ПРОТИВОСУДОРОЖНОЕ ЛЕКАРСТВЕННОЕ СРЕДСТВО Российский патент 2009 года по МПК A61K31/55 A61K31/4196 A61P25/08 A61P25/24 A61P25/28 A61P29/00 A61P39/06 

Изобретение относится к медицине и фармации, в частности к лекарственным средствам, используемым для лечения эпилепсии и нейропатической боли, в виде таблеток, капсул и порошков.

Известно лекарственное средство «Карбамазепин» [1].

Карбамазепин является одним из ведущих противоэпилептических препаратов, частота использования которого составляет от 16 до 55% среди препаратов первого и второго выбора при парциальных и генерализованных формах эпилепсии. Он назначается в монотерапии или инициальной терапии для лечения сложных фокальных и тонико-клонических приступов. По своей эффективности препарат не уступает другим препаратам, сокращая частоту приступов на 50-100% у 75% больных. Карбамазепин может быть использован при монотерапии парциальных приступов - простых (без потери сознания) и сложных (с изменениями сознания), характерных для симптоматической и криптогенной эпилепсии. Он наиболее эффективен при локализации очага в височной области - височной эпилепсии, которая часто сопровождается развитием психического дефекта. Препарат имеет достаточно выраженную аналгетическую активность, которая позволяет использовать его также для лечения нейропатической боли (тригеминальная невралгия, диабетическая нейропатия, фантомно-болевой синдром).

Недостатками карбамазепина является его нейротоксическое действие, а именно: способность вызывать головокружение, головную боль, атаксию, седацию, мышечную слабость, ощущение усталости, шум в ушах, нарушение концентрации внимания, замедление реакционной способности, в больших дозах - сонливость, галлюцинации. Кроме того, при применении карбамазепина отмечается нарушение функции печени и нарушение ритма сердца. В комплексном лечении эпилепсии (2) и болевого синдрома (3, 4) необходимо учитывать роль оксидативного стресса, который протекает на фоне угнетения антиоксидантной системы и имеет важное значение в патогенезе данных заболеваний. Установлено, что активация свободно-радикального окисления приводит к усилению судорожной готовности, уменьшению латентного периода судорожного припадка, увеличению времени клонических и тонических судорог. Вышеизложенное обосновывает целесообразность, создания препарата, объединяющего противосудорожные, анальгетические и антиоксидантные, ноотропные, нейропротективные свойства. Антиоксиданты не только оказывают позитивное влияние на картину судорожного припадка, но усиливают действие противосудорожных препаратов и позволяют применять их в меньших дозах. Карбамазепин обладает незначительными антиоксидантными свойствами. Клинико-экспериметальными исследованиями установлено, что на пике судорожного припадка происходит массовая гибель нейронов коры головного мозга, и, как следствие, в более отдаленные сроки - развитие когнитивного дефицита: ухудшение процессов обучения, памяти, внимания. Все это предполагает целесообразность создания препаратов с комплексным противосудорожным и ноотропным и нейропротективным действием. Карбамазепин не обладает ни ноотропным, ни нейропротективным действием. Известное лекарственное средство тиотриазолин (5-6) обладает ярко выраженными антиоксидантными свойствами - реактивирует такие антиоксидантные ферменты как супероксиддисмутазу и каталазу, снижает степень окислительной модификации белка и липопероксидации, снижает образование супероксидрадикала и пероксинитрита. Кроме этого тиотриазолин обладает выраженным энерготропным эффектом, что обуславливает улучшение метаболических процессов тканей головного мозга и повышение резистентности нейронов к неблагоприятным внешним и внутренним воздействиям, наличием гепатопротекторного, кардиопротекторного действия и он не токсичен.

Учитывая широкое применение карбамазепина в качестве противосудорожного средства, он принят как прототип. В основу изобретения положена задача разработать лекарственное средство с широким спектром фармакологического действия, превосходящее прототип и аналог по достигаемому противосудорожному и анальгетическому эффектам.

Решение поставленной задачи обеспечивает комбинированное противосудорожное, нейропротективное, ноотропное, анальгетическое, антидепрессивное, актопротективное и антиоксидантное средство, содержащее в качестве активной основы карбамазепин, за счет того, что активная основа дополнительно содержит тиотриазолин при соотношениях карбомазепина к тиотриазолину 2:(4-5), 3:(1-2), 4:(1-2). Принимая любое количество карбамазепина за единицу при изготовлении комбинированного средства, соотношение его к тиотриазолину ограничено - 1:(0,25-2,5).

Фармакологический эффект от использования изобретения

Использование комбинации карбамазепин -+тиотриазолин приводит к усилению антиконвульсантных свойств карбамазепина. У животных не только сокращалась продолжительность конвульсий, но и повышалась стойкость к судорожному фактору, они быстрее и легче выходили из состояния неподвижности в постпароксизмальном периоде, уменьшалась смертность животных. В результате скрининговых исследований удалось выявить, что наиболее удачной комбинацией является использование препаратов карбамазепин - 1-тиотриазолин в соотношении 2:5, 3:2, 4:1, при которых у всей группы животных имело место полное отсутствие судорожных проявлений (табл.1).

Использование предложенного лекарственного средства в терапевтической дозе, согласно приведенному ниже описанию, позволит повысить противосудорожную активность в сравнении с карбамазепином, что может быть обусловлено нормализацией метаболических сдвигов в центральной нервной системе, вызванных эпилептическим процессом, улучшением электрогенеза головного мозга, угнетением очагов в лимбико-ретикулярных и срединно-стволовых структурах, уменьшением вероятности вторичной генерализации приступов. Для реализации этой задачи имеют значение интенсификация кислородзависимой продукции энергии в нейронах, снижение образования активных форм кислорода, реактивация антиоксидантной системы и активация процессов адаптации нейронов в условиях гипоксии, а также церебропротекторное и ноотропное действие, присущее тиотриазолину в условиях патологии ЦНС (6), что подтверждается данными по изучению ПОЛ (табл.8).

Назначение комбинации карбамазепин + тиотриазолин животным с повышенной судорожной готовностью, согласно изобретению, приводило к значительному торможению свобоно-радикальных процессов (по снижению содержания МДА) и реактивировало ферменты СОД и каталазу в отделах головного мозга и, особенно значительно, в гиппокампе - ведущей эпилептогенной структуре мозга. По силе антиоксидантного эффекта предлагаемая комбинация превосходит как карбамазепин, так и тиотриазолин (табл.8).

Использование комбинации карбамазепин + тиотриазолин, согласно изобретению, потенцировало аналгетические свойства карбамазепина, более значительно снижая порог болевой чувствительности в тесте электро- и термораздражения хвоста и в тесте уксуснокислых корчей по сравнению с карбамазепином (табл.2 и 3).

Введение комбинации карбамазепин + тиотриазолин животным с повышенной судорожной готовностью (ПСГ), согласно изобретению, потенциировало антидепрессивные эффекты карбамазепина. Так, в тесте принудительного плавания у животных, получавших предлагаемую комбинацию, продолжительность состояния иммобилизации во время стресса сокращалась на 20,3% (Р<0,05), что превосходило аналогичный показатель карбамазепина (табл.4).

Нормализация исследовательских функций мозга, локомоторной активности и эмоционального компонента поведения под влиянием комбинации карбамазепин + тиотриазолин благодаря нейропротекторному и ноотропному действию тиотриазолина (6) проявлялась нивелированием отрицательного влияния карбамазепина на эти показатели в тесте «Открытое поле»: ограничение двигательной активности, имевшее место под влиянием карбамазепина, не проявлялось при использовании приведенной комбинации (табл.5).

Согласно изобретению, нарушение психических и моторных реакций, ухудшение трудоспособности (по тесту «висение на перекладине» - на 25-37%), обусловленные карбамазепином, устранялись при использовании предлагаемой комбинации (табл.6).

Согласно изобретению, уровень тревожности, страха и отчаяния (по продолжительности периода иммобильности в тесте «подвешивание за хвост») уменьшался на 39,8% при введении карбамазепина (15 мг/кг), а при использовании предлагаемой комбинации карбамазепин + тиотриазолин (15+10 мг/кг) этот эффект проявлялся еще активнее, составляя 45,5% (Р<0,05) (табл.7). Согласно изобретению, продолжительность жизни в условиях гипоксической гипоксии при введении карбамазепина (15 мг/кг) увеличивалось на 22,3%, при введении тиотриазолина (25 мг/кг) увеличивалось на 27%, а при введении предлагаемой комбинации карбамазепин + тиотриазолин - на 32% (табл.9).

Суть изобретения объясняется приведенным ниже описанием предлагаемого лекарственного средства и примерами его использования при различных соотношениях активных компонентов и принятых в качестве прототипа и аналога лекарственных средств.

Для выявления наиболее эффективной комбинации карбамазепина с тиотриазолином были исследованы разные соотношения доз изучаемых препаратов. В результате исследования были установлены особенности проявлений противосудорожного, анальгетического действия препаратов и их влияния на поведенческие реакции, антиоксидантные, антидепрессивные, нейропротективные, ноотропные и противогипоксические эффекты. Препараты вводили внутрижелудочно (per os) на 1% крахмальной слизи за 1 час до эксперимента в дозах, указанных в таблицах 1-9. В каждой группе использовалось по 10 животных.

Таким образом, предложенное лекарственное средство, согласно изобретению, проявляет более высокую противосудорожную, аналгетическую, ноотропную, нейопротективную, антиоксидантную, антидепрессивную и актопротективную активность в сравнении с известным препаратом карбамазепином, при этом снижая побочные действия карбамазепина, так как в предложенном лекарственном средстве достижение терапевтического эффекта наблюдалось при низшей дозе карбамазепина и с меньшим отрицательным влиянием на показатели физиологической активности организма, и может применятся как лекарственный препарат в виде таблеток, капсул и порошков.

Для иллюстрации приводим следующие примеры изучения внутрижелудочно (per os) введенных препаратов по изобретению.

Пример 1.

Изучение противосудорожного действия комбинации препаратов

Исследование проведено на белых беспородных крысах весом 160-180 г. Судороги моделировали по методике максимального электрошока (МЭШ). Максимальный электрошок вызвали с помощью ушных электродов, используя надпороговое раздражение постоянным током (50 Гц, 50 мА, 0,2 с.). Непосредственно перед наложением зажимов с электродами ушные раковины крысы смачивали физиологическим раствором для обеспечения максимальной электропроводности. После этого подавали ток. Оценивали количество крыс с тоническими судорогами и продолжительность судорог.

Результаты опытов показали, что карбамазепин в разной степени вызывал противосудорожный эффект во всех изученных дозах, что проявлялось существенным уменьшением количества крыс с электрошоковыми судорогами, уменьшением продолжительности электрошоковых судорог и тонической экстензии задних конечностей. В минимальной изучаемой дозе (5 мг/кг) он сокращал продолжительность пароксизмов на 60,9% (Р<0,05). Полное отсутствие конвульсий у животных наблюдалась при введении карбамазепина 20 мг/кг (Табл.1).

Второй препарат комбинации, тиотриазолин, также вызывал противосудорожный эффект во всех изучаемых дозах, но полного отсутствия пароксизмов в группе животных не удалось достичь ни на одной дозе. Так, тиотриазолин (5 мг/кг) сокращал продолжительность электрошоковых судорог на 25,3% (Р<0,05). При использовании его в 3 раза большей дозе наблюдалось отсутствие судорог у 1 крысы из 6 и сокращение времени экстензии задних конечностей на 30,62% (Р<0,05), самого приступа - на 46,67% (Р<0,05). В дозе 25 мг/кг он устранял судороги у 2 животных из шести, сокращая продолжительность конвульсий на 58,86% (Р<0,05). Комбинации карбамазепин + тиотриазолин в разных соотношениях по силе противосудорожного действия превосходили антиконвульсантные свойства карбамазепина. У животных не только сокращалась продолжительность конвульсий, а и повышалась стойкость к судорожному фактору, они быстрее и легче выходили из состояния неподвижности в постпароксизмальном периоде, уменьшалась смертность животных. В результате скрининговых исследований установлены оптимальные соотношения карбамазепина к тиотриазолину 2:(4-5), 3:(1-2), 4:(1-2).

Пример 2.

Изучение анальгетического действия комбинации препаратов

Для оценки антиноцицептивной активности препаратов использовали альгометрические тесты, которые основаны на сомато-сенсорных реакциях животных с использованием электрического, термического и химического раздражителей. Критерием реакции на болевое раздражение в первом случае была голосовая реакция (реакция вокализации), во втором - вытягивание хвоста, а в третьем - развитие произвольных сокращений брюшных мышц - "судорог, или корчей". В первом случае изучался сложный рефлекторный ответ, в формировании которого принимают участие разнообразные уровни регуляции ЦНС как сегментарного, так и надсегментарного плана. Вторая и третья методики позволяют определить периферический компонент анальгетического действия.

Исследования проводились согласно этическим требованиям к исследованиям экспериментальной боли у животных с сохранением сознания, которые были утверждены Комитетом по экспериментальным исследованиям и этическим проблемам Международной Ассоциации изучения боли.

Исследовательский прием изучения антиноцицептивной активности на модели электрического раздражения корня хвоста дает возможность выделить центральный компонент торможения ноцицептивной системы, который связывают с угнетением в участке таламуса межнейронной передачи болевых импульсов, а также с привлечением корковых механизмов. Для оценки болевого порога стальные игольчатые электроды (диаметром 0,5 мм) с фиксированным межэлектродным расстоянием (10 мм) вводились под кожу дистальнее 1 см от корня хвоста. В эксперименте были использованы белые беспородные крысы. Оценку ноцицептивной чувствительности проводили через 2-3 мин (животные успокаиваются) - исходное состояние, и через 60 мин после введения препаратов и их комбинаций внутрижелудочно (per os) на 1% крахмальной слизи по появлению голосовой реакции (писк, вокализация) в ответ на постепенно увеличивающееся электрическое раздражение от электростимулятора ЭСЛ-1. Продолжительность каждого раздражения не превышала 1 с (табл.2).

На модели термораздражения хвоста крыс в качестве болевого фактора использовалась горячая вода t=60°C. В процессе опыта подсчитывалось время реакции (латентный период) в секундах - до вытягивания хвоста из воды. Иммерсию оценивали на 60 мин после введения препаратов и их комбинаций (табл.2).

На мышах была использована модель боли - "уксуснокислые корчи". Внутрибрюшинное введение химического раздражителя приводит к общей активации ноцицептивной системы и местному высвобождению брадикинина, гистамина, серотонина, простагландинов и лейкотриенов, что приводит к развитию самопроизвольных сокращений брюшных мышц живота - "судорог, или корчей", которые сопровождаются вытягиванием задних конечностей и выгибанием спины.

Судороги (корчи) вызвали 0,6% раствором уксусной кислоты из расчета 0,1 мл на 10 г массы животных, который вводили внутрибрюшинно через 60 минут после внутрибрюшинного введения препаратов и их комбинаций. Контрольной группе вводили 1% раствор крахмальной слизи в эквивалентном объеме. За животными наблюдали на протяжении 20 минут и подсчитывали количество судорог.

При изучении аналгетического действия препаратов было установлено, что введение карбамазепина в дозах 15-20-25 мг/кг способствовало достоверному повышению порога боли по тестам электро- и термораздражения хвоста крыс. По тесту вокализации при электрораздражении корня хвоста повышение болевого порога имело доза-зависимый характер и составляло 49,76%, 53,33%, 48,2%, 65,87% и 60,42% соответственно. По тесту «термораздражения хвоста» максимально выраженная анальгезия была выражена при введении карбамазепина в дозе 20 мг/кг (Табл.2). На модели "уксуснокислых корчей" аналгетический эффект карбамазепина в дозах 10-15-20 мг/кг проявлялся в снижении продолжительности судорог и представлял - 60,13%,-70,3% и 65,6% соответственно (табл.3).

Введение тиотриазолина во всех изучаемых дозах (10-25-50 мг/кг) также сопровождалось достоверным уменьшением болевой чувствительности по тесту вокализации при электрораздражении корня хвоста на 18,88-41,11-66,25-46,86% соответственно, т.е. максимально аналгезия была выражена при использовании дозы препарата 25 мг/кг. Под влиянием температурного и химического раздражителей повышение болевого порога наблюдалось только при использовании данного препарата в дозе 25 мг/ кг и составляло +30,6% (Р<0,05) и 65% соответственно.

С целью подбора оптимального дозирования препаратов, которое дает наиболее значительную аналгезию при минимальных дозах применяемых препаратов, были изучены комбинации карбамазепин + тиотриазолин (10+5 мг/кг), (10+10 мг/кг), (10+25 мг/кг), (15+5 мг/кг), (15+10 мг/кг), (20+5 мг/кг), (20+10 мг/кг) (т.е. в соотношениях 2:1, 1:1, 2:3, 3:1, 3:2, 4:1, 2:1) с использованием тестов электро- и термораздражения хвоста и комбинации карбамазепин + тиотриазолин (10+25 мг/кг), (20+5 мг/кг), (20+10 мг/кг) с использованием теста "уксуснокислых корчей".

Было установлено, что по тесту электрораздражения хвоста аналгетический эффект комбинации проявлялся во всех использованных дозах и в целом был выражен значительно больше, чем при введении отдельных компонентов комбинации (Табл.2). Наиболее значимое повышение болевого порога наблюдалось при введении комбинации карбамазепин + тиотриазолином в соотношении 2:5, 3:2, 4:1 - на 95,65%, 78,9%, 69,9% (Р<0,05) соответственно.

По тесту термораздражения хвоста достоверный аналгетический эффект комбинации также в большинстве серий был более выражен, чем при введении отдельных компонентов комбинации, и составлял: + 76.9% (Р<0,05) при использовании комбинации карбамазепин + тиотриазолин (10+25 мг/кг); + 48,1% (Р<0,05) при использовании комбинации карбамазепин + тиотриазолин (15+10 мг/кг); + 61,7% (Р<0,05) при использовании комбинации карбамазепин + тиотриазолин (20+5 мг/кг); +59,3% (Р<0,05) при использовании комбинации карбамазепин + тиотриазолин (20+10 мг/кг) (табл.2).

Аналогичная картина наблюдалась в тесте «уксусных корчей». Использование комбинации карбамазепин + тиотриазолин (10+25 мг/кг) вызывало укорочение химических судорог на 86,7% (Р<0,05); комбинации (15+10 мг/кг) - на 78,3% (Р<0,05), а комбинации (20+10 мг/кг) на 73,0% (Р<0,05), в дозах (20+5 мг/кг) - на 90,1% (р<0,5) (табл.3).

Таким образом, аналгетическая активность предлагаемой комбинации карбамазепин + тиотриазолин была выше, чем при использовании карбамазепина и тиотриазолина, а максимальная обезболивающая активность проявлялась при использовании комбинации карбамазепин + тиотриазолин (2:5, 3:2, 4:1).

Пример 3

Изучение антидепрессивной (антистрессовой) активности комбинации препаратов

Исследование антидепрессивного (антистрессового) действия препаратов проведено на белых беспородных крысах-самцах по тесту принудительного плавания. Животных помещали в сосуд, наполненный водой, температура которой составляла 11°С, и на протяжении 6 минут наблюдали за поведением животных, регистрируя общую продолжительность пассивного плавательного поведения. Регистрированные в экспериментах формы активности животных при плавании согласовываются с наблюдениями, разделившими ее на три формы - активную, пассивную и некоторую промежуточную (плавание по кругу). Наличие антидепрессивной активности препаратов оценивали по способности соединения сокращать продолжительность состояния иммобилизации при принудительном плавании. Эксперименты показали, что у животных с высокой судорожной готовностью мозга в тесте принудительного плавания преобладала пассивная стратегия поведения во время стресса (250,4±9,25 из 360 с общего времени). Введение карбамазепина в дозе 10 мг/кг не влияло на продолжительность иммобилизации, введение карбамазепина в дозе 15 мг/кг увеличивало время пассивного плавания, а в дозе 20 мг/кг карбамазепин повышал активность животных в условиях стресса в сравнении с крысами контрольной группы (-27%, Р<0,05) (Табл.4).

Тиотриазолин, введенный в дозах 25 мг/кг, оказывал умеренное влияние на активность животных во время стресса. Введение комбинации карбамазепин + тиотриазолин (10+25 мг/кг) оказывало более выраженное воздействие на активность животных во время стресса, уменьшая продолжительность пассивного плавания на 20,3% (Р<0,05). Таким образом, у комбинации карбамазепин + тиотриазолин (10+25 мг/кг) в тесте принудительного плавания был продемонстрирован защитный стресс-протективный эффект, который может указывать на ее потенциальную антидепрессивную активность.

Пример 4

Изучение влияния комбинации препаратов на поведенческую активность в тесте «Открытое поле»

Исследования в тесте «Открытое поле» проведены на предварительно отобранных беспородных белых крысах с повышенной судорожной готовностью (аудиогенная эпилепсия). Модель аудиогенных судорог создавали, используя в качестве раздражителя звук электрического звонка (продолжительность звука 120 с, 96 Дц). Отбирали животных с высокой аудиогенной судорожной готовностью (клонические и тонические судороги, многократные падения на бок). Исследования авторов показали, что поведение животных с судорожной готовностью через 40-60 мин после воздействия звукового сигнала характеризовалось доминированием состояния тревоги, которое проявлялось в увеличении количества фекальных болюсов (85,7%, Р<0,05) и продолжительности чистки (147,37%, Р<0,05). Наблюдалось также снижение ориентировочной реакции: уменьшалось количество пересеченных горизонтальных квадратов на 32% (Р<0,05), вертикальных стоек - на 86,54 (Р<0,05). Норковый рефлекс угнетался на 64,1% (Р<0,05) (Табл.5).

На фоне действия карбамезепина (20 мг/кг) у животных с повышенной судорожной готовностью наблюдалось снижение локомоторной активности, которое проявлялось ограничением вертикальной и горизонтальной активности соответственно на 66,5% (Р<0,05) и 42,3% (Р<0,05) и норкового рефлекса (-74,3%, Р<0,05). Состояние тревоги (оценивали по болюсам) угнеталось в меньшей мере (-36,6%, Р<0,05). При этом время чистки сокращалось на 53,2% (Р<0,05). При введении карбамазепина в более низких дозах (15 мг/кг и 10 мг/кг) направленность действия не изменялась, но выраженность эффектов при этом уменьшалась. Так, карбамазепин в дозе 15 и 10 мг/кг уменьшал количество вертикальных стоек на 60,5% (Р<0,05) и 48,2% (Р<0,05) и количество заглядываний в норку на 51,7% (Р<0,05) и 32,9% (Р<0,05) соответственно, проявляя только тенденцию к уменьшению горизонтальной активности. Эмоциональная активность снижалась практически одинаково в обеих дозах (-28,6% - 29,7%). Количество актов груминга более заметно уменьшал карбамазепин (15 мг/кг) на 56,1% (Р<0,05), (табл.5).

Антиоксидант тиотриазолин, использованный в дозе 25 мг/кг, наоборот, повышал количество подъемов животных на задние лапы (+49,2%, Р<0,05), горизонтальных переходов (+66,6%, Р<0,05) и норковый рефлекс (+71,8%, Р<0,05), не влияя на эмоциональный компонент реакции. В дозе 5 мг/кг тиотриазолин повышал только исследовательскую активность - количество заглядываний в норку (+28,7%, Р<0,05), а в дозе 10 мг/кг повышал, кроме того, и горизонтальную подвижность (+36,8%, Р<0,05).

Введение комбинированного препарата карбамазепина (15 мг/кг) и тиотриазолина (10 мг/кг) приводило к нивелированию угнетающего эффекта карбамазепина на локомоцию. При этом сохранялось депримирующее влияние карбамазепина на эмоциональный компонент поведенческой реакции (-35,4%, Р<0,05).

Уменьшение в комбинации количества карбамазепина (10 мг/кг) и увеличение дозы тиотриазолина (25 мг/кг) позволяло не только полностью исключить депримирующий эффект карбамазепина на вертикальную активность, но и повысить количество пересеченных горизонтальных квадратов (+28,8%, Р<0,05). В то же время введение комбинации карбамазепина (20 мг/кг) и тиотриазолина (5 мг/кг) приводило только к незначительному ослаблению угнетающего эффекта карбамазепина на локомоторную активность, не изменяя его влияние на эмоциональный компонент поведения (табл.5).

Таким образом, у животных с повышенной судорожной готовностью мозга карбамазепин угнетает и локомоторную активность, и эмоциональную реакцию страха. Тиотриазолин, наоборот, не влиял на эмоциональный компонент поведения, повышая исследовательско-ориентировочную активность животных.

Комбинированное введение тиотриазолина с карбамазепином приводило к исключению отрицательного влияния карбамазепина на двигательную активность, не изменяя при этом его угнетающего влияния на эмоциональную реакцию страха.

Таким образом, комбинация тиотриазолина с карбамазепином является эффективной и позволяет устранить отрицательное влияние карбамазепина на локомоцию. Наиболее приемлемым является сочетание карбамазепина (10 мг/кг) и тиотриазолина (25 мг/кг), где даже повышалась горизонтальная активность животных, но хорошо зарекомендовала себя и комбинация карбамазепина (20 мг/кг) и тиотриазолина (5 мг/кг).

Пример 5

Изучение влияния комбинации препаратов на работоспособность

Изучение физической работоспособности проводили на беспородных белых крысах с учетом времени фиксации (в секундах) животными своего тела на перекладине (диаметр 10 мм, длина 1 м, закрепленной на высоте 70 см от пола) с момента перемещения в центр перекладины до времени падения. Тестирование проводили в исходном состоянии, до введения изучаемых препаратов и их комбинаций, и через 60 мин после их введения.

Результаты исследования свидетельствуют, что в исходном состоянии показатели физической работоспособности экспериментальных животных контрольной группы сравнения и исследовательских групп были сходны и составляли 38-41 с. Введение карбамазепина в дозах 10 мг/кг и 15 мг/кг сопровождалось снижением физической работоспособности крыс на 25,6% (Р<0,05) и 36,6% (Р<0,05) соответственно. Тиотриазолин, наоборот, проявлял активирующее действие, но этот его эффект был возможным только при введении в дозе 25 мг/кг и составлял +22,5% (Табл.6).

Введение комбинации препаратов (карбамазепин (10 мг/кг), тиотриазолин (25 мг/кг) нивелировало отрицательное влияние карбамазепина на работоспособность крыс. Другая комбинация (карбамазепин (15 мг/кг), тиотриазолин (10 мг/кг) проявила себя более эффективной, повышая время фиксации крыс на горизонтальном стержне на 18.1% (Р<0,05) (табл.6).

Таким образом, комбинированное применение карбамазепина и тиотриазолина улучшало показатели физической работоспособности крыс, уменьшая отрицательное влияние карбамазепина на этот показатель.

Пример 6

Изучение антистрессорного действия комбинации препаратов

Антистрессорное действие препаратов и их комбинаций изучали на беспородных белых крысах в тесте «подвешивание за хвост» (tail suspension), основанном на наблюдении, что животные, при их подвешивании за хвост, будут демонстрировать соответствующий период иммобильности, по продолжительности которого можно судить об уровне тревожности страха и отчаяния. Животных удерживали за хвост возле туловища на весу головой вниз. Регистрировалось время, на протяжении которого животное оставалось иммобильным (т.е. до того момента, пока морда животного не достанет основы хвоста).

Результаты показали, что при введении карбамазепина (10 мг/кг и 15 мг/кг) животные дольше находились при проведении эксперимента в иммобильном состоянии (+24,75% (Р<0,05) и 39,83% (Р<0,05) соответственно), что можно расценивать как невысокий уровень тревожности, страха. При этом более выраженные изменения отмечались при введении комбинированного препарата карбамазепина (15 мг/кг) с тиотриазолином (10 мг/кг) (+45,52%, Р<0,05). Одновременное введение этих препаратов в соотношении 2:5 удлиняло время нахождения крысы в вертикальном положении головой вниз на 30,69% (Р<0,05) (Табл.7).

Таким образом, комбинированный препарат в обеих изучаемых дозах снижал уровень тревожности, страха и отчаяния более значительно, чем препарат сравнения - карбамазепин.

Пример 7

Изучение влияния комбинации препаратов на активность перекисного окисления липидов (ПОЛ)

Интенсивность процессов свободно-радикального окисления в тканях головного мозга беспородных белых крыс оценивали по накоплению продуктов - ДК и МДА. Состояние антиоксидантной системы оценивали по активности СОД и каталазы.

Через 60 мин после введения препаратов и их комбинаций у животных формировали электросудорожное состояние (МЭШ) и на высоте пароксизмальной активности выводили из эксперимента.

После окончания эксперимента животных подвергали атравматической фиксации и моментальной декапитации. Отдельно выделяли и анализировали такие участки головного мозга: кора, гиппокамп, ствол. Замороженные в азоте ткани мозга гомогенизировали в фарфоровых ступках. После центрифугувания при t 4°C при 15000 g супернатант сливали в чистые пробирки. Определение активности СОД проводили по методу Чевари С. и соавт. по конкуренции с нитросиним тетразолием в системе аэробного взаимодействия НАДН и фенозинметансульфата. Активность каталазы определяли спектрофотометрически по уменьшению перекиси водорода. Содержимое ДК определяли спектрофотометрически. Содержимое Тбк-зависимых продуктов (МДА) определяли спектрофотометрически по рекции с тиобарбитуровой кислотой.

Наблюдения показали, что судорожное состояние существенно изменяет параметры окислительного обмена мозговых структур (Табл.8). Особенно резко увеличивалось количество конечного продукта ПОЛ - малонового диальдегида (МДА) в ткани гиппокампа - главной судорожной структуры. Концентрация МДА в этой области головного мозга при судорожной готовности возрастала на 61,97% (Р<0,05) в сравнении с интактными крысами. В неокортексе и стволе мозга также имело место четкое повышение количества МДА, однако менее значительное, чем в гиппокампе - на 39,1-61% (Р<0,05). Активация перекисных реакций сочеталась с угнетением функции антиоксидантной системы - как СОД, так и каталазы. В обоих случаях констатировалось достоверное снижение активности ферментов, причем также более резко выраженное в области судорожной зоны - гиппокампа.

Так, в судорожном состоянии редукция активности СОД в гиппокампе достигала 55% (Р<0,05), каталазы - 46,03% (Р<0,05). В неокортексе антиоксидантная защита также была ослаблена, причем в одинаковой степени для обоих ферментов: на 31% (Р<0,05). Что касается ткани стволового отдела, активность СОД нарушились в меньшей мере - на 18%, тогда как каталаза имела почти такую же степень ослабления активности, как и в коре больших полушарий - на 35,5% (Р<0,05).

В этих условиях четкий нормализующий эффект был достигнут при использовании антиоксиданта тиотриазолина в дозе 25 мг/кг. Действие его выражалось в полной инверсии всех сдвигов, которые имели место в условиях повышенной судорожной готовности. Уменьшилось накопление конечного продукта свободно-радикального окисления (СРО) - МДА. Во всех отделах мозга, но особенно в гиппокампе, отмечалась редукция содержания этого соединения, количество которого приближалось к показателям, характерным для интактных крыс, и на 30-40% было ниже, чем у животных с повышенной судорожной готовностью, но не получавших тиотриазолин. В то же время имели место контрастные изменения со стороны ферментов антиоксидантной защиты (АОЗ) как СОД, так и каталазы. Под влиянием тиотриазолина активность антиоксидантных ферментов почти полностью восстановилась, не отличаясь существенно от показателей у интактных крыс.

Нормализацию окислительно-антиоксидантного баланса можно было отследить и в условиях профилактического назначения классического противоэпилептического средства - карбамазепина в дозе 10 мг/кг. Как в отношении содержания конечного продукта ПОЛ, так и в состоянии активности СОД отмечаются четкие сдвиги в сторону редукции процессов пероксидации, стимуляции активности антиоксидантных ферментных систем. Однако эта тенденция реституции отставала по своей выраженности от эффекта, вызванного тиотразолином.

Так, если в гиппокампе при введении антиоксиданта содержание МДА снижалось на 31% (Р<0,05), а активность СОД и каталазы повышалась на 79, 6% (Р<0,05) и 56,4% (Р<0,05), то карбамазепин вызывал более слабые изменения: рост активности СОД - на 53, 8% (Р<0,05), а каталазы - на 48,8% (Р<0,05). Это свидетельствует об определенном метаболическом дефиците, неполной нормализации, которая проявляется даже при выраженной конвульсантной феноменологии.

Более полное восстановление с некоторым преимуществом антиоксидантного эффекта удалось получить при одновременном использовании карбамазепина и тиотриазолина в дозах 10 мг/кг и 25 мг/кг соответственно. В этом случае анализ всех показателей окислительного обмена свидетельствует о четком ослаблении прооксидантных реакций. Эта тенденция закономерно прослеживается со стороны как количественной характеристики продукта ПОЛ - МДА, так и в отношении активности антиоксидантных ферментов. Ее выраженность можно отметить во всех отделах мозга (за исключением ствола, где сдвиги функции СОД не носили закономерного характера). Особенно четкие изменения констатируются в гиппокампе, наиболее значимой структуре при судорожных приступах.

Повышение дозы карбамазепина до 15 мг/кг сопровождалось незначительным повышением антиоксидантного баланса в структурах головного мозга. Как видно из таблицы 8, активность каталазы несколько увеличилась по сравнению с дозой 10 мг/кг как в кирковых участках (+44,60%, Р<0,05), так и в гиппокампе (+50,30%, Р<0,05) и стволе мозга (+23%). Аналогичный небольшой уровень активации наблюдался также со стороны СОД в неокортексе (+38,2%, Р<0,05), гиппокампе (+59,1%, Р<0,05) и стволе (+17%). Тот же небольшой уровень изменений отмечался относительно редукции содержимого МДА в разных структурах мозга (уменьшение от 15,4 до 29,1%).

Снижение дозы тиотриазолина до 10 мг/кг приводило к более выраженному увеличению интенсивности процессов пероксидации. Сравнение показателей при дозах тиотриазолина 10 мг/кг и тиотриазолина 25 мг/кг свидетельствует, что содержание МДА повышалось на 4-5% при уменьшении дозы препарата.

Таким образом, изучение процессов ПОЛ свидетельствует, что комбинация, которая состоит из 15 мг/кг карбамазепина и 10 мг/кг тиотриазолина, является эффективной, хотя при этом и уступает соотношению карбамазепина и тиотриазолина 2:5. О преимуществах такого состава свидетельствуют данные по изучению трудоспособности и антигипоксического эффекта.

Синергизм метаболических эффектов карбамазепина и тиотриазолина со стороны ведущих мозговых структур дает основание считать рекомендованную комбинацию важным средством терапии и профилактики нарушений функции ЦНС при эпилептической патологии.

Пример 8

Изучение антигипоксического действия комбинации препаратов

Известно, что антигипоксические и антиоксидантные свойства многих лекарственных средств являются взаимосвязанными, поскольку защита и стабилизация клеточных мембран является главным механизмом протекции клеток от повреждающего влияния активных форм кислорода, которым объясняют защитный эффект препаратов.

Исследование возможных проявлений антигипоксического действия проводили методом гипоксической гипоксии. Экспериментальных животных (белые беспородные мышы) через 60 мин после введения препаратов и их комбинации помещали в колбы объемом 125 мл с хорошо притертыми пробками. Определяли время выживания животных в замкнутом пространстве.

Изучение роли карбамазепина и тиотриазолина в повышении устойчивости животных к гипоксии показало, что обоим препаратам в определенной степени присуща способность повышать резистентность к дефициту снабжения кислородом. Уже в дозе 10 мг/кг тиотриазолин приводил к тенденции удлинения продолжительности жизни животных на 18%. При увеличении его дозировки до 25 мг/кг отмечалось достоверное увеличение продолжительности жизни мышей в герметически закрытом пространстве на 27,96% (Р<0,05). Таким образом, удалось установить соответствующую дозо-зависимость действия для тиотриазолина по антигипоксической активности. Карбамазепин также вызвал антигипоксичный эффект, но вариации с разными дозами - 10 и 15 мг/кг - существенным образом не отобразились на способности к переживаемости в условиях дефицита кислорода, достоверно колеблясь в пределах 20,6% и 22,3% (Табл.9).

Комбинация антиоксиданта с антиконвульсантом дала наиболее четкий противогипоксический эффект, особенно при сочетании тиотриазолина в дозе 25 мг/кг и карбамазепина - 10 мг/кг. В этих условиях устойчивость к гипоксии превышала на 32% (Р<0,05) показатели контроля. Таким образом, данные экспериментов убедительно свидетельствуют об адаптационном характере влияния комбинация тиотриазолина и карбамазепина на метаболические сдвиги в организме при дефиците кислорода.

Выявленные в результате вышеописанных исследований преимущества заявленного комбинированного средства над средствами, принятыми в качестве прототипа и аналога, проявляются только при четко определенных соотношениях, в качестве активной основы заявляемого средства карбамазепина и тиотриазолина в виде таблеток, капсул и порошков.

Указанные соотношения компонентов и эффект не являются очевидными и определяются посредством глобального и многостороннего исследования соединений компонентов в широком спектре их соотношений. Следовательно, заявленное комбинированное лекарственное средство соответствует изобретательскому уровню и может быть признано изобретением.

Литература

1. Машковский М.Д. Лекарственные средства. Изд-во 15. - М.: Медицина, 2005. - С.41-42.

2. Вицкова Г.Ю., Башкатова В.Г., Наркевич В.Б. и др. // Психофармакол. и биол. Наркол., 2002, т.2, №1-2, с.198-202.

3. Сутковой Д.А. Роль активации перекисного окисления липидов тканей в реакции организма на ноцицептивные стимулы // Журнал невропатологии и психиатрии им. С.С.Корсакова. - 1991. - Т.91. - №12 - С.43-46.

4. Воскресенский О.Н. Биоантиоксиданты и свободнорадикальная патология. - Полтава: Московское общество испытателей природы. - 1987. - С.153.

5. Справочник Компендиум, Киев: Морион, 2004. - С.Л - 948.

6. Мазур И.А., Беленичев Н.Л. и другие. "Тиотриазолин". Запорожье - Львов; "Наутилус", 2005, с.26-40.

Таблица 1
Влияние препаратов и их комбинаций на проявления максимальных электрошоковых судорог у крыс № п/п Условия экспери-
мента Дозы препаратов, мг/кг Количество крыс в группе Количество крыс с электро-шоковыми судорогами Длительность электро- шоковых судорог Длительность тонической экстензии задних конечностей M±m
с % M±m
с % 1 МЭШ - 10 10 48±0,8 - 19,6±0,54 - 2 Карбамазепин 5 10 9 18,88±0,82 -60,9%* 9,22±0,36 -53,07%* 10 10 6 9,5±0,42 -80,21%* 5,16±0,4 -73,7%* 15 10 2 5,5±0,5 -88,55%* -   20 10 0 -   -   3 Тиотриазолин 10 6 6 31,33±1,2 -34,73%* 14,33±0,55 -27,05%* 15 6 5 25,6±1,32 -46,67%* 13,6±1,2 -30,62%* 20 6 5 26,6±1,96 -48,75%* 10,2±0,86 -48,0%* 25 6 4 19,75±2,25 -58,86%* 7,5±1,04 -61,74%* 30 6 4 16,75±1,18 -65,11%* 3,5±0,64 -82,15%* 40 6 4 10,75±1,49 -77,61%* 3,25±0,75 -83,42%* 50 6 3 8,66±0,88 -81,95%* 2,33±0,33 -88,1%* 60 6 2 7,5±0,5 -84,38%* - - 70 6 2 5,5±0,5 -88,55%* - - 4 Карбамазепин + тиотриазолин 5+25 6 3 11,66±0,33 -75,7%* 3,33±0,33 -83,75%* 5+30 6 3 10,66±0,33 -77,78%* 2,35±0,33 -88,1%*     5+40 6 3 8,33±0,33 -82,64%* 2±0 -89,8%*     5+50 6 2 5,5±0,5 -88,56%* - -     10+15 10 5 8±0,4 -83,75%* 3,75±0,47 -80,62%*     10+20 10 2 3,5±0,5 -92,74%* - -     10+25 10 0 - - - -     15+10 10 2 4,62±0,35 -95,8%* 2,37±0,4 -87,1%*     15+5 10 0 -   -   Примечание: В таблице изменения показателей поведения животных поданы в процентах от контрольных величин, которые приняты за 100%. (+) - повышение, (-) - снижение. Звездочка - отличия достоверны (Р<0,05).

Таблица 2
Влияние карбамазепина, тиотриазолина и их комбинаций на болевой порог в тесте электро- и термораздражения хвоста крысы № Препарат Показатель Вокализация исходный фон Вокализация на 60 мин Имерсия исходный фон Имерсия на 60 мин   Интактные М±m % 1,68±0,08 1,76±0,09+4,76% 3,08±0,25 3,14±0,13+1,94%   Повышенная судорожная готовность М±m % 2,1±0,04 2,18±0,08+3,8% 3,62±0,18 3,71±0,25+2,48% 1 карбамазепин 5 мг/кг М±m % 2,12±0,11 3,18±0,1+49,76%* 3,7±0,3 4,3±0,42+16,2% 2 карбамазепин 10 мг/кг М±m % 2,25±0,09 3,45±0,14+53,33%* 3,5±0,34 5,0±0,33+42,6%* 3 карбамазепин 15 мг/кг М±m % 2,18±0,07 3,23±0,07+48,2%* 3,7±0,3 5,3±0,36+42,8%* 4 карбамазепин 20 мг/кг М±m % 2,11±0,07 3,5±0,08+65,87%* 3,6±0,33 5,2±0,38+45,6%* 5 карбамазепин 25 мг/кг М±m % 2,135±0,08 3,43±0,11+60,42%* 3,8±0,35 5,3±0,42+40,3%* 6 тиотриазолин 5 мг/кг М±m % 2,25±0,06 2,68±0,12+18,88%* 3,6±0,33 4,4±0,42+23,4% 7 тиотриазолин 10 мг/кг М±m % 2,25±0,09 3,18±0,1+41,11%* 3,7±0,3 4,7±0,51+28,3% 8 тиотриазолин 25 мг/кг М±m % 2,0±0,08 3,33±0,11+66,25%* 3,8±0,35 5,0±0,33+30,6%* 9 карбамазепин 10 мг/кг + тиотриазолин 5 мг/кг М±m % 2,21±0,07 3,28±0,1+48,4%* 3,5±0,34 4,5±0,45+28,6% 10 карбамазепин 10 мг/кг + тиотриазолин 10 мг/кг М±m % 2,19±0,08 3,23±0,11+47,4%* 3,6±0,33 4,8±0,41+32,1% 11 карбамазепин 10 мг/кг + тиотриазолин 25 мг/кг М±m % 1,955±0,07 3,83±0,15+95,65%* 3,7±0,3 6,5±0,34+76,9%* 12 карбамазепин 15 мг/кг + тиотриазолин 5 мг/кг М±m % 2,11±0,07 3,28±0,07+55,5%* 3,8±0,35 5,2±0,46+39,6% 13 карбамазепин 15 мг/кг + тиотриазолин 10 мг/кг М±m % 2,03±0,08 3,63±0,05+78,9%* 3,5±0,34 5,2±0,41+48,1%* 14 карбамазепин 20 мг/кг + тиотриазолин 5 мг/кг М±m % 2,09±0,08 3,55±0,06+69,9%* 3,6±0,33 5,8±0,44+61,7%* 15 карбамазепин 20 мг/кг + тиотоиазолин 10 мг/кг М±m % 2,02±0,08 3,58±0,06+77,2%* 3,6±0,33 5,7±0,42+59,3%* Примечание: В таблице изменения показателей поведения животных поданы в процентах от исходных величин, которые приняты за 100%. (+) - повышение, (-) - снижение. Звездочка - отличия достоверны (Р<0,05).

Таблица 3
Влияние карбамазепина, тиотриазолина и их комбинаций на порог боли на модели "уксусно-кислые " корчи (судороги) (при внутрибрюшинном одноразовом введении мышам) Группы Показатели Среднее количество корчей Контроль М 47,4   ±m 1,01 Карбамазепин, 10 мг/кг М 18,9   ±m 0,52   % -60,13%* Карбамазепин, 15 мг/кг М 14,1   ±m 0,56   % -70,3%* Карбамазепин, 20 мг/кг М 16,3   ±m 0,59   % -65,6%* Тиотриазолин, 25 мг/кг М 16,6   ±m 0,49   % -65,0%* Карбамазепин 10 мг/кг М 6,3 + ±m 0,47 тиотриазолин, 25 мг/кг % -86,7%* Карбамазепин, 15 мг/кг М 10,3 + ±m 0,51 тиотриазолин, 10 мг/кг % -78,3%* Карбамазепин, 20 мг/кг М 4,7 + ±m 0,42 тиотриазолин, 5 мг/кг % -90,1%* Карбамазепин, 20 мг/кг М 12,8 + ±m 0,57 тиотриазолин, 10 мг/кг % -73,0%* Примечание: В таблице изменения показателей поведения животных представлены в процентах от контрольных величин, которые приняты за 100%. (+) - повышение, (-) - снижение. Звездочка - отличия достоверны (Р<0,05).

Таблица 4
Стресс-протективный эффект карбамазепина, тиотриазолина и их комбинаций на модели "неизбегаемого плавания" Группы Показатели Время пассивного плавания, с Интактные М 187,3   ±m 3,33 Контроль М 250,4 (ПСГ) ±m 9,25   % +33,47* Карбамазепин 10 мг/кг М 212,8 (ПСГ) ±m 13,65   % -15 Карбамазепин 15 мг/кг М 312,5 (ПСГ) ±m 4,16   % +24,8* Карбамазепин 20 мг/кг М 181,0 (ПСГ) ±m 4,40   % -27,7* Тиотриазолин 10 мг/кг М 262,9 (ПСГ) ±m 5,7   % +5 Тиотриазолин 25 мг/кг М 225,4 (ПСГ) ±m 5,87   % -10 Карбамазепин, 10 мг/кг + М 149,3 тиотриазолин, 25 мг/кг ±m 5,90 (ПСГ) % -20,3* Карбамазепин, 15 мг/кг + М 313,5 тиотриазолин, 10 мг/кг ±m 4,12 (ПСГ) % +25,2* Примечание: В таблице изменения показателей поведения животных представлены в процентах от контрольных величин (ПСГ), которые приняты за 100%, показатели контрольной группы сравнивались с показателями у интактных животных. (+) - повышение, (-) - снижение. Звездочка - отличия достоверны (Р<0,05).

Таблица 5
Влияние карбамазепина, тиотриазолина и их комбинаций на поведение животных с повышенной судорожной готовностью мозга в тесте "Открытое поле" № г/п Препарат   Показатели Горизонтали Вертикали Норки Груминг Болюсы 1 Контроль (ПСГ) М 21,1 1,4 8,4 32,9 7,4 ±m 0,52 0,16 0,58 0,77 0,6 % -32,0* -86,54* -64,1* +147,37* +85,7* 2 Карбамазепин, 10 мг/кг М 18,3 0,77 5,4 20,9 5,6 ±m 1,59 0,13 0,33 0,45 0.3 % -10 -48,2* -32,9* -30,5* -28,6* 3 Карбамазепин, 15 мг/кг М 14,8 0,7 3,8 13,8 5,1 ±m 2,80 0,15 0,29 0,32 0,4 % -29,3 -60,5* -51,7* -56.1* -29,7* 4 Карбамазепин, 20 мг/кг М 11,2 0,7 2,0 14,1 4,6 ±m 0,38 0,15 0,25 0,27 0,22 % -42,3* -66,5* -74,3* -53,2* -36,6* 5 Тиотриазолин, 5 мг/кг М 29,6 1,4 11,7 27,9 7,5 ±m 2,90 0,16 0,36 2,60 0,37 % +26,7 +7,8 +28,7* -16,3 +8,7 6 Тиотриазолин, 10 мг/кг М 27,1 2,1 12,8 25,0 7,0 ±m 0,27 0,31 0,24 3,3 0,29 % 36,8* +24,1 +50,6* -22,1 -9,8 7 Тиотриазолин, 25 мг/кг М 38,3 2,8 14,3 27,4 5,7 ±m 0,33 0,24 0,26 3,10 0,54 % +66,6* +49,2* +71,8* -18,2 -20,6 8 Карбамазепин, 10 мг/кг + Тиотриазолин, 25 мг/кг М 23,4 1,5 9,7 20,5 5,3 ±m 0,37 0,22 0,3 0,42 0,21 % +28,8* +8,3 +12,0 -32,7* -37,1* 9 Карбамазепин, 15 мг/кг+Тиотриазолин, 10 мг/кг М 26,3 1,3 8,2 15,2 4,9 ±m 2,10 0,21 0,9 0,24 0,27 % +22,5 -18,6 -15,3 -50,1* -35,4* 10 Карбамазепин, 20 мг/кг+Тиотриазолин, 5 мг/кг М 13,7 1,2 5,4 16,6 4,8 ±m 0,3 0,13 0,26 0,22 0,29 % -36,5* -40,0* -30,8* -49,4* -37,7* Примечание: В таблице изменения показателей поведения животных поданы в процентах от начальных величин, которые приняты за 100%. (+) - повышение, (-) - снижение. Звездочка - отличия достоверны (Р<0,05).

Таблица 6
Влияние карбамазепина, тиотриазолина и их комбинаций на показатели физической работоспособности крыс с повышенной судорожной готовностью мозга Группы Показатели Время, с Контроль М 39,2   ±m 0,33 Карбамазепин, 10 мг/кг М 29,2 ±m 0,25 % -25,6* Карбамазепин, 15 мг/кг М 24,9 ±m 0,28 % -36,6* Тиотриазолин, 10 мг/кг М 45,1 ±m 2,5 % +15 Тиотриазолин, 25 мг/кг М 48,0 ±m 0,26 % +22,5* Карбамазепин, 15 мг/кг + Тиотриазолин, 10 мг/кг М 43,2 ±m 1,77 % +10,3 Карбамазепин, 10 мг/кг + Тиотриазолин, 25 мг/кг М 46,3 ±m 0,63 % +18,1* Примечание: В таблице изменения показателей поведения животных представлены в процентах от контрольных величин, которые приняты за 100%. (+) - повышение, (-) - снижение. Звездочка - отличия достоверны (Р<0,05).

Таблица 7
Влияние карбамазепина, тиотриазолина и их комбинаций на продолжительность иммобильности животных в блице-тесте "подвешивание за хвост" (острый эксперимент, внутрибрюшинное введение) Группы Показатели Исходный фон, с Время, с   М 10 10,1 Контроль ±m   0,23   %   +1,00   М 10,9 12,6 Карбамазепин, 10 мг/кг ±m   0,37   %   +24,75*   М 10,3 11,9 Тиотриазолин, 25 мг/кг ±m   0,84   %   +17,82 Карбамазепин, 10 мг/кг М 9,8 13,2 + ±m   0,49 Тиотриазолин, 25 мг/кг %   +30,69*   М 12 12,3 Контроль ±m   0,21   %   +2,50   М 10,9 17,2 Карбамазепин, 15 мг/кг ±m   0,44   %   +39,83*   М 11,5 14,8 Тиотриазолин, 10 мг/кг ±m   1,05   %   +20,32 Карбамазепин, 15 мг/кг М 11,9 17,9 + ±m   0,53 Тиотриазолин, 10 мг/кг %   +45,52* Примечание: В таблице изменения показателей поведения животных представлены в процентах от контрольных величин, которые приняты за 100%. (+) - повышение, (-) - снижение. Звездочка - отличия достоверны (Р<0,05).

Таблица 8
Влияние карбамазепина, тиотриазолина и их комбинаций на показатели ПОЛ в головном мозге крыс Группы Показатель Каталаза, мКат/л/мг белка СОД, у.е./мг белка МДА, нМ/мг белка Кора Гиппокамп Ствол Кора Гиппокамп Ствол Кора Гиппокамп Ствол Интактные М±m 45,8±3,2 23,9±2,2 44,3±2,2 0,38±0,01 0,28±0,006 0,36±0,009 2,68±0,12 2,13±0,11 3,12±0,08   Контроль (ПСГ) М±m 31,48±2,1 12,8±1,3 28,57±2,3 0,26±0,009 0,13±0,009 0,29±0,029 3,73±0,11 3,451±0,14 4,35±0,12 % -31,27* -46,03* -35,5* -31,58* -55* -18 +39,1* +61,97* +39,61* Карбамазепин, 10 мг/кг (ПСГ) М±m 44,01±2,4 19,05±1,4 34,88+2,0 0,35±0,008 0,20±0,009 0,34±0,007 3,11±0,24 2,31±0,17 3,42±0,40 % +39,81* +48,8* +22,1 +35,38* +53,8* +16 -16,63 -32,9* -21,3 Тиотриазолин 25 мг/кг (ПСГ) М±m 47,69±1,8 20,02±1,1 42,25±1,1 0,40±0,009 0,23±0,008 0,34±0,01 2,48±0,10 2,38±0,10 3,14±0,53 % +51,5* +56,4* +47,9* +52,8* +79,6* +16 -33,4* -31,0* -27,7 Карбамазепин 10 мг/кг + Тиотриазолин 25 мг/кг (ПСГ) M±m 51,09±3,1 22,83±2,1 41,97±2,7 0,40±0,009 0,24±0,007 0,36±0,008 2,46±0,14 2,02±0,16 3,2±0,47 % +62,3* +78,4* +46,9* +54,8* +87,9* +26 -34,1* -41,45* -26,3 Карбамазепин 15 мг/кг + Тиотриазолин 10 мг/кг (ПСГ) М±m 40,08±2,96 21,44±2,13 41,14±2,96 0,39±0,29 0,22±0,018 0,34+0,02 2,38±0,18 2,12±0,18 3,30±0,32   % +55,9* +67,5* +44,0* +48,7* +71,5* +18,9 -36,1* -38,6* -24,1 Примечание: В таблице изменения показателей представлены в процентах от контрольных величин ПСГ, которые приняты за 100%, а отклонение контрольных величин (ПСГ) - в сравнении с показателями у интактных животных. (+) - повышение, (-) - снижение. Звездочка - отличия достоверны (Р<0,05).

Таблица 9
Антигипоксическая активность тиотриазолина, карбамазепина и их комбинаций на модели "гипоксической гипоксии" Группы Показатели Продолжительность жизни, с Контроль М 712,5   ±m 9,64 Карбамазепин, 10 мг/кг М 859,3   ±m 10,03   % +20,60* Карбамазепин, 15 мг/кг М 871,4   ±m 9,02   % +22,30* Тиотриазолин, 10 мг/кг М 840,8   ±m 54,49   % +18 Тиотриазолин, 25 мг/кг М 911,7   ±m 10,01   % +27,96* Карбамазепин, 10 мг/кг М 940,5 + ±m 10,29 Тиотриазолин, 25 мг/кг % +32,00* Карбамазепин, 15 мг/кг М 914,9 + ±m 9,95 Тиотриазолин, 10 мг/кг % +28,4* Примечание: В таблице изменения показателей представлены в процентах от исходных величин, которые приняты за 100%. (+) - повышение, (-) - снижение. Звездочка - отличия достоверны (Р<0,05).

Изобретение относится к области медицины и фармации, в частности к лекарственным средствам, используемым для лечения эпилепсии и нейропатической боли. Средство по изобретению содержит в качестве активной основы карбамазепин и тиотриазолин в массовом соотношении 1:(0,25-2,5). Средство обладает противосудорожным, нейропротективным, ноотропным, анальгетическим, антидепрессивным, актопротективным и антиоксидантным действием. Использование комбинированного средства по изобретению позволяет повысить эффективность лечения указанных болезней в сравнении с использованием карбамазепина и тиотриазолина раздельно и снизить проявление токсического действия средства при лечении. 9 табл.

Комбинированное противосудорожное, нейропротективное, ноотропное, анальгетическое, антидепрессивное, актопротективное и антиоксидантное средство, характеризующееся тем, что в качестве активной основы оно содержит карбамазепин и тиотриазолин в массовом соотношении 1:(0,25-2,5).