РАНОЗАЖИВЛЯЮЩИЙ ПРОБИОТИЧЕСКИЙ ПРЕПАРАТ Российский патент 2010 года по МПК A61K35/74 A61P37/02 

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в качестве ранозаживляющего средства при лечении инфицированных, травматических и ожоговых повреждений кожного покрова.

Известна биологически активная композиция на основе хитозана (патент РФ №2197971, МПК А61К 31/722, 2003 год). Состав композиции содержит хитазановый гель или хитозановую суспензию и ионы благородных металлов в количестве не более 10 мас.%. Известная композиция обеспечивает высокое качество заживления поверхностных ран - ожоговых, язвенных и других за счет высокой проникающей способности и заживляющего и обеззараживающего действия.

Однако недостатком известной композиции является высокая токсичность, обусловленная присутствием ионов благородных металлов, поскольку эти ионы обладают способностью в больших количествах накапливаться в органах на путях выведения из организма.

Известен ранозаживляющий биопрепарат, содержащий живую микробную массу штамма Bacillus subtilis 3H, или штамма Bacillus subtilis 11B, или штамма Bacillus 12В и гелевую основу (заявка РФ №2006121043, МПК А61К 35/74, 2008 год) (прототип). Препарат может содержать в качестве гелевой основы коллаген, ихтиокол, карбопол, натрий-карбоксиметилцеллюлозу, сополимер стирола с малеиновым ангидридом. Кроме того, препарат может содержать целевые добавки, в частности глицерин.

Однако недостатком известного биопрепарата является использование монокомпонентного пробиотика, который не может в должной мере обеспечить высокую активность препарата и, следовательно, значимую лечебную эффективность. Большой разброс диапазона живых клеток является препятствием в точном дозировании препарата. Кроме того, гелеобразующие агенты, используемые в составе геля, не обладают высокой транскутанной проводимостью, а следовательно, не могут обеспечить необходимую биодоступность к патологическому очагу.

Таким образом, перед авторами стояла задача разработать ранозаживляющий пробиотический препарат, обладающий высоким лечебным эффектом, который достигается за счет высокой антагонистической активности в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, за счет стимуляции местного и общего гуморального и клеточного иммунитета, восстановления эндогенной микрофлоры.

Поставленная задача решена в новом ранозаживляющем пробиотическом препарате, содержащем живую микробную биомассу штаммов бактерий, гелевую основу и глицерин, который содержит в качестве биомассы бактерии штамма Bacillus subtilis 60T (ВКПМ №В-9907) в количестве (2-4)·10⁷ КОЕ·см^-3 и бактерии штамма Lactobacterium plantarum 8P-A3 в количестве (5-7)·10⁷ КОЕ·см^-3, а в качестве гелевой основы - кремнийорганический глицерогидрогель состава Si(С₃Н₇O₃)₄·хС₃Н₈О₃·yH₂O, где 3≤х≤10; 20≤у≤40; и дополнительно физиологический раствор при следующем соотношении компонентов, мас.%:

биомасса бактерий штамма Bacillus   subtilis 60T (ВКПМ №В-9907) и бактерий   штамма Lactobacterium plantarum 8P-A3 - 3÷5; кремнийорганический глицерогидрогель - 50÷60; глицерин - 20÷25; физиологический раствор - остальное до 100.

В настоящее время не известен ранозаживляющий пробиотический препарат, содержащий живую микробную биомассу бактерий штамма Bacillus subtilis 60T (ВКПМ №В-9907) в количестве не менее (2-4)·10⁷ КОЕ·см^-3 и бактерий штамма Lactobacterium plantarum 8P-A3 в количестве не менее (5-7)·10⁷ КОЕ·см^-3, а в качестве гелевой основы - кремнийорганический глицерогидрогель состава Si(С₃Н₇O₃)₄·хС₃Н₈О₃·уH₂О, где 3≤х≤10; 20≤у≤40; и дополнительно физиологический раствор.

Современный уровень медицинской практики позволяет сделать вывод о том, что для лечения инфекционных и травматических поражений пограничных покровов тела актуально, целесообразно и возможно использовать препараты на основе живых пробиотических бактерий. При этом наиболее эффективными следует считать такие препараты, в состав которых входят штаммы пробиотических микроорганизмов, обладающие выраженными антибактериальными свойствами. В этом плане перспективными являются бактериальные культуры таких видов, как Bacillus subtilis и Lactobacillus plantarum. Авторами в предлагаемом техническом решении использованы культуры штаммов Bacillus subtilis 60T (ВКПМ №В-9907) и Lactobacterium plantarum 8P-A3. Используемые штаммы имеют следующие паспортные характеристики:

Bacillus subtilis 60T (ВКПМ №В-9907). Бактериальные клетки представляют собой аэробные грамположительные спорообразующие палочки размером 0,8-2,7 мкм, расположенные одиночно или в виде цепочек. В аэробных условиях образуют овальные споры, которые располагаются в клетках центрально. При спорообразовании раздувания клеток не наблюдается.

На мясопептонном агаре, сусло-агаре, среде Громыко, среде Гаузе №2 штамм растет обильно, образует маточные складчатые колонии телесного цвета с изрезанными краями, легко снимающиеся петлей с агара.

В аэробных условиях на мясопептонном бульоне культура образует пленку. В анаэробных условиях не растет, не гидролизует мочевину. Бактериальная культура Bacillus subtilis 60T образует каталазу; дает положительную реакцию Фогес-Проскауэра; растет в присутствии 7% NaCl; гидролизует крахмал и кадеин; разжижает желатину. При росте на мясопептонном бульоне образует аммиак, не образует сероводород и индол. Ферментирует глюкозу, арабинозу, ксилозу с образованием кислоты без газа. Редуцирует нитраты, обесцвечивает метиленовую синь. Не обладает коагулазной, гиалуронидазной и лецитиназной активностью.

Штамм обладает антагонистичекой активностью в отношении тест-культур: Staphylocoous aureus, Candida albicans, Shigella Sonnei, Salmonella thyphimurium.

Lactobacterium plantarum 8P-A3. Бактерии этого штамма микроскопически представляют собой грамположительные палочки, расположенные одиночно или в цепочках, размером от 1,0 до 8,4 мкм. На плотных питательных средах (минерально-растительная среда, капустный агар) на 2 сутки культура образует мелкие ровные колонии белого цвета диаметром от 2 до 5 мм, выпуклые, с цельным ровным краем, непрозрачные, без пигмента.

Оптимальные значения величины рН питательной среды составляют от 5,8 до 6,2. Культура устойчива при понижении кислотной среды. Оптимальной температурой роста является 37°С.

Культура штамма развивается в мясопептонном бульоне с 6% содержанием хлорида натрия, ферментирует без образования газа глюкозу, рамнозу, сахарозу, галактозу, сорбит, мальтозу, лактозу и салацин. Восстанавливает лакмусовое молоко.

Данные штаммы с 1992 г. депонированы в музейной коллекции Центра военно-технических проблем биологической защиты научно-исследовательского института микробиологии Министерства обороны Российской Федерации. Кроме того, штамм В. subtilis 60T депонирован и во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (г.Москва) под номером В-9907.

Для конструирования предлагаемого препарата авторами была оценена антагонистическая активность штаммов Bacillus subtilis 60T (ВКПМ №В-9907) и Lactobacterium plantarum 8P-A3 при их совместном культивировании. При совместном выращивании культур штаммов Bacillus subtilis 60T (ВКПМ №В-9907) и Lactobacterium plantarum 8P-A3 на плотных питательных средах авторами было установлено, что эти культуры штаммов не оказывают друг на друга антагонистического воздействия и могут служить компонентами для создания комплексного препарата. Использование данных культур в составе комплексного препарата обеспечивает стабильность такого сочетания штаммов. Было доказано, что Bacillus subtilis 60T (ВКПМ №В-9907) и Lactobacterium plantarum 8P-A3 могут служить стабильным материалом для получения лечебного препарата, так как они сохраняют жизнеспособность и активность при лиофильном высушивании и в процессе длительного хранения.

В качестве гелевой основы в предлагаемом препарате использован кремнийорганический глицерогидрогель состава Si(С₃Н₇O₃)₄·хС₃Н₈О₃·yH₂O, где 3≤х≤10; 20≤у≤40, (патент РФ №2255939, МПК C07F 7/04, 2005 г.), который наряду с высокой транскутанной проводимостью медикаментозных средств самостоятельно оказывает положительное воздействие на организм. Известно, что кремний является эссенциальным элементом для нормального функционирования организма человека. Соединения кремния обнаруживаются практически во всех органах и тканях, они необходимы для нормального развития эпителиальных и соединительных тканей, способствуют биосинтезу коллагена и образованию костной ткани, играют существенную роль в метаболических процессах, препятствуют отложению холестерина в стенках кровеносных сосудов.

Экспериментальные исследования, проведенные авторами, позволили установить оптимальное количество микробной массы в составе гелевой композиции, обеспечивающее максимальное проявление антагонистической активности. В соответствии с экспериментальными данными оптимальная концентрация бактериальных клеток в 1,0 г гелевой композиции соответствует 10 разовым дозам для внутреннего применения, что составляет не менее 2·10⁷ КОЕ-см^-3 для штамма Bacillus subtilis 60T (ВКПМ №В-9907) и не менее 5·10⁷ КОЕ·см^-3 для штамма Lactobacterium plantarum 8P-A3. Одновременно при такой концентрации повышается сохраняемость бактериальных клеток при различных сроках хранения. В качестве консерванта для удлинения сроков хранения использован глицерин.

Количественное содержание компонентов в предлагаемом препарате обусловлено следующими причинами. При содержании биомассы бактерий менее 3 мас.%, кремнийорганического глицерогидрогеля менее 50 мас.% и глицерина менее 20 мас.% препарат становится неудобным для наружного применения в результате значительного снижения его динамической вязкости, что ведет к растеканию препарата в месте нанесения. При содержании биомассы бактерий более 5 мас.%, кремнийорганического глицерогидрогеля более 60 мас.% и глицерина более 25 мас.% снижается выраженность лечебного эффекта вследствие затруднения в реализации живыми бактериальными клетками своих пробиотических свойств.

Предлагаемый ранозаживляющий пробиотический препарат может быть получен следующим образом.

Для выращивания бацилл Bacillus subtilis 60T и Lactobacterium plantarum 8Р-А3 используют плотную (агаризованную) питательную среду Гаузе, мясопептонный агар, мясопептонный бульон и капустный агар. Концентрированную суспензию биокомпонентов получают методом сепарирования в боксированном сепараторе АСТ-3МБ из культуральной жидкости Bacillus subtilis 60T и Lactobacterium plantarum 8P-A3. Для приготовления физиологического раствора используют хлорид натрия, натрий фосфорнокислый двузамещенный и воду очищенную. После тщательного перемешивания исходных компонентов и растворения солей в раствор добавляют очищенную воду и измеряют величину рН, которая должна быть в пределах (6,9±0,1) ед. рН. Значение рН регулируют добавлением фосфорнокислого натрия. После установления водородного показателя физиологический раствор фильтруют через бязь, разливают в стеклянную посуду. Готовый раствор стерилизуют в автоклаве при температуре (121±2)°С в течение (21±1) минут. Стерильный физиологический раствор отвечает следующим требованиям: водородный показатель, ед. рН - 7,0±0,1; микрофлора - не допускается. Для приготовления препарата используют стеклянный реактор, оборудованный лопастной мешалкой с нижним спуском и загрузочным люком на съемной крышке. Физиологический раствор выливают в реактор, затем загружают глицерин и включают мешалку. Перемешивают в течение 10-15 минут, после чего в реактор загружают кремнийорганический глицерогидрогель. Смесь еще раз перемешивают до получения однородной массы, в которую добавляют необходимое количество концентрированной микробной массы (Bacillus subtilis 60T и Lactobacterium plantarum 8P-A3) и еще раз перемешивают в течение 5-10 мин. По достижению гомогенности мешалку отключают. Готовый препарат представляет собой непрозрачную однородную гелеобразную массу светло-бежевого цвета, без запаха, водородный показатель рН 5,5-8,8; динамическая вязкость, сП, - 1200-1500.

Предлагаемое техническое решение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Для выращивания бацилл штамма Bacillus subtilis 60T (ВКПМ №В-9907) и штамма Lactobacterium plantarum 8P-A3 используют плотную питательную среду Гаузе. Концентрированную суспензию биокомпонентов штамма Bacillus subtilis 60T (ВКПМ №В-9907) в количестве 2·10⁷ КОЕ·см^-3 и штамма Lactobacterium plantarum 8P-A3 в количестве 5·10⁷ КОЕ·см^-3 получают методом сепарирования в боксированном сепараторе АСТ-3МБ из культуральной жидкости Bacillus subtilis 60T и Lactobacterium plantarum 8P-A3. Для приготовления 1 дм³ физиологического раствора используют 8,5 г хлорида натрия, 0,2 г натрий фосфорнокислый двузамещенный и 0,9 дм³ воды очищенной. После тщательного перемешивания исходных компонентов и растворения солей измеряют величину рН, которая равна 6,9 ед. рН. Физиологический раствор фильтруют через бязь и выливают в стеклянную посуду. Готовый раствор стерилизуют в автоклаве при температуре 121°С в течение 21 минут. Стерильный физиологический раствор отвечает следующим требованиям: водородный показатель, ед. рН - 6,9; микрофлора - отсутствует. Для приготовления препарата используют стеклянный реактор, оборудованный лопастной мешалкой с нижним спуском и загрузочным люком на съемной крышке. Физиологический раствор выливают в реактор, затем загружают 200 г глицерина (20 мас.%) и включают мешалку. Перемешивают в течение 10 минут, после чего в реактор загружают 500 г кремнийорганического глицерогидрогеля состава Si(С₃Н₇O₃)₄·3С₃Н₈О₃·20Н₂О (50 мас.%). Смесь еще раз перемешивают до получения однородной массы, в которую добавляют 30 г концентрированной микробной массы (Bacillus subtilis 60T и Lactobacterium plantarum 8P-A3) (3 мас.%) и еще раз перемешивают в течение 5 мин. По достижению гомогенности мешалку отключают. Готовый препарат представляет собой непрозрачную однородную гелеобразную массу светло-бежевого цвета, без запаха, водородный показатель рН 5,5-8,8; динамическая вязкость, сП, - 1200. Состав готового продукта, мас.%: биомасса бактерий штамма Bacillus subtilis 60T (ВКПМ №В-9907) и бактерий штамма Lactobacterium plantarum 8P-A3 - 3; кремнийорганический глицерогидрогель состава Si(С₃Н₇O₃)₄·3С₃Н₈О₃·20Н₂О - 50; глицерин - 20; физиологический раствор - 27.

Пример 2. Для выращивания бацилл штамма Bacillus subtilis 60T (ВКПМ №В-9907) и штамма Lactobacterium plantarum 8P-A3 используют плотную питательную среду Раузе. Концентрированную суспензию биокомпонентов штамма Bacillus subtilis 60T (ВКПМ №В-9907) в количестве 4·10⁷ КОЕ·см^-3 и штамма Lactobacterium plantarum 8P-A3 в количестве 7·10 КОЕ·см^-3 получают методом сепарирования в боксированном сепараторе АСТ-3МБ из культуральной жидкости Bacillus subtilis 60T и Lactobacterium plantarum 8P-A3. Для приготовления 1 дм³ физиологического раствора используют 8,5 г хлорида натрия, 0,2 г натрий фосфорнокислый двузамещенный и 0,9 дм³ воды очищенной. После тщательного перемешивания исходных компонентов и растворения солей измеряют величину рН, которая равна 7,0 ед. рН. Физиологический раствор фильтруют через бязь и выливают в стеклянную посуду. Готовый раствор стерилизуют в автоклаве при температуре 120°С в течение 22 минут. Стерильный физиологический раствор отвечает следующим требованиям: водородный показатель, ед. рН - 7,0; микрофлора - отсутствует. Для приготовления препарата используют стеклянный реактор, оборудованный лопастной мешалкой с нижним спуском и загрузочным люком на съемной крышке. Физиологический раствор выливают в реактор, затем загружают 250 г глицерина (25 мас.%) и включают мешалку. Перемешивают в течение 15 минут, после чего в реактор загружают 600 г кремнийорганического глицерогидрогеля состава Si(С₃Н₇O₃)₄·10С₃Н₈О₃·40Н₂О (60 мас.%). Смесь еще раз перемешивают до получения однородной массы, в которую добавляют 50 г концентрированной микробной массы (Bacillus subtilis 60T и Lactobacterium plantarum 8P-A3) (5 мас.%) и еще раз перемешивают в течение 10 мин. По достижению гомогенности мешалку отключают. Готовый препарат представляет собой непрозрачную однородную гелеобразную массу светло-бежевого цвета, без запаха, водородный показатель рН 5,5-8,8; динамическая вязкость, сП, - 1500. Состав готового продукта, мас.%: биомасса бактерий штамма Bacillus subtilis 60T (ВКПМ №В-9907) и бактерий штамма Lactobacterium plantarum 8P-A3 - 5; кремнийорганический глицерогидрогель состава Si(С₃Н₇O₃)₄·10С₃Н₈О₃·40Н₂О - 60; глицерин - 25; физиологический раствор - 10.

Доклинические испытания предлагаемого препарата проводили на лабораторных животных из вивария кафедры фармакологии Уральской Государственной Медицинской Академии и Центра военно-технических проблем биологической защиты научно-исследовательского института микробиологии Министерства обороны Российской Федерации: белых мышах с массой тела 16-22 г (520 особей) и морских свинках - 200-250 г (60 особей). Животные содержались в одинаковых условиях вивария с соответствующим пищевым рационом. Работу с экспериментальными животными проводили в соответствии с "Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных".

На этапе доклинических испытаний предлагаемого препарата, прежде всего, была изучена его острая и хроническая токсичность.

Острую токсичность определяли на двух видах лабораторных животных (белые мыши и белые крысы) при различных путях введения: подкожном и местном (накожном). Препарат применяли однократно в концентрации 10⁷ микробных клеток на 10 г массы животного (рекомендуемая разовая лечебная доза). Продолжительность наблюдения за животными после введения препарата составила 1 сутки. В процессе наблюдения за животными ежедневно фиксировали следующие показатели: общее состояние животных, двигательную активность, интенсивность потребления корма и воды, изменение массы тела, а также регистрировали количество выживших или погибших животных. При определении острой и хронической токсичности предлагаемого препарата на экспериментальных животных было исследовано 85 гистологических срезов органов и тканей лабораторных животных.

В результате изучения острой токсичности предлагаемого препарата установлено, что все лабораторные животные оставались живыми и признаков интоксикации у них не выявлено в течение срока наблюдения.

Таким образом, полученные результаты по изучению острой токсичности явились основанием для исследований по оценке влияния предлагаемого препарата на лабораторных животных при его длительном применении (хроническая токсичность). Хроническую токсичность препарата изучали при его ежедневном накожном нанесении в концентрации 10⁷ КОЕ в объеме 0,5 см³ на животное в течение 30 суток. На протяжении всего эксперимента животные находились под ежедневным наблюдением, при этом регистрировали потребление корма и воды, изменение массы и температуры тела, состояние волосяного покрова и слизистых оболочек, поведенческие реакции, а также выживаемость (гибель) животных. При наблюдении за поведением экспериментальных животных после ежедневных аппликаций предлагаемого препарата не отмечено каких-либо отрицательных изменений. Внешний вид животных, состояние волосяного покрова, интенсивность потребления корма и воды были в норме. Также в норме были динамика изменения массы тела и температуры экспериментальных животных за время наблюдения. В месте нанесения препарата у всех экспериментальных животных отсутствовали гиперемия, отечность, шелушение, усиление капиллярного рисунка. В течение всего срока наблюдения гибели животных также не наблюдалось.

Таким образом, изучение острой и хронической токсичности предлагаемого препарата свидетельствует об отсутствии у него токсического действия на экспериментальных животных. Результаты патоморфологических исследований органов и систем экспериментальных животных позволяют сделать заключение о том, что при изучении острой и хронической токсичности предлагаемого препарата при различных путях введения патологических изменений не выявлено.

Терапевтическую эффективность предлагаемого препарата изучали на моделях резаных ран и термических ожогов кожи экспериментальных животных. В качестве препарата сравнения использовали левосин, который представляет собой мазь для наружного применения, содержащую левомицетин, сульфадиметоксин, метилурацил, тримекаин, полиэтиленоксид. Левосин оказывает противомикробное, местноанестезирующее, противовоспалительное и стимулирующее регенетативное действие. Он широко применяется в современной медицинской практике для лечения инфицированных ран кожи и слизистых различной этиологии (ожоги, раны, трудно заживающие раны).

В таблице 1 представлены экспериментальные данные по лечению термических ожогов кожи у белых мышей предлагаемым препаратом и левосином.

ТАБЛИЦА 1 Длительность лечения по фазам раневого процесса, сутки Препарат Степень ожога Очищение ран от гнойно-некротических тканей Образование грануляций Начало эпителизации Время излечения Эффективность лечения, % Предлагаемый препарат (пример 1) I 7,2±0,8 8,3±0,5 9,0±0,9 10,2±0,7 32,9 II 9,8±0,6 11,3±0,6 12,0±0,8 11,5±0,9 35,4               I 8,1±0,7 9,9±0,7 10,9±0,9 13,1±0,7 13,8 Левосин II 10,1±0,6 11,9±0,6 12,6±0,8 14,9±0,9 16,3 Контроль (без лечения) I 8,5±0,9 11,6±0,6 13,1±0,8 15,2±0,9 - II 11,2±0,7 13,4±0,4 14,8±0,7 17,8±1,0 -

Результаты экспериментальных данных свидетельствуют об эффективности применения предлагаемого препарата для лечения термических ожогов первой и второй степени. Очищение ран от гнойно-некротических тканей, образование грануляций, начало эпитализации в группе животных, леченных новым препаратом, происходило в более короткие сроки по сравнению с животными, леченными левосином. Время полного излечения термических ожогов кожи в группе животных, леченных предлагаемым препаратом, составило 10-11 суток для первой степени ожога и 11-12 суток - для второй степени ожога, что значительно меньше, чем в группе животных, которых лечили левосином.

Результаты терапевтической эффективности предлагаемого препарата при лечении резаных ран кожи у экспериментальных животных (морских свинок) представлены в таблице 2.

Результаты, приведенные в таблице 2, свидетельствуют о сравнительной более высокой ранозаживляющей активности предлагаемого препарата. Так, на 5-6 сутки в группе животных, леченных экспериментальным препаратом, уменьшалась местная воспалительная реакция, на 5-7 сутки начиналось образование грануляционной ткани, на 8-9 сутки рана полностью очищалась от некротических тканей, заполнялась грануляциями и начиналась эпителизация. Полное заживление наступало в сроки от 10 до 11 суток, против 13-14 суток в контрольной группе (без лечения) и 12-13 суток в группе животных, леченных левосином. Сроки длительности излечения ран в подопытной группе животных, леченных предлагаемым препаратом, уменьшились на 20% быстрее, чем в контрольной (без лечения) группе животных, и на 7,4% по сравнению с группой животных, которым наносился левосин.

Таким образом, авторами предлагается новый эффективный медицинский препарат на основе пробиотиков и трансдермального проводника для лечения инфекционных и травматических, в том числе ожоговых заболеваний кожи. В результате экспериментальных исследований был разработан компонентный состав гелевого пробиотического препарата для наружного применения. Микробиологические исследования штаммов Bacillus subtilis 60T (ВКПМ №В-9907) и Lactobacterium plantarum 8Р-А3-5 показали, что их культурально-морфологические и биохимические свойства в составе предлагаемого препарата не изменялись и соответствовали паспортным характеристикам. Антагонистическая активность штаммов была высокой и при оценке ее с использованием тест-препаратов таких видов патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, как S.aureus, S. pyogenes, С.albicans, Ps. aeruginosa, P. vulgaris, P. mirabulis, E.coli, не изменялись в течение длительного периода. Жизнеспособность пробиотических микроорганизмов в составе препарата не снижалась в течение длительного времени (3 месяца при температуре (18±2)°С).

Изобретение относится к медицине и биотехнологии и может быть использовано в качестве ранозаживляющего средства при лечении инфицированных, травматических и ожоговых повреждений кожного покрова. Ранозаживляющий пробиотический препарат содержит при следующем соотношении компонентов, мас.%: биомассу бактерий штамма Bacillus subtilis 60T (ВКПМ В-9907) и бактерий Lactobacterium plantarum 8P-A3 - 3÷5; кремнийорганический глицерогидрогель - 50÷60; глицерин - 20÷25; физиологический раствор - остальное до 100. Изобретение обеспечивает более высокую ранозаживляющую активность препарата за более короткие сроки излечения ран. 2 табл.

Ранозаживляющий пробиотический препарат, содержащий живую микробную биомассу штаммов бактерий, гелевую основу и глицерин, отличающийся тем, что он содержит в качестве биомассы бактерии штамма Bacillus subtilis 60T (ВКПМ №В-9907) в количестве (2-4)·10⁷ КОЕ·см^-3 и бактерии штамма Lactobacterium plantarum 8P-A3 в количестве (5-7)·10⁷ КОЕ·см^-3, а в качестве гелевой основы - кремнийорганический глицерогидрогель состава Si(С₃Н₇O₃)₄·хС₃Н₈O₃·уН₂O, где 3≤х≤10; 20≤у≤40, и дополнительно физиологический раствор при следующем соотношении компонентов, мас.%:
биомасса бактерий штамма Bacillus   subtilis 60T (ВКПМ №В-9907) и бактерий   штамма Lactobacterium plantarum 8P-A3 3÷5 кремнийорганический глицерогидрогель 50÷60 глицерин 20÷25 физиологический раствор остальное до 100