ПОЛИСПЕЦИФИЧЕСКИЕ ДЕИММУНИЗИРУЮЩИЕ CD3-СВЯЗУЮЩИЕ Российский патент 2010 года по МПК C07K16/46 C07K16/28 C12N15/63 A61K39/395 A61P35/00 A61P37/00 A61P43/00 

Текст описания приведен в факсимильном виде.

Настоящее изобретение относится к иммунологии и биотехнологии. Предложены варианты СD3-специфической связывающей конструкции, обладающей цитотоксическим действием. Конструкция включает первый домен, специфически связывающийся с CD3 человека, и Ig-производный второй связывающий домен, который специфичен в отношении молекулы на поверхности клетки. Описана кодирующая нуклеиновая кислота, вектор для экспрессии конструкции и эукариотическая клетка, трансформированная вектором. Предложены варианты композиций на основе конструкции для лечения, предупреждения или облегчения различных заболеваний и соответствующие способы лечения заболеваний. Раскрыт способ получения конструкции. Использование изобретения обеспечивает конструкцию с пониженной иммуногенностью, которая обладает цитотоксичностью, сопоставимой с исходной конструкцией, что может найти дальнейшее применение в медицине. 20 н. и 40 з.п. ф-лы, 18 ил., 15 табл.

1. CD3-специфическая связывающая конструкция, обладающая цитотоксическим действием, включающая первый домен, специфически связывающийся с CD3 человека, и второй связывающий домен, происходящий из Ig, в которой указанный первый домен является деиммунизированным и включает область CDR-H1, содержащую аминокислотную последовательность, показанную в виде последовательности SEQ ID NO:88, область CDR-H2, содержащую аминокислотную последовательность, показанную в виде последовательностей SEQ ID NO.:90 и SEQ ID NO.:93 и область CDR-H3, содержащую аминокислотную последовательность, показанную в виде последовательностей SEQ IDNO.:96, 108, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126 или 127; и в которой указанный первый домен также включает в своем каркасе H1 последовательность VKK, и кроме того транзитивная последовательность между каркасом H1 и областью CDRH1 включает последовательность Ala-Ser-Gly-Tyr-Thr-Phe (ASGYTF; SEQ ID NO.:233), a указанный второй домен, происходящий из Ig, включает сайт взаимодействия с молекулой на поверхности клетки, обладающий специфичностью в отношении указанной молекулы.

2. CD3-специфическая связывающая конструкция, обладающая цитотоксическим действием по п.1, дополнительно включающая в указанном первом домене каркас Н3, включающий последовательность Met-Glu-Leu-Ser (MELS; SEQ ID NO.:234).

3. CD3-специфическая связывающая конструкция, обладающая цитотоксическим действием, по п.1, дополнительно включающая в указанном первом домене каркас Н3, включающий последовательность Ile-Thr-Thr-Asp-Lys (ITTDK; SEQ ID NO.:235).

4. CD3-специфическая связывающая конструкция по п.1, в которой указанный первый домен, специфически связывающийся с CD3 человека, включает каркас H1, показанный в виде последовательностей SEQ ID NO.:152 или 153.

5. CD3-специфическая связывающая конструкция по п.1, в которой указанный первый домен, специфически связывающийся с CD3 человека, включает каркас Н2, показанный в виде последовательностей SEQ ID NO.:156 или 157.

6. CD3-специфическая связывающая конструкция по п.1, в которой указанный первый домен, специфически связывающийся с CD3 человека, включает каркас Н3, показанный в виде последовательностей SEQ ID NO.:160 или 161.

7. CD3-специфическая связывающая конструкция по п.1, в которой указанный первый домен, специфически связывающийся с CD3 человека, включает каркас Н4, показанный в виде последовательностей SEQ ID NO.: 164 или 165.

8. CD3-специфическая связывающая конструкция по п.1, в которой указанная конструкция включает область V_H, показанную в виде последовательностей SEQ ID NO.:74 или 76.

9. CD3-специфическая связывающая конструкция по п.1, в которой указанная конструкция включает CDR-L1, показанную в виде последовательностей SEQ ID NO.:98 или 100.

10. CD3-специфическая связывающая конструкция по п.1, в которой указанная конструкция включает CDR-L2, показанную в виде последовательности SEQ ID NO.:102.

11. CD3-специфическая связывающая конструкция по п.1, в которой указанная конструкция включает CDR-L3, показанную в виде последовательности SEQ ID NO.:104.

12. CD3-специфическая связывающая конструкция по п.1, включающая область V_L в своей CD3-специфической части, в которой указанная область V_L выбрана из группы, включающей последовательности SEQ ID NO.:78, SEQ ID NO.:80, SEQ ID NO.:82 и SEQ ID NO.:112.

13. CD3-специфическая связывающая конструкция по п.1, в которой указанный второй домен, происходящий из Ig, является scFv.

14. CD3-специфическая связывающая конструкция по п.1, в которой указанный второй домен, происходящий из Ig, и/или (а) связывающая линкерная область (области) является (являются) гуманизированными и/или деиммунизирующими.

15. CD3-специфическая связывающая конструкция по п.14, в которой указанная молекула на поверхности клетки является специфическим опухолевым маркером.

16. CD3-специфическая связывающая конструкция по п.14, в которой указанный второй связывающий домен, происходящий из Ig, включает сайт взаимодействия с антигеном, обладающий специфичностью в отношении молекулы, выбранной из группы, состоящей из ЕрСАМ, CCR5, CD19, HER-2, HER-2 neu, HER-3, HER-4, EGFR, PSMA, СЕА, MUC-1 (муцина), MUC2, MUC3, MUC4, MUC5_AC, MUC5_B, MUC7, βhCG, Lewis-Y, CD20, CD33, CD30, ганглиозида GD3, 9-O-ацетил-GD3, GM2, Globo Н, фукозила GM1, поли SA, GD2, карбоангидразы IX (MN/CA IX), CD44v6, Sonic Hedgehog (Shh), Wue-1, плазмацитарного антигена, (мембраносвязанного) IgE, хондроитинсульфат протеогликана меланомы (MCSP), CCR8, предшественника TNF-альфа, STEAP, мезотелина, антигена А33, антигена стволовых клеток простаты (PSCA), Ly-6;
десмоглеина 4, нео-эпитопа Е-кардерина, рецептора фетального ацетилхолина, CD25, маркера СА19-9, маркера СА-125 и рецептора II типа Muellerian-ингибирующего вещества (MIS), sTn (сиалированного антигена, TAG72), FAP (антигена активации фибробластов), эндосиалина, EGFRvIII, L6, SAS, CD63, TAG72, TF-антигена, коревого антигена, CD7, CD22, Igα, Igβ, G250, gp100, MT-MMPs, F19-антигена, СО-29 и EphA2.

17. CD3-специфическая связывающая конструкция по п.1, в которой указанный второй связывающий домен, происходящий из Ig, включает сайт взаимодействия с антигеном, обладающий специфичностью в отношении ЕрСАМ.

18. CD3-специфическая связывающая конструкция по п.17, в которой указанная CD3-специфическая связывающая конструкция включает аминокислотную последовательность, выбранную из группы
(а) аминокислотной последовательности, представленной одной из последовательностей SEQ ID NO.:31, 33, 35, 37, 39, 49, 55, 58, 61, 63, 65, 67, 237, 239, 241, 243, 245, 247, 249, 251, 253, 255, 257, 259, 261, 263, 265, 267, 269, 271, 273, 275, 277, 279, 281, 283, 285, 287, 289, 291, 293, 295, 297, 299, 301, 303, 305, 307, 309, 311, 313, 315, 317, 319, 321, 323 и 325;
(б) аминокислотной последовательности, кодируемой последовательностью нуклеиновой кислоты, представленной одной из последовательностей SEQ ID NO.:30, 32, 34, 36, 38, 48, 54, 57, 60, 62, 64, 66, 236, 238, 240, 242, 244, 246, 248, 250, 252, 254, 256, 258, 260, 262, 264, 266, 268, 270, 272, 274, 276, 278, 280, 282, 284, 286, 288, 290, 292, 294, 296, 298, 300, 302, 304, 306, 308, 310, 312, 314, 316, 318, 320, 322 и 324; и
(в) аминокислотной последовательности, кодируемой последовательностью нуклеиновой кислоты, которая вырождается как результат генетического кода в нуклеотидную последовательность (б).
(г) аминокислотной последовательности, кодируемой последовательностью нуклеиновой кислоты, гибридизирующейся с комплементарной цепью последовательности нуклеиновой кислоты, описанной в (б) в условиях строгой гибридизации и обладающей специфичностью в отношении CD3 и молекулы, выбранной из группы, состоящей из ЕрСАМ, CCR5, CD19, HER-2, HER-2 neu, HER-3, HER-4, EGFR, PSMA, CEA, MUC-1 (муцина), MUC2, MUC3, MUC4, MUC5_AC, MUC5_B, MUC7, βhCG, Lewis-Y, CD20, CD33, CD30, ганглиозида GD3, 9-O-ацетил-GD3, GM2, Globo Н, фукозила GM1, поли SA, GD2, карбоангидразы IX (MN/CA IX), CD44v6, Sonic Hedgehog (Shh), Wue-1, плазмацитарного антигена, (мембраносвязанного) IgE, хондроитинсульфат протеогликана меланомы (MCSP), CCR8, предшественника TNF-альфа, STEAP, мезотелина, антигена А33, антигена стволовых клеток простаты (PSCA), Ly-6; десмоглеина 4, нео-эпитопа Е-кардерина, рецептора фетального ацетилхолина, CD25, маркера СА19-9, маркера СА-125 и рецептора П типа Muellerian-ингибирующего вещества (MIS), sTn (сиалированного антигена, TAG72), FAP (антигена активации фибробластов), эндосиалина, EGFRvIII, L6, SAS, CD63, TAG72, TF-антигена, корового антигена, CD7, CD22, Igα, Igβ, G250, gp100, MT-MMPs, Р19-антигена, СО-29 и EphA2.

19. CD3-специфическая связывающая конструкция по п.1, в которой указанный второй связывающий домен, происходящий из Ig, включает сайт взаимодействия с антигеном, обладающий специфичностью в отношении CCR5.

20. CD3-специфическая связывающая конструкция по п.19, в которой указанная CD3-специфическая связывающая конструкция включает аминокислотную последовательность, выбранную из группы
(а) аминокислотной последовательности, представленной одной из последовательностей SEQ ID NO.:206, 208, 210, 212, 214 или 216;
(б) аминокислотной последовательности, кодируемой последовательностью нуклеиновой кислоты, представленной одной из последовательностей SEQ ID NO.:205, 207, 209, 211, 213 или 215; и
(в) аминокислотной последовательности, кодируемой последовательностью нуклеиновой кислоты, которая вырождается как результат генетического кода в нуклеотидную последовательность (б),
(г) аминокислотной последовательности, кодируемой последовательностью нуклеиновой кислоты, гибридизирующейся с комплементарной цепью последовательности нуклеиновой кислоты, описанной в (б) в условиях строгой гибридизации и обладающей специфичностью в отношении CD3 и молекулы, выбранной из группы, состоящей из ЕрСАМ, CCR5, CD 19, HER-2, HER-2 neu, HER-3, HER-4. EGFR, PSMA, CEA, MUC-1 (муцина), MUC2, MUC3, MUC4, MUC5_AC, MUC5_B, MUC7, βhCG, Lewis-Y, CD20, CD33, CD30, гангдиозида GD3, 9-О-ацетил-GD3, GM2, Globo Н, фукозила GM1, поли SA, GD2, карбоангидразы IX (MN/CA IX), CD44v6, Sonic Hedgehog (Shh), Wue-1, плазмацитарного антигена, (мембраносвязанного) IgE, хондроитинсульфат протеогликана меланомы (MCSP), CCR8, предшественника TNF-альфа, STEAP, мезотелина, антигена А33, антигена стволовых клеток простаты (PSCA), Ly-6; десмоглеина 4, нео-эпитопа Е-кардерина, рецептора фетального ацетилхолина, CD25, маркера СА19-9, маркера СА-125 и рецептора II типа Muellerian-ингибирующего вещества (MIS), sTn (сиалированного антигена, TAG72), FAP (антигена активации фибробластов), эндосиалина, EGFRvIII, L6, SAS, CD63, TAG72, TF-антигена, корового антигена, CD7, CD22, Iga, Igβ, G250, gp100, MT-MMPs, Р19-антигена, СО-29 и EphA2.

21. CD3-специфическая связывающая конструкция по п.1, в которой указанный второй связывающий домен, происходящий из Ig, включает сайт взаимодействия с антигеном, обладающий специфичностью в отношении CD 19.

22. CD3-специфическая связывающая конструкция по п.21, в которой указанная CD3-специфическая связывающая конструкция включает аминокислотную последовательность, выбранную из группы
(а) аминокислотной последовательности, представленной одной из последовательностей SEQ ID NO.:190, 192, 194, 196, 198, 200, 327, 329, 331, 333, 335, 337, 339, 341, 343, 345, 347, 349, 351, 353, 357, 359,361, 363, 365, 367, 369, 371, 373, 375, 377, 379, 381, 383, 385, 387, 389, 391, 393, 395, 397, 399, 401, 403, 405, 407 или 409;
(б) аминокислотной последовательности, кодируемой последовательностью нуклеиновой кислоты, представленной одной из последовательностей SEQ ID NO.:189, 191, 193, 195, 197, 199, 326, 328, 330, 332, 334, 336, 338, 340, 342, 344, 346, 348, 350, 352, 354, 356, 358, 360, 362, 364, 366, 368, 370, 372, 374, 376, 378, 380, 382, 384, 386, 388, 390, 392, 394, 396, 398, 400, 402, 404, 406 или 408; и
(в) аминокислотной последовательности, кодируемой последовательностью нуклеиновой кислоты, которая вырождается как результат генетического кода в нуклеотидную последовательность (б);
(г) аминокислотной последовательности, кодируемой последовательностью нуклеиновой кислоты, гибридизирующейся с комплементарной цепью последовательности нуклеиновой кислоты, описанной в (б), в условиях строгой гибридизации и обладающей специфичностью в отношении CD3 и молекулы, выбранной из группы, состоящей из ЕрСАМ, CCR5, CD 19, HER-2, HER-2 neu, HER-3, HER-4, EGFR, PSMA, CEA, MUC-1 (муцина), MUC2, MUC3, MUC4, MUC5_AC, MUC5_B, MUC7, βhCG, Lewis-Y, CD20, CD33, CD30, ганглиозида GD3, 9-O-ацетил-GD3, GM2, Globo H, фукозила GM1, поли SA, GD2, карбоангидразы IX (MN/CA IX), CD44v6, Sonic Hedgehog (Shh), Wue-1, плазмацитарного антигена, (мембраносвязанного) IgE, хондроитинсульфат протеогликана меланомы (MCSP), CCR8, предшественника TNF-альфа, STEAP, мезотелина, антигена А33, антигена стволовых клеток простаты (PSCA), Ly-6; десмоглеина 4, нео-эпитопа Е-кардерина, рецептора фетального ацетилхолина, CD25, маркера СА19-9, маркера СА-125 и рецептора II типа Muellerian-ингибирующего вещества (MIS), sTn (сиалированного антигена, TAG72), FAP (антигена активации фибробластов), эндосиалина, EGFRvIII, L6, SAS, CD63, TAG72, TF-антигена, корового антигена, CD7, CD22, Iga, Igβ, G250, gp100, MT-MMPs, Р19-антигена, СО-29 и EphA2.

23. CD3-специфическая связывающая конструкция по п.1, в которой указанный второй связывающий домен, происходящий из Ig, включает сайт взаимодействия с антигеном, обладающий специфичностью в отношении CD20.

24. CD3-специфическая связывающая конструкция по п.23, в которой указанная CD3-специфическая связывающая конструкция включает аминокислотную последовательность, выбранную из группы
(а) аминокислотной последовательности, представленной одной из последовательностей SEQ ID NO.:218, 220, 222, 224, 226 или 228;
(б) аминокислотной последовательности, кодируемой последовательностью нуклеиновой кислоты, представленной одной из последовательностей SEQ ID NO.:217, 219, 221, 223, 225 или 227; и
(в) аминокислотной последовательности, кодируемой последовательностью нуклеиновой кислоты, которая вырождается как результат генетического кода в нуклеотидную последовательность (б).
(г) аминокислотной последовательности, кодируемой последовательностью нуклеиновой кислоты, гибридизирующейся с комплементарной цепью последовательности нуклеиновой кислоты, описанной в (б), в условиях строгой гибридизации и обладающей специфичностью в отношении CD3 и молекулы, выбранной из группы, состоящей из ЕрСАМ, CCR5, CD 19, HER-2, HER-2 neu, HER-3, HER-4, EGFR, PSMA, CEA, MUC-1 (муцина), MUC2, MUC3, MUC4, MUC5_AC, MUC5_B, MUC7, βhCG, Lewis-Y, CD20, CD33, CD30, ганглиозида GD3, 9-О-ацетил-GD3, GM2, Globo Н, фукозила GM1, поли SA, GD2, карбоангидразы IX (MN/CA IX), CD44v6, Sonic Hedgehog (Shh), Wue-1, плазмацитарного антигена, (мембраносвязанного) IgE, хондроитинсульфат протеогликана меланомы (MCSP), CCR8, предшественника TNF-альфа, STEAP, мезотелина, антигена А33, антигена стволовых клеток простаты (PSCA), Ly-6; десмоглеина 4, нео-эпитопа Е-кардерина, рецептора фетального ацетилхолина, CD25, маркера СА19-9, маркера СА-125 и рецептора II типа Muellerian-ингибирующего вещества (MIS), sTn (сиалированного антигена, TAG72), FAP (антигена активации фибробластов), эндосиалина, EGFRvIII, L6, SAS, CD63, TAG72, TF-антигена, корового антигена, CD7, CD22, Igα, Igβ, G250, gp100, MT-MMPs, Р19-антигена, СО-29 и EphA2.

25. Нуклеиновая кислота, кодирующая CD3-специфическую связывающую конструкцию согласно одному из пп.1-24.

26. Вектор для экспрессии CD3-специфической связывающей конструкции по любому из пп.1-24, включающий нуклеиновую кислоту согласно п.25.

27. Вектор по п.26, который дополнительно включает нуклеиновую кислоту, которая является регуляторной нуклеиновой кислотой, функционально связанной с указанной нуклеиновой кислотой согласно п.25.

28. Вектор по п.26, в котором вектор является экспрессирующим вектором.

29. Эукариотическая клетка-хозяин, трансформированная или трансфектированная вектором согласно одному из пп.26-28.

30. Способ получения CD3-специфической связывающей конструкции по одному из пп.1-24; указанный способ включает культивирование хозяина по п.29 в условиях, допускающих экспрессию полипептидной конструкции и выделение образованной полипептидной конструкции из культуры.

31. Композиция для обеспечения лечения или профилактики пролиферативного заболевания, включающая эффективное количество CD3-специфической связывающей конструкции согласно одному из пп.1-24 и, необязательно, белковое соединение, способное обеспечить активирующий сигнал для иммунных эффекторных клеток.

32. Композиция для предупреждения, лечения или облегчения пролиферативного заболевания, опухолевого заболевания, воспалительного заболевания, иммунологического расстройства, инфекционного заболевания, вирусного заболевания, аллергических реакций, паразитических реакций, реакции «трансплантат против хозяина» или реакции «хозяин против трансплантата», включающая эффективное количество CD3-специфической связывающей конструкции, полученной способом по п.30, и, необязательно, белковое соединение, способное обеспечить активирующий сигнал для иммунных эффекторных клеток.

33. Композиция для предупреждения, лечения или облегчения пролиферативного заболевания, опухолевого заболевания, воспалительного заболевания, иммунологического расстройства, инфекционного заболевания, вирусного заболевания, аллергических реакций, паразитических реакций, реакции «трансплантат против хозяина» или реакции «хозяин против трансплантата», включающая эффективное количество CD3-специфической связывающей конструкции, полученной с помощью нуклеиновой кислоты по п.25, и, необязательно, белковое соединение, способное обеспечить активирующий сигнал для иммунных эффекторных клеток.

34. Композиция для предупреждения, лечения или облегчения пролиферативного заболевания, опухолевого заболевания, воспалительного заболевания, иммунологического расстройства, инфекционного заболевания, вирусного заболевания, аллергических реакций, паразитических реакций, реакции «трансплантат против хозяина» или реакции «хозяин против трансплантата», включающая эффективное количество CD3-специфической связывающей конструкции, полученной с помощью вектора по одному из пп.26-28 и, необязательно, белковое соединение, способное обеспечить активирующий сигнал для иммунных эффекторных клеток.

35. Композиция для предупреждения, лечения или облегчения пролиферативного заболевания, опухолевого заболевания, воспалительного заболевания, иммунологического расстройства, инфекционного заболевания, вирусного заболевания, аллергических реакций, паразитических реакций, реакции «трансплантат против хозяина» или реакции «хозяин против трансплантата», включающая эффективное количество CD3-специфической связывающей конструкции, полученной с помощью хозяина по п.29 и, необязательно, белковое соединение, способное обеспечить активирующий сигнал для иммунных эффекторных клеток.

36. Композиция по п.31, которая является фармацевтической композицией, дополнительно необязательно включающей подходящие составы носителя, стабилизаторов и/или эксципиентов, или диагностической композицией, дополнительно необязательно включающей средства и способы обнаружения.

37. Композиция по п.32, которая является фармацевтической композицией, дополнительно необязательно включающей подходящие составы носителя, стабилизаторов и/или эксципиентов, или диагностической композицией, дополнительно необязательно включающей средства и способы обнаружения.

38. Композиция по п.33, которая является фармацевтической композицией, дополнительно необязательно включающей подходящие составы носителя, стабилизаторов и/или эксципиентов, или диагностической композицией, дополнительно необязательно включающей средства и способы обнаружения.

39. Композиция по п.34, которая является фармацевтической композицией, дополнительно необязательно включающей подходящие составы носителя, стабилизаторов и/или эксципиентов, или диагностической композицией, дополнительно необязательно включающей средства и способы обнаружения.

40. Композиция по п.35, которая является фармацевтической композицией, дополнительно необязательно включающей подходящие составы носителя, стабилизаторов и/или эксципиентов, или диагностической композицией, дополнительно необязательно включающей средства и способы обнаружения.

41. CD3-специфическая связывающая конструкция по одному из пп.1-24 для предупреждения, лечения или облегчения пролиферативного заболевания, опухолевого заболевания, воспалительного заболевания, иммунологического расстройства, инфекционного заболевания, вирусного заболевания, аллергических реакций, паразитических реакций, реакции «трансплантат против хозяина» или реакции «хозяин против трансплантата».

42. CD3-специфическая связывающая конструкция, полученная способом по п.30, для предупреждения, лечения или облегчения пролиферативного заболевания, опухолевого заболевания, воспалительного заболевания, иммунологического расстройства, инфекционного заболевания, вирусного заболевания, аллергических реакций, паразитических реакций, реакции «трансплантат против хозяина» или реакции «хозяин против трансплантата».

43. CD3-специфическая связывающая конструкция, полученная с помощью нуклеиновой кислоты по п.25, для предупреждения или облегчения пролиферативного заболевания, опухолевого заболевания, воспалительного заболевания, иммунологического расстройства, инфекционного заболевания, вирусного заболевания, аллергических реакций, паразитических реакций, реакции «трансплантат против хозяина» или реакции «хозяин против трансплантата».

44. CD3-специфическая связывающая конструкция, полученная с помощью вектора по одному из пп.26-28 для предупреждения, лечения или облегчения пролиферативного заболевания, опухолевого заболевания, воспалительного заболевания, иммунологического расстройства, аутоиммунного заболевания, инфекционного заболевания, вирусного заболевания, аллергических реакций, паразитических реакций, реакции «трансплантат против хозяина» или реакции «хозяин против трансплантата».

45. CD3-специфическая связывающая конструкция, полученная с помощью хозяина по п.29, для предупреждения, лечения или облегчения пролиферативного заболевания, опухолевого заболевания, воспалительного заболевания, иммунологического расстройства, аутоиммунного заболевания, инфекционного заболевания, вирусного заболевания, аллергических реакций, паразитических реакций, реакции «трансплантат против хозяина» или реакции «хозяин против трансплантата».

46. Способ предупреждения, лечения или облегчения пролиферативного заболевания, опухолевого заболевания, воспалительного заболевания, иммунологического расстройства, аутоиммунного заболевания, инфекционного заболевания, вирусного заболевания, аллергических реакций, паразитических реакций, реакции «трансплантат против хозяина» или реакции «хозяин против трансплантата, включающий введение CD3-специфической связывающей конструкции по пп.1-24 субъекту, нуждающемуся в таком предупреждении, лечении или облегчении.

47. Способ предупреждения, лечения или облегчения пролиферативного заболевания, опухолевого заболевания, воспалительного заболевания, иммунологического расстройства, аутоиммунного заболевания, инфекционного заболевания, вирусного заболевания, аллергических реакций, паразитических реакций, реакции «трансплантат против хозяина» или реакции «хозяин против трансплантата, включающий введение CD3-специфической связывающей конструкции, полученной способом по п.30, субъекту, нуждающемуся в таком предупреждении, лечении или облегчении.

48. Способ предупреждения, лечения или облегчения пролиферативного заболевания, опухолевого заболевания, воспалительного заболевания, иммунологического расстройства, аутоиммунного заболевания, инфекционного заболевания, вирусного заболевания, аллергических реакций, паразитических реакций, реакции «трансплантат против хозяина» или реакции «хозяин против трансплантата, включающий введение CD3-специфической связывающей конструкции, полученной с помощью нуклеиновой кислоты по п.25, субъекту, нуждающемуся в таком предупреждении, лечении или облегчении.

49. Способ предупреждения, лечения или облегчения пролиферативного заболевания, опухолевого заболевания, воспалительного заболевания, иммунологического расстройства, аутоиммунного заболевания, инфекционного заболевания, вирусного заболевания, аллергических реакций, паразитических реакций, реакции «трансплантат против хозяина» или реакции «хозяин против трансплантата, включающий введение CD3-специфической связывающей конструкции, полученной с помощью вектора по одному из пп.26-28, субъекту, нуждающемуся в таком предупреждении, лечении или облегчении.

50. Способ предупреждения, лечения или облегчения пролиферативного заболевания, опухолевого заболевания, воспалительного заболевания, иммунологического расстройства, аутоиммунного заболевания, инфекционного заболевания, вирусного заболевания, аллергических реакций, паразитических реакций, реакции «трансплантат против хозяина» или реакции «хозяин против трансплантата», включающий введение CD3-специфической связывающей конструкции, полученной с помощью хозяина по п.29 субъекту, нуждающемуся в таком предупреждении, лечении или облегчении.

51. Способ по п.46, в котором указанным субъектом является человек.

52. Способ по п.47, в котором указанным субъектом является человек.

53. Способ по п.48, в котором указанным субъектом является человек.

54. Способ по п.49, в котором указанным субъектом является человек.

55. Способ по п.50, в котором указанным субъектом является человек.

56. Способ по п.46, дополнительно включающий введение белкового соединения, способного обеспечить активирующий сигнал для иммунных эффекторных клеток.

57. Способ по п.47, дополнительно включающий введение белкового соединения, способного обеспечить активирующий сигнал для иммунных эффекторных клеток.

58. Способ по п.48, дополнительно включающий введение белкового соединения, способного обеспечить активирующий сигнал для иммунных эффекторных клеток.

59. Способ по п.49, дополнительно включающий введение белкового соединения, способного обеспечить активирующий сигнал для иммунных эффекторных клеток.

60. Способ по п.50, дополнительно включающий введение белкового соединения, способного обеспечить активирующий сигнал для иммунных эффекторных клеток.