АНТИГЕЛЬМИНТНОЕ СРЕДСТВО Российский патент 2010 года по МПК C07D271/12 A61K31/428 A61P33/10 

Изобретение касается области ветеринарии и может быть использовано для профилактики и лечения стронгилятозов животных.

Стронгилятозы желудочно-кишечного тракта в настоящее время насчитывается более 400 видов. Они широко распространены и наносят значительный экономический ущерб, связанный со снижением количества и качества продукции животноводства и большими затратами на лечебно-профилактические мероприятия.

Известен структурный аналог 4 или 6-нитро-5,7-дихлорбензофуроксан формулы

,

где R₁ - NO₂, R₂ - Н или R₁ - Н, R₂ - NO₂, обладающий фунгицидной активностью, см. RU Патент №2032678, МПК C07D 271/12, 1995. Указанные соединения не проявляют антигельминтную активность.

Наиболее близким по структуре веществ к заявляемому объекту является 5,7-дизамещенный-4,6-динитробензофуроксан формулы

,

где R₁ - 2-хлорфениламин или 2,5-дихлорфениламин или 4,5-дихлорфениламин или 2-гидроксифениламин или 4-гидроксифениламин или 4-бромфениламин или 2-метил-5-хлорфениламин или 4-аминодифенил, обладающие акарицидной и бактерицидной активностью, см. RU Патент №2255935, МПК C07D 271/12, 2005.

Задачей изобретения является разработка антигельминтного средства, на основе 5,7-дизамещенного-4,6-динитробензофуроксана, где R - фениламин или 3-метилфениламин.

Техническая задача решается тем, что антигельминтное средство представляет собой 5,7-дизамещенный-4,6-динитробензофуроксан общей формулы

,

где R₁ - фениламин или 4-метилфениламин.

Антигельминтное средство, представляющее собой 5,7-дизамещенный -4,6-динитробензофуроксана общей формулы

,

где R₁ - фениламин или 3-метилфениламин,

обладает малой токсичностью, проявляет высокую антигельминтную активность в течение короткого времени 1-45 минут.

5,7-дизамещенный-4,6-динитробензофуроксан получают взаимодействием 5,7-дихлор-4,6-динитробензофуроксана с фениламином (1) и 3-метилфениламином (2) в среде диметилсульфоксида или изопропилового спирта по схеме

Приводим пример получения соединения формулы 5,7-бис-(фениламино)-4,6-динитробензофуроксан (1).

Пример 1.

К раствору 5,7-дихлор-4,6-динитробензофуроксана (50 г) в растворителе диметилсульфоксиде (450 мл) добавляют раствор анилина (68 г) в растворе диметилсульфоксида (400 мл) и выдерживают реакционную смесь при температуре 20-25°С. Полноту протекания реакции контролируют тонкослойной хроматографией. По окончании реакции добавляют в реакционную смесь воду. Осадок отфильтровывают, промывают водой, сушат. Выход 48 г (85%), Т_пл 198°С (из этилового спирта)

ИК-спектр, см^-1: 1690 (C=N-O), 3360 (NH)

C₁₈H₁₂O₆N₆

Вычислено, % C52; H2,9; N20

Найдено, % С52,7; Н2,8; N20

Спектр ПМР^1H, ацетон δ м.д. 9,3 (2Н, NH), 7,2 (4Н бензола).

Пример 2 аналогичен примеру 1, в качестве растворителя берут изопропиловый спирт.

Приводим пример получения соединения формулы 5,7-бис-(3-метилфениламино)-4,6-динитробензофуроксан (2).

Пример 3.

К раствору 5,7-дихлор-4,6-динитробензофуоксана (50 г) в растворителе диметилсульфоксиде (450 мл) добавляют раствор 3-метилфениламина (68 г) в растворе диметилсульфоксида (400 мл) и выдерживают реакционную смесь при температуре 20-25°С. Полноту протекания реакции контролируют тонкослойной хроматографией. По окончании реакции добавляют в реакционную смесь воду. Осадок отфильтровывают, промывают водой, сушат. Выход 44 г (80%), Т_пл 159-160°С (из изопропилового спирта)

ИК-спектр, см^-1: 1680 (C=N-O), 3370 (NH)

C₂₀H₁₆N₆O₆

Вычислено, % С57; Н3,8; N20

Найдено, % С56,9; Н3,9; N19,8

Спектр ПМР^1H, ацетон δ м.д. 9,4 (2Н, NH), 7,5 (3Н бензола), 3,1 (6Н, СН₃)

Пример 4 аналогичен примеру 3, в качестве растворителя берут изопропиловый спирт.

Исследование токсичности соединений 5,7-дизамещенный-4,6-динитробензофуроксан (I) при введении в желудок.

При однократном введении (I) в желудок определяют параметры токсичности и изучают симптомы острого отравления. Острую токсичность изучают на белых крысах весом 170-200 г. Соединения (I) вводят в желудок в виде 10% суспензии через металлический зонт. Животным контрольной группы вводят в соответствующих количествах эмульсию, содержащую только эмульгатор. Учитывают следующие показатели: внешний вид и поведение животных, отношение к корму, подвижность, ритм и частоту дыхания, время возникновения и характер интоксикации, ее тяжесть, обратимость, сроки гибели животных или их выздоровления. Наблюдение за клиническим состоянием животных проводят в течение 10 дней.

Для оценки токсичности определяют максимально переносимую дозу - МПД; дозу, вызывающую гибель 50% животных, - ЛД₅₀ и абсолютно смертельную дозу - ЛД₁₀₀. ЛД₅₀ и ее доверительные границы вычисляют по методу Кербера, см. Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. - М.: Медицина, с.262, 1963.

После введения соединений (I) в дозах 1000-1500 мг/кг существенных изменений в общем состоянии животных не обнаружено. В дозах от 1500-2000 мг/кг наступает легкое угнетение, отказ от корма, которое через 2-2,5 часа проходило. При введении препарата в дозах от 2000-2500 мг/кг животные становились угнетенными, отказывались от корма в течение 4-5 часов, затем начинали принимать корм. Все функциональные системы животных восстановились в течение 1,5-2 суток. Гибель животных за период наблюдения (10 суток) отсутствовала. Препарат в дозах более 3000 мг/кг не представлялось возможным вводить в желудок животным из-за слишком большого объема массы. Результаты исследований приведены в таблице 1.

Таблица 1 Токсичность соединений (I) для теплокровных животных Острая токсичность, мг/кг 5,7-бис(фениламино)-4,6-динитробензофуроксан (1) МПД ЛД₅₀ ЛД₁₀₀ 1000 -^* -^* 1500 -^* -^* 2000 -^* -^* 2500 -^* -^* 3000 -^* -^* 5,7-бис(3-метилфениламино)-4,6-динитробензофуроксан (2) 1000 -^* -^* 1500 -^* -^* 2000 -^* -^* 2500 -^* -^* 3000 -^* -^* - * не смогли определить, т.к. даже доза 3000 мг/кг не вызвала гибели животных.

Из таблицы видно, что соединения (1) и (2) являются малотоксичными и относятся к 4 классу токсичности.

Антигельминтная активность соединений, полученных по примерам конкретного выполнения 1-4, изучена на нематодах, принадлежащих подотрядам: Ascaridata (Ascaris suum, Parascaris equorum, Toxocara canis, Ascaridia galli), Strongylata (Haemonchus contortus, Nematodirus spathiger, N. filicollis, Ostertagia ovina, Oesophagostomum columbianum, O. Venulosum, O. Radiatum), Trichocephalata (Trichocephalus suis) по общепринятой методике, см. Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. - М. Медицина, с.262, 1963. В качестве биологических объектов используют имагинальные стадии гельминтов. Нематод плотоядных (Т. canis) получают при неполном гельминтологическом вскрытии тонкого отдела кишечника собак. Во всех случаях используют свежий материал. Гельминтов дифференцировали по видам.

Нематод выделяют из свежих способов, взятых от пораженных животных, и по 10-20 штук помещают в чашки Петри, которую пропитывают суспензией, содержащей различные концентрации испытуемых соединений, и в течение 3 часов ведут наблюдение и учет погибших гельминтов.

Результаты исследований представлены в таблице 2.

Как видно из таблицы 2, соединения (1) и (2) обладают быстродействующей в течение 1-45 минут антигельминтной активностью.

Заявляемый объект по сравнению с прототипом обладает антигельминтной активностью, а по сравнению с контрольными препаратами превосходит в 2 раза.

Таким образом, заявляемый объект может применяться в качестве быстродействующих антигельминтных препаратов.

Изобретение относится к новому антигельминтному средству, представляющему собой 5,7-дизамещенный-4,6-динитробензофуроксан общей формулы

,

где R₁ - фениламин или 3-метилфениламин. Предлагаемое средство обладает быстродействующей антигельминтной активностью (в течение 1-45 минут). 2 табл.

Антигельминтное средство, представляющее собой 5,7-дизамещенный-4,6-динитробензофуроксан общей формулы
,
где R₁ фениламин или 3-метилфениламин.