить на метро/поезде/автобусе 0 1 2 3 4 38. затрудненное дыхание 0 1 2 3 4 39. периоды чувства холода и жары 0 1 2 3 4 40. избегать некоторых дел, мест и видов деятельности, так как они пугают вас 0 1 2 3 4 41. ваш мозг опустошен 0 1 2 3 4 42. отсутствие чувствительности или проблесков в частях вашего тела 0 1 2 3 4 43. ком в вашем горле 0 1 2 3 4 44. безнадежность по отношению к будущему 0 1 2 3 4 45. трудность сконцентрироваться 0 1 2 3 4 46. чувство слабости в отдельных частях тела 0 1 2 3 4 47. ощущение стресса и напряжения 0 1 2 3 4 48. чувство тяжести в ваших руках и ногах 0 1 2 3 4 49. мысли о смерти 0 1 2 3 4 50. булимия 0 1 2 3 4 51. тяжелое чувство, если люди смотрят на вас или говорят о вас 0 1 2 3 4 52. мысли, которые не являются вашими мыслями 0 1 2 3 4 53. желание ударить кого-нибудь, причинить боль или нанести вред 0 1 2 3 4 54. проснуться рано утром 0 1 2 3 4 55. повторять одну и ту же активность, такую как прикосновение, счет или мытье 0 1 2 3 4 56. тревожный или беспокойный сон 0 1 2 3 4 57. побуждение разрушить или сломать какие-то вещи 0 1 2 3 4 58. идеи или мысли, которые никого больше не посещают 0 1 2 3 4 59. очень дискомфортно в присутствии других людей 0 1 2 3 4 60. чувство дискомфорта среди массы людей (например, во время посещения магазина, театра) 0 1 2 3 4 61. чувство, что все требует усилий 0 1 2 3 4 62. чувство ужаса и паники 0 1 2 3 4 63. чувство дискомфорта во время еды или питья на публике 0 1 2 3 4 64. желание всегда быть последним в споре 0 1 2 3 4 65. нервничать, оставаясь в одиночестве 0 1 2 3 4 66. другие признают ваши поступки 0 1 2 3 4 67. чувство одиночества даже тогда, когда вы находитесь среди других людей 0 1 2 3 4 68. тревожное чувство, поэтому вы не можете даже спокойно сидеть 0 1 2 3 4 69. чувство никчемности 0 1 2 3 4 70. чувство, что с вами произойдет что-то плохое 0 1 2 3 4 71. кричать, чтобы освободиться от чего-нибудь 0 1 2 3 4 72. страх упасть в обморок на публике 0 1 2 3 4 73. симпатия к людям, которые принесут вам пользу, если вы им это позволите 0 1 2 3 4 74. сексуальные мысли, которые вас беспокоят 0 1 2 3 4 75. идея быть наказанным за грехи 0 1 2 3 4 76. ужасные мысли и чувства 0 1 2 3 4 77. ощущение того, что плохо для вашего организма 0 1 2 3 4 78. никогда не чувствовать себя близким к кому-нибудь еще 0 1 2 3 4 79. чувство вины 0 1 2 3 4 80. мысль о том, что что-то не так в вашем сознании 0 1 2 3 4

Приложение 2

Пожалуйста, ответьте нам утвердительно, если указанные ниже виды активности доставляют вам неприятности сейчас и насколько сильно в последние семь дней вашего заболевания или если вы не можете их выполнять вовсе. Пожалуйста, не пропускайте никакие обозначения.

Активность 0 1 2 3 4 Туалет (по меньшей мере, один раз в день)           Чистить зубы 0 1 2 3 4 Причесываться расческой/щеткой 0 1 2 3 4 Бритье/наложение косметики 0 1 2 3 4 Принимать ванну (по крайней мере, 2 раза в неделю)           Забираться в ванну/вылезать из ванны 0 1 2 3 4 Управляться с кранами 0 1 2 3 4 Мыть ноги 0 1 2 3 4 Мыть спину 0 1 2 3 4 Мытье волос 0 1 2 3 4 Туалет           Управляться с одеждой 0 1 2 3 4 Садиться и вставать с туалета 0 1 2 3 4 Пользоваться туалетной бумагой 0 1 2 3 4 Одеваться (по крайней мере, один раз в день)           Управляться с одеждой 0 1 2 3 4 Управляться с нижним бельем/бюстгальтером 0 1 2 3 4 Управляться с носками/обувью 0 1 2 3 4 Управляться с рубашкой/блузкой 0 1 2 3 4 Управляться с трусами/колготками 0 1 2 3 4 Управляться с пальто 0 1 2 3 4 Приготовить еду (по крайней мере, один раз в день)           Открыть упаковки 0 1 2 3 4 Применять консервный нож (ручной) 0 1 2 3 4 Помыть/разрезать овощи 0 1 2 3 4 Перемешать с усилием 0 1 2 3 4 Держать электрический миксер 0 1 2 3 4 Открывать дверцу духовки 0 1 2 3 4 Нести большой чайник с водой 0 1 2 3 4 Налить молоко из полного пакета 0 1 2 3 4 Накрыть стол 0 1 2 3 4 Убираться (по крайней мере, один раз в неделю)           Собрать вещи 0 1 2 3 4 Почистить загрязненные продукты 0 1 2 3 4 Собрать бусы 0 1 2 3 4 Вытереть пыль 0 1 2 3 4 Протирать шваброй 0 1 2 3 4 Чистить щеткой 0 1 2 3 4 Пропылесосить комнату 0 1 2 3 4 Почистить ванну 0 1 2 3 4 Отскрести пол 0 1 2 3 4 Мытье окон 0 1 2 3 4 Почистить духовку 0 1 2 3 4 Убрать посуду в сервант 0 1 2 3 4 Выбросить мусор 0 1 2 3 4 Стирка (по крайней мере, раз в неделю)           Нести полную корзину с бельем 0 1 2 3 4 Применять стиральную машину 0 1 2 3 4 Вынуть мокрую одежду 0 1 2 3 4 Сложить одежду 0 1 2 3 4 Повесить одежду на плечики 0 1 2 3 4 Гладить одежду 0 1 2 3 4 Работа в саду           Подстригать траву 0 1 2 3 4 Сгребать граблями 0 1 2 3 4 Копать 0 1 2 3 4 Полоть 0 1 2 3 4 Заменять лампы 0 1 2 3 4 Забивать гвозди 0 1 2 3 4 Применять отвертку 0 1 2 3 4 Транспорт           Садиться в машину/вылезать из машины 0 1 2 3 4 Садиться/вылезать из автобуса/поезда 0 1 2 3 4 Понимать дорожные знаки 0 1 2 3 4 Подвижность/активность           Небольшая прогулка пешком 0 1 2 3 4 Подниматься по ступенькам 0 1 2 3 4 Стоять в течение одного часа 0 1 2 3 4 Сидеть 2 часа 0 1 2 3 4 Согнуться вперед 0 1 2 3 4 Наклониться, чтобы поднять что-нибудь 0 1 2 3 4 Встать на колени 0 1 2 3 4 Ползать 0 1 2 3 4 Бытовая работа           Толкать тележку для продуктов в магазине 0 1 2 3 4 Посетить супермаркет 0 1 2 3 4 Оплатить счет 0 1 2 3 4 Прекратить поход по магазину 0 1 2 3 4 Сделать покупки 0 1 2 3 4 Унести покупки 0 1 2 3 4 Физические манипуляции           Открыть дверные замки 0 1 2 3 4 Пользоваться дверными ручками 0 1 2 3 4 Открыть/задернуть занавески 0 1 2 3 4 Открыть/задернуть шторы 0 1 2 3 4 Открыть/закрыть окно 0 1 2 3 4 Информационные средства           Понимает любую информацию 0 1 2 3 4 Понимает газету 0 1 2 3 4 Понимает телевидение 0 1 2 3 4 Писать письмо (а4) 0 1 2 3 4 Работа на компьютере в течение 30 минут 0 1 2 3 4 Беседа по телефону 0 1 2 3 4

Предложено применение композиции, содержащей в качестве активного ингредиента индолил-уксусную кислоту (ИУК), которая активирует у субъекта гипоталамус, чтобы повысить уровень гормона, высвобождающего гормон роста (GHRH), в сыворотке крови, который в свою очередь приводит к повышению секреции гормона роста (GH) и последующему повышению уровня инсулин-подобного фактора роста 1 (IGF-1) в сыворотке крови, для приготовления терапевтической композиции для лечения у людей синдрома хронической усталости, диабета 2-го типа, для иммунной терапии или для стимулирующего восстановления после физических тренировок или повышения иммунитета у животных. Композиция может выполняться в форме пищевой добавки. Показано улучшение состояния поросят со стафилококковой инфекцией, хороший прирост в весе и мышечной массе, увеличение концентрации IGF-1. Показан эргогенный эффект ИУК у спортсменов. 4 з.п. ф-лы, 8 ил., 8 табл.

1. Применение композиции, содержащей в качестве активного ингредиента индолилуксусную кислоту (ИУК), которая способна активировать у субъекта гипоталамус, чтобы повысить уровень гормона, высвобождающего гормон роста (GHRH), в сыворотке крови, который в свою очередь приводит к повышению секреции гормона роста (GH) и последующему повышению уровня инсулин-подобного фактора роста 1 (IGF-1) в сыворотке крови, для приготовления терапевтической композиции для лечения у людей синдрома хронической усталости, диабета 2-го типа, иммунной терапии или для стимулирующего восстановления после физических тренировок, или для повышения иммунитета у животных.

2. Применение по п.1, при котором композиция дополнительно включает одну или несколько аминокислот.

3. Применение по любому из пп.1-2, при котором композиция включает от 1 до 100 мг, предпочтительно от 10 до 90 мг, более предпочтительно 40 мг активного ингредиента.

4. Применение по любому из пп.1-3, при котором композиция представлена в форме капсулы.

5. Применение по любому из пп.1-4, при котором композиция выполнена в форме пищевой добавки.